Н. А. БЕЗСОНОВ
ВИТАМИНЫ
{Природа, значение в питании и особенности
физиологического действия)
2-е дополненное издание
ГОСУДАРСТВЕННОЕ НАУЧНО-ТЕХНИЧЕСКОЕ ИЗДАТЕЛЬСТВО
ЛЕНХИМСЕКТОР
ЛЕНИНГРАД
1931
НХ 4.	а	ГНТИ № 831.
Ленинградский Областлит № 4376. Заказ № 142. 1931 г. Кв. III. Тираж 5000 экз. 2 п. л.
8-я типография ОГИЗа РСФСР .Красный Печатник". Ленинград, Международный пр., 75а.
Введение
Существование чудодейственной пищи, дающей юность и силу,—древняя
греза человечества.
Многие чудеса народных сказок превзойдены, благодаря успехам совре-
менного знания, но разумна ли самая мысль о создании «пищи богов»? Не-
достаточно простодушной веры во всемогущество науки, надо иметь опреде-
ленные указания на то, что необычайное улучшение пищи высших животных
возможно. Еще в начале этого века Марселин Бертло видел верх достижений
в области питания в том, чтобы свести его к поглощению нескольких пилюль,
т.-е. в концентрации питательных веществ. Мечников думал улучшить питание
не путём существенного изменения качества пищи, а борьбой с бактериями
кишечника.
Дело в том, что еще недавно вопрос о составе пищи считался в основе
своей выясненным. Признавалось, что лишь белки, углеводы (глюсиды), жиры
и немногие минеральные соли являются единственными необходимыми состав-
ными частями корма животных. Оценивая в калориях питательное значение
этих тел, изучали термодинамически и химически использование их внутри
организма., Такие исследования выявили несколько очень ценных данных, но
особо существенных сведений по вопросу об улучшении качества пищи они не
дали, да и не могли дать.
Тщетно было искать наилучшее соотношение между чистыми белками
или аминокислотами, жирами, углеводами и солями, в отсутствии других необ-
ходимых организму факторов питания. Противоречия и затруднения, к которым
приводили опыты с химически чистым кормом, уже сами по себе указывали
на существование неизвестных факторов. Факторы эти—витамины. Они явля-
ются ничтожной по весу частью пищевой дачи. Но доли миллиграмма витамина
столь же необходимы животному, сколь сотни граммов белков, жиров и угле-
водов. Отсутствие его в пище неизбежно влечет быстрое старение тканей,
голодное истощение и смерть.
В 19 z2 году Габриэль Бертран дал понятие об олигосинергетическпх
веществах, назвав их неточно, но метко-«биологическими бесконечно малыми».
Тела эти входят ничтожной, но необходимой частью в состав пищи растений
и животных. Их решающее влияние на ход жизни творческого процесса несо-
измеримо с псчезающе-малым весом и калорийной ценностью, которые они
вносят в этот процесс.
Отдельными представителями олигосинергетиков являются витамины,
органические тела необходимые лишь для животных. Дополняя закон о мини-
1*
— 4 —
мумах Осборна и Менделя, понятие об олигосипсргетпках глубоко изменяет
прежнее упрощенное представление о составе пищи и значении пищевых
веществ. Становится мыслим новый подход к коренному изменению качества
пищи. Достаточно указать на возможность значительно повысить в ней обыч-
ную долю «бесконечно малых».
Относительно витаминов вначале думали, что такое повышение никак не
отражается на состоянии животных. Однако, работы последних лет содержат
ряд указаний на то, что существует оптимальная наилучшая доза витаминов
в питании, значительно превосходящая обычную. Осборн и Мендель взращи-
вали крыс на корму, тщательно составленном из естественных продуктов и
особо богатом витаминами. Вес этих крыс превзошел в 2,5 раза вес наплуч-
ших до того полученных образцов той ясе породы. Другая работа, отмечает
значительное увеличение средней продолжительности жизни тех крыс, которые
получали усиленную, но еще не вредную дозу трескового жира. Опыты эти
любопытны, но произведены они были в условиях недостаточно точных.
Выяснить точно влияние крупных доз витаминов возможно лишь поль-
зуясь особыми препаратами. Содержание витаминов в пищевых веществах
вообще не велико, а те" из них, которые ими сравнительно богаты, вносят
в пищу попутно ряд других факторов. С другой стороны, вопрос о получении
препаратов всех известных ныне витаминов не получил еще окончательного
решения. А потому, отдельные указания на то благоприятное действие, которое
оказывает усиленное пользование витаминами, носят неполный характер. Выяс-
нить достаточно точно влияние крупных доз витаминов и окон 'ательно дока-
зать, что они способны значительно увеличивать силы организма и продлить
жизнь—задача будущего. Наилучшее ее решение будет, вероятно, достигнуто
при использовании не только известных ныне витаминов, но и другие олиго-
синергетиков. Те данные о витаминах, которыми мы располагаем ныне, ука-
зывают лишь, что возможность решения не является заранее исключенной.
Уже с XVII века отдельные наблюдатели отмечали, что некоторые
болезни—цынга, рахит, куриная слепота—связаны с определенными каче-
ственными изъянами пищи.
В 1897 году точные и доказательные наблюдения Эйкмана \Eykmann
Van Hoodenhuze (1), (2), 1897] впервые выяснили, что эти изъяны могут
быть объяснены отсутствием особых начал, обычно составляющих лишь
ничтожную долю всей пищевой дачи. Он показал, что куры заболевают птичьим
полиневритом, получая в корме очищенные от шелухи зерна, и исцеляются,
когда им дают немного шелухи или подкармливают цельными зернами.
Затем последовал четырнадцатилетний перерыв. За это время хотя и
появляются наблюдения, указывающие на зависимость между заболеваниями
бери-бери и цынгой и составом пищи, но существенно нового они не содер-
жат. И вдруг в короткий промежуток времени, в 1911—1913 годах, одновре-
ые* ю и независимо друг от друга исследователи различнейших стран публи-
кую! ряд статей: работающий в Германии Stepp (1911) сообщает о присут-
ствии в жирах особых нестойких веществ, необходимых для жизни и роста
5
животных. Растворимые в бензоле и эфирах и нерастворимые в воде, эти
начала не являются каким-либо из известных жиров. В Америке Мак-Коллум
(Me Collum и Davis, 1913) удается получить данные, сходные с таковыми
Stepp'а\ они послужили основой к знаниям о липорастворимых (жиро-раство-
римых) витаминах А и D.
В Норвегии Аксель Хольст (Heist п Frdlich, 1912, 1913) заканчивает
большую работу, тщательность которой в значительной мере устраняет неяс-
ности, неизбежно связанные с исследованиями нового и очень сложного
вопроса. Он не только неопровержимо устанавливает присутствие в свежих
растениях особого водорастворимого начала, которое предохраняет от цынги,
но и выясняет многие существенные его особенности, прокладывая дорогу
на много лет вперед дальнейшим исследованиям водорастворимых вита-
минов С.
Между тем, Suzuki, Schimamurd и Odake (1911 и 1912) в Японии
извлекают из шелухи риса особый препарат. Нескольких миллиграммов этого
растворимого в воде препарата оказалось достаточно, чтобы предупредить и
излечить полиневрит голубей, возникающий при корме очищенным рисом.
Одновременно работавший во Франции в лаборатории Габриеля Бер-
трана, а затем в Англии русский поляк К. Функ (Funk, 1911,1912,1913)
получает подобные же препараты из дрожжей и из шелухи зерен. Действую-
щее начало этих препаратов было названо Функом витамином В, а неиз-
вестное начало, растворимое в бензоле и эфирах и обнаруженное в жирах—
витамином А.
По существу, состоящий из нескольких отдельных тел водорастворимый
витамин В является из всех прочих витаминов первым по времени его откры-.
тия. Уже опыты Эйкмана явно указывали на существование такого начала.
Напечатав в Англии и Германии свои наблюдения, Funk (1911, 1912,
1913) попутно дал имя и очертил впервые понятие о витаминах. Название
витаминов, т.-е. жизненных аминов, часто осуждается. Указания анализов
первых препаратов на характерное присутствие аминных групп не подтвер-
дились. Ныне доказано относительно трех наилучше химически известных
витаминов, что азота в них вовсе нет.
Но многократные попытки заменить название «витамины» успеха не
имели. Одна из последних принадлежит Randoin и Simonnet (1928) пред-
ложившим обозначать их «экс-гормоны». Это новое название, подобно ранее
предлагавшимся, тоже небезупречно. А каковы бы ни были недостатки дан-
ного Функом наименования, ныне нельзя пренебрегать огромным преиму-
ществом, представляющим его мировую распространенность. Если не оправдался
выбор второй части слова «витамин», за то начальная—напоминающая о жиз-
ненном значении этих тел, выбрана метко. В области положительного знания
этимологический смысл терминов не обладает столь существенным- зна-
чением.
Основа его силы не в удачном выборе созвучных обозначений, а в ясной
точности определений.
— (> —
Основное физиологическое значение витаминов 
Наиболее существенные сведения о химической природе витаминов будут
изложены далее; пока отметим лишь, что все наиболее изученные витамины
являются нестойкими органическими соединениями.
Отсутствие в пище какого-либо витамина вызывает заболевание, назы-
ваемое авитаминозом. Если причиной заболевания является одновременное
отсутствие нескольких витаминов, то заболевание обозначают полиавитамино-
зом или сложным авитаминозом. Пища, в ^оторой витамины имеются, но в не-
достаточном количестве, вызывает частичный авитаминоз.
Авитаминозы являются частным случаем болезней «по недостаточности».
Словом «недостаточность» переводится тут французский термин «сагепсе» пли
английский—n-deficience*.
Необходимо возможно точнее определить это понятие. До сих пор господ-
ствовало мнение, выраженное еще Schneffer’wA (1918—1919), Weill’en и
Mouriquand’oit (1918), что этот термин обозначает исключительно наличие
качественных изъянов пищевой дачи; недостаточности противополагалась
количественная нехватка потребных организму калорий. «Недостаточ-
ность» знаменовала отсутствие в пищевой даче тех органических и неорга-
нических веществ, составляющих ничтожную часть ее, которые являются необ-
ходимыми для обеспечения правильного хода усвоения, при чем вещества эти,
а в особенности витамины, обозначались, как своеобразные катализаторы
усвоения.
Уже ранее указывалось [Безсонов (2), 1924], что желание придать тер-
мину «недостаточность» исключительно качественное значение приводит к про-
тиворечию. Выражение: наша пищевая дача «недостаточна» по триптофану,
может означать его полное отсутствие в пище, но также и то, что эта амино-
кислота, которую наш организм не может синтезировать, присутствует в коли-
честве, недостаточном для обеспечения нормальной потребности в” ней. Тоже
относится к «недостаточности» по кальцию, железу, или по какому-либо вита-
мину. Это понятие может обладать и более широким значением. Так, выра-
жение'«белковый голод» вполне соответствует таковому: «недостаточность пищи
по белкам». Понятие о недостаточности, соответствуя закону мииимум^Ов&оги’а
и Mendel’s, обладает и качественным, и количественным значениями. Каждое
необходимое для жизни животнцгб и незаменимое другим вещество должно
присутствовать в пище в достаточном количестве.
Относительно витаминов нельзя даже более утверждать, что если только
количество их не падает ниже предельной, практически ничтожной, величины,
колебания его не имеют значения. Ныне все более выясняется влияние ка-
чественных различий содержания пищи по витаминам, что соответствует раз-
ным ступеням их физиологического действия. Надо признать, что и наивысшая
величина достигается при наличии весьма малой весовой доли чистого вита-
мина, но превосходит во много раз предельную долю. Такой долей мы назы-
ваем ту( которая еще достаточна для проявления вполне характерного физио-
7
логического действия данного витамина. Имеются указания и на то, что сте-
пень такого действия зависит от отношения количества витамина к числу кало-
рий в данной пищевой даче и у отдельных видов пищи, которые ее составляют.
«Недостаточной» пищевой даче можно противопоставить «голодную
дачу». Последняя, если даже она содержит все незаменимые пищевые веще-
ства, каждое в достаточном количестве, не обладает тем общим чисЛом калорий,
^гго соответствовало бы нуждам данного организма. Такой изъян будет лишь
количественным, если он может быть пополнен очень различными веществами—
либо глюсидами (углеводами), либо жирами, либо даже белками. Так, если
крысы в обилии снабжены витаминами и нужными им солями и белками, то
общая сумма калорий их пищевой дачи может на 85% состоять из жира при
практически полном отсутствии глюсидов (углеводов). Вопреки прежним дан-
ным, было установлено, что весь жир (98%—99%) такой дачи отлично
усваивается. Состояние крыс и их органов вполне нормально (Levine и
Smith 1927).
Почти столь же благоприятные результаты получаются, когда жиры
практически отсутствуют в пищевой даче, которая содержит лишь тресковый
жир, примешанный в количестве 2% общего веса дачи. Жиры дачи могут
быть замещены не только углеводами, но и чрезвычайным повышением содер-
жания в ней белков. Так, в опытах Beader и Drummond (1926), Hassan
и Drummond (1927) содержание пищевой дачи по казеину достигало 70% ее
общего веса. При условии повышения содержания в даче вытяжки из дрожжей,
рост и развитие крыс были вполне нормальны. Итак, одна часть пищевой,
дачи служит удовлетворению особых потребностей организма и состоит из ни-
чем незаменимых веществ, витаминов, близких им, еще неизвестных тел
\Palmer и Kennedy (1927—1928)] и некоторых минеральных солей и белков,
другая^-лишь для пополнения нужного числа калорий и может быть предста-
влена, веществами различной природы.
Так же, как и простая общая нехватка калорий, «недостаточ-
ность» пищевой дачи вызывает, кроме характерных заболеваний, явление
общего голодного истощения. Наступают они, и притом очень быстро, и при
отсутствии в пище витаминов. По краб ней мере, относительно витамина. В это
впервые было доказано A. Lumiere (1), (2), (3), 1920, а затем вполне под-
тверждено Drummond и Marrian (1926), Drummond (1927), Marrian,
Baker, Drummond, и Woollard (1927). При чем исследователи эти выяснили,
что, во-первых, голодание—прямое следствие авитаминоза В, а во вторых, что
все особые болезненные признаки, которые ему сопутствуют, наблюдаются
при голодании даже при наличии витамина. Безсоновым [(2) (3) 1928] было
показано, что и авитаминоз С быстро влечет за собой голодное истощение
организма.
Заметим, что белковая «недостаточность» пищи, хотя белки в отличие
от витаминов составляют очень значительную долю нормальной пищевой дачи,
и роль их в питании существенно иная, чем витаминов,—знаменуется, помимо
особых явлений белкового голода, также и общим голодным истощением организма.
8
Белки не только влияют на ход усвоения других составных частей ищи,
но и непосредственно могут участвовать в покрытии энергетических потреб-
ностей организма. Между тем относительно витаминов до сих пор продолжает
господствовать мнение, выраженное в свое время Schaeffer’fM (1918—1919),
РКеШ’ем и Mouriquand’oa, а затем и многими другими, что они непосред-
ственного участия в покрытии таких потребностей организма не несут. Роль
их будто бы сводится исключительно к обеспечению правильного усвоения
авитаминной пищи. Только эта последняя непосредственно служит удовлетворе-
нию всех потребностей животного.
Пытаются обосновать такое мнение неопределенной ссылкой на катали-
тические свойства витаминов (Baly, 1926), а также предположением, что они
близки (Neppi, 1926) или аналогичны гормонам (Randoin и Simonnet, 1928).
Единственным указанием в пользу подобного представления об основном зна-
чении витаминов является то обстоятельство, что, будучи, жизненно необхо-
димыми, они составляют лишь ничтожную долю пищевой дачи. Последние
исследования позволяют предположить, что она достигает для отдельных вита-
минов от одной двухсот-тысячной до одной двадцати-миллионной сухого веса
всей дачи. Этих данных, однако, недостаточно, чтобы признать сколько-нибудь
доказанной гормоноподобную природу или каталитические свойства витаминов;
нужно напомнить, что все многочисленные попытки добыть более полные и точ-
ные доказательства потерпели неудачу. Не только пе удалось выяснить с полной
очевидностью непосредственное воздействие какого-либо витамина на какой-
либо из органов, в частности, на железы и их выделения, но попутно были
опровергнуты и те прежйие данные, .которые, казалось, указывали на суще-
ствование таких воздействий.
Этим не опровергается вероятность того, что витамины глубоко отличны
от прочих пищевых веществ. Возможно также, что влияние их на ход усвоения
проявляется лишь косвенно, подобно либо катализу, либо действию гормонов,
но данные опытов не исключают и других вероятий. Достаточно предположить,
что витамины непосредственно необходимы для частичного покрытия потреб-
ностей не только энергетических, но и строительных (пластических) некоторых
нервных клеток, как, например, клеток узлов, сплетений или окончаний пара-
симпатической и симпатической систем, чтобы согласовать жизненное значение
с ничтожностью действующей массы витаминов. В связи с фотохимическими
особенностями некоторых витаминов возможны и другие предположения. Упо-
мянуты они с целью показать, что в настоящее время гипотезы об основной
физиологической роли витаминов преждевременны. Лишь новые опыты, новая
техника работ по механизму непосредственного физиологического действия
каждого витамина приблизят к пониманию общего и основного их значения.
Доселе добытые данные позволяют только утверждать, что витамин^
подобно белковым телам (в общем смысле слова) и определен-
ным солям являются незаменимыми, жизненно необходи-
мыми факторами питания животных. Отсутствие или малое содер-
жание в пище любого из этих факторов, наряду с особыми заболеваниями
9
«недостаточности», влечет и общее нарушение в обмене веществ, что выра-
жается явлениями общего голодания.
Единственным коренным отличием группы витаминов от других особых
факторов питания может, пожалуй, служить их следующая особенность, кото-
рая была выяснена работами последних лет. Повидимому, все животные могут
быть обеспечены антирахитическим витамином D не только путем поглощения
его в пище, а также благодаря образованию его внутри их тканей из особого
вещества—провитамина под влиянием ультра-фиолетовых лучей. Иначе обстоит
дело с витамином С; синтезировать его неизвестным еще. путем способны лишь
некоторые виды животных—крысы, птицы. По слишком мало еще, разработан
ход усвоения пищевых веществ, чтобы придавать этому отличию решающее
значение. Ведь п белковые тела, введенные в организм, претерпевают перед
использованием ряд еще мало известных превращений.
То, что витамины нс только поступают извне, как таковые, но также
могут образовываться внутри организма, путем превращения из физиологически
недеятельных провитаминов, не противоречит по существу тому общему опре-
делению «недостаточности», которое было дано выше.
Сперва кратко отметим те начальные данные, которые позволили бы
распознавать самое существенное об отдельных ныне наиболее изученных
витаминах.	ж
Разделение витаминов
Витамины различаются по двум признакам: 1-й—физиологическое дей-
ствие данного витамина, 2-ой—растворимость его.
Одна группа витаминов растворима в жирах (липидах) и растворителях
жиров: в бензоле, эфирах, ацетоне, спиртах—группа жирорастворимых вита-
минов или липовитамннов, другая в воде—водорастворимые или гидро-
витамины.
К липорастворимым витаминам принадлежат: витамин А., фактор роста,
он же аптиксерофтальмический фактор, витамин D—антирахитический или
«костный» витамин, сложный витамин Е—фактор воспроизведения.
К гидровитаминам принадлежат: сложный витамин С—(антицинготный
витамин) и факторы, которые прежде объединялись под общим названием
витамина В, антиневрптический фактор, водорастворимый фактор роста, воз-
можно однородный с ним антппелагрический фактор РР, и недавно открытый
фактор, противодействующий отравлению организма усиленным белковым
питанием.
Работы последних лет все более подтверждают, сколь существенен и
верен признак растворимости, который давно уже предложен Мак-Коллумом,
как основа деления витаминов. Но признак этот, применяя его к гпдровита-
минам, необходимо определить точнее. Тогда как липовитамины растворимы
лишь в жирах и их растворителях и в воде смогут лишь присутствовать
в виде механически полученных, нестойких эмульсий,—гидровитамины раство-
римы также и в абсолютных этиловом и метиловом спиртах.
10
Одно время ошибки техники позволили предположить, что некоторые
гидровитамины обладают небольшой растворимостью в бензоле и петролейном
эфире. Как будет указано ниже, удалось ныне разъяснить, что причиной тому
было присутствие примесей этилового спирта. В общем случае гидровитамины
нерастворимы в чистых: бензоле, и эфирах, т.-е. в растворителях, которые не
смешиваются сколько-нибудь значительно с водой. Но не растворимы они
также и в чистом, хорошо обезвоженном ацетоне. В смеси ацетона и абсолют-
ного этилового спирта они обладают уже заметной растворимостью. На это
указывают относительно витамина В данные Seidell (1924) и Q. Bertrand и
Seidell (1923), относительно витамина С—данные Veder ’(1927) и мои соб-
ственные наблюдения.
Группа липорастворимых витаминов
Первые липовитамины, которые стали известны, это витамины А—
фактор роста, антиксерофтальмический фактор, и витамин, обозначаемый ныне,
D—антирахнтический фактор. Целебное действие, оказываемое на рахит, а также
ж на общее состояние здоровья и развитие детей кормлением тресковым жиром
и сливочным маслом, давно стало известным в медицине (Trousseau 1872).
Тресковый жир, сливочное масло, как вообще, невидимому, все жировые
тела животного происхождения, содержат обычво оба витамина А и D. Началь-
ные наблюдения использовали, главным образом, подобные вещества, »"потому,
смотря по условиям опытов, исследователи отмечали либо влияние на рост,
либо антирахитическое влияние особого начала, присутствие которого в жирах
было открыто Stepp’ou (1911). Лишь работы Afc Collum, Simmonds, Schidley
и Park, также и Parson (1921), особенно же работы первых четырех
[(1), (2), (3), (5), 1922] и Shipley, Me Collum и Simmonds (1921) Shipley,
Park и Me Collum, те же и Simmonds и Park (1920), Shipley, Kinney и
Me Collum [(1), (2), 1924] вполне установили, что имеются два отдельных
тела — одно лицовптамин А — фактор роста, другое антирахнтический фактор,
ныне названный витамином D.	'
Так, было установлено опытами над крысами, что свежий тресковый
жир, если его в течение 12 часов прогревать при 100° Ц, пропуская сквозь
неРо воздух, сохраняет присущее ему антирахитическое действие, тогда как
достаточно 4 часов такого прогревания, чтобы исчезло его свойство излечивать
болезнь глаз (ксерофтальмию) крыс, которая возникает, когда их корм лишен
липовитаминов.
Более поздние опыты показали (Wokes и Willimott 1927), что уже
70-минутное нагревание трескового жира при 98° Ц с пропусканием воздуха
разрушает вит. А (фактор роста, антиксерофтальмический фактор). Удалось
также установить, что существуют в природе вещества, например, свежее коко-
совое масло, которые, обладая антирахитическими свойствами, могут быть совер-
шенно лишенными витамиЛ А, и обратно, другие, например, все зеленые
части растений, богатые вит. А, которые оказывают с^ршенно ничтожное
антирахитическое действие.
Остается упомянуть о спорах, которые вызвало в свое время прилага-
тельное «антирахитический», которым отличают витамин D.
Дело в том, что причиной клинически изученного рахита человека (детей
и взрослых), в среднем общем случае, является не только недостаток вита-
мина D, но и других витаминов. Как и в случаях других клинически азвест-
ных авитаминозных болезней человека, внешние признаки, установленные
медициной, не вполне совпадают с признаками, которые получаются при точных
опытах над животными. Кроме того, признаки эти различно выражаются
у разных пород животных. Так, согласно Mellenby (1918—1921), щенки,
лишенные лпповитаминов, заболевают типичным рахитом, от которого излечи-
вают их тресковым жиром или сливочным маслом. Коренчевский (1922)
установил, что если крыс в течение поколений держать на пище, лишенной
липовитаминов, то у них развивается типичный рахит. Zilva, Golding, Drum-
mond и Coward (19£1) кормили поросят со дня их рождения пищей,
лишенной липовитаминов. Они наблюдали довольно значительные изменения
строения костной ткани, но вовсе не типичные для рахита. К подобным же
выводам пришли Harden и Zilva (1919), испытывая молодых обезьян, и
Макау (1921) и Tozer [(2), 1921]—котят. Зато Hart, Steenbock и Hoppert
(1921) выяснили, что дача трескового жира козам превращает отрицательный
кальциевый баланс в положительный, тогда как витамин С такого действия
вызвать не может. Баланс этот устанавливался точным определением содержа-
ния кальция в пище животных и в их выделениях. Подобное влияние на
баланс кальция не только смеси витаминов А и D, которые содержит тресковый
жир, но и одного витамина D было вполне подтверждено несколькими авто-
рами на различных животных.
В 1921 и 1922 годах Me Collum начал обозначать антирахитический
витамин—ныне витамин D—как «особое органическое вещество,
оказывающее влияние на ход отложения солей кальция
в костях и хрящах».
Правильность такого определения вполне подтверждена позднейшими
данными. Влияние на образование костной ткани и рост костей оказывают
и витамин С [Delf и Tozer, 1918, Tozer-(У), 1921, а также собственные
наблюдения] и витамин В [Shipley, Me Collum и Simmonds, (2) 1921] и,
невидимому, и вит. A [Poulson, 1925), но лишь по отношению к вит. D
установлено положительное влияние па усвоение кальция и известкование
костей п хрящей, пораженных рахитом.
Сведения о сравнительно недавно открытом липовитамине Е—факторе
плодородия животных—будут изложены далее в специальной части
Водорастворимые витамины
Витамины группы В
Под именем витамина В объединяли вначале ряд различных физиологи-
чески действенных начал, растворимых в воде и этиловом спирте. Давно уже
догадывались, а ныне окончательно установили самостоятельное существование
12 —
двух таких начал: антиневритического витамина или вит. Вх и водораствори-
мого фактора роста—вит. В2.
Авитаминоз Вх проявляется обычно на двадцатый день нервными судо-
рогами и параличом конечностей и шеи, авитаминоз В2—остановкой роста
молодых и резким падением веса взрослых животных.
Оба эти авитаминоза, подобно авитаминозам А и D, неизбежно при-
водят к гибели животного. Только-что отмеченные физиологические последствия
обоих авитаминозов В считаются наиболее характерными и всего более при-
влекли внимание исследователей, но так же, как и в случае других авитаминозов,
оба авитаминоза В могут проявляться весьма разнообразно.
В зависимости от состава основной пищевой дачи, а еще более от вида
животного, избранного для опытов, выступают более ясно одни, затеняются
другие физиологические последствия данного авитаминоза. Так, у птиц особенно
ясно проявляются нервные расстройства, которые характеризуют авитаминоз Вх;
крысам они также свойственны, но наступают не всегда и не резко выра-
жены.- Авитаминоз Вх отражается на них, главным образом, так же как и
В2—падением аппетита и хирением животных.
Объединяя оба витамина Вх и В2 под общим названием вит. В, укажем,
что он, кроме дрожжей, оболочек и зародыша различных зерен, содержится
и в зеленых тканях растений. Но они сравнительно мало богаты этим вита-
мином. По мере прорастания зерна, количество вит. В в ткани проростка
убывает, но зато появляется в ней витамин С [Osborn и Mendel, (1), (2)] 1919.
Витамин В был обнаружен в мякоти весьма различных плодов и корне-
плодов, испробованных на его присутствие [Osborn и Mendel (1), (2), 1919
и 1920, Schorten и Ray (1921), Orton и Me Collum и Simmonds 1922,.
Sherman и Smith 1922].
Животные неспособны ни синтезировать, ни долго сохранять витамин В,
присутствующий в их тканях. Так же как и относительно витамина А, богат-
ство молока витамином В зависит от содержения его в пище кормилицы
[Afc Collum Simmonds и Pits (1916), Wollman и Vagliano (1922) и другие
авторы]. Витамин В имеется в незначительных количествах в меде (Dutcher,
1918) и в моче (Van der Walle, 1922). Витами^ В отлично растворим в воде,
ледяной уксусной кислоте, хорошо в 95° этиловом спирте, немного в абсо-
лютном этиловом спирте. Он обладает свойством легко и прочно адсорбиро-
ваться некоторыми глинами (особенно английской глиной из «Суррей»),
животным углем, некоторыми сернистыми солями.
Простой и верный способ приготовить довольно концентрированный пре-
парат вит. В состоит в извлечении измельченной рисовой шелухи, дрожжей
или других веществ, особо им богатых, 80% этиловым спиртом, с после!
довательным отгоном спирта (немецкий патент 311074, английский 10 3294—*
1917 г.). Безопаснее не прибегать к дальнейшим обработкам, указанным в этих,
патентах, так как часто они ведут к разделению витамина В и утрате Ва.
Легко получаются также препараты, согласно способу Seidell’s. (1922).
Клетки свежих дрожжей вносятся в воду, нагретую до 90° Ц, подкисленную»
— 13 —
введением в иее 0,1% ледяной уксусной кислоты, но расчету: объем свежих
дрожжей на объем воды. Около 5-ти минут температура смеси поддержи-
вается в 90° Ц, затем она охлаждается до 50° Ц, дрожжи разрываются, белки
коагулируют, а витамин переходит в раствор. Смесь центрифугируют; к филь-
трату, представляющему собой темно-коричневую жидкость, прибавляется англий-
ская глина, 30 г на литр. Смесь взбалтывается г/г часа. Поглотившая вита-
мин В глина центрифугируется, промывается водой и сушится.
Дозы такой глины, менее 0,1 г весом, достаточно, чтобы предохранить
от заболевания полиневритом голубей, весом в 300 г, содержащихся на корме,
состоящем псключитильно из очищенного рнса.
О приготовлении более концетрнрованных препаратов будет упомянуто
в специальной части.
Цветные реакции, которые всегда дают вещества, богатые витамином В,
точнее витамином Bj—антпневритическим фактором—недостаточно характерны,
так как такие же реакции даются и телами, ничего общего с этим витамином
не имеющими. Все же, в виду того, что отсутствие таких реакций обычно
указывает на отсутствие витамина, полезно упомянуть о них.
Ранее других стала известна [Funk и Лс Collum (1913), Drummond
и Funk (1914)] синяя реакция на вит. В с реактивом на мочевую кислоту
и другие производные пурина Folin и Denis'а. (1912).
Реактив этот состоит из смеси фосфорной кислоты и вольфрамовокислого
натрия и употребляется в щелочной среде в присутствии избытка углекислой
соды. Существование этой реакции долгое время побуждало исследователей
предполагать, что витамин В близок к пуринам. Предположения эти не оправ-
дались. Заметим, что другой реактив Folin'а, реактив на фенолы—смесь
фосфорной кислоты, вольфрамо-и молибденокислого натрия—не только дает ту
же синюю реакцию с растворами препаратов вит. В, что и реактив на
пуринц, но при том в 3 раза более сильную, чем пуриновый реактив
Безсонова (1925).
Синяя реакция витамина В, указанная Jendrasslk’wi (1923), получается
также со свежеприготовленной смесью децинормальных растворов FeCl3 и K3Fe(CN)e.
Реакция эта получается со всеми фенолами и является особенно чувствительным
признаком присутствия орто- и пара-полифенолов [Безсонов (3), (4), (1924)].
Обладая некоторой практической ценностью для быстрого определения
отсутствия в данном веществе витамина В, эти реакции не позволяют судить
о химической его природе. Указывают они лишь, что один из витаминов В,
подобно всем прочим витаминам, — тело, обладающее большой восстановительной
способностью. Возможно, что тело это близко к полифенолам.
Витамин С
(Антицинготный витамин)
В 1912 году норвежскому профессору A. Holst и его ассистенту д-ру Frd-
lich удалось установить, что морские свинки, получающие в корм исключительно
овес (зерно) и воду, гибнут между 25-м и 33-м днем от болезни, чрезвычайно
14 —
схожей с детской цингой. Прибавление к пище зеленых растений или их свежих
-«оков предупреждало такое заболевание свинок.
Несмотря на крупные изменения, внесенные за последние годы в технику
исследований авитаминоза С, необычайно тщательные и многочисленные макро-
и микроскопические исследования классического труда Акселя Хольста
[Л. Holst и FrGlich (1912 —1913)] сохраняют ценность и до сего вре-
мени.
Ими были отмечены следующие главные признаки экспериментальной
цынги морской свинки: 1) кровоизлияния в области сочленений ложных ребер
с истинными, кровоизлияния в мускулатуре голеней, ослабление коренных
зубов; иногда наблюдается парезия зада; 2) пористость и хрупкость костей.
Изменение костной ткани лучше всего наблюдается .в ребрах и конечностях.
Изменение костной ткани сопровождается разрывом кровеносных'сосудов и обра-
зованием внутрикостных кровоизлияний. Поражение длинных костей конечностей
может выражаться в полном разрыве костного вещества. Наблюдения эти были
затем подтверждены Delf и Tozer (1918) и Tozer (1921).
Ни A. Holst, ни Tozer не могли установить у морской свинки крово-
излияний в области десен и подкожных кровоизлияний в грудной области,
характерных для человеческой цынги.
Давая свинкам такую дозу антицинготного сока, которая была недоста-
точна для полного предохранения, но продолжила их жизнь до 80-ти дней,
я мог в двух случаях наблюдать очень значительные подкожные кровоизлияния
в грудной области.
Надо особо отметить, что расшатывание коренных зубов — наиболее точный
и постоянный признак цынги (авитаминоза С) морской свинки. Коренные зубы
цинготных морских свинок легко извлекаются обыкновенными гистологическими
щипчиками, что совершенно невозможно, если свинки получали корм, обильный
витамином С. Признак этот явно указывает на ослабление ткани десен. Ослабление
это не столь резко проявляется, как при цынге человека, так как резцы и клыки
продолжают крепко держаться и у цинготной свинки.
Согласно Tozer (1921), кровоизлияния, характеризующие цынгу, связаны
с перерождением эндотелия кровеносных капилляров.
Повидимому, такому перерождению капилляров, питающих зубы, надо
приписать те микроскопические изменения строения зубов морской свинки, ко-
торые, согласно Zilva и Wells (1918), наблюдаются уже на 7-й день авита-
миноза С. Подобно большинству прочих витаминов, витамин С играет также
роль фактора роста. Mourlqaand, Michel и Barr (1922) отметили, что весовой
прирост, а также и рост костей молодых морских свинок, получающих лимонный
сок, совершались быстрее, чем у контрольных свинок. Но разница наблюдалась
явно лишь в 'поздние периоды цынги.
Опыты Безсонова [(2), (3) 1928] доказали, что уже в первые 48 часов
авитаминоза явно понижается прирост веса. Так же как и отсутствие вита-
мина В, отсутствие витамина С быстро отзывается резким падением аппетита
животного {Безсонов (2), (3), 1928].
15 —
Витамином С особо богаты зеленые ткани растений; встречается он и в пло-
дах, и в корнеплодах. За исключением сливы (Hess и Unger, 1918), он при-
сутствует в большинстве обычных плодов: в яблоках, персиках (Delf, 1922),
помидорах (Givens, 1918), землянике (4. Holst и Frblich, 19Г2), апельсинах,
лимонах, ананасах. Из корнеплодов укажем картофель. Дозы сырого картофеля
от 10 до 15 г в день на свинку обеспечивают ее от цынги [Givens и Me Glu-
gage (1920), Безсонов (1920)]. Богатство кормовой репы витамином С близко
к картофелю (Sherman и Smith, 1922). Оно значительно уступает богатству
зеленых листьев и многих плодов. Всегда присутствует витамин С в моркови (Hart,
Steenbock и I llis, 1921). Хотя в покоющихся зернах витамина С нет, но он
появляется даже в выросших в темноте проростках. В отличие от витамина В^
витамин С отсутствует в пчелином меде (Dutscher, 1918, Harold Faber, 1920).
Любопытно отметить, что витамин С отсутствует в моче (Van-der- Valle, 1922)
и тогда, когда свинки получают зелень в изобилии (Вольман—• цитировано
по Безсонову, 1922). Однако, в виду двойственности витамина С, возможно,
что в данном случае переходит в мочу фракция С2.
Уже данные A. Holst и Frolich (1912 — 1913) позволяли заключить,
что мясо и молоко животных, не получающих свежего растительного корма,
лишены антицинготного действия. В общем, данные эти были подтверждены
Cohen и Mendel (1918), Hess, Unger и Suppley (1920) и многими поздней-
шими работами, но встречаются и исключения. Крысы, мыши и птицы обладают
способностью синтезировать витамин С: их печень всегда богата им.
Все попытки предупредить цыигу, давая разнообразнейшие вещества
определенного химического состава, неизменно приводили к неудаче. Me Collum
и Pits (1917) предложили состав искусственного лимонного сока, содержащего
все установленные анализом настоящего сока сахара, соли и кислоты. Hess (1918)
доказал опытами над свинками, что сок этот лишен всякого антицинготного
действия, а в 1921 году Me Collum сам признал существование неизвестного
органического фактора — витамина С.
Вследствие своей чрезвычайной чувствительности к окислению, витамин €
очень нестоек. Внутри лимонов и апельсинов он сохраняется целиком 6 месяцев
и более, пока ткань их остается живой, но сохранение его в растворах очень
мало надежно. Относительно действия ферментов укажем, что ни инвертаза
(Smith и Medes, 1921), ни спиртовое брожение (McClendon, 1921) не уско-
ряют разрушение витамина С. Зато достигается оно действием оксидаз.
Безсонов [1921 (1)] проверял влияние оксидаз на разрушение витамина С
в ткани картофеля. Оксидазы обусловливают быстрое почернение картофель-
ного сока, получаемое под прессом. Обсыпая по определенному расчету ломтик
картофеля лимонной или винной кислотой, удается остановить действие оксидаз —
сок не чернеет. Такой сок оказывает значительное антицинготное действие
и дает сине-фиолетовую реакцию с раствором моно-молибденово-фосфорно-вольфра-
мовой кислоты реактивом на полифенолы и витамины [Безсонов 1921 (2) и 1922].
Контрольный, чернеющий сок, полученный без участия кислот, не оказывает
антицинготного действия и не дает сине-фиолетовой реакции. Последующее
— 16 —
прибавление кислоты к котрольному соку обесцвечивает его, но реакции по-
прежнему он не дает.
Укажем, наконец, некоторые данные о витамине С молока. Согласно данным
Jefcott и Bacharach (1921), чтобы дать свинке все нужное количество вита-
мина С, надо снабжать ее 26-ю кубиками наилучшего свежего коровьего мо-
лока на 100 г веба морской свинки. Опыты Harden и Zilva (1919 и 1920)
над детьми и опыты их с обезьянами позволяют рассчитывать, что ребенку
требуется доза молока вчетверо меньшая, т.-е. около 7-ми кубиков на 100 г его
веса, чтобы обеспечить его витамином С. Наилучшее короьье молоко в 50 раз
беднее витамином С свежего капустного и в 35 раз свежих лимонного и апель-
синового соков. Очень короткое нагревание свежего молока до точки кипения
или повторное короткое нагревание до 60° Ц молока, налитого в бутылку до
горлышка, тишь незначительно уменьшает,количество присутствующего в нем
витамина С {Jefcott и Bacharach, 1921). Несладкое консервированное молоко
совершенно лишено витамина С [Vario (1922), Безсонов (1923)]. Сладкое кон-
сервированное молоко, которое при приготовлении нагревают не свыше 50° Ц,
а также благодаря предохраняющему витамин присутствию сахара, сохраняет
его почти целиком [Vario (1922) и другие]. Богатство витамином С сушеного
молока очень различно, в зависимости от способа его фабрикации. Наилучшие
результаты дает способ «.Just». Свежее молоко увлекается тонким слоем на
поверхность вращающихся валов, нагретых до 116° Ц. При такой температуре
оно пребывает лишь около 2-х секунд, достаточных для высыхания. Сушеное
молоко, полученное таким способом, сохраняет целиком витау пт С, присутство-
вавший в исходном свежем молоке (Hart, Steenbock и Ellis, 1921, Jefcott
и Bacharach, 1921). Согласно этим авторам, высушивание молока способом
«распыления» ведет к очень значительным утратам вит. С. Любопытно отме-
тить, что имеются новейшие данные, которые указывают, что потери в молоке'
вит. В при сушении вальцовкой превосходят таковые при сушении распылением.
Сохранение витамина В менее существенно, так как даже зимой оп присутствует
в изобилии в обычной пище, как-то: гречневой, пшенной и других не очищен-
ных от шелухи кашах, в вареных моркови, картофеле, репе и т. п.
Новый период исследований витаминов
Учение о витаминах вступает, невидимому, в наиболее плодотворную по-
лосу своего развития; количество посвященных ему работ продолжает возрастать.
Вместе с тем преобразовываются старые и создаются новые способы исследо-
вания. Разработке собственно-биологических сноровок в от^ытах над животными
сопутствует усиленное использование средств современной техники и данных,
накопленных в других областях знания. Наглядный тому пример — открытие
антирахнтического провитамина, одновременно сделанное в 1927 году Rosen-
heiin'ox и IVindaus’oM. Открытие это было предсказан^спектрографическими
исследованиями {Steenbock и Black, 1925, Heilbron, Катт и Morton,
1927) многократно перекристаллизованного, считавшегося химически чистым
холестерина; оказалось, что лишь спектр поглощения ультра-фиолетовых лучей'
17 —
и действие на животных выдает присутствие в перекристаллизованных холе-
стеринах и фитостеринах ничтожной примеси «провитамина»
Розенгейм и Виндаус выяснили, что этот провитамин тождественен хо-
рошо изученному телу — эргостерину Tanret (1890 и 1908 г.г.). Одна пяти-
десятитысячная миллиграмма эргостерина, предварительно иррадиированного,
уже оказывает явное антйрахитическое действие па крысу. Вполне понятно,
что присутствие столь ничтожных количеств постороннего вещества в пробах
холестеринов и фитостеринов не проявляется при определении точки плавления,
и угла вращения этих тел. А потому вначале считали, что способность к анти-
рахитическому действию возникает после иррадиации в химически чистых
холестеринах и фитостеринах.	*
Но не только радиография и исследование условий активации липинов
ультра-фиолетовыми лучами привели к открытию провитамина. Его отождествле-
ние оказалось возможным лишь благодаря работам по органической химии начала
нашего века, что привело к выделению и характеристике эргостерина, а также
благодаря исследованиям Виндоуса, Розенгейма и других авторов по химии
стеринов и их производных. Кроме того, необходимейшим условием успеха
явилось применение отчетливой биологической пробы на рахит, выработанной
в свое время Мак-Волумом.
Относительно работ, посвященных другим витаминам, надо также особо
отметить тщательную проверку и подробную разработку, которой подвергся сам
биологический метод опытов по авитаминозу над животными.
Решение основной задачи этого метода — обеспечить животное всеми вита-
минами, кроме исследуемого, избежать полиавитаминоза, давая пищу строго
специфическую по отсутствию в ней только одного витамина, часто приводило
к вопросам общей физиологии питания и потребовало много усилий. Одна из
главных заслуг исследований последних лет та, что они внесли большую опре-
деленность в учение,о витаминах, устранив в значительной степени то, что
могло казаться гадательным в самой основе этого учения. Ныне мы располагаем
рядом определенных данных, относящихся к химическому состаайГ?®Ямвых
витаминов. Можно считать доказанным, что витамины А, антирйрвдич£Щй^ч^
и С — органические соединения, составленные исключительно^з/аваиов
и 0. Полное выявление химической сущности какого-лиофшпамииьеще щн
достигнуто, но в отдельных случаях исследователи вплотную фдофлй к ПИпениф <
этой задачи. Точнее разграничены особенности физиологиче^ЭДХдейстйЩ
дельных витаминов. Разъяснены главнейшие противоречия
опытов.
Другим следствием новейших успехов изучения витаминов является то,
что в свете новых данных необычайно возросло их обще-биологическое значение.
Вое более решающей выявляется роль витаминов "В области физиологии питания,
х) Предложение Мак-Колумом обозначения буквой D антирахитического витамина ныне
окончательно принято в литературе. В предыдущем очерке [Безсонов, 1924 (2)] витамин
этот временно был обозначен Аа, так как в то время буквой D некоторые авторы обозна-
чали 2-ю фракцию вит. В.
Витамины.
О
18 —
роста и размножения. Так, пелагра — болезнь кожи, которую склонны были
объяснить, как следствие качественного изъяна белкового питания — оказалась
авитаминозом 1). Все более выясняется, что наряду с типичными признаками,
которые характерны для отдельных авитаминозов, основное его проявление, по
крайней мере в случае авитаминоза В и С, есть голодное истощение организма.
Далее выяснено, что кроме вит. А и В, также и антирахитический вит. I)
проявляет влияние на рост молодых животных. Помимо действия, которые ока-
зывают на половые железы некоторые из уже известных витаминов, было
обнаружено решающее влияние на все функции воспроизведения вновь открытого
витамина Е.
Прежние работы намечали возможное .значение витаминов для общей пато-
логии. Новые данные вновь указывают на связь между развитием туберкулеза
и малокровия и некоторых функциональных расстройств и авитаминозами.
Еще в 1917 году Osborne и Mendel отметили образование камней в моче-
точниках крыс, которые получали пищу, лишенную липовитаминов. В печени
цыплят, подвергнутых подобному же авитаминозу, согласно Beach (1921)
и Hart, Steenbock, Lepkovsky и Halpin (1924), наблюдались отложения белых
полосок солей мочевой кислоты.
Но особенно значительными в этой области кажутся достижения исследо-
вателей японского Института по изучению питания, недавно опубликованные
в Европе его директором (Salki, 1927). Им удалось, применяя частичный авита-
миноз по липорастворимым витаминам, вызвать у крыс образование камней
в печени, желчных протоках, мочевом пузыре. При чем усиленное и долгое
пользование этими витаминами вело к рассасыванию камней.
Тем же исследователям, применяя своеобразную технику частичного авитами-
ноза, удалось вызвать у некоторых крыс образование опухолей, схожих с раком.
Наконец, работы последних лет позволили несколько приблизиться к раз-
гадке значения витаминов для самих растений. Прежние попытки связать
образование витаминов — особенно витамина А — с фотосинтезом дали противо-
речивые результаты. Более совершенная техника позволила ныне разъяснить
противоречия и значительно увеличить запас фактических сведений об образо-
вании витаминов и растительной ткани.
Новые данные указывают на вероятную связь между процессами фотосин-
теза и вит. А. Но, обратно первоначальному предположению, невидимому. обра-
зование витамина А не столь зависит от фотосинтеза, сколь осуществление
фотосинтеза от наличия витамина А.
Настоящий очерк отнюдь не претендует дать сколько-нибудь полное изло-
жение обширной литературы по витаминам последних лет. Его цель — сообщить
наиболее существенные и достаточно обоснованные фактические сведения.
г) Отметим, однако, что, согласно Parson (1931 Jour. Biol. Chem. 90 351), крысы,
получая корм, обильный яичным белком -вареным или сырым, обнаруживают болезнь, сходную
с пелагрой, при чем очень значительные дозы вит. В (дрожжей) бессильны предотвратить ее
Облегчение получается при кормлении печенкой. Следовательно, также и изъяны белкового
питании могут вызывать кожные заболевания, вне всякой зависимости от авитаминоза В.
И. Г>.
Глава I
Новые данные о природе и свойствах отдельных витаминов.
Группа липорастворимых витаминов
В группу эту входят ныне: вит. I) — антирахнтический фактор, вит. А,
фактор роста или антиксерофтальмический фактор, и сложный витамин Е—
фактор воспроизведения, представленный двумя различно физиологически дей-
ствующими телами.
Природа витамина D
Уже прежние работы (Безсонов, 1924) наглядно выяснили самостоятельное
существование особого «костного» или антирахитического витамина D, со-
гласно ныне принятой терминологии. Многочисленные исследования последних
лет окончательно устранили возможность сомневаться в этом. Как удалось
выяснить, антирахитическое действие, которое оказывает освещение животных
солнцем пли ртутной кварцевой лампой, не только не противоречит существо-
ванию вит. I), но всецело обязано его возникновению внутри освещаемых тканей.
Первые опыты, показавшие, что ткани животного, погибшего от острого рахита
после того, как их подвергли действию кварцевой лампы, приобрели свойство
излечивать от рахита крыс, — имеют ныне лишь исторический интерес. К ре-
шению основной задачи — открытию провитамина D — привело открытие резко
выраженного антирахитического действия некоторых липидов, которое они при-
обретают после иррадиации.
Такое действие иррадиированного холестерина было почти одновременно
описано Rosenheim и Webster (1925), Weinstock и Helman (1925 ), Steen-
bock и Black (1925). Дальнейшие исследования показали, что антирахитическое
начало, возникающее в иррадиированных холестеринах, тождественно витамину I),
который созидается в природных условиях. Освещение солнечными лучами недея-
тельного холестерина придает ему антирахитическпе свойства также, как и
иррадиация кварцевой лампой (Rosenheim и Webster (1) 1926].
Характерные особенности, которые свойственны антирахитическому началу
трескового жира, отличают также вит. 1), возникающий после иррадиации
в холестерине.
Dubin и Funk (1923), Nelson и Steenbock (1925), Drummond (1924)
установили, что при осаждении неомыляемой фракции трескового жира диги-
тонином, вит. D остается в растворе. Весьма обильный осадок содержит лишь
бездеятельный холестерин.
2*
20
При осаждении дигитонином раствора иррадиированного холестерина [ Ло-
senheim и Webster (1) 1926, Hess, Weinstock и Sherman 1926, Hitzescu,
Popovicu и Deneus-Goetz, 1927] также наблюдается сосредоточение активной
фракции в фильтрате.
Любопытно отметить, что более активные образцы холестерина, получа-
ющиеся иррадиацией в атмосфере азота или в пустоте, а не на воздухе, дают
наибольшее процентное по весу количество осадка (не активной фракции).
В этом случае остающаяся в растворе чрезвычайно активная фракция
достигает по весу едва 0,1% всего иррадиированного холестерина, подвергнутого
осаждению дигитонином. Зато менее активный холестерин, полученный длитель-
ной иррадиацией в присутствии воздуха, осаждается дигитонином только на 90%
[Rosenheim и Webster (1) 1926].
Тождественность свойств вит. D'трескового жира и иррадиированного хо-
лестерина проявляется также их одинаковой избирательной растворимостью
в жидком безводном аммиаке. После обработки этим растворителем неомыляемой
фракции трескового жира [Koch, Cohen и Gustavson 1926] или иррадииро-
ванного холестерина [2Zess, Weinstock и Sherman (2) 1926], небольшая часть
материала, перешедшая в раствор — 4% в случае холестерина — обладала резко
выраженными антирахитическими свойствами.
Прямому изучению химических свойств вит. J) было, впрочем, уделен»
тогда сравнительно мало внимания. Главное усилие исследователей направилось
на определение свойств стеринов, связанных с их активацией ультрафиолетовым
светом, и самих условий этой активации.
Было выяснено, что кроме холестерина, ряд стеринов, выделенных из
животных и растительных тканей (протоплазмических стеринов), становятся
сильно антирахитическими после иррадиации. Исключением являются [Rosen-
heim и Webster (1) 1926] два насыщенных экетреторных стерина,^ мета-сте-
рины Doree (1913): копростерин С^Н^О, полученный из кала собаки, и а-ами-
роль С30Н500 из смолы.
Многие естественные, жиры, так, например, почти все испробованные
растительные масла, бездеятельные до иррадиации, приобретают резко выра-
женные антирахитические свойства после иррадиации. Те же свойства, хотя
и в меньшей мере, но все же ясно выраженные, приобретает после иррадиации
ряд веществ, не принадлежащих к липидам.
Одновременно опыты над препаратами стеринов показали зависимость
между образованием вит. D и продолжительностью иррадиации. Действие
ультра-фиолетовых лучей вначале сопровождается постоянным усилением анти-
рахитических свойств стерина, затем приращение вит. В останавливается, а
через некоторое время продление иррадиации ведет к уменьшению и к полному
уничтожению антирахитического начала.
Если иррадиация велась в атмосфере азота или в пустоте, то такое
разрушение вит. D не сопровожается изменением внешнего вида испытуемого
холестерина. Усиленная иррадиация в присутствии кислорода ведет к неболь-
шому осмолению препарата, но и в последнем случае перекристаллизация
— 21
позволяет вновь -получить в чистом виде 90% и более исходного количества
холестерина,1при чем точка плавления такого холестерина строго соответствует
химически 'чистому холестерину [Rosenheim и Webster (1) и (2) 1926, (3)
и Heilbron, Катт и Morton (4) 1927]. Новая иррадиация такого холесте-
рина не в состоянии восстановить утраченных антирахитических свойств
[Hess, Weinstock, Sherman 1925]. Лишь сравнение спектров холестерина до
и после иррадиации выдает совершившееся изменение его биологических
свойств. Отметим, что согласно этим авторам, усиленная иррадиация ведет
к образованию тела, совершенно несхожего с начальным холестерином. Точная
проверка этого утверждения [Rosenheim п Webster (4) 1927] его опро-
вергла.
Иррадиация холестерина, достаточная для его активаций, ведет к замет-
ному ослаблению его спектра поглощения ультра-фиолетовых лучей
и Weinstock (3) 1925]. Пере-иррадиация ведет к практически полному
исчезновению трех характерных полос поглощения ультра-фиолетовых лучей
в спектре холестерина. Steenbock и Black (1925) и Schlutz и Morse (1925)
указали, — последние, основываясь исключительно на  спектрографических
данных, — что способность стеринов приобретать антирахитические свойства
нод влиянием ультра-фиолетовых, луней находится в строгой зависимости от
их способности поглощать ,эи-лу®и.' В зависимости от того, присутствуют ли
характерные полосы пбгленцения ультра-фиолетовых лучей в спектре данного
стерина, можно предсказать, способен ли он приобретать антирахитические
свойства после иррадиации Такое положение совпадает с законом Гроттус-
Драпера, согласно которому на данное вещество действуют лишь те лучи,
которые оно поглощает. Кроме того, наблюдение этих авторов и подробное
спектрографическое исследование различных препаратов холестерина, сопро-
вождаемое биологической пробой Heilbron, Катт и Morton (1927), привели
к заключению, что в тех стеринах, которые считали химически чистыми, при-
сутствует особая примесь. Эта примесь, а не вся масса стерина, поглощает
ультра-фполетовый свет и затем становится витамином I).
Казалось, противоречило такому допущению то, что образцы холестерина,
приготовленные из различных материалов, обнаруживали характерные полосы
поглощения ультра-фиолетовых лучей и антирахитическое действие, не смотря
на то, что были тщательно приготовлены и после повторной обработки щелочно-
спиртовым раствором калия подвергнуты, порой, многочисленным дополнитель-
ным перекристаллизациям (до 20-ти) из этил, спирта, уксусного эфира, петро-
лейного эфира. Точка плавления полученных препаратов в пределах экспери-
ментальной точности совпала с таковой, характеризующей холестерин —148,5° Ц
[Schlutz и Ziegler, 1926, Heilbron, Катт и Morton,: 1927, Rosenheim и
Webster (1) 1926 и другие авторы]. Отметим, что позднее Anderson'N в 19'27
все же удалось установить разницу физических свойств препаратов холесте-
рина, полученных из различных материалов (мозга, яиц, камней печени и
проч.); она объяснялась вероятной примесью изомеров холестерина. Хотя Rosen-
heim и Webster (1) в 1926 г. и утверждали, что исследования их производи-
— 22 —
лись над «исключительно чистым холестерином», все же спектрографические
указания на существование активной примеси в таких препаратах заставили
их прибегнуть к особым, специально химическим способам получения чистого
холестерина.
Следуя путем, который в 1888 году привел Reinitzer’z к определению
правильной эмпирической формулы холестерина, бромированием начального пре-
парата с последующим вытеснением брома амальгамой натрия в присутствии
уксусной кислоты, Rosenheim и Webster [(2) в 1926 г. и (3) в 1927 г. | полу-
чили, наконец, спектрографически чистый холестерин. Холестерин этот, строго
соответствуя всем дотоле известным признакам химически чистого холестерина,
не обладал характерными полосами поглощения ультра-фиолетовых лучей.
Подверженный их действию, он не приобретал антирахитических свойств. Не
только холестерин, но и различные фитостерины, как обладающий двумя двой-
ными связями стигмастерин (СзоН48О), так и — одной двойной связью — сито-
стерин (С27Н4вО), утрачивали после бромирования способность активироваться
под влиянием иррадиации (Windefus и Hess, 1927). Далее выяснилось [Rosen-
heim и Webster (4), 1927}, что бромирование может быть заменено хлориро-
ванием и последующим омылением. Разрушение активированной примеси дости-
гается также действием перманганата на холестерин в растворе ацетона, при
чем холестерин остается нетронутым. Фильтрация в присутствии животного
угля также ведет к удалению этой примеси. Наконец, как было уже сказано,
ее уничтожает продолжительнная иррадиация стеринов.
Итак, окончательно выяснилось, что вещество, рождающее под действием
иррадиации вит. 1), не сам холестерин, а примесь. Примесь эта сопровождает
считавшийся химически чистым холестерин при всех обычных приемах его
очищения — этерификации, омыления, перекристаллизации.
Rosenheim и Webster [(2) 1926], вначале предложившие назвать это
вещество «витастероль», затем [Rosenheim и Webster (3) 1927] признали
более удобным обозначение Windaus’z.—провитамин. Дабы избежать недо-
разумений, осторожнее именовать это вещество провитамином I).
Те трудности, которые представляет очищение стеринов от провитамина,
казалось, указывали на то, что сам провитамин принадлежит к особому виду
стеринов, лишь менее стойкому, чем обычные протоплазмические стерины.
Работая над разнообразнейшими стеринами, Виндаус и Розенгейм обратили
внимание на один микостерин: эргостерин Tanret (1890, 1908). Эргостерин
(С27Н420), обладая тремя тройными связями, отличается от прочих стеринов
своей ненасыщенностью и малой стойкостью. Он характеризуется постоянной
вращения. В чистом хлороформе она: [<х]“ =—132 и [а]’461= —171°. Точка
плавления мало характерна (от 166 до 183°). [Bills и Honeywell (1928)].
Виндаус выделил из дрожей, Розенгейм из спорыньи препараты эрго-
стерина, точно соответствовавшие данной характеристике. Оба автора одновре-
менно пришли к заключению (Windaus и Hess, 1927 и Rosenheim и Web-
ster (1), 1927], что эргостерин обладает такими свойствами, которые должны
быть присущи провитамину 1).
— 23 —
Эргостерин, подобно провитамину Вив отличие от всех прочих стери-
нов, весьма легко поддается окислению. Воздействие воздуха и света при
обычной температуре быстро ведет к изменению цвета, точки плавления и
постоянной вращения эргостерина (Tanret, 1890, 1908, Schultze и Winter -
stein, 1906).
Провитамин D, присутствующий ,в обычных препаратах холестерина,
в отличие от рождаемого им витамина D, осаждается дигитонином [Rosenheim
и Webster (4) 1927]. Подобно всем типичным стеринам, эргостерин вступает
в связь с дигптонином, при чем такой дигитонид отличается своей малой
растворимостью {Smedley-Mac Lean и Thomas 1920). Также, как и про-
витамин, эргостерин разрушается действием брома [Rosenthal, 1922, Rosenheim
и Webster (4) 1927]. Но главное доказательство тождественности эргостерина
и провитамина D дали совпадающие результаты спектрографических наблюде-
ний и биологических испытаний.
Спектры обычных препаратов холестерина, содержащих провитамин,
имеют три полосы поглощения ультра-фиолетовых лучей в пределах волн,
длиной от 270 р.|х до 295 р-р- [Heilbron, Катт и Morton, 1926, Pohl, 1926,
Rosenheim и Webster (4) 1927].
Спектр эргостерина обладает теми же полосами, но количественно погло-
щение ультра-фиолетовых лучей превосходит от 1500 до 2000 раз поглощение
образков холестерина, полученных из мозга, и может достигать 10 000 в дру-
гих случаях. (Степень поглощения ультра-фиолетовых лучей различных пре-
паратов холестерина весьма неодинакова). Эргостерин отличается чрезвычайно
сильной способностью поглощать ультра-фиолетовые лучи. Слой, толщиной
в 10 -им, 0,05% раствора эргостерина в этиловом эфире поглощает целиком
все лучи короче 310 рр. Даже при разбавлении в 5Q-^00- явно поглощались
лучи зоны 280—310 рр, отчетливо поглощались все ультра-фиолетовые лучи,
характеризующие солнечный свет, что соответствует положительному результату
активирования холестерина солнечным светом [Rosenheim и Webster. (4),
1927, Windans и Hess, 1927].
Как было уже сказано, степень поглощения ультра-фиолетовых лучей
холестерином, очищенным при помощи животного угля, чрезвычайно пони-
жена^ Но, если к такому очищенному холестерину добавить одну двадцати
тысячную долю эргостерина, спектр поглощения становится совершенно подоб-
ным спектру начального деятельного, холестерина. Между тем такое ничтожное
добавление эргостерина не отражается ни на определении точки плавления,
ни на постоянной вращения.
Иррадиация эргостерина ведет к постепенному потуханию характерных
полос поглощения ультра-фиолетовых лучей. Параллельно уменьшается оса-
ждаемость эргостерина дигитонином, так как иррадиация ведет за счет про-
витамина р к образованию вит. D, не осаждаемого дигитонином. (В данном
случае провитамином является эргостерин, который осаждается дигитонином).
Пятичасовое действие ртутной кварцевой лампы (210 V 3,5 Л) на
— 24 —
ч
6,1% раствор эргостерина в эфире, при чем слой раствора имел толщину
в 10 мм, а удаление источника лучей от раствора 40 см [Rosenheim и
Webster (1), 1926, (4) 1927] ведет к полному исчезновению полос поглоще-
ния ультра-фиолетовых лучей. После такой иррадиации способность эргосте-
рина осаждаться дигитонином совершенно исчезла. Огромное антирахитическое
действие иррадиированного эргостерина, испытанное на крысах, вполне совпа-
дает с его необычайной способностью к поглощению ультра-фиолетовых лучей.
Опыты эти были произведены над эргостерином, подвергнутым иррадиации
в твердом виде и в эфирном растворе. Раствор находился в плотно замкнутом
кварцевом сосуде. В обоих случаях иррадиация длилась 30 минут и 5 часов.
После удаления эфира выпариванием все четыре образца были растворены
в оливковом масле. Оливковое масло было предварительно испытано на отсут-
ствие в нем антирахитических свойств.
Во всех случаях дозы в одну десятитысячную миллиграмма ока-
зались достаточными для излечения и для предотвращения рахита у крысы. Пять
миллиграммов иррадиированного эргостерина равнялось, по богатству витами-
ном D, одному литру хорошего, свежего трескового жира, [Rosenheim и Webster
(4) 1927].
Несмотря на такое чрезвычайное по силе физиологическое действие, содер-
жание витамина В в пррадиированном эргостерине обычно не прывы ' ает одной
десятой его общего веса [Coward (1928)]. Наиболее деятельные о _,азцы ирра-
диированного ртутной дугой эргостерина сохраняют от 90 до 73 /0 начального,
не измененного иррадиацией эргостерина [Rosenheim и Webster 1927,
Bills, Honeywell и Сох (1928)]. Усиливая иррадиацию и достигая более пол-
ного превращения эргостерина, не только не наблюдают повышения, но пони-
жают содержание в нем витамина D. Под влиянием иррадиации возникают
из эргостерина одновременно витамин D и другие тела. Спектрографически
витамин D отличается от этих тел х вентерным максимумом поглощения
ультра-фиолетовых лучей. Он лежит мея у длинами волн 280 и 290 микро-
микронов, максимумы бездеятельных тел характеризуются длиной волн в 230
и 248 микромикронов. В отличие от эргостерина, витамин D и эти тела обла-
дают очень большой растворимостью в метиловом спирте (грамм на грамм).
Повидимому, лишь тело или тела, которые появляются в начальной стадии
процесса превращения эргостерина, обладают антирахитичсскими свойствами.
[Webster и Bourdillon (1928), Bills, Honeywell и Сох 1928, Smakula
1928, Windaus, Westphal, Werder и Rygh 1929 Delaplace и Ribiere
1929, Lahousse и Gonnard 1929, Fabre и Simonnet 1929, Reerink
и Van Wijk (1929)]. Давшие эти указания работы состоят главным образом
в очень тщательных спектрографических исследованиях, часто сопряженных
с биологическими проверками. Особо надо отметить интересную работу Reerink
Van Wijk (1929). Сочетая совместное освещение ртутной дугой и магнием
е фильтрованием света через бензол, им удалось устранить все волны, короче
275 р-|х. Как и следовало ожидать, такое освещение оказалось наиболее выгод-
ным для превращения эргостерина в витамин D. Возникающий при этих уело-
— 25 —
виях витамин D превращается, правда, затем под влиянием того же освещения
в биологически бездеятельное, стойкое тело, но превращение это совершается
медленно, и удается получить образцы эргостерина, которые на 60% (вместо
обычных 10%) состоят из витамина 0. Биологические испытания хорош»
совпадают с спектрографическими наблюдениями авторов. Так, образец ирра-
диированного эргостерина, который по их определению состоял на 50% из вита-
мина D, исцелял рахит крыс при ежедневной дозе в одну стотысячную мил-
лиграмма. Иррадиация более короткими волнами (около 254 уу.) вызывало
в эргостерине очень сложное видоизменение. Рядом с витамином D, . который
в этих условиях быстро превращался в другое тело, возникало бездеятельное,
сравнительно стойкое соединение. Антирахитическое действие таких образцов
было, по крайней мере, в 10 раз слабее, чем тех, которые были получены ирра-
диацией более длинными волнами.
Осенью 1927 года осуществилось промышленное изготовление9 вит. 1>,
путем иррадиирования эргостерина, что позволило широко примепенять этот
витамин в клинических опытах.
Он был с успехом использован для лечения., не только рахита детей,
но также случаев остеомаляции взрослых {Gy&rgy, 1927, Seyderhelm и Тат-
тапп, 1927, Веек, 1927).
Замечательное открытие Виндауса и Розенгейма, столь полно соответ-
ствующее многочисленным данным других исследователей, не позволяет
сомневаться в том, что эргостерин является провитамином D и превращается
в вмтамин D под действием ультра-фиолетовых лучей.
Открытие это, приближая к разгадке химической сущности одного
мз витаминов, все же не дает ее, так как мы не знаем, что за изменения
происходят в эргостерине при превращении его из провитамина в витамин D
под влиянием ультра-фиолетовых лучей. Некоторые указания на характер этих
изменений все же имеются. Одно из них то, что [ превращаясь в витамин D,
провитамин перестает быть стерином.' Одно из типичных свойств стеринов—
способность образовать малорастворимые дигитониды,— витамин D дигитонином
не осаждается. Растворимость эргостерина в метиловом и этиловом спиртах
ничтожна, тогда как тела, возникшие при его иррадиации, отлично растворимы
в этих спиртах.
Имеются также указания на зависимость между особенностями хими-
ческого строения стеринов, а именно: наличие группы вторичного спирта
и двойной связи и способность к превращению в вит. D под действием
лучей. Еще до открытия провитамина исследования над производными
считавшегося чистым холестерина выяснили, что эфиры такого холестерина
с различными органическими кислотами также приобретают антирахитические
свойства иррадиации [Hess, Weinstock и Sherman (1) 1926, Rosenheim
и Webster (1), 1926, Bills и Me Donald (2), 1927], при чем предположение
Rosenheim и Webster (1) (1926) о. том, чтц активация таких эфиров
*) Фирма Мерка в Дармштадте, Ров-Пуленк во Франции и мног. друг.
26 —
связана с их гидролизом под влиянием лучей, было оповергнуто. Зато было
выяснено, что та кислота, что сама способна поглощать ультра-фиолетовые
лучи, дает инактивный эфир [Bills и Me Donald (2) 1927]. Следовательно,
группа вторичного спирта не играет роли в тех изменениях, которые сопрово-
ждают превращения провитамина в витамин D. Такому заключению, казалось,
противоречила неспособность к активации, которую проявили: холестеион,
кетон холестерина ^Н^О, хлорид холестерина С27Н45С1 [Rosenheim
и Webster (1) 1926] и 14 различных спиртовых эфиров холестерина, приго-
товленных Bills и Me Donald (1) и (2) 1927L Лишь открытие провита-
мина D позволяет разъяснить это противоречие. Только что упомянутые
препараты были получены способами, ведущими к разрушению провитамина.
Кетон холестерина был получен из дибромида, а 14 спиртовых эфиров—
обработкой фтором исходного холестерина. Получение кислотных эфиров не вы-
нуждало прибегнуть к действию галоидов, но вело к замещению спиртовой
группы как самого холестерина, так и его активной примеси —эргостерина.
Те же исследователи пришли к выводу, что наличие двойной связи необ-
ходимо для возникновения антирахитических свойств под влиянием осве-
щения. Замещенный холестерин — дигидрохолестерин — не приобретает антира-
хитических свойств под влиянием иррадиации.
Местонахождение провитамина и образование витамина D
в природных условиях
Большинство растительных масел и животных жиров, не обладая анти-
рахитическими свойствами, приобретают их после иррадиации и, следовательно,
содержат провитамин D. Но не только липиды содержат его — опыты над
животными обнаружили присутствие его в ряде яежировых веществ. Так,
пшеничная мука (Webster и Hill, 1925) приобретает после иррадиации резко
выраженные антирахитические свойства. Действие солнечных лучей на муку
придает ей антирахитические свойства. Усиленное промывание эфиром лишает
муку провитамина В (Rosenheim н Webster (1) 1926). В виду того, что доста-
точно присутствия ничтожных следов провитамина для проявления антирахитиче-
ского действия, часто тщательная экстракция нежировых веществ еще не ведет
к удалению провитамина.	’
Так, Steeribock и Coward в 1927 г. наблюдали антирахитическое дей-
ствие после иррадиации прогретых и подвергнутых экстракции спиртом казенна,
кукурузного крахмала и декстрина. При чем крахмал эктрагировался несколько
недель. Лишь некоторые препараты картофельного и рисового крахмала,
а также сахара, соли и некоторые чистые препараты белков] не активирова-
лись действием иррадиации.
Достигнутое антирахитическое действие обеспечивалось включением в пи-
щевую дачу крысы 5% иррадиированного кукурузного крахмала или дек-
стрина. Все же действие иррадиированного кукурузного декстрина оказалось
в 36 раз слабее чистого иррадиированного кукурузного масла (Dutscher
н Kruger, 1926). Согласно тем же авторам, казеин, подвергнутый после обра-
— 27
потки спиртом продолжительной экстракции эфиром, а затем 12-часовому на-
греванию при 120° Ц, оказался лишенным способности приобретать антирахи-
тические свойства.
Насколько распространен провитамин D, в каких разнообразных раститель-
ных веществах он встречается, показывает неожиданное решение спора о том,
приобретает ли воздух антирахитичесяие свойства под влиянием иррадиации.
Опыты Ните и Smith’d. (1923) привели их к заключению, что воздух акти-
вируется иррадиацией. Однако, данные Webster’d и Hill’d. (1924) Hughes’d,
Nitclwr'd, Charles и Titus’d (1925) опровергли.такое заключение. Причину про-
тиворечия выяснили Rosenheim и W'Vwfr’r (3) в 1926 г. В опытах Ните
и Smith (1923) пол клеток был покрыт слое»! древесных опилок. Оказалось,
что не воздух, а эти опилки приобретали под влиянием иррадиации антирахи-
тические свойства. Rosenheim и Webster (3) в 1926 г. испробовали на крысах
сухой остаток петролейно-эфирной вытяжки, полученной из опилок, подвергнув
их предварительно иррадиации. Всего лишь 5 мг дневной дачи такого ве-
щества оказалось вполне достаточно для предупреждения рахита у крысы.
Местонахождение витамина D
Широкое распространение в растительных тканях провитамина 1), каза-
лось, указывало, что растения—основной и главный источник самого вита-
мина В..Однако, опыты все более выясняют, что хотя витамин D и присутствует
постоянно в высших растениях, но в очень малых количествах. Большинство
растительных масел (оливковое, пальмовое, арахидное, сандальное, лимонное,
апельсиновое и т. д.)— несмотря на богатство их провитамином [Hess и Wein-
stock (1) 1925] — совершенно не содержат витамина D. Исключением является
гвоздичное и кокосовое масло [Shipley, Kinney и Me Collum (1) и (2) 1924,
Hess и Weinstock (1) 1925]. Примесь гвоздичного масла в количестве двух
процентов к пищевой даче крыс вполне предохраняла их от рахита. К сожа-
лению, опытам мешает ядовитость гвоздичного масла. Масло кокосовых орехов
содержит лишь следы витамина D, оно беднее им даже, чем сливочное масло.
Отсутствие витамина D в растительных маслах трудно объяснить тем,
что масла не в достаточной степени подвергаются непосредственному действию
ультра-фиолетовых лучей. Противоречит этому присутствие витамина D в гвоз-
дичном масле. Кроме того, относительно многих масел установлено их образо-
вание в самих хлорофиллоносных клетках. Только работами последних лет уда-
лось установить с достоверностью присутствие незначительных количеств вит. 1>
в зеленых листьях. Исследование над крысами антирахитического действия
листьев шпината привели сперва к выводу, что вит. D в них отсутствует
(Me Clendon и Shuck, 1923, Zucker и Barnett, 1923). Все же Chick и
Roscoe в 1926 г. могли подметить небольшое антирахитическое действие
на крыс летнего шпината. Затем {Chick и Roscoe 1927) они смогли точно
установить присутствие вит. D в листьях шпината опытами над кроликами.
Оно обнаружилось лишь тогда, когда до 25% пищевой дачи кроликов соста-
вляли листья шпината. Крысы не соглашались поедать дачу, содержащую
— 28 —
более 10% листьев шпината, а этого количества было еще недостаточно.
Зеленые части других растений'обнаруживают лишь весьма слабое антирахи-
тическое действие. Лишь два бобовых растения — люцерна и клевер—Обла-
дают заметным антирахитическим действием и сохраняют его, даже будучи вы-
сушенными [Shipley, Kinney и Me Collum.(1) 1924].
Между тем, после того как их подвергают иррадиации кварцевой лампы,
листья растений,“весьма бедных витамином D, как-то: шпината, салата,
(Lactuca), пшеницы, оказывают ясно выраженное антирахитичсское действие
на крыс. Замечательно то, что этиолированные листья, лишенные хлорофилла,
в равной степени с зелеными приобретают после иррадиации антирахитические
свойства [Т/ess и Weinstock (2) 1924, (1) 1925, Boscoe, 1927].
Следовательно, невидимому, не существует зависимости между хлоро-
фильными функциями и витамином I). Попрежнему наиболее богатыми источ-
никами деятельного вит. D являются липиды животного происхождения.
Кроме ранее известных своим антирахитическим действием рыбьих жиров
1 сливочного масла, к таким источникам надо’ныне причислить и яичный
желток [Gasparis, Schipley и Cramer 1923, Hess(V) 1923]. Уступая треско-
вому жиру, богатство желтков витамином I) и А превосходит в среднем случае
сливочное масло,' Так, присутствие в рахитическом корме крыс сливочного
масла в' количестве 5% не оказывает обычно никакого целебного дей-
ствия. За несколько лет опытов; лишь в одном случае образчик сливочного
масла оказался исключительно богатым вит. D, и процентное содержание
масла в антирахитической даче пришлось понизить до 1%—2% (Jlfc Collum,
Simmonds, Becker и Shipley 1925 и 1926). Между тем примесь куриного
желтка к рахитической даче крыс в количестве 5% вполне обеспечивает их
от рахита. Явное действие оказывается уже от 2% желтка (Hart, Steenbock,
Lepkovsky, Kletzien, Halpin и Johnson, 1925). Прибавление к рахитической
ищевой даче 2% яичного желтка кур, пасущихся; на траве, вполне предо-
храняет крыс от рахита (Bethke, Kennard, Sassaman, 1927) х), носодержание
вит. D в яичном? желтке -и в особенности в сливочном масле подвержено вели-
чайшим колебаниям, в зависимости от освещения и корма кур и коров. Если
кур освещать кварцевой лампой, богатство вит. D желтков возрастает от 2
до 5 раз (Hart и проч. 1925). Желток кур, пасущихся на траве, в 10 раз
богаче вит. I), чем' кур, которых содержат в закрытом помещении и не
получающих зелени. Кормление кур тресковым жиром повышает содержа-
ние [вит. D в желтках, но в меньшей степени, чем соединенное действие
солнечного света и зеленого корма (Bethke и проч. 1927). С еще большей
очевидностью проявляется зависимость между освещением коров и содержанием
вит. дО в сливочном масле. Коровы, содержащиеся в стойлах, даже получая
в изобилии зеленый корм, дают масло, почти лишенное вит. D. Между тем
коровы на сухом корму, под влиянием солнечного освещения, дают ;мавло,
богатое вит. I): но наиболее богатое вит. D масло получается от коров, когда
Joum. Biol. Chem. 1927.
— 2'.» —
они освещаются солнцем и получают зеленый корм [Chanonn, Drummond,
Coward, Golding, Mac Kintosh и Zilva, 1923 и 1924, Luce, 1924;
Chick и Roscog (2) 1926]. Согласно Lesne и Vagliano (1924), масло коровы,
совершенно лишеннее антирахитических свойств, приобрело их после того, как
к корму коровы начали ежедневно прибавлять вытяжку, полученною из 500 г
трескового жира. Подобное же наблюдали и Golding, Soames и Zilva 1936 г.
Они отметили, что добавление трескового жира к корму коровы ведет к понижен-
нмю процентного содержания жировых веществ молока. Освещение козы и жен-
щины ультра-фиолетовыми лучами ведет к чрезвычайному повышению вит. *
в козьем и женском молоке [Steenbock, Hart, Hoppert и Black, 1925, Hess,
Weinstock и Sherman (3) 1926]. Итак, условия, которые влияют на содержа-
ние вит. I), в яичном желтке и в молоке различных животных, вполне соот-
вотстуют тому, что мы знали о витамине D и его провитамине.
Главнейшее из этих условий — наличность освещения животного ультра-
фиолетовыми лучами солнца или кварцевой лампы, что непосредственно ведет
к образованию витамина D в его тканях. Второе условие — пища, содержащая
витамин и провитамин D. Жир печени млекопитающихся — богатейший источ-
ник витамина D. Менее ясны причины, обусловливающие присутствие вита-
мина D в рыбьих жирах. А между тем по своему богатству витамином 1) эти
жиры —один из лучших -естественных источников этого витамина. В среднем,
тресковый жир в 10 и более раз богаче витамином D, нежели яичный желток.
Достаточно добавить одну четверть процента общего веса пищевой дачи крысы
печеночного жира Ныо-Фаундлендской трески или селедки, Калифорнийской
сардинки или Бостонской гуз-рыбы (Lophius piscatorius'), чтобы всецело пред-
охранить животных от рахита {Bills, 1927). А между тем тому же Bills’^ уда-
лось обнаружить' в единственном случае рыбу, печеночный жир которой пре-
восходил в 15 раз по богатству витамином D жир печени Нью-Фаундлендской
трески. Отметим, что жидкое масло, которое 'накопляется в переднем желудке
некоторых морских птиц, как, например, арктической ^Fulmarus glacialis,
содержит витамин О в количестве, мало уступающем^ тресковому [жиру
[Rosenheim и Webster (2) 1927, Leigh-Clare (3) 1927]. Хотя по химиче-
скому составу это своеобразное вещество весьма отлично ’от рыбьего жира, н«
все же его богатство витамином D легко объясняется тем, что птицы питаются
рыбами. Но каким образом накапливаются в жире рыб столь большие коли-
чества витамина D? Подобно высшим растениям, зеленый планктон, невиди-
мому, очень беден витамином D. Leigh-Clare (2) в 1927 г. давал крысам] от
двух до четырех десятых грамма в день диатомовой водоросли Nitzchia clos-
terium, при чем антирахитическое действие этой водоросли ничем не прояви-
лось. Nitzchia closterium — одна из главных составных частей пищи малень-
кой рыбы Mallotus villosus, а рыбой этой почти исключительно питается
в летнее время Нью-Фаундлендская треска. В течение лета треска жиреет
и очень обогащается витаминами D и? А. Между тем {Bills, 1927) Mallotus
villosus содержит очень мало жира, и жир этот более чем в 30 раз^ беднее
витамином D жира трески. Путем наблюдений и расчетов Bills пришел
— 30 —
к выводу, что количество витамина I), которое заключалась в Mallotus villo-
sus, съеденных за лето треской, совершенно не соответствует запасу вита-
мина D в жире трески в конце лета. Ультра-фиолетовые лучи солнца всецело
поглощаются самым поверхностным слоем воды; все же можно допустить, что
эти лучи Достигают порой рыб- и вызывают образование в них витамина ]>.
Однако, попытки Bills’^. вызвать у рыб усиленное образование витамина 1>
путем освещения их кварцевой лампой не, дали результатов. Аквариум еже-
дневно подвергался пятиминутной иррадиации в течение 6-ти недель. От этой
иррадиации рыбы очень страдали, но количество витамина I) в их жире оста-
лось неизменным. Пресноводные рыбы Sctalurus pivnctdtus были подвергнуты
Bills’ом следующему опыту: рыб держали в темноте в течение нескольких
месяцев, при чем корм их состоял из промытых, не содержавших витамина 1)
телячьих мышц. Жир двух рыб, которые не только выдержали такое испыта-
ние, но притом удвоили свой вес, оказался по богатству своему витамином В
равным жиру тех же рыб перед испытанием. Следовательно, как то отме-
чает Bills, образование витамина 1) у рыб, в отличие от коз, женщин и коров,
добавим и птиц происходит, невидимому, независимо от их освещения ультра-
фиолетовыми лучами.	v
Возможность вызвать образование витамина 1), не прибегая к действию
ультра-фиолетовых лучей, показали Knudson и Moore (1929), иррадиируя
эргостерин катодными лучами. Таким способом были ими получены препараты,
которые оказывали уже заметное антирахитическое действие при наименьшей
ежедневной даче в пять десятитысячных милиграмм на крысу. Препараты эти
были всего в двадцать раз беднее витамином D, чем наиболее действенные из
тех, что были добыты, как обычно, с помощью ультра-фиолетовых лучей. Те
изменения в спектре эргостерина, которые были вызваны действием катодных
лучей, оказались подобными изменениям, которые получаются при его иррадиации
ультра-фиолетовыми лучами. Когда катодные лучи пропускали через кварцевую
пластинку, то образование витамина D в эргостерине не наблюдалось. Послед-
нее указывает, что происходило оно именно под влиянием катодных, а не
благодаря возникновению ультра-фиолетовых лучей. Наконец, согласно Morri-
son и Peaioek (1928), действие катодных лучей на эргостерин, уже предва-
рительно иррадиированный ультра-фиолетовыми лучами, уничтожает его анти-
рахитические свойства.
Наблюдение это вполне согласуется с данными об исчезновении этих
свойств при перепррадиацип эргостерина. Итак, возможно предположить, что
в природных условиях действие, ультра-фиолетовых лучей является главным,
но не единственным способом возникновения витамина D из эргостерина. Доба-
вим, что Clausen (1928) освещал ежедневно в течение десяти минут инфра-
красными лучами с длиной волны от 720 до 1120 микромикронов, крыс, кото-
рых он содержал на рахитогенном корме, от рахита их не избавил, ио достиг
— 31
лась ежедневно освещению 100-ваттной лампой «Мазда» (вольфрамовая нить
накаливания) от 8 до 24 часов в сутки. Вторая пользовалась лишь рассеянным
светом лаборатории, третья пребывала в клетках, завешанных неплотной тканью
(муселин), в рассеянном свете лаборатории.
Положительное действие освещения крыс лампой «Мазда», отразилось ив
только на общем состоянии и росте, но и на содержании зольных веществ
в костях. При чем проявлялось оно даже тогда, когда те группы крыс, которых
не освещали лампой «Мазда», получали вдобавок к корму по 2 капли треско-
вого жира на крысу. Опыты Dutcher и Honeywell привели их к выводу, что
на ход образования костного вещества влияют также и лучи с длинным перио-
дом волны, а не только ультра-фиолетовые. Вывод этот нуждается, однако,
в оговорке. Дело в том, что хотя нельзя с достаточной точностью фотографи-
ческим способом обнаружить присутствие ультра-фиолетовых лучей в радиации,
которую испускает лампа «Мазда», наличие их все же весьма вероятно. На
это указывают некоторые данные, полученные при работах с лампами, типа
весьма близкого к лампе «Мазда». При восьмичасовом и особенно при непре-
рывном освещении крыс лампой «Мазда», даже очень незначительная доля
ультра-фиолетовой энергии смогла вызвать действие, равное действию 2-х ка-
пель трескового жира.
Любопытно отметить, что, согласно Dutcher и Honeywell, все же крысы,
которых содержали в клетках, покрытых неплотной тканью, уступали в весе
и в содержании зольных веществ в костях крысам, которые пользовались рас-
сеянным светом в лаборатории. О том, что лучи с длинной волной могут ока-
зывать положительное влияние на общее состояние здоровья животного, ука-
зывали также и опыты Clausen'^, но способны ли они вполне заменить
специфическое влияние ультра-фиолетовых лучей на образование костного
вещества нельзя признать доказанным. Необходимо также иметь в виду, что
всякое благоприятное действие лучистой энергии на организм, действие, кото-
рое может отчасти способствовать и ходу образования костной ткани, вовсе не
должно исключительно быть связанным с возникновением витамина I) (активи-
рованием эргостерина). Имеются указания на то, что даже положительные
действия ультра-фиолетовых лучей нельзя всецело объяснить лишь их способ-
ностью рождать витамин J). Так Pringle (1928), отмечая многочисленные слу-
чаи исцеления рахитичных детей, которых он лечил ирридиированным эргосте-
рином, добавляет, что все же общее состояние этих детей восстанавливалось
медл.еннее, чем в тех случаях, когда он прибегал к прямой иррадиации ультра-
фиолетовыми лучами самих детей.
Новые данные о физиологическом действии витамина D
Влияние витамина ]> на усвоение кальция и фосфатов
Главная и первая ставшая известной особенность витамина 1), «кост-
ного» витамина, — его положительное влияние на образование костной ткани.
В присутствии витамина 1) кальций и фосфор пищевой дачи весьма полно
— 32 —
захватываются и используются организмом. Первые серии опытов Me Col-
Iwn’a. и Hess’a, и их сотрудников привели было к заключению, что потребность
в витамине D ограничивается лишь теми случаями, когда пища очень бедна
кальцием и фосфором, или когда количественное отношение фосфора и кальция
% пище очень далеко от оптимального. Однако, вскоре выяснилось, что, полу-
чая экспериментальную рахитическую пищевую дачу, бедную либо кальцием,
либо фосфором, некоторые крысы все же не заболевают рахитом, хотя  не
волучают витамина D. Эти отклонения объясняются тем, что еще в период,
предшествующий опыту, молодые крысы могли накопить запас витамина D
(Hess, Weinstock и Tolstoi, 1923). Более того, запас витамина D (и А) нв
только накапливается во время самостоятельной жизни отдельной особи, он пере-
дается по наследству по материнской линии. Особенности питания двух пред-
шествующих поколений отражаются на устойчивости по отношению к рахиту
испытуемых крыс [Korenchevsky в 1921, (1) и (2) 1922, 1923; Korenchevsky
и Carr (1) и (2) 1923; 1924].
Чтобы достичь при испытаниях на липовитамины однообразных результа-
тов, ныне прибегают (Chick, 1926; Smith и Chick, 1926) к выращиванию
ряда поколений крыс на пище, которая содержит определенное и небольшое
количество этих витаминов, например — от 1-2 процентов трескового жира.
Но, выведенные таким способом, крысы все же обладают небольшим запа-
сом витамина 1), сохраняя его. даже если их выдерживают долгий срок на
ище, совершенно лишенной этого витамина. Так печень крыс, болеющих рахи-
том, продолжает сохранять ясно выраженные антирахитические свойства.
А потому нельзя утверждать, что крысы, получающие пищу, в которой про-
центное содержание кальция и фосфора является оптимальным, и не содержа-
щую витамина D, избегают рахита вне всякого влияния витамина D. С дру-
гой стороны, если пища слишком бедна кальцием, то и избыток витамина D
ие в силах остановить декальцификацию организма, тогда как небольшое доба-
вление кальция ведет к восстановлению кальцификации. Так, в параллельных
•пытах [Sherman и Mac Leod (1), 19251 крысы, которые получали пищу,
содержавшую следы витамина В и 0,2% по сухому весу пищевой дачи каль-
ция,— теряли кальций — процентное содержание кальция в их теле достигло
в среднем 0,8%. Добавление к пищевой даче одного процента трескового жира
нисколько не отразилось на кальциевом балансе. Но повышение содержания
кальция в пище с 0,2% до 0,33% резко остановило декальцификацию, при
чем процентное содержание кальция в теле достигло 1,1%. Надо оговориться,
что содержание кальция в пищевой даче, близкое к таковому в опытах Sher-
man и Mac Leod, не ведет к рахиту, если прибегать к дозам витамина D,
превосходящим ту, которую использовали эти авторы [Chick и Roscoe (1),
1926 и др.]. Итак, оптимальное процентное содержание в пище минеральных
факторов, кальция и фосфора, понижает потребность в органическом факторе —
костном витамине D, но отнюдь не устраняет ее всецело. С другой стороны,
надо признать, что положительное влияние витамина D лишь до известного
предела уравновешивает вредные последствия неудовлетворительного процент-
— 83 —
кого содержания минеральных составных частей пищи. Отметим попутно йовоё
исследование зависимости между изменениями в пище процентного содержания
фосфора и кальция и метаболией при рахите [Karelitz и Shohl (1) и (2), 1927].
Для определения рахита и антирахитического действия доселе обычно прибе-
гали к гистологическому изучению ребер и конечностей. Метод, предложенный
Chick'mt и Roscoe (1) (1926), Chick’mt, Korenchevsky'au и Roscoe (1926),
состоит в том, что обезвоженные и обезжиренные кости после взвешивания сжи-
гаются. Затем определяют отношение A/R; А — органическое вещество кости,
оставшееся после удаления воды и жира, R— зольный остаток. Показания ме-
тода совпадают с результатами гистологических наблюдений, но более точны.
A/R вполне здоровой крысы близок к 1,5, явно рахитичной — к 0,9.
Действн-е очень больших доз витамина В
Выше было упомянуто, что Rosenheim, давая крысам дозы виатмина В’
в десять тысяч раз превышавшие нормальную, не наблюдал никаких вред-
ных последствий. Работа Hess и Sherman в 1927 г., посвященная действию
витамина В (иррадиированного холестерина) на усвоение кальция и фосфора,
казалось, подтверждала это наблюдение. Вводя крысам очень значительные дозы
иррадиированного холестерина, они установили, что повышение содержания
кальция в крови останавливается, как только оно достигло обычной для здо-
рового животного нормы.
Однако, как только Kreitmair и Moll (1928) прибегли к дозам
еще более значительным, например, к дозе, в сто тысяч раз превосходившей
достаточную для крысы (равняясь 10 мг иррадиированного эргостерина на
крысу в день), обнаружилось быстрое, резко выраженное вредное действие
огромного избытка витамина В. Все эти начальные пробы огромных доз были
кратковременны, продолжаясь Несколько дней, иногда всего сутки. Когда же пере-
шли к очень длинным многомесячным испытаниям над крысами, выяснилось (Bills
и Wirick 1930), что даже дозы, в 4000 раз превосходившие вполне достаточ-
ную, оказывают весьма вредное действие. Вредное влияние на рост и общее
состояние крыс проявлялось уже, как только доза в 1000 раз превосходила
достаточную. Выяснилось, что оптимальная доза витамина В лежит ниже этой'
величины (Bills и Wirick 1930, Brown и Shohl 1930).
Заметим, что «достаточная доза», т.-е. та доза иррадиированного эргосте-
рина, которая не только оказывала уже заметное действие, но вполне обеспе-
чивала витамином' В крысу, лишенную этого витамина (способна вылечить ее
от рахита), согласно большинству авторов равна одной десятитысячной милли-
грамма. В опытах Bills'^ и W trick's. (1930) они были определены в одну шест-
надцатитысячную миллиграмма. Необходимо оговорить, что условия иррадиации
и чистота препарата эргостерина в очень большой степени влияют на содер-
жание витамина В в отдельных образцах. Проверяя четыре различных про-
мышленных раствора иррадиированного эргостерина, я убедился, что он в двух
из них («Вигантол» Марка и «Эргорон» Рон-Пуленка) близко '^ответствовал.
Витамины.
- 34 ---
По содержанию витамина D с данными литературы, 3-й образец содержал около
должного количества витамина D, а 4-й—лишь следы.
Вредное действие очень крупных доз иррадиированного эргостерина пыта-
лись приписать нс самому витамину D, а тем примесям, которые его сопрово-
ждают {Underhill 1928), в частности, возникающим при иррадиации органи-
ческих перекисей. Но, во-первых, продолжительная иррадиация, уничтожая
витамин D, вместе с тем вполне обезвреживает эргостерин. Совершенно не
иррадиированный эргостерин, равно как переиррадиировавный, а также и под-
вергавшийся нагреванию, поглощается в больших количествах крысами, не
причиняя им вреда [Harris и Moore (1) 1928].
Любопытно, что крысы, охотно поедая пищу, которая содержит в изобилии
бездеятельные образцы эргостерина, при замене их соответственно большими
дозами деятельного эргостерина, испытывают по отношению к ней неодолимое
отвращение. Та же пища, если она содержит не слишком большую (ниже
токсической) дозу иррадиированного эргостерина, охотно поглощается ими.
На то, что причиной вредного действия огромных доз иррадиированного
эргостерина, является, именно, избыток витамина D, указывает также самый
характер болезненных явлений. Выражаются они, главным образом, сильным
и неправильным известкованием различных органов и тканей. Известковые
отложения возникают в мускулах сердца и межреберных, в стенках артерий,
в печени, почках, селезенке и легких. В-мочевом пузыре появляются содер-
жащие фосфор и кальций камни. Очень обогащается фосфором и кальцием
моча, отчасти за счет уменьшения их. в кале [Kreitmair и Moll, 1928,
Harris и Moore, 1928 (1), (2) 1929, Dixon и Hoyle, 1928, Brown
и Shohl, 1930].
При сколько-нибудь продолжительных опытах проявляются также хара-
ктерное исхудание, связанное с потерей аппетита.
Так же как и потребность в витамине D, устойчивость по отношению
к большим дозам этого витамина различных пород животных чрезвычайно
различна. Представление о том дают ниже приведенные данные Kreitmair’ъ
и Moll’si (1928). Устойчивость измерялась ими продолжительностью жизни
животного, которое получало очень большую ежедневную дозу иррадиированного
эргостерина.
Порода животного	! Белая мышь		| Белая ' крыса		Г"	 | Кошка		I Собака	Морская | свинка		j Цыпленок
Ежедневная доза				1 1			1 10 mi			
иррад. эргосте-							па 1 кг			
рина В Ml . . .	1	5	2	5	5	20	жив. веса	30 .	50	50
Продолжит, жизни в днях .....	20	6	28	15	35	11	34	живет более , 50 дн.	36	живет более 50 дней
Сильно ядовитая доза иррадиированного эргостерина для взрослого чело-
века равна 10 г в день. Молодые животные более чувствительны к действию
слишком больших доз витамина D, чем взрослые. {Harris и Moore 1929).
— 36 —
О механизме физиологического действия витамина 1)
Наблюдения над влиянием на организм огромных доз иррадиированного
эргостерина лучше позволили разобраться в*самом механизме физиологического
действия витамина D. Выяснилось, что повышенное содержание кальция в крови
отнюдь не является наиболее характерным и постоянным признаком действия
таких доз {Harris и Stewart, 1930, Harris и Moore, 1929). Оказалось
также, что введение в организм огромных доз иррадиированного эргостерина
вовсе не повышает его способность задерживать в себе кальций пищевой дачи.
Имеются даже наблюдения, что их действие приводит к отрицательному балансу
по кальцию. Следовательно, в этом отношении чрезвычайно большие дозы вита-
мина D или полное его отсутствие ведут к несколько сходным последствиям
(Collazo, Rubino и Varela, 1929, Brown и Shohl, 1930).
Возможность для организма, задерживать в себе кальций, осуществление
положительного баланса по кальцию, зависит, главным образом, от содержания
в пище кальция и фосфора в достаточном количестве.
Если основной причиной вредного действия огромных доз витамина 1)
является то понижение баланса по кальцию, которое они вызывают, то казалось бы
возможно бороться с этим явлением, изменяя в пище содержание кальция
и фосфора. Однако, добавление в пищевой смеси крыс, которые получали 40 тысяч
доз иррадиированного. эргостерина, 3 проц, углекислого кальция, не улучшило,
а ухудшило их положение, чрезвычайно ускорив гибель. Прибавление 3 проц.
Ка2Н1’04 имело положительное влияние, но весьма незначительное (Bills и Wirick,
1930). Те же долгие и тщательные опыты Bills’^ и Wirick'a показали, что,
когда доза иррадиированного эргостерина не чрезмерно велика, такие же
добавления извести или фосфора никак не отражаются на росте и здоровье
крыс. Эти новые данные подтверждают, что когда потребность в витамине D
получает правильное удовлетворение, наличие вполне определенного отношения
между количествами извести и фосфора пищевой дачи не является особо суще-
ственным. Любопытно, что как и при полном отсутствии витамина D, так
и при введении его в чрезмерных дозах, особо вредно отражается количествен-
ное значительное преобладание в пищевой даче кальция над фосфором.
Возвращаясь к вопросу о влиянии чрезмерных доз витамина D на баланс
по кальцию, укажем, что когда такие дозы дают лишенным витамина D
рахитичным крысам, то их отрицательный баланс по кальцию несколько улуч-
шается, хотя все же остается ниже нормального (Brown и Shohl, 1930).
Наблюдение это подтверждает, что трудно связать особенности действия чрез-
мерных доз витамина D с уменьшением- способности организма задерживать
кальций.
Вообще все более выясняется, что не во влиянии на кальциевый баланс
и на отношение в тканях кальция к фосфору обнаруживаются характерные
особенности физиологического действия витамина D. Согласно Brown'у и ShohVwi
(1930) проявляются они, главным образом, растворением и отложением солей,
которые содержатся в костях. Зольное содержимое костей зависит от такой двой-
з*
— 36 —
ственной деятельности витамина D. Витамин D управляет кальцификацией
скелета. Как видим, определение это совпадает с тем, которое дал в 1922 году
витамину D (костному витамину) Мс. Collum, при открытии им этого нач'ала.
Существует стремление ставит^ в связь механизм действия витаминов с дей-
ствием желез внутренней секреции. Известно, что удаление щитовидных и около-
щитовидных желез отражается понижением содержания кальция в крови. 'Однако,
исследования Demotes. и Christ’s (1929), подтвержденные Jones Rapoport'ом и
Hodes’oa (1930), показали, что, несмотря на отсутствие этих желез, содержание
кальция в крови оперированных собак повышалось выше нормального уровня
под влиянием крупных доз иррадиированного эргостерина. Вместе с тем, те
резкие болезненные явления, которые влечет за собой удаление этих желез, тета-
ния, исхудание и быстрая., гибель животного, отсрочивались или совершенно
предупреждались. Следовательно, действие витамина D не зависит от деятель-
ности щито- и околощитовидных желез и его нельзя приписать возбуждаю-
щему влиянию, которое оказывает этот витамин на выделение ими гормонов. -
Влияние витамина 1) на рост
Первое время после открытия особого антирахитического витамина — D,
его физиологическое влияние ограничивали исключительно положительным воз-
действием на образование костной ткани и связанное с ним правильное усвое-
ние кальция и фосфора. Единственным липовитамином, способным содейство-
вать росту, признавался витамин А, он же антиксерофтальмический фактор.
Ныне все более выясняется, что витамин D оказывает самостоятельное влияние
на рост (прибавку веса), и притом не только в меньшей, а пожалуй в боль-
шей степени, чем витамин A. Steenbock и Nelson (1923), подвергнув^ опытной
проверке данные Ните (1922) и Goldblatt's, и Soames’s (1922), убедились
в том, что крысы, получающие пищу, лишенную витамина А, и рост которых
остановился, начинают вновь расти, если им давать гретый тресковый жир,
т.-е. жир, лишенный витамина А и содержащий лишь витамин В, или осве-
щать их кварцевой лампой. Возможность такого действия на рост витамина D
объяснялась ими тем, что в данном случае крысы все же обладали еще неболь-
шим запасом витамина А, так как ни ксерофтальмия, ни заболевание дыхатель-
ных путей — верные признаки отсутствия витамина А — не наблюдались. Дан-
ные эти привели их к выводу, что рост зависит от одновременного действия
обоих витаминов А и D. Витамин А иррадиацией не создается, он безусловно
является фактором отдельным от витамина D; для того, чтобы влияние вита-
мина А на рост проявилось, требуется наличие витамина D. Такое заключение
подтвердили Steenbock и Black (1924), Sherman и Munsell (1925), Gold-
blatt и Moritz (1926), Sherman и Hessler (1927). Но одновременно выясни-
лось явно преобладающее влияние на рост витамина D. Некоторое указание на
то, что даже при избытке витамина А витамин D (иррадиация ультра-фиолето-
выми лучами) поощряет рост, можно вывести из данных v. Euler’s, W edell’я.
и Erikson’s (1925). Согласно Goldblatt’s и Moritz's (1926), молодые крысы,
лишенные витамина А, но получающие витамин D, продолжают в течение
— 37 —
4-х недель увеличиваться в весе, затем прирост веса останавливается, и даль-
нейший прирост действием одного витамина D не может быть вызван. Однако,
данные Steenbock’a и Coward’s, в 1927 г. свидетельствуют, что даже крысы,
которые проявляют явные признаки (ирерофтальмия, заболевания легочных
путей) полного отсутствия витамина’ А/могут продолжать увеличиваться в весе,
если витамин D обеспечен в избытке. Заметим, что ксерофтальмия и заболева-
ния легочных путей иногда лишь немногим предшествуют быстрой гибели
крысы, и, следовательно, в этих случаях мы имеем примеры как бы совершенно
самостоятельного влияния витамина D на рост. Собственные мои наблюдения
над морскими свинками, которые были лишены витамина А и обеспечены вита-
мином D, показали, что еще за три дня до гибели от воспаления легких, три
молодых свинки продолжали, хотя и незначительно, увеличиваться в весе. Но
все *же, согласно совпадающим наблюдениям всех авторов над крысами, надо
признать, что внесение витамина А в пищевую дачу, которая была лишена
этого витамина и богато снабжена витамином D, всегда ведет к значительно
более быстрому увеличению веса животных. Самостоятельным влиянием на
рост обладают оба витамина D и А.
Введение витамина D в организм
Как уже было сказано, вит. D может образоваться в организме под
влиянием иррадиации кожи ультра-фиолетовыми лучами. Ежедневное освещение
крыс в течение полутора минут., кварцевой лампой уже предохраняет их
от рахита (Hess (2) 1922). Кроликов предохраняли от рахита освещением
участка их кожи, величиной около 9 кв. см, сквозь дыру, проделанную
в черном атласе, который окутывал все тело кролика. Атлас этот совершенно
не пропускал ультра-фиолетовых лучей. Участок кожи, подвергнутый ирра-
диации, был предварительно лишен волосяного покрова (Ните, Lucas и
Smith, 1924). Образование вит. D происходит в самых поверхностных слоях
кожи. То, что вит. D образуется в коже животного, которое было подвергнуто
иррадиации, показывают опыты Hess’s, (1925), Hess's и Weinstock's (2)
(1925). Авторы наблюдали явное антирахитическое ‘действие, давая крысам
по одному г телячьей кожи, которая предварительно была иррадиирована.
До иррадиации кожа антирахитических свойств не проявляла. Ультра-фиоле-
товые лучи, которые превращают провитамин в вит. D, обладают длиной волн
от 270 до 295 р-р.. Между тем лишь i-ая часть лучей, длиной волны 297 рр, про-
□О
пикала сквозь слой эпидермиса, толщиной в 0,1 мм, и только когда
толщина слоя 0,2 мм (Hasselbach, 1911). Проникновение лучей в 280 рр
сквозь слой эпидермиса 0,1 мм совершений не удалось обнаружить (Ните,
Lucas и Smith, 1927).
Если вит. D, который образуется путем прямой иррадиации животного,
поступает в организм из самых поверхностных слоев эпителия, то, следова-
тельно, путем втирания в кожу жировых веществ, предварительно иррадки-
38 —
рованных, тоже можно вводить этот витамин. Лишив волосяного покрова
небольшие участки кожи кроликов и крыс, которые были недоступны рту
животного, Ните, Lucas и Smith (1927) втирали в них иррадиированный
холестерин и достигли таким путем полного предохранения от рахита. Введение
в организм вит. D может также быть достигнуто и подкожными впрыскива-
ниями, но удача обусловливается выбором подходящего растворителя. Раствор
в оливковом масле препарата, полученного из трескового жира, прп введении
его под кожу не оказал никакого действия (Zucker и Matzner, 1924). Под-
кожные впрыскивания (Lesne и Vaglia.no, 1923), а также и в брюшину
(Soames, 1924), самого трескового жира тоже не проявляли или проявляли
лишь очень малое действие. Подкожное впрыскивание иррадиированного холе-
стерина, взвешенного в воде, оказалось зато вполне действительным (Hess,
Weinstock и Helman, 1925). Препарат, полученный из трескового жира,
оказывал полное антирахитическое действие, когда его вводили под кожу рас-
творенным в этиловом эфире. Тот же препарат был почти бездеятелен, когда
пользовались раствором в пальмовом масле (Kramer, В. Kramer, S. Shelling
и Shear, 1927).
Измерение витамина D пробами на крысах
Работы Мс СоИит’а, и его сотрудников еще в 1922 году установили
основы способа, который и поныне служит для измерения вит. путем опытов
на крысах. Юным крысам 25—30 дней от роду и весом около 50 г дают
пищу, лишенную вит. D и притом содержащую от трех до четырех раз больше
кальция, чем фосфора. Такого рода весовое отношение кальция к фосфору
в составе пищевой дачи способствует развитию рахита. Молодые крысы, полу-
чающие такую пищу, и содержащиеся вдали от прямого солнечного света,
на 35—40 день начинают испытывать затруднения в движениях задних
конечностей. К этому времени, наблюдается потеря извести в хрящах эпифизов
и метафизов, особо резко выраженная в костях голени. Добавляя к пище пре-
дельную дозу вит. D наблюдают, что после 5—6 дней в хрящах появляется
явственная черта, образованная свежим отложением известковых солей. Afc Col-
lum назвал это явление «пробой на черту» (Line test). Заметим попутно,
что не только неправильное соотношение между кальцием и фосфором пищевой
дачи, но и недостаточность ее по одному из этих элементом, способствует
развитию рахита. Добавим также, что как то впервые доказал Коренчевский
(1922) и согласно позднейшим наблюдениям его и других авторов, в теле
крыс существуют запасы вит. D. Запасы эти частично передаются матерью
потомству. А потому, для опытов по измерению вит. D выгоднее пользоваться
крысами, родители которых уже были лишены вит. D или получали его
в виде определенной минимальной дозы. Раньше, в возникновении черты
свежего отложения кальциевых солей убеждались непосредственным осмотром
костей при посмертном вскрытии крыс. Последние годы прибегают к несрав-
ненно более точному приему, подвергая живых крыс рентгенографии, устана-
вливая появление черты или ее отсутствие путем ряда снимков костей конеч-
— 39 —
ностей крыс. Покажем на примере как производят ныне измерения содержания
вит. D в различных веществах [Poulson, 1930, (2)].
Подготовительный период. Юные крысы, весом около 50 г,
получают рахитогенный корм Стеенбока и Блэка, № 2965, следующего
состава:
Грубо размельченные зерна желтой кукурузы .... 76%
Пшеничная клейковина.............................  20%
Углекислая известь..................................3%
Поваренная соль.....................................1%
Крысы охотно пожирают этот корм и хорошо развиваются. Через 3 не-
дели после взвешивания рентгенографируют сочленение левой голени всех крыс.
Если аппарат позволяет мгновенные снимки, наркоз излишен. Если выдержка
при снимках необходима, достигают 'легкой анестезии крыс помещая их в про-
сторный бокал, который содержит 2 кубика этилового эфира.
Целебный период. Крыс продолжают содержать на рахитогенном
корму, но вдобавок им дают, по партиям, различные дозы испытуемого веще-
ства. Через 6 дней их снова взвешивают и -фотографируют Х-лучами. За время
предварительного периода в голени крыс должна ясно обозначиться декальци-
фикация метафиза. По крайней мере у половины крыс полоса декальцифика-
ции между диафизом и эпифизом тибии должна достигать ширины в 4 мм,
будучи ясно обозначена у остающейся половины. Действие 6-дневного лечения
отражается заполнением этой полосы свежими отложениями кальция. Состояние
здоровья крыс должно быть удовлетворительным, так как голодание и задержка
роста могут сами по себе вызвать отложение кальциевых солей в рахитичном
метафизе. Развитие крыс совершается в 30 раз скорее человеческого, следова-
тельно срок жизни крыс в 6 дней соответствует 180 дням жизни ребенка
Если срок превышает значительно 6 дней, то становится ощутимым действие
очень ничтожных доз вит. D, которое ничем не проявится, если их давать
в течение 6 месяцев ребенку.
Очень разработанный и точный способ измерения вит. D, основанный
на рентгенографии не голеней, а лап крыс предложили Scheunert и Sehie-
blich (1929), но его применение требует особого аппарата.
Укажем наконец, грубый, но общедоступный способ измерения действия
вит. О. Для испытаний пользуются однодневными цыплятами той же породы.
После двудневной голодовки, цыплята 8 дней получают хлебную мякину
Постепенно к ней подмешивают корм	следующего состава:
Желтое просо.............90%	Костяной муки...........5%
Свежие дрожжи............5%
Цыплятам дают мелких камушков и воды вволю. Содержат их на рас-
сеянном дневном свету. Витамин D вводят, кормя цыплят комочками мякины,
пропитанной раствором, содержащим витамин. Такие же комочки мякины, но
без витамина получают контрольные цыплята,
— 40 —
Действие вит. D отражается на росте цыплят. Мерой сравнения может
служить действие какого либо хорошего продажного раствора иррадиированного
«эргостерина»., например «Вигантоль» Мерка или «Эргорон» Гон-Пуленка.
Реакции на витамин D
Имеется- любопытная реакция самого животного, которая быстро указы-
вает, обладает ли оно Нужным количеством вит. D. ZucKer и Matzner (1923)
первые показали, что pH кала крысы выше 7 (щелочной), если крыса лишена
вит. D; pH быстро падает ниже 7, становясь слабо кислым, как только вит. D
введен в организм (Jephcott и Bacharach, 1926). Основываясь на этом
наблюдении, выработали способ, позволяющий определять снабжение крысы
вит. D. Авторы эти собирали кал крыс, который- задерживался решетчатым
полом клеток и, следовательно, был без мочи. Два грамма кала растирали
в 100 куб. см воды и затем определяли pH полученного, слегка мутного
раствора. Крысы получали вызывающую рахит пищу следующего состава;
мука 85%, яичный альбумин 10%, молочнокислый кальций 2,8%, лимонно-
кислое железо 0,2%, NaCl 2%. Чтобы обеспечить вит. D, каждой крысе давали
ежедневно от 2 до 3 г свежего шпината; шпинат, как было уже сказано,
очень беден вит. D. На 10-й, 12-й день такого режима pH кала крыс был
7,3 и более. Если затем крыс освещали кварцевой лампой или кормили ирра-
диированным холестерином или оливковым маслом, pH кала- через три дня
становился 6,7 и выше 6,8 не подымался. pH крыс, которые получали непр-
радиированные холестерин или оливковое масло, продолжал оставаться щелоч-
ным. Авторы отмечают, что у крыс, лишенных вит. D, можно искусственно
вызвать кислый pH кала, вводя в пищу значительное количество физиологи-
чески-кислых солей (NH4C1) или кислот; но, при условиях нормального питания,
щелочность кала является, невидимому, быстрым признаком отсутствия вит. D.
Для обнаружения вит. D были также указаны две цветных реакции. Безсо-
нов [(1) 1924 и (1) 1925] показал, что свежий тресковый жир и свежее
сливочное масло, после нагревания при доступе воздуха свыше часа при
108° Ц, дают при прибавлении мономолибденово-фосфорно-вольфрамовой кислоты
реакцию гранатового, переходящего в коричнево-желтый, цвета. По его пред-
положению эта цветная реакция соответствовала не самому вит. D, а его
производному, получающемуся окислением вит. D при нагревании. Тресковый
жир, свыше года хранившийся в лаборатории, давал реакцию и без нагре-
вания. Свежий тресковый жир, не будучи подогретжм, ее не давал. Разно-
образные растительные масла, не содержащие вит. D, не давали этой реакции
и после подогревания. Но, если нагревание этих масел доводилось до кипения,
следовательно, температура доводилась приблизительно до 300° Ц, масла эти
тоже начинали реагировать. Shears (1926) предложил реакцию:—па смесь
перегнанного анилина —15 частей и соляной кислоты —1 часть. Эта смесь
не давала реакции с бездеятельным холестерином и вызывала желтое, пере-
ходящее в красное окрашивание с тем же холестерином после того, как он
был иррадиирован. Антирахитические препараты, выделенные из трескового
— 41
жира (Kramer, В. Kramer, S. Shelling n Shears, 1927), давали ту же
реакцию. В отличие от Безсонова, Shears считал, что реакцию дает сам
вит. D, который образуется под влиянием иррадиации в холестерине (Shears
и В. Kramer, 1926). Rosenheim Webster (1) (1926) пришли к заклю-
чению, что реакция'Shear», «йййётствует образованию органических перекисей
и не является, как и реакция Безсонова, строго специфичной для вит. D.
В отношении реакции Shears's выводы Розенгейма были дополнепы и под-
тверждены Moore и Willimott (1927). Относительно моей реакции замечу,
что она всегда указывалась не как прямая реакция на вит.-В, а реакция
производного, которое получается при нагревании Тела, содержащего этот
витамин. Во всяком случае, данные J Oder’s (1926) не позволяют объяснить
появление реакции Безсонова в гретом тресковом жире и сливочном масле
и ее отсутствие в ряде масел, не содержащих вит. D, только фактом обра-
зования органических перекисей. Прогревая тресковый жир, минеральное
и оливковое масла при условиях, близких к тем, которые применял к тем же
веществам Безсонов, Joder наблюдал в них равное образование перекисей,
а между тем положительная реакция с моно-молибденово-фосфорно-вольфрамовой
кислотой получается в этих условиях лишь с первыми двумя маслами, содер-
жащими вит. D. Работа с иррадиированным эргостерином подтвердила абсолют-
ную ценность этой реакции. Практическую ее ценность для быстрого опреде-
ления анТирахитической годности рыбьих жиров и сливочного масла, мне
кажется, трудно отрицать.
Потребность в витамине D у различных животных
Весьма ‘ вероятно, что все позвоночные нуждаются в вит. D. Но потреб-
ность эта очень различно выражена у разных видов. Объясняется это отчасти
тем, что виды, иногда довольно близкие, в- очень неравной степени обладает
способностью отлагать в теле запасы вит. D и А. Так, у домашних кур спо-
собность эта сравнительно мало выражена; а потому еще в 1921 и 1922 году
Me Collum и Hess с их сотрудниками- легко обнаружили положительное
влияние антирахитического начала (света и трескового жира) на образование
скелета кур. Bethke, Kennard и Kik (1925) кормили цыплят смесью муки,
казеина и солей, которую дополняли па 25 и более процентов свежим клеве-
ром. Половина всех цыплят содержалась в закрытом помещении и освещалась
рассеянным светом, другую половину ежедневно в течение получаса подвергали
прямому действию солнечных лучей. Уже Йа шестой неделе часть цыплят,
которые содержались в закрытом помещении, начала болеть слабостью, ног, —
те, которые получали половину дачи клевера, начали болеть на 8-й неделе.
Из всех цыплят, которые освещались солнцем, не заболел ни один. Такое
быстрое проявление того влияния, которое оказала в данном случае дополни-
тельная дача вит. D, в виде солнечного света, тем более замечательно, что
в клевере все ясе имеется небольшое количество вит. D. Между тем, другая
птица — голубь обнаруживает весьма продолжительную устойчивость по отно-
шению к отсутствию вит. D и А. Вначале такая устойчивость голубя привела
— 42
к предположению, что он и вовсе не нуждается в этих витаминах. Hoel (1924),
опровергая те заключения, которые он сам высказал перед тем, установил,
что и голубь нуждается в вит. I) и А, по исчерпание запаса этих витаминов
обнаруживается у голубя лишь после 5-месячного испытания. Помимо способ-
ности к образованию запасов, возможно, что я количественная потребность
вит. I) различна у различных видов. Собственные наблюдения указали мне
на необычно быструю — две, три недели — и резкую реакцию на отсутствие
вит. D у морской свинки. В этой отношении этот субтропический грызун,
живущий нй-поверхности земли, является полной противоположностью крысам
и мышам.
Заканчивая обзор данных о вит. D — антирахитическом витамине, —
любопытно отметить, насколько медленно проникали сведения о нем в клиническую
литературу. Так, еще в 1925 году Reyher, несмотря на полное подтверждение
многочисленными работами открытия 1921—22 года Me Collum’s, отрицает
'существование лппорастворимого впт. D, приписывая антирахитические дей-
ствия вит. В или вит. В и С, a Ulmer и Aurnhammer в 1926 году при-
соединяются к его мнению. Специальная проверка, которой Л. А. Черкес
и II. И. Литвак в 1927 году подвергли опытные данные Reyher’s, выяснили
их несостоятельность.
Глава II
Вит. А. Липорастворимый фактор роста и антиксерофталь-
мический фактор
Новые данные о получении препаратов витамина А
Усовершенствование способов выделения концентрированных препаратов
вит. А из трескового жира было главным образом достигнуто работами
Drummond's, Channoris и Coward’s (1925 и 1926) и Takahashi, Ма Катуа,
Kawakami и Kitasato (1923 и 1925). Препараты эти послужили им для
исследования химии вит. А. Получались они следующим способом: тресковый
жир омылялся спиртовыми растворами щелочей — натриевой или бариевой
и кальциевой. Повторное омыление производилось при отсутствии воздуха
и легком нагревании. Витамины А и D оставались в неомыляемой фракции.
Холестерин удалялся из этой фракции последовательным осаждением мети-
ловым спиртом, а затем дигитонином. Избыток дигитонина удалялся встряхи-
ванием .раствора препарата в этиловом эфире с водой. После удаления эфира
остаток подвергался перегонке с .перегретым паром или при пониженном
давлении (от 2-х до 4-х мм), при чем фракция, которая содержала вит. А,
переходила в отгон при температуре от 180° до 220° Ц, согласно Drum-
mond’y и при температуре от 147° Ц до 150° Ц, когда давление всего
от 2-х до 3-х сотых мм, согласно Takahashi, содержание вит. А в этих
препаратах колеблется также в зависимости от богатства ими исходного тре-
скового жира. Чтобы удовлетворить ежедневную потребность в вит. А, крысе,
весом от 60 до 100 г, требовалось 0,03 мг препарата Drummond’s или
— 43 —
0,001 мг препарата Takahashi. Полученные, аналогичным способом препараты
Poulssoriz, (1924) оказывали явное действие в дозах в 0,004 мг.
Отметим также способ выделения препаратов А из неомыляемой фракции
жира тресковой печени Shimizu^ и Haiakagama (1929). Из эфирного или
хлороформенного раствора этой фракции деятельное начало увлекается в осадок
в соединении с дезоксихолевой кислотой. Дезоксихолеат растворяется при 40° Ц
в ксплене \ а затем деятельное начало отделяется от кислотного остатка, путем
перегонки при весьма низком давлении. Полученный препренарат, называемый
«Витостерин», авторы считают чистым витамином А. Заметим однако, что
необходимая ежедневная доза этого препарата на крысу, равна 0,03—0,04 мг.
Простой способ получения препаратов вит. А из растений указан Без-
соновым [(3) (1927), (2) (1929) (1930)]; сок свежих растений, богатых
вит. А (листьев капусты, плодов помидоров), немедленно по получении смеши-
вается с раствором нейтрального уксуснокислого свинца — два объема сока
на один объем 8% раствора уксуснокислого свинца. Полученный осадок,
после промывания водой, высушивается в пустоте при 50° Ц над крепкой
серной кислотой. Затем этот осадок извлекается петролейным эфиром, при чем
хлорофилл в вытяжку не переходит. .Все эти операции производятся в отсут-
ствии света и кислорода. Простое выпаривание петролейного эфира уже дает—
особенно в том случае, когда исходным продуктом была морковь — очень кон-
центрированный препарат вит. А. От 0,02—0,03 мг этого препарата обеспе-
чивают крысе необходимую ежедневную дозу вит. А (Безсонов, 1930).
Дальнейшее очищение препарата достигается удалением бездеятельных липи-
дов—омылением и осаждением метиловым спиртом.
Наконец, исследования [R v. Euler, Н. v. Euler и HellstrGm (1928),
те же и Кагтег (1929), Н. v. Euler, Karrer и Hydbom (1929)], подтвер-
жденные Моог’ом (1929), Javillier’fM и M-elle Emerique [1930, (1), (2)
и другими] показали, что образцы кристаллического каротина (но не ли-
копина), выделенные из различных растений, обычно обладают очень сильным
действием вит. А. В некоторых случаях перекристаллизированный каротин
обоспечпвал потребное крысе количество вит. А и излечивал от ксерофтальмии
ежедневной дозой от 0,005 до 0,01 мг. Таким образом оказалось, что образцы
растительного пигмента каротина по богатству вит*. А могут почти равняться
иаилучшим, почти бесцветным препаратам, полученным из жира тресковой
печени. Ныне все более выясняется, что такой каротин, даже многократно
перекристаллизованный, удерживает в виде посторонней примеси активное
начало вит. А.
Сведения о химической природе витамина А
Изложение данных, которые позволяют судить о химических особенностях
вит. А, начнем с тех, которые были добыты исследованием препаратов, выделенных
из рыбьего жира.
1 Кенлеи: С6Н4(СНа),.
— 44 —
Справедливость утверждений, которые содержались в ранних работах
Me Collum’s и Drummond's, о том, что вит. А не содержит азота и не
является какой-либо жирной кислотой, а принадлежит к типу неомыляемых
липидов, вполне подтверждена исследованиями Takahashi и его сотрудников
(1923) и (1925), а также Drummond’s, Channon’s и Coward’s (1925).
Совпадающие данные Drummond’s, и Takahashi с полной очевидностью
выяснили, что молекула вит. А состоит исключительно из атомов С, И и 0.
В частности, исследования эти совершенно устранили предположение о присут-
ствии в молекуле вит. А иода. Препараты Drummond’s., Channon’s и Co-
ward's (1925) и (1926) были получены способом, во всем существенном
схожим с таковым Takahashi, и казалось бы более совершенным, так как
была использована сложная аппаратура при перегонке; кроме того Takahashi
ограничился одной перегонкой, а в своих опытах Drummond прибегал
к двойной.
Однако, более верный и простой способ Takahashi дал все же лучшие
результаты. На равный вес его препарат содержит значительно больше вит. А,
чем препарат Drummond’s. Drummond пытался объяснить эту разницу тем,
что исходный тресковый жир, использованный Takahashi, приблизительно
в 4 раза был богаче вит. А того жира, каким пользовался Drummond, —
но внимательное сравнение данных, полученных обоими авторами при биоло-
гическом испытании, убеждает в том, что препарат Drummond's не в 4,
а, по крайней мере, в 20 раз уступал по силе препарату Takahashi. По своей
насыщенности вит. А, препарат TahahasHi (1925) превосходил все до сих
пор полученные. Его данные с несомненпостыо доказывают, что ежедневная
доза в одну тысячную мг на крысу уже достигает вполне определенного дей-
ствия вит. А.
Drummond убедился, что его препараты являлись смесью ненасыщенных
спиртов. Па это указывало уже то, что перегонка активной фракции происхо-
дила в пределах от 180° до 120° Ц (при пониженном давлении в 2—3 мм).
Кроме того, было установлено присутствие в этой последней фракции спина-
цена — вещества, которое не обладает свойствами вит. А. Определив приблизи-
тельно содержание спинацена в этой фракции, Drummond вычислил, что за
вычетом спинацена остающаяся фракция должна обладать иодным числом 103
и ацетильным 215. Определение молекулярного веса дало 300. Такой вес
и данные элементарного анализа на углерод и водород привели Drummond’s
(1925) к формуле С20Нзв02. Этим двум последним данным сам Drummond
не придает большого значения, считая, что имел дело не с чистым веществом,
а со смесью. Вит. А, согласно Drummond's, переносит ацетилирование
и бензоилирование, но разрушается операциями, которые ведут к замещению
двойной связи — бромирование, редукция. Вопреки высказанному в литературе
предположению, что вит. А — тело, близкое к бензойному альдегиду, Drum-
mond указывает, что полученная им активная фракция не проявляла альде-
гидных свойств. Согласно Drummond’s, вит. А всего вероятнее является
ненасыщенным спиртом. Но те ненасыщенные спирты, которые встречаются
45 -
в рыбьих жирах, как олеиновый С18НзоО, селаховый С2оН4О03— вит. А не со-
держат. Не содержит его также и фитоль (JaviHier, Bauds и M-lle Ldvy-
Lajeunesse, 1925, n Drummond, и сотрудники, 1925). Оставаясь в пределах
совпадающих и точно установленных данных работ Drummond's и Takahashi,
можно было признать док'азаннымГ~что молекула вит. А состоит всецело из Н>
С и 0, обладает двойной связью и карбоксильной группой, вес еемежду 300
и 400. Опа обладает ранее установленной и вновь подтвержденной резко
выраженной способностью к окислению.
. Заметим, однако, что новые данные подтверждают, что препараты А, выде-
ленные из трескового жира, отнюдь не являются чистым витамином.
Основываясь на некоторых косвенных  указаниях, Drummond и Baker
(1929) полагают, что содержание в них витамина А менее одной десятой
общего веса. Нельзя признать за чистый витамин А кристаллический «Ви-
тастерпн», выделенный Shimizu и Katakayama- (1929) из неомыляемой
фракции жира тресковой печени осаждением с дезоксихолевой кислотой и
последующим отделением от кислотного остатка.
Анализ этого «Витастерпна« соответствует формуле С24Н44О2—следова-
тельно, молекулярный вес его 364. Он близок оксистеролям, обладает двойными
связями и легко окисляется. Биологическое его действие, однако, не соответствует
по силе тому, которое можно было бы ожидать, если бы «Витастерин» был
чистым витамина А. Ежедневная достаточная доза на крысу «Витастерина»
равняется от 0,03 — 0,05 мг. Следовательно, «Витастерин» по содержанию
витамином А не превосходит заведомо нечистых препаратов, выделенных
Drummond’oa из трескового жира и Безсоновым из, моркови.
Как выше упоминалось, еще более сильным действием А могут обладать
образцы кристаллизованного каротина. Их содержание по витамину А не только
превосходит «Витастерин», но является того ясе порядка, как наилучшие пре-
параты, полученные nZтрескового жира Takahashi.
Позволяет ли это воскресить давно отброшенное предположение о том,
что пигмент каротин С40Н58 является витамином А? В таком упрощенном виде
предположение это наталкивается на ряд неодолимых противоречий.
Как объяснить сильное действие почти бесцветных препаратов, А полу-
ченных из трескового жира? Приходится предположить, что если каротин
является витамином А, то витамином А животных жиров является какое то
другое вещество. Недавно обнаруженные факты как будто бы являлись особо
благоприятными для такого допущения. Дело в том, что в спектре животных
жиров и препаратов, из них выделенных, постоянно обнаруживают одну харак-
терную полосу поглощения • ультра-фиолетовых лучей (в 328 микромикронов),
когда вещества эти обладают действием А. При чем, чем сильнее действие А,
тем сильнее поглощение. Когда химическая обработка препаратов ведет к поту-
ханию этой полосы, параллельно исчезает и их действие А. Между тем, в спек-
тре деятельного каротина и вообще препаратов А, полученных из растений,
наличие полосы поглощения в 328 микромикронов не наблюдается. Кроме
того при одной из реакций на витамин А1 спектрографическое исследование пре-
— 46 —
ходящего синего окрашивания в присутствии SbCl3 показало, что оттенок его
различен смотря по тому, животного или растительного происхождения является
вещество—носитель витамина А.
Цветная реакция препаратов А животного происхождения, характери-
зуется полосой поглощения в области 610—630 Рч*., растительных препаратов
590 fxp.; признаки эти очень характерны. А потому, не проверяя насколько
они непосредственно связаны с действием А, Н. Ezder пытался все объяснить
путем следующей догадки.
Физиологическое действие витамина А равно присуще каротинам растений
и некоторым бесцветным гидрированным их производным, наличие которых
предполагается в животных жирах, богатых витамином А. Согласно Н. Euler’y,
физиологическое действие А оказывает не одно какое-либо вполне опреде-
ленное химическое тело, а все органические тела, которые обладают особой
группировкой атомов, например, в виде цепи этиленных групп. Проверка
«полиэнной» теории Н. Еи1ег'й вызвала ряд исследований. Большая часть
их задавалась целью выяснить, может ли чистый каротин, самый пигмент,
являться носителем физиологических свойств витамина А.
Состояли они главным образом в измерениях биологического действия
образцов каротинов, возможно тщательно очищенных рядом кристаллизаций.
Но имеются и другие пути к проверке предположения И. Fuler’a, и, вообще
говоря, к выяснению связи между каротинами и витамином А. Один из этих
путей намечен в последних работах Capper’s. и Afoor’a.
Moor (1930) и Capper (1930) занялись исследованием истинной при-
чины того, различия цветных реакций и спектрографической характеристики,
которые наблюдают между всеми веществами животного происхождения, бога-
тыми витамином А, и препаратами А, извлеченными из растений. Их остро-
умные опыты сразу же дали очень любопытные указания. Они будут приве-
дены далее, попутно с разбором вопроса о связи между каротинами п вита-
мином А. Ранее необходимо указать на те цветные реакции, которые признаны
характерными для этого витамина.
Ниже будет отмечено применение некоторых из этих реакций к количе-
ственному измерению вит. А. Синяя, быстро выцветающая реакция с крепкой
серной кислотой {Drummond и Watson, 1922, Sjorslev, 1924, Willimott,
Moore и Wokes, 1926, и другие авторы), то же с диметпл-сульфатом, с AsCI3,
трихлоруксусной кислотой, ацетил- и бензоил-хлоридами {Rosenheim и Drum-
mond, 1925 г.). Сине-фиолетовая реакция с моно-молибденово-фосфорно-вольфра-
мовой кислотой [Безсонов (1 и 2), 1924 г.]. Нестойкая фиолетов.о-пурпурная
реакция с пятиокисыо фосфора (Ееагоп, 1925, Willimott, Moore и Wokes
1926, Wokes и Willimott, 1926). Нестойкая синяя реакция с трихлоридом
сурьмы, с хлоридом олова, растворенным в хлороформе, и с оксихлоридом фос-
фора. Фиолетово-пурпурная флуоресцирующая нестойкая реакция с безводным
FeCl3, нестойкая розовая реакция с безводным А1С13 в порошке и с тетра-
хлоридом кремния {Carr и Price, 1926).
— 47 —
Об истинном значении цветных реакций на витамин А
Все эти реакции наблюдаются в растворах, которые содержат вит. А;
действия, которые обусловливают разрушение вит. А, ослабляют, а затем и
ведут к полной неспособности испытываемого тела давать эти реакции.
Многочисленные наблюдения подтвердили несомненную связь этих реак-
ций с вит. А. Лишь по отношению к трихлоруксусной кислот? выяснилось,
что цветная реакция обусловливается примесью, которая обычно сопровождает
этот реактив. Чистая трихлоруксусная кислота реакцию не вызывает (Carr
и Price, 1926).
Но в чем, по существу, состоит связь между цветными реакциями и
витамином А? Они отнюдь не являются строго специфическими; некоторые
липиды, не будучи витамином, дают весьма сходные окрашивания. Разумеется*
трудно объяснить случайно-постоянной примесью все многочисленные и разно-
образные свидетельства о совпадений указаний реакций с наличием деятельного
витамина А. Однако, с другой стороны не только нет прямых доказательств
тому, что они вызываются непосредственно самим витамином А, но есть факты,
которые явно этому противоречат. Весь вопрос тесно связан с решением загадки
о природе и происхождении вит. А. Недавние работы, приближая нас к этому
решению, бросают неожиданный свет на свячь между цветными реакциями
и вит. А. Но дабы понять значение новых фактов, надо точнее разобраться
в характере исходных данных.
О достоверности цветных реакций, как признака витамина А
Связь между цветными реакциями и наличием вит. А наблюдается при
пробах весьма разнообразных жировых веществ. Наименьшее внимание было
посвящено липидам растительного происхождения.. Подробные, количественно
проведенные проверки были выполнены почти исключительно над рыбьими
жирами, главным образом, над жиром тресковой печени [Безсонов (1924, 3)
(1929, 2) Drummond, Coward и Haudy (1925), Rosenheim и Drum-
mond (1925), Carr и Price (1926), IVillimott, Moore и Wokes (1926),
Wokes и Willimott (1927), Medical Research Cone. Com. Rep. (1928),
Nelson и Jones (1928), Norris и Lanielson (1929), Andersen и Nightin-
gale (1929) и мн. др.]. Витамин А трескового жира последовательно разрушался
либо пропусканием воздуха при нагревании, либо воздействием химических
окислителей, либо, наконец, долгим хранением тресковых жиров на воздухе
при обычной температуре. В других опытах вит. А удалялся вместе с отделе-
нием неомыляемой фракции трескового жира. Параллельно производились изме-
рения степени синей окраски и проверка на крысах содержания вит. А.
Таким же параллельным измерениям подвергались различные образцы свежих
тресковых жиров, которые весьма отличались своим содержанием по вита-
мину А.
Внимание исследователей сосредоточилось на реактиве Carr и Price —
хлороформенном растворе треххлористой сурьмы (8ЬС13). В настоящее время
•*— 48
почти исключительно применяемая большинством исследователей проба на вита-
мин А этим реактивом является наиболее чувствительной. Проверяя благо-
приятные заключения многих авторов, английский Комитет изучения дополни-
тельных факторов питания [A/ed. Res. . Council Сотт. Rep. (1928)] после
сравнения указаний этой реакции и биологических испытаний нашел, что их
совпадение ввщлне удовлетворительно, но справедливо оговорил, что строго
количественное сравнение затруднено малой точностью биологических проб.
Исключительно обстоятельное проверочное исследование разных тресковых
жиров—свежих и после хранения—привело Drummond’а. и Morton’s. (1929)
к такому же заключению. Оно вновь 'подтверждено работой Ahmad'&m Drum-
mond’s. (1930).
Такое колориметрическое измерение тресковых жиров дает хорошие резуль-
таты лишь при соблюдении ряда определенных условий—степени разбавления
испытуемого жира, времени наблюдения' и т. д. Дело в том, что при увели-
чении содержания в растворе рыбьего жира в два, три, четыре и т. д. раз,
цветная реакция не усиливается также в два, три, четыре раза. Ее возраста-
ние следует по особой кривой. Явление это обусловлено ускоряющим влиянием
некоторых жирных кислот на ход выцветания реакции [xVorr/s и Danielson
(1929)]. При испытаниях не тресковых жиров,‘а выделенной из них неомы-
ляемой фракции, густота синей окраски возрастала прямо пропорционально
концентрации препарата в растворе. Andersen и Nightingale (1929) получил»
отличные результаты, работая, исключительно над неоыыляемой фракцией раз-
личных образцов сливочного масла и маргаринов. Сотни опытов удостоверили
отличное совпадение между указаниями реакции и биологический пробой. Ряд
наблюдений был проверен независимыми параллельными опытами двух раз-
личных лабораторий.
То обстоятельство, что влияние посторонних тел может исказить смысл
реакции с треххлорпстой сурьмой, еще не исключает возможности существова-
ния постоянной связи между реакцией и витамином А. Трудно отрицать нали-
чие какого-то рода причинной зависимости между ее появлением и присутствием
витамина А. По можем ли мы сейчас утверждать, что она непосредственно
вызывается' самим витамином, являясь отражением и одной из характеристик
его химико-физической природы? Вопрос этот весьма существенен. Ведь то
обстоятельство, что синяя реакция SbCls с вит. А животных жиров (максимум
поглощения 610 ц.^) несколько отличается от сине-зеленой с вит. А расте-
ний и каротином (максимум 590 нн) служит одним из главных доказательств
в пользу существования различных витаминов А и предположения об их
принадлежности к группе каротина. Однако, косвенные указания, которые
получил Wolces [1928, (2)] путем ряда спектрографических исследований,
заставили его усомниться в том, что синяя реакция на 8ЬС13 вызывается
самим витамином. С другой стороны, наб'людалось, что и жировые веще-
ства животных, несмотря на присутствие вит. А, не всегда дают типичное
синее окрашивание с треххлористой сурьмой. Так Schmidt-Nielsen (1928)
отметил, что селедочный жир вовсе не давал этой цветной реакции. А между
- 40 —
тем, испытания на крысах обнаружили, что он содержал на г до 180
единиц А фармакопеи САСШ. иначе говоря, треть обычного для свежего
трескового жира количества-витамина А. Испытания велись согласно наставле-
нию 1926 г. фармакопеи САСШ, прп чем главный недостаток'этого наставле-
ния был устранен—а именно^рысы получали витамин D в изобилии. Тот же
автор указывает и другие случаи расхождения между указаниями • реакции
Carr и Price и действительным ’ содержанием вит. A [Schmidt-Nielsen (1928)
и (1929)]. Такого рода расхождения указывают и Bailey, Cannon и Fisher
(1928) уже относительно некоторых изменений тресковых жиров. Хотя к их
данным надо относиться с осмотрительностью, так как они в точности без
поправок п рименили наставление фармакопеи САСШ, все же нельзя, со-
гласно Drummond'y, считать их лишенными всякого значения. Тем более, что
имеется и. другое указание на то, что в некоторых случаях богатые витами-
ном А образцы трескового жира могут вовсе не давать синего окрашивания
с трехмористой сурьмой [Безсонов. 1929 (2)].
При заготовке в прок тресковой печени по способу О'. М. Миттеммана
[Mittelmawn (А925), (1927), Arnold (1928)], свежая печень немедлещю
укладывается в консервные банки и прогревается в автоклаве при 120° Ц.
Внутри запаянных банок она выделяет совершенно бесцветный жир. Приятным
вкусом и отсутствием характерного запаха он отличается от всех образцов
тресковых жиров, приготовленных любым из обычных способов. Немедленно по
вскрытии такой банки, жир этот был в отдельности испробован на треххлори-
стую сурьму, на дпметпл-сульфат (реакция Друммонда) и на моно-молибденово-
фосфорно-вольфрамовую кислоту (Б. Р.). С сурьмой никакой синей реакции
не получилось, тогда как с двумя другими реактивами синяя и фиолетовая
реакции витамина А оказались приблизительно вдвое сильнее чем те, которые
были получены прп одновременном испытании коммерческого образца треско-
вого жира. Опыт был повторен ч^ижды с тем же результатом.
Весьма любопытно, что после десятидневного хранения вскрытой банки новая
проба на треххлористую сурьму дала на этот раз характерную синюю реакцию.
Обе других тоже получились, но вместе с появлением способности давать синее
окрашивание в присутствии SbCl3, жир стал издавать обычный для тресковых жи-
ров запах,—явление, невидимому связанное с образованием ненасыщенных связей
Сходное по существу явление отметил Hawk (1929). Тресковый жир
после хранения на воздухе и свете дал синюю реакцию на SbCls сильнее, чем
начальный, свеже добытый, хотя воздух и свет действуют разрушающе на
вит. А. Оговорим, что при сколько-нибудь долгом хранении на воздухе, спо-
собность тресковых жиров давать синюю реакцию падает, и обычно, в пределах
точности биологических опытов, падение это близко совпадает с понижением
содержания в них вит. А. В подавляющем большинстве случаев, синяя реакция
на SbCl3 неомыляемых липидов животного происхождения соответствует их
содержанию по вит. А. Лишь отдельные наблюдения выдают нам, что связь
эта отнюдь не выражает прямой, непосредственной зависимости между вит. А
и реакцией.
Витамины.
4
— 50 —
Ведь если даже признать, вопреки всем данным об устойчивости вита-
мина А, что заготовка по Миттельману ведет к его полному уничтожению, то
как объяснить появление или усиление реакции после хранения жира в сопри-
косновении с воздухом? Приведем попутно еще одно указание на большую
достоверность реакций на диметил-сульфат и Б. Р., по сравнению с реакцией на
SbCI3 [Безсонов, 1929 (2)]. Препарат, выделенной из моркови, после долгого
хранения раствора на воздухе утратил действие А, как то показали опыты на
животных. Вместе с тем исчезла и его способность давать реакцию на диметил-
сульфат'и Б. Р., но с SbCI8 он продолжал давать весьма отчетливое характер-
ное сине-зеленое окрашивание. Moor, 1929 (1) окислял каротин в хлорофор-
менном растворе перекисью бензоила. Действие А было уничтожено, но способ-
ность давать реакцию па SbCI3 сохранилась. Bertram (1929) указывает, что
присутствие каротина и каротиноидов может обусловить реакцию на SbCl3
и в отсутствии действия А. Первые пробы оливкового масла на крысах и свиньях
дали неясные результаты, и оно считалось лишенным витамина А. Масло
это не дает реакцию Carr’а и Priced—но реакцию на Б. Р. оно слабо, но ясно
обнаруживает. Обстоятельство это было отмечено в свое время, как цонижающее
цениость реакции [Безсонов 1924 (1)]. Оказалось, однако, что свежее оливко-
вое масло обладает вит.. A [Margaillon (1930)] и теряет его лишь при обра-
ботке или хранении. Ряд других, еще неопубликованных наблюдений указал
мне, что двойная проба на диметил-сульфат и Б. Р. дает наиболее надежное
указание на присутствие биологически деятельного вит. А. Хотя нельзя еще
утверждать, что эти реакции непосредственно вызываются витамином А, но
ничто пока этому не противоречит. Зато по отношению к реакции Carr'а и
Price'a на треххлористую сурьму такое противоречие обнаружено рядом на-
блюдений.
Но если эта реакция не вызывается непосредственно самим витамином,
то как объяснить столь часто проявляющуюся-’Между ними зависимость? Заме-
тим, что другой спектрографический признак присутствия витамина А в жирах
животных, а именно полоса поглощения в спектре таких жиров между 280
и 360 pji с. максимумом в 328 рц, как оказалось, соответствует окси-
эргостерину [Rosenheim и Webster (1929)], телу лишенному действия А.
Тем не менее, измеряя степень поглощения лучей в характерной полосе, Mor-
ton и Meilborn (1928) и Drummond и Morton (1929) определили содержание
вит. А в ряде тресковых жиров с той же точностью, как и с помощью реакции
на 8ЬС13. Способность окси-эргостерина вызывать эту реакцию, еще не дока-
зана, но вероятна. Напомним однако, что спектр растительных вытяжек, богатых
вит. А, не содержит полосы поглощения окси-эргостерина, да и некоторые
наблюдения с тресковыми жирами нельзя истолковать постоянным присутствием
окси-эргостерина. Итак, предположение, что реакция на SbCl3 вызывается ка-
кими-то постоянными спутниками витамина А, не вполне исключено, но мало
согласовано с совокупностью известных в этой области фактов. Более вероятно
допустить, что реакция вызывается двумя компонентами: витамином А и дру-
гим сопутствующим ему липидом. Этот ко-хромоген иной в животных и в ра-
— 51 —
стельных жирах, чем и объясняется разница оттенков реакции в обоих
случаях. В животных жирах образование необходимого ко-хромогена требует
участия кислорода, почему реакция с тресковым жиром, заготовленным по
Миттельману, получается'лишь после хранения жира на воздухе.
Только что высказанное предположение носит временный характер рабо-
чей гипотезы. Ее необходимое^ подсказана также и открытием Capper’г (1930)
и Мооге’г, (1930), показавшим, что каротины превращаются внутри печени
живых крыс в тело или тела, обладающие типичными особенностями вит. А
животных. Оценить все значение этого открытия возможно, лишь разобравшись
в данных по вопросу о связи витамина А и каротина.
Витамин А и каротины
Ряд данных, выявленных Гансом Эйлер и его сотрудниками и кото-
рые были затем подтверждены другими авторами, побудили его предположить,
что самый пигмент каротин равно как и некоторые другие тела группы каро-
тиноидов, обладают; биологическими свойствами витамина А.
 Далеё' будет видно, что такое решение вопроса о химии витамина или
витаминов А наталкивается на ряд противоречий. Ныне и сам Ганс
Эйлер усомнился в его правильности-.~.Но с другой стороны, работы вызван-
ные его предположениеМгЭй^^,.Дополняя прежние указания, все более делают
очевидным су1р^си«ИЙгаё^химического родства между витамином А и кароти-
ном. Возможно, то оно объясняется тем, что каротин принимает участие
в образовании витамина А. Последние столь значительные успехи по выясне-
нию химического строения каротинов увеличивают интерес всего вопроса.
Приведем вкратце существенные сведения о химической природе каротинов.
О химии каротинов
Как известно, каротин C40HS6, оранжевый липо-пигмент моркови, присут-
ствует в зеленой ткани всех высших растений. Несколько менее распростра-
нен весьма ему близкий оранжево-красный липо-пигмент помидоров—ликопин.
Гождестгенный по элементарному составу (С40Н5в) с каротином, он несколько
отличен от него по химическому своему строению.
Каротины и ликопины весьма растворимы в хлороформе, сернистом угле-
роде, бензоле и двухлорэтилене. Растворимость в этиловом и петролейном
эфирах и в кипящем этиловом спирту ликопинов и каротинов различна, но
всегда невелика, порядка 700 и 500 мг на л. Очень мала, но тоже раз-
лична растворимость на холоду в этиловом и метиловом спиртах и ледя-
ной уксусной кислоте.
Спектр каротина (раствор 5 мг в л этилового спирта) отличается
двумя полосами поглощения в зеленом (492—478 ур.) и синем (459—446 ц-и)
[JaviUicr (1930)]. Полосы поглощения ликопина сдвинуты вправо, в сторону
волн большей длины [Ллобименко (1916)].
Замечательно, что тогда как кристаллы каротинов, выделенные из раз-
личных растений, обычно всегда обладают действием А, кристаллический лпко-
4*
— 52 —
пин лишен этого действия [Н. von Euler, Karrer и Rydbom (1929)]. При-
сутствие пигмента группы каротиноидов удалось установить и в тканях одного
сумчатого гриба [Fusarium (Giberella'), Безсонов (1914)]. Позднейшие мой
исследования показали, что этот малиново-красный пигмент близок к а-лико-
пину и весьма отличен от каротинов. Ликопиновый его характер (сдвижение
вправо полос поглощения, особенности растворимости) еще более выражен, чем
в ликопине томатов.
Из петролейного эфира каротины и ликопины легко кристаллизуются
в иглах и призмах, точная кристаллографическая характеристика коих еще
не была выяснена. Точка плавления кристаллов 176-185° Ц.
Напомним попутно, что вопреки первоначальным утверждениям выясни-
лось, что в грибах (дрожжах) нет и следов витамина А. Как будет сейчас
 показано, особенности химического строения ликопина томатов и каротина
как-бы указывают на то, что каротины произошли из ликопинов. В ходе
развития живого вещества, когда образовывался хлорофильный аппарат, каро-
тины, спутники витамина А, возникли, вероятно, как видоизменение ликопинов.
Исследования швейцарца Каррера и его сотрудников [Karrer и Bachmann
(1929) и др.] выяснили, что строение ликопина выражается следующей фор-
мулой (сокращены повторения средней части):
ликопин:
СН3 СН3
V	СН8	СН3	СН3
//	1	I	I
НС	СП-СП=СН-С=СН-СН=СН-С= [С12Н14] =сн—с
I II	II
НаС С-СН3	СП
\/.	г
сна	сна
I
с
//\
СП сн3
сн3
Ликопин, как видно, оказался всецело алифатическим телом. В отличие
от него, цепь каротина несомненно завершается на одном конце кольцеобраз-
ным соединением, вероятно, такое же имеется и на другом: '
каротин:
СН3 СН3
СН3	СН3
/' \	I	I
Н2С	С—СН=СН—С=СН—СН=СН—С=[С22Н30]
I II
Н2С с-сн3
сн2
— 53 —
Сравним строение каротина и бэта-ионона:
бэта-ионон:
СН8 СН8
\ сн
нас \z %н
сн, сн3 0
Давно отмечалось, что при окислении каротина возникает запах ириса
или фиалки [Gab. Bertrand и Poirault (1892)]. Karrer и Hefenstein (1929)
показали, что невидимому запах этот объясняется образованием ионона. Коль-
цеобразное строение концов каротина доказывается и другими данными Кар-
рера.
Как видно, каротин образовался из ликопина замыканием на концах
открытой цепи последнего. Возможно, что зоо-биологическое его значение свя-
зано с этой особенностью.
Каротин обладает 11 двойными связями [Zechmeister, von Cholnoky и
Vrabely (1928), Pummerer и Rebmann (1928)]. При замещении водо-
родом 2-х двойных связей, густота окраски понижается на 25% начальной.
Надо заместить 8 двойных связей, чтобы его совершенно обесцветить. Следо-
вательно, трудно быстро различить от истинного каротина его частично гидри-
рованное производное.	।
Уже особенности строения молекулы каротина указывают на возможность
существования многочисленных изомеров. Наличие их в природе вполне уста-
новлено, при чем оно наблюдается и в ткани того же растения (моркови, зла-
ков) [Любименко (1916)]. Любименко были намечены особенности отдель-
ных изомеров—их спектры, отличия растворимости и внешнего вида кристал-
лов. Исследование Любименко имело лишь разведочный характер.
Точной характеристики изомеров каротина, основаннбй на приложении совре-
менной физико-химической техники, пока не имеется. Каротин, равно и лико-
пин, повидимому, весьма склонны к образованию молекулярных соединений.
Willstatter и Escher (1920) установили, что бром не только замещает двойные
связи, но и присоединяется к молекуле каротина. Сернистый ангидрид (S02)
присоединяется, выделяя тепло, к каротину и ликопину, уже при обыкновенной
температуре. Возникает нестойкое молекулярное соединение в три раза более
насыщенной окраски, чем начальный пигмент (собственные неопубл, наблюде-
ния). Восстановление каротина и ликопина пропусканием сквозь его раствор
водорода, достигается лишь в присутствии губчатой платины. Зато окисляются
они легко при недолгом соприкосновении с воздухом. Авторы отмечают, что
чем чище каротин, тем лучше противостоит он окислению. Предполагают, что
в отсутствии той примеси, которая катализирует его окисление, совершенно
— 54 —
чистый каротин является стойким телом \Javillier (1930)]. Любопытно попутно
отметить, что каротин, выделенный из промерзшей моркови, отличается значи-
тельно повышенной стойкостью (собств. набл.).
Окисление каротина при хранении его на воздухе в растворе или в виде
кристаллов происходит и на свету, и в темноте, хотя в последнем случае идет
оно медленнее. Обычно отмечают, что при этом каротин обесцвечивается.
Однако, в некоторых случаях наблюдается [Безсонов 1929(2)], что при хра-
нении в темноте особым образом приготовленных растворов каротина и лико-
пина, по мере их исчезновения, образуется зелёный пигмент, мало растворимый
в петролейном эфире. Наиболее резко выражено это явление в препаратах
наименее очищенных, хотя и лишенных всяких следов хлорофила. Но еще
с более полной достоверностью удавалось его наблюдать и в растворах перекристал-
лизованного каротина, полученного из этих препаратов. Зеленый пигмент
является смесью желтого, повидимому ксантофилла (С4ОН5602), и цианово-синего.
Кратковременное позеленение тех же растворов можно наблюдать прп встря-
хивании с химическим окислителем, например, с азотной -кислотой.
Витаминное действие каротинов
Давно было замечено, что содержание каротинов в растительной ткани
близко соответствует ее богатству витамином А. Так, например, зерна белой
кукурузы лишены витамина А, тогда как он присутствует в желтой. Более
того, гибриды белой и желтой кукурузы обладают действием Ав той же мере,
в которой они наследовали окраску каротинами. Можно было предположить,
либо что образование витамина А как-то связано с каротином, либо что самый
этот пигмент является витамином А. Предположение, сходное с последним, было
впервые высказано Стенбоком [Steenbock (1919), Steenbock, Boutwell и Kent
(1919)]. Но сопровождал он его оговорками, при том даже тогда, когда ему
первому удалось установите, что перекристаллизованный и обладающий опре-
деленной точкой плавления каротин способен оказывать на крыс действие вита-
мина А. Вскоре ряд новых данных заставил и самого Стеноока и других
авторов совершенно отбросить его предположение.
Выяснилось, что в отдельных случаях соответствие между содержанием
по каротинам и витамину А вытяжек, полученных из растений, вовсе не
наблюдается. Оказалось, что желтая кукуруза, после того как ее обработкой
горячим эфиром лишили каротина, все же продолжает оказывать действие А.
Полное несоответствие- между содержанием - вит. А и каротином обнаружи-
лось в случае животных жиров, например, трескового жира. Наконец, повероч-
ные опыты на крысах Drummond'& (1919),. Drummond's. и Coward's. (1920),
Rosenheim’sn Drummond's (ISM)) Stephenson'a (1920) показали, что образцы
кристаллического каротина могут быть лишены сколько-нибудь заметного дей-
ствия А. Можно усомниться в результатах этих ранних опытов в виду несо-
вершенства техники испытаний, но такой же результат был получен и в 1925 г.
[Drummond, Shannon и Coward (1925)]. Немного ранее Coward (1923)
доказала, что в растениях образование рнт. А предшествовало появлению
— 55 —
пигментов. Ее заключение, что, несмотря на частое совпадение между богат-
ством ^кани витамином А и каротинами, оно является случайным, было затем
принято всеми. По, как уже упоминалось, в 1928, 1929 г.г. работы Н. Euler
и его сотрудников, вновь воскресили вопрос о связи каротина с вита-
мином А. Хотя недавний пример эргостерина заставил Н. Euler прибегнуть
к оговоркам, все же он и ряд исследователей за ним признали наиболее веро-
ятным, что каротин является одним из видов вит. А. Таково заключение опы-
тов Collison’s, Hume, Smedley'a, Mac Lean’s и Smith’s, (1929), согласно
которым кристаллы каротина из листьев капусты (т. пл. 178° Ц) обеспе-
чивает рост крысы ежедневной дозой 0,00 3 мг, а из шпината (т. пл
164° Ц) 0,01 мг. Moor (1929,1) проверяет действие на крыс 4-х образ-
цов кристаллического каротина (т. пл. 174° Ц) моркови, выделенных им,
Н Euler'on, Morton’oyi и Capper'ov. Несмотря на очищение многочис-
ленными, разнообразными перекристаллизациями, все эти образцы исцеляли
ксерофтальмию и восстанавливали рост крыс ежедневными дозами около одной
сотой миллиграмма. Столь же действительным оказался и каротин, выделенный
из красного пальмового масла {Moor 1929( 2)]. Moor особо отметил, что все
образцы каротина давали синюю реакцию на треххлористую сурьму с полосой
поглощения 590 р-р., тогда как тот же реактив в присутствии вит. А рыбьих
жиров, дает синюю реакцию с полосой поглощения 610 рр. Все эти данные
говорили в пользу предположения, что каротин является одним из витаминов А,
отличным от вит. А животных жиров.
* Drummond пытался его опровергнуть указанием на то, что образцы
каротина которые оказывали действие А не были чистыми. Выделенный им
каротин моркови с особо высокой точкой плавления (184,9) такого действия
не оказывал [Duliere, Morton и Drummond (1929), Drummond (1930)].
Оказалось, однако, что тот растворитель, которым пользовался Dry/mmond при
последних своих опытах—олеат этила действует разрушающе на каротин.
Возможно, что этой случа^Шой ошибкой объясняется то, что Жавилье [Javil-
lier и M-elle Emerique 1930 (1 и 2)], выделив из моркови каротин с той же
точкой плавления (185° Ц.), установили вопреки Drummond’y, что он
оказывает на крыс действие А уже в дозах от 0,03 — 0,01 мг. Попутно
заметим, что точка плавления является мало характерной постоянной в осо-
бенности для органического соединения крупного молекулярного веса.. Ее повы-
шение вовсе не указываете достаточной достоверностью, что образцы каротина
моркови, порученные Drummond’w и Javillier, чище всех прочих. Судя по
тому, что мы знаем о витамине D, примесь вит. А может составлять менее
одного процента и, следовательно, не отражаться заметным образом на опреде-
лении точки плавления деятельного каротина. Ошибка, допущенная в последних
опытах Drummond’s, и положительные результаты, полученные Javillier еще
не доказывают, что каротин с точкой плавления 185° Ц. оказывает действие
благодаря вит. А, а не благодаря примеси.
С другой стороны, трудно считать, что лишены всякого значения пред-
шествовавшие опыты самого Drum mend’s в 1925 г. и друтих авторов в 1919
— 66
и 1920 г.г., согласно которым крупные дозы (в 0,5 мг) кристаллов каротина
и в отсутствии олеата этила не оказывали никакого действия А на крыс.
В 1919, 1920 г.г. испытания еще велись без снабжения крыс вит. D, что затруд-
няло полное проявление действия А каротина. Однако, вместе с Жавилье
(1930) надо признать, что когда каротин таким действием обладает, его воз-
можно различить и при этих условиях опыта. С другой стороны, согласно
весьма доказательным данным разных авторов в том числе и Эйлера
[Euler, Karrer и Rydbom (1929)], содержание витамина А в растительных
тканях не всегда соответствует содержанию каротинов. В виде пояснительного
примера приведем результаты одного из моих недавних опытов. Из той же мор-
кови были получены два препарата А. Пробы на крысах выяснили, что при
равном действии А один препарат содержит более чем вдвое каротина, чем
другой. Как примирить эти факты с допущением, что образцы чистого каро-
тина, самого пигмента как такового, способны проявлять действие А? Казалось,
оставался единственный выход: предположить, что среди изомеров каротина
лишь некоторые обладают этим действием. Одцрко и это предположение должно
быть исключено. Оно противоречит следующим данным [Безсонов (1'930)]: из
моркови был выделен препарат А, содержавший все каротины моркови в смеси
с другими ее липидами. Ряд параллельных испытаний установил, что доза
в 0,025 мг препарата превосходила по действию А таковое 9 мг свежего,
особо проверенного трескового жира. Доза эта покрывала в большом избытке
минимальную потребность крысы в витамине А. Между тем,' общее содержание
в ней каротинов равнялось всего около 0,002 мг. Напомним, что согласно
Н. Euler'у и другим авторам, наименьшие дозы «чистого» каротина, выде-
ленного из моркови, равнялись от 0,030—0,010 мг. Если этот каротин являлся
деятельным изомером, одним из. воплощений вит. А, то непонятно, почему
смесь всех изомеров каротина моркови значительно превосходила jrt’o
по действию А. Все объясняется, если признать, что и в том и в дру-
гом случае действие А проявлялось не каротинами, а сопутствующими
липидами.
Витамин А, каротины и цветные реакции
Оставив пока в стороне вопрос о том, какова истинная зависимость между
вит. А и цветными реакциями, отметим, что последние давно указывали, что
невидимому в чистых кристаллах каротина может в разной мере содержаться
деятельная примесь. Н. Euler с удивлением отметил случай, когда равное
по весу количество кристаллов каротина дало при двух последовательных изме-
рениях реакцию Сагг’а и Рггсе’а (SbCl3) весьма разной силы (различие дости-
гало 30%). Он вовсе не является исключительным. Если последовательно
сравнивать многочисленные растворы кристаллов каротина и липидных вытя-
жек из растений, то обнаруживается, что подобные расхождения далеко не
редкое явление. Это всего легче обнаружить, прибегая к реактивам более
надежным, чем SbCl3—к диаметил-сульфату и к моно-молибденово-фосфорно-воль-
фрамовой кислоте [Безсонов 1930 и 1929 (2)]. В общем, цветные реакции,
— 57 —
как и опыты на животных, лишь указывают, что содержание каротина
в вытяжках из растений не всегда соответствует их содержанию по витамину А.
Имеется и внешний признак того, что цветные реакции растительных вытяжек
вызываются не только каротином. Выше упоминалось, что ряд реактивов—
треххлористая сурьма, диаметил-сульфат и т. д.—дают в присутствии витамина
А быстро проходящую синюю реакцию. Оттенок ее различен смотря по тому,
содержится ли витамин в растительных или живф'ных липидах.
Каротин дает реакцию того же оттенка, как и витамин А растений, но
стойкую, как то давно уже указали Rosenheim и Drummond (1925). А потому,
раствор богатопЛвитамнном каротина дает синюю реакцию, которая частью
выцветает в течение первых 2-х минут, частью же, поблекнув, сохраняется
часами. Зная ту силу окраски, которая приходится на долю известного коли-
чества каротина, можно определить избыточную окраску, которая вызывается
присутствием витамина А. Такой прием позволяет применить к определению
вит. А в присутствии каротина и те цветные реактивы, которые дают постоян-
ное, а не быстро выцветающее окрашивание, как например Б. Р. (моно-мо-
либденово-фосфорно-вольфрамовая кислота). Возможность эта очень облегчает
и уточняет определение. Получить основную данную степень окраски, которая вы-
зывается самим каротином, можно было лишь располагая пигментом без примеси
вит. А. Удостовериться в этом позволяет полное отсутствие выцветания прехо-
дящих реакций и отсутсвие действия А па животных. Лично мне лишь слу-
чайно удавалось получить такие образцы каротина [Безсонов 1929 (2)], при
чем одним из приемов очищения служила перекристаллизация из горячей
уксусной кислоты. Wolff и Overhoff (1930) утверждают, что, встряхивая
раствор каротина в петролейиом эфире с 90% этиловым спиртом, можно таким
• Путем очистить каротин от вит. А. Утверждение это нуждается в проверке,
ТО согласно данным других авторов, растворимость витамина А в петро-
лейном эфире значительно превосходит растворимость в этиловом спирту.
Условия, при которых определенное количество каротина не вызывает цветную
реакцию, необходимо указать точно, так как перемена растворителя и другие
изменения могут значительно изменить чувствительность хромолипида.
Бензоловый раствор каротинов моркови приравнивается по цвету к 2-х
'процентному водному раствору двухромовокислого калия. Полученный раствор
снова разбавляется на четверть бензолом—он содержит около 12 мг на л
каротина. Заметим, что"* насыщенность цвета растворов каротина в бен-
золе в 5 раз больше, чем в петролейиом эфире. Два куб. см бензольного рас-
твора встряхиваются либо с 4 куб. см 0,6% Б. Р., либо с 2 куб. см диме-
тил-сульфата. Если раствор каротина не содержал витамина А, синяя реакция
не наблюдается Наличие цветной реакции указывает в этом случае на при-
сутствие витамина А, при чем густота окраски позволяет измерять его отно-
сительное содержание [Безсонов 1929 (2)].
Значительно меньшую чувствительность каротина к цветным реакциям
указывают Wolff и Overhoff (1930). Они утверждают, что синее окрашивание
в присутствии SbCl3 получается лишь тогда, когда содержание каротина превышает
— 58 —
50 мг па л. Точные условия наблюдения ими не указаны. Если, как
можно полагать, они пользовались растворами каротина в петролейном
эфире с примесью спирта, то расхождение является вполне объяснимым. Итак,
наличие витамина А в животных липидах и в растительных, в смеси с каро-
тином, обычно обнаруживается сходными цветными реакциями, при чем
некоторые из этих реакций дают спектрографически несколько различные
оттенки.
Однако, природа зависимости между этими реакциями и витамином А
еще не обнаружена. Мы видели, что наиболее ходовая и изученная
реакция на треххлористую сурьму не вызывается повщцуюму самим вита-
мином A.	z ..
С другой стороны, имеется п некоторая общность цветных реакций на
холестерин и в особенности на его океппропзводные. Холестерин же, как ныне
полагают, является продуктом метаболии фитостеринов—постоянных спутников
в растениях вит. А и липохромов. Ряд указанных выше реактивов, напри-
мер, AsCI3, диметил-сульфат, хлориды ацетиловый и бензоловый, являются
также реактивами на холестерин с той разницей, что в случае холестерина
цвет реакции красный, и получается она лишь при нагревании (Rosenheim
и Drummond, 1925). Но если химически очищенный холестерин подвергнуть
осторожному окислению, то со всеми реактивами на вит. (AsCl3, SbCl3
(CH3)2SO4 и т. д.) получается типичная синяя реакция, но стойкая. Реакция
не является реакцией на оксихолестерип, реагирует какое-то неизвестное еще
производное холестерина. Небольшая разница спектра реакции, по сравнению
с спектром реакции на вит. А, все же имеется (Rosenheim, 1927).
Более поздние, но еще недостаточно определенные данные указывают,
что после осторожного окисления сгерянов можно наблюдать в присутствии
SbCl3 синее, переходящее в красное, окрашивание, т.-е. реакцию весьма сходную
с той, которая характеризует витамин А. Нестойкие тела, которые вызывают
такие реакции, точно еще не определены. Напомним, кстати, что стойкость
синей реакции понижается в присутствии некоторых жирных кислот [iVorr/s
и Danielson (1929)], а возможно и других тел. Поводимому, все реакции
могут быть вызваны окси-эргостерином, но количественно явление это еще не
было исследовано. Спектр оксиэргостерина, как уже упоминалось, характери-
зуется той же вершиной поглощения (328 р-р-), которая обычно выдает присут-
ствие вит. А в тресковых жирах, хотя это тело свойствами витамина А не
обладает [Rosenheim и Webster (1929)].
Возможно, что в природных условиях те нестойкие окси производные сте-
ринов, которые способны давать реакции, сходные с реакциями витамина А,
образуются лишь в его присутствии. Возможно также, что совершенно типич-
ные реакции получаются при одновременном наличии подобного рода тел
и витамина А. Оба предположения, не противореча фактам, дают возможность
объяснить, почему в огромном большинстве случаев цветные реакции довольно
точно измеряют наличие вит. А. Но вместе с тем, все вышесказанное свиде-
тельствует. о том, что нельзя придавать решающее значение особенностям
— 59 —
хода л спектроскопическим различиям оттенков реакций, считая их непосред-
ственным отражением химических свойств молекулы витамина А. Такая осто-
рожная оценка значения цветных реакций, особенно необходима для понимания
открытия Capper's. и Afoore’a, о котором речь следует.
О превращения каротина в витамин А внутри живого
организма
Кормя кроликов морковью Н. Euler и Rydbom (1929) заметили, что
в их печени отлагается не каротин, а какое-то бледно-желтее тело. Не пытаясь
выяснить, обладает ли это тело свойствами витамина А животных жиров, они
причислили его к каротиноидам. По началу сходные, но несравненно более
ценные результаты дали работы Moore’s. и Capper's,.
Moore (1930) содержал юных крыс на корму, лишенном витамина А,
вплоть до полного исчерпания запаса этого витамина в их теле. Затем, часть
крыс убивалась, а другая получала крупные дозы кристаллического каротина,
моркови и красного пальмового масла, Жировые вещества печени всех этихЗ
крыс были извлечены этиловым эфиром и исследованы при участии Каппера.
Этот последний уже перед тем [Capper 1930 (1)]’ установил при помощи
секторного фотометра (источник ~света—накаленная медь) и цельно-кварцевого
спектрографа	спектры липидов моркови и красного паль-
мового	Аршины поглощения 325—328 столь характер-
ной	жиров, богатых витамином А. Оказалось, что ее не
содержит также жир печени крыс, лишенных витамина А и тех, которые полу-
чали строго необходимую дозу каротина. Зато в спектре печеночного жира крыс,
поглощавших большие количества каротина, эта характерная полоса поглоще-
ния выражена была весьма резко [Moore 1930, Capper (1930 (2)].
•*<-«4$|1.есте с тем, спектры синей реакции с треххлористой сурьмой этих
последних жиров содержали вершину поглощения 610 pp, следовательно, реак-
ции характерной для вит. А животных жиров, а не каротина (вершина поглощ.
590 рр). Мур выражает в колориметрических единицах превращение каротина
в вит. А животных жиров. Приведем те из них, которые касаются четырех
крыс, получивших большие дозы кристаллического пигмента и которые
показывают перемену реакции на треххлористую сурьму.
Реакция на SbCI3.
№№ крыс
4
1	2
3 I
I
Поглощ. крысой зеле-
новато-синих единиц
(590	..........
Найдено в ее печени си-
них единиц (610 |а|а)
Разница
2 200	3 000	3 500	3 500
2 000	3 300	3 700	2 000
— 200 1+300 |+200 | — 1500
— во —
Отметим, что не менее 400 сине-зеленых единиц исчезало в теле крысы,
обеспечивая ее потребность в витамине А. Приняв это во внимание, можно
заключить, что в трех случаях из четырех сине-зеленая реакция Каротина
целиком заменялась синей реакцией А животных жиров. .
Мур особо отмечает, что минимальная доза витамина А в виде каротина
дает с SbCl8 окраску (590 р-р-), несколько более слабую чем та (610 р-р), кото-
рую вызывает минимальная доза витамина А животного жира. Он заключает
отсюда, что синяя реакция 610 н* отнюдь не могла заслонить зеленовато синюю
реакцию 590 рр. Содержание деятельного витамина А в печеночном жире тех
крыс, которые получали в избытке кристаллы каротина, морковь или пальмовое
масло, было подтверждено также и биологическими испытаниями. Наконец, факт
исчезновения в печени каротина был непосредственно установлен соответствую-
щими колориметрическими измерениями. Неизмененный каротин сохранялся
в печеночном жире лишь в ничтожных количествах. Они вызывали в некоторых
случаях бледно-желтое окрашивание в общем почти бесцветного жира, но
♦ нисколько не соответствовали силе его цветной реакции и биологического
действия.
Таким образом, наблюдалось как бы превращение внутри печени живых
крыс каротина и витамина А животных жиров. Для большей наглядности,
Moore характеризует это явление ^следующим образом:
----> витамин А
Откладывается в животных.
Почти бесцветный.
Вершина поглощен. 328 hi1 хорошо
выражена.
Ярко синяя реакция с SbCI3 с по-
лосой поглощения 610—630' pp.
< Принятие этой схемы ведет к следующим допущениям:
1)	существует единственный витамин А;
2)	этот витамин А есть так называемый витамин А животных, характе-
ризуемый полосой -поглощения 328 рр и реакцией с полосой поглощения в 610 рр;
3)	витамин А происходит из каротина, который является как бы его
провитамином.
Велико значение опытов Мооге’а, но в таком виде схема его противоречит
некоторым хорошо установленным данным. Сознавая это, Moore оговаривается
что даже в кристаллическом каротине могла содержаться небольшая деятельная
примесь. Упоминает он и новые подтверждения того факта, что различные
образцы того же каротина • могут обладать весьма различным действием А.
Если сам пигмент каротин целиком превращается в теле животного в витамин А,
, то существование таких различий становится непонятным. Смущает Мооге’а и
другое обстоятельство. Наилучшие препараты из трескового жира оказывают дей-
ствие А в дозах меньших, чем кристаллический каротин и при том, согласно
Drummond’yu Вакег'у (1929), содержание в них чистого витамина А, повиди-
к аф о т р н
Образуется в растениях.
Ярко-желтый (оранжевый).
Вершину поглощен. 328 р-н
ствует.
Зеленовато-синяя реакция с
с полосой поглощения 590
отсут-
8ЬС13
р.р.
— 61 -
мому, ниже 0,1 доли их веса. Укажем еще на одно обстоятельство, которое надо
иметь в виду для понимания результатов Moore'a. Moore настаивает лишь на
особом характере оттенка цветной реакции на каротин (полоса поглощ. 590 цр.).
Но дело в том, что рядом с собственной реакцией каротина проявляется реакция
того же оттенка, вызываемая иным телом. Составной характер и колебания
силы цветной реакции карбтина соответствуют тем различиям в действии А
разных образцов каротина, о которых напоминает Moore. Все эпгоговорки про-
тиворечат не фактическим данным, которые установили Capper и Moore, а лишь
той схеме, в которой Moore хотел их выразить. Одно из основных ее положений
то, что полоса поглощения 328 рр и синяя реакция на SbCl3—610 рр суть
непосредственные и точные признаки самого витамина А. Напомним, что полоса
поглощения 328 рр характеризует спектр окси-эргостерина и что ряд данных
противоречит существованию прямой связи между реакцией на 8ЬС13 и вита-
мином А.	»,	**
Если допустить, что витамин А лишь способствует проявлению этих
признаков, а что связаны они с образованием тел иных, чем витамин А, то
разница оттенков реакции получает иной смысл чем тот, который ей придал
Moore. В связи с каротинами или в печеночном жиру, в Присутствии различных
липидов, тот же витамин А может с 8ЬС13 способствовать появлению реакции
различного оттенка. Он может также, не вызывая в первом случае образования
сколько нибудь значительных количеств окси-эргостерина, способствовать тако-
вому во втором. Предположение это в некоторой мере сглаживает противоречие
между ранее добытыми данными'll открытием Moore. Но как объяснить, что
весь каротин—нс только его примесь, но и бездеятельный пигмент—количе-
ственно превращался в печени крыс в витамины А животных жиров? Трудно
признать, что подобно превращению эргостерина в витамин D, образование
витамина А происходит исключительно за счет каротина.
Не будем вновь приводить те данные, которые этому противоречат. Но
если допустить, что витамин А возникает как следствие реакции между каро-
тином и каким либо-иным телом — например, эргостерином, то противоречия
исчезают.
Напомним, что все анализы сильных препаратов А, в том числе препа-
ратов Tak ihashi, содержание которых по витамину А в 10 раз превосходило
содержание кристаллов каротина, неизменно обнаруживали присутствие кисло-
рода. Имеются и другие косвенные указания на вероятность присутствия в мо-
лекуле витамина А этого элемента, отсутствующего в каротине. Не следует,
однако, полагать, что образование витамина А может быть сведено к осторож-
ному окислению каротина. Наиболее вероятно, что оно сопровождается распадом
молекулы последнего. Заметим наконец, что окислительно-восстановительные
реакции являются наиболее ходовыми для так называемого «живого вещества»,
а именно такая реакция и должна вести к образованию витамина А из каро-
тина.
— 62 —
Закончить обзор сведений о связи каротина и витамина А можно сле-
дующими выводами.
1.	Каротин, пигмент, как таковой, не является отдельным «раститель-
ным» витамином А.
2.	Весьма вероятно, что каротин принимает участие в образовании вита-
мина А.
3.	Каротин не является провитамином А в том же смысле, как эргосте-
рин является провитамином D, так как образование из него витамина А объяс-
нимо лишь при участии иного химического тела.
Влияние света на вит. А
Витамин D создается''и разрушается ультра-фиолетовыми лучами, при
чем достаточно иррадиировать животное, чтобы в его коже происходил синтез
вит. D. Но освещение животных не может заменить им вит. A (Steenbock
и Nelson, 1923). Внутри тканей растения вит. А начинает образовываться вне
влияния освещения, но иод влиянием освещения видимыми лучами спектра
скорость его образования чрезвычайно возрастает. Так, указание Wilson’a
(1922) на образование вит. А в этиолированных проростках подтверждено
точными опытами Coward'a (1927). Полученные в темноте ростки белой куку-
рузы и пшеницы первые два дня совершенно не содержат вит. А. Но в течение
следующих 10 дней в них образуется небольшое, но, благодаря новейшей
технике, вполне поддающееся определению количество вит. А. Между тем зерна
белой кукурузы не содержат вовсе, ai зерна пшеницы—лишь ничтожное коли-
чество вит. А. Уже ранее Coward (1923) показала, что если освещать этио-
лированные проростки подсолнуха три дня по 10 часов светом обыкновенной
электрической лампы в 32 свечи, то количество вит. А, который образуется
в этих проростках, сильно возрастает. Такое же действие оказало на этиоли-
рованные проростки.' кукурузы и пшеницы освещение кварцевой лампой
(Coward, 1927) в течение 4-х дней по 4 часа каждый раз. Действие это,
однако, как и в первом случае, отнюдь не зависело от присутствия ультра-
фиолетовых лучей,—параллельные опыты с экраном, который задерживал ультра-
фиолетовые лучи, дали тот яге результат. Видимые лучи спектра содействуют
образованию, но также в известных условиях ускоряют разрушение вит. А.
Peacocks (1926), а затем Willimott, Moore и Wokes (1926) показали, что,
если подвергать тресковый жир усиленному освещению кварцевой лампой,
вит. А, который в нем содержался, исчезает. Авторы приписали такое действие
ультра-фиолетовым лучам, хотя в их опытах никаких мер к задержанию лучей
большей длины волны не применялось, а кварцевая лампа—могучий источник
также и лучей видимой части спектра. Согласно Безсонову [(3) (1927)], раз-
рушают вит. А не только улыра-фиолетовые лучи, а и фиолетовые и синие
лучи видимой части спектра. Растворы в петролейном эфире препаратов вит. А,
полученных из капусты и помидоров, разливались в одинаковые склянки
белого и желтого стекла. Склянки находились внутри лаборатории, получая
рассеянный свет летних дней. Содержание вит. А быстро падало в белых
63 —
склянках и оставалось неизменным в желтых. Обнаружились также, что при-
рода растворителя влияет на скорость' разрушения вит. А световыми лучами.
Тресковый жир, который содержался на свету в склянках белого стекла, стойко
сохранял вит. А. Но тот же тресковый жир, в пять раз разбавленный петро-
лсйным эфиром, столь же быстро утрачивал на свету вит. А, как и растворы
в петролейиом эфир^ препаратов, полученных из растений. Следовательно, лучи
видимой части спектра ускоряют созидание, а при известных условиях и раз-
рушение вит. А.
Присутствие вит. А в веществах животного происхождения
Так же, как и вит. D, очень богат вит. А тресковый жир, в особен-
ности жир Новоземельной трески. Достаточно ежедневной дачи.от 1 до 2-х мг
свежего трескового жира, чтобы излечить от ксерофтальмии крысу, которая
получала корм, лишенный вит. A (Holmes, 1922, 1925, 1926).
Любопытно отметить, что' измерение с помощью типичной реакции на
впт. А с треххлористой сурьмой указало (Wilson, 1927).'нАчто, что
содержание4 вит. А в жире печени млекопитающих значительно превосходит
таковое хорошего трескового жира. Жир печеии человека (подразумевая
жирные вещества самой печени)- в . .некоторых случаях давал реакцию в 25
раз сильнее трескового жир&^^йнОгда она была в 10 раз слабее. Жир печени
быка, верблюда)'ОВЦЫ—в 10.12 и 8 раз сильнее трескового жира. Печень является
органом; наиболее богатым впт. А. Принимая содержание вит. А в мышцах
крысы за единицу, Sherman и Boynton (1925) определили, что на равный
вес печень ее содержит от 200 до 400 единиц, селезенка — 40 и легкие—
немного более 40.
Другим богатым источником вит. А являются яйца птиц, точнее—
шга^|Ь^^1^и, Дк)гласно Murphy и Jones'у (1924), достаточно на крысу
0,25 г ЦёЖногоЙйца кур, чтобы излечить се от ксерофтальмии, от 0,5 до
0,75 г нужны для того, чтобы восстановить нормальный рост. Как уже ука-
зывалось попутно с рассмотрением вит. D, богатство яичного желтка впт. А
всецело зависит от питания кур. Оно достигает максимума, когда куры
пасутся на зеленой траве.
Образование вит. А в растениях
Первые попытки найти связь между образованием витамина А и про-
цессами фотосинтеза и выяснить, идет ли в листе параллельно образование хло-
рофилла и вит. А, привели к противоречивым результатам. Применение более
совершенной техники (о ней будет сказано ниже) позволило выяснить эти
противоречия. Как уже было указано, вит. А не только существует, но
и может вновь образоваться в растительной ткани, лишенной хлорофилла.
Но вместе с тем- новые данные (Dye, Medlock и Crist, 1927), подтверждая
прежние (Stephenson, 1920), указывают, что содержание впт. Ав листьях
того же растения возрастает параллельно с содержанием в них хлорофилла.
— 64 -
Итак, во-первых, образование вит. А в растениях усиливается под
влиянием освещения, а во-вторых, богатство им ткани листа возрастает
параллельно богатству ее хлорофиллом. Эти данные находятся в полном
соответствии. Все же нет прямых доказательств того, что вит. А участвует
и потребляется растением в течение процессов фотосинтеза. Имеются зато
указания, что в отсутствии света содержание его в растительной ткани
остается неизменным. Так (Coward, 1925) листья, которые хранились
14 дне!Г в темноте, и осенние-листья — пожелтевшие, но еще невысохшие,
содержат столько же вит. А, сколько они содержали,- будучи зелеными и све-
жими. Вит. А неизменно выявлялся в зеленой ткани всех до сих пор
испробованных растений, но содержание его в различных растениях и даже
в листьях того же растения, испробованных в разные годы, может быть
весьма различно (Quinn, Burtis и Milner, 1927). .Согласно тем же авто-
рам, наиболее богата вит. Д зеленая ткань следующих растений. На первом
месте находится шпинат (листья); приблизительно одинаково содержание
вит. А в зеленой мякоти плода перца, в зеленых стручках бобов и в листьях
салата (Lactuca). Немногим менее его в листьях капусты. Заметим, что рост
молодых крыс, весом около 60 г, в опытах Quinn’a восстанавливался при
даче в 0,09 г и до 0,17 г зеленого перца, 0,09 и до 0.22 г стручков бобов.
В моих опытах над морскими свинками требовалось свежей капусты
от 0,75 до 1 г на каждые 100 г-веса свинки. Но, как давно известно, содер-
жание вит. А весьма велико в моркови и в зрелых плодах томата, следо-
вательно, в тканях, почти совершенно лишенных хлорофилла. Большинство
зерен зрелых, утративших хлорофилл, совершенно лишено вит. А. Так,
даже при помощи новой чувствительной биологической методики его нельзя
было обнаружить в зернах овса и в белой кукурузе. Очень незначительные
количества вит. А присутствуют в зародыше пшеницы, несколько более
богат им эндоспер*м зерен желтой кукурузы и желтого проса (Steenbock
и Coward, 1927). Как можно видеть, присутствие вит. А в зернах, лишенных
хлорофилла, носит случайный характер. Нахождение вит. А в бесхлорофиль-
ных тканях зеленых растений может быть объяснено образованием его в то
время, как хлорофилл присутствовал еще в этих тканях, или переносом его с мест
его образования в зеленой ткани. В грибах, вит. А невидимому отсутствует.
Образование вит. А в этиолированных проростках указывает, что оно
происходит вне зависимости от процессов фотосинтеза. Но если вит. А не
нуждается в фотосинтезе и хлорофилле, то зато весьма вероятно влияние
вит. А на фотосинтез и в частности па деятельность и образование хлорофилла.
Физиологические особенности действия вит. А
Так же, как и вит. D, вит. А сохраняется в организме животных;
запасы этого витамина передаются матерью потомству (Sherman и Gammack
1926; Масу, Outhouse, Long и Graham, 1927). Ранее были склонны счи-
тать наиболее характерным проявлением вит. А его влияние на рост молодых
животных. Но, как было уже'-выше указано, такое же влияние оказывает
- 6S -=
it вит. 1). Steenbock и Coward (1927) считают, Что если судить об отсут-
ствии вит. А, основываясь исключительно на остановке роста, то это может
повести к катастрофическим результатам. Как на удобный и точный признак
отсутствия вит. А, они указывают на заболевание крыс ксерофтальмией.
Ослабление жизнедеятельности тканей, которые окружают глазное яблоко,
является, повидимому, Общим признаком отсутствия вит. А для весьма раз-
личных видов млекопитающих. Так, Dahr (1925) указывает, что Индийская
болезнь глаз человека возникает вследствие отсутствия вит. А в пище. Болезнь
эта, повидимому, соответствует куриной слепоте наших местностей, — которая
вылечивается пищей, обильной жирами. Редкие случаи ксерофтальмии наблю-
дались и у детей при переходе их от питания молоком матери к питанию
мучными подболтками (Mori, 1904; Schwartz, 1925). Более многочисленны
наблюдения ксерофтальмии у детей от 2 до 5-летнего возраста (Block, 1921
и 1924, Ross, в 1921). Но, согласно Ross, ксерофтальмия у детей проявляется
лишь в ее поздних стадиях и потому не является надежным и быстрым призна-
ком авитаминоза А. У детей, которые питаются молоком, ксерофтальмия почти
никогда не наблюдается. Масу и ее сотрудницы (2) (1927) объясняют это
установленным ими богатством вит. А женского молока. Не у всех пород
ослабление глазных тканей ведет к таким характерным заболеваниям, как
ксерофтальмия крыс. Ксерофтальмия по существу является бактериальным
заражением тканей эпителия, ороговевших и ослабленных под влиянием авита-
миноза А. У белых мышей при авитаминозе А она вовсе не наблюдается
(Beard, 1926). Из всех многочисленных случаев авитаминоза А у белых
мышей, лишь в одном мне удалось подметить заболевание одного глаза, схожее
с ксерофтальмией крыс. Авитаминоз А у мышей проявляется остановкой роста
и заболеваниями дыхательных путей (Beard, 1926 и собств, неопубликов.
наблюдения). Emmett and Peacock (1923) отмечают случаи ксерофтальмии
среди цыплят, которые были подвергнуты авитаминозу А. Но в опытах
Hart’s, Steenbock’s, Lepkovsky’wo и Halpin’s, (1924) цыплята весьма
сильно страдали от авитаминоза А, а ксерофтальмией не болели. Заболевание
бронхов и легких крыс, которые были подвержены авитаминозу А, согласно
отмечается всеми авторами. Такое заболевание — типичный и постоянный при-
знак авитаминоза А. В моих опытах контрольные морские свинки, лишенные
вит. А, неизменно гибли от воспаления легких, при чем в некоторых случаях
смерть их последовала в середине периода теплых летних дней. Так же, как
и в случае ксерофтальмии, причиной заболевания дыхательных органов, ослаб-
ленных авитаминозом А, является заражение бактериями. Уже ранее было
известно, а ныне подтверждено, резкое влияние авитаминоза'В на половые
функции. Влияет на них также и авитаминоз А, вероятно, впрочем, и любой
другой авитаминоз. Масу, Outhouse, Long и Graham (1927) установили,
что авитаминоз А ведет к явлениям приапизма у крыс самцов и к задержке
в наступлении половой зрелости самок. В моих опытах белые мыши, получая
овес, смешанный с 2% трескового жира, свеже выписанного из Норвегии,
правильно размножались в течение ряда поколений. Пара этих мышей была
Витамины.	&
ев
Передана другому исследователю, проф. Ратри. Мыши эти получали у него
тот же корм, но тресковый жир поставлялся центральной -городской аптекой.
Мыши продолжали быть в отличном состоянии, но размножение остановилось.
При измерении цветными реакциями оказалось, что тресковый жир город-
ской аптеки в Зг/2 раза беднее вит. 'А норвежского жира. Понижая нагре-
ванием с пропусканием воздуха содержание вит/ А в норвежском жире,
я мог убедиться, что прибавление такого жира к овсу, не-отражаясь внешне
на здоровье мышей, вело к бесплодью. Указывают на влияние авитаминоза А
на функции воспроизведения также опыты Hoet'a, (1924) и Simonnet‘&
(1925). К сожалению, оба автора сопоставляют результаты, полученные
путем полного исключения из пищи липовитаминов и добавления к ней
необработанного трескового жира следовательно, внесения обоих вит. А и D.
Все же, в свете предыдущих данных, полученные им результаты- не лишены
интереса. Hoet (1924), опровергая данные своей собственной предыдущей
работы, удостоверился, что голуби, если их выдерживать свыше 5 месяцев на
пище, лишенной липовитаминов, так же, как и куры, хотя и менее быстро,
начинают страдать от их отсутствия. Одним из признаков авитаминоза яви-
лось вначале побледнение желтков яиц, а затем полная остановка кладки яиц
всеми тремя самками. Simonnet сравнивал относительные веса тириодальных
желез и семенников крыс, получавших нормальную пищу' в волю, голодающих
и лишенных вит. А и D. У взрослых крыс уменьшение, относительного веса
тироидальных желез и семенников веса, — отнесенного к весу всего тела — было
значительно большим при авитаминозе, чем при голодании. У очень молодых
крыс такое неравномерное падение веса при авитаминозе набюдалось лишь
по отношению к семенникам. Poulsson (1924) отмечает, что, помимо бронхита,
бронхопневмонии, поноса, подкожных нарывов — отсутствие вит. А обусловли-
вает иногда заболевание -костной ткани. Заболевание это, хотя и напоминает
внешне рахит, но все же от него отлично. Очень чувствительный признак
отсутствия в пище вит. А — появление ,в эпителии влагалища ороговевших
клеток, которые долго сохраняются [Масу, Outhouse, Long и Graham (1) и
(2), 1927]. Признак этот обычно появляется на 23-й день питания пищей,
лишенной вит. А, тогда как ксерофтальмия появляется лишь на 34-й день.
Действие очень больших доз вит. А
Замечательное исследование Takahashi, Nakamiya Kawakami и Kata-
sato (1925) показало, что до’зы препарата «Биостерина», в десять тысяч раз
превосходящие минимальную, оказывают на крыс резко выраженное вреднее
действие, а в сто тысяч раз, смертельное.
Напомним, что минимальная ежедневная доза «Биостерина» на крысу
еще оказавшая определенное действие А, равнялась одной тысячной мг и, сле-
довательно, вредная и смертельная дозы равнялись десяти и ста мг. Надо
особо отметить, что недавние работы е иррадиированным эргостерином указали
на существование отношения точно такого же порядка между минимальной
и чрезмерными дозами витамина.
— 67 —
Открытие японских ученых было встречено в свое время с недоверием.
Деселе косвенным и притом мало определенным подтверждением этого откры-
тия могут служить лишь указания Agduhr (1926') и Schmidt-Nielsen (1929)
на то, что очень крупные дозы витамина А, даваемого в виде трескового жира,
менее действительны, чем более умеренные. Долгое невнимание, проявленное
к доказательным опытам Takhashi, объясняется критикой Drummond’s.
Последний, пользуясь своими собственными препаратами, не мог установить
того токсического действия, которое наблюдал Takahashi. Напомним однако,
что на равный вес препарат Takahashi приблизительно в 20 раз содержал
больше витамина А, чем препарат Drummond's, чем вероятно и объясняется
расхождение результатов обоих авторов.
Когда Takahashi и его сотрудники давали крысам, получавшим мини-
мальную дозу А, дозу в 10 тысяч раз большую, то вначале здоровье и роет
животных улучшались, но быстрое улучшение сменялось рядом болезненных
признаков: паралич задних конечностей, резкое исхудание, потускнение глаз.
Пользование такими дозами препарата вело к гибели животных в срок
от 30 до 50 дней. Посмертное вскрытие удостоверило весьма характерное
жировое перерождение печени и кровоизлияния в области пищеварительных
органов и легких.	(
f
Усовершенствование биологической пробы на вит. А
Уже при начальных опытах измерения вит. А, как фактора роста,
пришлось отказаться брать за основу проявления «нормального» роста живот-
ных. Более удобной мерой признали небольшое, определенное повышение кри-
вой роста, которое достигается внесением в пищу данного количества, испы-
туемого на вит. А, вещества. Но как определить небольшое повышение кривой
роста, которое должно бьйъ принято за единицу действия вит. A? Javillier
Baude и m-lle Levy-Lajeunesse (1925) предложили определить единицу вит. А
следующим образом: на оси абсцисс откладывают время опыта в днях,
на оси ординат — прибавление веса животного в граммах. Отрезки, которые
соответствуют одному дню и одному грамму, равной длины. За единицу
вит. А принимается количество, которое обусловливает, кривую роста,
образующую угол в 30э с осью абсцисс. Приблизительно одинакова единица
биологического действия вит. А, предложенная Sherman'ом й Munsell’oM
(1927), Sherman’Mx и Hessler'ти (1927), которая принята официальной фарма-
копеей Соед. Шт. Сев, Ам. и применяется в ряде последних исследований.
Единица действия вит. А измеряется по Sherman у следующим образом:
крысы 4-х недель от роду получают пищу, лишенную вит. А, вплоть до исчер-
пания запасов вит. А в их теле, что требует около 25 дней. Затем часть
крыс оставляется на той же пище, как контрольные, а другая часть получает
вещество, испытуемое на вит. А. Доза такого вещества, которая обеспечи"
вает крысе прибавку веса в 3 г в неделю, содержит единицу вит. А.
Вычерчивая кривую такого роста в масштабах Javillier, мы получаем угол,
роста оче^ь близкий к 30*. Но весь способ Sherman’s далеко не иечерпы-
.	5*
— 68 —
вается лишь определением угла роста. Точность этого способа и других, анало-
гичных ему, обусловливается тем, что, в противоположность Javillier и его сотруд-
никам, принято во внимание влияние на рост вит. D, а также устранена
возможность индивидуальных колебаний. Последнее достигается опытами над
животными, происходящими от выводков, в течение ряда поколений полу-
чавших однообразную пищу, при чем содержание вит. А в этой пище лишь
немногим превосходило строго необходимое. Кроме того, измерению предше-
ствует период, в течение которого все животные получают пищу, лишенную
вит. А.
Один опыт Sherman’ъ и Hessler’^ (1927) очень наглядно выявляет
взаимно дополняющее влияние на рост вит. D и А. В опыте этом к основ-
ному корму крыс, лишенному вит. D и А, вит. А добавлялся в корм в виде свежей
моркови — вещества, бедного вит. D и богатого вит. А, а вит. D вводился
путем прямой иррадиации крыс.
	Источники вит. D и А	Морковь 0,3 г в неделю	Морковь 0,3 г иррадиация	Морковь 0,6 г в неделю	Морковь 0,6 г -|- иррадиация	
	Среднее ежене- дельное увели- чение веса крыс в граммах . . .	- 19	23	31	39	
Заметим, что действие вит. А на рост как бы помножается действием
вит. В на коэффициент, близкий к 1,2. Заметим также, что действие вит. D>
достигнув известного предела, заметно не увеличивается и, следовательно,
при наличии постоянного избытка вит. D действие на рост будет исключительно
проявляться под влиянием вит. А, что позволяет точно измерять этот витамин.
Введение вит. D во время самого испытания достигалось прежде непо-
средственным иррадиированием самих крыс кварцевой лампой. Способ этот
не только неудобен, но и отражается на здоровье крыс и притом на состоянии
их глаз, что может повлиять на развитие ксерофтальмии, типичного признака
отсутствия вит. A {Leigh-Glare, 1927). Более совершенный способ введения
вит. D состоит в даче крысам иррадиированного эргостерина. Удобный, ныне
широко применяемый способ состоит в иррадиации основной пищевой дачи
животных. Способ этот был впервые применен в 1925 Nelson’ou и Stewart’w
(неопубликов. данные). Steenbock и Coward (1927) с успехом пользовались
этим способом и указывают, что он также применим и тогда, когда корм
состоит из очищенных веществ. В их опытах иррадиация прогретого и очи-
щенного этиловым спиртом казеина, кукурузного крахмала и полученного из
него декстрина обогащала их вит. В. Данные, которые были приведены при
обзоре вит. D, позволяют заключить, что такая очистка еще не вела к удале-
нию провитамина D. Заметим попутно, что вит. В трудно удалить всецело из
казеина; присутствует он, повидимому, и в некоторых крахмалах. Весьма
— 69 —
распространенная склонность употреблять неправильно называемые «синтети-
ческие» пищевые дачи, в состав которых входят очищенные казеин и крахмал,
мало целесообразна. Приемы очищения, отражаясь на основных химических
и физиологических свойствах этих веществ, часто не в состоянии удалить
небольшие, но весьма физиологические активные примеси. Все же, в случае
испытаний на вит. А, пищевые дачЯ* этого типа наиболее допустимы, так
как витамин этот сравнительно легко удаляется очищениями — особенно же
2-х часовым прогреванием в сушильном шкафу при 120° Ц. Вот пример такого
испытания (Steenbock и Coward, 1927; Coward, 1927): крысята около
25-ти дней от роду весом-40—45 г получают корм следующего состава:
очищенный казеин 18 г, агар 2 г, смесь солей 4 г, сухих дрожжей 8 г, декстрини-
зованный крахмал 68 г. Состав смеси солей указан согласно Bethke, Kennard’a
и Sassaman’a (1927): NaCl —23,96 г; MgS04 • (17 Н20) — 24,6 г; Na2HP04
(12 Н2О) — 35,8 г; К2НР04— 69,6 г; Са2Н2 |Р04]2-(4-Й20)—68,8 г; молочнокислый
кальций (5Н20) —15,4 г; лимоннокислое железо (6 Н2О)—5,98 г; KJ—0,16 г.
Иррадиирование смеси производится следующим образом (Steenbock и
Coward, 1927; Coward, 1927): от 100 до 200 г смеси устилают на цинковом
листе, поверхностью в 125 кв. см, затем освещают ртутной кварцевой
(отнюдь не пирексовой) лампой в 40 V 4 А на расстоянии в 25 см в те-
чение */2 часа. После первых 15-ти минут иррадиации смесь перемешивают.
Иррадинрованная смесь сохраняет вит. D в течение многих недель.
Однако, слйшком строгое исключение жиров из пищевой дачи, влечет
дурные последствия. Среди эфиров жирных кислот имеется вещество, отсут-
ствие которого в пище отражается на здоровья животных, хотя и менее
существенно, чем авитаминоз (G. Burr и М. Burr, 1929).
Корм следующего состава позволяет их избегнуть (корм Мура,-измененный
Безсоновым, 1930): рисовый крахмал—53 Ч, -очищенный казеин—18 ч.,
арахидпое масло—14 ч., свежие> хлебные дрожжи—10 ч„ смесь солей—5 ч.,
пропускной чистой бумаги и воды вволю. Избыток витамина D обеспечивается
давая ежедневно каждой крысе каплю арахидного масла, содержащую 0,1 мг
иррадиированного эргостерина. Состав смеси солей был указан выше. Продажный
казеин очищают встряхивая его с 95° этиловым спиртом—один объем казеина
на два объема спирта. Спирт сменяют дважды. Затем извлекают казеин этило-
вым эфиром до получения бесцветной вытяжки. Удалив эфир, прогревают казеин
при 110° Ц 6 часов, располагая его тонким слоем. Если казеин был хорошо
очищен, он желтеет при прогревании.
В моих опытах я также с успехом использовал и упрощенный корм,
лишенный вит. А, заменяя смесь овсяным зерном. Опыты Steenbock’a и Со-
ward’a 1927 г. показали, что зерна овса, составляя 68% всей пищевой дачи,
еще не обнаруживают следов действия вит. А. В этом случае вит. D вводится
либо путем прямого освещения лучами солнца животных, либо часовым осве-
щением кварцевой лампой размолотых на ручной мельнице зерен овса. Как
уже указывалось, крысята, взятые в опыт, должны происходить от выводка,
который в течение трех-четырех поколений получал однообразный корм, чтобы
— 70 —
избежать индивидуальных отклонений, вызванных неравномерностью запаса
вит. А в теле животных. Корм этот часто состоит из цельного сушеного
молока. Sherman и Campbell (1924) предложили следующий состав такой
пищи: 2/з — цельное сухое молоко, х/а— пшеничное зерно и NaCb—2% от
количества пшеничного зерна. Но чтобы достичь хорошей производительности
крыс на такой пище, надо прибавлять каждый день небольшое количество све-
жей капусты а также давать кормящим матерям вволю свежего цельного
молока. Заметим, что при этих условиях трудно выполнить основное задание—
полную равномерность в снабжении вит. А. Масу, Outhouse, Long и Graham
(1) (1927) выращивают запасных крыс следующим образом: основной корм —
очищенный казеин 18, декстрин 76, агар-агар 2 и смесь солей 4 (ее состав
был указан выше). Затем каждой крысе^ежедневно дается 5 капель (100—
110 мг) свежего трескового жира, 2 капли эфирной вытяжки (40—50 мг) из
сухих зародышей пшеничного зерна и 0,4 г свежих дрожжей,— заметим, что
для обеспечения хорошего воспроизведения количество дачи дрожжей может
быть увеличено. Каждой матери дается на выкормку не более 6 крысят. Недо-
статок этого способа—сложность ухода. Хорошие результаты были мною полу-
чены при разведении белых мышей на зернах овса. К овсу ежедневно подмеши-
валось 2% свежего трескового жира. Еще лучшие результаты получаются — при
замене овса пшеничным зерном с добавкой 10% веса дрожжами. Но в виду
присутствия в пшеничном зерне вит. А, — при самом испытании корм должен
состоять не из пшеничного, а из овсяного зерна. Масу испробовала выше-
указанную ею смесь для самого испытания на вит. А — при чем тресковый
жир устранялся, и пищевая смесь иррадиировалась. Но выяснилось, что вне-
сение вытяжки из зародышей пшеницы, кроме факторов производительности
Е, вносит и вит. А, и потому эту вытяжку также пришлось исключить из
пищевой дачи во время Самого опыта. Выше было указано измерение вит. А
небольшим повышением роста животного. Steenbock и Coward (1927) нахо-
дят, что более удобным и точным признаком является начальное заболевание
крыс ксерофтальмией, при чем единицей вит. А признается то его количество,
которое излечивает ксерофтальмию и препятствует ее вторичному появлению
в течение последующих 5-ти недель.
Совпадающие данные Steenbock’s и Coward’s (1927), Bethke, Ken-
nard's, и Sassaman’s (1927) и Масу, Outhouse, Long’s и Graham’s (1)
(1927) указывают, что ксерофтальмия неизменно появляется у крысят между
30-м и 38-м днем авитаминоза А, когда крысы при начале опыта были около
25-ти дней от роду и происходили от поколений, выдержанных на корму,,
который содержал ограниченное количество вит. А.
Быстрая реакция животного на вит. А следует лишь, когда первые
признаки ксерофтальмии только что проявились. >
• Необходимо однако оговорить и неудобства, связанные с использованием
ксерофтальмии как основного признака авитоминоза А. Вырождение слизистой
оболочки в области глаза и даже эпителия, выстилающего роговицу, несомнен-
ный признак авитоминоза А. Но внешние проявления ксерофтальмии связаны
— 71 —
с развитием бактериального заболевания. Последнее выражается более или
менее резко в зависимости от разной степени иммунности отдельных крыс и
от подробностей ухода за животными.
Всего удобнее пользоваться ксерофтальмией лишь как подсобным, прове-
рочным признаком того, что данная партия крыс действительно страдает от
авитоминоза А. При чем ле только появление и излечение отдельных достаточно
ясно выраженных случаев ксерофтальмии, но и средняя кривая -роста всей
группы удостоверяет отсутствие, а также действие витамина А.
Точность биологической пробы на витамин А
Всякий, кому привелось наблюдать ясно выраженное влияние на рост
крыс ничтожной дозы в одну сотую мг каротина, поймет то восхи-
щение, которое по этому поводу высказывает Javillier. Но вряд ли справе-
дливо относить еАик необычайной точности обычного способа испытания вит.
А на крысах. Последние усовершенствования устранили возможность очень
грубых ошибок и явных противоречий. Однако в большинстве случаев, предел
точности измерения по прежнему не может быть выражен количественно.
Пытались его установить Друммонд и Мортон. Они [Drummond и Morton]
(1929) вели наблюдение над 23 партиями крыс. Партии эти были значительно
крупнее обычных, заключая от 6 до 12 животных. Друммонд • заключил,
что точность колеблется в пределах±50%. Иначе говоря, крайнее расхождение
между оценками той же дозы достигает 100% и лишь удваивая дозу, можно
наверное заметить большее действие. А. Далее мы покажем, что даже при
составе партии в 4 крысы можно при известных условиях достичь несколько
большей точности. Но ранее надобно- кратко отметить основные причины
погрешностей подобных испытаний [Sherman и Burtis (1928)], Nelson
Jones (1928), Безсонов'(1929), 2]. Одинаковая доза витамина А разно отра-
жается на росте юных крыс в зависимости от:
1.	Пола Kjyjc. Рост самок медленнее. Известно, что они откладывают
большие запасы в теле витамина A [Poulsson (1930,1) и Масу и ее сотруд-
ницы].
2.	Возраста крыс. Близость половой зрелости особо сильно отра-
жается на росте крыс.
3.	Индивидуальных различий запаса вит. А в теле от-
дельных крыс. Тщательный подбор животных лишь сглаживает, но
отнюдь не устраняет эти различия.
4.	Продол,жительности опыта. Долгие испытания дают наиболее
точные результаты, но надо принять во внимание, что кроме увеличения воз-
роста крыс, на рост их влияет понижая продолжительное пребывание на
экспериментальном корму.
5.	Состава основного корма. Его изъяны, как, например, полное
исключение жировых веществ, могут различно отражаться на росте отдельных крыс.
6.	Физиологического состояния крысы в начальный период пользования
витамином А.
— 72 —
Если юная крыса остро страдает от авитоминоза А, быстро теряя в весе,
рост ее часто не может быть восстановлен дозами витамина А, во много раз
превышающими строго необходимую. В этих случаях также весьма сильно
проявляются индивидуальные различия Лично я наблюдал случаи, когда рост
и здоровье крысят, потерявших более трети начального веса, были восстано-
влены дозами, лишь вдвое превышавшими минимальную. Некоторые из пере-
численных причин погрешностей биологической пробы, особенно трудно подда-
ются устранению. Приведем пример. Как было уже сказано, наиболее обычный
ныне способ биологического измерения вит. А состоит в пробе на исцеление.
При производстве подобных испытаний стремятся убедиться в том, что пред-
варительный период во время которого юные крысы получали только корм
лишенный вит. А исчерпал все запасы этого витамина в их теле. Как уже
упоминалось, ксерофтальмия не всегда является достаточно удобным и общим
признаком наступления авитоминоза А. Предпочитают руководствоваться оста-
новкой или падением кривой роста. Но небольшие остановки и падения этой
кривой могут ноеить случайный характер, а когда они выражены резко, то
часто доза вит.-А, превосходящая средне-необходимую, уже не может спасти
крысу от гибели. Как быть с этими, смертными случаями в отдельных партиях
при конечном вычислении результатов? Drummond прибег к следующему
приему. Он исключал из расчета тех крыс, которые погибли раньше 3 недель-
ного срока пользования витамином А. Искусственность подобного расчета
признал и сам Drwnmond. Она в известной степени объясняет малую точность
вычисленных им результатов. Укажем на другую непосредственную причину
неточности подобных измерений. Достаточно просмотреть многочисленные работы,
посвященные вопросу, чтобы убедиться, что на деле те кривые роста, которые
у различных авторов соответствуют минимальной дозе, весьма разнообразны.
Требование, чтобы такая кривая соответствовала прибавке Зев неделю или,
что приблизительно тоже, характеризовалось углом в 30° в мастшабах Javillier,
сколько нибудь точно не осуществляется. Едва ли возможно достичь точного
его выполнения, даже используя чрезвычайно крупные партии крыс. Но в таком
случае, как избавиться от субъективного характера оценок минимального
действия вит. А?
Покажем на примере, каким образом можно в значительной мере устра-
нить только что указанные затруднения. Желая произвести испытания над
5-ю партиями крыс по 4 в партии, берут для начала количество несколько
большее, например, 24 крысы. Крысы эти чистой породы, например, альбиносы
института Уайт-Стар Филадельфийского Университета. И сами они и их родители и
прародители содержались на определенном корму (см. выше). Крысы прибли-
зительно одинакового возраста от 30 до 40 дней от роду и веса от 60 до
70 г. Крысы либо одного пола, либо равное число самок и самцов. Крысы
получают корм Мура-Безсонова (см. выше). Но казеин очищается лишь эти-
ловым спиртом, чтобы в течение предварительного периода избегнуть слиш-
ком резкого авитаминоза. Весьма выгодно для точного измерения сохранить
крыс в возможно лучшем состоянии здоровья, предотвращая случайные забо-
— 73 —
левания и смертность. Размещают их в одиночных клетках с решетчатым дном,
дабы они не могли поедать кал. Когда не менее чем у половины крыс обна-
ружатся явные признаки авитоминоза А, 8-дневная остановка роста, падение
веса не менее чем на 10%, отчетливая ксерофтальмия, приступают к самому
испытанию. Удаляют 4-х лишних крыс, выбирая наиболее слабых. Четыре
наиболее сильные крысы составляют партию свидетелей. Остальных распреде-
ляют по партиям возможно ровнее. Таким образом, помимо партии свидетелей,
получается 4 партии весьма ровного по устойчивости состава. Затем, одновре-
менно приступают к сравнительному испытанию, при чем мало очищенный
казеин корма заменяется теперь очищенным. Испытание продолжается 80 дней.
Мерой сравнения служит не какой-либо угол кривой роста, а то действие на
рост, которое производит «образцовый» тресковый жир.
Условно, можно признать образцовым жир, который соответствует сле-
дующим признакам: 2 кубика 30%-го раствора такого жира в бензоле, должны
при встряхивании с 4 кубиками 0,6%-го раствора Б. Р. вызвать фиолетовую
окраску нижнего водного слоя равную той, которую дает водный раствор гид-
рохинона в 13 мг на л.
Поверочная проба. После встряхивания такого жира с 15%
раствором Б. Р. верхний жирный слой должен оставаться бесцветным в тече-
ние 4-х часов. Проба по Carr и Price. Два десятых кубика хлороформа,
содержащих четыре сотых кубика жира, добавляют к двум кубикам насыщен-
ного раствора треххлористой сурьмы в хлороформе. При измерении-, цветной
реакции с помощью колориметра Rosenheim — Shyster, ее густота после
одной минуты наблюдения выражается 6 синими единицами шкалы Лови-
бонда.
При сравнительных испытаниях крысы получают тресковый жир в ра-
створе . арахидного масла. А потому, если данный образец жира не совсем
совпадает с характеристикой «образцового», то его разбавляют соответствующим
образом и выражают содержанием в нем трескового жира в единицах «образ-
цового?. 1 мг «образцового» жира является носителем единицы действия
вит. А. Такая единица, совпадая по действию со средним значением единицы А
американской фармакопеи, несравненно точнее последней. Наконец, вместе
с Nelson и Jones (1928), надо признать, что точность измерения значительно
увеличивается, если в основу его положить действие дозы вит. А в 10 раз большей,
чем минимальная. Особенно выгодно применять этот прием работая согласно
только что изложенному способу. Минимальная доза применялась в надежде
получить всегда определенный угол роста—как общую основу сравнения изме-
рений. Этой цели она не достигает, но зато является причиной гибели
отдельных животных, а тот прирост, который она способна обеспечить, мало
отличается от прироста случайно устойчивых свидетелей.
Приведем в виде примера результаты одного из испытаний, выполненных
согласно новому способу [Безсонов (1930).] Особо отметим, что несмотря на
общность происхождения крыс (альбиносы Уайт-Отар, выводок Тиллера) и
подготовку предыдущих поколений, 4 свидетеля значительно превосходили
74 —
устойчивостью своих товарищей. Сравним попарно действия А* а) 9 мг тре-
скового жира, б) 0,025 .иг препарата А (смесь липидов моркови), в) 18 лег
трескового жира и г) 0,05 мг того же препарата. Предварительное колори-
метрическое измерение по Б. Р. указало, что дозы препарата содержали на
20% больше вит. А, чем соответственные дозы трескового жира. Результаты
испытания можно выразить сравнением прибавок среднего веса крысы каждой
партии. Прибавки эти вычислены сравнивая вес крыс в'конечный день
общего подготовительного периода и на 80 день сравнительного испытания.
Имеем: свидетели—средний прирост 25 г; а) 9 . .иг трескового жира—средн,
прирост 42 г; б) 0,025 мг препарата—средн, прирост 52 г; в) 18 мг
трескового жира—средн, прирост 58 г; г) 0,050 мг препарата—средн,
прирост 5 г. Если принять за сто среднюю прибавку веса свидетелей, то
результаты испытания могут быть выражены следующим образом:

Основные дозы		Д во йные дозы	
Характер дозы	Относит, приб. веса	Характер дозы*	Относит, приб. веса
1 Препарат X 0,025 мг	208	ПропаратА 0,050 мг	260
Тресковый жир 9 мг	168	Тресковый жир 18 мг	232
В обоих случаях—тресковой жир и препарат—удвоение дозы'повело
к очень значительному увеличению прибавки веса.
То обстоятельство, что каждая доза препарата содержала на 20% более
витамина А, чем соответственные дозы трескового жира, также явно выражено
результатами. Прибавка веса, вызванная 0,025 мг препарата, на 23% пре-
восходит ту, что вызвана дозой в 8 мг трескового жира, а 0,050 мг препа-
рата на 12% ту, что вызвана дозой в 18 мг жира. Следовательно, расхождение
в оценке той же дозы не могло превосходить 20%. Иначе говоря^ точность
определения 10%. Относительно данного опыта, результаты определенно ука-
зывают, что число единиц А в грамме препарата было не ниже 360 000
и позволяют полагать, что оно приближалось к цифре на 20% большей. Даль-
нейшее уточнение, очевидно,, требовало дополнительного опыта.
Как можно было видеть, сколько-нибудь точное измерение витамина А
пробами на крысах весьма длительно и кропотливо. Крыса отличается большой
стойкостью к авитаминозу А и исключительно развитой способностью откла-
дывать запасы витамина А в своей печени. Можно" достигнуть более точного и
вместе с тем более простого и быстрого способа измерения витамина А, при
замене крысы морской свинкой [Безсонов 1929 (2)]. Морская свинка отли-
чается исключительной чувствительностью не только к авитаминозу О, но и кА.
Г~ 1Ъ -
На равный вес ее потребность в витамине А от 4 до 5 раз превосходит
потребность крысы. Это обстоятельство уже само по себе значительно увеличивает
точность измерения. Молодых свинок можно отделять от матери на 8-ой день
от рождения, а не на 25-ый, как крыс. Такой прием еще увеличивает чув-
ствительность к авитаминозу. Лишенные витамина А столь юные свинки
гибнут обычно не позже 40-го дня испытания. Следовательно, получается
возможность основать пробу на выживаемости тех свинок, которые получают
известную дозу вит. А и быстрой поголовной гибели свидетелей. Такой способ
определения витаминного действия наиболее показателен, будучи основан на
.выявлении жизненной необходимости данного начала Необходимый свинкам
витамин С легко обеспечить дачей лимонного сока. Витамина А он не содер-
жит. Заметим наконец, что исключительная потребность свинок в витамине А
и чувствительность их к авитаминозу А облегчает задачу приготовления особо
очищенного корма и избавляет от необходимости пользоваться лишь особо
подготовленными животными. Возможность пользоваться свинками была пока-
зана [Безсонов 1929, (2)], но со времени первых опытов Stepp'd, (1911) и
Мас Colum’d, (1922) "крысы оказались принятыми как международный образец
для определения витамина А.
Закоц инерции проявляется и в области научного исследования.
Измерение вит. А цветными реакциями
Первая по времени реакция, предложецная Drummond’w для опреде-
ления вит. А — синее окрашивание трескового жира в присутствии крепкой
серной кислоты — подвержена многим случайностям и мало применима к коли-
чественным определениям в виду свойства самого реактива.
Затем была предложена реакция вит. А [Безсонов (1) 1924 (1) 1925]
на моно-молибдено-вольфрамо-фосфорную кислоту. Ныне выработан простой и
быстрый способ получения кристаллов этой кислоты и очищения их [Без-
сонов (1) 1926].
74 г вольфрамовокисл, натрия, 8 г фосфорномолибденовой кислоты и
10 кубиков ортофосфорной кислоты (уд. вес 1,75) последовательно растворяют
в перегнанной .над перманганатом /воде, дополняя водой до 250 кубиков.
С другой стороны, к 125 кубикам крепкой серной кислоты прибавляют пере-
гнанной воды, доводя до 250 кубиков (при 15° Ц). К первому раствору,
нагретому до 45° Ц, добавлять по каплям второй, в количестве 85 куб. см все
время перемешивая. После трех часов отстаивания выпадает кристаллическая
кислота. Сливают жидкость и промывают кристаллы 50 кубиками 15%-ной
серной кислоты (объемных процентов). Полученные таким способом 60 г кри-
сталлов растворяют в 50 кубиках перегнанной вод^, нагретой до 45° Ц. Затем
снова осаждают кристаллы, добавляя 18 кубиков бО^ной серной кислоты
(объемных процентов). Промывают 15%-ной сернбй кислотой. Убеждаются
в чистоте кристаллов, прибавляя % кубика насыщенного 1&дноЛ) раствора
к одному кубику водного раствора пирогаллола, крепостью приблизительно
в 0,001. Получается желто-бурое окрашивание, которое должно сохраняться
-Тв-
по крайней мере 2 часа,— затем оно переходит в фиолетовое. Кристаллы
быстро просушивают в листах шведской пропускной бумаги, взвешивают и
растворяют в 5% серной кислоте, заготовленной на воде, перегнанной над
перманганатом; хранят раствор в желтом стекле, пробки притертые или каучу-
ковые. Для краткости будем, следуя Armando Frank’у (1925), Loewy (1925)
и другим, обозначать этот реактив Б. Р. Для измерения вит. А. реакт. Б. Р.
удобно заготавливать в слабом растворе, например, в 0,6%. Избыток Б. Р.
при измерении вит. А в тресковом жире ведет к дополнительной реакции
с веществами иными, чем вит. А. Реакция получается слишком сильной. Любо-
пытно, что при пробах на препараты А, полученные из растений, избыток
реактива ослабляет реакцию. Вот примеры измерений: к пробирке с двумя
кубиками трескового жира, разбавленного в четверть петролейным эфиром,
добавляют 4 кубика реактива; усиленно встряхивают. 'В присутствии вит. А
через 10—20 минут в нижнем водном слое пробирок появляется фиолетовое
окрашивание. Его измеряют через час после встряхивания. Для сравнения
пользуются растворами гидрохинона, прореагировавшего с реактивом (1 вес.
часть гидрохинона на 150 вес. частей кристаллов Б. Р.). При пробе растворов
в петролейном эфире растительных препаратов вит. А—прп избытке вит.
А—получается зеленое окрашивание верхнего эфирного слоя пробирки, а
фиолетовое окрашивание просачивается в нижний водный слой. Раствор надле-
жащей крепости дает следы зеленой окраски верхнего слоя лишь на границе
разделения двух слоев. Окрашенным в зелено-синий цвет оказывается только
нижний водный слой — окраска эта не стойкая и быстро переходит в стойкую
фиолетовую [Безсонов (3) 1927]. Из’ всех прочих многочисленных реакций на
вит. А, которые были перечислены вначале, наиболее чувствительными счи-
таются реакции Rosenheim'a и Drummond’a (1925) на треххлористый
мышьяк и Сагг’а и Price (1926) на треххлористую сурьму. Обе реакции пре-
ходящи, но вторая несколько более стойка и потому удобнее. Выше' были
приведены оговорки относительно специфичности последней реакции. Надо
однако признать что для практических целей — измерения различных образцов
продажного трескового жира, она достаточна. 0 том свидетельствуют очень
подробные и разнообразные опыты, с тресковым жиром (Willimott,, Moore и
Wokes, 1926 и Wokes и Willimott, 1927). Измерения производят следующим
образом: SbCl8 в кристаллах обмывают хлороформом и быстро просушивают
на фильтровальной бумаге {Carr и Price, 1926). Я нахожу более удобным
сушить в эксикаторе над хлористым кальцием. 30 г SbCl3 растворяют в 160
кубиках безводного и по возможности лишенного спирта хлороформа. Вводят
в пробирку 0,2 кубика 20% раствора трескового жира в хлороформе и приба-
вляют два кубика раствора SbCls (Wokes и Willimott, 1927). Реакция на
вит. А—синяя, но вслед за ней появляется и желтая реакция, вызванная не
вит. А, а поэтому Wokes и Willimott советуют употреблять при измерении
желтые стекла. В виду того, что синяя реакция преходяща и быстро выцве-
тает, при чем выступает оранжевая, колориметрическое измерение должно,
согласно Willimott'a, Moore и Wokes'а (1926), Wokes’а и Willimott'а (1927),
— Il —
происходить в течение первых 30 секунд после смешивания (Carr и Price
в 1926 г. допускали срок в три минуты). Наилучшая температура реакции
15° (Wokes и Willimott, 1927). Точность реакции при сравнении разных
тресковых жиров около 10°/о. Концентрация трескового жира в реагирующей
смеси не должна превышать 2°/0 (Wokes и Willimott). Добавлю, что неме-
дленное появление дополнительных цветов, которые не относятся к вит. А при
пробах трескового жира не позволяет применять эту реакцию для сравнения
богатства вит. А в растительных препаратах и в тресковом жире. Препятствует
не только разница оттенков, но и искусственно усиленная густота цвета
реакции с тресковым жиром. Применяя реакцию Carr's и Price для
пробы растительных препаратов вит. А, нельзя пользоваться растворами
в петролейиом эфире. В этих случаях первоначальный раствор — тот, коГорый
должен послужить для приготовления 20°/о раствора в хлороформе, может
быть получен или в парафиновом, или в оливковом, или арахидном маслах. По
сравнению с Б. Р. преимущества SbCl, в большей чувствительности реакции
и в том, что реакция на вит. А отличается от реакции на каротины — в пер-
вом случае она выцветает, во-втором— стойка. Но та же нестойкость реакции
очень затрудняет пользование ею. Кроме того, недостатком SbCl3 является
невозможность сравнивать вит. А трескового жира и растительных препаратов.
Такое сравнение легко достигается помощью Б. Р.
Как то указывалось выше, при разборе связи между каротином и вита-
мином А, Прибегая к достаточным разбавлениям испытуемого раствора, можно
устранить влияние на реакцию каротина.
Физиологическое действие смеси вит. А и D
Наиболее характерным примером такой смеси является тресковый жир.
Некоторые авторы, давая животным пищу, лишенную липовитаминов, и приба-
вляя к ней тресковый жир, продолжают рассматривать и обозначать действие
этого жира, как действие вит. А. Параллельные указания, которые были полу-
чены более точным путем, позволили допустить, что часть этих данных, пови-
димому. действительно относится в вит. А, и потому они были приведены
выше. Использование других—вследствие их неопределенности—затрудни-
тельно, но есть среди них наблюдения, которые представляют очень значи-
тельный интерес.
Образование камней в печени, желчном протоке, почках,
мочеточниках, мочевом пузыре и авитаминоз А и О
Еще в 1917 году Osborne и Mendel отметили, что в почках крыс, под
влиянием авитаминоза А и D, появляются камни, которые содержат фосфор.
Затем Beach (1921) и Emmet и Peacock (1923) наблюдали белые полосы
отложений солей мочевой кислоты на поверхности печени, селезенки и сердца
цыплят, лишенных липовитаминов А и D. Подобные же полосы наблюдали
Hart, Steenbock, Lepkovsky и Halpin (1924) на поверхности печени цыплят,
лишенных витамина А, но обеспеченных витамином D. Это единственное наблю-
— 78 —
дение, которое позволяет несколько связать весь вопрос о появлении отложений
и камней с отсутствием именно витамина 1. Но такое толкование должно при-
ниматься с осторожностью, так как дальнейшие ж наиболее полные наблюдения
были снова выполнены в присутствии и отсутствии обоих витаминов А и D.
Saiki (1927) выдерживал большое количество крыс на пище, лишенной вит. А
и D. Затем крысам короткое время давали тресковый жир. После того, как
и\ здоровье начинало восстанавливаться, дача трескового жира снова упраздня-
лась. Таким образом,' животные находились в опыте очень долгие сроки. Рент-
генография и вскрытие обнаружили, что у-таких крыс, после периода лишения
трескового жира в 40 дней, появляются камни в мочевом пузыре, после 80-днев-
ного— в почках, после 60-дневного—в желчных протоках. Кайни эти были
демонстрированы на заседании в Пастеровском институте в Париже. По внеш-
нему виду они^совершенно напоминали камни, которые наблюдаются у человека,
и достигали довольно значительных размеровх). Химический состав камней
изменялся в соответствии с изменениями состава основной пищевой дачи крыс.
Шесть больных крыс были подвергнуты лечению убиленными дачами треско-
вого жира. Через четыре месяца здоровье этих крыс вполне восстановилось,
и путем рентгенографии можно было убедиться в полном исчезновении камней.
Добавлю, что в моих опытах мне неоднократно приходилось наблюдать обильные
белые отложения (взвеси) в мочевом пузыре морских свинок, которые получали
пищу, недостаточную по вит. А. С теми данными, которые были приведены
выше касательно отложений в печени солей мочевой кислоты при авитаминозе А,
интересно сопоставить данные Morgan’s и Osburn’s (1925) об изменениях
в содержании аллантоина в моче крыс, лишенных вит. А. У крыс, которые
получали пищевую дачу с прибавкой трескового жира, содержание аллантоина
в моче понижалось с повышением веса крысы и повышалось при понижении
веса. Обратно у крыс, получавших тот же корм, но без трескового жира, со-
держание аллантоина в моче понижалось-вместе с понижением веса. Аллантоин —
один из продуктов метаболизма мочевой кислоты в теле животного. Предста-
вляется весьма вероятным, что понижение в выделении аллантоина при авита-
минозе А и отложение солей мочевой кислоты в органах животного, которые
наблюдаются при том же авитаминозе А, находятся в причинной зависимости.
Злокачественный опухоли и авитаминоз А и D
Использовав вышеуказанный прием длительного лишения крыс вит А и D,
которые чередовались короткими периодами, когда крысы получали тресковый
жир, Saiki (1927) вскрыл 49 крыс, которые пробыли без вит. А и D от 58
до 318 дней. Он мог установить не только типичное для авитаминоза А орого-
вение мостовидного эпителия, выстилавшего внутренности животных, но также
анормальное размножение клеток ткани этого эпителия. Размножение это вело
к образованию опухолей, весьма схожих с раковыми и саркоматозными образо-
ваниями. То же подтвердило и микроскопическое изучение. На срезах этих опу-
х) Данные Saiki вполне подтверждены Van Leertwn, 1928, Journ. Biol. Chemie, 76,
стр. 137.
— 7W —
Холей можно было установить присутствие многочисленных метастазов, которые
характеризуют также ткань раковых опухолей. Из 49 вскрытых крыс у 5 были
обнаружены крупные орухоли в передней части желудка, у 12 —более мелкие,
но еще значительные. Мелкие, но заметные опухоли встречались у многих крыс
близ подъязычной железы, в мочевом пузыре, во влагалище, матке и на коже.
Ввиду сложности и спорности вопроса об этиологии рака, окончательная оценка
этих данных будет возможна лишь после дополнительных изысканий. Но и сейчас
нельзя было не упомянуть этих наблюдений Saiki и его многочисленных сотруд-
ников Японского Государственного Института по исследованию пищевых веществ.
Заживление кожных порезов и а в и а т а м и н ы А и D.
8агк1 (1927) наносил крысам одинаковое число легких кожных порезов.
Затем часть'крыс получала пищу, лишенную вит. А и D, другая часть — ту
ясе пищу, но с добавкой трескового жира. Заживление порезов происходило
быстрее у крые, которые не получали трескового жира. Результат этот надо
сопоставить с данными ой ороговении клеток мостового эпителия и их усиленном
размножении при наличии авитаминоза А.
Глава III.
Липорастворимые витамины Е
Факторы воспроизведения
Имеются основания думать, что любой из тех витаминов, которые необ-
ходимы для жизни данного вида, оказывает влияние и на функции его воспро-
изведения. Так, отсутствие в пище смеси вит. А и D или вит. В, или С быстро
отражается на состоянии и правильной функции семенников, яичников л мл&чных
желез. При чем некоторые наблюдения указывают, что то содержание витаминов
в пище, которое необходимо для воспроизведения потомства, более, чем вдвое,
превышает обычное, понимая под обычным то, что обеспечивает здоровье и нор-
мальный рост данного вида. Работы последних лет выяснили с полной очевид-
ностью существование 2-х новых липовитаминов'—Е. Их деятельность, повиди-
мому, всецело ограничивается влиянием, притом весьма резко выраженным,
на функции воспроизведения, состояния семенников и яичников, созревание
плода, деятельность молочных желез. Вероятно, что помимо функций воспроиз-
ведения, витамины эти оказывают влияние и на общее состояние здоровья
животного, но, по сравнению с таковым других витаминов, проявляется оно
чрезвычайно медленно.
Доказательства существования двух витаминов Е
Впервые наблюдения Evans’z и Bishop's. [1922 и 1923 (1) и (2)] ука-
зали на существование неизвестного еще витамина, названного ими вначале
вит. X, отсутствие которого цедет к бесплодию, вследствие рассасывания заро-
дыша. Первые данные выяснили, что витамин этот отсутствовал в тресковом
жире [Evans и Bishop (1), 1923]; он находился внутри зерен (Evans и В г-
— 80 —
shop, 1922), им оказалось богато масло, полученное из пшеничных зерей
[Evans и Bishop (2), 1923]. Впоследствии Evans {Evans и Burr, 1925)
принял для этого витамина обозначение, предложенное tyure, — вит. В.
Между тем Sure [(2) 1923 и (1) 1924] в течение долголетних опытов
кормил крыс либо так называемыми синтетическими дачами, либо сухим снятым
молоком так же, как и Evans, добавляя все дотоле известные витамины, но,
в отличие от Evans’s,, вит. А и D вносились им не в виде трескового жира,
а сливочным маслом (точнее, жиром сливочного масла). В этих условиях крысы
Sure производили здоровое потомство. Однако, потомство это быстро гибло,
молоко матерей неспособно было его питать. Замена сливочного масла тресковым
жиром вела к полному прекращению и рождений. Добавление к тем же пищевым
дачам бензольной или ацетоновой вытяжки из зародышей пшеничного зерна
восстановляло способность рождать, а также питательную силу материнского
молока [Sure (1) 1923, (2) 1924]. Таким образом, уже эти начальные опыты
не только выяснили существование особого витамина воспроизведения, но и дали
первые указания на его двойственный характер. Несмотря на долгие и кро-
потливые изыскания Sure (он перед тем зря испробовал все доступные ему
препараты белков, пептонов и аминокислот), это открытие сделано было лишь
благодаря счастливой случайности. Как выяснилось впоследствии, в сливочном
масле имеются оба фактора Е: фактор воспроизведения, который влияет на
первичные половые железы и на развитие плода, а также и фактор, который
обеспечивает правильное действие молочных желез, но содержание последнего
в сливочном масле очень мало [Sure (4), 1927, Evans и Burr, 1925]. В на-
чальных опытах Sure содержание сливочного масла в пище крыс не превос-
ходило 5%. Между тем пища, которая содержала 10% сливочного масла, пре-
красно обеспечивая само деторождение, позволяла выкормить молоком матери
59% всех рожденных крысят [Sure (4) 1927].	9
Для правильной оценки работ, которые посвящены воспроизведению, необ-
ходимо иметь в виду, что, подобно двум первым липовитаминам А и D, липо-
витамипы Е могут образовывать запасы в теле животного и частью передаются
матерью потомству. При чем вит. Ех, фактор рождения, обладает этим свойством
в несравненно большей степени, чем фактор Е2, который влияет на выделение
молока [Mattil и Clayton (4), 1925, Sure, 1927]. Мыши и крысы, которые
впервые подвергнуты кормлению пищей, лишенной витаминов Е, обычно дают
один —первый и последний — помет, но лишены возможности выкормить этот
помет.
Способность вит. Е образовывать запасы в теле животного выражена
слабее, чем в случае цит. А и D, но все же свойство это объясняет возможность
некоторых противоречивых результатов. Источник таких противоречий можно
устранить, ведя опыт не над одним поколением, а охватывая нисходящий ряд
4-х, 6-ти поколений крыс. Такой прием систематически применяется в работах
Sure 1926 —1927 г.
Добавим, что столь долгие опыты необходимы лишь для проверки полу-
ченных данных и разъяснения противоречий. Обычно случаи индивидуальных
— 81 —
Отклонений, вызванных наличием у некоторых животных особо крупных запасов
вит. Е, очень редки. Собственные мои опыты над белыми мышами, которые
случайно проверяли четыре различных, весьма характерных указания Sure
и Evans’s, уже на первом поколении привели к данным, вполне их подтвер-
дившим.
Другая причина возможных противоречий кроется в том влиянии на
плодоношение, которое оказывает минеральный состав пищи. Так, для того,
чтобы обеспечить воспроизведение далее второго поколения, необходимо наличие
в пище ничтожной примеси фтористой соли. Наиболее удобным, основным кормом
при опытах воспроизведения крыс и мышей, является сушеное снятое молоко,
добавленное нужным количеством витаминов. Вот такой пример пищевой дачи
[Sure (2), 1926]:
Святое сушеное молоко............................ 50,00	»
Цитрат железа..................................... 0,25	*
Агар-агар......................................... 2,00	„
Остаток спиртовой вытяжки дрожжей .............0,40—0,1 ,
Тресковый жир...................................... 2,00	»
Остаток эфирной вытяжки зародышей пшеницы . . .	5,00	„
Декстрин....................................... 39,75	— 40,35
вит. Е
вит. А и D
вит. Е
(Заметим, что вит. В можно вводить, примешивая к даче от 10% до 16%
свежих дрожжей).
Оказалось [Sure (2), 1926], что минеральный состав сушеного снятого
молока, приготовленного летом и зимой, различен. Зимнее молоко бедно фтористыми
солями, и потому воспроизведение останавливается часто уже на первом и не
позднее, чем на втором поколении, несмотря на обильную дачу вит. Е. Добавив
к даче, которая содержала зимнее молоко, смесь солей: NaF, MnS04(4H20),
A1K(S04)j(12H20), Na2SiO3 — каждой по 0,0125% веса всей дачи — Sure снова,
как и на летнем молоке, получил 5 поколений — всего 778 крыс, при чем
и быстрота роста, и величина, достигнутые этими крысами, значительно пре-
взошли наилучшие случаи, указанные во 2-м издании посвященной крысе моно-
графии Donaldson's, 1924 г. Те же пищевые дачи с летним и зимним молоком,
иногда вит. Е к ним не добавляли, неизменно и быстро вели к бесплодию.
То, что из всех элементов, добавленных Sure, действие оказал именно
фтор, явствует из данных Maze (1925). Maze наблюдал остановку плодоно-
шения крыс, получавших в пищу зимнее снятое молоко. Илодонощепие проис-
ходило (появление 1-го поколения), когда в пищу крыс добавляли фтористый
и иодистый натрий. Как можно видеть в опытах Sure и Maze, единственным
общим элементом, добавление которого к снятому молоку восстановляет способ-
ность к воспроизведению, является фтор. Отметим, что имеется работа Me Col-
lum’s, (1925), указывающая, что значительное повышение процентного содер-
жания в пище фтора, сравнительно с дозой, только-что приведенной, ведет
к вредным последствиям.
Упомянем еще одну существенную особенность техники исследования дей-
ствия вит. Е, которая дала повод к возражениям. Относительно вит. D уже
Витамины.	6
— 82 -
указывалось на существенную роль для действия этого витамина того раство-
рителя, который сопровождает препарат вит. D при его введении в организм.
Подобное же явление наблюдалось мной относительно вит. А. Препарат этого
витамина, растворенный в арахидном масле, оказывал явное действие на евпнок-
тот же препарат, но растворенный в парафиновом масле, был бездеятелен.
Данные Sure (1) (1927) указывают, что и для действия липовитаминов Е реша-
ющим является тот способ, которым они вводятся в организм.
Вит. Е оказывает свое полное действие, если масло или препарат, который
его содержит, растворять в тресковом жире, примешанном к опытной даче. Если
тресковый жир давать отдельно, а препарат вит. Е смешивать с казеином, то
число рожденных и выкормленных матерями крысят значительно уменьшается.
Между тем Anderegg и Nelson (1925) выступили с критикой теории
вит. Е. Они высказали предположение, что при смешении трескового жира
с сухим снятым молоком происходит частичное разложение жира с образованием
акролеина — что препятствует положительному влиянию трескового жира на
воспроизведение.
Действие тех веществ, которые будто бы содержат вит. Е, состоит лишь
в предохранении трескового жира от распада.
Давая крысам тресковый жир и препарат дрожжей отдельно от основной
дачи, авторы наблюдали воспроизведение крыс и в отсутствии вит. Е. Данные
эти находились в полном противоречии с данными Evans’b и Bishop’b (1) (1923),
Sure (1) (2) (3) (1926),	(1922), Hartivell’b (2) (1926) к Нодап’ъ
и Harshaw’& (1926). Все эти авторы согласно выяснили, что особый фактор
воспроизведения (вит. Е) в тресковом жире отстуствует. Тем не менее Sure
подверг новой проверке утверждения Anderegg’z, и Nelson's,. Давая крысам
тресковый жир и вытяжку дрожжей отдельно от основной дачи и во всем прочем
следуя точно условиям опытов Anderegg’^ и Nelson’s., Sure (1) (1927) убедился,
что в отсутствии вит. Е воспроизведения не происходило — несколько случаев
зачатия заканчивались рассасыванием плода. Прибавляя вит. Е отдельно от
трескового жира, он наблюдал и воспроизведение, и выкормку сосунков — но
в меньшем количестве, чем при его обычном способе действий. Sure приготовил
из масла зерен хлопка концентрированный препарат вит. Е. Он смешивал его
с тресковым жиром и затем со всей пищевой дачей. При процентном содержании
в 0,0175% всей дачи, препарат еще оказывал явное действие на рождаемость,
Sure замечает, что такая ничтожная примесь едва ли могла предотвратить гипо-
тетическое взаимодействие трескового жира и молока. Затем Sure (2) (1927)
посвятил особое исследование окончательному выяснению вопроса о том, обладает
ли тресковый жир в какой-либо мере свойствами вит. А, который проявляется
маслянистым содержимым зародышей зерен. Как и во всех прочих опытах Sure,
жир получался выдавливанием из предварительно обмытой свежей печени трески.
Было установлено, что жир этот богат вит. А и D. Крысы, которые получали
через рот 0,1, 0,3, 0,5, 0,7 и 1 кубик трескового жира, но были лишены
вит. Е, оказались способны дать лишь один помет большей частью мертво-
рожденных крысят. Рожденные живыми быстро гибли. После первого помета
— 83 —
дальнейших не последовало. Равное число крыс получало ту же основную дачу,
но с примесью 3% пшеничного масла, при чем одной группе трескового жира
не давалось вовсе, а другие получали по 0,3, 0,2, 0,1 кубика на крысу. Крысы
этих групп дали ряд пометов. 158 крысят были выкормлены матерями. Способ-
ность к воспроизведению обнаружила и та группа, которая не получала треско-
вого жира, но смертность крысят в этой группе оказалась наивысшей: 67%. Воз-
можность воспроизведения в этой группе объясняется запасами в теле крыс вит. А
и D, которые накопились во время предшествовавшее опыту и были унаследованы
от предыдущего поколения. Так как крысы Sure, которые находились вне опытов
(запасные крысы), получали вит. А и D в виде добавки к их пище 1% трескового
жира, то факт этот дал новое подтверждение богатства трескового жира, который
употреблял Sure, витаминами А и D. Заметим, что вопреки утверждения Sure,
надо признать наличие в масле зародышей зерен пшеницы небольших количеств
вит. А, что доказано опытами Steenbock и Coward (1927), Масу, Outhouse,
Graham и Long (1) (1927). Обстоятельство это, впрочем, нисколько не уменьшает
доказательности опытов Sure относительно отсутствия вит. Е в тресковом жире.
Только-что описанные опыты показали, что даже дача в 1 кубик или
в 920 мг трескового жира на крысу не снабжает ее вит. Е. Напомним, что
достаточная доза вит. А обеспечивается 1 — 2-мя мг (Holmes, 1922,
1925, 1926), а вит. D — 7-ю мг трескового жира на крысу [Леев; см. Sure
(2), 1927]. Как можно видеть, возражение Anderegg и Nelson'& совершенно
отстранено. Другое возражение против теории вит. Е было выражено
Нодапо'ои. и Harshaw (1924), но затем авторы эти (Hogan и Harhsaw,
1926), проверив свою первую работу, вполне подтвердили теорию вит. Evans'г.
и Sure. Их первое ошибочное заключение основывалось на опытах с пище-
вой дачей, в основной состав которой входил коммерческий препарат «Криско».
«Криско» получается из масла зерен хлопка, как продукт гидрогенизации
(водородного замещения) этого масла. Между тем Sure (1) (1926) показал,
что хлопковое масло содержит оба вит. Е. Устранив <Криско» из основной
пищевой дачи, Hogan и Harshaw (1926) получили данные, вполне совпа-
дающие с данными Sure.
Выявление двойственности вит. Е
Как выше было упомянуто, уже первые опыты Sure со сливочным
маслом дали указания на существование двух отдельных вит. Е:
Ej является началом плодовитости (рождаемости) в точном смысле этого
слова,
Е2 влияет на состояние молочных желез — его можно обозначить, как
млекотворное начало.
Но полной убедительности наблюдений над действием сливочного масла
мешают два обстоятельства. Первое — то, что в масле присутствуют оба вит. Е,
хотя второй и находится в нем в несоразмерно малом количестве. Второе —
то, что, подобно всем прочим витаминам, содержание в молоке и масле
витаминов Е подвержено величайшим колебаниям (Mattil и Clayton, 1926).
6*
— 84 —
Работая с иным источником вит. Е, а именно, с маслом зародышей
пшеничных зерен, Sure (1) (1926) получил данные, которые вполне совпа-
дали с результатами опытов со сливочным маслом. Три группы крыс получали
пищевую дачу, которая содержала 2%, 1% и 0,3% пшеничного масла.
Рождаемость во всех трех группах оказалась приблизительно равной, но
смертность крысят чрезвычайно возрастала по мере понижения процентного
содержания пшеничного масла в даче. Работа с различными препаратами,
полученными из того же масла [Sure (3) 1926], дала такие же результаты.
Крысы, которые получали по 7,5 и по 18 мг препар. № 1, родили равное
количество крысят, но в 1-м случае все погибли, а во 2-м — 75% крысят
было выкормлено матерями. Препарат № 2 — 3 мг и 4 мг на крысу—число
рождений приблизительно равное, число выкормленных—15% и 74%. Следо-
вательно как jb сливочном, так и в пшеничном масле, повидимому, имеется
два начала Е, лри чем содержание —млекотворного фактора, значительно
уступает Ех— фактору плодовитости.
Другое указание двойственности вит. Е основываетея на разной устой-
чивости к нагревацдю и окислению факторов Ех и Еа. Еа —фактор млеко-
творности несравненно более хрупок, чем фактор плодовитости Ех [Sure (3),
1926, (1) 1927]. Пшеничное масло прогревалось 2 и 3 часа в автоклаве
при значительном давлении—2 кг и Р/а кг. Сравнение с контрольными кры-
сами, которые получали то же масло, по не гретое, показало, что нагревание
рождаемости не уменьшило, но понизило число выкормленных крысят на 37%
и 50% [Sure (3) 1926]. Суточное прогревание на 100° Ц с пропусканием воз-
духа уничтожает оба вит. Е. Без пропускания воздуха оно ведет к ослабле-
нию Ех — число рождений достигает приблизительно половину обычного,
и к полному уничтожению Еа. Простое прогревание 24 часа при 50° Ц
и 37° Ц оставляет почти нетронутыми оба Е. Такое же прогревание, но с про-
пуском воздуха, не затрагивая _ЕХ, ведет при 37° Ц к уменьшению на треть
числа выкормленных крыс, а при 50’ Ц уничтожает оба вит. Е [Sure (1)
1927]. Однако, в предыдущей работе Sure (3) (1926) суточное прогревание
при пропускаемости воздуха в темпер. 85° Ц оставило нетронутым вит. Ех
и лишь значительно уменьшило число (на 86%) выкормленных крысят.
Трудно обеспечить совершенно одинаковые условия при длительном про-
пускании воздуха сквозь масло. Кроме того, надо заметить, что во 2-й серии
опытов Sure (1) (1927) наблюдались отдельные случаи ядовитого действия
масла обработанного воздухом при температуре 50° Ц и выше. Все жо дан-
ные Sure ясно указывают на сравнительно большую окисляемость и неустой-
чивость к нагреванию млекотворного фактора Еа — по сравнению с факто-
ром Ех.
Нахождение в природе растительных масел, которые обладают лишь
свойствами фактора плодовитости Ех и совершенно лишены Еа — млекотвор-
ного фактора — является третьим указанием на двойственность вит. Е. Так
[.Sure (1), 1926], масла: оливковое, персиковых косточек, бобов сои содер-
жат фактор Ех, — но фактор Еа в них отсутствует. Точнее, его присутствия
85
нельзя было установить, прибавляя до 5% этих масел к основной пищевой
даче крыс. Итак, до сих пор удалось получить лишь три указания на то, что
фактор плодовитости Ех и млекотворный Ё2, весьма вероятно, являются двумя
отдельными телами. Бесспорное доказательство двойственности вит. Е еще
отсутствует. Оно будет получено лишь тогда, когда удастся найти вещество,
богатое Е2 — млекотворным началом, и почти совершенно или совершенно
лишенное Ех — факторов плодовитости. История выяснения двойственности
вит. Е совершенно повторяет ту, которая привела к установлению отдельных
витаминов А и D. Существование двух отдельных витаминов Е чрезвычайно
вероятно.
Распространение в природе вит. Е
Помимо сливочного масла, оба вит. В-были обнаружены в масле зерен
шценицы [Evans и Bishop (2), 1923], хлопка, кукурузы и в пальмовом масле.
Промышленно-заготовленное, сырое необработанное кукурузное масло. содержит
оба Е. Но тот препарат под названием Mazola, который из него получают
для продажи, не содержит вовсе Е. Получают его обработкой сырого масла
паром, углекислой содой и пропусканием через глину, что и ведет к разру-
шению вит. Е [Snre (1), 1926]. Наиболее богатым источником обоих вит. Е
является пшеничное масло, а сливочное — один из беднейших. Один — вит. Ех
присутствует в зернах персика, оливковом масле и бобах сои. Отсутствуют
оба вит. Е: в масле кокосовых орехов, сезамовом, льняном [Evans и Bishop
(2), 1923 и Sure (1), 1926] горчичного семени, сладкого миндаля и пальмо-
вых семян [Palm Kernel oil), [Sure (1), 1926]. Sure особо отмечает тот
факт, что, тогда как пальмовое масло содержит оба Е, масло пальмовых
зерен не содержит ни одного пз них. Отметим также пробу на масло семян
подсолнуха. Она оказалась безрезультатной, так как добавка 5% этого масла
к основной даче привела к остановке развития крыс. А потому пришлось
отказаться от случки этих крыс.
Получение препаратов вит. Е. Указание на природу этих
витаминов
Удобный источник получения препаратов, которые содержат оба Е,
сырое (в смысле: необработанное) масло зерен хлопка. Масло это беднее
вит. Е, чем пшеничное, но его можно легко получить в больших количествах,
так как оно заготовляется промышленностью. Вот основной способ пригото-
вления [Sure (1), 1927]: сырое масло смешивается с избытком раствора
калийной щелочи в этиловом спирте. Смесь отстаивается два дня, затем
приливают этилового эфира и воды для отделения мыла. Последовательно
добавляют к смеси эфир и повторно отливают верхний, эфирно-спиртовой
слой, который содержит неомыляемую фракцию. Отлитый эфир выпаривают,
полученный остаток обрабатывают снова раствором калийной щелочи в эти-
ловом спирту — 4 часа прп 37° Ц. И затем повторяют отделение неомыляемой
фракции путем прибавления к щелочному спиртовому раствору этилового
— 86 —
эфира и воды, и отделения эфирно-спиртового слоя. При выпаривании этой
смеси эфира и спирта, которая содержит неомыляемую фракцию, после уда-
ления эфира, в оставшемся спиртовом растворе выпадают кристаллы фитр-
стерина. Кристаллы эти растворимы в горячем этиловом спирту. После окон-
чательного выпаривания досуха в пустоте получают препарат, один а
которого соответствует 170 г исходного хлопкового масла. О количестве
разрушенного при приготовлении вит. Е позволяет судить следующие цифры:
примесь 0,07% препарата к пище позволяет выкормку 42% крысят [Sure
(1) 1927], примесь 5% сырого хлопкового масла—71% крысят [Sure (2),
1926]. Второй результат лучше первого, но в пределах точности подобных
опытов результаты эти надо признать приблизительно равными. Перечисляя
процентное количество препарата на то процентное количество исходного
масла, которому оно соответствует, получим: 0,07%. 170=11,9%. Следо-
довательно, примесь препарата в количестве, которое соответствует 11,9%
исходного масла, оказала действие Е несколько слабее примеси 5% самого
исходного материала. Итак, в процессе получения препарата разрушается
около 2-х третей вит. Е. Потеря эта вероятно объясняется тем, что почти все
операции ведутся Sure’oM при доступе воздуха, а между тем его собственные
данные указывают на легкую окисляемость вит. Е, особенно Е2. Концентри-
рованные препараты Е были получены [Evans и Burr, 1925, Sure, (3),
1926] из масла зародышей пшеничных зерен — также путем выделения
неомыляемой фракции этого масла. Дальнейшее очищение достигалось удале-
нием из неомыляемой фракции фитостеринов—тел, лишенных свойств вит. Е.
Примесь к пищевой даче 0,03% такового препарата [Sure (3), 1926] обес-
печивала не только рождение, но и выкормку крысят. Масло зародышей зерен
пшеницы добывалось обработкой зародышей ацетоном, этиловым эфиром или
бензолом. Ацетон оказался наихудшим растворителем вит. Е.
Все вышесказанное указывает, что подобно вит. А и D: 1) вит. Е суть
неомыляемые липиды — т.-е. липиды, которые не принадлежат к разряду
жирных кислот, 2) они не являются также и фитостеринами и 3) легко под-
даются окислению — особенно вит. Еа.
Но, тогда как молекулы вит. А и D обладают двойной связью, она
повидимому отсутствует — судя по опытам с <Криско» — в молекулах
вит. Ej и Еа.
Физиологические особенности действия вит. Ех — начала
плодовитости
Как уже упоминалось выше, при отсутствии вит. Ех в пище крыс
появляется лишь один помет. Зародыши второго помета рассасываются
до рождения, впрочем это отчасти происходит и с зародышами первого помета,
затем наступает полная бесплодность самок. Бесплодность эта появляется
и тогда, когда самок случают с самцами, которые получали вит. Е. Смерть
и рассасывание зародыша — единственный признак влияния на самку пищи,
которая лишена вит. Ех [Evans и Bishop (1), 1923, Mattil и Clayton, 1926]
— 87 —
Введение в пищу вит. Е быстро восстанавливает плодовитость самок, но
целительная дача вит. Е должна значительно превышать нормальную.
Крысы самцы, если их держать от рождения до 3-х — 5-ти месячного
возраста на пище, .чищенной Е, также становятся бесплодными (Mattil, Car-
man и Clayton, 1924, Mattil и Clayton, 1926), но бесплодие это затем
почти — вернее совершенно—неизлечимо дачей вит. Е.
Влияние пищи, лишенной Е, на самок выражается автолизом тканей
зародыша. Автолиз начинается в печени зародыша (Long и Parkes, 1924).
Страдают также зародышевая часть плаценты и желточный мешок (Evans
и Burr, 1925), но структура собственно материнских тканей остается незатро-
нутой, что и позволяет быстрое излечение материнского бесшюдия дачей вит. Е.
У крыс самцов, получающих с рождения пищу, лишенную Ех, семен-
ники созревают нормально, но на 3-ем—5-ом месяце начинается вырождение
семинального эпителия. Убеждаются в том гистологическим изучением, но
еще полнее отражается оно падением веса семенников. При помощи гистоло-
гических препаратов семенников трудно удостоверить, что вся поверхность
сперматогенной ткани выродилось. Между тем как падение веса семенников,
достигнув известного предела, соответствует полному бесплодию самца, следо-
вательно, и полному вырождению его семинального эпителия. Вес семенников
вычисляют в процентах веса нормальных семенников крысы данного общего
веса, пользуясь данными Donaldson's (1924). Определяют его при посмертном
вскрытии самцов. Семенники, которые обладают весом не ниже 80% нормаль-
мального, действуют правильно. Падение веса семенников ниже 70% нормаль*
ного в подавляющем большинстве случаев совпадает с неизлечимым беспло-
дием. Лишь в единственном случае дачами вит. Е удалось восстановить плодо-
витость самца, семенники которого обладали весом в 55% нормального
(Mattil и Clayton, 1926).
Хотя многочисленные самцы, чьи семенники потеряли в весе более 53%,
все оказались бесплодными, решающей пробой бесплодия самца является
лишь случка. Несмотря на отсутствие удобного признака полного вырождения
всей поверхности сперматогенного эпителия, все же данные Mattil's и Clay-
ton's. наглядно свидетельствуют о невозможности восстановить помощью вит. Ех
деятельность этой ткани, которая подверглась вырождению в отсутствии вит. Ег
Отметим, вместе с Mattil'wn и Clayton's^ (1926), что созревание семенников,
которое происходит в течение первых месяцев жизни при полном отсутствии
вит.Е в пище, — лишнее указание на наличие унаследованного от матери
запаса вит. Ех. Явление это совершенно соответствует способности самок,
также лишенных с рождения вит. Ех — давать 1-й и единственный помет.
Наконец, необходимо отметить совпадение наблюдения Evans’s и Burr's.
(1925) и Mattil’s и Clayton's (1926). Согласно данным этих авторов, чем
больше процентное содержание жиров в пище, тем значительнее должно быть
также ее богатство вит. Е, чтобы обеспечить функции воспроизведения. Так,
определенное количество сливочного масла или цельного молока не проявляет
действия вит. Е, если в пишу крыс введено 15% — 25% сала. Заменяя сало
— 88 —
веществом, которое йе содержит Е, но не является жирным телом, например,
декстрином—наблюдают, что то же количество сливочного масла или цельного
молока обеспечивает правильное производство потомства. Значение этих наблю-
дений не ограничивается областью изучения вит. Е, они, повидимому, обнару-
живают принцип действия общий и другим витаминам.
Глава IY
Водорастворимые витамины
Две особенности существенно различают водорастворимые витамины от
липорастворимых. Т1з них первая выражена неспособностью водорастворимых
сохраняться в теле животного. Витамины В и С потребляются по мере их
поступления в организм. Достаточно прервать на сутки их приток, чтобы уже
проявились начальные признаки авитаминоза.
Если признавать деление веществ, которые образуют живую ткань, на
запасные и непосредственно жизнедеятельные, то липовитамины должны быть
отнесены к первому, а водорастворимые ко второму разряду. Впрочем справед-
ливо это лишь относительно животных.
В растениях, плодах, зернах, корневищах, запасы водорастворимых вита-
минов сохраняются долгие месяцы, а в некоторых случаях — годы.
Но как бы ни истолковывать их быстрый распад внутри животных
организмов, явление это на деле влечет ряд весьма характерных последствий.
Голуби, которые получали корм, совершенно лишенный витаминов В (очищен-
ный от шелухи рис), морские свинки — витаминов С, выглядят не позже 4-ой
недели испытания тяжело больными, совершенно истощенными животными.
Наиболее устойчивые не переживают ЗЗ-iip дня опыта. А между тем, братья
их, которых те же 33 дня содержали на тех же нормах, добавляя лишь
несколько мг препарата витамина В в 1-ом, С во втором случае, вполне
здоровы, хорошо упитаны.
Неизменно резко выраженный ход таких опытов, рождает необычайно
яркое представление об особом жизнетворческом начале, которое заключено в не-
скольких мг, иногда долей мг таких препаратов.
Несмотря на то, что препараты липовитаминов оказывают физиологи-
ческое действие в дозах несравненно более малых, опыты с ними дают далеко
не столь отчетливое впечатление. Опыты эти редко доводят до поголовной
гибели крыс, которые были лишены липовитаминов. Да и сроки выживания
таких животных весьма различны, что объясняется неравномерностью запасов
липовитаминов в печени отдельных особей. Хотя надо признать, что в конечном
итоге жизненная необходимость в водорастворимых, не превосходит таковую в
липовитаминах; проявляется она значительно более наглядно.
Напомним, что именно эта наглядность действия препаратов водораство-
римого витамина В на голубей, которые получали в пищу очищенный от
шелухи рис,- побудила Funk's, выразить впервые с нужной отчетливостью
силой само понятие о витаминах.
— 89 —
Быстрое разрушение в организме животного водорастворимых витаминов
ведет и к другим важным последствиям. Оно дает возможность выделить
и изучить начальное действие витаминов на ход физиологических процессов.
Опыты с липовитаминами не позволяют наблюдать резкий, быстрый
переход от полного снабжения ими к полному их отсутствию. Тогда как такой
переход в случае витаминов В и С можно осуществить менее, чем в двое
суток. Такая возможность существенна не только для техники изучения вита-
минов. Случайности, которым подвержено питание большинство людей, легко
приводят к временному отсутствию в пище каких-либо витаминов. Разумеется
наиболее часты короткие перерывы в два-три дня. Когда дело идет о вита-
минах С или В, то судя по опытам над животными, даже такой краткий
авитаминоз уже оказывал вредное физиологическое действие. Тогда как непро-
должительный перерыв в поступлении извне липовитаминов обычно воспол-
няется за счет запасов печени. Поэтому имеется основание полагать, что
в общем случае влияние авитаминозов С и В чаще проявляется на здоровье
людей, чем отсутствие в их питании липовитаминов.
О другом существенном отличии водорастворимых витаминов говорит само
их название.
Способность этих тел, состав и химико-физические свойства которых еще
мало известны, превосходно растворяться в воде, весьма затрудняет их изуче-
ние. Трудности эти необходимо иметь в виду для оценки добытых о них
данных.
Множество биогенных веществ растворимы в воде, и внутри живых тканей
витамины В и С находятся в сложнейшей смеси с ними.
7 Для изучения и характеристики витаминов, испытания над животными
являются единственно надежным способом. Но как приготовить необходимую
для таких испытаний пищу. Она должна содержать все нужные вещества,
кроме искомого неизвестного. Следовательно, в зависимости от задания
витамины С или В должны совершенно в ней отсутствовать. Ничтожная по
весу примесь витамина уже способна оказать влияние па исход опыта,
а в состав пищи неизбежно входят вещества, добытые из растительных или
животных тканей, которые содержали витамины. Выше указывались случаи, когда
казалось тщательно обезжиренный казеин, содержал еще заметную долю про-
витамина D — эргостерина. Трудно очистить казеин также и от витамина А.
Но еще труднее от водорастворимых витаминов, которые он адсорбирует при
осаждении из молока. Надо принять во внимание, что слишком усиленная
чистка и прогревание казеина могут отразиться на его собственных питатель-
ных свойствах.
А между тем сейчас, более чем когда-либо, становится необходимым для
дальнейшего продвижения к познанию природы водорастворимых витаминов,
достичь возмозйЬо большей чистоты и постоянства физиологических свойств
корма. Особенно необходимо это потому, что как выяснилось, обозначение,
витамин В, невидимому и С, соответствует не одному, а нескольким отдельным
телам. При чем лишь относительно некоторых из этих тел или фракций витаминов,
— »0 —
удается иногда наблюдать признаки их особого характерного физиологического
действия. Во многих случаях отсутствие в питании отдельной фракции про-
является только на росте, общем состоянии и продолжительности жизни жи-
вотного. А потому когда в состав основной пищевой смеси вводят такие
вещества, как казеин, декстрины, молочный сахар, гретое молоко, то обнару-
ружить по ходу опыта, не внесли ли они кацую-либо фракцию витамина В
или С, весьма затруднительно. Таким образом, создается возможность того,
что в постоянную уравнения — основной корм — незаметно включается часть
искомого неизвестного — витамина.
Все вышеизложенное находится в непосредственной связи с решением
основного вопроса: как можно в настоящее время наиболее надежно определить,
отграничить понятие о витамине В и С.
Очевидно, что пока не удастся выделить в чистом виде те тела, которые
объединяют под этими названиями, определения должны опираться нате началь-
ные опыты, которые открыли самое существование в природе особых физиоло-
гических факторов В и С. Согласно опытам Funk‘& и его предшественников
витамин В—это какое то водорастворимое начало, которое отсутствует в оч::-
шенных от шелухи зернах злаков (риса) и необходимо для поддержания жизни
птиц.
Опыты Axel Holst'a, показали, что витамин С -водорастворимое начало,
которого лишены цельные зерна злаков (овса) и которое необходимо для жизни
морских свинок. Крайняя схематичность и эмпиризм таких определений,
очевидны. Но их достоинство в том, что они сводят к одной отправной точке
сложную цепь многочисленных исследований, которые были посвящены водора-
створимым витаминам.
Далее будет приведен ряд данных, которые позволяют существенно
дополнить и уточнить эти определения. Многие из этих данных стало возмож-
ным получить лишь пользуясь основными кормами, которые были значительно
более сложными, чем очищенный рис и цельный овес. Необходимость прибе-
гать к таким более совершенным основным кормам очевидна. Так, например,
очищенный рис, пища, которая лишена не только витамина В, но и липовитами-
нов. Пользоваться ею при опытах на голубях все же вполне возможно, так как этот
недостаток отзывается на них очень нескоро. Но нельзя при опытах по витамину В
над млекопитающимися, даже столь неприхотливыми, как крыса, свести весь
основной корм к очищенному рису. Препятствует тому в данном случае не
только отсутствие липовитаминов, но и качественный и количественный.изъян
белков в основном корме.
Также и цельные зерна овса лишены не только витамина С, но и других
факторов, к отсутствию которых столь требовательное животное, как морская
свинка, весьма чувствительно. Ограничивая основную дачу одним овсом A. Holst
мог все же открыть само существование витамина С, так как потребность
в этом факторе питания — морской свинки, исключительна велика, и отсутствие
его в пище проявляется особенно быстро и резво. Кроме того, те растительные
ткани и соки, антицинготное действие которых установил A. Holst, содержали
— «1 —
помимо витамина С и примеси других, нужных свинке, факторов, которых не
доставало овсу. Но для того, что бы стали возможными сколько-нибудь точные
измерения витамина С, и вообще для всей дальнейшей работы по раскрытию
его природы, усовершенствовать основной корм A. Holsts являлось необхо-
димым.
Итак, с одной стороны нельзя обойтись без замены очищенного от шелухи
риса и цельного овса более совершенными основными кормами, а с другой—
такая замена легко может внести целиком или частично те неизвестные водора-
створимые начала, которые мы именуем витаминами В и С. Необходимо все же
сказать, что избежать возможности подобного рода загрязнений при усовершен-
ствовании основного корма, задача хотя и трудная, но выполнимая.
Ряд отдельных исследований выяснил отсутствие следов витаминов В и С
во многих разнообразных пищевых веществах. Добавление таких веществ
к очищенному рису, либо к цельному овсу, не отражаясь на проявлении
типичных признаков авитаминозов В или С, не влияет и на удлинение пре-
дельного срока жизни животных. Но, к сожалению, большинство авторов вели
и ведут свои исследования, пользуясь основными кормами, мало специфичными
и притом довольно разнообразными. Надо оговорить, что в таких кормах
примесь того витамина (или его фракций), который подлежал исключению,
почти всегда ничтожна. Нельзя поэтому не признать, что добытые таким путем
данные все же могут обладать определенной, часто весьма большой ценностью.
Но когда они относятся к решению столь исключительно сложных задач, как
открытие новых витаминных фракций, или химической характеристики вита-
минов, возникают противоречия и некоторая неясность выводов становится
неизбежной.
Двойственность витамина В и физиологическая характеристика
отдельных фракций В
Многочисленные и разнообразные данные различных авторов вполне под-
твердили теорию Mitchell’b в 1919 о существовании 2-х отдельных витами-
нов В: Вх—антинейритического и Ва—фактора роста. Me Collum ранее опре-
делял вит. В, как единое вещество, способное проявлять антинейритическое
действие на птиц и поощрять роет крыс.
Однако, уже в 1925 г. он заявляет, что (Jfc Collum, Simmonds и Becker)
различное действие на крыс вит. В, который вводился, пользуясь 2-мя
разными источниками—зернами и дрожжами, заставляет признать, что «воз-
можное объяснение описанного явления то, что витамин В
не единое вещество, но состоит из двух или более начал».
Ниже будут изложены те последние работы, которые окончательно выяс-
нили двойственность вит. В и главные особенности физиологического действия
каждого из двух факторов В. Но прежде сопоставим вкратце данные различных
авторов, которые уже приводили к заключению о существовании 2-х отдельных
вит. В. Данные эти и сами по себе представляют известный интерес. Удобнее
всего распределить их не 3 признакам;
— 92 —
1)	Содержание факторов В в природных источниках.
Оба витамина В встречаются обычно совместно, но относительное их содер-
жание в разных веществах подвержено большим колебаниям. Зародыши зерна
пшеницы богаты антинейритическим вит. (Вх), но бедны фактором роста В2
[Chick и Ните (1) (2), 1917, Osborne и Mendel в 1919].
Обратно, молоко, зеленые листья, корневища и корнеплоды богаты В2
и бедны Вх (Cooper, 1914, Hopkins, 1919, 1920, Osborne и Mendel, 1919
(1), (2), 1920 и 1922, Gibson и Concepcion, 1916, Me Collum и Kennedy,
1916, Chick и Hume (2), 1917, Yedder и Clark, 1912, Sugiura и Benedici,
1918, Me Collum, Simmonds и Parson, 1918].
Имеется пример живого вещества—дрожжей, в различных испытанных
сортах, показывающих то же содержание по фактору роста В2, но очень
изменчивых по содержанию Вх—антинейритического фактора (Randion и
Lacoq, 1926). Укажем еще на яичный белок, вещество, богатое вит. В2 и
совершенно лишенное Bj (Chick и Roscoe (1929, 1)].
2)	Устойчивость к нагреванию. Нагревание при 120° Ц при
нейтральной или кислой реакции мало отражается на вит. В2,—факторе роста,
но ведет к исчезновению вит. Вг—антинейритического фактора [Chick и Ните,
1917 (1), Sherman и Grose, 1923, Emmet и Luros, 1920]. Согласно данным
Scotti-Foglieni в 1925, (1) 1926, при температуре в 120° Ц происходит не
разрушение, а отгонка антинейритического вит. Вг
3)	Растворимость и адсорбция. Оба витамина В отлично раство-
римы в воде и ледяной уксусной кислоте, но в крепком и абсолютном этило-
вом спирте вит. Вх значительно более растворим, чем В2 (Funk, 1912, Cooper,
1913, Kinnersley и Peters, 1925).
В2 растворим лишь в растворах этилового спирта крепостью не свыше 70°.
[Chick и Roscoe (2) (1929)]. Витамины В хорошо растворимы в муравьиной
кислоте [de Сидпас (1929)].
Некоторые авторы приписывали витамину В растворимость в бензоле.
Но, как это установили Williams и Watermann (1926), указания эти осно-
ваны на применении ошибочной техники, а именно—присутствие в бензоле
этилового спирта. Такая примесь объяснялась предыдущей обработкой препарата.
В чистом, сухом бензоле и эфирах витамины В совершенно нерастворимы.
При осаждении вытяжек из дрожжей или отрубей раствором нейтрального
уксуснокислого свинца, большая часть В2, до трех четвертей всего наличного
его количества, прилипает к осадку (адсорбируется), тогда как В, почти
целиком остается в растворе [Peters (1924), Chick и Roscoe (2) (1929)].
Оба витамина адсорбируются животным углем и глиной, но В2—фактор
роста—адсорбируется полнее, прилипает прочнее к углю и глине, чем Вх—
антинейритический фактор, и перевести его в раствор после адсорбции значи-
тельно труднее, чем вит. Вх (Drummond, 1917, Hauge и Carrick, 1926).
Заметим, что наиболее часто витамин Вх определялся по действию на
полинейрит птиц, а витамин Ва—по действию на рост крыс. Исключением
является работа Найде и Carrick's., 1926. Авторам удалось опытами над
— 93 —
одним и тем же животным, цыпленком, установить раздельно действие аяти-
нейритического вит. Вх и фактора роста Ва. В присутствии Bi рост цыплят
останавливался, но припадков полинейрита не наблюдалось: в присутствии Ва—
они болели типичным полинейритом, несмотря на продолжавшийся рост. Авторы
использовали коммерческий препарат, полученный следующим образом: хлебо-
пекарные дрожжи подвергли автолизу. Автолизат выпаривался, а затем высу-
шивался окончательно на быстро вращающихся валах при 100° Ц. Образчик
препарата, который послужил при опытах, до этого’хранился 6 лет. Первая
серия опытов обнаружила, что очень малые дозы такого препарата уже ока-
зывают явное положительное влияние на рост крыс, которые получали пищу,
лишенную вит. В. Между тем добавление до 15% препарата не могло преду-
предить припадков полинейрита у молодых петухов. Вторая серия опытов
была проведена исключительно на цыплятах. Витамины В они получали либо
в виде указанного препарата дрожжей, либо прибавкой к пище кукурузных
зерен и, наконец, смесью препарата дрожжей и свежеразмолотых кукурузных
зерен. В первом случае цыплята продолжали расти, но вскоре обнаруживались
частые случаи припадков полинейрита, во втором—рост почти совершенно
останавливался, но полинейритом цыплята не болели. Наконец, в третьем
случае цыплята развивались правильно. Препарат дрожжей, богатый В2—фак-
тором роста, все же содержал и небольшие количества Вх—антинейритического
витамина. Так, введение в корм цыплят очень больших' доз препарата-
до 30% всей дачи, хотя не устраняло окончательно’полинейрит, но надолго—
до 10-й недели—оторачивало его проявление. Потребность крыс в В!—анти-
нейритическом факторе значительно уступает потребности в нем птиц. А потому
следов В1; которые содержались в препарате, уже было достаточно, чтобы пре-
дупредить явления нервного заболевания крыс (вращательные движения, пара-
лич). Обратно, зерна кукурузы, богатые Bx, содержали также и небольшие
количества Ва. Когда содержание кукурузы в пище цыплят достигало 30%—
случаи припадков полинейрита совершенно устранялись, но цыплята не росли;
когда же содержание кукурузы в корме доводилось до 66%, не только цыплята
не болели, но и в некоторых случаях обнаружилось небольшое положительное
влияние на рост. Дополнительно авторы предприняли проверочные опыты
с спиртовой вытяжкой, полученной из продажного препарата дрожжей. Опыты
эти показали, что действие этого препарата на рост не может быть объяснено
влиянием тех примесей белковых тел, которые могли в нем остаться от первой
обработки.
Итак, опыты над одним и тем же животным, цыпленком, показали, что
из двух разных веществ, кукурузы и препарата дрожжей, одно проявляло
лишь свойства антинейритического фактора, не влияя на рост, другое—лишь
водного фактора роста, лишенного антинейрптических свойств.
Этим дано точное доказательство существования 2-х отдельных тел -
носителя антинейритического начала и водного фактора роста.
Другие указания на сложную природу вит. В связаны с открытием Gold-
Ъегдег'ъ. Goldberger первый выяснил, что отдельно от антинейритического
— »4 —
фактора имеется другой водорастворимый фактор—антипелагрический. Фактор
этот, названный им фактором Р. Р., согласно данным его и других авторов,
повидимому, тождествен витамину В2—в одному фактору роста.
Пелагра—болезнь, которая выражается неглубокими вначале поражениями
(ранками) кожного покрова. В первой стадии заболевание охватывает обычно
лицевую область. Беспрепятственное развитие пелагры ведет к смерти. Первые
попытки связать пелагру с проявлением особого авитаминоза были неудачны.
Затем Goldberger и другие авторы высказались в пользу предположения, что
причиной пелагры является недостаточность пищи по некоторым сложным бел-
кам типа казеина—белкам, содержащим те аминокислоты, синтез которых
неосуществим в теле животного. Однако, тот же Goldberger, клинически
наблюдая пелагру людей, установил, что тогда как крупные дачи чистого
казеина—до 90 г в день—не могли остановить пелагру, она излечивалась
разными веществами, богатыми вит. В: широким потреблением свежего молока
или мяса, ежедневной дачей 30 — 50 г сухих дрожжей (Goldberger и
Tanner, 1924, 1925, Goldberger, Wheeler, Lillie и Rogers, 1926). Эти
начальные указания были дополнены и разъяснены опытами Goldberger'^
над молодыми крысами (Goldberger, Wheeler, Lillie и Rogers, 1926, Gold-
berger и Lillie, 1926).
В первом ряде опытов крысы получали основной корм, который не содер-
жал витаминов В, но в нему примешивали от 30% до 40% дрожжей, про-
гретых 2*/а часа в автоклаве при давлении около 2 кг. Рост крыс останавли-
вался, они умирали через 8—10 недель с признаками паралича. Как
увидим далее, такая обработка дрожжей сохраняла в них значительную часть
вит. В2—фактора роста, но всецело уничтожала В!—антинейритический вит., а
при его отсутствии действие вит. В2, как фактора роста, не могло проявиться.
Спиртовая вытяжка из кукурузной муки известна, как вещество, богатое
антинейритическим витамином. Достаточно было Goldberger'^ прибавить
немного этой вытяжкп к тому корму, который выше был описан, чтобы вы-
звать рост крыс. Антинейритический витамин кукурузной вытяжки обеспечи-
вал проявление действия на рост того вит. В2, который заключал в себе пере-
гретые дрожжи. Но тот же антинейритический витамин, прибавленный в избытке
к основной даче—без примеси В2 перегретых дрожжей—не мог обеспечить
роста. Его действие ограничилось устранением явлений паралича. При этих
условиях опыта—обилии в пище антинейритического витамина и наличии лишь
следов вит. В2—проявляется в конце седьмой недели и позже заболевание
крыс, схожее с пелагрой человека (Goldberger и Lillie, 1926). Болезнь
сопровождается случаями ксерофтальмии, потерей шерсти, дерматитом ушей,
шеи и лап. Прибавление к пище крыс препарата, полученного из перегретых
дрожжей, в количестве 6% общей дачи, излечивало их от пелагры и восста-
новляло рост. Опыты Chik и Roscoe в 1927 г. над крысами вполне подтвер-
дили и дополнили данные Goldberger'^ и его сотрудников.
Основная дача, лишенная впт. В, состояла в этих опытах из смеси очи-
щенного продолжительной обработкой спиртом казеина—21 часть, рисового
— »5 —
крахмала—63 части, хлопкового масла—11 частей, смеси солей Me Collum
(состав смеси был приведен выше)—5 частей. Каждая крыса получала еже-
дневно от 0,05 г до 0,1 г свежего трескового жира.
Надо особо отметить, что наиболее богатым источником антинейрптиче-
ского витамина—без примесей или с ничтожной примесью В,—оказался пре-
парат Peters'^ (Peters, 1924). Препарат этот получается из дрожжей. 3 кг
дрожжей повторно извлекают 1,5 л кипящей воды. К вытяжке прибавляют
примерно 300 кубиков насыщенного раствора нейтрального уксуснокислого
свинца. Удаляют получающийся осадок, а фильтрат подкисляют серной кисло-
той и прибавляют к нему вислой сернокислой ртути. Снова фильтруют, удаляют
ртуть и серную кислоту сернистым барием и гидратом бария, a H2S—кипячением.
Затем встряхивают фильтрат с 30—50 г животного угля до полного
обесцвечивания. Животный уголь повторно извлекают 450 кубиками 50%
этилового спирта, содержащего 1% соляной кислоты. Вытяжку выпаривают
в пустоте, доводя до 20 кубиков. Перед дачей животным жидкость усредняют
содой. Сильно вислая реавция предохраняет вит. Bt этой вытяжки от рас-
пада при хранении в комнате в течение многих месяцев. 0,05 кубика препа-
рата соответствуют 10,5 мг сухого вещества. Такая доза быстро прекращает
припадок полинейрита голубя.
В этих опытах источником вит. В,—фактора роста и. антипелагрического
фактора Р.Р.—служили сушеные хлебопекарные дрожжи, прогретые в авто-
клаве 5 часов при 120° Ц и затем высушенные снова при 37° Ц.
Крысята, весом около 50 г, получая лишь основной корм, умирали после
3-х или 4-х недель, потеряв в весе около 15 г. За несколько дней до кон-
чины в редких случаях наблюдались явления паралича зада и шеи. Действие
антинейритических препаратов вит. Вг испытывалось после 3-недельного пре-
бывания крыс на основном корме. Ежедневная дача в 0,1 кубика препарата
Peters'a прекращала явления паралича, когда последние наблюдались, и во
всех случаях вела к улучшению здоровья животных. Рост не возобновлялся,
но падение веса останавливалось. В некоторых случаях животные, которые
получали только Blt умирали через 8 недель с начала опыта, не обнаруживая
никаких особых признаков. Но иногда на 7-ой или 9-ой неделе появлялись
признаки пелагры. Шерсть частично выпадала и на оголившихся участках
близ носа, на задней поверхности передних ног—обнажалась красная воспа-
ленная кожа. Наблюдалось также и опухание передних ног. Кожное заболе-
вание, разрастаясь, охватывало также и область рта, задних ног, иногда и
ушей. Наблюдался и коньюнктивит; моча слегка окрашивалась кровью. Забо-
левание пелагрой резким падением веса не сопровождалось, и больные крысы
выживали еще 2, 3 и более недель.
Медленно, по верно, пелагра излечивалась, и рост крыс восстанавливался
ежедневной дачей по 0,2 г и более на крысу перегретых в автоклаве дрож-
жей. Выздоровление длилось обычно около 2-х недель.
Но когда перегретые дрожжи прибавлялись к основной даче без одно-
временного введения также и антинейритического фактора в виде препарата
— 9в —
Peters’a или в ином виде, то рост не восстанавливался. На таком корме крысы
пелагрой не болели, но все же хирели и гибли. Наконец, когда крысы, кроме
основной дачи, получали небольшую дозу — от 0,2 до 0,4 г — цельных дрожжей,
высушенных при 37°Ц, они росли правильно и пребывали совершенно здоровыми.
Итак, в дрожжах и некоторых других биологических единицах заклю-
чены не менее двух витаминов: антпнейритический витамин Вх, отсутствие
которого в пище влечет расстройство некоторых нервных функций, и водный
фактор роста В2.
Представляется вероятным, что Ва тождественен с антипелагрическим
фактором Р. Р. Goldberger’^.. Но такое тождество еще не может считаться
окончательно доказанным.
Для обеспечения здоровья и жизни животного необходимо одновременное
присутствие в пище обоих витаминов В- Полное отсутствие одного из двух
факторов мешает проявлению действия другого фактора, даже если последний
имеется в избытке.
Имеются ли еще другие факторы В, помимо Вх антинейритического фак-
тора и В2 антипелагрического ? Опыты Williams и Eddy (1928) на голу-
бях, Williams и Waterman (1928) на голубях и крысах, Reader (1929)
и (1930) на крысах, привели их к заключению, что существует особый, мало
устойчивый фактор В3.. Так же как и Вх он разрушается целиком часовым
нагреванием при 120° Ц и щелочной реакции (Р. Н. 9). Согласно Reader
(1930) В3 может быть отделен от Вх и В2 осаждением сернокислой ртутью.
Reader утверждает, что антипелагрилеское действие приписываемое В2 зави-
сит от совместного влияния В2 и В3. Существование В3 доказывалось сле-
дующим образом: молодые животные, которые получали препарат антинейрити-
ческого витамина Вх и кроме того прогретую вытяжку из дрожжей, через
несколько недель обнаруживали задержку или полную остановку роста. Доба-
вляя к их корму небольшую дозу цельных зерен дрожжей, либо особого пре-
парата, выделенного из дрожжей [Williams и Waterman (1929), Reader
(1930)], достигали значительного повышения роста и улучшения здоровья. Оспа-
ривая существование нестойкого фактора В8, Chick указала, что нагревание
уничтожает значительную часть В2 и что дополнительные дозы лишь воспол-
няли эту потерю, а вовсе не вносили особый фактор В3. Возражение это очень
существенно. Заметим однако, что помимо приведенных имеются и иные ука-
зания на то, что кроме Вх и В2 повидимому существуют и другие факторы В.
Так Eddy, Gurin и Keresztesy (1930) нашли, что В3 отличен от фактора,
описанного Reader. Он оказывает физиологическое действие лишь на птиц, его
устойчивость значительно слабее устойчивости антиневритического витамина Вх.
Но, согласно опытам над молодыми крысами Kennedy и Palmer (1) (1929)
и Quick и Roscoe (1) (1929) и над голубями Randoin и Lecoq (1928), новый
фактор является не менее, а более устойчивым к нагреванию, чем В2. Ken-
nedy и Palmer (1) (1929) и (2) (1929) указывают, что испражнения крыс
богаты этим новым началом. Добавим, что в испражнениях (кале) могут содер-
жаться все факторы В, нужные крысе. Возможно, что существует пе только
— 97 —
•мало устойчивый фактор В3, но и новый устойчивый к нагреванию By. Но
следует оговорить, что вполне очевидных тому доказательств пока не имеется.
Несомненно в некоторых опытах (например, Williams и Waterman 1928)
.добавление веществ, в которых предполагался В3, вызывало весьма резкое повы-
шение кривой роста. А между тем уже до того животные, казалось, были
в изобилии снабжены витамином Bi и Ва. Но следует иметь в виду, что вполне
надежных способов полного отделения Bj от В2 не имеется.
Препараты Bt часто содержат примесь В2, а иногда теряют Вх при
их получении. Прогревание дрожжей может либо не разрушить весь В2 либо
уничтожить также и значительную часть В2. Наконец, очень трудно очистить
пищевую смесь, в частности казеин, от витаминов В, в особенности от В2. Если
животному, лишенному витаминов В, давать порознь либо Вх либо В2, самостоя-
тельного влияния на рост ни тот нп другой не проявит. Но если животное
вполне обеспечено одним из этих витаминов, а доза другого мала, добавляя ее
вызывают рост (данные Munsell (1929) и другие).
Впредь до окончательного выяснения вопроса, осторожнее полагать, что
то влияние на рост, которое приписывалось новым неизвестным факторам В,
могло в действительности принадлежать двум факторам В — Вх и В2, самостоя-
тельное существование которых окончательно установлено.
В дрожжах и зародышах зерен существует еще одно водорастворимое
жизнедеятельное начало, это «биос» Вильдье. Биологические его особенности
проявляются в его способности чрезвычайно ускорять размножение дрожжей.
«Биос» пытались было отождествить с витамином В2 [Williams (1919)].
Новые исследования [Williams и Waterman (1928), Narayanan (1930)]
опровергли это предположение. Устойчивость «биоса» к нагреванию в щелочной
среде устраняет также возможность отождествлять его с витамином Вг
Надо сказать, что несмотря на длинный ряд работ, посвященных «биосу»
вопрос о нем все еще далек от выяснения, а работы вплоть до последнего
времени продолжают содержать противоречивые данные. [Eddy, Heft, Steven-
son и Johnson (1921), [Suzuki (1923), Suzuki n Taira (1925), Fulmer, Due-
cker и Nelson (1924), Miller (1924), Eddy, Kerr и Williams (1924) (1926),
Eastcott (1928), Kerr (1928), Narayanan (1930)].
Как известно, коэнзима зимазы — продукт, который получают обработкой
дрожжей, так же как и биос, отличается термоустойчивостью. С. И. Костычев
fKostytshew, Medwedew й Kardo-Sysoiewa, 1927) высказал предположение,
что коэнзима суть витампноподобное тело, в роде биоса Вильдье. В пользу пред-
положения С. П. Костычева говорит общая устойчивость к нагреванию, свой-
ственная и коэнзиме, и биосу.
Данные Eddy, Heft, Stevenson и Johnson в 1921 г. указывали, что
нагревание в щелочной среде одновременно понижает способность данного веще-
ства стимулировать размножение дрожжей и рост крыс. Но необходимо огово-
рить, что попытки применить предполагаемую способность витамина В стимулиро-
вать размножение дрожжей к измерению этого витамина дали противоречивые
результаты. Некоторые из этих противоречий объясняются тем, что витамин В
Витамин и.	7
— 98 —
характеризовался исключительно, как антипейритическсе начало; другие — тех-
ническими трудностями, среди которых главная — присутствие в препаратах
витамина В певитаминных примесей, также способных влиять на размножение
дрожжей.
Витамины В
Антинейротический витамин Вп водорастворимый фактор роста
и антипеларгический фактор В2 (Р. Р.) и фактор В,.
О попытках выяснить химическую природу витаминов В
Основой нескольких современных способов получения препаратов, богатых
витаминами В,—в особенности антинейритическим витамином Вр является уже
давнее указание Seidell (1916) на то, что в водном растворе витамины, эти
могут быть избирательно адсорбированы некоторыми грубыми коллоидами. Сад*
Seidell пользуется с этой целью глинами, преимущественно глиной из
английской местности Суррей. Начальные приемы получения препаратов по
его способу заключаются в следующем {Seidell 1921 и 1922): в воду, слегка
подкисленную добавлением 0,1 проц, ледяной уксусной кислоты и нагретую до
90° Ц, вносят свежие дрожжи по расчету; объем воды на объем дрожжей.
В течение 5 минут поддерживают температуру смеси в 90е Ц, а затем дают
настояться около 24 часов при 50° Ц. Дрожжи разрываются, витамины В
переходят в раствор, а белки свертываются. Выпавшие белки отделяют центро-
фугированием к темнокоричневому фильтрату, прибавляют по 30 г на л
английской глины. Смесь усиленно взбалтывают полчаса. Затем «активирован-
ную» глину отделяют центрифугированием и промывают водой и 60°
этиловым спиртом (быстро) и тщательно высушивают. Такая глина содержит
до 65% азота. Дабы предупредить заболевание полинейритом голубя,
которого содержат на корму, состоящим исключительно из очищенного риса,
доста очно ежедневной дозы такой «активированной» глины в 0,1 г. Как
можно видеть препараты получаются мало концентрированные, но способ их
добычи прост и остается доселе одним из наиболее надежных. Seidell пытался
один и совместно с G. Bertrand его усовершенствовать, избавиться от глины
и других примесей и получить витамины В в чистом виде. Для этого он обра-
батывал активированную глину едким баритом и, удаляя затем из раствора
барит серной кислотой, прибегал к разнообразным приемам очистки витамина,
в том числе к попыткам осадить его пикриновой кислотой.
Заявление G. Bertrahd'z. и Seidelda о получении ими пикрита антиней-
ритического витамина в кристаллическом виде казалось позволяло надеяться
на быстрое выяснение химической природы витамины В. Заметим, впрочем,
что в английском тексте этого исследования, опубликованном вслед за французским
{Seidell, 1924), отмечалось, что активная фракция пикрита, напоминая по
внешиюти кристаллический осадок, не состояла из явно выраженных кристал-
лических особей. Дальнейшие усилия авторов выяснили невозможность охаракте-
ризовать таким путем химическую природу витамина В.
— 99 —
Новые работы Seidell’s, (1926, 1929) ограничиваются относительно хими-
ческой природы витамина В] лишь подтверждением характерного присутствия
азота во всех антинейтритических преЛйратах. Те разнообразные препараты,
которые послужили Seidell’y для этих новых исследований, были получены
исходя из основного его способа и прибегая затем к различным фракциониро-
ваниям: абсолютным спиртом, ацетоной и хлористым бензоилом. При чем
осаждение пикриновой кислотой им более не применялось. Богатство витамином В
пикратов Seidell’a, повидимому, объясняется прилипанием (адсорбацией) к их
поверхности этого витамина, а вовсе не образованием особого пикрата В.
Данные Jansen’a и Dona'h'a, (fl) и (2) 1926] противоречат возможности
самого существования пикрата витамина В. Авторы эти выделили антинейрит^-
ческий препарат из 100 кг рисовых отрубей. В основе способа получения
препарата они воспользовались приемами Seidell’?).-. адсорбция глиной, обработка
баритовым щелоком и т. д. [Безсонов (2), 1924]. Прибегли они также к фрак-
ционированию помощью нейтрального уксуснокислого свинца. Полученный ими
в конце длительного и разнообразного фракционирования «полукристалличе-
ский» препарат по содержанию антинейритического витамина превосходил
пикрат Bertrand’^ и Seidell's,. Наименьшая ежедневная дача на голубя
препарата Seidell’?), была в 2 .мг, тогда как дача в мг препарата Jansen
и Donath’?), уже предохраняла от полиневрита тропических птиц «Нуна Ноя»;
однако, с пикриновой кислотой этот препарат не давал никакого кристалличе-
ского соединения. Jansen и Donath обогатили собрание формул вит. В, дав
для своего «полукристаллического» препарата формулу: CeH10ON2HCl.
Химическое исследование привело их к мнению, что в состав молекулы
вит. В входит ядро глиоксаля (С2П202).
Степень силы физиологического дейстшй! препаратов Jansen и Donath
была подтверждена Eykman’ovt (1927). Затем Guha и Drummond (1929)
получили антинейритическне препараты еще более деятельные, пользуясь спо-
собами весьма близкими к способу Jansen и Donath. Наличие азота и
реакция Паули, характерная для обнаруживания глиоксаля (С202На), частью
подтвердили указания Jansen и Donath о химизме таких препаратов. Но
наблюдались и противоречия. Так, выяснилось, что препарат Jansen и Donath
едва ли мог быть химически чистым телом, а следовательно нельзя было,
основываясь на его анализе, строить химическую формулу витамина Вг Работа
Guha и Drummond вплотную подводит нас к последним преградам на пути
познания природы витамина В. Доказательно и наглядно выявляет она те
характерные трудности, которые связаны с попытками выделить его в чистом
виде. Приведем некоторые из наиболее существенных данных этого исследования.
Исходное вещество для вы юления препаратов было заготовлено Guha и Drum-
mond следующим образом: 100 кг зародышей пшеницы настаивались 4 часа
при 70 градусах Цельсия в 250 л 50% этилового спирта, подкислен-
ного добавлением 0,5% соляной кислоты. Вытяжка эта после выпари-
вания в пустоте дала около 20 кг бурого, клейкого вещества, богатого обоими
7*
100 —
витаминами В. Из водных растворов этого вещества были выделены 2 серии
препаратов Вх. Первая серия получалась по способу в основе своей сходному
со способом Veters'a, вторая по способ, сходному со способом Jansen и Donath.
Относительно первой серии отметим следующее: после очищения исходного
раствора осаждением нейтральным уксуснокислым свинцом и удаления свинца
наблюдалось, что при поглощении антинейритического витамина Вх животным
углем {Norit‘oa) наилучшие результаты получались при кислой реакции среды
(рн = 4 до 5). А между тем Kinnersley и Peters (1928), выделяя этот вита-
мин не из отрубей, а из дрожжей, установили, что он избирательно погло-
щается тем же животным углем лишь при нейтральной реакции (Рн=1).
Проверив указание Kinnersley и Peters, Guha и Drummond убедились Brfro
точности. Следовательно, в зависимости от того, какова природа исходного веще-
ства, источника витамина Вр изменяются свойства той фракции, которая содер-
жит в себе витамин Вг Более того, Guha и Drummond указывают, что даже
незначительные изменения в приемах приготовления препарата могут значи-
тельно изменить физико-химические свойства той фракции, которая содержит
В]. Этим объясняют они некоторые противоречия между их данными и данными
Jansen и Donath. Так, например, последние наблюдали, что при прибавле-
нии пикролоновой кислоты (1-пара-нитрофенол-3-метил-4-изонитро-5-пиразо-
лон — N02 • С6Н4 • N3C3O3H4) выпадает осадок, который содержит весь вита-
мин Вп тогда как согласно Guha и Drummond в этом случае происходит
обратное, весь витамин В4 остается в растворе, а осадок получается бездея-
тельный. Как указывалось выше 2 серия препаратов Guha и Drummond
была выделена способом очень близким к способу Jansen Donath. Началь-
ные его стадии совпадали со способом Seidell’^. После обработки активиро-
ванной глины баритом и удаления серной кислотой барита, к кислому раствору
(рц= 1,8) добавлялось в избытке азотнокислое серебро. Затем снова вводился
баритовый щелок. Усреднение вызывало образование осадков. Согласно Guha
и Drummond весь витамин Вх содержался в том осадке, который получался,
когда реакция раствора достигала рн= 6,5. Осадок этот они разлагали соля-
ной кислотой и удалив серебро получили препарат, который содержал 12,5 проц,
азота и на 85 проц, состоял из органического вещества. Достаточная ежеднес-
ная доза на крысу витамина Бд заключалась в 0,21 мг такого препарата.
Затем раствор этого препарата в 5 проц, серйой кислоте осаждался фосфорно-
вольфрамовой кислотой. Осадок извлекался 50 проц, ацетоном. После повторения
этого приема, новой обработки баритом и удаления бария, получился пре-
парат вдвое более богатый вит. В4, чем предыдущий. Этот препарат обрабаты-
вался абсолютным спиртом. К вытяжке добавляли спиртовой раствор хлористой
платины. При 24-часовом стоянии на холоду (при град. Цельсия) выпадал
осадок. Осадок обрабатывался сероводородом для удаления платины. Таким
образом удалось выделить очень деятельный препарат. Ежедневная доза обеспе-
чившая крысе все потребное ей количество витамина В1( равнялась всего 0,015 мг.
Добавим, что при всех подобных испытаниях крыс Guha и Drummond
прибавлен к корму витамины В, иные чем Вь в виде дрожжей прогретых при
101
120° Ц в щелочном растворе. Напомним, что согласно Williams, Waterman
и Gurin (1929) и Chicle и Roscoe (1930) нагревание при щелочной реакции
разрушает также и значительную часть витамина В2.
Последний прием очищения препарата заключался в добавлении к его
спиртовому раствору хлористого золота. Согласно Jansen и Donath образую-
щийся при этом' осадок состоит из чистого витамина Вх в соединении с золо-
той солью. Однако Guha и Drummond наблюдали, что такое осаждение ведет
к разделению физиологически деятельного начала на две самостоятельные
фракции. Фракция, связанная осадком, давала очень сильную реакцию Паули
и оказывала заметное положительное действие на рост молодых крыс, но
в дозах вдвое больших, чем предыдущий препарат. Фракция,
выделенная из раствора^ давала реакцию Паули очень слабо, и действие ее на
крыс не удалось различить. Дополнительные опыты на голубях показали, что
смесь обоих фракций обладает значительно болмшим действием, чем каждая
фракция, взятая порознь. А потому авторы предположили, что антинейритиче-
ский витамин Вх состоит из 2-х отдельных тел. Однако опыты на голубях
Guha и Drummond? нуждаются в оговорках. Авторы прибегли к так назы-
ваемой «пробе па излечение» (iCurativ test»). Голубям впрыскивали опреде-
ленную дозу каждой фракции, порознь и в смеси. Затем наблюдали прекра-
щение припадков полинейрита и отмечали сколько дней длилось предохрани-
тельное действие впрыснутой дозы. Деля вес единовременной вспрыснутой
дозы на число дней, получали величину ежедневной дозы. Так например,
после впрыскивания 0,028 мг фракции, полученной из осадка, голубь
в течение 6 дней не подвергался припадкам, после впрыскивания 0,072 мг
фракции, полученной из фильтрата,—в течение И дней, после впрыскивания
0,033 мг. смеси обеих фракций —13 дней. Авторы заключают, что еже-
дневные дозы фракций из осадка и из фильтратА оказались равными 0,0046
и 0,0065 мг, а таковые смеси обеих фракций 0,0025 мг. Допустимость
сравнения, основанного на подобном расчете, весьма спорна. Да и сама «проба
на исцеление» способ мало надежный. Guha и Drummond воспользова-
лись им как особо характерным для выявления действия антинейритического
витамина (Вх), но сами признают, что эта часть их исследования нуждается
в подтверждениях. Надо сказать, что вся совокупность данных Guha Drum-
mond свидетельствует в пользу предположения, что осаждение хлористым
золотом привело к разделению деятельного начала на 2 отдельных тела. Но
то, что эти тела суть фракция витамина Вх, не столь ясно. Не вполне исклю-
чена возможность того, что одно из тел являлось витамином Вх, а другое
одним из других факторов В, например, мало стойкими В3. Весовые количества
препаратов, выделенных из золотого осадка и фильтрата, были ничтожны.
Около 5 мг в первом и 7 мг во втором случае, а потому большая часть
сведений о химических свойствах касается предыдущих, уже весьма концен-
трированных препаратов.
Вплоть до разделения препарата на 2 фракции, Guha и Drummond
постоянно наблюдали очень резко выраженную красочную реакции» при доба-
102 —
влении реактива Паули. Но тогда как эта реакция служила Jansen и Donath
одним из доказательств присутствия глиоксаля, согласно Guha и Drummond,*
она могла быть вызвана гистидином. Заметим, что и Kinnersley и Peters
(1928) также наблюдали реакцию Паули своих антинейритических препаратов,
одпако при дальнейшем очищении связь между реакцией и физиологически
деятельным началом терялась. Guha и Drummond отмечали, что при сож-
жении их препаратов выделялся характерный запах алкаламинов. Отмечают
они также отсутствие в препаратах серы. Отрицательные результаты проб на
реактивы Милона, ксантопротеиновый и пуриновый х), привели их к за-
ключению, что витамин Вх не является ни пуриновым, ни фенольным произ-
водным. Второе утверждение необосновано, так как эти реактивы не обнару-
живают некоторых полифенолов, особенно когда последние находятся в сколько
нибудь значительном разбавлении. Также как и Eijkman (1927) при пробах
препарата Jansen и Donath's, они, испытывая фракцию, выделенную из осадка
с золотой солыо, наблюдали синюю радкцию с реактивом Folin и Denis's на
мочевую кислоту, но более слабую, чем ту, которую дает эта кислота в рас-
творе одинаковой крепости. Напомню {Безсонов 1925), что при пробах анти-
нейритического «пикрата» Seidell's я наблюдал, что с реактивом Фолин-
Дениса на мочевую кислоту получается окрашивание в три раза [слабее, чем
при испытании реактивом Фолина на фенолы. Этот последний особенно чув-
ствителен но отношению к полпфенолам.
Все только-что приведенные данные относятся К выяснению химического
состава антинейритического витамина Вх или G. Несколько лет тому назад
Funk, а затем и другие приводили указания в пользу того, что в отличие
от антинейритического витамина Вх, водорастворимый фактор роста, ныне
витамин В2 или G, не содержит азота. Надо однако добавить, что в то время
понятие о втором факторе В было мало выяснено, мало соответствовало совре-
менному понятию о витамине Ва или G, которые сейчас склонны отождест-
влять с антипеларгическим фактором Р. Р.
Как бы то ни было, работы последних лет согласно указывают на при-
сутствие азота в препаратах витамина В2 \Levene (1928), Chick (1929), Nars-
уапап и Drummond (1930)]. Оговорим, что препараты В2 этих авторов далеко
не были столь очищенными как препараты Вх и могли содержать следы этого
последнего фактора. Любопытное свойство препаратов В2 отмечают Sherman
и Sandels (1929) и Chick и Roscoe (2) (1929). Оказывается, что витамин
В2 не только мало растворим в крепком этиловом спирту, но когда кре-
пость спирта достигает 95°, он повидимому действует разрушительно
на этот витамин. При чем кислая реакция среды, которая обычно предохра-
няет витамин В, в данном случае способствует разрушению \Chick и Roscoe
(2) (1929)].
Как выше указывалось, исследования, посвященные «биосу», дали пока
противоречивые результаты. Отождествить «биос» с каким-либо определенным
Какой,именно—не указано.
— 103 —
витамином В пока невозможно, но принадлежность этого водорастворимого
начала, способствующего быстрому размножению дрожжей к группе вита-
минов В, очень вероятна. Указания последних работ относительно химиче-
ской характеристики «биоса» весьма различаются между собой. [Eddy,
Kerr и Williams (1924) (1926); Williams, Wilson и Von der Ahe (1927);
Williams, Warner и Roehm (1929), Eastcott (1928), Narayanan (1930)].
Однако все Соглашаются с тем, что органические соединения, одно или
два. которые являются «биосом», содержат азот. Наиболее сильный по действию
препарат биоса был выделен из дрожжей Naraynan, он содержал 15,6 проц,
азота и давал резкую реакцию с реактивом Паули. Н так в общем выводе надо
признать, что присутствие азота в молекулах тех тел, окторые входят в состав
группы витаминов В, хотя и не доказано окончательно, но чрезвычайно веро-
ятно. Любопытно обметить, что азот этот не принадлежит к аминогруппам.
Доказывали это тем, что обработка азотистой кислотой (HNO2) не уменьшала
физиологического действия (испытания на крысах) смеси витаминов 1>х и В2
[Mac-Collum и Simmond (1918)] антинейритических препаратов Bi [Peters
(1924) и препаратов Ва (Chick 1929)]. Такая же обработка очень незначи-
тельно отражается и на биологических свойствах «Биоса» Narayanan (1930).
Данные, которыми ныне мы располагаем относительно природы вита-
мина В, принуждают относиться с недоверием к новой попытке выделить
в чистом виде и химически охарактеризовать этот витамин. Данные эти вполне
подтвердили уже ранее имевшиеся указания на двойственность природы вита-
мина В [Безсонов (2) 1924]. Более того, ныне выясняется, что действие одного
из тех отдельных факторов, на которые распался прежний витамин В, воз-
можно лишь в присутствии, хотя бы в небольших количествах, другого
фактора.
,, Так, типичное действие витамина Вх—антинейритического витамина,
предупреждающего и излечивающего нервные припадки птиц и крыс, явно
и полно проявляется лишь, когда в пище имеются следы витамина В2—фак-
тора роста, растворимого в воде (вероятно, тождественного с антипелагриче-
ским фактором Р.Р.) и обратно. Очевидно, что работу по выделению в чистом
виде одного из факторов В надо сопровождать опытами над животными, в пище
которых имеется также и другой фактор В. До сих пор при работах этого
рода такую сноровку не применяли. Этим, повидимому, объясняется неуспех
всех попыток дать химическую характеристику вит. В и противоречия в пред-
положениях о его химической природе. Сумма всех полученных до сих пор
данных позволяет лишь указать, что витамины В являются органическими
соединениями. Эти соединения, в особенности витамин Bj—антинейритический
фактор, очень нестойки: нагревание до 100° Ц на воздухе, до 120° Ц в авто-
клаве ускоряет разрушение антинейритического фактора. Устойчивость воз-
растает по мере увеличения кислотности среды. Многочисленные указания на
такое влияние реакции среды содержались уже в прежних работах, ныне они
дополнены рядом исследований. Очень показательна работа Sherman’a. и
Burton’a, в 1926 г.
104 —
Единицей витамина В служила им ежедневная дача испытуемого веще-
ства, достаточная, чтобы предупредить потерю в весе молодых крыс, получав-
ших пищу, лишенную лишь витаминов В. Срок испытания был 8 недель.
Как можно видеть, испытывалось главным образом влияние вит. В2—фактора
роста. Крысы быстро реагируют на отсутствие в пище этого фактора, но
потребность их в антинейритическом витамине Вх проявляемся слабее, чем
у птиц. Вплоть до последних лет она оставалась незамеченной, считалось, что
витамин В проявляется на крысах и нужен им лишь, как фактор роста, Sher-
man и Burton употребляли в своих опытах, как источник витаминов В,
свежий сок помидоров. Подобно всем другим, доселе известным естественным
источникам вит. В, сок помидора содержит оба вит. В. Сравнительно краткий-
срок опыта—8 недель—при малой потребности крысы в антинейритическом
факторе В п наличии этого фактора в исходном материале объясняет, что в этих*
опытах измерялось преимущественно влияние В2—фактора роста.
Sherman й Burton прибавляя на холоду к свежему соку помидоров воз-
растающие дозы слабого раствора едкого натра, устанавливали рн сока и под-
вергали все образцы часовому и 4-часовому нагреванию при 100° Ц, после
чего снова измеряли рн соков. Затем все образцы соков усреднялись НС1
перед дачей их животным. Основной единицей являлось то количество свежего,
нагретого и неподщелоченного сока (рн =4%3), которое, добавленное к пище крысы,
обеспечивало животное от падения веса в течение 8 недель. Содержание вит. В
в таком соке принималось в 100%. В соответствии с разрушением вит. В
в соках, гретых и подщелоченных, требовалось их все большие количества,
чтобы достичь постоянства веса в течение 8 недель. Отношение этих коли-
честв к количеству свежего сока позволяло определить в % потерю вит. В
в гретых соках. Когда разрушение вит. В превышало 70%, дальнейшее изме-
нение становилось практически трудно выполнимым.	•
Результаты опытов Sherman’ и Burton’a выражены в следующей
таблице:
	Реакция среды	Разрушение вит. (Вр Ва) в процентах			
		Нагревание 1 час при 100° Ц		Нагревание 4 часа при 100° Ц	
	4,3	около	9	20	
	5,2	»	10	31	
	7,9	п	32	70	
	9,2	п	66	—	
Данные, которые относятся к 4-часовому нагреванию, особенпо яснсг
показывают, что не только уменьшение щелочности вплоть до нейтральной
реакции, но также и увеличение кислотности уменьшает скорость разрушения
вит. В. Иначе говоря, разрушение вит. В обратно пропорционально концен-
105 —
грации водородных ионов, при чем это одинаково справедливо по обе стороны
точки нейтральности.
Однако опыты эти не указывают точно какой именно витамин В разру-
шался в этих условиях. Разрушительное влияние щелочности среды на анти-
невритический витамин В, хорошо установлено рядом исследований. Выяснено,
что проявляетея оно весьма быстро уже при обыкновенной температуре
(20 —25 градусов Цельсия) и притом даже в отсутствии кислорода. ч Такого
рода чувствительность к щелочи точнее к уменьшению содержания в среде
Н попов, можно признать одним из характерных свойств молекул витамина Вг
Витамин Ва значительно более устойчив не только к нагреваниюАно и к дей-
ствию щелочной реакции. Выясняется однако, что и по отношении» к В2 раз-
рушительное действие среды, обогащенной ионами ОН, проявляются весьма
отчетливо. Williams, Watermann и Gurin (1929) давали крысам витамин В2
в виде препарата Seidell's,, а В2 в виде различно обработанных дрожжей.
Прогревая дрожжи 6 часов при 120 ° Ц они убедились в том. что когда реак-
ция была сильно кислой рн=2, разрушения В2 не происходило. Отдель-
ный опыт показал, что и Вх в значительной доле сохраняется в этих усло-
виях. Когда реакция среды оставалась определенно кислой, рп нп.нпже
4,5, разрушение витамина В2 оставалось незначительным. Витамин Вх разру-
шался более, но не вполне. Но когда прп нагревании применили они щелочную-
реакцию (рн=8 и 14), оба витамина В были нацело разрушены. Очень под-
робное исследование на крысах стойкости витамина В2 провели Chick и Roscoe
(1930) пользуясь как источником витамина В2 препаратом Петерса. Источником
В2 служили им не только цельные дрожжи, но п уксуснокислая вытяжка из
дрожжей, так как выяснилось, что долгое прогревание дрожжей особенно при
щелочной реакции, вызывает образование вредных для крыс веществ, возбу-
дителей поноса. Согласно опытам Chick и Roscoe, 24-часовое нагревание при
100° Ц и рн =5 сохраняет целиком Ва, 5-часовое при 123° Ц и той же реак-
ции рн — 5 разрушает половину всего количества В2. Такие же прогревания,
но при щелочной реакции (рн=8,3) ведут к разрушению половины В2 в пер-
вом и трех четвертей, во втором случае. Выяснилось также, что десятидневное
хранение при комнатной температуре (около 25° Ц) и резко шелочной реакции
(рн ==10) ведет к потере одной трети витамина Ва.
Влияние витаминов В на усвоение глюсидов (углеводов), белков
и жиров
В прошлом обзоре [Безсонов, 1924 (2)] лишь кратко были упомянуты
некоторые фактические данные относительно пониженной метаболии сахаров
и понижения дыхательного коэффициента при авитаминозе В. Теории, построен-
ные в связи с этими и ряд»м других утверждений, не были изложены. Фак-
тические данные, на которых они основывались, частью смутны, частью стояли
в неразрешимом противоречии с данными других авторов. Вопрос далек и ныне
от выяснения. Но многочисленные, порой весьма тщательные, исследования,
106
которые были посвящены укреплению п проверке этих теорий, вынуждают
привести тс главные новые фактические сведения, которые были ими добыты,
и кратко упомянуть теории, которые их вызвали. Два основных варианта этих
теорий можно изложить следующим образом:
1) Авитаминоз В ведет к понижению окисляющей способности живых
тканей и самих клеток, выражаясь точнее, понижению В.Н2 (давление реду-
цирующего водорода) живой ткани. Это влечет за Ообой понижение дыхатель-
ного коэффициента животного, а также способности сжигать сахара. Основной
причиной явления предполагается уменьшение деятельности окислительных
энзим.
2) Авитаминоз В понижает дыхательный коэффициент животного не
более, чем общее голодание, но он ведет к полной неусвояемости сахаров. Роль
витамина В почти исключительно связана с метаболией сахаров в организме:
сахара могут усваиваться лишь при наличии в пище В. [Мадпе и Simonnet,
1922, М-те Randoin и Simonnet, 19.24, М-те Rundoin и Lecoq (1)
1927)|.
Новые исследования выяснили частью несостоятельность самих данных,
которые служили основой этих теорий, частью — пеприложимость их к выво-
дам, облеченным в такую форму. Но опытная поверка этих теорий, способ-
ствуя выяснению истинной роли витамина В в процессах обмена веществ,
представляет значительный интерес.
Drummond и Marrian, 1926, применяя весьма разработанную технику,
посвятили обширное исследование проверке противоречивых данных о влиянии
витамина В на способность живой ткани окисляться (на ее Pi. [Н2]).
Авторы испытывали грудные мышцы голубей и мышцы ног крыс, про-
мытые и не промытые. Мышцы брались у здоровых голубей и крыс и у голу-
бей, умиравших от полинейрита, и крыс, которые обнаруживали характерные
признаки авитаминоза В. Способность к самоокислению этих мускулов (их
В. [Н2]) измерялась восстановлением метиленовой синьки, следуя технике Thun-
berg'a 1920).
R. [Н2| промытых мускулов определялся в присутствии искусственного
«метаболита» — раствора янтарнокислого калия.
Многочисленные измерения показали, что мышцы здоровых и авитами-
нированных по В животных обесцвечивают синьку е равной скоростью. При-
бавление к мышцам вытяжки дрожжей нисколько не усиливало окислительную
способность самих мышц. В этом случае небольшое ускорение в обесцвечива-
нии синьки происходило исключительно за счет собственной восстановительной
способности вытяжек дрожжей.
Необходимо заметить, что, хотя метиленовая синька хорошо позволяет
измерять hi vitro каталитические способности различных отдельных живых
клеток (Quastel, 1926), попытки использовать ее для измерения различий
между больными и здоровыми тканями до сих пор не давали ясных разуль-
татов. Но еще менее применим другой индикатор, использованный .Hess'ом
(1921 (2), 1922, 1923] для доказательства понижения R. [Н2] тканей при
107 —
авитаминозе В, а именно, метадинитробензол (нитрофенил гидроксил амин). Та
реакция, которую он дает, в отлитие от реакции метиленовой сини, необратима.
Согласно Clark’a (1925) и Саппапа, Сокеп'а и Claris а (1926), такого рода
индикаторы в настоящее время не могут применяться к биологическим изме-
рениям. В виду спорности результатов, полученных с помощью цветных инди-
каторов, лишь, прямое измерение поглощения кислорода изолированными участ-
ками тканей могло дать решение вопроса.
Абдергальден и его сотрудники опубликовали в 1920, 1921 и 1922 годах
ряд наблюдений, свидетельствующих о пониженном потреблении кислорода
голубями, получавшими [очищенный от шелухи рис. Таково же заключение
Shinoda (2), 1924), основанное, впрочем, на данных весьма мало убедительных.
Между тем тщательное исследование Roche (1925) показало, что изолированная
ткань голубей,' больных полинейритом и голодающих, обладает равной способ-
ностью поглощать кислород. Dnimmond и Marrian (1926) повторили опыты
Roche в очень точных условиях, использовав значительно усовершенствован-
ный ими аппарат Баркрофт-Хальдана. Полученные ими данные вполне
подтверждают данные Roche и опровергают прежние Абдергальдена и Shi-
noda. Затем Drummond и Marrian (1926) проверили на крысе поглоще-
ние кислорода самим животным. Опытам подверглись крысы, получавшие
нормальный корм, крысы, получавшие корм, лишенный витамина В, и
голодающие крысы. Параллельно отмечались температура тела и общий вес.
Одна серия голодающих крыс не была совершенно лишена пищи, но полу-
чала дозу нормальной пищевой смеси, которая содержала и витамин В,
значительно меньшую потребной, а именно 1 г на 10 г веса животного
в день. Заметим, что первое проявление авитаминоза В заключается в резком
падении позыва к пище, что ведет фактически к частичному голоданию-
Таким образом, достигалась приблизительная параллельность условий питания
между крысами, которые получали витамин В, но были подвергнуты частич-
ному голоданию, и крысами, получавшими вволю пищу, лишенную вита-
мина В. Потребление кислорода понижалось в одинаковой степени у жи-
вотных, частично голодающих и лишенных витамина В. Небольшое различие
наблюдается лишь между крысами, которые подвержены полному голода-
нию, и крысами, не получающими витамина В. Резкое падение веса тела,
сопровождаемое столь же резким понижением температуры тела, равно наблю-
дались незадолго до кончины у голодающих и лишенных витамина В крыс.
Значительное повышение температуры окружающей среды вызывало у тех
и других кратковременное, но резкое повышение потребления кислорода. Наблю-
дения эти ясно указывают, что понижение потребления кислорода не находи-
лось в связи е авитаминозом В. Отсутствие такой связи подтверждается еще
следующими данными: одна серия крыс получала в пищу лишь ежедневную
дозу в 0,5 г вытяжки дрожжей, другая была подвергнута полному голоданию-
Падение температуры тела в конце опыта, что соответствовало понижению
потребления кислорода, содержание сахара в крови и продолжительность жизни
обеих серий оказались одинаковыми.
108 —
Некоторые авторы указывали, что температура тела и потребление кисло-
рода у голубей, лишенных витамина В, повышается при введении ничтожных
доз вытяжек дрожжей. Согласно Drummond's и Martian's, в этих случаях
повышение поглощения кислорода вовсе не означает, что было достигнуто повы-
шение межклеточного дыхания тканей под влиянием витамина В.
В желудках птиц, истощенных полинейритом, обычно накапливаются
остатки непереваренной пищи. Введение вытяжки дрожжей влечет частичное
усвоение этих пищевых остатков. Повышение потребления кислорода, кото-
рое наблюдалось авторами, получается за счет сгорания. Вводя вытяжку дрож-
жей голубям, которые были длительно лишены витамина В, Drummond и Mar-
tian либо нс наблюдали вовсе, либо наблюдали очень ничтожное повышение
температуры тела. Но когда они вводили сахар, температура тела медленно, но
стойко повышалась на несколько градусов, и достигнутое повышение сохраня-
лось в течение нескольких часов.
Работы Mattil’s (1) (2) (1923) и Eggleton's и Gross’s (1925) указы-
вают на постоянное повышение дыхательного коэффициента крыс, лишенных
витамина В, при введении в них сахаров. В частности, при введении сахарозы
коэффициент повышался от 0,75 до 0,9 и более.
Эти последние данные подтверждают отсутствие непосредственного влия-
ния витамина В на ход внутриклеточного окисления.
Роль сахаров в авитаминозе В и техника исследования этого
авитаминоза
Излишне разбирать те старые работы Braddons и Cooper's (1914) и
Funk’s (1914), с одной стороны, и Vedder's (1918), с другой, посвященные
вопросу о том, существует ли определенное отношение меж^у количеством вита-
мина В в пище и метаболией глюсидов (углеводов). Теория, оформленная
Me Garrisons’» (1) (2) (1919), о несовершенном усваивании глюсидов, как
признаке авитаминоза В, была в последние годы значительно изменена и раз-
вита Simonnet и M-nfa± Random с их сотрудниками [Мадпе и Simonnet,
1922, М-те Randoin и Simonnet (1) (2), 1924, M-те Randoin и Lecoq
(1), 1927)].
Весьма вероятно, что полное усвоение сахаров, равно и другйх пищевых
веществ, достигается лишь при наличии известного предельного количества,
витамина В в пищевой даче (Plimmer, Rosedale и Raymond 1927, Л. А.
Черкес и другие авторы). Но Simonnet и М-те Randoin не ограничиваются
таким допущением.«4)ни полагают, что в отсутствии витамина В внутриткане-
вая метаболия сахаров совершенно прекращается, что явление это наблюдается
лишь с сахаром, и что наличие неизменного сахара в крови и тканях живот-
ного является главной причиной болезненных явлений, которые сопровождают
авитаминоз В.
Помимо уже приведенных, ряд других данных (работы Drummond's.
и Martian's, 1926, а также Reeder's и Drummond’s, 1926, и Eon's и
Drummond's, 1927) несовместимы с такой теорией. Но ранее, чем изложить
109 —
эти данные и те выводы, к которым они приводят, отметим кратко одну из
основных ошибок опытов Simonnet'^ и М-те Randoin. Отмечая порой те
несообразности, к которым эта ошибка приводит, английские авторы оставляют
•ее без разъяснения, а потому часть противоречий опытных данных остается
непонятной.
Ошибка эта очень типична для настоящей стадии исследования витами-
нов. Она выявляет одну из главнейших трудностей техники таких исследова-
ний в наше время — составления основной пищевой дачи, которая не содер-
жала бы следов испытуемого витамина.
Предположив, чЛ обычный корм голубей при опытах по авитаминозу В —
«чищенный от шелухи рис — неполно обеспечивает их потребности. Simonnet
и М-те Randoin прибегли к* сложным пищевым смесям [Мадпе и Simonnet,
1922, Randoin и Simonnet. 1924, (1) и (2)|. Особенностью их смесей является
неизменное присутствие в них от 66% до 71% картофельного крахмала и около
16% белковых тел —казеина и промытых мышц.
Крахмалистый эндосперм различных зерен всегда доселе оказывался
лишенным витамина В. Очевидно авторы считали, что всякий крахмал лишен
•его. Между тем наличие витамина В в мякоти картофельных клубней давно
установлено. Хорошо также известна способность витамина В прочно прилипать
(адсорбироваться) к дисперсоидам — в данном случае к зернам крахмала —
и трудность целиком отмыть адсорбированный витамин В. Картофельный крах-
мал, а отчасти и казеин и мышцы должны были вносить витамин В в пище-
вую дачу авторов. Собственные данные авторов наглядно подтверждают это
•предположение. В опытах Randoin и Simonnet'^ (1924) голуби, которые полу-
чали корм такого типа — без добавления витамина В —жили до 3 месяцев;
между тем, когда картофельный крахмал заменялся рисовым, голуби быстро
гибли от полинейрита. Авторы объясняют это предположением, что рисовый крах-
мал легче картофельного гидролизировался в пищевом тракте, и поступившая
в кровь глюкоза, согласно их теории, способствовала развитию поли нейрита-
Коп и Drummond (1927) с удивлением отмечают это предположение.
Заметим, что согласно данным самого Simonnet (Tiger и Simonnet,
1921), подтвержденным Bickel'an в 1922 и -йлт’ом и Drwnonnd^ 1927,
панкреатическая железа и кишечник голубей, подвергнутых авитаминозу В,
продолжают проявлять усиленную амилолитическую деятельность. Заменяя кар-
тофельный крахмал основной дачи различными сахарами, Simonnet и Ran-
doin наблюдали быстрое развитие полинейрита и заключали о связи вита-
мина В с метаболией сахаров. Приведем один из последних таких опытов
(М-те Randoin и Lecoq, 1927); он наглядно выявляет, что не особое дей-
ствие сахаров, а присутствие или отсутствие случайных примесей витамина В
влияли на развитие полинейрита.
В этом опыте голуби получали основную дачу М-те Randoin и Simon-
net’a, при чем в составе дачи картофельный крахмал заменялся и другими
глюсидами. При введении в дачу: 1) моноз: глюкозы, левулозы, галактозы —
продолжительность жизни достигала 28 дней, 2) биос: мальтозы и саха-
по —
розы—25 дней, лактозы—50 дней и 3) полиоз: гликогена, декстрина, рисового
крахмала — 30 дней, картофельного крахмала —60 дней, инулина — 40 дней.
Как можно видеть, кроме двух крахмалов, которые были получены из
корнеплодов, богатых витаминами В, один лишь истинный сахар—лактоза —
способствовал значительному удлинению жизни голубей. Такое действие лактозы
удивило авторов, и они не знали, как связать его с химическим’ ее строением.
Но свойство лактозы (которая получается из молока) — жадно адсорбировать
и стойко удерживать витамин В — уже отмечалось в предыдущем обзоре [Без-
сонов, 1924 (2)]. Еще в 1917 году Drummond, говоря о таком ее свойстве
назвал лактозу вектором витамина В. Отметим, наконец^ что, хотя легче уда-
лить витамин В из казеина, да и вносится его менее, чем картофельного
крахмала — все же и казеин есть возможный источник введения витамина В
(Freedman и Funk, 1922).
Коп в 1927 г. применил в опытах над голубями пищевую дачу типа.
Randoin-Simonnet'b, но в которой картофельный крахмал был заменен рисо-
вом, а белки вводились в виде 16% казеина. Наибольшая продолжительность
жизни достигала 40 дней — всего на 10 дней превосходя таковую на корме
очищенным рисом. Но большая часть голубей совершенно не заболевала судо-
рогами и параличом, характерными признаками полинейрита, а значительная
часть заболевших излечивалась сама без помощи извне. Между тем проверка
па 24 голубях, получавших очищенный рис, дала 60% случаев припадков,
полинейрпта и ни одного случая самопсцелеппя. Коп заключает о невозмож-
ности применять корм такого типа для измерения витампна В путем излечения
припадков полинейрита. Добавим, что его данные указывают на большую веро-
ятность внесения витамина В казеином. Заметим также, что критика корма
голубей очищенным рисом при опытах на витамине В более основана на умо-
зрении, чем на опытных данных. Голуби безболезненно переносят 3-месячное
пребывание на корму, который состоит лишь из очищенного риса с добавкой
препарата витамина В. Такой срок вполне достаточен для опытов по авитами-
минозу В. Дальнейшее улучшение рп&вого корма легко достигнуть добавлением
липовитаминов. Нерастворимость витамина В в растворителях этих витами-
нов— в чистом бензоле и в безводном чистом этиловом эфире и других—легко
позволяет избежать загрязнения основной дачи витамина В. Но существовало
препятствие более общее, на пути к выяснению истинного характера особен-
ностей обмена веществ при авитаминозе В.
Препятствовало такому выяснению то, что почти все исследования такого
рода велись путем сравнения животных, лишенных продолжительное время
витамина В, либо со здоровыми, получавшими вволю нормальный корм, либо
с подвергнутыми длительному голоданию.
Между тем немедленное и резко выраженное падение аппетита всегда,
сопровождает авитаминоз В. Оно усиливается по мере продления опытов.
Попытка искусственного питания ведет к рвоте и к выделению в испражне-
ниях совершенно непереваренной пищи (Drummond и Marian, 1926, Коп
и Drummond, 1927).
Ill
. Какова бы ни была первопричина этого явления, но фактически при
длительном авитаминозе В наступает состояние частичного голодания. Помимо
изменений, вызванных авитаминозом, не могут не происходить также измене-
ния в общей метаболии, причиной которых является лишь частичное голодание
само по себе. А потому сравнение метаболии животных, подвергнутых авита-
минозу В и здоровых, приводит к решению одного уравнения с двумя неизвест-
ными. Столь же неправильно сравнение их с животными, подвергнутыми пол-
ному голоданию. При авитаминозе В аппетит падает, но не исчезает вовсе,
пища потребляется до последнего дня жизни животного. Она не только потреб-
ляется, но и переваривается. Сохранение способности к деятельности пищева-
рительных желез в конечных стадиях авитаминоза В засвидетельствовано
опытами (Tiger и Simmonet, 1921, Rothlin, 1922, Bickel, 1922, Апгер и
Drummond, 1921, Covgill и Mendel, 1921). Им противоречила попытка Far-
mer’^ и Redenbaugh'd, (1925) доказать, что авитаминоз В ведет к прекраще-
нию и уменьшению деятельности амилазы, липазы и протеазы голубя. Она
опровергнута исследованием Ко п г, и Drummond's., 1927. Итак, в течение
авитаминоза В стадия полного голодания не проявляется.
Нельзя изучать действия авитаминоза В, сравнивая его с авитаминозами
полного голодания, еще и потому, что такое голодание является в сущности
также авитаминозом В.
Вит. В, в отличие от жирных витаминов, сохраняться в организме не
может. Он должен вводиться извне каждые 24 или 48 часов. Период пол-
ного голодания, который ведет к смерти животного, охватывает значительно
больший срок, в течение наибольшей его части животное фактически подвер-
жено авитаминозу В.
Типичные признаки полинейрита наблюдались у голодающих голубей,
но лишь тогда, когда жизнь их была продолжена насильственным введением
воды сверх того количества, которое голуби поглощали добровольно (Chamber-
lain, Blombourgh и Kilbourne, 1911, C.amberlain и Vedder, 1911, Eyk-
man и van Hoogenhuyze, 1916).
Заметим, что Л. А. Черкес, 1922, 1923, и другие авторы не наблюдали
припадков полинейрита у голодающих голубей. Но, как замечают Л. А. Чер-
кес, Drummond и Marian, смерть животных в этих случаях возможно
наступала ранее, чем успевали развиваться внешние признаки полинейрита.
Итак, сравнение с живо.ними, получающими вольную нормальную пищу,
или с голодающими животными равно не подходит для точного изучения
особенностей влияния на организм авитаминоза В. Такое изучение становится
возможным, когда для cpai нения пользуются животными, которые получают
ту же основную дачу, что и подвергнутые авитаминозу, но с добавкой вита-
мина В, при чем такой нормальный корм дается не вволю, а в количествах,
соответствующих тем, которые добровольно поглощают животные, лишенные
вит. В.
При этих условиях сравниваются животные, которые подвержены вы-
нужденному частичному голоданию, но получающие витамин В, с животными,
112 —
которые вследствие авитаминоза В и вызванного пл уменьшения аппетита
испытывают то же частичное голодание, но лишены витамина В.
Такой способ исследования был впервые кратко намечен Gulick’w,
1922, затем он был подробно развит и широко использован Коп’ом и
Drummond'oyi, 1927.
Авторы тщательно определяли количество пищи, которое добровольно
потреблялось каждый день опыта голубями, получавшими основную дачу,
лишенную вит. В. Такое же Количество пищи давалось голубям равного
веса, которые получали тот же основной корм, но с придачей 1 г сухого
остатка вытяжки дрожжей. Кривые падения веса тела строго совпадали в
обоих случаях, так же как и постепенное понижение температуры. Резкое пони-
жение температуры наблюдалось у лишенных вит. В голубей лишь во время
нервных припадков полинейрита. Никаких указаний на особое влияние вит. В
на метаболию глюсидов (углеводов) не было получено. Содержание сахара
в крови голубей обеих групп оказалось одинаковым. Была установлена оди-
наковая степень деятельности амилазы голубей, убитых во время полинейрн-
тического припадка, и контрольных.
Как основной и наиболее быстро проявляющийся признак авитаминоза В,
Коп и Drummond указывают на падение позыва к пище, которое неизбежно
влечет голодание.
То, что существует непосредственная зависимость между авитаминозом В
и падением аппетита, было уже ранее установлено Л. Lumi&re’w, подтвер-
ждено Bierry и Kollman (1928) и сомнений не вызывает. Но относительно
влияния витамина В на усвоение сахаров, опыты па голубях Drummond’^,
не внесли ничего нового. Они лишь подчеркнули одну из причин тех явных
противоречий, которые были отмечены на сводке данных Stucky и Rose (1929)
по этому вопросу. Drummond не мог установить, что авитаминоз В вызы-
вает сколько-нибудь явное повышение титра глюкозы в крови больных поли-
невритом голубей. Но дело в том, что и в случаях, когда такое повышение
авторы считали установленным, выражалось оно ничтожными величинами.
Величины очень близки тем отклонениям, которые встречаются при просмотре
анализов крови не одного, двух, а свыше десятка здоровых, получавших
хороший корм, голубей. Очевидно, что таким путем трудно было получить
достаточно убедительное доказательство тому, влияет ли витамин В на усвое-
ние сахаров. Лишь благодаря использованию новых приемов исследования
удалось в настоящее время выяснить, что такое влияние несомненно суще-
ствует. Sure и Smith (1) (2) (1929) и в особенности Lepkovsky, Wood
и Evans (1930) смогли вполне наглядно показать зависимость между авита-
минозом В и повышением титра глюкозы в крови. Исследования их были
выполнены над крысами.. Наблюдения охватывали длительный период авита-
миноза. Авитаминоз не означал, как обычно в подобных опытах, отсутствие
обоих витаминов В, а лишь лишение животн&х, полное или частичное, одного
антинейритического витамина Br Sure и Smith подвергли испытаниям две
крупных партии крыс. Основной корм был тот же, но одна партия получала
113 —
вдобавок прогретые в автоклаве дрожжи — следовательно была лишена Вп
другая — те же дрожжи непрогретые. Многочисленные пробы глюкозы крови
крыс обеих партий, показали, что титр ее возрастает под влиянием авита-
миноза Вх. За несколькими исключениями разница титров между обеими груп-
пами не была выражена с большой резкостью. Но, так как из 15 авитамини-
рованных крыс десять показали явное его возрастание, нельзя объяснить это
действием случайных причин.
Достоинство данных Sure и Smith несколько ослаблено тем обстоя-
тельством, что они не ограничивали дачу корма свидетелей, а потому влияние
частичного голодания авитаминированных крыс оставалось не учтенным.
То, что причиной возрастания титра глюкозы в крови крыс является не частич-
ное голодание, а недостаток в Вх, вполне удалось доказать последовавшей
затем работе Lepkovsky, Wood и Evans (1930).
Главный интерес работы Sure и Smith (1) (2) (1929) заключен в проверке
настоящего значения тех цифр, которые, казалось, указывали на повышение
титра глюкозы в крови авитаминозных крыс. Известно, как всегда спорен
вопрос о том, в какой мере полученные при титровании крови цифры соответ-
ствуют истинной глюкозе, удалось ли, например, полностью изъять вещества,
которые, обладая восстановительными свойствами, не являются сбраживающимися
сахарами. Один из наилучших, обоснованных способов окончательной очистки
крови без удаления сбраживающихся сахаров, выработан Samoggi (1929).
Sure и Smith (2) (1929) титруя глюкозу с помощью K3Fe/CN/e, по микро-
методу Folin (2) (1928), в ряде параллельных определений прибегли к допол-
нительной очистке крови по Samogqi. Таким образом, один ряд их чисел
соответствовал «истинному» содержанию глюкозы, другой — «кажущемуся»,
т.-е. глюкозе 4-иные вещества восстановители. При сравнении обоих рядов
оказалось, что влияние авитаминоза Вх проявляется наиболее явно не увели-
чением содержания в крови истинной глюкозы, а в том, что кровь обогащается
иными телами — восстановителями—в том числе глютатионом. В крови авита-
минозных крыс содержание истинной глюкозы оказалось не выше, а во многих
случаях ниже нормального.. Такое понижение резко обнаруживалось в конце
длительного авитаминоза, но часто наблюдалось и ранее. В виде дополнитель-
ного доказательства Sure и Smith указывают на то, что из 44 юных, авита-
минозных крыс, у 17 они смогли наблюдать болезненные признаки недостатка
глюкозы в крови (гипоглисемии). Хотя Sure и Smith и утверждают, что
зависимость между усвоением углеводов (глюсидов) и авитаминозом Вх ими
доказана, но с этим трудно согласиться. Особое влияние авитаминоза Вх на
повышение титра глюкозы крови было ими установлено далеко не бесспорно.
Но даже если признать, что его наличие они доказали, надо было подтвердить,
что явление связано именно с процессом усвоения сахаров. Ведь согласно их
собственным данным повышение титра означало обогащение крови не глюкозой,
а иными веществами, восстановителями. Особое значение работа Sure и Smith
приобрела лишь после того, как Lepkovsky, Wood и Evans (1930) смогли
выявить справедливость ее основных положений. Превосходно задуманное
Вптавааы.	8
— 114 —
и выполненное исследование этих авторов впервые, повидимому, позволило
вполне наглядно установить, что авитаминоз В—а именно Вх—несомненно
оказывает влияние на ход усвоения глюкозы. Как основу своих опытов авторы
избрали принцип пробы на «терпимость» к глюкозе юных крыс. Сравнитель-
ная проба «терпимости» состояла в введении глюкозы в кровяной поток крыс,
лишенных Bj, и тех, которые его получали. Непосредственно затем они одно-
временно производили ряд определений содержания глюкозы в крови обеих,
групп. К'такому способу пытались уже однажды прибегнуть Eggleton
и Gross (1925), но в те времена им не удалось избежать весьма существенных
ошибок в проведении самих опытов.
Главное преимущество способа заключается в его чувствительности.
Всякое нарушение правильного усвоения сахаров отражается в данном случае
очень значительными изменениями титра глюкозы в крови. Доказательность
полученных Lepkovsky’w данных еще значительно увеличилась благодаря*
тому, что после каждого впрыскивания глюкозы производилось, одно за другим,
не менее четырех определений содержания в крови глюкозы. Кровь брали из
хвоста крыс немедленно после введения в кровь глюкозы и в течение после-
дующих 24-х часов. Перед впрыскиванием глюкозы крыс подвергали 12-часо-
вому голоданию. Через несколько дней пробы повторялись на тех же крысах,
охватывая длинный период авитаминоза. Кроме основного корма, лишенного'
витаминов В, все крысы получали большую дозу прогретых в автоклаве дрожжей.
Дрожжи эти были лишены Вр но содержали достаточную дозу В2. Одна группа
крыс получала вдобавок 0,5 г свежих дрожжей бедных витамином В,
и, следовательно, испытывала частичный авитаминоз Въ другая группа—свиде-
тельская, получала 0,5 г дрожжей богатых витамином Вг Позыв к пище,
авитаминозных крыс был значительно слабее, чем у крыс свидетелей. А потому,
учитывая указания Drummond’s,, количество пищи,которое давалось свидетелям,
уравнивалось с тем количеством, которое соглашались добровольно поглощать
авитаминозные крысы того же веса. Выяснилось, что на 10-й, 12-й день
авитаминоза впрыскивание глюкозы ведет к особо резкому повышению ее-
титра в крови авитаминозных крыс. Тогда как у крыс свидетелей титр глюкозы
в крови после впрыскивания лишь редко достигал 150 мг на 100- кубиков
крови, у авитаминозных он доходил до 250, 350 и даже свыше 400 мг..
Однако, в течение начальных дней авитаминоза те повышения титра глюкозы,
которые наблюдались после впрыскиваний, были приблизительно того же
порядка, как повышения в крови крыс свидетелей. В конце длительного авита-
миноза, когда у крыс появлялись признаки бери-бери, разница обеих групп
в «терпимости» к глюкозе хотя и обнаруживалось, но слабее, чем в предыдущий
период. Авторы заключают, что авитаминоз В1( несомненно оказывает влияние
на усвоение сахаров, но что влияние это не является непосредственным, а Вто-
ричным. Авитаминоз В, производит какие то начальные изменения в организме,
которые в свою очередь ведут к ослаблению его способности сжигать сахар.
Цифровые данные работы Лепковского весьма убедительны. Зависимость,
между повышением после впрыскивания титра глюкозы в крови и авитами-
115 —
нозом Въ выявлена им очень наглядно. Но, согласно Sure, повышение под
влиянием авитаминоза В! титра глюкозы может быть «кажущимся» и вовсе
не соответствовать обогащению крови истинной глюкозой. Титр глюкозы опре-
делялся Лепковским исключительно по Folin (1) (1928). Он пользовался
каждый раз свежеприготовленной вольфрамовой кислотой, но к дополнительной
очистке крови по Samoggi не прибегал. Заметим однако, что Лепковский
определял титр непосредственно после впрыскивания в кровь глюкозы. А
потому, являлись ли те повышения титра глюкозы, которые он отметил,
«кажущимися» или действительными; они несомненно стояли в связи с ходом
усвоения глюкозы. Следовательно, и установленное им особое повышение титра
в известной стадии авитаминоза Вг несомненно отражало влияние авитаминоза
на процессы, которые сопровождают распад глюкозы внутри организма. Хотя
опыты Lepkovsky, Wood и Evans не разъяснили, каким именно образом дей-
ствует витамин Вх на усвоение сахаров, значение их все же очень велико, т. к*
благодаря им можно теперь считать окончательно доказанным,'что такое дей-
ствие существует.
Все вышеизложенные данные опровергают предположение о влиянии
вит. В на межклеточное дыхание и" его непосредственное участие в процессах
начального усвоения глюсидов в организме. В той определенной форме, которую
придали ей М-те Randoin и Simonnet, теория о метаболии глюсидов под
влиянием вит. В не подтвердилась, Но это отнюдь не значит, что витамин В
вовсе не влияет на конечное использование организмом глюсидов, равно,
впрочем, как и белков и жиров. Проследить его влияние на использование
конечных продуктов метаболии сахаров внутри самой клетки мы не можем.
Ускользает от нас также влияние вит. В на действие эндокринных желез,
как впрочем и участие этих желез в конечном использовании продуктов
метаболии пищевых веществ. Ныне пытаются облечь этот вопрос в следую-
щие положения {Cowgid, Smith и Beard, 1925, Beard, 1925, Plimmer,
Rosedale и Raymond, 1927 и другие):
1) нормальный корм характеризуется определенным числовым отноше-
нием между количеством вит. В и общим количеством калорий пищи, съеденной
животным.
2) отношение это изменяется в зависимости от качественного состава
калорий пищевой дачи.
Смотря по тому, состоит ли пища преимущественно из белков, глюсидов
или жиров, изменяется величина той наименьшей дозы вит. В, которая пре-
дохраняет от авитаминоза В.
Мы не можем пока точно указать на ту форму, в которой проявляется
влияние вит. В на ход усвоения пищевых веществ, но мы вынуждены допу-
стить существование такого влияния. Если наличие определенных отношений
между числом калорий пищи и дозой вит. В — отношения, различного для
качественно различных калорий, нуждается еще в подтверждении, то как
объяснить то, что состояние голодания является первым и основным призна-
ком авитаминоза В?
8*
— 116 —
Влияние витаминов В на усвоение белков
Влияние вит. В не только проявляется лишь по отношению к глюсидам,
(углеводам) но и тогда, когда пища состоит преимущественно из белковых кало-
рий. Вопрос несколько усложняется тем, что отдельные виды глюсидов и белков
различаются также и между собой по степени потребности в витамине В.
Необходимо также добавить, что в большинстве прежних опытов вит. В, пред-
ставленный дрожжами или вытяжками из дрожжей, рассматривался, как единое
вещество (Header и Drummond, 1926). Между тем нам теперь известно,
что в дрожжах присутствуют не менее двух, физиологически деятельных
начал — антинейритический вит. В1( фактор роста В2, или антипелагрический
фактор Р. Р. Вполне возможно, что каждое из этих 2 начал обладает собствен-
ным отличным от другого действием на усвоение белков, глюсидов и жпров.
Некоторые противоречия и неясности опытов связаны с этой двойственностью
вит. В, особенно в тех случаях, когда испытывали не дрожжи, а препараты
из дрожжей, пли когда противопоставляли результаты одного автора, получен-
ные на птицах более чувствительных к вит. Вх, с результатами другого
на крысах и мышах, потребность которых в вит. В2 более резко выражена,
чем в вит. В2.
Вредные последствия пищи, чрезмерно богатой белками, наблюдались
многочисленными авторами. Так, имеется ряд указаний, что корм крыс яичным
белком кур вызывает потерю шерсти (Harrts, 1923, Boas, 1924, Fried-
berger (1) и (2) 1926). Последний автор заметил, что, после свертывания
белка нагреванием его, общая токсичность возрастала. Но прогревание белка
с «железным сахаром» уменьшает его ядовитость. Корм вареным цельным
яйцом вызывал падение волос и остановку роста. Drummond, Crowden и Hill
в 1922 г. отметили остановку роста кошек и крыс, которые получали пищу,
богатую казеином, несмотря на, казалось, вполне достаточное обеспечение
животных всеми нужными витаминами и солями. Hartvell, 1921, кормя
матерей крыс такого рода пищей, наблюдала, что рожденные ими крысята
обнаруживают внешние признаки авитаминоза В. Опыты Desgrez и Bierry,
1921, £ад крысами указывали, что пища, богатая казеином, особо способ-
ствует ходу авитаминоза В. Опыты с яичным белком упомянуты в виду того,
что выпадение волос напоминает один из характерных признаков пелагры.
Но надо оговорить, что большая ядовитость такого белка — она в течение
от 2 до 7 дней ведет к смерти крыс и белых мышей (Friedberger, 1926,
Tscherkes, 1927) — едва ли может быть связана с наличием больших или
меньших количеств вит. В в корме.
Данные эти, совместно с опытами с казеином, позволяли лишь дога-
дываться о вероятном влиянии неизвестного начала, присутствующего в
дрожжах, на усвоение белков. Более точное указание было дано опытами
Л. А. Черкес над голубями в 1926, 1923 г. Оно было подтверждено и до-
полнено последующими наблюдениями над птицами и крысами (Л. А. Чер-
кес, 1926, Asada, 1923, Hartwell'я, 1924 и 1925, Reader'ъ и Drum-
— 117 —
mond’a, 1926, Hassan's и Drummond's 1927, Phmmer's, Rosedale's. Ray-
mond's, 1927 r.).
Приведем некоторые из наиболее характерных данных. Norris и Church
(1930) давали ежедневно молодым крысам изоамиламина до 56 сотых мг
на крысу или солянокислаго холина до 98 мг. Хотя эти основные амины
ядовиты, но столь небольшие дозы позволяли вести 8-недельные опыты.
Витамин В крысы получали в виде дрожжей. Одни партии получали
дрожжами 10% пищевой дачи, а другие 18%. Те крысы, которые получали
10% пищевой дачи дрожжами, росли плохо и проявляли характерные признаки
авитаминоза В—хотя эта доза должна была вполне обеспечить их потребность
в витамине В.
В тех случаях, когда доза дрожжей равнялась 18%, ядовитое действие
аминов ничем не проявлялось. Заметим, что присутствие изоамиламина и холина
наблюдается в кишечнике при усиленном белковом питании. Очень вероятно,
что тела эти образуются и при внутренней метаболии белков. Опыты Cowgill,
Smith и Beard, над взрослыми крысами, мышами и собаками (1925) при-
вели к определению витаминной постоянной, которая позволяет вычислить
количество вит. В, необходимое., для животного определенного веса, потре-
бляющего определенное число калорий пищи определенного состава.
Вот эта формула:
витаминная постоянная К
дневная дача вит. В (дрожжей)
двевв. потребл. калорий X “1“ веса
о
животного
Величина постоянной различна: 1) для различных источников вит. В,
2) для различных видов животных.
Так, в опытах авторов она была наибольшей для мыши, средней для
крысы и наименьшей для собаки. Формула не приложима к молодым расту-
щим животным.
Более простой формулой пользовались Plimmer, Rosedale и Raymond
в 1927 г.:
витаминная постоянная =
количество (дачи дневной) вит. В
дневное потреблевие калорий
при чем они пытались определить величину такой постоянной для 3 раз-
личных видов пищи,—богатой глюсидами, жирами, либо белками. Источником
глюсидов (углеводов) служил очищенный рис, жиров — масло хлопковых
зерен и незначительное количество трескового жира, белков — рыбья мука
(высушенные и растертые в порошок мышцы рыб). Источником вит. В явля-
лись смешанные с пищей сушеные дрожжи. Витаминная постоянная, назовем
ее' КВ, определялась по процентному содержанию в корму сушеных дрожжей
и по числу калорий, которые содержали 100 г данного корма. Так, пища,
которая содержала на 100 г 10 г дрожжей и 400 кал., соответствовала
постоянной ~.
— 118 —
Для опытов использовали однодневных цыплят начального веса от 32
до 42 г. Каждый из трех видов корма исследовали, добавляя к нему раз-
личное содержание дрожжей. Таким образом устанавливалось то отношение
количества вит. В к калориям данной пищи, которое еще обеспечивало
цыплят от явного заболевания авитаминозом В и гибели в продолжение
20 дней.
Состав жировой пищи был: жиров 22,6%, глюсидов около 50%, белков
около 15%. 100 г пищи содержали 481 кал. При такой пище жизнь
и рост цыплят были обеспечены, когда число калорий пищевой дачи, которое
приходилось на один грамм дрожжей, не превосходило 40. Иначе выражаясь,
ВИТ. В	1
когда КВ--------= -Гт-.
калории	40
Заметим, что при этом значении КВ рост цыплят был несколько
задержан, и оперение страдало. При более высоком значении КВ = опе-
рение было нормальным, и рост ускорялся; еще более ускорялся он
при КВ =
Состав глюсидной пищи был: глюсидов около 70%, жиров около 2,8%,
белков около 14%. 100 г пищи содержали от 362 до 368 кал. Пре-
дельная величина КВ принята равной-у, следовательно, лишь немногим
большая КВ жирной пищи = Но в действительности, величина эта несом-
ненно выше, так как при КВ = и даже по указанию самих авторов,
не только наблюдались признаки авитаминоза В, но и случаи смерти цыплят,
больных авитаминозом. Величина эта ниже , так как КВ — обеспечи-
вала вполне нормальный рост цыплят. Предельным КВ для такой углеводной
пищи можно принять величину, близкую к -±-.
OV
Состав белковой пищи был: белков около 24%, глюсидов около 57%,
жиров около 1,7%. 100 г пищи содержали от 348 до 350 калорий. Полу-
чение такой пищи, когда КВ = -^ и выше, предохраняло цыплят от смерти,
но даже при КВ = цыплята развиваются неправильно.
Как можно видеть данные Plimmer'z указывают, что для избежания
авитаминоза В количество калорий пищевой дачи, которое приходится на
1 г сухих дрожжей, не должно превосходить: 40 кал,., когда пища со-
держит 22,6% жиров, 30 кал., когда она содержит 70% глюсидов (угле- 
водов), и 20 кал., когда она содержит 24% белков. Следовательно, наименее
велика потребность в витамине В, когда пища богата жирами, и наиболее—
когда она богата белками.
Данные Л. А. Черкес и других авторов позволяют предполагать, что
при лучшем выборе источника жиров и при большем процентном содержании
119 —
пищи жиром за счет содержания ее углеводами КВ жировой пищи был бы
еще более низок.
Менее подробные опыты тех же авторов указывают, что величина КВ
значительно ниже для взрослых голубей и еще ниже для взрослых крыс.
На кормах углеводного типа КВ Голубей достигает , КВ крыс .
Данные Reader'%. и Drummond\ 1926, еще нагляднее выявляют зави-
симость между содержимым белка и дрожжей в пищевой даче. Но эти авторы
отрицают существование отношения между суммой всех калорий пищевой
дачи и вит. В, а в частности, отрицают влияние В на метаболию не только
жиров, но и глюсидов, придавая его лишь по отношению к белкам.
Заметим, что очень интересные и подробные опыты касались лишь
наблюдений о влиянии различных пищевых смесей на роет крыс, а уско-
ренное проявление авитаминоза В, при питании, богатом глюсидами. (угле-
водами) и увеличенной потребности в вит. В при таком питании, установлено
было сперва опытами над птицами.
Между тем птицы более остро ощущают потребность в вит. Bi — анти-
нейритическом витамине, крысы — в В2—факторе роста и антипелагрическом
факторе. Кроме того птицы являются и вообще более чувствительным реакти-
вом на вит. В, чем крысы. Этим может объясняться, что влияние на усвоение
глюсидов вит. В наблюдалось при опытах над птицами и было неясно в опы-
тах над крысами.
Ныне удалось, однако, и на крысах показать и притом очень отчетливо
вляние витаминов В на усвоение сахаров. Но влияние это принадлежит, неви-
димому не смеси обоих витаминов В, а фактору Br С другой стороны, судя
по опытам Hassan и Drummond (1927), Hartwell (1928), можно считать
очень вероятным, что на усвоение белков влияет главным образом фактор В2—
устойчивый к нагреванию. Напомним, что ныне многие авторы Chick
и Roscoe (1928) и другие склонны отождествлять этот фактор с антипеларги-
ческим началом.
Hassan и Drummond (1927) прогревали в автоклаве час при 120°
вытяжку дрожжей в сильно щелочном растворе. Такая обработка ведет к полному
разрушению Вг сохраняя частью В2. При прибавлении прогретой в щелоке
вытяжке в пище, лишенной В, рост крыс не наблюдался, но зато выяснилось
обезвреживающее действие обработанной так вытяжки при добавлении ее
к пище, которая содержала до 70% белка (казеина). При введении в такую
пищу необработанной вытяжки дрожжей (сухого остатка) в количестве 4%,
крысы растут слабо и болеют; дабы достичь нормального роста надо в этом
случае довести содержание необработанной вытяжки дрожжей до 16%. Вводя
в 100 г такой пищи 4 г необработанной вытяжки и зольный остаток осталь-
ных 12 г, улучшения не наблюдают. Но если к 4 г необработанной вытяжки
присоединить 12 г вытяжки, прогретой в щелоке (усредненной перед смешива-
нием с пищей), то рост крыс становится еще лучшим, чем при 16% необра-
ботанной вытяжки.	«
— 120 —
Высоко концентрированный и свеже проверенный препарат вит. В
Seidell's, даже при очень сильных дозах не мог обеспечить роста крыс на
корму, который содержал 70% белка. Но ежедневные дозы от 2 до 5 мг
в день на крысу обеспечивали отличный рост при наличии 4% примеси, про-
гретой в щелоке вытяжки дрожжей. *
Итак начало, которое присутствует в дрожжах, обезвреживает корм,,
чрезмерно богатый белками:
1)	противостоит часовому нагреванию при 120° Ц в щелочной среде,
2)	не находится в препарате Seidell'а и
3)	не является минеральной солью.
Следовательно антипеларгический фактор, который ныне все более
склонны отождествлять с витамином В2, способствует в определенных случаях
усвоению белков. Сходное указание дают также и опыты Hartwell (1928).
Hartwell не прибегала к кормам чрезмерно богатым белком. Белковая часть
ее пищевой смеси была представлена 20 проц, эдестина. Но дело в том, что
эдестин, когда он является единственным источником белковаго питания, пере-
носился хорошо лишь взрослыми крысами. Молодые крысы на таком корму через
несколько недель начинали хворать и гибнуть, при чем посмертное вскрытие
обнаруживало ярко красный цвет их селезенки. Вредное действие эдестина
удалось предотвратить, добавляя к пищевой даче до 15 проц, остатка
вытяжки из дрожжей, прогретой 4г/2 часа при 120 Ц. Судя по данным Wil-
liams, Waterman и Gurin (1929) и Chick и Roscoe (1930), те нагре-
вания, которым подвергали вытяжку из дрожжей Hassan, Drummond
и Hartwell, должны были не только нацело уничтожить Вр но и значитель-
ную часть В2. Необходимы дополнительные опыты, чтобы окончательно
выяснить, существует ли особый еще более чем Ва устойчивый к нагреванию
фактор В или доказать способность Ва противодействовать белковому отра/
влению.
Но если признать, что Ва и антипелагрическое начало тождественны
и вспомнить, что белковое отравление часто проявляется повреждениями
кожного покрова, напоминающими пелагру, то последнее положение надо
считать наиболее вероятным.
Итак мы видим, что в случае пищи, богатой белками, резко проявляется
благоприятное влияние фактора Ва (или G) или антипеларгического фактора. По
отношению к жирам проявляется некоторое совпадение данных большинства
авторов. Согласно этим данным, влияние витамина В наименее проявляется,
когда пища очень богата жирами.
, Позволительно, следовательно, следующее общее заключение: витамины В
не влияют 'заметно на усвоение жиров, влияние вит. Вг проявляется преиму-
щественно на усвоении сахаров, а витамина Ва на усвоении белков. Попутно
заметим, что Sherman (1926) и Sherman и Axtmayer (1927) предложили
именовать антиневритический вит. В2 — фактором F, а витамин В2 — факто-
ром G. Большинство американских авторов следуют этому предложению, англий-
ские предпочитают называть Вх и В2.
— 121 —
Некоторые особенности, характеризующие общее физиологическое-
действие витаминов В
Главные из этих особенностей были уже указаны:—явление общего голо-
дания и явно с ним связанная остановка роста; расстройство нервных функ-
ций и вероятно также, если признать тождество факторов В2 и Р. Р.» кожное
заболевание — пелагра. Их полезно дополнить данными Коп’а и Drummcmd’a,
1927, Л. А. Черкес и Т. М. Купермана, 1926, и других авторов, которые
способствуют уточнению картины авитаминоза В у голубей. Данные Коп’а и
Drummond'а в 1927 г. особенно ценны тем, что картина авитаминоза уста-
навливалась по сравнению с голубями, получавшими витамин В и то же коли-
чество пищи, которое добровольно поглощалось голубями, лишенными вит. В.
Таким образом^ могли быть определены те признаки, которые были вызваны
лишь частичным голоданием, и устранялось искусственное влияние насильного-
кормления, к которому обычно прибегали авторы прежних работ. Зеленый
цвет испражнений указывался авторами {Collazo и Funk, 1925, и друг.), как
признак авитаминоза В у голубей. Такой же цвет испражнений наблюдается.
{Коп и Drummond, 1927) и у частично голодающих голубей, а в некоторых
случаях испражнения авитаминозных были нормального цвета. Зеленый цвет
испражнений, повидимому, связан с бактериальной заразой. Деятельность ки-
шечника была проверена радиографией голубей, частично голодающих и ави-
таминозных, через час 35 минут после кормления их сернокислым барием.
В обоих случаях картина получалась одинаковая. Исследование Л. А. Черкес
и Т. М. Купермана в 1926 г. выяснило, что расстройство нервных функций
голубя при авитаминозе В не связано с поражением лабиринта. Гистологиче-
ское изучение периферической нервной системы (нервных окончаний) {Коп и
Drummond, 1927) также не обнаруживает каких-либо болезненных осложне-
ний. Процессы вырождения нервной ткани были замечены лишь в одном случае-
у голубя частично голодавшего, но который получал вит. В. Внешний вид
голубей авитаминозных и частично голодающих тот же. Содержание извести,
в крови в обоих случаях одинаковое {Коп и Drummond, 1927). Единствен-
ный орган, изменившийся под влиянием авитаминоза В, это надпочечные же-
лезы. Разбухание (гипертрофия) надпочечных желез голубя наблюдается и при
общем голодании. Kellaway в 1920 г., считая, что оно связано с полиневри-
том, указал, что такое перерождение надпочечных желез голубя сопровождается
расширением коркового слоя и образованием перерывов в сетчатом строении
среднего слоя желез. Beznak в 1923 г. показал, что при голодании, сопро-
вождающемся пользованием вит. В, оно не происходит и что, следовательно,
такое разбухание есть типичное проявление авитаминоза В’). Данные Коп’а
и Drummond’а, ограниченные двумя парными наблюдениями, подтверждают
существование особого влияния вит. В на надпочечные железы. Вес и объем
х) Впервые перерождение корковой ткани надпочечных желез голубей при авита-
минозе В было установлено в 1919 г. одним скандинавским исследователем. К сожалению,,
я не мог восстановить утерянную выписку его работы и забыл его имя. И. Б.
122 —
надпочечных желез авитаминозных голубей увеличивается, но общее содержа-
ние в них адреналина равно содержанию в железах частично голодающих
голубей, которые получали вит. В.
Единственные ясные указания на общее влияние вит. В на усвоение
пищи дается лишь явлением голодания, которое неизменно и быстро наступает
при наличии авитаминоза В, несмотря на правильную деятельность пищевари-
тельных желез.
Отдельно отметим, что наблюдения Hartwell’л (1925), Sure (1927, 3),
Macy и ее сотрудниц (1927, 1 и 3) установили, что потребность в вит. В
крыс самок при рождении и выкормке потомства около^4-х и более раз пре-
восходит обычную.
Новые данные о местонахождении вит. В ,
♦
Излишпе в обшем обзоре сколько-нибудь подробно перечислять много-
численные данные последних лет о распределении вит. В в различных расте-
ниях. Но нельзя не привести сводку обширного исследования Plimmer’a, Ro-
sedale, Raymond’a и Lowndes’a. в 1927 г. о сравнительном содержании вит. В
в главнейших кормовых хлебах и в дрожжах. Для нравильной оценки их
данных надо иметь в виду, что предметом испытаний были птицы (преимуще-
ственно голуби), а птицы отличаются повышенной потребностью в вит. В!
(или F) — антинейритическом витамине. Следовательно, предельным фактором
в этих опытах являлся вит. В2, и установленные авторами количественные
отношения касаются главным образом содержания в дрожжах и зернах этого
витамина. Добавим, что вит. В2 (или G) тоже необходим птицам, и авторы не
могли бы получить приведенные ими результаты, если бы зерна не обладали
достаточным количеством В$, но полученные количественные соотношения были бы
иными, если бы предельным фактором был бы вит. Ва, - каковым он является,
когда опыты ведутся на крысах. Насколько отличным от полученных могли бы
быть эти отношения при опытах на крысах, указывает то, что тогда как
дрожжи более богаты вит. В2, чем Вх — содержание зерен по вит. Bj превосхо-
дит содержание по вит. В2.
Отсюда следует, что если бы опыты велись на крысах или одновременно
на голубях и крысах, коэффициенты содержания вит. В в зернах получились
бы еще значительно ниже тех, которые были установлены авторами. Но как
оценка относительного богатства по вит. Вх — антинейритическому витамину,
данные авторов имеют определенное и большое значение. Вот сводка этих
данных. Пищевая смесь, лишенная вит. В, в которую вводили 4% сухих
дрожжей, обеспечивала жизнь и здоровье голубей достаточным содержанием
витаминов В. Приняв содержание вит. В (антинейритического вит.) в высу-
шенных дрожжах равным 100, авторы, основываясь на полученных ими опыт-
ных данных, дают следующие величины относительно богатства этим вита-
мином испытанных ими продуктов.
Высушенные дрожжи—100; свежие хлебопекарные дрожжи—от 33 до 40;
зародыши пшеничного зерна—66; цельные пшеничные зерна—около 9; ржи—9;
123 —
ячменя — около 8; овса — около 5; обмолоченного овса — 4; гречихи — около 6;
кукурузы — около 8; проса — 8 и пшеничных отрубей — около 13.
Соком апельсинов и лимонов (Citrus aurantium и Citrus medica var.
.limonum) часто пользуются в опытах над животными. Добавляют его также
к пище малых детей и больных, как источник вит. С. Отметим, что согласно
указаниям Willimott и Wokes в 1926 году, основанным на их собственных
данных и таковых других авторов, соки эти содержат также и вит. В.
'Содержание вит. В в этих соках значительно уступает содержанию вит. С.
Образование вит. В бактериями
Первые попытки разных авторов, в том числе и Damon’a, установить
•образование вит. В бактериями не дали положительных результатов. Однако
затем Damon в 1923 г., безуспешно попробовав ряд бактерий, убедился
в присутствии вит. В в бацилле Пфефера и в кислотоустойчивой Вас. Ti-
mothy х). Damon вводил в пищу, лишенную вит. В, бактериальную массу,
предварительно промытую и высушенную, в количестве 5% общего веса дачи.
Падение веса молодых крыс, которые получали такую добавку к основной
даче, останавливалось, а в некоторых случаях наблюдалось восстановление
усиленного роста. Быстрый и постоянный рост крыс постоянно наблюдался,
когда добавка Вас. Timothy достигала 10% основной дачи. Бактерии Damon’a
были выращены на хлебной вытяжке; не вполне исключена возможность при-
липания к их телам (адсорбции) тех следов вит. В, которые могла содержать
эта среда.
Scheunert и Schieblich (1 и 2) в 1923 и 1927 установили аналогичными
опытами над крысами присутствие вит. В в телах Вас. vulgatus Migula.
Scheunert и Schieblich (1) в 1927 г. проверили свои данные, прибегнув также
и к разводкам бактерий на средах, которые не содержали вит. В. Ежедневная
доза на крысу от 0,2 до 0,4 г сухого веса этой бактерии оказалась достаточ-
ной для поддержания правильного роста и развития крыс при продолжитель-
ности опытов 62 дня [Scheunert и Schieblich (2), 1927)]. Выяснилось [Scheunert
и Schieblih 1927 (1)], что реакция среды бактериальной разводки оказывает
решающее влияние на образование вит. В бактериями.
Витамин В образуется при реакции среды рн-7 и кислой. Как только
рп начинает показывать щелочность среды, достигая 7,6, содержание вит. В
в бактериях оказывается ничтожным. Еще в 1920 г. Portier указывал на
.присутствие вит. В в испражнениях кроликов. Точные опыты Salmons
в 1925 г. над крысами вполне подтверждают наблюдений Portier. Крысы,
которые получают пищу, лишенную вит. В, продолжают расти, если им позво-
лить пожирать свои испражнения. Salmon установил, что на равный вес
испражнения крыс содержат более вит. В, чем зерна овса или пшеницы. Вита-
мин В не может накапливаться и сколько-нибудь долго сохраняться в орга-
низме высшего животного; с другой стороны, пища, которую получали в этих
х) Терминология автора. — Н. Б.
124 —
опытах крысы, была лишена вит. В, а потому следует допустить, что вит. В
испражнений созидался микрофлорой кишечника. В этой микрофлоре дрожжи
встречаются редко и в небольшом количестве. Представляется наиболее веро-
ятным, что значительное богатство витамином В испражнений крыс накоплено
бактериями.
Излагая данные о витамине бактерий, мы пользовались общим термином,
вит. В, хотя опыты ограничивались лишь наблюдением над ростом крыс.
Следовательно, проявлялось в этих опытах главным образом действие впт. В2
(или G) — водного фактора роста. Но как было уже показано выше, дей-
ствие В2 возможно лишь в присутствии Вх (или F)—антинейритического вита-
мина, а потому приходится допустить, что бактерии создают оба вит. В, хотя
возможно, что их богатство В2 значительно превосходит Вх. Данные Portier у
особенно работы, которые последовали затем — Salmon’а. и других авто-
ров, выяснив присутствие вит. В в испражнениях, вынудили исследователей
ввести новое условие в технику опытов над крысами на вит. В. Ныне при
таких опытах для получения более точных результатов крыс помещают на
решетчатый пол, что лишает их возможности пожирать свой кал. Большим1
общим значением для всего учения о витаминах обладает то явление, которое
было доказано Scheunert’ом, Schieblich'OM и Damon’он — образование вит. В-
бактериями.
Цветная реакция на вит. В
Свежеприготовленная смесь равных объемов нормальн. растворов,
KsFe(CN)e и FeCl3, добавленная 2% уксусной кислотой, дает с разнообразней-
шими препаратами вит. В синее окрашивание (Jendrassik, 1923). Однако,
реакция не специфична. Она является очень чувствительной пробой на орто-
и параполифенолы [Безсонов (1) (3), 1925].
Глава?.
Витамин С
Водорастворимый антицинготный витамин
Новая биологическая техника исследования вит. С
Прежде чем излагать новые данные о природе вит. С, приходится оста-
новиться на самой технике биологического испытания и измерения этого ви-
тамина. Поверка прежней биологической пробы на вит. С и применение новых
более точных испытаний в известной мере непосредственно связаны с оценкой
новых данных о его природе. Существование экспериментальной цынги мор-
ской свинки было, как известно, показано Holst и Frolich (1912 и 1913), при
чем они пользовались главным образом, основным кормом, который состоял исклю-
чительно из зерен овса и воды. Из всех многочисленных свинок, подвергнутых,
авторами такому испытанию, лишь одна дожила до 33-го дня; остальные гибли
— 125 —
не позже 30-го дня. Корм этот был лишен не только вит. С, но и липовита-
минов А и D, мало известных в ту пору. Добавляя к этой овсяной даче какое-
либо вещество, которое обеспечивало жизнь свинов, авторы, кроме вит. С вно-
сили и липовитамины. Одним из таких веществ в опытах Holst'а был свежий
сок свеклы.' Добавка кипяченого сока свеклы оказалась недостаточной, при
чем смерть свинок была приписана авитаминозу С. Между тем кипячение
такого сока не только лишало его вит. С, но и уничтожало большую часть
вит. А. Нельзя было установить на основании анатомо-гистологических при-
знаков, что свинки гибли в данном случае от полиавитаминоза, потому что,
как то затем показали исследования Tozer, такие признаки весьйа схожи у
свинок, лишенных либо липовитаминов, либо вит. С.
Мы остановились на этой старой работе Hoist’s., так как до последнего
времени, хотя и редко, но встречаются исследования физиологических послед-
ствий авитаминоза С, которые основаны на сравнении действия зернового
корма, добавленного либо свежим, либо кипяченым соком свеклы. Последние
годы подавляющее большинство авторов предпочитало пользоваться более
рациональной основной дачей (цинготным кормом), которая была предложена
в 1918 г. Chick'ом, Ните’ом и Skelton’ом [Безсонов, (2), 1924]. Она со-
стояла из смеси овса с отрубями и 60 кубиков на свинку коровьего молока,
прогретого в автоклаве 1 час при 120° Ц. Для свинок свыше 300 — 400 г
весом дача молока повышалась. Такое молоко должно было вносить в корм
нужные липовитамины. С другой стороны, оно, как полагали авторы, было
практически лишено вит. С {Chick и Delf, 1919). Корм этот, примененный
многочисленными авторами, позволил получить ряд хорошо совпадавших ре-
зультатов [см. Безсонов, (2), 1924]. Но заметим, что наилучшие результаты
были получены при длительности опытов не менее 90 дней и участия в них
многочисленных свинок. При соблюдении этих двух условий основная дача
Chick's и Hume’s позволяет измерять относительное богатство вит. С различ-
ных пищевых веществ. Но все же такой способ -измерения вит. С обладает
крупными недостатками. Наличие их особо сказывается [Безсонов (2), 1926
и (1), 1927] при его применении к тем многочисленным и точным испы-
таниям, которые потребны для исследований природы вит. С. Один из этих
недостатков связан с большими колебаниями содержания липовитаминов в ко-
ровьем молоке, при чем зимнее молоко часто оказывается лишенным этих
витаминов {Drummond, Channon, Covard, Mackintosh и Zilva, 1923 и 1924,
Lesne и Vagliano, 1924, Luce, 1924, Golding, Soames и Zilva, 1926 и др.).
Даже в летнем молоке содержание липовитаминов бывает иногда недостаточно
для того, чтобы обеспечить целебность в них свинок, которые получают корм
Chick's и Hume’s [Безсонов (1), 1927]. Обстоятельство это значительно огра-
ничивает возможность применения такого корма. Еще более существенным
является другой его недостаток. Проявляется он очень значительными разли-
чиями продолжительности жизни свинок-свидетелей, которые получают лишь
эту дачу. Продолжительность жизни таких свинок была указана Chicle ом, Ни-
те’ом и Skelton'ом в 1918 г. в 40 дней, основываясь на единичном опыте,
— 126 —
всего на 5 свинках. В течение последующих лет других точных данных о
долговечности свинок-свидетелей способа Chick'd и Ните'а почти не встре-
чалось. Имелось лишь одиночное указание (Безсонов, 1922) па случай, когдгь
долговечность свинок, которые получали корм, достигла 50 дней, а с добавле-
нием к корму сухой люцерны, прогретой при 120°, — 92 дней. Последний
случай объяснялся тогда предположением, которое в дальнейшем не подтверди-
лось, о сохранении вит. С в такой люцерне.
Итог пятилетних наблюдений [Безсонов (2), 1926 п (1) 1927] пад свин-
ками, которые получали корм Chick'а и Ните а, один или с добавлением веществ,
в которых ’вит. С отсутствовал, показал, что из 84 свинок 18, т.-е 21,5%,
умерли позже 40-го дня; из них 6, т.-е. 7,1%—между 51-м и 91-м днем опыта.
Другая серия опытов дала еще большее увеличение случаев долговеч-
ности свидетелей. В этих опытах « молоку основной дачи добавляли свежий
куриный желток. Между тем желток совершенно лишен вит. С [Найде и Car-
rick, 1926, Безсонов (1), 1927]. Но за то он является богатым источником:
липовитаминов и притом в противоположность тресковому жиру легко усваи-
вается свинками.
Согласно предположению G. Bertrand'а и Benson’а, 1924, G. Bertrand'а.
и Nakamura, 1925, и Nakamura, 1925, среди животных различных видов
должны проявляться случаи «физиологической мутации», что обнаруживается
ненормальной устойчивостью некоторых особей по отношению к авитаминозам.
Предположение это основывалось на наблюдениях над мышами. Упрощенная
техника, которой пользовались авторы, позволяет заключить, что причиной тех
уклонений, которые ими наблюдались, являлось существование небольших за-
пасов липовитаминов в теле отдельных мышей.
Только что указанные случаи особой устойчивости свинок к авитами-
нозу С, как удалось выяснить, были связаны с внесением небольших количеств
вит. 0, которые содержались в гретом молоке основной цинготной дачи Chick’d
и Ните'а. Предположение G. Bertrand'а о существовании «физиологических
мутаций» по отношению устойчивости к авитаминозу подтвердилось—с ого-
воркой, что проявляются они лишь, когда авитаминоз не является полным.
Случаи исключительной долговечности более не наблюдаются, когда цинготная
дача, содержа витамины В и липовитамины, совершенно лишена вит. С. Пре-
дельный срок долговечности свинок, которые получают такую дачу, достигает
лишь 32 дней, т.-е. совпадает с опытами Holst’a с кормом овес — вода.
Добавим, что характерные признаки экспериментальной цынги не всегда ясш>
обнаруживаются даже при вскрытии свинок-свидетелей, и притом значение
этих- признаков часто является спорным. Лишь проба на долговечность
является основным и решающим испытанием на вит. С.
Значительно более совершенный цинготный корм, чем корм Chick'd
Ните’а, был предложен Lopez-Lomba и М-те Randoin, 1923, М-те Ran-
doin, 1923. Он состоял из смеси вареной бобовой муки, дрожжей, жира, сли-
вочного масла и солей. Как можно видеть, источником липовитаминов служит
жир сливочного масла, а не прогретое молоко, что устраняя возможность вве-
— 127 —
дения в корм следов вит. С, обеспечивает специфичность пробы на вит. С.
Но, с другой стороны, жир сливочного масла еще менее верный источник
липовитаминов, чем молоко. Он часто совершенно их лишен или очень
беден ими.
Позднее М-те Randoin и Lecoq (1929) изменили состав своего цин-
готного корма, заменив бобовую муку крахмалом кукурузы и мясным пептоном,
не устранив однако главного его недостатка—отсутствие надежного источника
липовитаминов.
Hojer предложил корм, проверенный Eddy (1929), следующего состава:
кипяченое снятое молоко 30, сливочное масло 9, солей 1, смеси овса и отрубей
в равных количествах 59, трескового жира 1%. Дрожжи даются отдельно.
Так же, как корм Randoin и Безсонова, он невидимому совершенно лишен
витамина С.
Возможность случайного недостатка в основном корме липовитаминов
практически очень затрудняет опыты с таким кормом, особенно в виду уже
указанного выше свойства липовитаминов образовывать запасы в организме
животных—запасы, которые весьма различны у отдельных особей. Необходимо-
было найти другое вещество, которое, не содержа вит. С, явилось бы более
богатым и верным источником липовитаминов, чем сливочное масло.
Тресковый жир плохо усваивается и в сколько-нибудь значительных
дозах вредно действует на свинок. Яичный желток, не обладая этими недо-
статками, богат липовитаминами и не содержит вовсе витамина С [Найде в
Carrick, 1926, Безсонов (2) 1926, (1), 1927].
Свежий куриный желток был использован для приготовления нового цин-
готного корма следующего состава: 86 г зерен овса смешиваются с 10 г
отрубей и 4 г свежих хлебопекарных дрожжей, к этой смеси прибавляют
7,5 г свежего куриного желтка, предварительно разбавленного 20 кубиками
воды. После тщательного перемешивания корм дается свинкам вволю, и от-
дельно получают они вволю воды. 16 свинок были последовательно, по-4 в ряду,
испытаны на этом корму. Свинки умирали не позже 32х/2 дней, обнаруживая
при вскрытии признаки экспериментальной цинги.
Добавление к этой даче вит. С в виде либо нескольких кубиков, усред-
ненного двууглекислой содой, лимонного сока, либо 50 мг препарата 4- 2
кубика прогретого лимонного сока, обеспечило жизнь и здоровье свинок
в течение опытов, длившихся 90 и 80 дней [Безсонов (2), 1926, (1), 1927].
Эти первые данные подтверждены вновь полученными [Безсонов 1928, (1)].
Опыты длились 100 и 170 дней. Отличное состояние здоровья свинок дости-
галось добавлением к основному корму в первом случае 0,6 г свежей капусты
на 100 г веса свинки, а во втором—лимонного сока в течение первых 90 дней
и препарата, полученного из капусты, 30 мг на 100 г веса свинки следующие
80 дней.
Было также выяснено, что повышение содержания желтка основной дачи
до 14%, видимо, не отражается на ее свойствах.
128 —
О природе вит. С
Почти все данные работ последних лет о природе вит. С были получены
путем опытов с основным кормом Chick’on и Ните’ом. Ныне получены ука-
зания, которые позволяют предполагать существование двух «самостоятельных
фракций вит. С: одной Съ менее устойчивой к нагреванию при 120° Ц, дру-
гой С2, которая хорошо переносит такое нагревание. Данные опытов, которые
привели к такому предположению, будут приведены ниже, но необходимо
отметить немедля, что согласно этим данным, гретое молоко корма Chick'd, и
Ните'а богато второй фракцией вит. С—С2. Отсюда следует, что все сведения
о природе вит. С, которые были получены опытами с кормом Chick'd, и Ните’а,
вероятно характеризуют не весь вит. С, а его фракцию Сх.
Способы получения препаратов вит. С
Укажем упрощенный способ (Безсонов, 1922) получения таких препа-
ратов. Свеже полученный сок капусты смешивается с раствором нейтрального
уксуснокислого свинца, выпадающий осадок отделяется, а раствор после уда-
ления свинца сернистым водородом, сгущается в пустоте; полученный сироп
высушивается в присутствии крепкой серной кислоты или пятиокиси фосфора.
Все эти операции ведутся в отсутствии свободного кислорода, в атмосфере
азота или пустоте прп температуре не выше 35 Ц°.
Способ этот был усовершенствован следующим образом [Безсонов (2)
1925]: после отделения осадка, который получается при взаимодействии капуст-
ного сока и определенного количества нейтрального уксуснокислого свинца,
к фильтрату, который содержит вит. С, прибавляли едкий натр, доводя рн
фильтрата до 8,2. При этом образовался новый осадок — он содержал весь
вит. С капустного сока. Осадок этот растворялся в 8% уксусной кислоте, и
операция снова повторялась. Затем свинец удалялся сероводородом, и филь-
трат сгущался в пустоте. Дальнейшее фракционирование и свойства получен-
ного кристаллического препарата вит. С15 будут описаны ниже.
Перед опубликованием 2-й работы Безсонова появилась таковая Zilva,
1924. Автор вводил в лимонный сок в анаэробных условиях углекислый каль-
ций, затем на один объем сока прибавлялось 2 объема абсол. этил, спирта-
Осадок отфильтровывался. Операция эта, согласно Zilva, предпринималась для
«децитрации» сока (удаления лимонной кислоты). Фильтрат выпаривался до
.первоначального объема. К фильтрату постепенно прибавляли раствор основного
уксуснокислого свинца до тех пор, пока, по мнению Zilva, дальнейшее
прибавление не вело больше к образованию осадка. Осадок этот содержал вит. С.
После растворения осадка в уксусной кислоте свинец удалялся приба-
влением сернокислой магнезии. Затем к объему раствора добавляли 2 объема
этил, спирта, сернокислый свинец отфильтровывался, а фильтрат снова выпа-
ривался.
Как можно видеть, существенная аналогия обоих способов проявляется
.в осаждении вит. С, вызываемом слабо щелочной реакцией те присутствии
129 —
уксуснокислого свинца. Но тем не менее способы эти весьма различны. Слабо
щелочная реакция достигалась Zilva в 1924 г. прибавлением к лимонному
-соку основного уксуснокислого свинца, а Безсоновым—прибавлением к ка-
пустному соку, который уже содержал нейтральный уксуснокислый свинец,
•натриевой щелочи. Полнота осаждения вит. С зависит от двух факторов: кон-
центрации уксуснокислого свинца в растворе и реакции среды. Произвольное,
взаимно независимое регулирование обоих факторов допускает лишь второй
способ. Растворимость нейтрального уксуснокислого свинца в капустном соке
очень велика—при 20° Ц она более- 3 раз превосходит растворимость в воде, что
позволяет ввести заранее в сок оптимальное количество свинцовой соли, а затем
установить добавлением щелочи оптимальный, для полного осаждения вит. С,
рн раствора, рн оказался близким к изоэлектрической точке свинцовой соли
в этом растворе, а именно—8,2. Ныне выяснилось, что оптимальное коли-
чество вводимого нейтр. уксуснокисл, свинца равняется 100 г на литр капуст-
ного сока. Осаждением вит. С в щелочном растворе в присутствии уксусно-
кислого свинца достигается его отделение от большого количества сопровожда-
ющих веществ, главным образом, сахаров, глюкозы и полиоз. Zilva (1924), на
основании микроскопического рассмотрения полученного им глюкозазона, реак-
ции Селиванова, фильтрата и измерения угла вращения, сопряженного с титро-
ванием по Bertrand'у, предположил, что почти весь сахар является инвертным
сахаром. Данные Zilva, 1925, косвенно указывают, что содержание сахара,
высчитанное по глюкозе на основании титра по Bertrand'у, должно достигать
ле менее 50% сухого вещества сока до осаждения его щелочной реакцией.
Собственные мои титрования фильтратов по Bertrand'у и Blanchetier'y
после осаждения щелочью вит. С и количественное определение с взвешива-
нием глюкозазона по Maquene указали содержание сахара (расчет на глю-
козу) около 75% всего того сухого вещества, которое имелось в 1 фильтрате
до осаждения.
Другое существенное отличие способа Безсонова состояло в том, что
прибавление нейтрального уксуснокислого свинца к соку ведет до ощелочения
раствора к выпадению обильного осадка, который не содержит вит. С. Третье
отличие—удаление свинца помощью сероводорода, а не сернокислой магнезии.
Zilva в 1925 г. подтвердил, что вит. С не содержится в осадке, который
получается при смешении свежего сока растения с раствором нейтрального
уксуснокислого свинца. Затем он убедился [Zilva (1), 1927] в неудобстве
достигать ощелочения, которое необходимо для выпадения осадка, содержа-
щего вит. С, путем добавления основного уксуснокислого свинца.
Оставив свой прежний способ, Zilva назвал своим способ, весьма ^близ-
кий к способу Безсонова, ныне способ Zilva[(l), 1927]; так же, как и Безсонов
>{1922 и (2) 1925] он предварительно очищает сок осаждением нейтральным
уксуснокислым свинцом, затем ощелачивает его, пользуясь не натриевой
щелочью, а аммиаком и доводя рн не до 8,2 а до 7,5. Последнее отличие
повидимому, является причиной неполного осаждения вит. С, на что указы-
вают данные самого Zilva. Воспользовался Zilva также сероводородом для
Витамины.	9
— 130 —
удаления свинца {Hoyle и Zilva 1927), но только для препаратов, получае-
мых для химического анализа. Ссылаясь на свое предыдущее указание, Zilva
утверждает, что H2S инактивирует вит. С. Однако, указание это {Zilva, 1924>
говорило не об инактивации сероводородом вит. С, а о невозможности удалить
при его помощи свинец и о токсичности препаратов г). Заметим, что простым
пропусканием сероводорода нельзя количественно удалить свинец в условиях
получения препаратов вит. С. Такое удаление быстро достигается при давле-
нии H2S, на 200 и более миллиметров (в зависимости от внешней температуры
среды) превышающее атмосферное, и при непрерывном перемешивании жид-
кости [Безсонов (2) 1925].
Многочисленные опыты на свинках, в полтора и два раза более Долгие,
и проведенные в условиях значительно более точных, чем опыты Zilva.,
доказали, что, пользуясь H2S, можно получить препараты, лишенные токсич-
ности и богатые вит. С [Безсонов (2) 1922, (3), 1925, 1926 и (2), 1927]..
(1) (1928) (2) (1929).
Основываясь на еще неопубликованных мною данных, добавлю, что
отсутствие токсичности подобных препаратов было доселе проверено двумя,
стами парными опытами. Юным свинкам весом от 200 до 300 г вводили
одновременно от 2 до 3 граммов препарата. В некоторых случаях испытания
длились до 8 дней подряд. Усиленные дозы не только никогда не вызывали,
отравления, но действие их было скорее благоприятным. Кроме того удалось,
опытами другого рода количественно подтвердить, что сероводород не разрушает'
витамина С. Отметим кратко эти опыты, так как они вместе с тем дают
примеры измерения единицы действия витамины С. Когда к строго специ-
фическому цынготному корму, а именно к смеси овса, дрожжей, яичного
желтка и отрубей, добавляют 0,5 г свежей зеленой капусты на каждые 100 г
живого веса свинки, то к концу 60-дневного испытания наблюдают, что„
в среднем, вес свинок приблизительно равен начальному. Тогда как контроль-
ные свинки, получая тот же корм, но без'* капусты, потеряв более трети
начального веса, гибнут к 30 дню. Следовательно, полграмма капусты обла-
дают единицей действия витамина С. Два образца препарата, полученных
одинаковым способом [Безсонов, (1923)], как всегда применяя H2S, были испро-
бованы в 2 различных дозах каждый. Все четыре испытания проводились,
на партиях, заключавших по 4 свинки. Каждому парному испытанию соответ-
ствовала отдельная проба на такой же партии свидетелей, получавших лишь,
основной корм (овес, свежий яичный желток и т. д.). Отношение между весом
препаратов и весом свежей капусты, из которой они были получены, было
определено со всей возможной тщательностью. Дозы 1 препарата равнялись.
34 и 27 мг, соответствуя 0,61 г свежей йапусты первая и 0,47 г вторая.
На 60 день испытаний начальный вес обеих партий (около 700 г на свинку
в среднем) понизился ^ первом случае на 5 проц., во втором на 11 проц.
т) The lead could not be removed by hydrogen sulphide as the resulting preparation^
was found be toxic to the animal. Zilva, 1924.
— 131 —
Свидетели приблизительно того же начального веса все погибли к 21 дню,
потеряв в весе 40 проц. Дозы второго образца равнялись 27 и 20 мг соот-
ветствуя 0,66 и 0,46 г капусты. На 60 день средний начальный вес свинок
(около 500 г) возрос на 4 проц., доза в 27 мг и на 2 проц., доза в 20 мг.
Свидетели, начальный вес которых был только около 500 г, погибли к 31 дню,
потеряв в весе 41 проц.
Проведенная одновременно с этими опытами дополнительная проверка
того действия, которое оказывает сама свежая капуста в дозе 0,5 г, дала
прибавку начального веса (около 500 г) в 3 проц. Лишь испытание 1 об-
разца указывает, повидимому, на некоторую потерю витамина С. Возможно,
что -действительно произошла из-за одной, случайно допущенной, погреш-
ности Цри его изготовлении. Возможно также, что небольшое отклонение носит
случайный характер. Во всяком случае, пробы 2 образца удостоверяют отсут-
ствие всякой видимой потери витамина С. Опыты эти окончательно выясняют,
что сероводород при температуре в 20° Ц и давлении не свыше одного
кг не оказывает сколько-нибудь заметного разрушительного действия на вита-
мин С. С.
Данные о химической природе вит. С
Способ получения кристаллического препарата и его свойства были лишь
весьма кратко описаны в сообщении Парижской академии наук [Безсонов (2).
1925]. Тут они будут изложены с добавлением наиболее существенных под-
робностей.
Ежедневная дача в 2 мг предохраняла свинок от цынги. Дальней-
шие испытания меньших доз не были выжолнены из-за исчерпания мате-
риала. Начальные стадии получения препарата были выше описаны. Добавим
лишь, что после растворения в 8% уксусной кислоте осадка, который выпадал
при подщелачивании раствора, до 20% этого осадка оставалось нерастворен-
ным. Эта нерастворимая фракция не содержала вит. С. При гидролизе она
давала, помимо свинца [S04], глюкозу и H2S, заключая, повидимому, один из
глюкозидов, типичных для вида Brassica. После трехкратного повторения опе-
рации осаждения щелочной реакцией и растворения в уксусной кислоте,
нерастворимая фракция более не обнаруживалась. Уксуснокислый фильтрат,
после удаления свинца, выпаривался в пустоте, разбавлялся водой и снова
выпаривался для удаления большей части уксусной кислоты. Затем вводился
избыток углекислой извести, взвешенной в воде. После реакции с известью
жидкий препарат уд. веса около 1,1 смешивался с 95% этиловым спиртом
в присутствии H2S (один объем препарата на 4 объема спирта). Выпадавший
осадок отфильтровывался, спирт отгонялся в пустоте, остаток разбавлялся
водой, муть, нерастворимая в воде, отфильтровывалась под давлением.
Фильтрат сгущался, высушивался в пустоте над крепкой серной кислотой,
растирался в порошок в особом металлическом ящике-эксикаторе. Порошок,
смешанный один объем на два с очищенным кварцевым песком, извлекался
в сокслете абсолютным спиртом. Сухой остаток вытяжки снова извлекался
9*
— 132 —
но без примеси песка. После повторения последней операции получался про-
дукт, обладавший значительной растворимостью (до 2х/2% при 20 Ц°) в абсол-
этил, спирту. После удаления спирта продукт извлекался коммерческим препа-
ратом «абсолютного» ацетона.
Позднее выяснилось—в согласии с данными Vedder и Lawson (1927),—
что в сухом и очищенном от спирта ацетоне вит. С нерастворим. А потому
2 следующих препарата были получены, при замене извлечения абсолютным аце-
тоном добавлением сухого ацетона к раствору вит. С в абсолютном спирту:
один объем раствора на 3 объема ацетона. В этих случаях получался хлопь-
евидный осадок, не содержавший вит. С. Образование кристаллов в виде тонких
коротких бесцветнйх игол наблюдалось и при выпаривании спирто-ацетоновых
вытяжек, и особенно ясно, при сгущениц растворов в абсолютном спирту,
полученных из сухого остатка этих вытяжек.
Кристаллы слипались в общую массу при выпаривании досуха, что,
вероятно, обусловливалось их большой гигроскопичностью. Эта гигроскопич-
ность и чрезвычайная окисляемость очень затруднили исследование. -
Образчик, предназначенный для сжигания, пролежав три недели в про-
стом эксикаторе над крепкой серной кислотой, расплылся и побурел. А потому,
хотя данные 3 сжиганий близко совпадали, ценность их лишь ориентиро-
вочная: С = 45,57%; О = 48,24%; Н = 6,19%. Отсутствие зольного остатка,
азота, серы и фосфора было доказано (в последних 2 случаях прибегнув
к методу Carrius’a) анализом последней фракции, предшествовавшей кри-
сталлической, и самих кристаллов. В частности, азота нельзя было обнаружить
4-мя анализами по Кьельдаллю навесок по 0,2 г кристалл, препарата, титруя
-к^норм. серной кислотой (норм, эквивалентной). Данные эти указывали, что
вит. С состоит лишь из атомов С, Н и 0. Такой вывод хорошо согласуется и
с многочисленными данными Zilva.
Анализы Zilva [Zilva, 1925, Daubney и Zilva (2), 1926, Hoyle и
Zilva, 1927] производились над препаратами, полученными, в лучшем случае
применяя начальные стадии только-что описанного фракционирования, но без
экстракций абсолютным спиртом и фракционирования спиртом-ацетоном—сле-
довательно, над препаратами, значительно менее очищенными, чем кристалли-
ческий препарат Безсонова. Тем не менее Zilva в 1925 г. даже в таком
препарате определил общее количество азота лишь равным около 0,0015% по
отношению к начальному соку, иначе говоря, препарат, полученный из 100 ку-
биков сока,—и который должен был, по моим данным, весить в этой стадии
очищения около 0,5 г сухого вещества, — содержал около 1,5 мг азота. Daubney
и Zilva в 1926 г. (2) и Hoyle и Zilva в 1927 г. установили полное отсут-
ствие в активной части своих препаратов иода, марганца, никкеля, кобальта,
бора и лишь следы фосфора, железа и серы. Из 7-ми проб на серу в двух она
не была вовсе ими обнаружена, в 2-х других—в количестве менее мг, по
расчету на л начального сока. Фосфора было найдено около 1 мг и железа
от 0,16 до 0,04 мг в препарате, что соответствовало начального сока.
— 133 —
В своем заключении Hoyle и Zilva сами предостерегают от попыток
установить связь между серой, фосфором и железом и вит. С, ссылаясь на
распространенность этих элементов в растениях. Несмотря на такую распро-
страненность и на то, что работа была выполнена над мало очищенными
препаратами, авторы установили лишь следы этих трех элементов и отсут-
ствие ряда других, наиболее известных по своей физиологической деятель-
ности. А потому, данные их трудно рассматривать иначе, как подтверждение
вывода, основанного на анализе кристаллического препарата Безсонова, ука-
завшего, что в состав витамина С входят лишь атомы С, Н и О.
Zilva в 1925 г. по- поводу кристаллического препарата Безсонова ука-
зывает, что им также порой наблюдалось появление кристаллов при дальней-
шем фракционировании спиртом его препаратов. Он справедливо отмечает, что
наличие кристаллов еще не указывает, что кристаллы эти соответствуют
чистому вит. С.
Замечу лишь, что при получении моего кристаллического препарата
наблюдалось не случайное образование кристаллов на бортах сосудов, а вне-
запная кристаллизация охватывала всю поверхность сгущаемого в пустоте
спиртового раствора, как то обычно наблюдается лишь при кристаллизации
чистых тел.
Помимо опытов над животными, чрезвычайная неустойчивость кристал-
лического препарата, соответствуя таковой самого вит. С, говорила в пользу
предположения о их тождественности. Более убедительное, хотя тоже не
решающее, доказательство такого тождества дано определениями молекулярного
веса. Определения эти, полученные прямой криоскопией кристаллов (Безсонов
(2), 1925), и определения Zilva путем ультрафильтрации лимонного сока, дают
весьма близкие величины. Криоскопия кристаллов была выполнена в растворах
чистого сухого монофенола (карболовой кислоты). Брались навески свеже полу-
ченных кристаллов от 0,2 до 0,3 е.
Место не позволяет описать предосторожности, принятые для обеспечения
наибольшей точности определений. Укажем лишь, что два проверочных опре-
деления с такими же навесками пирокатехина дали молекулярный вес всего
на +1,0% и + 3,1% мол. веса выше истинного. Первые 2 определения
кристаллов С, приведенные в сообщении [Безсонов (2), 1925], дали величины
около 200 и 230. Затем два других дали 257 и 246. В среднем 233.
Гигроскопичность препарата отражалась на точности определений и
должна была вести к получению цифр несколько больших, чем действительная
величина.
Указание на величину молекулярного веса кристаллов С было получено
и другим путем. При прибавлении к раствору кристаллов С в абсол. спирте
спиртового раствора едкого калия выпадает белый осадок. Осадок этот еще
более нестоек, чем кристаллы С. При надлежащем окислении он дает тот
же хинон, что и кристаллы. Основываясь на анализе на калий осадка и допу-
щении, что осадок есть соединение молекулы вит. С с 1 атомом К, моле-
кулярный вес вит. С (расчет на К20) получился 185.
— 134 —
Zilva прибегал к определению мол. веса вит. С, фильтруя лимонный сок
сквозь коллодийные ультрафильтры различной проницаемости. Опыты над
животными определили те фильтры, которые пропускали вит. С. Одновременно
фильтры калибрировались пропусканием веществ, молек. вес которых был
известен. Первая серия таких определений (Zilva и Miura, 1921) указала
на мол. вес. вит. С, близкий к 340. Новая работа определила этот вес, лак
близкий к весу' глюкозы, т.-е. к 180 (Connel и Zilva (2), 1924). При
встряхивании раствора кристаллов С в абс. спирту с крепкой серной кислотой
получается оранжево-красное окрашивание. Возникший пигмент, судя по его
свойствам, принадлежит к ряду фрно-антрахинонового хинона. Его растворы
в крепких кислотах красного цвета, в крепких щелочах—желтого. Он обладает
большой растворимостью в уксусном эфире, меньшей—в бензоле, .малой—
в этиловом эфдре, нерастворим в хлороформе. Выпадает бурыми хлопьями]при
разбавлении водой растворов в крепких кислотах. Хинон этот возникает также
при произвольном самоокислении кристаллов С. В менее чистых препаратах С
появление этого хинона маскируется наличием другого хромогена; этих слу-
чаях получаются красный вираж с кислотами и фиолетовый с щелочами. Так
же как и наиболее чистые препараты Zilva [Connel и Zilva, (1), 1924,
Zilva, 1925], свеже приготовленные водные растворы кристаллов С не давали
реакцию на Б. Р. (мономолибденово-вольфрамовофосфорн. кисл.) [Безсонов, (2),
1925]. Новые данные о Б. Р., как индикаторе вит. С, будут приведены ниже.
Отметим сейчас, что, начиная с первых сообщений об этой реакции, всегда
указывалось, что она дается не самим вит. С, а его производным [Безсонов
(2), 1924, (1), 1925]. Кристаллы вит. С не бромируются слабыми водными
растворами брома (пользуясь уточненным методом Копешаара), хотя бро-
мирование по такому методу ведет к значительной, всегда характерной,
фиксации брома предыдущими, менее очищенными фракциями препаратов
вит. С. Отметим, что те же фракции всегда дают отчетливую реакцию
на Б. Р.
Тот факт, что витамин С осаждается свинцовой солью в слабо щелочном
растворе, а также данные, полученные Me Kinnis и King (1930) путем
электролиза лимонного сока, ^указывают, что молекулы витамина С обладают
слабо выраженными вислыми свойствами. В той же степени свойства эти
отмечают множество органических срединений. Но все же данные электролиза
позволили с полной достоверностью установить, что витамин С отнюдь не
является каким-либо азотсодержащим электролитом—в роде аминокислот.
Электролиз велся в особом аппарате, остроумное устройство которого предо-
храняло витамин от разрушения окислением и нагреванием, вызванными элек-
тролизом.
Концентрация витамина С в различных камерах проверялась опытами
на свинках. Попутно авторы смогли вновь подтвердить, что витамин С легко
диффундирует сквозь мелкопористые перепонки из коллодия. Наблюдения эти
лишний раз показывают, ‘ что он не принадлежит к типично коллоидальным
телам.
— 135 —
Указание на существование 2-ой фракции витамина С
Все вышеприведенные данные о природе вит. С были получены Zilva
« Безсоновым, пользуясь при пробе на свинках кормом Chick'd, и Нйте’а,
который включает гретое в автоклаве молоко. Если предположить, что такое
молоко сохраняет в достаточном количестве особую самостоятельную фракцию
вит. С, то очевидно ее существование не могло быть ими обнаружено. Scotti-
Foglieni (2), 1926, 1927, воспользовался цынготным кормом М-те Randoin
[Lopez-Lomba и М-те Randoin, (1) и (2), 1923, М-те Random, 1923].
Источником липовитаминов этого корма служит не гретое молоко, а жир сли-
вочного масла. Корм этот значительно более специфичен, как проба на вит. С,
чем Корм Chick'd и Ните’ъ. Scotti-Foglieni грел в автоклаве свежий лимон-
ный сюк и перегонял его (подробностей не указано) в течение 40 минут,
каждый раз при темпер. 100° Ц, 120° и 135° Ц. Отгоны собирались отдельно,
а остаток вещества в автоклаве обрабатывался горячей водой и фильтровался.
Отгон не давал фиолетовую реакцию на Б. Р., но она получалась в фильтрате
юстатка*-^Одновременно партия свинок получала корм, предложенный М-те
Randoin. Одна партия получала вволю свежий негретый лимонный сок и
в продолжение 100 дней отлично росла. Партии, которые получали лишь
отгоны, быстро погибли. Свинки партии, которая получала только фильтрат
{остатка отгона), прожили 100 дней, не теряя, но и не прибавляя почти
в весе.	_
Зато те свйнки, которые получали и фильтрат остатка, и отгон, полу-
ченный при 120° Ц, обнаружили рост и прибавку веса, совершенно равные
свинкам, которые получали свежий сок.
Отсюда Scotti-Foglieni заключил, что в лимонном соке имелись 2 фрак-
ции вит. С—одна из них переходила в отгон при 120° Ц, другая задержи-
валась в остатке от отгона. Заметим, что это заключение основывается лишь
на весьма явной разнице в среднем увеличении веса свинок, которые получали
лишь фильтрат остатка, и тех, которые получали фильтрат и отгон, полу-
ченный при 120° Ц. Источник липовитаминов—факторов роста в корме М-те
Randoin, очень ненадеасен. Возможно, что результаты Scotti-Foglieni объясня-
ются случайным присутствием свинок, которые обладали достаточными запа-
сами в теле липовитаминов в партии, давшей наилучший рост. Добавим, что
текст работы позволяет предположить, что фильтрат давался свинкам вволю.
Аппетит свинок к лимонному соку весьма различен, и не лишено вероятия,
что, разбавленный отгоном, фильтрат поглощался ими охотнее, а потому и дал
лучшие результаты. С другой стороны, указания Scoti-Foglieni на существо-
вание 2-х самостоятельных фракций вит. С подтвердились данными, получен-
ными другим способом [Безсонов (2) (3), 1926 и (1) (2), 1927]. Так, выяс-
нилось [Безсонов (2), 1926, (1) 1927], что при пробе на новом корму с яич-
ным желтком требуется в два раза более свежего лимонного сока, чем при
корме Chick'd и Ните'а, который содержал гретое 1 час при 120° Ц коровье
молоко. Применяя корм Chick'd и Hume'd, нужно было около 0,4 кубика
— 136 —
ва 100 г веса свинки свежего лимонного сока и около 0,8 кубика сока, гре-
того час при 120° Ц. Применяя новый корм в обоих случаях потребное коли-
чество оказывалось двойным; итак, дабы предохранить свинку от цынги, надо
в замену 60 кубиков гретого молока—полтора кубика свежего лимонного сока
или 3 кубика гретого. Между тем, данные очень тщательной работы Jephcoffz,
и Bacharacli'd. в 1921 г. позволяют определить, что ацынготное действие,
полутора кубиков свежего лимонного сока равно таковому 52 кубиков наилуч-
шего свежего (негретого) коровьего молока. Допущение, что содержание вит. С
в 60 куб. молока, гретого чае при 120° Ц, равняется содержанию в 52 кубиков,
свежего молока, явно противоречило многочисленным данным о значительном
разрушении вит. С при часовом нагревании при 120° Ц. Такое нагревание
уничтожает половину вит. С в кислых соках лимона и апельсина; еще значи-
тельней потери соков, обладающих нейтральной реакцией, а потому трудно-
было допустить сохранение почти целиком вит. С при таком нагревании,
молока. Но помня, что все измерения вит. С основывались на применении
корма, который содержал гретое молоко, легко установить противоречие, пред-
положив, что вит. С состоит из 2-х фракций, при чем одна из этцх фрак-
ций, Сх—малоустойчива к нагреванию, другая—С2 почти не разрушается
часовым нагреванием при 120° Ц. И лишь одновременное присутствие в корме
обеих фракций обеспечивает полное ацынготное действие. В таком случае бла-
гоприятное действие гретого молока объясняется не тем незначительным содер-
жанием вит. Сх, которым оно еще обладает, но внесением необходимой дозы
вит. С2, дозе из полутора кубиков свежего лимонного сока.
Прямое доказательство правильности такого предположения могли лишь
дать опыты с 2-мя веществами, из которых каждое представляло бы лишь-
одну фракцию С без примеси или с ничтожной примесью другой фракции.
При принятии такого допущения фракцией Сх в чистом виде являлся кристал-
лический препарат С. За неимением этого продукта пришлось воспользоваться
менее очищенным препаратом Сх, приготовленным следующим -образом: после
очищения капустного сока нейтральным уксуснокислым свинцом и последую-
щих—осаждения вит. С щелочной реакцией, растворения осадка, удаления
свинца, выпаривания,—в сгущенный раствор вводился избыток СаСО8, а затем
прибавлялся этиловый спирт, как было указано выше. Получившийся осадок
удалялся. Осадок этот давал сильную реакцию на Б.Р. и обладал, по расчету
на органическое вещество, высшим титром по брому (160 п более мг брома
на 1 г органического вещества). Раствор выпаривался, высушивался; полу-
чался желтоватый гигроскопический порошок, называемый «сырой вит. С».
Порошок этот, упакованный в особых условиях, сохраняет свои свойства и
физиологическое действие при хранении 5 месяцев и более. Такой порошок
служил источником Сх; небольшое количество лимонного сока, прогретого-
1 час при 120° Ц, обеспечивало присутствие вит. С2. Затем свинки, весом
около 500 г каждая, были подвергнуты следующим испытаниям:
1)	корм Chicle а и Ните г, который содержит гретое при 120° Ц молоко»
и препарат Сх>
— 137 —
2)	новый корм без молока и препарат Сх,
3)	новый корм, препарат Сх и полтора кубика на свинку гретого 1 час
10 мин. при 120° Ц лимонного сока (Cg),
4)	новый корм и 2 кубика на свинку гретого сока,
5)	новый корм, полтора кубика свежего и 3,5 кубика гретого 1 час
10 мин. при 120° Ц сока.
Лимонный сок, предварительно нейтрализированный, и растворы препа-
рата вводились свинкам через рот пипеткой. Опыты дали следующее
результаты:
1)	Ежедневная доза в 40 мг на свинку препарата С1} вполне предо-
храняла от цынги при даче 60 куб. см гретого молока (корм Chick'd. и
Ните’а,).
2)	Доза в 180 мг оказалась недостаточной на новом корму без гретого
молока,—на 34-й день опыта обозначилось резкое падение веса животных,
в среднем 44 г. Начиная со следующего дня, те же свинки, на том же корму
стали получать:
3)	5(кз*г препарата и полтора кубика лимонного сока, гретого 1 час
10 мин. при 120° Ц. Немедленно последовало увеличение веса. 80-дневная
проба показала затем, что такая дача вполне предохраняла свинок от цынги.
4)	Две партии свинок, которые получали новый корм и по 2 кубика,
гретого сока, погибли с признаками цынги ранее 39 дня испытания.
5)	Новый корм, полтора кубика свежего и 3,5 кубика гретого сока.
Содержание витаминов С в такой даче оказалось близким к необходимому, но
не вполне достаточным.
Как можно видеть, свинок равного веса предохраняет от цынги дача
в 40 и 50 мг препарата С1? при условии дополнительной дачи 60 куб. молока
или полтора кубика лимонного сока, гретых 1 час 10 мин. при 120° Ц. Без
этих дополнений даже 180 мг препарата не могут предохранить свинку. Соб-
ственное, самостоятельное антицинготное действие 1х/2 кубиков гретого сока
ничтожно. Им нельзя объяснить благоприятное действие добавления такого
количества гретого сока к 50 жг препарата. В этом можно также убедиться
расчетом, сопоставляя данные опытов с 24-мя кубиками гретого сока и смесью гре-
того и не гретого в других опытах. А потому, опыты эти, повидимому, под-
тверждают предположение Scotti-Foglieni о существовании 2-х фракций вита-
минов С: С2 — менее устойчивой к нагреванию, которая удаляется (отгоняется,
согласно Scotti) при нагревании до 120°С и С2.
Но надо признать, что хотя существование 2-х фракций витамина С
чрезвычайно вероятно, оно не может считаться окончательно доказанным.
Новые мои опыты дали пока следующие указания. [Безсонов (1928, 1].
Более упрощенный препарат витамина С, полученный растворением щелоч-
ного осадка, удалением свинца и выпариванием без последующей обра-
ботки СаСО3 и спиртом, содержит обе фракции С. Дача такого препарата
свинкам, получавшим новый корм без всяких иных добавлений, вполне предо-
храняла их от цынги. То же действие было достигнуто, когда при обработке
138 —
СаСО3 с последующим добавлением спирта и удалением получившегося осадка,
СаСО3 вводился не в избытке, а до неполного усреднения (рп—4). Оба эти пре-
парата, которые заключали в себе обе фракции С, давали сильную реакцию
на Б. Р.
Слецовательяо, если, согласно первым данным, существуют 2 фракции
витамина С, разделение их происходит лишь при обработке раствора препа-
рата избытком углекислого кальция (и затем спиртом). Добавим, что лишь
при таких условиях получающийся после обработки осадок дает сильную реак-
цию на Б. Р. и обладает значительным титром по брому. Очевидно, что при
должном разделении обеих фракций С, фракция С15 которая остается в, филь-
трате от осаждения СаСО3 и спиртом, не должна давать реакцию на Б. .Р., как
не давал ее кристаллический препарат. Упомянем также, что факт .существо-
вания 2-х фракций . витамина В и особенности так называемой «хронической
цынги морской свинки», которая наблюдается при пользовании недостаточными
дозами гретого лимонного сока, приводят также М-те Randoin и Lecoq, 1926
и (3), 1927 путем умозаключения к утверждению существования 2-х фракций
витамина С.	->
Допущение, что существуют 2 самостоятельные фракции витамина С
должно сопровождаться весьма существенной оговоркой. Такому допущению на
первый взгляд противоречит ныне вполне доказанная способность крыс и птиц
созидать витамин С внутри тканей печени. Те данные, которые позволили
установить это явление, будут приведены ниже. Но сейчас необходимо отметить,
что предположение, что в печени крысы созидаются 2 отдельные фракции С,
тогда как печень близкой ей морской свинки не содержит ни одной из этих
фракций, может казаться невероятным. Оно становится более допустимым, если
принять, что одна фракция является производной другой или что они обе про-
исходят из одного и того же тела. Далее мы увидим, что указания, которые
дав? цветная реакция на витамин С, соответствуют такому допущению.
Восстановительная способность антицынготной жидкости
и содержание в ней витамина С
Первые работы Zilva и Безсонова согласно указали, что антицынготные
свойства соков и растворов легко разрушаются соприкосновением с кислородом
воздуха уже при температуре около 20° Ц и атмосферном давлении. Справедли-
вость этого указания подтвердилась затем многочисленными данными различ-
ных авторов и признается и поныне самим Zilva. Так (Daubney и Zilva, (1),
1926) он справедливо указывает, что «величайшей трудностью при работе
с витамином С является легкость, с которой он инактивируется окислением»,
«кгкая окисляемость витамина С казалось бы должна соответствовать и значи-
тельной восстановительной способности этого тела или тел. Zilva в 1924 г.
заметил также, что наиболее чистый им полученный препарат витамина С
редуцировал аммиачный нитрат серебра и перманганат. Но, оспаривая
специфичность реакции Безсонова на витамин С и признавая [Connell
— 139 —
и Zilva, (1) 1924], что сущность этой реакции заключается в восстановлении
молибденового соединения, он пытался выяснить отсутствие прямой связи между
стеденью восстановительной способности (R. [Н2]) данной жидкости и ее содер-
жайием по витамину С. А для этого Zilva предположил, что потеря антицин-
готных свойств при окислении воздухом, возможно, связана с разрушением не
самого витамина С, а другого тела, которое служит предохранителем витамина С*
Полученные им до сих пор данные дали ряд указаний, которые противоречат
такому допущению. Данные эти не лишены интереса, так как хорошо выра-
женные восстановительные свойства доселе являются единственным общим при-
знаком всех витаминов.
Cannel и Zilva (1), 1924, сравнивали снособность лимонного сока,
в котором витамин С не был разрушен, восстановлять аммиачный нитрат
серебра* и перманганат с соком, который был подвергнут предварительно нагре-
ванию или подщелачиванию, ведущих к разрушению вит. С.
Сравнение количеств восстановленного серебра и обесцвеченного перман-
ганата позволяло установить в процентах, насколько уменьшилось при разру-
шении витамина С количество веществ, которые восстановляют серебро и пер-
манганат. Выяснилось, что часовое нагревание на воздухе в кипящей бане
нейтрально и часовое стояние на воздухе слегка подщелоченного лимонного
сока, разрушая большую часть витамина С, уменьшает от 10% до 40% и от
18% до 42%. количество веществ сока, который редуцирует нитрат серебра.
Когда действие нагревания, а также ощелочения продолжалось до 3-х часов,
ведя к полному исчезновению витамина С, разрушение редукторов серебра
достигало от 20% до 60% в первом и от 20% до 70% во втором случаях.
Те же действия значительно менее влияли на уменьшение редуцирующей
способности сока по отношению к перманганату, она уменьшалась всего на -^%
и 6%. Трехчасовое нагревание в атмосфере С0а и суточное хранение подще-
лоченного сока в пустоте нисколько не отражались на уменьшении его редук-
ционных способностей.
Zilva основывает на этих данных вывод, что редуцирующие вещества
лимонного сока разрушаются с иной скоростью, чем вит. С.
Заметим, что, согласно самому Zilva, антицынготные свойства разруша-
ются даже столь слабым окислителем, как кислород воздуха. Перманганат
и даже нитрат серебра должны были окислять (восстанавливаясь) множество
веществ сока, масса которых была огромна по сравнению с массой вит. С.
Даже при допущении, что нагревание и ощелочение сока вело к разрушению
вит. С, совершенно очевидно, что такое разрушение не могло привести к зна-
чительному уменьшению того количества перманганата, который обесцвечивается
органическим^ веществами свежего сока. И~до, и после уничтожения вит. С
большая часть перманганата потребляется веществами сока иными, чем вит. С.
Более слабый окислитель, нитрат серебра, окисляет меньшее количество веществ
сока, чем перманганат, и вместе с тем действия, которые вели к разрушению
вит. С, значительно более отразились на уменьшении титра сока по нитрату
серебра, чем по перманганату.
— 140 —
Исходя из предположения, что витамин С, легко окисляясь слабыми окис-
лителями, обладает значительной редукционной способностью, и что количества
его по весу ничтожно по отношению к количеству прочих веществ лимонного
сока, которые окисляются нитратом серебра и особенно перманганатом, нельзя
было ожидать данных других, чем данные Connell и Zilva. Zilva, (2),
1927, признает, что он тщетно пытался получить препарат, лишенный способ-
ности редуцировать нитрат серебра, но сохранивший антицынготное действие.
Затем он избрал другой, значительно менее энергичный окислитель — цветной
индикатор «фенолпндофенол». При прибавлении «фенолиндофенола» к лимон-
ному соку он быстро обесцвечивается, восстанавливаясь до своей лейкобазы.
Заметим, что лейкобаза эта сама обладает значительной редукционной способ-
ностью, так как она легко окисляется вновь, образуя цветной фенолиндофепол
уже при соприкосновении с атмосферным воздухом. Не только лишенный
лимонной кислоты сок, но и различные фракции препарата С, из него полу-
ченные, обладают способностью редуцировать «фенолиндофенол», превращая его
в бесцветную лейкобазу.
Те факторы, которые обусловливают уничтожение вит. С,щелочная
реакция при доступе воздуха, аэрация и долгое хранение антицынготных
растворов, — ведут также к исчезновению их способности редуцировать «фено-
линдофенол». Однако, такая способность наблюдалась у некоторых фрак-
ций, которые Zilva отделял при приготовлении препаратов, считая их не обла-
дающими антицинготным действием.
Но единственным существенным указанием на то, что восстановитель-
ная способность лимонного сока не связана с присутствием в нем вит. С,
Zilva считает следующий опыт: к децитрированному лимонному соку приба-
влялся избыток «фено л индофено л а» вплоть до появления окрашивания,
свойственного этому индикатору. Таким образом Zilva думал достичь исчер-
пания всей восстановительной способности сока по отношению к фенолиндо-
фенолу. Затем сок этот немедленно испытывался на свинках. Отдельно было
доказано, что фенолпндофенол вредного действия на свинок не оказывает.
Согласно заключению Zilva, такой восстановленный фенолиндофенолом сок не
испытывает очень заметной {very appreciable) потери антицынготных свойств.
Приведенные им данные не вполне соответствуют такому заключению —
все три свинки, которые получали кроме корма Chick'b и Ните'г полтора
кубика лимонного сока, обработанного избытком фенолйндофенола, умерли от
цынги на 43, 49 п 57-й день.
Такая доза необработанного сока обычно предохраняет свинку на корму
Chick'a и Ните’а в течение 90 дней. Но, даже давая свинкам двойную дозу
(3 кубика) сока и притом добавленного лишь 3/4 того количества фенолиндо-
фенола, который требуется для появления окрашивания, Zilva наблюдал при
вскрытии животных признаки цынги.
Следовательно, осторожнее признать, что прп испытаниях на корму Chick'?),
и Ните'ъ, сока, -окисленного добавлением фенолйндофенола, наблюдалось частич-
ное уничтожение вит. С.
— 141
Но могла ли вообще работа Zilva с фенолиндофенолом дать указание на
отсутствие восстановительной способности витамина С? Вводя в сок фенолиндо-
фенол, он получал, за счет окисления части вит. С или других сопутствующих
ему тел, лейкобазу фенолиндофенола. Лейко-база эта обладает восстановитель-
ной способностью (R. [Н2]), весьма близкой к той, которую опытные данные
позволяют предполагать для вит. С. Равно и лейкобаза переходит в пигмент,
и антицинготные свойства уничтожаются кислородом воздуха при комнатной
температуре. Появление в соке лейкобазы фенолиндофенола соответствовало
введению рядом с вит. С нового, приблизительно равного ему по силе акцеп-
тора кислорода; Образование бесцветной лейкобазы из окрашенного фенолиндо-
фенола — реакция обратимая.
Следовательно, при неизменности всех прочих условий при возрастании
концентрации в соке лейкобазы должен был наступить момент, когда вели-
чина обратного окисления в фенол индофеноле лейкобазы полагала конец обес-
крашиванию фенолиндофенола, добавляемого к соку. Приняв во внимание, что,
тогда как ничтожная концентрация вит. С в соке оставалась неизменной или
уменьшалась, концентрация лейкобазы возрастала, и что степень восстановитель-
ной способности обеих очень близка, становится очевидным, что в этих условиях
лейко-база не могла не предохранять впт. С от окисления фенолиндофенолом.
Лишь при условии непрерывного удаления из раствора лейкобазы могла бы
быть доказана невозможность разрушения вит. С окислением помощью фено-
линдофенола.
Отметим попутно, что в позднейшей работе Zilva (1929) признал все же
определенно, что исчезновение «восстановительного начала» во всех его опытах
неизменно указывало на разрушение витамина С. Он продолжает настаивать
на предположении, что это начало, обесцвечивающее фенолиндофенол, не вита-
мин С, а особое тело, предохраняющее его от окисления, но как бы то ни
было, теперь и Zilva не отрицает более наличия определенной, постоянной
связи между восстановительными свойствами данной жидкости и наличием в ней
витамина С. Данные и выводы Zilva (1927, 2) вызывают еще иное возражение.
Данные эти получены при применении корма, который содержит гретое
молоко. Выше были приведены указания на существование 2-й фракции вит. С,
при чем эта фракция сохраняется в достаточном количестве в гретом молоке
такого корма. А потому, помимо нечеткости результатов, измерения антицин-
готного действия помощью корма Chick'd, и Ните'ъ не позволяют заметить
влияния 2-й фракции С (С2).
Между тем, признавая, что фракция С, обладает значительным восстано-
вительным действием, надо признать весьма вероятным, что таковое действие С2
повидимому выражено еще сильнее. Прямые доказательства тому смогут лишь
быть даны после окончательного выделения С2. Но и сейчас имеются косвен-
ные указания не только возможности, но и большей вероятности того, что С2
обладает более резко выраженными восстановительными свойствами, чем Сх.
Основываются они частью на указанных выше данных Scotti-Fogelini и Без-
сонова с помощью реакции на Б. Р. Невозможно в этом обзоре дать более
— 142 —
подробное рассмотрение еще неопубликованных данных, полученных парал-
лельным методом бромирования в цветной реакции Б. Р. различных препара-
ратов С и мочи свинок авитаминозных и получающих разные дозы вит.' С.
Но в виду того, что выше было указано, что вит. С2, невидимому, отличается
высоким титром по брому, надо оговорить, что, как и следовало ожидать,
в препаратах Сив моче присутствуют тела иные, чем вит. С2, легко фикси-
рующие бром.
Цветная реакция на витамин С
Первая работа [Безсонов, 1921; см. также Безсонов (1), 1925], йосвя-
щенная фиолетовой реакции антицынготных соков и растворов в присутствии
мономолибденов фосфорно-вольфрамовой кислоты, содержала точное указание, осно-
ванное на первых опытных данных, что реакция эта обусловлена не самим
вит. С, а его нестойким производным. Та же точка зрения последовательно
проводилась в последующих работах. В начале можно было полагать, что вит.
С является единым веществом, и что, следовательно, цветная реакция его
производного является одним из способов отождествления витамина С в его
целом. Ныне имеются веские основания допустить существование 2-х самостоя-
тельных фракций вит. С, но, как отмечалось выше, такое допущение стано-
вится вероятным лишь принимая, что обе фракции С происходят из^того же
тела, или что одна из. фракций является производной другой. Предположения
эти наиболее соответствуют всем доныне известным данным. Если признать
их справедливость, то фиолетовая реакция на Б. Р., присущая лишь одной
фракции С — С2 или производному С2, все же является косвенным способом
к отождествлению и изучению вит. С в его целом. -
Кратко упомянем те фактические данные, которые соответствуют такому
предположению.		ч
Намеченная схема связи фиолетовой реакции на Б. Р. и вит. С основы-
вается на утверждении, что за счет тела, не дающего этой реакции, возникает
тело, ею характеризуемое. При чем отсюда следует, что это 2-ое тело обладает
восстановительной способностью большей, чем обладало вещество, его поро-
дившее. Возможность такого явления в тех условиях, в которых оно должна
происходить, может показаться сомнительной. Однако, такая' возможность уста-
новлена рядом наблюдений, опубликованных задолго до начала первых изыска-
ний, которые указали на двойственность витамина С. Согласно этим наблюде-
ниям [Безсонов (3), 1924, (1), 1925], реакция на Б* Р., которая получается
с различными жидкостями животного и растительного происхождения, может
быть подвергнута следующей проверке: испытуемая жидкость подкисляется и
подвергается краткому нагреванию, после охлаждения Б. Р. добавляется к жид-
кости не гретой и гретой. Увеличение сил фиолетовой реакции в гретой жид-
кости по отношению к негретой удостоверяет присутствие деятельного вит. С;
отсутствие такого увеличения или уменьшения реакции в гретой жидкости
означает очень малое наличие или полное отсутствие вит. С.
— 143 —
Такое увеличение силы фиолетовой реакции неизменно наблюдалось во
всех растительных соках, антицинготное действие которых было установлено
пробой на свинках; оно никогда не проявлялось в жидкостях, лишенных анти-
цынготных свойств. Жидкости, которые содержат небольшое количество вит. С,
но не дают заметной фиолетовой реакции, как-то — свеже полученная сыво-
ротка молока, после прогревания^ обнаруживают эту реакцию.
( Не прибегая к подкислению и кипячению антицынготных соков, можно
наблюдать начальное' возрастание силы цветной реакции при их хранении при
обыкновенной температуре, но вскоре реакция уменьшается, а затем вполне
исчезает. Значительное усиление реакции наблюдают, не прибегая к подкисле-
нию, X антицынготных жидкостях, прогретых полчаса прп 120° Ц в автоклаве.
В некоторых случаях (молоко) увеличение реакции наблюдается даже, если
такое нагревание длилось 1 час.
Итак, образование в антицынготных жидкостях, попутно с разрушением
вит. Ср тела, которое дает фиолетовую реакцию на Б. Р, и, следовательно,
обладает повышенной способностью к редукции, вполне установлено.
Заметим, что доселе во всех случаях, когда наблюдалось предохранение
•свинок от цынги, в пище животных находилось вещество, которое давало фио-
летовую реакцию на Б. Р.
Опыты Zilva и Безсонова с препаратами вит. С, которые не давали
этой реакции, были проведены на корму, который включал коровье молоко,
гретое 1 час при 120° Ц в автоклаве. Такое молоко (сыворотка его), в отличие
от свежего, дает вполне заметную реакцию на Б. Р.
В опытах Scotti — Foglieni, которые бкли посвящены установлению
двойственности вит. С, фиолетовая реакция получалась с фильтратом остатка от
перегона сока; в опытах же Безсонова реакцию давал гретый в автоклаве
лимонный сок. В тех опытах, где такой сок не вводился, сильную реакцию на
Б. Р. давал препарат С, который обеспечивал жизнь свинок.
Каков бы ни был истинный'характер связи фиолетовой реакции с вит. С,
отметим пока данные последних лет, которые подтверждают, и те, которые
ограничивают или отрицают практическую ценность реакции, как признак при-
сутствия вит. С в различных природных веществах.
До сих пор все авторы, которые изучали применение фиолетовой реакции
Б. Р. на витамин С, в том числе и те, которые отнеслись к ней наиболее
критически, согласно признают, что она дается всеми свежими соками плодов
и овощей, известных по своему антицинготному действию [Кау и Zilva
1923; Wedgewood и Ford, 1924; Коортап (1), (2), 1924; Loewy, 1925;
(Armando) Frank, 1925].
Количественное соответствие между силой фиолетовой реакции и богат-
ством витамином С растительных соков отрицается: Хау и Zilva, 1923,
Frank, 1925, которые, испробовав на Б. Р. и одновременно биологической
пробой плоды, овощи и листья многочисленных растений, указали, что по
общему правилу соки, весьма богатые вит. С, дают сильную фиолетовую реак-
цию, а соки, в которых содержании вит. С мало или сомнительно, дают ела-
— 144 —
бую или вовсе не дают реакции. Frank оговаривается, что применение Б. Р.
должно быть ограничено случаями, когда фиолетовая реакция соков резко выра-
жена. Наличие слабой реакции или ее отсутствие дают указания, которые не
вполне соответствуют данным биологической пробы. Коортап, 1924, и Loewy,
1925, нашли, что реакция на Б. Р. растительных соков хорошо соответствует
данным опытов над животными. Затруднения в правильном истолковании
в случаях слабой реакции Loewy объясняет физическими особенностями среды,
которая может затруднить точный умет цветной реакции. Вполне очевидно, что
фиолетовая реакция отнюдь не может вполне заменить биологическую пробу
на свинках. Но практически ценным применением этой реакции является
возможность быстрого и Легкого испытания на вит. С растений давно#'мест-
ности, консервов и овощей, приготовленных в пищу.
Как то уже указывалось в первых работах, сообщавших о существова-
нии этой реакции [см. Безсонов (1), 1925], нельзя при ее помощи точно
определить относительное богатство вит. С различных растений. Но данные
Безсонова, подтвержденные Koop'mt, 1924, Frank'ом, 1925, и Loewy, 1925,
указывают, что она позволяет различать растения, обладающие большим содер-
жанием вит. С (доза на свинку на корму Chick’& и Нпте’ъ от 1 до 2 куби-
ков сока) и средним (доза на свинку около 10 кубиков сока).
Добавляю, что, употребляя дополнительное условие — прогревание сока
перед пробой, возможно определять и 3-й разряд бедных вит. С соков (доза
на свинку около 100 кубиков).
Пример такого определения в жидкости, бедной вит. С, нерастительного
происхождения, а именно, в коровьем молоке — был уже указан [Безсонов,
1), 1925]. Сыворотка свежего молока не дает реакции, но опа появляется,
(если молоко было прогрето в автоклаве при 120° Ц час и более или подверг-
нуто короткому кипячению на воздухе.
Дополнительная проба с прогреванием совершенно необходима, когда на
реакцию испытывают не свежий сок растения, а вытяжку заготовленных впрок
плодов, овощей, лимонного сиропа или других обработанных продуктов. В таких
случаях реакция часто может быть значительной и до нагревания, но лишь ее
усиление в нагретых жидкостях укажет присутствие в них деятельного вит. С.
Из всех критических замечаний Zilva (Kay и Zilva, 1923) по поводу
фиолетовой реакции на вит. С наиболее существенным являлось утверждение,
что вытяжки из дрожжей также дают эту реакцию. Между тем известно,
что дрожжи всегда совершенно лишены антицынготного действия. Повторив
опыты Zilva, Безсонов [(4), 1924] вновь подтвердил отсутствие фиолетовой
реакции в вытяжках дрожжей. Но Zilva снова [Connell и Zilva, (1) 1924]
-заявил, что, при пробе на Б. Р. вытяжки дрожжей, он наблюдал появление
окраски («а coloration-»).
Loewy в 1925 г. проверил противоречия данных Zilva и Безсонова,
испытывая на Б. Р. вытяжки дрожжей и различных препаратов, из них полу-
ченных. Опровергая утверждение Zilva, он удостоверил, что все эти вытяжки
фиолетовой реакции на Б. Р. не давали. Возможно, что результаты, полученные
— 145
.Zilva, объясняются фильтрованием или центрифугированием растворов уже
после прибавления реактива, или прибавлением слишком значительного коли-
чества реактива.
Весьма существенной причиной противоречий является также различие
в кислотности (точнее рн) испытуемого раствора. Согласно М. С. Егорову
(1928), когда среда явно кислая, чувствительность фиолетовой реакции стано-
вится слишком велика и окрашивание появляется и в отсутствии витамина С,
есйи раствор содержит вещества богатые витамином В — например, настой
дрожжей. В растворах нейтральных и слабо-щелочных, чувствительность
цветной реакции слабеет и она становится специфической для витамина С 1).
Несмотря на некоторые пробелы, исследования Егорова привели его
к наиболее разработанному и колориметрически точному способу определения
витамина С. О действительной ценности способа Егорова можно судить лишь
-сравнив им полученные данные с данными биологических испытаний. Соб-
ственные указания Егорова на результаты, опубликованные в литературе,
•ограничиваются весьма неопределенной качественной оценкой.
А потому любопытно привести несколько примеров количественного
сравнения его данных с данными, которые были получены опытами над свин-
ками. Общей основой сравнения примем богатство витамином С свежего сока
лимона, выразив его, согласно обозначению Егорова, цифрой 3,5. Пересчитав
соответственно с принятой основой данные различных авторов получим:
Свеж, растения: . Плоды, овощи	Колориметр, определен. Егорова	1 Проба на свинках	Авторы	Примечание
Лимон		3,5	1 3,5	Chick и Rhodes (1920)	
Апельсин		3,5	3,5	Davey (1921), Delf (1925)	
Помидор		2,5	2,45 до 3	Delf (1924,2)	Большие колеб.
Яблоки		1,0	0.5 до 1,7	Bracewell^ Hoyle и Zilva (1930)	в содерж. вит. С в завис, от сорта
Картофель		0,6	0,52	Givens и Me Glugage (1921), Shorten и Rag (1920)	
Морковь красная . . Капуста красная . . .	0,8 3,8	।	0,66 i	Безсонов (неопубликован. данные)	
Капуста зеленая . . .	—	i 5,25 1	Delf (1920,2) Безсонов (1928)	
i) Заметим, что влияние рн среды на специфичность подобной реакции вполне
согласуется и с требованиями теории. Как известно рн — степень концентрации ионизи-
рованного водорода — влияет на R (На) — степень концентрации и давление молекулярного
{редукционного) водорода. Для появления фиолетовой реакции, которая есть реакция вос-
становления, требуется чтобы R (Н,) достиг определенной величины. Невидимому в нейтраль-
ной среде R (Н,), обусловливаемый витамином С, достигает этой величины, тогда как
R (Н,) дрожжей в этих условиях) еще недостаточен. Более подробно о значении R (Ht)
для цветных реакций витаминов см. Безсонов (1929, ,1). Н. Б.
Ввтаигаы.	Ю
— 146 —
Единственное крупное расхождение наблюдается при измерении капусты-
Объяснить его можно лишь тем, что сравнивалась красная капуста и зеленая..
Тем более, что мои прежние колориметрические определения указали на меньшее
содержание витамина С в зеленой капусте, чем в лимоне, тогда как опыты
над свинками выяснили, что зеленая капуста в полтора раза богаче витами-
ном С лимона. Расхождение уменьшается, если пользоваться цветной реакцией
по способу Егорова, но все же остается значительным.	ч
Дальнейшего улучшения невидимому возможно достигнуть, производя пробы
при всегда одинаковом рн= 7. Надо-однако признать, что в исключительных
случаях расхождение оценки вит. С в свежих тканях путем цветной реакции
и биологическим способом может превышать погрешность последнего. Относи-
тельно влияния на разрушение витамина С нагревания, щелочной реакции
и заготовки впрок растительных продуктов, данные Егорова совпадают
в общем с указаниями биологических опытов. В данном случае количественное
сравнение часто затруднительно в виду того, что условия опытов редко явля-
ются вполне тождественными. Укажем, в виде наиболее подходящих для сравне-
ния примечу', что, согласно Егорову, картофель, сваренный в супе теряет 80%.
витамина, а  : арке (в мундире лишь) 25%, тогда как опыты-над свинками
(Sheimerl, 1 .) дали при варке очищенного картофеля потерю витамина С
в 50%. Цельные томаты в консерве сохраняют 33% начального витамина С
по колориметрическому определению Егорова и от 33 др 25% согласно пробам
на свинках {Delf, 1924). Егоров отмечает, что при нагревании лимонного сока
до 120 Ц при полном отсутствии воздуха, в запаянной трубке, цветная реакция
вовсе не обнаруживает потери в вит. С. Имевшиеся в литературе до появления
работы Егорова данные указывали, что при испытании на свинках лимонного
и апельсинного соков, нагретых в автоклаве в течение 1 час. при 120° Ц, утрачи-
валось приблизительно 50% вит. С. Однако, в этих опытах влияние воздуха на
нагретый сок не было исключено в достаточной мере. Новые исследования в зна-
чительной мере уменьшили это влияние. И тогда обнаружилось, что разрушение
витамина С вызывалось не столько собственным действием высокой температуры,,
сколько сочетанием температуры и окисления. Zilva (1928 и 1929) заключает
даже, что такое нагревание само по себе совершенно не действует на вит. С. Заме-
тим, что данные его собственных опытов не совсем сходятся с таким заклю-
чением. Совпадая с моими последними неопубликованными наблюдениями, они
свидетельствуют что в этом случае разрушается около 20% вит. С. Способ Егорова
нуждается в дальнейшей разработке и заменить всецело биологическую пробу,
особенно при работах по раскрытию самой природы и свойств витамина С, он
не может.
Но то, что выше было сказано об этом способе, указывает, что он ныне
уже обладает известной ценностью для решения чисто практических задач:
определения относительного богатства витаминов различных сортов того же
плода, быстрой ориентировки в антицинготной ценности растений и, наконец,
все же до известной степени дает возможность удобной проверки приготовления
пищи. Сообщим существенные особенности техники Егорова', реактив приго-
— 147
товляют, растворяя 15 г кристаллов Б. Р. не в 5% серной, а в 5% уксусной
кислоте и доводя общий объем до 100 кубиков. Для определения вводят
в пробирку вытяжку из 1/2г исследуемого вещества или 2/2 кубика сока. Раз-
бавляют водой, доведя объем до 5 кубиков. Кислые соки при этом усредняют
двууглекислой содой. Затем добавляют в пробирку 1 кубик реактива, прогревает
содержимое в кипящей воде 5 минут и переносят в холодную воду. По охлажде-
нии процеживают сквозь асбест и сравнивают со стандартными растворами гидро-
хинона. Содержание витамина С выражают в сотых долях мг гидрохинона
на г исходного исследуемого вещества. Основой для расчета служит тот
раствор гидрохинона, который оказался одинаковой окраски с исследуемой жид-
костью. Исходный стандартный раствор гидрохинона получают, добавляя к од-
ному мг гидрохинона, растворенного в воде, один кубпк 15%-ого реактива г)
и доводя здтем водой общий объем до 50 кубиков.
Добавим, что при пользовании способом Егорова полезно, когда предмет
пробы не является живой тканью, прибегать к дополнительной проверке,
а именно, сравнивать реакцию на вытяжках, прогретых до прибавления
реактива и непрогретых.
Остается упомянуть несколько простодушное возражение некоторых авто-
ров, согласно которым нельзя пользоваться Б. Р. для обнаружения витамина Сг
так как сине-фиолетовое окрашивание Б. Р. дается рядом разнообразных тел,
обладающих хорошо выраженными восстановительными свойствами. Возражение
это следовало бы отметить, так как оно может быть отнесено к большинству,
если не ко всем прочим известным реакциям на витамины, да и не только
на витамины.
Сине-фиолетовое окрашивание на Б. Р. суть реакция восстановления.
Предел чувствительности этой реакции обусловлен определенным небольшим
давлением восстановительного водорода — иначе говоря, соответствует характер-
ной величине R (Н2) исследуемой жидкости. Величина эта характерна лишь
для жидкостей и растворов биологического происхождения, в которых встре-
чается витамин С. Пропускание водорода, сероводорода и вообще воздействие
химических восстановителей повышает величину П(Н2) во много сот раз
против той, которая обычна для подобных сред. Молекулярный сероводород
и водород присутствуют в живой ткани, но в количествах /исчезающе-
малых.
Glass шапп и Posdeev (1929) нашли, что степень силы цветной реакции
на Б. Р. в точности совпадает с содержанием таннина в данном растворе
и, следовательно, указания реакции, когда ее применяют к исследованию соков
растений, относятся не к витамину С, а к присутствующему в этих соках
таннину.
х) Следовательно, одпн .ш гидрохинона на 150 мг кристаллического реактива, что
соответствует отношению: одна молекула гидрохинона на три молекулы мономолибденово-
фосфорно-вольфрамовой кислоты. Это молекулярное соотношение, которое ссответствует-
максимальной цветной реакции гидрохинона, было точно указано в „Успехах биологической
химии" [2>езсоиов(1925,2)], но приведенное в виде примера число было тогда йскажено. Н.
*	10* *
— 148 —
Объяснению этому противоречит ряд данных. Сок выжатый в присутствии
кислот из свежего картофеля, дает резкую синюю реакцию и оказывает явное
антицинготное действие, если же выжимать сок не обсыпав лимонной или вин-
нокаменной кислотой ломтик картофеля, то сок не дает реакции и оказывается
лишенным антицынготного действия [Безсонов (1921, 2) и (1922)]. Прибавле-
ние кислоты к уже выжатому соку не воскрешает утраченную им способность
давать реакцию и предохранять от цынги. Сок персика дает резкую реакцию
Б. Р. и обладает антицинготным действием; сок сливы не дает реакции или
дает лишь чрезвычайно слабую в соответствии с отсутствием или крайней
слабостью его антицынготного действия. Можно было бы привести еще ряд
сходных примеров, но вряд ли это необходимо. Дело в том, что лишь неочи-
щенный реактив дает сине-фиолетовую реакцию с растворами таннина.
Надлежаще приготовленный и проверенный раствор кристаллов моно-молибденово-
фосфорно-вольфрамовой кислоты дает в присутствии таннина весьма характер-
ную желто-бурую реакцию. Ее стойкость и отчетливость побудили в свое время
[Безсонов (1925, 1)] Воскресенского предложить пользоваться ею для изго-
товления образцовых растворов при колориметрических измерениях желтой
реакции на Б. Р.
Образование витамина С в теле крыс и птиц
Первые указания Parson'а в 1920 г. на способность крысы образовывать
в печени вит. С, отмеченные в прошлом обзоре [Безсонов (2), 1924], возбу-
ждали недоверие, в виду необычайности образования вит. С вне растительной
ткани. Но затем ряд работ подтвердил, что не только крысы, но и птицы
обладают такой способностью, и тем объясняется отсутствие у них потребности
•в вит. С.
Patson п Hutton 1924, Lepkovsky и Nelson, 1924, подтвердили, что
печень крыс, притом крыс, которые в течение 2 поколений получали корм,
лишенный С, корм вполне специфический, без добавления гретого молока,
предохраняет свинок от цынги. Было также выяснено Par sori <пл и Reynolds
в 1924 г., что сами свинки такой способности совершенно лишены. Авторы
давали печень свинок, получавших вит. С другим свинкам, лишенным вит. С,
и достигали тем предохранения последних от цынги. Но печень свинок, кото-
рые содержались на корму, лишенным вит. С, не оказывала никакого антицин-
готного действия.	*
Таким же способом было показано Carrick'oa, Careylov. и Hauqe
в 1925 г. образование вит. С в печени цыплят. Способность крыс и птиц
созидать витамин С внутри тканей своего тела объясняет отсутствие у них
потребности в этом витамине. Данные Найде и Carrieck'z. 1925, потвержден-
•ные Безсоновым, [(2), 1925, и (1), 1927], свидетельствуя о полном отсутствии
вит. С в яичном желтке кур, указывают, что и в начальных стадиях своей
жизни птицы не нуждаются в вит. С.
В различной степени выраженной способностью к созиданию вит. С
обладают, невидимому, и другие млекопитающие, кроме крысы. Так, уже
— 149 —
ранее имелись указания о весьма малой потребности в вит. С кролика; согласно-
Hart’s, Steenbock's, Elvehjem's и Waddell's, 1925, кролик совершенно не
нуждается в вит. С. Имеются также указания, что только некоторые разно-
видности собаки нуждаются в вит, С. Наконец, опыты Hughes’s, Fitch’s,
и Cave’s—Riddell’s, 1927, привели к заключению, что лишь некоторое коли-
чество вит. С коровьего молока происходит из пищи коровы, а часть его-
созидается внутри тела коровы.
Сохранение растительными продуктами антицынготных свойств
при долгом хранении
Delf, (2), 1924, проверяя прежние данные относительно богатства,
вит. С свежих помидоров и консервированных, установила следующее: наи-
меньшая дневная дача свежего сока помидоров, которая предохраняет свинку
в 400 г от цынги, равна от полутора до 2 кубиков — в случае английских
помидоров—и еще большему количеству, когда помидоры южно-африканские.
Следовательно, европейские помидоры обладают богатством вит. С близким
к лимонам и апельсинам. Выяснилось, что потери вит. С при хране-
нии помидоровых консервов бо'лыпие, чем то указывали прежние данные.
Консервы цельных. томатов после 6 месячного хранения теряли от двух
третей до трех четвертей своего начального богатства вит. С. При дальнейшем
хранении, до 4 лет, наблюдались дальнейшие потери, но менее значительные.
Заготовленная впрок кашица (пюре) из помидоров после 6 месячного хранения
содержала лишь одну восьмую начального количества витамина С.
Интересно отметить, что стерильность отнюдь не является главным
условием сохранения вит. С в плодах, в частности, в помидорах. Согласно-
Lepkovsky, Hart's, Hastings's и Frazer's (1925), сок помидоров, бродивший
в течение 24 дней, продолжал проявлять значительные антицынготные свой-
ства; 4 кубика такого сока обеспечивали свинке потребное ей количество
вит. С. Причиной брожения являлись бактерии.
Работы прежних лет содержали указания, что полученные выпариванием-
в пустоте децитрированных соков лимона и апельсина густые вязкие сиропы
сохраняют большую часть своего начального богатства вит. С при хранении
до 2 лет. Humphrey (1926) хранила 5 лет высушенный в аппарате Me Clen-
don's апельсиновый сок, смешанный с 25% сахарозы. Продукт этот, испы-
танный на свинках, показал антицынготное действие, близкое к действию
соответствующего количества свежего сока. Позднейшие данные выяснили, чт
примесь глюкозы в значительной степени предохраняет вит. С от разрушения
при долгом хранении и при нагревании жидкостей, которые его содержат.
Некоторые авторы указывали, будто подобным предохраняющим действием
обладают ничтожные дозы метабисульфита калия (т.-е. по существу двуокись
серы). Недавно сведение это попало в заграничную повседневную печать и было
ею широко распространено. Между тем весьма обстоятельная проверка Williams
и Соггап (1930) выяснила, что примесь метабисульфита калия не только не
задерживает, а ускоряет распад витамина С. Одно из наиболее простых
— 150 —
и действительных средств сохранить в течение 4-х и более месяцев антицин-
готные свойства лимонного' сока, состоит в легком его подкислении, добавле-
нием 0,3 проц. кр. соляной кислоты (получается рн= 1,6). Такое подкисление
не предохраняет сок от плесеней, а потому его необходимо пастеризовать, что
в виду его кислотности ведет лишь к очень незначительной потере вита-
мина С.
Некоторые физиологические особенности действия витамина С
Характерные признаки цынги проявляются лишь при остром и продол-
жительном отсутствии в питании витамина С, а потому в обычных условиях
жизни типичная цынга наблюдается у человека редко. Однако давно уже про-
фессор Меленби указывал, что в Англии многие случаи детских недомоганий
связаны с недостаточно полным обеспечением детей витамином С. Явно цин-
готные признаки могут совершенно не наблюдаться у такого частично авита-
минированного ребенка. Кроме того, скрытая (латентная) цынга, являясь
первопричиной недомогания, часто затемняется появлением какой либо заразной
болезни. Для клинических наблюдений в этой области существенно было
располагать препаратами витамина С. Пользовать больных детей крупными
дозами лимонного сока или сырой зелени во многих случаях является опасным.
Первые клинические применения препаратов лишенного лимонной кислоты
и обезвоженного сока лимонов, были применены английскими авторами
{Harden и Zilva и друг.) к излечению отдельных острых случаев детской
цынги. Затем профессор Rothery (1924) смог установить положительное
действие значительно более концентрированных препаратов, которые были
мною выделены из капусты, леча ими младенцев, развитие которых (весовой
прирост) долгое время являлось остановленным, но которые отнюдь не проявляли
каких-либо признаков цынги. Наиболее систематическое и подробное исследо-
вание лечебного действия витамина С в некоторых заболеваниях раннего детства,
•было выполнено, пользуясь теми же препаратами, профессором Rohmer в дет-
ской клинике Страсбургского университета. Rohmer (1) (2) (1929) наблюдал:
1) излечение препаратом типичной детской цынги, 2) целительное успешное
действие в лечении болезни coeliaque (хронически несовершенное пищеварение),
3) восстановление весового прироста дистрофичных младенцев, не страдающих
расстройством пищеварительных функций. Несмотря на отсутствие ясно выра-
женных признаков цынги, можно предполагать, что те недомогания, о которых
только что говорилось, были вызваны частичным авитаминозом С. Во всяком
случае, их главной причиной не являлись заразная (микробиальная) болезнь.
Имеются, однако, указания и о полезном содействии витаминов, в частности
витамина С, в борьбе со столь типично заразной белезнью, как туберкулез.
В этом направлении в немецких клиниках особенно в последние годы были
получены очень обнадеживающие результаты. Но достигнуты они были, глав-
ным образом, кормлением такими естественными продуктами, которые были воз-
можно более богаты всеми ныне известными витаминами. Относительно действия
витамина С укажем на клинические наблюдения Canegaly (1914), касавшиеся
— 151 —
^хорошо выраженного положительного действия усиленных дач моего препарата
'вит. С на тяжело больных туберкулезом (кавернозная стадия) женщин.
Mouriquand, Rochaix и Dosdat (1925), а также и немецкие авторы
'наблюдали различие в течении туберкулеза у свинок, частично или совер-
шенно лишенных витамина С и получивших достаточное количество вит. С.
Сопротивление заражению и длительность жизни заболевших свинок, как
и следовало ожидать, оказались большими, когда свинки получали достаточную
дачу вит. С. Заметим, что опыты эти отнюдь не доказывают специфического
действия вит. С по излечению туберкулеза. Авитаминоз С, равно как и В,
сопровождается явлениями общего голодания, что и объясняет пониженное
-сопротивление заражению и его последствиям.
Весьма характерна для авитаминоза С повышенная к нему чувствитель-
ность тех свинок, которые болели цынгой и были затем вылечены. Mouri-
quand, Michel и Bernheim (1924) сравнивали свинок, в первый раз подвер-
гнутых авитаминозу С, и свинок, которые, испытав такой авитаминоз, пробыли
затем 62 и 87 дней на обычном корму. Продолжительность жизни всех
трех групп на корму, лишенном вит. С, оказалась равной. В равные сроки
также стало возможным впервые различить характерный хруст костей — приз-
нак внутренних кровоизлияний. Но свинки 2-ой группы обнаружили боль на
8-ой день, у 3-ей группы'—на 13, тогда как свинки, впервые подвергнутые
авитаминозу — между 17 и 15 днем. Мало специфический, неопределенный
корм, к которому прибегает Mouriquand, вынуждает с осторожностью отно-
ситься ко всем данным этого автора. Но в данном случае мои наблюдения,
выполненные применением.корма Chick'а и Ните'ъ или нового корма с яичным
желтком, вполне совпадают с данными этого автора. Повышенная чувствитель-
ность свинок, которые были подготовлены недавним авитаминозом С и затем
вылечены, проявляется не только ранним ошущением боли, но и весьма быстро
наступающим резким падением веса. Последний признак, не отмеченный
Mouriqiiand'w., всего лучше различает таких свинок от свидетелей, которые
были впервые подвергнуты авитаминозу.
Замечательно, что, как и в опытах Mouriquand'а,, свидетели, подготовлен-
ные и свежие, гибли в разные сроки (в пределах точности таких опытов).
Mouriquand и Leulier (1925) отметили, что при авитаминозе С содержание
холестерина в надпочечных железах и крови свинок отличается от нормального.
Данные эти были подтверждены и дополнены М-те Randoin и М-lle Мг-
chaux (1926). Так же как и авитаминоз В, авитаминоз С ведет к разбуханию
гнадпочечных желез. По расчету на свежий вес желез содержание в них холе-
стерина составляет от 5 до 6,5% у нормальных свинок и от 2,6 до 2,8%
у свинок, которые получали в течение 21 и 25 дней цинготный корм.
А. В. Палладии и А. И. Кудрявцева (1923) отметили, что при авитами-
нозе. С свинки, в ее моче появляется креатин. Чем далее длится авитаминоз,
тем более значительное количество общего азота мочи представлено креатином
и креатинином. О значительных изменениях в метаболии экскреторного азота
'.при авитаминозе С свидетельствуют также данные М-те Randoin et M-lle
— 152 —
2ИгсЛ<шж(1925). Содержание мочевины в крови свинок на обычном корму лишь-
немногим уступает содержанию мочевины на корму М-те Randoin, который был
дополнен дачей лимонного сока; 0,36 г на л в первом случае и 0,38—во
втором. Но достаточно было прекратить дачу лимонного сока, чтобы начало зна-
чительно повышаться содержание мочевины в крови. Между тем, сухой вес
лимонного сока, который давался свинкам, составлял всего около 0,5% общего-
веса всей пищи. После 12 дней такого корма, содержание мочевины в крови
достигает 0,5 г на л, после 16 дней — 0,8 г на л.
Особое значение этих наблюдений в том, что они указывают на те началь-
ные изменения, которые вызывает в организме сам авитаминоз, а не на те вто-
ричные последствия его длительного действия, доселе изучавшиеся главным
образом под видом авитаминозных заболеваний.
О непосредственном физиологическом действии витамина С.
и водорастворимых витаминов
Выше были упомянуты многочисленные исследования, посвященные вы-
явлению влияния витаминов на обмен веществ, морфологию и действие раз-
личных органов. Большая часть их касалась авитаминоза В. Наблюдения эти'
получались помощью опытов, длившихся почти всегда более 14 дней. Срок опыта
должен был быть достаточен для появления признаков, считавшихся характер-
ными для авитаминоза В. Между тем ряд данных указывает, что начальное изме-
нение, вызываемое в организме отсутствием в пище водорастворимого вита-
мина В или С, происходит уже через несколько часов. Оно влечет ряд вторичных
последствий, а потому трудно связывать признаки, которые проявляются после
двухнедельного авитаминоза, с самим авитаминозом, а не со вторичными послед-
ствиями, вызванными им и сопровождавшими его с самого начала опыта.
Еще в 1920 году A. Lumiere [1920, (1) и (13), 1924] указал, что ряд.
признаков, считавшихся наиболее типичными для авитаминоза В, проявляются
и в случае частичного или полного голодания, даже в присутствии витамина В.
Ссылки на работы A. Lumiere‘& затруднялись тем, что они содержали также
и ряд предположений, несовместимых с добытыми позже опытными данными.
Но относительно обозначения признаков авитиминоза В и голодания
в присутствии витамина, позднейшие данные Drummond1 а. и его сотрудников,
изложенные выше, совпадают и дополняют данные A. Lumierel&.
Из всех признаков авитаминоза В лишь падение аппетита является,
согласно Marrian, Balcer, Drummond, и Wollard (1927), Коп и Drummond
(1927), признаком, к<щ>рый характеризует действие этого авитаминоза. Все
остальные могут быть также вызваны голоданием, которое неизбежно сопро-
вождает авитаминоз.
Итак, можно было бы предположить, что гидро-авитаминоз, авитаминоз В,
уменьшая аппетит, вызывает голоданье, которое в свою очередь обусловливает
возникновение характерных признаков для бери-бери. Однако, такое объяснение,,
хотя оно основывается на хорошо установленных данных, противоречит дру-
гим, не менее достоверным. Дело в том, что A. Lumiere [(2), '1920 и 1924]
153 —
первый показал, что насильственное кормление голубей счищенным рисом лишь
ускоряет появление признаков бери-бери (полиневрита) по сравнению с пти-
цами, которые поглощают его добровольно и, следовательно, страдают от голод-
ного истощения.
Marrian, Baker, Drummond и Wollard (1927) получили данные, вполне
подтвердившие данные А. Lumiere’a. При чем они насильственно кормили
голубей) не очищенным рисом, а пищевой смесью, которая заключала все
нужные голубю вещества, кроме витамина В. Припадки полиневрита наступали
на 16 ый день у голубей, кормленных насильно, и на 30-й у тех, которые
принимали пищу добровольно.
Кроме того, надо отметить, что, согласно Drummond, разбухание надпо-
чечных желез проявляется в одинаковой степени и у голубей, кормленных на-
сильно, и у тех, которые поглощают пищу, лишенную витамина В,добровольно.
Если признаки бери-бери (полиневрита) возникают из-за голодания, является
непонятным, почему насильственное кормление, уменьшая голодание (падение
веса становится ничтожным), не устраняет и даже ускоряет проявление этих
признаков.
Drummond (Marrian, Baker, Drummond и Wollard, 1927), предпо-
ложил, чтобы выйти из затруднения, что те же признаки бери-бери могут
быть вызваны различными причинами. Указывая, что отравление не смер-
тельными дозами цианистых солей вызывает у голубя признаки, схожие
с бери-бери, он предполагает, что нервные припадки, которыми проявляется
авитаминоз В у птиц, объясняются самоотравлением организма, и что вита-
мин В усредняет действие ядов или препятствует их возникновению. Также
и Williams (1927) напоминает, что поражения нервной системы, наблю-
дающиеся при заболеваниях бери-бери, пелагрой и смягченными видами цынги,
наблюдались также вследствие отравлений малыми дозами мышьяка пли
органическими кислотами и этиловым спиртом. Данные его собственных очень
любопытных наблюдений привели его к мысли, что все болезни по недоста-
точности вит. В связаны с самоотравлениями организма; — витамины действуют,
как противоядие. Яды возникают в процессах, сопровождающих усвоение пищи.
Предложение Drummond-Williams не могло сколько-нибудь точно выра-
зить, ни в чем состоит такое самоотравление, ни каким образом препятствуют
ему витамины.. Оно могло лишь основываться на догадках, так как вторичные
явления, сопровождающие авитаминоз, в особенности же связанное с ним
общее голодание, затемняют характер собственного непосредственного действия
авитаминоза и истинную роль витаминов.
Относительно витамина В любопытное подтверждение такой догадки дала
работа Norris и Church (1930) указав, что усиленные дозы витамина В
противодействуют отравлению основными аминами, изоамилом, и холином.
Данные [Безсонов (2) (3) 1928] относительно непосредственного физио-
логического действия другого гидро-витамина — витамина С—также подтвер-
ждают догадку Drummond’a, и Wiliams’ а и вместе с тем приближают к пони-
манию сущности такого самоотравления и противодействия ему витамина.
— 164 —
Способ кратких испытаний физиологического действия
водорастворимых витаминов
Данные эти были получены особым способом — отдельных 48 часовых
испытаний животных. Столь краткий срок испытаний достаточен для опре-
деления физиологического действия витамина С, который, подобно вит. В, не
сохраняется в организме, если параметры, измеряющие это действие,' доста-
точно верны и чувствительны. Опыты эти заключались в следующем: партия
морских свинок, весом по крайней мере около 5 кг и численностью от 7 до
14 животных, помещалась в одну клетку с двойным решетчатым полом
и коллектором мочи. Партия получала 48 часов цынготный корм, состоящий
из смеси: овса 88 г, свежих дрожжей 4 г, свежих куриных желтков 8 г, а затем
другие 48 часов такой же корм, но в придачу получала определенную дозу
витамина С в виде свежей капусты, лимонного сока или препарата, содержа-
щего обе фракции С [Безсонов (1), 1928].
Единицей действия витамина С была принята доза, которая, согласно
предварительным опытам в 80 —100 дней, оказалась строго достаточной для
поддержания в хорошем состоянии свинок, содержимых на таком корму.
Такая доза, обозначим ее предельной, равнялась 0,6 г свежей капусты,
0,8 кубика свежего лимонного сока или.20л«г «препарата С» Безсонова на
100 г живого веса свинки в день. Параметрами действия витамина являлись:
1) вес животных: «) ежедневное взвешивание определяло изменение
веса, которое произошло под влиянием каждой 48-ми часовой пробы, Ъ) опре-
.деление отношения между изменениями веса и аппетита свинок;
2) особенности мочевого- выделения: а) бромное число мочи или коли-
чество брома, связанного всей мочей данной партии, собранной в продолжение
48-ми часов, Ъ) определение фиолетовой реакции мочи помощью реактива Б. Р.
Определение и значение бромного числа мочи
Бромное число мочи определялось способом, представлявшим собою видо-
изменение классического способа Копешаара (Copeshaar). Siegfried и Zimmer-
man |(11,12), 1910] уже использовали его для раздельного определения фенола
и паракрезола мочи. При измерениях влияния витамина С цель ограничи-
валась лишь определением бромного числа в целом. При пересчете его на
количество мочи, собранной в продолжение 24-х и 48-ми часов, получался
численный показатель, чувствительный к переменам, происходившим в моче-
вом выделении.
Напомним кратко сущность метода Копешаара'. к видному раствору
фенола, после подкисления соляной кислотой, бриливают отмеренное количество
смеси бромистого и бромноватокислого калия (КВг и КВгО3). Часть свободного
брома, что выделяется в этом солянокислом растворе, связывается с фенолом.
Затем приливают йодистого калия, избыток свободного брома заменяется иодом.
Свободный иод титруют точным раствором гипосульфита, заканчивая в при-
 сутствии крахмала. Смесь КВг и КВгО3 была предварительно измерена помощью
— 155 —
того ясе раствора гипосульфита, а потому можно высчитать количество брома,
связанного фенолом.
Соблюдая лишь обычные предосторожности, легко получить хорошие
результаты, определяя способом Копешаара фенол, либо паракрезол, взятые
порознь. Но если тела эти находятся в смеси, то, как уже указывали данные
Siegfried^ и Zimmerman'г (1910-412) и Ditz'z и Bardach'z (1912), полу-
•чаютсй трудно объяснимые отклонения бромных чисел.
Дабы избежать их, Безсоновым был выработан способ бромирования,
принципы которого совершенно совпадали с таковыми, опубликованными
в работе Jdrvinen (1927).
1)	Раствор, который подвергают бромированию, должен содержать 10%
(объемных) чистой крепкой серной кислоты и 5% ледяной уксусной.
2)	К*100 кубикам подкисленного раствора, после введения в колбу,
•снабженную притертой пробкой, добавляют от 15 до 20-ти кубиков смеси КВг
и КВгО3, которые выделяют от 120 до 760 мг свободного брома. Количество это
должно от 2,5. до 4-х раз превышать то, которое будет связано фенолами
раствора. А потому необходимо одно предварительное определение.
3)	Бромирование длится одну минуту.
4)	Затем вводят раствор KJ. Раствор этот получен добавлением кубика
воды на г KJ. Каждые 10 кубиков смеси КВг + КВгО3 требуют добавле-
ния кубика раствора KJ.
5)	Действие иода длится 3 минуты.
6)	Свободный иод титруют 0,1 норм, раствором гипосульфита, к концу
титрования вводят 2 кубика раствора крахмала (крепостью в 0,5%) на
100 кубиков титруемой жидкости.
Кроме уже указанных, необходимы растворы: а) водный раствор, содер-
жащий 20% (объемных) крепкой серной и 10% ледяной уксусной кислот
и Ъ) 10% крепкой серной и 5% ледяной уксусной кислот.
Пример. Располагают 15 кубиками прозрачной мочи; предполагается,
что ее бромное число соответствует одному кубику гипосульфита на 1 кубик
мочи; 15 кубиков мочи вводят в размеченную пробирку или колбу и добавляют
равным объемом кислого раствора а; 5 кубиков этого раствора, которые содержат
2,5 кубиков мочи, вводят в колбочку с притертой пробкой и добавляют 45-ю
кубиками раствора В. К 50 кубикам полученного раствора приливают точно
5,5 кубиков КВг + КВгО3. Титрование указывает, что моча поглотила количе-
ство бромаг измеряемого не 2,5, а 1,2 кубиками 1/10 норм, гипосульфита. Сле-
довательно, бромное число мочи должно быть несколько ниже 0.6 кубика гипо-
сульфита па 1 кубик мочи. А потому, для точного определения берут 10 кубиков
смеси мочи и раствора А и добавляют 40 кубиками раствора В. К полученным
50 кубикам, которые содержат 5 кубиков мочи, добавляют 7,5 куб. ВКг + КВгО3;
гипосульфита идет на поглощение свободного брома 5 кубиков. 7,5 — 5 = 2,э.
Разделив 2,5 на 5—число кубиков мочи, получаем, что бромное число одного
кубика мочи равно 0,5 кубика гипосульфита, или 4 мг брома на 1 кубик мочи.
— 156 —
Полученное в таких условиях бромное число является постоянной, харак-
теризующей данную мочу. Доказывается, это следующим образом.
Определив порознь бромные числа мочи свинки и человека и мочи раз-
личных свинок, смешав затем эту мочу, человека и свинки (различных свинок),
и определив бромные числа смесей, убеждаются, что сумма бромных чисел раз-
личных определений всегда равна бромному числу смеси [Безсонов (3) Д928].
Бромирование непосредственно относится к фенолам, главным образом,
к свободным — монофенолу (карболовой кислоте) и паракрезолу мочи, но уда-
лось установить [Безсонов (2) (3) 1928] и другое весьма любопытное зна-
чение бромного числа. Одновременные анализы по микрометоду Nicloux
(1927) на весь углерод мочи свинок и определения бромных чисел указали,,
что на каждый г связанных литром мочи брома, приходится два г углерода.
Результаты испытания взрослых свинок
Пять партий взрослых свинок были поочередно подвергнуты 48-часо-
вым испытаниям. Для наглядности приведем таблицу данных, полученных:
при испытании 1-й партии.
Начальный вес партии 4,875 г. Число свинок 10.
Антицинготное вещество	Число доз вит. С	Измен, веса партии в 48 ч в г	Собран, моча в г	Бром, взят, мо- чей в мг	Влияние вит. С	
					На бромн. число в мг	На вес партии в г
	О	+ 95	41,5	214	—	—
Свежая	2	+ 460	70,1	446	4- 232	4- 365
капуста	О	— ПО	34,8	195	)	—
	4	+ 185	107,5	485	+ 290	4- 295
	О	— 40	50,0	341	—	—
	3	+ 185	96,6	589	+ 238	4- 225
Препарат вит. С	О	+ 150	98,2	333	—	—
	6	+ 210	93,8	722	+ 289	4- 60
Свежий лимон-	О	+ 105	69,8	361	—	—
ный сок	2	+ Ю5	70,1	492	+ 131	0
На других четырех партиях были проверены действия тех же доз, а так же
одной и трех доз витамина. Во всех случаях без исключения влияние вита-
мина проявилось значительным увеличением бромного числа мочи.
— 157 —
Пересчет отдельных увеличений на вес партии в 5 кг И' расчет сред-
него увеличения, соответствующего каждой из различных доз витамина, дают
следующие числа:
	Число доз	0	1	2	3	4	6	
	Среднее увелич. бромного числа мочи в мг . . .	0	112	129 (135) 1)	157	297	296	
Добавим, что вследствие несовершенства клетки, в которой велись опыты,
количество собранной мочи достигало лишь приблизительно -i- выделенной,
моча задерживалась на частых двойных решетках пола и на больших
поверхностях коллектора, а потому и увеличения бромного числа, которые
'были установлены, значительно уступают действительным.
Другая партия взрослых свинок, единственная испытанная в более
усовершенствованной клетке, дала увеличение бромного числа, более чем
вдвое превосходившее те, которые были приведены выше.
Особо надо подчеркнуть, что бромные числа мочи, на которых основан
расчет увеличений, выражают собою количества брома, связанного всей мочей
партии, собранной за 24 и 48 часов. Бромные числа по расчету на л
мочи не дают никакого точного указания на влияние витамина. Бромный индекс
на л мочи возрастает приблизительно параллельно плотности мочи. Сколько-
нибудь постоянной зависимости между значением этого индекса и степенью
естественной окраски мочи не обнаружено. Все серии 48-ми часовых испы-
таний, над партиями взрослых свинок (весом каждая около 500 и более г)
неизменнно указывали на увеличение бромного числа мочи под влиянием
витамина. Прямой расчет в случае применения препаратов С, бромное число
которых было известно, и ряд других данных согласно указали, что увели-
чение это отнюдь не может быть отнесено за счет тех бронирующихся веществ,
которые вносили с собой дозы витамина С.
Положительное влияние витамина С на увеличение бромных чисел мочи
при применении 48-ми часовых проб проявилось в 100%, а на вес в 89%
всех случаев. Расчет данных, которые относились к первым 24-м часам испы-
таний, показал, что положительное влияние вит. С на возрастание бромного
числа успело проявиться в 79%, а на вес —в 58% всех случаев.
Как можно видеть, у взрослой свинки действие витамина сперва про-
является повышением бромного числа мочи, а затем уже повышением веса
животных. Своеобразное подтверждение тому было дано другой серией опытов
!) 135 не среднее арифметическое, а среднее по цифровому своему значению
’число 3-х определений. Н. Б.
158 —
с партией исключительного состава. На 10 свинок этой партии приходилось
i взрослых самки, из них 3 беременных и 6 молодых свинки, весом около
400 г каждая. В отличие от всех прежде упомянутых партий, серия
48-ми часовых испытаний дала в этом случае резкие повышения веса во время
авитаминоза. Кривая веса этой партии, построенная на данных, которые были
отмечены за каждые 24 часа, явно указала, что в псключительном^случае
присутствие беременных свипок отразилось в регулярном запаздывании
действия витамина на вес. Между тем и в этом случае действие витамина
неизменно проявлялось увеличением бромного числа мочи.
Отметим, однако, что увеличение это оказалось наиболее незначительным
в том единственном случае, когда оно сопровождалось небольшим повышением'
веса этой партии.
Для понимания дальнейшего необходимо отметить характер^евязи. между
аппетитом и колебаниями веса животных. Определение воздушно-сухого веса
пиши (экспериментального корма, без витамина и с витамином С), который погло-
щался свинками в сутки —по расчету на 100 г живого веса свинок и одно-
временное изменение веса партий, дали следующие числа:
В сутки
Влияние аппетита на колебание веса животных
Количество пищи, по- глощенной на 100 г свинок (В г)	5,9	6,8	5,7	6,1	5,0	1 1 1 5,0 |	4,0		4,5
Изменение веса пар- тии В %	+ 3,1	+ 3,0	+ 1,3	+ 0,2	-а - — 0,3	— 0.5		-3,0	— 3,1
Приме- чание	с Партия взрос- лых СВИ- НОК	Партия молодых свинок		Моло- дые и берем, свинки	1 Взрослые свинки				Моло- дых сви- пок
Итак, животные, которые поглощают более 5,5 г пищи на 100 г своего-
веса, прибавляют в весе, .а менее 5,5 г — убавляют в весе. Иначе говоря,
колебания веса, находятся в строгой зависимости от аппетита. Никакого ука-
зания на такую зависимость от более или менее совершенного использования
пищи данные эти не дают.
Сопоставляя все данные опытов над взрослыми свинками, мы получаем
следующую схему: авитаминоз, понижение бромного числа мочи, падение аппе-
тита и, связанное с ним, падение веса.
159 —
Явно, что схема эта приводит непосредственно к голодному истощению-
организма, как прямому следствию авитаминоза С. Далее мы постараемся
выяснить все значение этой схемы, но ранее надо отметить особые резуль-
таты, которые дали первые серии 48-часовых опытов не над взрослыми,
а над молодыми свинками, находившимися в периоде быстрого роста. Влияние
витамина^С на прибавление веса таких: свинок такое же, как и в случае
взрослых свинок, и та же связь обнаруживается между их аппетитом и при-
бавлением веса. Но зато влияние вит. С на ‘бромное число мочи молодых
свинок, весом не более 450 г, а особенно свинок от 300 до 400 г, про-
является не увеличением, а падением этого числа. При чем надо отметить,,
что именно в случаях, когда влияние доз витамина выражалось большой
прибавкой веса, одновременно наблюдалось очень значительное падение бром-
ного числа. Та®, например, 2 дозы витамина вызывали повышение веса в 6%
(за 48 час.) и понижение бромого числа мочи в 300 мг партии в 5 кг веса.
Обратно, незначительным понижениям бромного числа могло сопутствовать
даже небольшое понижение веса животных.
Относительно молодых свинок опытных данных имеется еще пока значи-
тельно менее, чем относительно взрослых, но отмеченное явление выразилось
очень резко особенно в виду того, что понижения бромного числа под влиянием
витамина С у взрослых свинок ни разу не наблюдалось.
Выяснение физиологического значения витамина С на основании
данных, полученных новым способом кратких испытаний
Итак, непосредственное действие вит. С, проявляясь повышением бромных
чисел мочи взрослых свинок, повышает мочевое выделение фенола, паракре-
зола, а также и не бронирующихся углеродных тел. Такое действие витамина
возможно объяснить либо как следствие повышения содержания в крови этих
веществ, либо обратно — его понижением.
Предположение, что витамин может увеличивать содержание в крови ядо-
витых веществ, как фенол и паракрезол, явно противоречит этому неоспоримому
благоприятному действию, которое ему свойственно и которое проявлялось в этих
опытах.
Остается лишь допустить, что витамин обладает выделительной функцией,
устраняя из крови часть органических соединений, — неизбежный отброс,
процессов внутритканевого усвоения. Об этом и свидетельствует повышение
бромных чисел мочи взрослых свинок под влиянием витамина. В таком случае
начальная причина болезненных явлений авитаминоза есть самоотравление,
вследствие повышения и содержания в крови фенолов и мочевины. Напомним,
что М-те Randoin и M-elle Michaux (1925) показали, что уже на 12-ый
день авитаминоза С содержание в крови свинок мочевины превышает на
30% нормальное. На самоотравление указывает также факт падения аппетита,.,
которому, как было указано выше, предшествует падение бромных чисел мочи
взрослых свинок.
— 160 —
Следовательно, полная схема авитаминоза может быть выражена следу-
ющим образом: авитаминоз, уменьшенное выделение фенолов и других угле-
родных не циклических соединений (например, мочевины), самоотравление, по-
теря аппетита, падение веса, явления голодания.
В свою очередь, голодание вызывает белковый гидролиз тканей и значи-
тельное образование фенолов. Новый источник обогащения фенолами крови
усиливает самоотравление. Таким образом объясняется то противоречие,
к которому, казалось, вели данные A. Lumier'e‘& и Drummond1^, относя-
щиеся к другому гидро-витамину—витамину В. Напомним, что, согласно этим
данным, признаки бери-бери, будучи совершенно схожими с признаками общего
голодания, тем не менее проявлялись быстрее, когда голубей питали насиль-
• ственно.
Итак, основная роль гидро-витамина -способствовать удалению из крови
избытка ядов, которые появляются в ней, как остаток внутритканевого обмена
веществ. Голодание, увеличивая производство этих ядов (фенолов), сводит на
нет действие витамина и приводит к болезненным последствиям, подобным
тем, которые характеризуют авитаминоз.
Равно становится понятным, почему насильственное питание ускоряет
проявление признаков авитаминоза, увеличивая искусственно количество погло-
щенной животным авитаминозной пищи, тем самым увеличивает и количество
. ядовитых тел, являющихся отбросом усвоения этой пищи. Напомним, что при
рассмотрении данных, относящихся к физиологическому действию вит. В, были
указаны работы Plimmer, liosedale и Raymond (1927) и других авторов, согласно
. которым для обеспечения нормального усвоения пищи определенному числу
калорий пищевой дачи должно соответствовать определенное весовое количество
вит. В.
Помимо выделительной функции, первые опыты с молодыми свинками
указывают на существование и пластической функции витамина С. Функция
; эта также содействует сохранению нормального содержания в крови углеродных
веществ, но не удаляя эти вещества в мочу, а способствуя их использованию расту-
щими тканями. Такая функция витамина близка той, которую приписывают ей,
иначе ее называя, М-те Randoin и Simonnet (1927 и 1928) и многие
другие авторы. Она должна проявляться не увеличением, а уменьшением бромных
чисел мочи. Как можно было видеть, такое уменьшение наблюдается в дей-
ствительности в случае молодых, быстро растущих свинок.
Итак, влияние витамина на мочевое выделение проявляется внешне
. двумя прямо противоположными действиями. Проявления выделительной функ-
ции витамина наиболее явственны в случае взрослых свинок и выражаются
повышением бромного числа мочи. Обратно, у молодых, быстро растущих
животных выявляется, главным образом, пластическая функция витамина,
что затемняет действие выделительной и вызывает не повышение, а понижение
бромных чисел мочи. В общем витамин является, по отношению к внутреннему
обмену веществ, регулятором содержания в крови органических соединений, обра-
-зующихся в течение этих процессов, и тем самым регулятором самого усвоения.
— 161 —
На такую роль гидро-витаминов указывали уже и ранее полученные
данные. Так, согласно Desgrez и Bierry (1920) и другим авторам, крысы,
получающие пищу, Лишенную витаминов, способны усваиваИ» эту- пищу
(первые дни авитаминоза) лишь, когда в состав ее входят одновременно глюсиды
(сахара), протеиды (белки) и липиды (жиры), взятые в определенном отноше-
нии. На этих опытах пытались основать понятие «о уравновешенных пищевых
режимах». Между тем Reader и Drummond (1926), Hassan и Drummond
(1927), Levine и Smith (1927), давая крысам витамины, в особенности
вит. В, в изобилии, наблюдали отличное развитие крыс и полное усвоение
цищевых дач, которые состояли:
1) на 70% из чистого казеина, при чем жиры дачи вносились лишь
такие, которые содержали 2% примеси трескового жира, или
2) на 69% из жиров (они составляли 85% всего числа калорий дачи)
и практически лишенной глюсидов (сахаров).
С другой стороны, напомнив, что данные, относящиеся равно и к вита-
минам С и В, равно указывают и на то, что прямым и неизбежным последствием
этих авитаминозов является голодание, нельзя попутно не упомянуть теорию
покойного М. С. Мильмана (1926), согласно которой старение тканей является
по существу голодным их истощением.
Данные о повышении бромных чисел мочи взрослых свинок под влиянием
витамина С и. понятие о выделительной функции этого витамина находятся
в полном противоречии с главной гипотезой, на которой основывалась теория
Мечникова, гипотезой о проникновении в кровь продуктов бактериальной
деятельности циклических соединений через стенки кишечника. Но интересно
напомнить не гипотезы, а экспериментально обоснованные данные покойного
ученого и его школы (Metchnikoff (13, 15, 1910), Metchnikoff и Wollmann
(1912), Wladyczko (1913)J, которые, впрочем, соответствуют наблюдениям
и других авторов. Согласно этим данным, медленное отравление фенолом и па-
ракрезолом проявляется признаками, которыми отличают старческое вырождение
тканей и органов- Авитаминоз, повидимому, вполне соответствует такому типу
отравления: оно может быть весьма длительным, продолжаться 'многие годы,
когда авитаминоз (или авитаминозы) является не острым, а частичным.
Добытые данные опытов над животными указывают, что практически
.пища людей редко содержит вполне достаточную дозу всех витаминов. ”
Предельная (минимальная) и обычная (нормальная) дозы
витамина С
Д-р Е. И. Вольманн (Безсонов, 1922) первый показал, что поглощение
свинками в изобилии антицынготных веществ ведет к появлению сине-фио-
летовой реакции в их моче в присутствии раствора мономолибденово-фосфорно-
вольфрамовой кислоты (реактива В. Р.). Моча авитаминозных свинок такой
реакции не дает. Реакцию получают, прибавляя к раствору 1 кубик
мочи + 3 кубика воды + 2 капли реактива (15% раствор кристаллов Б. Р.
® 5% серной кислоте).
Витамины.
И
— 162 —
*
Наблюдения д-ра Вольманма вполне подтвердились. Выяснилось также.,
что реакция отсутствует или слабо выражена, пока свинки получают не более-
2 — 3 доз витамина .С; она проявляется постоянно и становится отчетливой,,
когда им дают 4 и более доз. Между тем, даже то количество препарата С,
которое соответствовалоЛлишь одной дозе, растворенное в том количестве воды,
которое поглощалось за сутки партией свинок, давало фиолетовую реакцию,,
в 4 раза более сильную, чем предельно различимая. Позволительно заклю-
чить, что то вещество, которое дает ^фиолетовую реакцию, совершенно или
почти совершенно используется организмом, пока дача витамина не превы-
шает 4 доз.
Напомним, что полная антицынготная дача всегда заключает вещество,,
дающее такую реакцию, и что, повидимому, вещество это близко к 2-й фрак-
ции витамина С.
Тот факт, что цветная реакция становилась ясной и постоянной лишь,
тогда, когда животные получали 4 и более предельных доз, благоприятство-
вал заключению, что наилучшая доза превосходит 4 предельных дозы. Такому
заключению благоприятствовали и данные, которые относятся к бромным числам..
Относительно влияния количества доз на прибавку в весе мы приведем
ниже расчет, основанный на данных 48^ часовых опытов со всеми 9-м>
н]1ши взрослых свинок. Можно было полагать, что случайные причины
»< j \ ч оказывать слишком большое влияние на колебание веса животных, если,
(.и.’ество опытов не очень велико, а потому величина оптимальной дозы
111. С была кроме того проверена другим способом — путем более долгих.
1 j foB.
Опыты над партией в 14 свинок, в 6990 г, начались 5 сутками авита-
11 ] оза, затем по-очередно периодами, по 4 суток каждый, животные получал»
различные дозы витамина С в виде свежей капусты. Опыты закончились.
5- дневным периодом, в течение которого свинки получали вит. С (в виде
свежей капусты) вволю. В основу расчетов долгих опытов и 48-часовых испы-
таний кладется не относительное изменение веса, по сравнению с периодом
авитаминоза, а непосредственно отмеченные изменения веса на пище, лишен-
ной витамина, или при даче различных доз витамина. При расчете на 48 ча-
о в и на вес партии в 5 кг отношения прибавок веса и доз получались сле-
дующие:
Данные долгих опытов
	Число доз вит. С . .	0	1	2	6	Вволю	
	Изменение веса пар- тии в 48 часов В 1		— 57	+ 51	+ 50	+ 156	+ 140	
— 163 —
Изменения веса и увеличения бромных чисел мочи при опытах
в 48 часов, также отнесенные к весу партии в 5 кг, дают:
Данные 48-часовых проб
	Число доз вит. С . .	О	1	2	3	4	6 ’
	Изменение веса пар- тии в 48 часов в г 		— 72	— 1	+ 135	+ 98	+ 190	+ 157
	Среднее увеличение бромного числа мочи в г ....	0	112	129	157	297	296
Несмотря на случайные отклонения, сопоставление указаний обеих
таблиц, подтверждая отклонения цветной реакции 'и бромных чисел, указывают,
что оптимальная доза, повидимому, не превышает 6 и близка к 4 предельным
дозам.
’ Заметим, что существуют в литературе данные, согласно которым и по
отношению к другим витаминам можно установить существование предельной,
строго необходимой, дозы и обычной или нормальной. Так, например, доза
витамина В, которая вполне обеспечивает возможность правильного воспроиз-
ведения потомства, согласно Sure «3), (1927 —1928)], равна четырем предель-
ным дозам и между тремя и пятью — согласно опытам Масу, Outhouse,
Long и Graham (1927). Итак, в данном случае разница между предельной
и нормальной дозами оказывается очень близкой к таковой в случае вита-
мина С.
Витамин С и малокровие
Попытки доказать, что авитаминоз С причиняет малокровие, путем
подсчетов форменных элементов крови свинок не дали результатов. Но Mou-
riquand, Leulier и Michel в 1925 году установили значительное понижение
содержания железа в крови при таком авитаминозе. Литр крови нормальной
свинки содержит около 0,59 г Fe. После’ 24 дней авитаминоза содержание Fe
начинает падать, достигая после 31 дня 0,27 — 0,31 г на литр.
Отметим, наконец, что А. В. Палладии в 1924 году, опровергая дан-
ные старой работы Ваитапп'ь и Howard'ъ в 1917 и в согласии с после-
довавшими затем работами, подтвердил, что вит. С не оказывает никакого,
или очень малое влияние на общую метаболию кальция и в частности па
содержание кальция в крови.
11*
— 164 —
Общее заключение
Указания относительно непосредственного влияния витаминов на
ход усвоения веществ внутри тканей
Вышеизложенный обзор новых данных о витаминах В показал, что
единственная попытка приблизиться к пониманию непосредственного действия
витаминов на свойства живой ткани и самих клеток — несмотря на усилия
многочисленных исследователей — не дала положительных результатов.
Между тем, задача является одной, из основных для всего учения о вита-
минах. Заканчивая этот очерк, приведем те данные, которые, хотя и косвенным
путем, дают определенные указания на характер непосредственнного воздействия
витаминов на некоторые свойства тканей высшего животного. Любопытны
в этом отношении результаты одной из серий опытов Saiki в 1927 году.
Saiki вводил подковным впрыскиванием свинкам и крысам возрастающие
дозы стрихнина, при чем половина свинок получала полный корм, другая
половина была лишена в течение 15 дней вит. С.
Крысы были разделены на 3 группы. 1 получала полный корм, 2 — тот
же корм, лишенный вит. В, 3 — лишенный вит. А и D (трескового жира).
Результаты получились следующие:
На первый взгляд результаты этих опытов могут казаться довольно
неожиданными. Отсутствие витаминов неизменно влечет значительное повышение
сопротивления организма отравлению алкалоидом. Явление это связано со всеми
тремя группами витаминов, но оно более резко выражено по отношению к водо-
растворимым витаминам С и В, чем к смеси жирорастворимых А и D.
165 —
Известно, что алкалоиды легко проникают сквозь клеточную оболочку,
а потому первое предположение, которое порождают эти результаты, это то,
что авитаминоз уменьшал проницаемость оболочек клеток и волокон нервных
окончаний и тем препятствовал воздействию на них стрихнина. Но при рас-
смотрении данных относительно деятельности тканей во время авитаминоза В
можно было убедиться, что видимо авитаминоз не уменьшает проникновения
. веществ в клетку. Способность тканей авитаминированного животного сжигать
глюкозу, поглощая кислород и выделяя углекислоту, оказалась равной таковой
животного не авитаминированного.
Между тем, как то подтверждают новые данные С. Л. Костычева
относительно истинной сущности зимазы, разложение глюкозы надо признать
типично внутриклеточным процессом. Но если предположить, что авитаминоз,
не отражаясь на проницаемости клеточных оболочек, частично устраняет от
деятельности, частично изолирует некоторые единицы цитоплазмы, то такое
объяснение опытов Saiki нисколько не будет противоречить данным исследо-
вания влияния авитаминоза В на разложение глюкозы живой тканью. Вместе
с тем допущение, что воздействие витаминов охватывает не всю поверхность
клеточных оболочек, а лишь отдельные внутриклеточные зерна и при том веро-
ятно не всех, а лишь некоторых клеток высшего животного, хорошо соответ-
ствует факту решающего физиологического действия, которое производят
ничтожные по весу количества витаминов.
В виду большого принципиального значения для всего учения о вита-
минах сведений, которые относятся к усвоению сахаров при авитаминозе В,
приведем, кончая очерк, данные, опубликованные М-те Bandoin и Lecoq
в 1927 году (4).
Авторы испытывали голубей на корму, лишенном вит. В, и в этих
опытах воздержались от употребления подозрительного по содержанию вит. В
картофельного крахмала. В одной серии в состав пищи введены 66% глюкозы,
во второй — параллельной — 66% галактозы. Выяснилось, что галактоза весьма
резко влияет на понижение сопротивления голубя полиневриту, тогда как еже-
дневные дачи в 2,5 г пивных дрожжей на птицу не предохраняли от гибели'
в 20-дневный срок голубей, которые получали галактозу. Те, которые получали
глюкозу и всего 1 г дрожжей, жили, не теряя в весе, в течение ста дней.
Опыты эти особенно интересны в виду давно известных особенностей
сбраживания галактозы. Способность галактозы к брожению совершенно
отрицалась некоторыми авторами. Но другие (Slator, 1908, Harden и Norris,
1910, v. Euler и Nilson, 1925, v. Euler и Lovgren, 1925, и пр.) свидетель-
ствуют, что она возникает при постепенном приучении дрожжей последовательным
их выращиванием на галактозе. Ellion в 1927 году убедился, что так назы-
ваемая зимаза не способна сбраживать галактозу.
Принимая во внимание, что требуется особое приспособление дрожжей
1 для приобретения ими способности сбраживать галактозу, наблюдение ЕШоп'ъ
вполне согласуется с отрицанием С. П. Ностычевым зимазы, как внекле-
точного фермента.
— 166 —
Данные эти позволяют заключить, что более простой внутриклеточный
аппарат заведует сбраживанием глюкозы, и другой, особый, трудно осуще-
ствимый, — таковым галактозы.
То, что корм, богатый галактозой, весьма усиливает влияние авитами-
ноза В, видимо указывает на непосредственное влияние витамина на действие
внутриклеточных аппаратов; указание это совпадает с указанием, которое уже
дали опыты Sailci.
Степени физиологического действия и взаимная зависимость
отдельных витаминов
Главным образом опыты с витаминами А и D, отчасти и опыты с гидро-
витаминами, позволяют наметить степени физиологического действия, общие
каждому витамину.	/
1.	Действие минимальной дозы. В случае витаминаD она равна
около одной стотысячной мг чистого витамина на 100 г живого веса крысы.
Эта доза обеспечивает самую возможность продолжения жизненных процессов.
Удваивая, утраивая, учетверяя минимальную дозу, последовательно
наблюдают резко выраженное усиление жизненных процессов.
2.	Действие достаточной дозы. Дозы, от 5 до 10 раз превосхо-
дящие минимальную, весьма близки к тому наилучшему (оптимальному) дей-
ствию, которое способен оказать данный витамин на ход жизненных процессов
(витамины A, D, Е, С и В). Следующие за тем очень крупные увеличения
доз витамина проявляются лишь весьма малым усилением его благоприятного
действия. А потому даже наиболее долгие из обычных лабораторных опытов
не позволяют точно определить теоретически оптимальную дозу. Все же, опыты
с вит. D, отчасти и с А, позволяют предположить, что:
3.	Оптимальная доза близка к 500 минимальным дозам. Вновь под-
черкиваем, что, значительно превосходя достаточную дозу, она оказывает
физиологическое действие, приблизительно одинаковое с последней. Дальнейшее
увеличение дозы не вызывает в начале какого-либо изменения физиологиче-
ского действия. Однако, при очень большом увеличении начинает проявляться
специфически вредное действие избытка витаминов (A, D).;
4.	Вредная доза начинает обозначаться, когда достигнута величина,
равная тысяче минимальных доз (вит. D и А). Вполне явно проявляется вред-
ное действие когда величина эта достигает 10 000 минимальных доз. Доза
в 100 000 минимальных доз ядовита и ведет к быстрому смертельному исходу.
Итак, действие возрастающих доз отдельного витамина может быть предста-
влено своеобразной кривой. Ее начальный отрезок резко восходит вверх,,
соответствуя быстрому вначале усилению благоприятного действия, конечный
почти столь же резко понижается, обозначая начало и усиление вредного дей-
ствия, средняя же часть представлена длинной весьма слабо выраженной ду-
гой—почти прямой. Эта длинная средняя часть означает, что в очень широких
пределах изменение дозы витамина может не отражаться на физиологическом
состоянии животного.
— 167 —
Общая картина действия различных по силе доз витамина позволяет сделать
«еще следующее заключение: содержание в пище необходимых для поддержания
жизни тел не только не может падать ниже определенной минимальной вели-
чины, но и не должно превышать известную максимальную. Помимо закона
минимумов Осборна и Менделя, существует повидимому и закон максимумов.
Его существование, равно как и характерные для витаминов ступени дей-
ствия, возможно также обнаружить на примере других олигосинергетиков.
Напомним, что олигосинергетиками или биологическими бесконечно малыми
Габриель Бертран назвал те тела, биологическое значение которых несоизме-
римо с незначительной массой вещества и энергии, которые они вносят в состав
пищевой дачи. Фтор, иод, мышьяк, цинк, медь, железо можно считать при-
мерами некоторых минеральных олигосинергетиков. Легко понять, что легче
всего обнаруживается закон максимумов путем опытов с олигосинергетиками.
Ведь, в этом случае максимальная доза, равняясь 1000 и более минимальных
доз, все же не превосходит 1 мг или долей его на 100 г живого веса. Благо-
даря этому устраняется влияние побочных причин и становится возможным
установить вредное действие избытка именно данного фактора как такового.
Надо однако признать, что в настоящее время биогенное значение и осо-
бенности действия минеральных олигосинергетиков еще мало выяснены. Все
же существование минимальных, строго необходимых и максимальных вредных
доз таких элементов, как иод, фтор, медь, представляется очевидным и соответ-
ствует некоторым данным опыта. Так, относительно меди можно пригнать, что
яесмотря на возражения Drabkin и Waggoner (1930), работы Waddell,
-Steenbock и Hart (1929, 1,2), Waddell, Steenbock, Elvehjem и Hart (4-929),
Elvehjem и Hart (1929), Elvehjem, Steenbock и Hart (1929, 1,2), Flinn и
Inouge (1929) повидимому доказали необходимость для образования гемогло-
бина присутствия в пище рядом с железом ничтожных количеств этого эле-
мента. Судя по их опытам, благоприятное действие зольных остатков печени
да излечение острого малокровия объясняется присутствием в них следов меди.
Минимальная доза меди близка к одной тысячной мг на 100 г живого веса
Waddell, Steenbock, Elvehjem и Hart (1929) и др.]. Такая ежедневная доза,
которая давалась в виде сернокислой или солянокислой меди и в других
соединениях, вела к наглядному повышению содержания гемоглобина и роста
молодых крыс. Благоприятное действие значительно усиливалось при увели-
чении дозы до пяти раз против минимальной. Сходные результаты получены
также путем опытов на цыплятах и собаках. Являясь составной частью гемо-
цианина, дыхательного пигмента крови некоторых беспозвоночных, медь.
>в состав молекулы гемоглобина не входит. Решающее для жизни позвоночных
действие она оказывает косвенным путем, повидимому, благоприятствуя введе-
нию железа в молекулу гемоглобина. Во всяком случае, ничтожные ее коли-
чества являются необходимой составной частью пищи и оказывают то благо-
приятное влияние на общее состояние здоровья животного, которым обычно
-проявляется действие любого витамина. С другой стороны, мы знаем, что, уве-
личивая в сто тысяч раз минимальную дозу, вводя единовременно до 100 мг
— 168 —
меди на 100 г живого веса, мы вызовем типичные признаки отравления
медью. Точно так же, как вводя сто тысяч доз иррадиированного эргостерина,
вызывают типичное отравление вит. D. Итак, характерные для витаминов
ступени действия различных по силе доз повидимому проявляются и в дей-
ствии других факторов питания.
Рассмотрим теперь указания на взаимную зависимость между действием
отдельных витаминов. Все сказанное выше о ступенях действия витаминов;
относилось к изменениям дозировки одного какого-либо витамина, при чем-
содержание в пище остальных оставалось постоянным. Как можно было видеть,
в этих условиях хорошо выраженные физиологические последствия вызывали*
начальное усиление доз от нуля до 10 и конечное от 1000 до 100 000. По
обе стороны от мало выраженной по своему действию теоретически оптималь-
ной дозы лежит область, которую можно назвать областью оптимального дей-
ствия витамина. В пределах этой области очень крупные изменения доз от 10
до нескольких сотен, не влекут заметных физиологических последствий. Если
дача витамина А изменяется, положим, от 20 до 400 доз, не вызывая физио-
логических последствий, а дача витамина В остается при этом неизменно-
равной, примерно, 4 дозам, мы вправе предположить, что в этих широких преде-
лах различие во взаимоотношениях между вит. А и В ничем не обнаруживается.
С другой стороны, нельзя отрицать вероятности того, что те физиологи-
ческие последствия, которые наблюдаются при изменении очень малых и очень
крупных доз определенного витамина, зависят также и от перемен количе-
ственного соотношения между этим и другими витаминами. Но для оконча-
тельного выяснения этого вопроса, требовалась особая проверка на опыте.
Начальные попытки в этом направлении подтверждают только-что намеченный
характер взаимоотношений между различными дозами отдельных витаминов.
Еще в 1922 г. Mouriquand и Michel отметили, что вредное влияние на мор-
скую свинку крупных доз трескового жира проявляется особенно, наглядно,
когда она недостаточно снабжена витамином С. Безсонов (1923), подтверждая
наблюдение Mouriquand и Michel, высказал предположение, что существует-
известная физиологическая зависимость между действием избытка—даже не-
большого—липовитамина (А) и действием, в очень малых дозах, гидровитамина (С).
Harris и Moore (1928 и 1929), нацомнив об этом предположении, решили
его проверить на прймере взаимодействия между избытком липовитаминов D
и А и различными дозами гидровитамина В. Опыты их велись на крысах.
Надо оговорить, что еще в 1923 г. Гопкинс, а за ним и другие отметили, что
.вредное влияние на крыс избытка трескового жира устраняется при значи-
тельном повышении дачи вит. В. Дача эта давалась в виде препарата из
дрожжей «Мармит». Но дело в том, что во всех этих опытах, включая опыты
Мурикана и Безсонова, источником витаминов А и D служил тресковый жир..
А ныне хорошо установлено, что тресковый жир содержит несколько тел, вызы-
вающих уже в малых дозах вредное действие. Помимо йодистых соединений,
особенно характерны в этом отношении те основные амины, которые присутствуют
в нем. Выше, в главе о влиянии витамина В на усвоение белков, указыва-
169 —
^ось, что дрожжи являются особым противоядием по отношению к отравлению
основными аминами трескового жира. Следовательно, трудно было yirt j ждать,
что благоприятное действие усиленных доз дрожжей проявляется по отношению
к витаминам трескового .жира, а не к основным аминам, которые он содержит.
Особая ценность опытов Гарриса и Мура, помимо многочисленности испытаний,
в том, что они кроме трескового жира широко пспильзогали как источник
вит. I) и А иррадиированный эргостерин и сильный препарат вит. А. Пре-
парат этот был получен из трескового жира способом, который ведет к уда-
’ лению йодистых соединений и аминов. То обстоятельство, что он обеспечивал
минимальную дозу крысе одной сотой мг, в значительной степени устраняло
возможность влияния других факторов помимо вит. А, даже при использовании
очень крупных доз.
Источником вит. В служил им мало насыщенный, но сравнительно надеж-
ный торговый препарат из дрожжей «Мармит». Первый ряд опытов Harris
и Moore (1928) состоял в исследовании зависимости между действием избытка
вит D и повышением дозы вит. В. Крысы получали вит. D в количестве 1 000
минимальных доз на животное, снабжение их вит. В изменялось в пределах
от одной до 4-х минимальных доз. В этих условиях обнаружить благоприятное
действие повышения дозы вит. В на вредное дейс твие избытка вит. J) не уда-
лось. Имеются основания полагать, что отрицательный результат может объяс-
няться неполнотой этого ряда опытов. Во всяком случае, следующая серия
весьма многочисленных опытов [Harris и Moore (1929)] вполне наглядно-
показала, что вредному действию избытка вит. А с успехом противостоит
повышение дозы вит. В. Опыты эти состояли в том, что серии молодых крыс
получали одна 200, вторая 1 000', третья 5 000 минимальных доз ййт. А на
крысу. Каждая серия была в свою очередь разбита на партии, получавшие
различные количества вит. В. Последний добавлялся к пище в виде слабого
препарата из дрожжей «Мармит», составляя 1, 2, 8, 16 и 32 процента общего-
веса ашщевой дачи. Заметим, что наименьшая доза в 1% «Мармита» уже
обеспечивает крысе ее потребность в вит. В. Когда содержание в пище «Мар-
мита» не превосходило 2%, весьма резко сказывалось вредное влияние двух
крупнейших дач вит. А в 1и00 и 5000 доз. Проявлялось оно признаками
несколько сходными с авитаминозом В: остановка роста, потеря в весе, потеря
шерсти и поражения кожного покрова.
К концу испытания наблюдалась •усиленная смертность, особенно среди
животных, получавших 5 000 доз вит. А. Те крысы, которые получали корм,
содержавший 8% «Мармита», мало страдали от действия 10(10 доз, вит. А, но-
действие 5 000 доз попрежнему оставалось резко выраженным. Вредное влияние
столь большого избытка вит. А ясно наблюдалось даже, когда увеличивая дозу
вит. В доводили содержание «Мармита» в пище до 16%. Оно сглаживалось лишь-
в том случае, когда содержание «Мармита» в корме достигало 32%. Особого
упоминания заслуживает еще одна подробность опытов Гарриса и Мура. Со-
гласно их данным, молодые крысы, получавшие сильные, но еще неядовитые
дозы вит. А, напр. 200 доз А на крысу, не испытывали особого улучшения при
— 170 —
повышении дозы вит. В от 8% до 16% «Мармита» в даче. Хотя то же повы-
шение являлось весьма благотворным,.когда избыток вит. А достигал 1 000 и
5 000 доз на крысу.
Как можно видеть, Гаррису и Муру удалось выявиты^уществование извест-
ного рода зависимости между содержанием в пище вит. А и В. Однако, зави-
симость эта начинала сказываться лишь, когда содержание в пище вит. А,
далеко превзойдя оптимальную дозу, достигает явно вредного избытка. Заметим,
что зависимость между действием минимальной дозы определенного вита-
мина и изменениями содержания в пище другого витамина вовсе не исследо-
валась Гаррисом и Муром. Некоторые указания на существование такого рода
зависимости имеются, но они недостаточно доказательны. Невидимому, то коли-
чество данного витамина, которое еще способно вызвать определенное мини-
мальное физиологическое действие, должно быть увеличено при значительном
повышении содержания в пище другого витамина.
Итак, физиологическое действие очень малых и очень больших доз дан-
ного витамина изменяется в зависимости от содержания в пище других вита-
минов. Ио между двумя пределами расположена обширная область практически
оптимального действия витамина. Изменения доз витаминов, пока они остаются
в широких- пределах этой области, и возникающие различия в количественных
отношениях между витаминами в этом случае не отражаются заметно на
физиологическом состоянии животного. Выводы эти не во всех частях можно
считать вполне обоснованными, но в настоящее время, в целом, они дают наи-
более вероятное представление о характере взаимной зависимости витаминов.
То, что было сказано о взаимоотношениях между различными дозами
витаминов, любопытно сопоставить с указаниями на зависимость между содер-
жанием в пище витаминов и других пищевых веществ.
Сведения о существовании подобного рода зависимости были приведены
в главе о физиологических особенностях действия витаминов В. Напомним, что
вредное влияние чрезмерного содержания белков в пищевой даче устраняется
путем значительного повышения обычной дозы вит. В. Усиление доз витами-
нов влияет не только на усвоение органических, но и минеральных веществ
пищевой дачи. Так называемое физиологическое равновесие солей в значитель-
ной степени зависит от содержания, в пище витаминов. Наад и Palmer (1928)
повышали содержание магния в пище юных крыс, вводя в ее состав до 3,3%
углекислого и до 5% сернокислого магния. Избыток магния вредно отражался
на их росте и общем состоянии здоровья. Как ранее отмечалось другими авто-
рами, крупные дозы магния вытесняют из организма кальций; вели они также
к усиленным потерям фосфора. Содержание этих элементов в выделениях пре-
восходило количество, поглощенное в пище, иначе говоря, баланс по извести
и фосфору становился отрицательным. В состав основного корма крыс была
включена необходимая доза впт. A, D и В. Повышая в некоторых случаях
содержание витаминов, доводя его приблизительно до 4—6 минимальных доз,
авторы убедились, что вредное влияние избытка магния исчезает. Умерить
вредное влияние избытка магния удалось также не повышением дозы витаминов»
— 171 —
но увеличением содержания пищи по кальцию и фосфору. Заметим, что в отсут-
ствии избытка магния, содержание основной пищевой дачи по витаминам,
кальцию и фосфору вполне обеспечивало правильное развитие крыс, при чем
баланс этих двух элементов оставался положительным. Следовательно, трудно
сомневаться в том, что основной причиной неправильного развития крыс явля-
лась несоразмерность содержания пищи по магнию и кальцию—точнее, избыток
магния при недостаточном увеличении дозы кальция. Однако, вредное влияние
такой несоразмерности минеральных частей пищи оказалось устранимым про-
стым повышением доз витаминов. Оставляя в стороне вопрос о взаимной
соразмерности минеральных элементов пищевой дачи, можно сказать, что
вредное влияние избытка одного из этих элементов устраняется повышением
содержания витаминов в корме.
Все вышесказанное возможно свести к следующим общим положениям:
ядовитое действие чрезмерных количеств определенного витамина в 1000 и
более минимальных доз на животное может быть умерено или совершенно
устранено повышением дозы другого витамина или витаминов до 10, 20 мини-
мальных доз.
Дача витаминов приблизительно той же силы действия препятствует
также вредному влиянию избытка отдельных вешеств, органических и мине-
ральных, входящих в состав пищевой дачи.
Таким образом, повышение до 10, 20 минимальных доз витаминов зна-
чительно усиливает возможность сохранения так называемого «физиологического
равновесия». Проще говоря, таким путем достигается частичная страховка против
вредного действия избытка той или иной составной части пищевой дачи. То
количество витамина, которое содержится в 10 минимальных дозах, было выше
обозначено, как доза вполне достаточная, близкая к оптимальной. В действи-
тельности доза эта близка к нижнему пределу той широкой области, посреди
которой находится теоретически оптимальная доза. Повышая содержание в пище
определенного витамина против обычного до 10 минимальных доз, наблюдают,
что свойственное ему благоприятное действие весьма близко к тому наилуч-
шему, которое он способен оказать. Если опыт достаточно точен, действие такой
десятикратной дозы отдельного витамина выражается определенным улучшением
общего физиологического состояния животного. Иы вправе ожидать, что такое
улучшение значительно усилилось бы при одновременном введении в организм
усиленных доз всех известных ныне витаминов. Напомним, что в опытах над
молодыми крысами Osborne и Mendel (1926), Mendel и Cannon (1927) сред-
ний для самок и самцов дневной прирост в пределах от 60 до 200 г равнялся
4 г против 1,4 г лучшего прироста той же породы крыс альбиносов, указанного
в монографии Дональдсона. Добавим, что крысы великаны Osborne и Mendel’s
отличались прекрасным здоровьем и развитием. Росли они на корму, содержа-
ние которого по витаминам значительно превышало обычное, все же не дости-
гая десятикратных доз. Несомненно, успех этих опытов объясняется не только
обилием витаминов, но и общим удачным составом корма. Однако, без особого
усиления витаминов, корма сходного состава не давали доселе сколько-нибудь
— 172 —
близких результатов. В настоящее время пища большинства городского насе-
ления часто бывает лишена даже необходимой минимальной дозы того или
другого витамина.
Постоянное пользование овощами, плодами, зеленью, кашами из цельных
круп позволяет устранить острый недостаток в витамине и весьма повышает
физиологическую сопротивляемость среднего городского жителя. Приспособление
к природным условиям провело нижнюю границу нашей потребности в вита-
минах. Но явные признаки указывают, что дальнейший путь развития высших
организмов связан с изменениями и увеличениями этой потребности. Напомним,,
что лишь небольшая группа высших млекопитающих нуждается в вит. С.
Позволительно думать, что решительного улучшения пищи человека
можно будет достигнуть, лишь доведя до 10—20 минимальных доз содержание
в ней всех известных витаминов. Такое усиление содержания в пище вита-
минов может выразиться заметным повышением жизнедеятельности и сопро-
тивления старению.
Однако, обогатить в такой мере пищу витаминами, пользуясь лишь пище-
выми веществами в их природном виде, более чем затруднительно. Так, напри-
мер, удобным повседневным источником вит. С является лимон. Но минимальная
доза вит. С на вес взрослого мужчины равна приблизительно ста кубикам
лимонного сока. Один выжатый лимон дает около 25—30 кубиков cofca. Чтобы
принять даже не 10, а всего 5 минимальных fiiT. С нужно следовательно
в течение дня выжать и поглотить сок 15—25 лимонов. Имеется природный,
сравнительно богатый источник вит. А и В—тресковый жир. Но помимо неприят-
ного вкуса, сколько-нибудь крупные дозы трескового жира оказывают явно
вредное действие по причине присутствия иных тел, чем витамины А и ВЦ
Обеспечить организму наилучшую дозу всех витаминов возможно лишь-
путем получения особых препаратов.
Задача эта лежит на пути, ведущем к раскрытию природы витаминов.
Так, ныне удалось получить промышленный препарат I), который более
чем на половину состоит из чистого витамина. Творцы нового способа, Reiter
(1929), Kisch и Reiter (1930) так же, как и Ван-Вийк, (Van-Wi'jk') убедились
в том, что обычное разрушение вит. В, возникающего при иррадиации эргостерина,
объясняется действием волн короче 280 р-н- Применяя особые стекла и источник
света, они смогли целиком устранить эти волны. Они иррадиируют эргостерин
волнами длиной от 280 до 310 р-р. Происходит длительное накопление вит. В.
Достигнув предела, содержание вит. В остается неизменным, даже есяи про-
должать иррадиацию двое суток и более. Образующийся вит. В удаляют пере-
гонкой в пустоте. Получают аморфное вещество. Достаточно двух стотысячных
мг этого вещества в день на крысу, чтобы предохранить или исцелить ее от
рахита. Изготовление промышленным способом, следовательно в больших коли-
чествах, столь богатого чистым витамином препарата позволяет надеяться, что
близко раскрытие тайны строения первого витамина.
Послесловие.
Все успешнее и быстрее развивается учение о витаминах. Некоторые
яз главнейших загадок, намеченных в книге, значительно разъяснились благо-
даря работам последних месяцев. Moore (1931, Biochem. Jour. 25, 275), вы-
держав крыс на корме, который бы! лишен вит. А, добавлял затем к нему
37 дней крупную дачу каротина, в виде морковного или красного пальмового
масла (т.-е. природной смеси липидов, богатых каротином). Затем снова крысы
долго (до 60 дней) получали лишь основной корм. Этот новый опыт Мура
обнаружил, что печеночный жир крыс, почти бесцветный, необычайно обога-
тил я вит. А. Испытания его действия на других крысах показали, что мини-
мальная доза равна всего 0,005 мг; следовательно, приблизительно равна
минимальным дозам лучших препаратов из жира тресковой печени или кри-
стал шческого каротина—а именно, 0,004 мг. Между тем это был необрабо-
танный печеночный жир, из которого легко можно было бы выделить препарат
в двадцать и более раз богаче вит. А, считая на равный вес. Эти и другие
данные Мура окончательно устраняют предположение о том, что пигмент ка-
ротин, как таковой, является разновидностью вит. А. Мур справедливо указы
вает, что наиболее вероятным является превращение каротина в вит. А. Мног •
каротина тратится организмом, не достигая превращения, но то количество его
которое, довольно медленно, претворяется в вит. А, дает- вещество не равненно
более деятельное, чем начальный каротин. Превращение это совершается исклю-
чительно в печени. Крысы, накопившие в печени запас витамина А, во" всйх
других органах обнаруживали нормальное содержание вит. А.
с удивлением отметил, что сила синей реакции на SbClt масел
морковного и красного пальмового была значительно выше, чем та, которая
соответствовала количеству кристаллического каротина, которое содержали эти
масла. Так как синяя реакция эта отмечалась чертой поглощения 590 н1,
а не 608, как реакция печеночного жира; Мур отнес это явление на долю
случайна ти. Как было сказано выше, такого решающего значения нельзя при-
давать положению черты поглощения. Новые данные подтверждают, что оно
меняется в зависимости от изменений в составе липидов, которые сопутствуют
витамину A. Morton, Heilbronn Thompson (1931, Biochem. Journ. 25, 20) по-
казали, что синяя реакция препаратов, т.-е. пеленочного жира, из Второго уда-
— 174 —
лили омыляемую фракцию, дает черту поглощения не 608, а 624 р-р. Если
удаление омыляемой фракции ведет к передвижению черты вправо, то мы
имеем основание предположить, что и удаление растительных жиров, сопрово-
ждающих вит. А,присутствующий рядом с каротином в растениях, также пере-
двигает вправо эту черту. Повидимому, и в растениях происходит образование
из каротина деятельного вит.'А, но в несравненно меньщей степени, чем внутри
печени животных. Та же работа Хейльброна и Мортона и другая, ей со-
путствующая, показали, что гидролиз и другие химические воздействия, когда,
они имеют место в присутствии витамина А, вызывают в тех липидах, кото-
рые с ним смешаны, какие то особые изменения молекулярного их строения,—
очень ясно выраженные анализом их спектров. Они выяснили также, что лишь
незначительная часть поглощения печеночных жиров в полосе 328 р-р-
(ультра-фиолет.) может быть отнесена на долю оксиэргостерина, и подтвердили
вновь, что это поглощение строго соответствует содержанию в жирах живот-
ных деятел!ного bit. А. Исключительное значение для выяснения непосред-
ственного и главного действия на организм гидро-витаминов, а вероятно
и всех витаминов, имеют данные новейшей работы Hoche (1931, Bull. Soc.
Chlm. Biol. 13, 186).
Партии голубей содержались им либо на одном чищеном рисе, либо
с добавкой дрожжей (витаминов В). Очень многочисленные микро-анализы
крови на углерод весьма наглядно показали, что авитаминоз неизменно
и быстро повышает его содержание в крови, Повышение это весьма заметно,
избыток достигает до одного грамма углерода на литр крови. В главе, посвя-
щенной физиологическому значению вит. С (стр. 161), указывалось, что авита-
миноз С быстро приводит к понижению общего содержания углерода в моче,
иначе говоря, к уменьшению выделения углерода организмом. Основываясь
на этом, мо к но было полагать, что кровь авитаминозных животных должна
обладать повышенным содержанием углерода. Общность явлений при отравле-
ниях и авитаминозах объяснялась именно этим необычным повышением
титра крови по углероду. Как можно видеть, данные непосредственного опыта
с другим . гидрозитамином вполне благоприятны такому предположению.
Из всех чрезвычайно многочисленных работ последних месяцев, которые были
посвящены разнообразным факторам В, отметим лишь подтверждение того,
что Ва может быть разрушен действием этилового спирта на холоду (Chick
и Copping, 1930, Biochem. Journ. 24, 1744) и работу Seidebl'si (1931, Publ.
Health Rep. 45 3194). Последний выделил препарат Вх, очень близкий по силе
действия Лаковому Янсена и Доната, но препарат этот не дает реакцию
Паули и содержит не только азот, но и серу. Сейдель признает, что сера,
возможно, не входит в состав молекулы витамина Вх и что сернистое соедине-
ние является лишь примесью, но и в таком случае возможность признать
кристаллический препарат Янсена за чистый витамин Bi окончательно отпа-
дает. Много новых работ посвящено выяснению существования добавочных фак-
торов В, В3, В4, В8. Получен ряд весьма интересных, но еще недостаточно
ясных указаний, а главное—не доказано, являются ли новые факторы «витами-
— 175 —
вами», веществами совершенно необходимыми для поддержания жизни, .или
лишь оказывают известное влияние на ход физиологических процессов. Главным
препятствием к выяснению этого вопроса остается по прежнему внесение до-
полнигельных факторов вместе с основным кормом, а потому особо надо отме-
тить исследование, посвященное дополнительным факторам В. Carter,Kinner ley
и Peter* (1930, Blochem. Jour. 24, 1832 и 1844) окончательно выяснили
полную пригодность шелушеного риса, как основного корма для голубей-
Любопытно отметить, что предположение о недостаточности белков риса, которое
казалось вероятным, не подтвердилось. Принятие всеми исследователями столь
однообразного и простого основного корма несомненно будет способствовать
быстрому выяснению пока еще чрезвычайно запутанного и сложного вопроса
о дополнительных факторах В. Последние работы американских исследователей
по витамину С дали указания не общего, но за то большого практического
значения.
Давно известно, что авитаминоз С прежде всего отражается на состоянии
зубов и десен. Надо было выяснить, насколько влияет на порчу зубов
(карию и пиорею) человека отсутствие в пище витамина С. Наблюдения, точнее
опыты, произведенные в школах - и клиниках, в условиях, которые позволяли
точно знать состав пищи пациентов, показали следующее (Hanke, Journ. of
Nutrition 3, 433, H&jer и др.). Bx подавляющем большинстве случаев порча
зубов "совпала с - бедностью пищи витамином С. Дальнейшая порча (кария)
останавливалась при введении в питание крупных доз витамина С (100 еле®
изболев лимонного сока). Излечение уже появившейся порчи этим путем не до-
стигалось, но оно проявлялось по отношению к пиорее, за исключением не-
многих весьма сложных случаев. Выяснилось также, что при наличии в пище
достаточного количества витаминов, а в особенности витамина С, усиленное по-
глощение сладостей и сахара на состоянии зубов не отражается. Помимо витамина
С в некоторых опре де л енныхелучсЫх, а именнву ^беременных и кормящих грудью
женщин, влияет на состояние зубов и витамин В. Зато никакого положительного
влияния нельзя было различить при употреблении дезинфицирующих средств.
Гигиена, в смысле очищения полости рта полосканиями и чисткой зубов, ни-
сколько не отражалась на развитии карим и пиореи. Говоря о витамине С,
нельзя не отметить, что ныне Зильва (1930, Blochem. Jour. 24, 1687) оконча-
тельно стал употреблять цветную реакцию, основанную на восстановлении фе-
нолиндофенола, для предварительного определения силы антицынготного дей-
ствия своих препаратов. Производя такое определение, он оговаривается, что
они измеряют не самый витамин С, а тело, его сопровождающее, и в отсутствии
которого происходит быстрый распад витамина. По существу дела факты, им
приводимые, [лишь подтверждают, что’ цветная реакция, основанная на вос-
становлении,’ относится, повидимому, ко второму фактору С или С2. Степень вос-
становительной способности R(H2), отмечаемая обескрашиванием фенолиндофе-
нола или появлением окраски (синей) в присутствии мономолибденофосфорно-
вольфрамовой кислоты, приблизительно равна. В этой книге часто упоминалось
о новой постоянной R(H2)—степени давления молекулярного, редукционного
— 176 —
-водорода ланной жидкости или степени ее восстановительной способности.
Значение новой постоянной огромно для всей биологии, а в особенности для
изучения витаминов. Последние годы американцы и англичане выработали
точный способ ее определения. Он основан йена прежнем применении цветных
реакций, а на точном учете разницы потенциалов при пользовании «ртутисто-
ртутным» электродом. Он представляет некоторую общность с способом опре-
деления р„ iSchufhan 1924, Popoff, Riddick, Wirth и Ough 1931,
Amer. Chem. Soc. 46, 58 и 53, 1195 и Carter и Robinson 1927, Jour. Cbem.
..Soc. 128, 267).
Литература
Abderhalden und Wertheimer. Pfliiger Arch. (1) 1921. 191, 258; (2) 1921,
192, 174; 1922, 194, 647.
Ahmad and J. C. Drummond. Biochem. Journ. 1930, 24, 27.
Anderegg L. and Nelson V. J. Ind. and Eng. Chem. 1925, 17, 451.
Anderson A. and Nightingale E. Journ. Soc. Chem. Ind. Trans. 1929,
48, 139.
Anderson. Journ. Biol. Chem. 1927, 71, 407.
An rep and Drummond J. C. Journ. Physiol. 1921, 54, 349.
A q d u r. Acta Poediatrica. 1926, 5 — part. 3 — 4.
Arnold J. Fisher Agric. Exp. in RSFSR. 1917 — 1927.
Asa Id a K. Biochem. Zeitschrift. 1923, 139, 234.
Aurnhammer. Arch. f. Kinderheilk. 1926, 79,. 44.
Aykroyd W. and Roscoe M. H. Biochem. Journ. 1929, 23, 483.
Bailey, Cannon and Fisher. Conn. Agric. Exper. Stat. Rec. 1928, 295.
В a 1 у E. C. Journ. Soc. Deyers Colorists. 1926, 42, 14.
Beach. Journ. Amer. Veter. Med. Ass. 1921, 11, 303.
В e a t d. Amer. Journ. Physiol. 1925, 75, 668; 1926, 78, 645.
Beck W. Die Theor. d. Gegenwart. 1927, 9, 1.
Bertram S. H. K. Akad. Wetensh. Amsterd. Proc. 1929, 32, № 51, 664.
Bertrand G. et Poireault G. C. R. Ac. Sc. 1892, 115, 828.
Bertrand G. et Seidell. Bull. Soc. Chim. Biol. 1923, 5, 794.
Bertrand G. et B/e n z о д B. Bull. Soc. Chim. Biol. 1924, 6, 394.
Bertrand G. et N akamurl. Bull. Soc. Chim. Biol. 1925, 7, 42.
В e z n a k. Biochem. Zeitschrft. 1923, 141, 1.
Безсонов H. C. R. Ac. Sc. 1914', 159, 448; Bui. Soc. Hyg. Aliment. 1920, 8, 10;
C. R. Ac. Sc. (1) 1921, 173, 460; Bui. Soc. Hyg. Aliment. (2) 1921, 9, 9; Bui. Soc.
Chim. Biol. 1922, 4, 83; Bui. Soc. Hyg. Aliment. 1923, 11, 24; C. R. Ac. Sc. (1)
1924, 179, 572; (2) 1924, 1, 5; Bui. Soc. Chim. Biol. (3) 1924, 6, 220. Biochem.
Journ. (4) 1924, 18, 384. (1) 1925, 2, 24. C. R. Ac. Sc. (2) 1925, 180, 970. Journ.
Biol. Chem. (3) 1925, 64, 589. C. R. Ac. Sc. (1) 1926, 182, 1223; (2) 1926, 183,
* 921. (3) 1926, 183, 1309; Bui. Soc. Chim. Biol. (1) 1927, 9, 555; (2) 1927, 9, 568.
Bui. Soc. pathol. veget. (3) 1927, 14, 142. C. R. Ac. Sc. (1) 1928, 186, 259; (2)
1928, 186, 914. Bui. Soc. Chim. Biol. (3) 1928, 10, 1179; (4) 1928, 10, 1199;
(1) 1929, 11, 294; (2) 1929, 11, 1145; C. R. Ac. Sc. 1930, 190, 529.
Bickel A. Klin. Wochenschrft. 1922, 1, 110. Biochem. Zeitschrft. 1924, 146, 493.
В i e г г у et К о 1 1 m a n. C. R. Ac. Sc. (1) 1928, 186, 264; (2) 1928, 186, 1062.
Bills С. E. Journ. Biol. Chem. 1925, 64, 1; 1927, 72, 751.
Bills С. E., Honeywell and Cox. Journ. Biol. Chem. 1928, 80, 15.
Bills С. E. and Wirick A. M. Journ. Biol. Chem. 1930,86,117.
Block С. E. Journ. Hyg. 1921,19, 283; Amer. Journ. Dis. Child. 1924, 27,139.
Boas N. Biochem. Journ. 1924, 18, 422.
Bracewell M., Hoyle E. and Zilva. Biochem. Journ. 1930, 24, 82.
Brown H. B. and S h о 1. Journ. Biol. Chem. 1930, 86, 245.
Витамины.
12
— 178 —
Burr G. О. and Burr M. M. Journ. Biol. Chem. 1929, 82, 345.
C a n e g a 1 y. Contribution b i’etude des regimes alimentaires au cours des tubercu-
loses evolutives. These. Lib. Marcel Vigne, Paris, 1924.
Cannan, Conen and Clark. Publ. Healt Report U. S. A. 1926, 55.
Capper N. S. Bioch. Journ. (1) 1930, 24, 453. Bioch. Journ. (2) 1930, 24, 980.
Carr F. H. and Price E. Bioch. Journ. 1926, 20, 497.
Carrick C. W., Carey W. and Hauge S. Journ. Biol. Chem. 1925, 63, 115.
Gasparis, Shipley P. G. and Cramer. Journ. Amer. Med. Assoc. 1923,.
81, 818.
Chamberlain, Blomburg and К i 1 b о u r n. Philippine Journ. Sci.
1911, 6, 177.
Chamberlain and V e d d e r. Philippine Journ. Sci. 1911, 6, 177.
Chamberlain and V e d d e r. Philippine Journ. Sci. 1911, 6, 177.
Channon H. J. and Chibnail A. G. Biochem. Journ. 1929, 23, 168.
Chick H. Biochem. Journ. 1926, 20, 119; 1929, 23, 514.
C h i с к H. and Hume. Proc. Roy. Soc. Lond. (1) 1917, 90, 44; Proc. Roy. Soc. bond.
(2) 1917, 90, 60; Journ. Roy. Army Med. Corps. (3) 1917, 29, 121.
Chick H., Korenchevsky and Roscoe. Biochem. Journ. 1926, 20, 622.
Chick H. and Roscoe M. H. Biochem. Journ. (1) 1926, 20,137; (2) 1926, 20, 632;
1927, 21, 698; 1928, 22, 790; vl) 1929, 23, 439; (2) 1929, 23, 504.
Clark. Chem. Rev. 1925, 2, 127.
С 1 a u s e n E. M. L. Proc. Soc. Exp. Biol, and Med. (Biochem. Journ.) 1928, 26, № 2, 77.
Cohen and Mendel. Journ. Biol. Chem. 1928, 36, 425.
Collazo G. A. Biochem. Zeitschrft. 1923, 131, 292.
Collazo G. A., RubinoP. und Varela. Biochem. Zeitschrft. 1929, 204, 347.
С о n n e 1 and Zilva S. S. Biochem. Journ. (1) 1924, 18, 638; Biochem. Journ.
(2) 1924, 18, 642.
Coolidge T. and S h о t t s M. Journ. Biol. Chem. 1928, 76, 985.
Cooper Biochem. Journ. 1913, 7, 268.
Cooper Journ. Hyg. 1914, 14, 12.
Copping Biochem. Journ. 1929, 23, 1050.
C o’ward K. Biochem. Journ. ^1) 1923, 17, 134; (2) 1923, 17. 145; (1) 1925, 19, 240;
(2) 1925, 19, 500. Journ. Biolog. Chem, 1927, 72, 781. Bioch. Journ. 1928, 22, 1221.
Cowgill, Buel and Smith. Amer. Journ. Physiol. 1925, 73,106; 1926, 77, 389;
Cowgill and Mendel. Amer. Journ. Physiol. (1) 1921, 57, 420. (2) 1921, 58, 131.
Journ. Biol. Chem. (1) 1923, 56, 725. Amer. Journ. Physiol. (2) 1923, 66, 164.
Cowgill, Smith and Beard. Journ. Biol. Chem. (Proceed.). 1925, 63, 23.
Crist J. W. and D у e M. Journ. Biol. Chem. (Proceed.). 1929, 81, 525.
C u g n a c de A. Bui. Soc. Chim. Biol. 1929, 11, 423.
D a h r N. Chem. Zell. u. Gew. 1925, 12, 317.
Damon. Journ. Biol. Chem. 1923, 56, 895.
Daubney C. G. and Zilva S. S. Bioch. Journ. Ц) 1926, 20, 519; .2) 1926,
20, 1055.
Deas. Journ. Biol. Chem. 1924, 61, 5.
De lap la ve et Ribiere. C. R. Ac. Sc. 1929, 188, 1169.
Dell E. M. Biochem. Journ. 1920, 14, 220; The Lancet. 1922, 1, 576; Biochem. Journ.
(1) 1924, 18, 93; (2), 1924 18, 674; 1925, 19, 141;
D e 1 f E. M. and T о z e r. Biochem. Journ. 1918, 12, 416.
D e m о 1 e A. und Christ A. Arch. Exp. Path. u. Pharmac. 1929, 146, 361.
Desgrez A. et Bierry H. C. R. Ac. Sc. (1) 1920,170,1209; (2) 1920,171,1393;
1921, 172, 1068.
D i t z und В a r d a c h. Biochem. Zeitschrift. 1911, 37, 272; (1) 1912, 42, 347; (2) 1912,
46, 219.
— 179 —
Dixon W. E. and Hoyle J. C. Brith. Med. Journ. 1928, 40, 832.
Donaldson. «The Rat», 2 Edit. Philadelphia. 1924.
D о г e e. Biochem. Journ. 1913, 7, 616.
Drabkin D. L. and Waggoner G. S. Journ. Bioch. Chem. 1929, 89, 54.
Drummond J. C. Biochem. Journ. 1917. 11, 55; Chem. and Indust. 1924, 44, 923.
Drummond J. C. and В a к e r. Biochem. Journ. 1929, 23, 275.
Drummond J. C., Channon and Coward K. Biochem. Journ. 1925, 19,
1047; Journ. Biol. Chem. (Proceed.) 1926, 67, 111.
Drummond	J.	C., Channon, Coward K. and Golding.	Journ.
Agric. Sc. 1923, 13, 144; 1924, 14, 531.
Drummond	J.	C., Crow den	and Hill. Journ. Physiol. 1922, 56,	413.
Drummond and Marrian G. F. Biochem. Journ. 1926, 20, 1229.
Drummond	J.	C.	and Morton R. Biochem. Journ. 1929, 23, 785.
Drummond	J.	C.	and Watson.	Analyst. 1922, 10/7, 341.
Dubin H. E. and Funk C. Journ. Med. Research. 1923, 4, 467.
Dutcher A. Journ. Biol. Chem. 1918, 36, 63 — 547.
Dutcher A. and Honeywell H. E. Science. 1929, 70, 173.
Dutcher A. and Kruger J. Journ. Biol Chem. 1926, 69, 277.
Dye M., Med lock’ О. C. and Crist S. W. Journ. Biol. Chem. 1927, 74, 95.
E a s с о 11. Journ. Physiol. Chem. 1928, 38, 1094.
Eddy W. H. Amer. Journ. Publ. Health. 1929, 19, 1209.
Eddy W. H., Heft H., Stevenson H. C. and Johnson R. Journ.
Biol. Chem. 1921, 47, 248.
Eddy W. H., Gurin S. and Keresztes J. Journ. Biol. Chem. 1930, 87, 729.
Eddy W. H., Kerr and Williams R. Journ. Amer. Chem. Soc. 1924, 46,
2846; Proc. Soc. Exp. Biol, and Med. 1926, 23, 416; Amer. Journ. Publ. Health.
1929, № 12, 1309.
E g g 1 e t о n and Gross. Biochem. Journ. 1925, 19, 633.
Eijkmann. Proc. K. Akad. Wetensch. Amsterdam. 1927, 30, 376.
E i j km an n and Van Hoogenhyuse. Proc. K. Akad. Wetensch. Amsterdam.
1916, 18, 1467.
Eijkmann and Van Hoogenhyuse. Arch. Pathol. Anat. (Virchow Arch).
(1) 1897, 148, 523. V
EijkMann and Van Hoogenhyuse Arch. f. Hyg. (2). 1897, 136, 150.
E 1 1 i о n E. Thdse (Faculte des Sciences. Paris) 1927, № 1125.
Elvehjem G. and Hart E. Journ. Biol. Chem. 1929, 84, 131.
Emmet A. D. and L u г о s. Journ. Biol. Chem. 1920, 43. 265.
Emmet A. D. and Peacock G. S. Journ. Biol. Chem. 1923, 56, 679.
Euler von В., E u 1 e r v. H. u. H e 1 1 s t г о m. Biochem. Zeitschrft. 1928,203,370.
Euler von B., Euler v. H. u. К а г r e r Helvet. Chim. Acta. 1929, 12, 278.
Euler v. H. Sv. Vet. Akad. Av. K. j. Kemi. 1923, 8, 31.
Euler v. H. und Lovgren T. Zeitschrft f. physiol. Chem. 1925, 146, 44.
Euler v. und N i 1 s s о n R. Zeitschrft f. physiol. Chem. 1925, 143, 89.
Euler v. und W e i d e И H. Zeitschrft f. physiol. Chem. 1925, 144, 132.
Euler v., Weidel 1 H. u. Erikson E. Zeitschrft. f. physiol. Chem. 1925.
144, 23.
Euler v. H., Karrer P. u. Rydbom. Deutsche Chem. Ges. 1929, 62, 2445.
Euler und Rydbom. Svensk. Kemisk. Tidskrift 1929, 41, 223.
Егоров M. С. Врачебное дело. 1928, № 23.
Evans H. M. and Bishop K. S. Science. 1922, 56, 650; Journ. Metabol. Research.
(1) 1923, 3, 281; Journ. Amer. Med. Assoc. (2) 1923, 81, 889.
Evans H. M. and Burr G. O. Anatom. Rec. 1924, 27, 203; Proc. Nat. Acad. Sc.
1925, 40, 334; Journ. Biol. Chem. 1928, 76, 263.
12*
180 —
Fabre R. et Simonnet H. G. R. Ac. Sc. 1929, 188, 1312.
Farmer F. and Redenbaugh. Amer. Journ. Physiol. (1) 1925, 75, 27; (2) 1925,
75, 45.
Fearon. Bioch. Journ. 1925, 19, 888.
Findlay. Journ. Pathol. Bact. 1921, 24, 175.
F о 11 i n G. Journ. Biol. Chem. (1) 1928, 77, 421; (2) 1928, 81, 231.
F о 1 1 i n G. and Denis. Journ. Biol. Chem. 1912, 12, 239.
Frank Armando, Jahrb. f. Kinderheilk. 1925, 59, 88.
Fraser and Stanton. Etyologie of Beri-Beri. 1911.
Freedman L. and F u n с к C. Journ. Metab. Research. 1922, 1, 469.
Friedb erger E. Deutsche Med. Woch. (1) 1926, 42, 1760; Klin. Wochenschrift.
(2) 1926, 42, 1966.
Funk C. Journ. physiol. 1911,43, 395; 1912, 44, 50; Biochem. Journ. 1913, 211; Ergebn.
d. Physiol. 1913, 13, 2; Zeitschrft. physiol. Chem. 1914, 89, 378.
Fulmer, Duecker and Nelson. Journ. Amer. Chem. Soc. 1924, 46, 723.
Gibson and Concepcion. Philippine Journ. Sci. 1916, 11, 119.
Givens. Proc. Soc. exper. Biol, and Med. 1918, 16 Oct. 2.
Givens and Me. G 1 u g a g e. Journ. Biol. Chem. 1920, 42, 431.
Glassmann B. und P о s d e e v. Zeitschrft. Unters. Lebensmith. 1929, 57.
G oldberger and Lillie U. S. A. Publ. Health Reports. 1926, 41, 1025.
Goldberger and Tanner U. S. A. Publ. Health Reports 1924, 39, 87; 1925,
40, 45.
Goldberger, Wheeler, Lillie and R о g e г s. U. S. A. Publ. Health Re-
ports 1926, 41, 297.
Goldblatt H. and Moritz A. R. Journ,. Biol. Chem. 1926, 71, 127.
Goldblatt H. and :S о a m es К. M. The Lancet. 1922, 11, 1321.
Golding J.,Soames К. M. and Zilva. Biochem. Journ. 1926, 20, 1306.
Guha В. C. and Drummond J. C. Biochem. Journ. 1929, 23, 880.
G u 1 i c h. Amer. Journ. Physiol. 1922, 59, 483. 1924, 68, 131.
Gyorgy P. Klin. Wochensch. 1927, 13, 1.
Haag J. R. and Palmer L. S. Journ. Biol. Chem. 1928, 76, 367.
H a m a n о S. Journ. Chem. Soc. Japan. 1928, 4 N 1, 45.
Harden A. and Norr,is R. V. Proc. Roy. Soc. B. 1910, 82, 645.
Harden A. and Zilva S. S. Biochem. Journ. 1918, 12, 270; The Lancet 1919;
Biochem. Journ. 1920, 14, 131.
Harris L. J. Proc. Roy. Soc. A. B. 1923, 94, 441.
Harris L. J. and Moore T. Biochem. Journ. (1) 1928, 22,1461. The Lancet ii.
(2) 1928, 17, 892. Biochem. Journ. (1) 1929, 23, 261; (2) 1929, 23, 1114.
Hart E., Steenbock H., E 1 v e 1 у e m and Waddell. Journ. Biol. Chem.
1925, 65, 67.
Hart E., Steenbock H., Lepkowsky and Halpin. Journ. Biol. Chem.
1924, 60, 341.
Hart E., Kletzien S., Halpin and Johnson. Journ. Biol. Chem. 1925,
65, 679.
Hart E., Steenbock, Kletzien and Scott H. Journ. Biol. Chem.
1927, 78, 278.
Hartwell G. A. Biochem. Journ. 1921, 15, 140; 1924, 18, 785; 1925, 19, 1075.
(1) 1926, 20, 1273; (2) 1926, 20, 1277. 1928, 22, 1212.
Hassan A. and Drummond J. C. Biochem. Journ. 1927, 21, 653.
Hasselbach. Skand. Arch, physiol. 1911, 25,55.
Hauge S. M. and Carrick C. W. Journ. Biol. Chem. 1925, 64, 111. 1926, 60, 403.
Hauge S. M. and Trost. Journ. Biol. Chem. (1) 1930, 86, 161; (2) 1930 86, 167.
Hawk P. B. Science. 1929, 69, 200.
— 181 —
Hawking F. Biochem. Journ. 1927, 21, 728.
Heilbron J. M., К a m m, E. D. and Morton R. A. Biochem. Journ. 1927,
21, 78.
Heller V. G. Journ. Biol. Chem. 1928, 76, 499.
Hess A. Z. physiol. Chem. 1921, 117, 284; (1) 1922,120, 277. Journ. Amer. Med. Assoc.
(2) 1922, 78, 1177. (1) 1923, 81, 15; Pfluger’s Archiv. (2) 1923, 198, 483.
Hess A. Journ. Amer. Med. Ass. 1925, 84, 1910.
Hess A. and Shetmann E. Journ. Biol. Chem, 1927, 73, 145.
Hess A., Unger and S u p p 1 e y. Biochem. Journ. 1920, 14, 229.
Hess A. and Weinstock M. Amer. Journ. of Childr. Dis. (1) 1924, N 27. Journ.
Biol. Chem. (2) 1924, 63, 301. (1) 1925, 63, 297. (2) 1925, 64, 181; (3) 1925, 64, 193.
Agric. Exp. St. Research. Bull. 1926, 94.
Hess A., Weinstock and Helman. Journ. Biol. Chem. 1925, 63, 305.
Hess A., Weinstock and Sherman E. Journ» Biol. Chem. 1925, 66, 145;
(1) 1926, 67, 413; (2) 1926, 70, 123; Proc. Soc. Exp. Biol, and Med. (3) 1926,
23, 636.
Hess A., Weinstock and Tolstoi E. Journ. Biol. Chem. 1923, 57, 731.
H i e g e r. Journ. Biol. Chem. 1927, 21, 407.
H о e t. Bioch. Journ. 1924. 18, 412.
Hogan A. and Harschaw. Journ. Metabol. Research. 1924, 5, 111. Missouri
Agr. St. Research Bui. 1926, 94.	'
Holmes. Journ. Metal. Research. 1922, 2, 361. Industr. and Eng. Chem. 1925, 17,
310; 1926, 18, 188.
Holst A. und Frolich. Zeitschrft. f. Hyg. 1912, 72, 1; 1913, 75, 35.
Hopkins. Journ. Physiol. 1912. 44, 425. Biochem. Journ. 1920, 14, 721.
House M., Nelson P. and Haber E. Journ. Biol. Chem. 1929, 81, 495.
Hoyle and Zilva S. S. Biochem. Journ. 1927, 21, 1121.
Hugues J. S., Fitch J. B., Cave H. W. and Riddell W. Journ.
Biol. Chem. 1927, 71, 309.
Hugues, Nitcher, Charles, and Titus. Journ. Biol. Chem. 1925, 63, 205.
Hume E. M., Lucas N. S. and Smith H. H. Biol. Journ. 1927, 21, 362.
Hume E. M. and Smith H. H. Biol. Journ. 1923, 17,364.
Humphrey G. J. Journ. Biol. Chem. 1926, 69, 511.
Jackson H. and Riggs M. D. Journ. Biol. Chem. 1926, 67, 101.
Jansen В. C. and Donath W. Proc. K. Akad. Wetench. Amsterd. (1) 1926,
29, 1390. Chem. Weeeblad. (2) 1926, 23, 201.
Jarvine n. Zeitschrift. Analyt. Chem. 1927, 70, 108.
Javillier, Baudeet M-elle Lev y-L ajeunesse. Bull. Soc. Chim. Biol.
1925, 7, 39.
Javillier M. Bull. Soc. Chim. France (1) 1930, 47, 34; Bull. Soc. Chim. Biol.
(2) 1930, 12, 554.
Javillier M. et M-elle Emerique C. R. Ac. Sc. (1) 1930, 190, 655; (2) 1930,
191, 226.
Jendrassik A. Journ. Biol. Chem. 1923, 57, 129.
Jephcott H. and Bacharach A. L. Biochem. Journ. 1926, 20, 1351;
1921, 15, 129.
Jones J., Briod, Arzoomanian and Christiansen Journ. Amer.
Pharm. Assoc. 1929, 18, 253.
Jones J., Rapoport M. and Hodes H. L. Journ. Biol. Chem. 1930,
86, 267.
Karelitz S. and Shohl A. Journ. Biol. Chem. (1) 1927, 73, 655; (2) 1927, 73, 665.
Karrer P., Helfenstein und W e h r 1 i H. Helvet. Chim. Acta. 1930, 13, 87.
Karrer P. und Helfenstein. Helvet. Chim. Acta. 1929, 12, 1142.
182 —
Kawakami and К i m m. Proc. Imp. Acad. Tokyo. 1929, 5, 213.
Kay H. S. and Zilva S. S. Biochem. Journ. 1923, 17, 872.
К e 1 1 a w а у H. Proc. R. Soc. Ser. B, 1920, 92, 6.
Kennedy C. and Palmer L. S. Journ. Biol. Chem. (1) 1928, 76, 591; (2) 1928,
76, 611.
Kerr. Proc. Soc. Exp. Biol, and Med. 1928, 25, 344.
К i s c h und Reiter. Berl. Med. Wochesheft. 1930, 56, № 48.
Kinnersley and Peters. Biochem. Journ. 1925, 19, 820.
Knudson A. and Moore T. Journ. Biol. Chem. 1929, 81, 49.
Kr eitmair und Moll T. Munchen. Med. Wochenschrft. 1928, 75, 637.
Kramer M. M., Boehm G. and Wibiams R. E. Journ. Home Econ.
1929, 21, 679.
Koch E., Koch Fr. and Lemon H. Joufrn. Biol. Chem. 1929, 85, 159.
Koch E., Cahan M. and Gustavson R. G. Journ. Biol. Chem. 1926,
67, 52.
Koch Fr., Koch E. and R a g i n s. Journ. Biol. Chem. 1929, 85, 141.
Koh S. K. Biochem. Journ. 1927, 21, 834.
Kon S. K. and Drummond J. C. Biochem. Journ. 1927, 21, 632.
К о о p m a n. Nederl, Tijdschr. u. Gesenkund Jg. (1) 1924, 67, № 24, 2595. Wiener
Klin. Wochenschrift (2) 1924, 68.	'
Korenchevsky V. Brit. Med. Journ. 1921, 2, 547. Journ. Path. Bact. (1) 1922,
25, 366. Med. Res. Consul Spec. Rep. Serv. (2) 1922, 71. Brit. Med. Journ. 1923,
1, 802.
Korenchevsky V. and Carr. Bioch. Journ. (1) 1923, 17, 187.
Journ. Path. Bact. (2) 1923, 26, 389, Bioch. Journ. 1924, 18, 1308.
Kramer B., Kramer S., Shelling D. K. and Shear. Journ. Biol.
Chem. 1927, 71, 699.	'	,
Kuhn R. und W interstein A. Helvet. Chim. Acta. 1928, 11, 426.
Lahousse et Gonnard. Journ. Soc. Fran$. Phys. 1929, 280, 114.
Lasowsky und Sumnitzky. Arch. path. Anat. (Virchow Arch.). 1926, 262, 101.
Leigh-Clare J. L. Bioch. Journ. (1) 1927, 21, 208; (2) 1927, 21, 368f, (3) 1927,
21, 725.
Lepkovsky, Hart, Hastings and Frazier. Journ. Biol. Chem. 1925,
66, 49.
Lepkovsky and Nelson. Journ. Biol. Chem. 1924, 59, 91.
Lepkovsky, Wood and Evans M. Journ. Biol. Chem. 1930, 87, 239.
L e s n	e et V a g 1 i a n о. C. R. Ac. Sc, 1923, 177, 711.	1927,	72, 223.
L e v e	n e.	Journ. Biol. Chem. 1928, 79, 465.
L e v e	n e	and Muhfeld. Journ. Biol. Chem. 1923,	57, 341.
L e v e	n e	and Smith A. Journ. Biol. Chem. 1927, 72, 223.
L о e w у Fr. Munch. Med. Wochenschrft. 1925, 2, 1781.
LongS. H. and Parkes A. S. Bioch. Journ. 1924, 18, 800.
Lopez-Lomba et M-me Randoin. C. R. Ac. Sc. (1) 1923, 175, 1003.(2)
1923, 176, 1573.
Luce E. Biochem. Journ. 1924, 18, 716.
Luce E. and Smedley Mac-Lean. Biochem. Journ. 1925, 19, 47.
Lumiere A. Bull. Ac. Med. Paris. (1) 1920, 20 Janvier. Presse Medicale (Masson
edit. Paris). (2) 1920, № du 8 Mai. «Paris Medical» (3) 1920, №du 25 Dec. Annales
Lab. A. Lumidre (Lyon) (Bailliere et fils edit. Paris) 192, 1916, cep. VlII,33, №12.
Mac Carrison. Indian. Journ. Vhed. Research. (1) 1912, 6, 275; (2) 1912, 7,188—269.
Stud, in Dific. Diseases (London) 1919, 3. Proc. Roy. soc. Lond. Serie В 1920,
91, 103.
— 183 —
Mac Clendon. Journ. Biol. Chem., 1921, 67, 411.
Mac Clendon and Shuck. Proc. Soc. Exp. Biol, and Med. 1923, 20, 288.
Mac Collum E. V. and Davis. Journ. Biol. Chem. 1913,15, 166; 1914,19, 245.
Mac Collum E. V. and Kennedy. Journ. Biol. Chem. 1916, 24, 491.
Mac Collum E. V. and P i t z. Journ. Biol. Chem. 1917, 31, 229.
Mac Collum E. V. and Simmonds. Journ. Biol. Chem. 1918, 33, 55.
Mac Collum E. V., Simmonds and Baker G. Journ. Biol. Chem. 1925,
64, 161.	*
Mac Collum E. V., Simmonds and P i t z Journ. Biol. Chem. 1916, 27, 33.
Mac Collum E. V. Simmonds, Becker and Shipley. Journ. Biol.
Chem. 1925, 65, 97.; 1926, 70, 437.
Mac Collum E.V. Simmonds and Park. Journ. Biol. Chem. 1921, 47, 507.
Mac Collum E. V., Simmonds and Parson. Journ. Biol. Chem. 1918,
36, 197.
Mac Collum E. V., Simmonds, Becker and Shipley. Journ. Biol.
Chem. (1) 1922, 50, 1; (2) 1922, 51. 41; (3) 1922, 53, 293; (4) 1922, 54.
Macy J., H unscher H., Melosch and Nims B. Journ. Biol. Chem.
1930, 86, 59.
Macy J., Outhouse J., L о n g M. H. and Graham A. Journ. Biol. Chem.
(1) 1927, 73, 153; (2) 1927, 73, 175; (3) 1927, 73’, 189.
Magne et Simonnet. Bui. Soc. Chim. Biol. 1922, 4, 419.
M a r	g a i	1 1 о n.	C. R. Ac. Sc.	1930, 191.
M a t	t i 1	H. A.	Journ. Biol.	Chem. (Proc.). 1922, 50, XLIV;	Proc.	Soc. Exp. Biol,
and	Med. (1) 1923, 20, 537; Journ. Biol. Chem.	(Proc.).	(2) 1923, 55,	XXV.
Mat	til	H*. A.,	Carman	J. and Clayton.	Journ.	Biol.	Chem.	(Proc.).
1924, 61, 729.
M a 11 i 1 H. A. and Clayton. Journ. Biol. Chem. (Proc.). 1926, 68, 665.
Maze. C. R. Ac. Sc. 1925,180,1683.
Me KinnisR. and King C. Journ. Biol. Chem. 1930, 87, 615.
Medical Research Council Rep. Lancet i. 1928, 148.
M e 1 1 e n b y. Journ. of Physiol. 1918. № 52; The Lancet. 1920, № 5042, 847; Rapp.
Med. Res. Council London. 1921, № 61.
M e 1 1 e n b у and Green. Brit. Med. Journ. 1929, 3569, 984.
Mendel L. and Cannon H. Journ. Biol. Chem. 1927, 75, 779.
Metchnikoff E. Ann. Inst. Pasteur. 1910, 24, 755; 1913, 27, 896; 1915, 29, 477.
Metchnikoff E. et Wolman n. Pasteur. 1912, 26, 825.
Miller C. A. Bioch. Journ. 1926, 20, 515; Science. 1924, 59, 197.
M и л ь м а н M. С. Теория роста, старения и смерти. Баку. 1926.
Миттельман С. Nouv. Inst. Agron. Exp. Leningrad. 1925, 3, № 1; Inst..Explor.
North. 1927, 38, 39.
Moore and W i 1 1 i m о 11 . Biochem. Journ. 1927, 21, 585.
Moore T. Lancet ii. (1) 1929, № 5, 219; Biochem. Journ. (2) 1929, 23, 803; 1930,
24, 692.
Morrison R. R., Peacok and Weight S. Biochem. Journ. 1928, 22,1138.
M о r tpn and Heilbron. Biochem. Journ. 1928, 22, 387.
M u n s e 1 1 H. E. Journ. Home Econ. 1929, 21, 124.
Morgan and Osburn. Journ. Biol. Chem. 1925, 66, 573.
Mori M. Jahrb. Kinderheile. 1904, 59, 175.
Mouriquand, Le'ulier. C. R. Ac. Sc. 1925,181,434.
Mouriquand, Leulier et Michel. C. R. Ac. Sc. 1925; 180, 86.
Mouriquand, Michel et Barre. C. R. Soc. Biol. 1922, 86, 1169.
Mouriquand, Michel et Bernheim. C. R. Soc. Biol. 1924, 179, 541.
Mouriquand, Rochaix et Dosdat.C. R. Soc. Biol. 1925, 93, 901.
184 —
Mu гр у J. С. and Jones D. В. Journ. Agric. Research. 1924, 29, 253.
Nakamura. These Doctoral Faculte Scien., Edit. Medicales, Paris. Ser. A. 1924,.
1813, № 983.
Narayanan В. T. Biochem. Journ. 1930. 24, 6.
Narayanan В. T. and Drummond J. C. Biochem. Journ. 1930, 24, 19..
Nelson E. M. and Jones D. B. Journ. Biol. Chem. 1928, 80, 215.
Nelson E. M. and Steenbock. Journ. Biol. £hem. 1925, 64, 299.
N e p p i B. Giog. Chem. Ind. Applic. 1926, 8, 432.
Nicloux M. Bull. Soc. Chim. Biol. 1927, 9, 639.
Nitzescu I., Popovicu G. et Denes-Goetz. Bull. Soc. Chim. Biol..
1927, 9, 126.
Norris C. R. and Danielson J. Journ. Biol. Chem. 1929, 83, 469.
Norris C. R. and C h u r c h A. E. Journ. Biol. Chem. 1930, 89, 437.
Orton, Me Collum and Simmonds. Journ. Biol. Chem. 1922, 53, 151.
Osborne T. and Mendel L. Journ. Amer. Med. Ass. 1917, 69, 32; Journ. BioL
Chem. (1) 1919, 37, 189; (2) 1919, 39, 29; 1920, 41,451; 1922,16, 363; 1926, 69, 661.
Palmer L. S. and Kennedy C. Journ. Biol. Chem. 1927, 74, 591; 1928, 75, 619-
Palmer L. Carotinoides and related pigments. 1922, New-York.
Palmer L. and Kennedy C. Journ. Biol. Chem. 1921, 46, 559; 1927, 75, 619.
Палладии A. B. Bioch. Zeitschrft. 1924, 153, 66.
Палладии А. В. и Кудрявцева А. И. Врачебное дело. 1923, 6, 3.
Parson Н. Journ. Biol. Chem. 1920, 44, 567.
Parson H. and H u t t о n M. Journ. Biol. Chem. 1924, 59, 97.
Parson H. and Reynolds M. Journ. Biol. Chem. 1924, 59, 731.
Peacock. The Lancet. 1926, 11, 328.
Peters. Nature. 1929, 124, 411.
Peters. Biochem. Journ. 1924, 18, 858.
Plimmer, Rosedale and Raymond. Journ. Biol. Chem. (1) 1927, 21, 913-
Plimmer, Rosedale, Raymond and Lowndes. Journ. Biol. Chem.
(2) 1927, 21, 1241.
Pohl R. tfachr. Gesell. Wiss. Gott. Mat. Phys. KI. 1926, 10 Dezem.
P о u ] s s о n. Presse Medicale. 1924, № 14, 25; Med. Wochenschrft. (1) 1930, № 40-
Arch. Inter. Pharmacodyn. et Therap. (2) 1930, 38, 200
Pringle. Lancet ii. 1928, 24, 1237.
Pummerer R. und R e b m a n L. Deutsch. Chem. Ges. 1928, 61, 1099.
Q u a s t e 1.. Bioch. Journ. 1926, 20, 166.
Quinn E. J., Burtis and Milner E. W. Journ. Biol. Chem. 1927, 72, 557-
M-me Randoin L. Bull. Soc. Sc. Hyg. Alim. 1923, 11, 463.
M-me Randoin L. et L e с о q R. C. R. Ac. Sc. 1926, 182, 1564; (1) 1927, 184, 1347.
C? R. Soc. Biol. (2) 1927, 96, 671; Bull. Soc. Chim. Biol. (3) 1927, 9, 513; C. R. Ac.
Sc. (4) 1927, 185, 1068.
M-me Randoin L. et L e 1 e s z. Bull: Soc. Chim. Biol. 1925, 7, 765.
M-me Randoin L. etM-lle Michaux. C. R. Ac. Sc. 1925, 180, 1063; 1926,
183, 1055.
M-me Randoin L. et Simonnet. C. R. Ac. Sc. (1) 1924, 179, 700; Bull. Soc. Chim.
Biol. (2) 1924, 6, 601; Les problemes biologiques. La question de Vitamines. Presse
Universitaire de France (Paris). 1927, 2; Bull. Soc. Chim. Biol. 1928,10, 745.
M-me Randoin L. et L e с о q R. C. R. Ac. Sc. 1928, 187, 60; C. R. Soc. Biol. 1929r
101, 877.
R a t h e r y. Paris' Medical. 1924, 18, 399.
Reader V. Bioch. Journ. 1925, 19, 1037.
Reader V. and Drummond J. C. Bioch. Journ. 1926, 20, 1256; 1929, 23, 689.
1930, 24, 77.
— 185 —
Reerin к E. H. and W i j к van A. Bioch. Journ. 1929, 23, 1295.
Reiter T. Die Naturwissensch. 1929, 45, 876.
R e у h e r. Arch. f. Kinderheilk. 1925, 75, 166.
Roche. Arch. Inter. Physiol. 1925, 24, 413.
Rohmer P. Bull. Soc. Pediatrie Paris (1) 1929; Rev. Fran$. Pediatrie. (2) 1929, 5.
№ 3, 293.
Rohmer P. et Dubois R. Rev. Fran$. Pediatrie. 1930, 6, 604.
Roscoe M. H. Biochem. Journ. 1927, 21, 211.
Rosenheim O. Biochem. Journ. 1927, 21, 386.
Rosenheim O. and Drummond J. C. Biochem. Journ. 1925, 19, 753.
Rosenheim O. and Webster T. A. The Lancet. 1925. 1, 1025; Biochem.
Journ. (1) 1926, 20, 337; J. Soc. Chem. Industr. (2) 1926, 45, 932; Biochem. Journ.
(3) 1926, 20,1341; (4) 1926, 20,1342; The Lancet. (1) 1927, 21, 111; Biochem. Journ.
(2) 1927, 21, 111; (3) 1927, 21, 127; (4) 1927, 21, 389; 1929, 23, 633.
Rosenthal. Monatsch. Chem. 1922, 43, 237.
Ross S. G. Amer. Journ. Dis. Child. 1921, 22, 232.
R о t h 1 i n. Zeitschrft. physiol. Chem. 1922, 121, 300.
Saiki T. Annales Inst. Pasteur. 1927, 41, 668.
Salmon. Journ. Biol. Chem. 1925, 65, 457.
Schaefer. Bui. Soc. Sc. Hyg. Alim. 1918, 6, 261; C. R. Soc. Biol. 1919, 82, 2.
Scheunert A. und Schieblich M. Biol. Zeitschrift. 1923, 139, 57; Annalen
d. Chem. (1) 1927, 453, 249. Bioch. Zeitschrft. \2) 1927, 184, 58.
Scheunert A. Der Vitamingehalt der Deutsch. Nahrungsmittel. Julius Springer
Berlin 1929; Biochem. Zeitschrft. 1929, 209.
Schultz and Morse. Amer. Journ. Dis. Child. 1925, 30, 199.
Schmid t-N i e 1 s e n S. und S. Det. Kgl. Norske Videnskab. Forhandlinger. 1928,
1 B,№№ 29 — 63; (1) 1929, 2B,№№13 —15; Biochem. Journ. (2) 1929, 23,1153.
Schultz and Ziegler. Journ. Biol. Chem. 1926, 69, 415.
Schultze und Winterstein. Zeitchrft. physiol. Chem. 1906, 124. 8.
Schwartz. Journ. Amer. Med. Ass. 1925, 85, 2025.
Scott i-Foglieni L. Bol. Soc. ^Med. Chir. Pavia. 1925, 37, № 6; Arch. I tai. di
Biol. (1) 1926, 75, № 3; Bol. Soc. Biol. Sper. \2) 1926, 1, № 5; Bol. Soc. Med. Chir.
Pavia. 1927, 1, № 1.
Seidell A. Public Health Rep. Healt. V. S. Healt. Serv. 1924, № 902, 294; Publ.
Health Rep. 1916, 31, 364; Journ. Ind. Eng. Chem. 1921, 13, 1111; Publ. Healt.
Report. 1922, 37f № 25; Journ. Biol. Chem. 1926, 67, 593; 1929, 82, 633.
Seyderhelm und T a m m a n n. Klinische Wochenschrft. 1927, 25, 1.
Shears M. J. Proc. Soc. Exp. Biol. Med. 1926, 23, 546.
Shears M. J. and Kramer B. Journ. Biol. Chem. 1926, 71, 213.
Sherman H. C. Journ. Chem. Eng. 1926, 3, 1241.
Sherman H. C. and Axtmayer J. H. Jouin. Biol. Chem. 1927, 75, 207-
Sherman H. C. and Burton G. W. Journ. Biol. Chem. 1926, 70, 639.
Sherman	H.	C.	and	В о у t о n. Journ. Amer. Chem. Soc. 1925, 47, 1646.
Sherman	H.	C.	and	C a m m a c k. Journ. Biol. Chem. 1926, 68, 69.
Sherman H. C. and Campbell H. L. Journ. Biol. Chem. 1924, 60, 5.
Sherman	H.	C.	and	Grose. Proc. Soc. Exp. Biol. Med. 1923, 21, 11.
Sherman	H.	C.	and	Hessler M. C. Journ. Biol. Chem. 1927, 73, 113.
Sherman H. C. and Mac Leod. Journ. BioL Chem. (1) 1925, 64, 429; Journ-
Amer. Chem. Soc. (2) 1925, 47, 1658.
Sherman H. C. and M u n s e 1 1 H. E. Journ. Amer. Chem. Soc. 1925, 47, 1639.
Sherman H. C. and S a n d e 1 s. Proc. Soc. Exp. Biol. Med. 1929, 26, 536.
Sherman H. C. and Burtis M. P. Journ. Biol. Chem. 1928, 78, 671.
Shimizu T. und Hatakeyama T. Zeitchrft. physiol. Chem. 1929, 182, 56.
— 186 —
Shinoda Z. Ges. Exp. Med. (1) 1924, 40, 274; Pfliiger. Arch. (2) 1924, 203, 365.
Shipley, McCollum and Simmonds. Journ. Biol. Chem. 1921, 49, 399.
Shipley, Park and McCollum. Bull. Johns Hopkins Hosp. 1921, 32, 160.
Shipley, Park, McCollum, Simmonds and P a г s о p. Journ. Biol.
Chem. 1920, 45, 343.
Shipley, Kinney and McCollum. Journ. Biol. Chem. (1) 1924, 59. 165;
(2) 1924, 59, 177.
Shorten and Ray. Biochem. Journ. 1921, 13, 274.
Simonnet H. Bull. Soc. Hyg. Alim. 1925, 13, 419.
S j о r s 1 e v N. Journ. Biol. Chem. 1924, 62, 487.
S 1 a t о r A. Journ. Chem. Soc. 1908, 93, 217.
S m а к u 1 a. Nachr. Ges. Wiss. Gottingen. 1928, 49.
Smedley, Mac Lean and Thomas. Biochem. Journ. 1920, 14, 483.
Smith H. H. and Carey. Journ. Biol. Chem. 1923, 58, 425.
Smith H. H. and Chick H. Bioch. Journ. 1926, 20, 131.
Smith Er. and Medes. Journ. Biol. Chem. 1921, 48, 323.	4
Soames К. M. Biochem. Journ. 1924, 18, 1349.
S о m о g у i M. Proc. Soc. Exp. Biol. Med. 1929, 26, 536.
Steenbock H., Sell M., Nelson E. and Buell M. Proc. Amer. Soc. Biol.
Chem. in Journ. Biol. Chem. 1921, 46, XXXII.
Steenbock H., Sell M. and Boutwell. Journ. Biol. Chem. 1921, 47, 303.
Steenbock H. and Block A. Journ. Biol. Chem. 1925, 64, 263.
Steenbock H. and Coward K. Journ. Biol. Chem. 1927, 72, 765.
Steenbock H., Hart, Hoppert and Black A. Journ. Biol. Chem.
1925, 16, 441.
Steenbock H. and Nelson E. M. Journ. Biol. Chem. 1923, 56 — 355.
Steenbock H., Sell and Jones. Journ. Biol. Chem. 1923, 50, 327.
Steenbock H., Sell and Nelson. Journ. Biol. Chem. 1918, 36, 171.
Stepp. Zeitschrft. f. Biol. 1911, 87, 170; 1911, 69, 495.
Stucky C. and Rose W. Amer. Journ. Physiol. 1929, 89, 1.
S u g i u r a and Benedikt. Journ. Biol. Chem. 1918, 36, 171.
Sure В., К i к. M. and W a 1 к e r D. Journ. Biol. Chem. 1929, 82, 287.
Sure B. and Smith M. Journ. Biol. Chem. (1)1^29, '82, 287; (2) 1929, 84, 727.
Sure B. Rep. Bioch. Div. Am. Chem. Mil^wakkee. (1) 1923, 23—9; Journ. Biol. Chem.
(2) 1923, 58, 681; (1) 1924, 58, 693; (2) 1924, 62, 371; 1925, 63, 223. (1) 1926, 69, 29;
(2) 1926, 69, 41; (3) 1926, 69, 53; (1) 1927, 74, 37; (2) 1927, 74, 45; (3) 1927, 74, 55;
(4) 1927, 74, 71; 1928, 76, 673.
Suzuki, Schimamura and О d a к e. Biochem. Zeitschrft. 1912, 43, 89.
Suzuki and Taira. Journ. Chem. Soc. Japan. 1923,45, Proc. 228; 1923, 44, Proc.
299. 1911, 32, 1.
Takahaschi K., Nakamiya Z., K. Kawakami and К i t a s a t o.
Sci. Taker. Inst. phys. Chim. Res. Tokyo. 1925, 3, 81.
T a n г e t. Ann. Chim. Phys. 1890, 20 (6), 289; 1908, 15 (8), 313.
Thunberg. Scand. Arch. Physiol. 1920, 35, 163.
Tiger etSimonnet. Bull. Soc. Chim. Biol. 1921, 3, 580.
Tozer. Bioch. Jour. (1) 1921, 15, 28; Journ. Pathol. Bact. (2) 1921, 21; 306.
Trousseau. Clinical Medecine 1872, 92.
Черкес A. Bioch. Zeitschrft. 1922, 133, 75; 1923, 143, 1; 1924, 149, 151; Журн.
Эксп. Биол. и Медиц. Москва. 1925, 1, 97; Bioch. Zeitschrft. 1926, 167, 203;
Журн. Эксп. Биол. и Медиц. Москва (1) 1927, 15, 130; Klin. Wochenschrft.
(2) 1927, 6 N 19.
Черкес А. иКуперман Т. М. Журн. Эксп. Биол. и Медиц. Москва, 1926,
8, 13.
187 —
Черкес А. иЛитвак И. И. Журн. Эксп. Биол. и Медиц. Москва 1927, 14, 763.
Ulmer. Arch. F. Kinderheilk. 1926, 79, 4.
Underhill S. W. F. Lancet 1928, № 18, 948.
Van der W a 1 1 e. Biochem. Journ. 1922, 16, 713.
V а г i о t. Resultats de Femploi des differents laits condenses dans 1’a.imentation des
nourissons. Conference Soc. Med. Hopitaux. 1922, 26 Mai.
V e d d e г E. В. and Clark. Philippine Journ. Sci. Ser.'B. 7. 1912, 423.
V e d d e r E. B. and Lawson W. E. Journ. Biol. Chem. 1927, 73, 225.
Waddell J., Steenbock H. and Hart. Journ. Biol. Chem. 1929, 83, 243.
Waddell J., Steenbock H., Elvehjem and Hart E. Journ. Biol.
Chem. 1929, 83, 251.
Waddell J., Steenbock H. and Hart E. Journ. Biol. Chem. 1929, 84, 115.
Webster T. A. and В о u r d i 1 1 о n. Biochem. Journ. 1928, 22, 1223x
Webster T. A. and Hill. Brit. Med. Journ. 1925, 1, 956.
Wedgewood P. etFor d E. Bull. Soc. Chim. Biol. 1924, 6, 217.
Weill et Mouriquand. C. R. Soc. Biol. 1919, 82, 182.
Williams R. and Waterman R. E. Journ. Biol. Chem. 1928, 78, 311.
Williams R. and Eddy W. Carnegie Inst. Year Book, 1928, 27, 375.
Williams R., Waterman R. E. and Gurin S. Journ. Biol. Chem. 1929,
83, 321; 1930, 87, 559.
Williams R., Wilson and v. der A h e. Journ. Amer. Chem. Soc. 1927, 49, 227.
Williams R. , Warner and Roehm. Journ. Amer. Chem. Soc. 1929, 51,
2764.
Williams R. and С о г г a n. Biochem. Journ. 1930, 24, 37.
Williams R. Journ. Biol. Chem. 1919, 38, 465.
Williams R. and Waterman. Journ. Biol. Chem. 1926, 68, 499.
Willimott S. G. and Moore T. Biochem. Journ. 1926, 20, 869; 1927, 21, 86-
Willimott S. G., Moore T. and W о k e s F. Biochem. Journ. 1926, 20, 1292.
Willimott S. G. and W о k e s F. Biochem. Journ. 1926, 20, 1299.
Wilson. Journ. Biol. Chem. 1922, 51, 411.
Wilson. Biochem. Journ. 1927, 21, 1054.
Willstatter R. und Escher H. Zeitschrft. physiol. Chem. 1920, 64, 47.
Windaus, Westphal 1, Weder u. Rygh. Nachr. Ges. Wiss. Gottingen
1929, 45.
Windaus and Hess. Nachr. Ges. Wiss. Gottingen 1927, 1, 175.
Wladyczko. Ann. Institut Pasteur. 1913, 27, 336.
W о k e s F. Biochem. Journ. (1) 1928, 22, 830; (2) 1928, 22, 997.
W о k e s F. and Willimott S. G. Biochem. Journ. 1927, 21, 419.
Wolf L. K. und Overhoff H. Deutsch. Med.-Wissenschrft. 1930, 56, N 34. 1428.
W о 1 1 m a n n E. et V a g 1 i a n о. C. R. Soc. Biol. 1923, 88.
Yoder L. Journ. Biol. Chem. 1926. 70. 289.
Zeichmeister L., v. Cholnocky L. u. Vrabely V. Deutsche Chem.
Ges. (1) 1928, 61, 566; (2) 1928, 61, 15345.
Zilva S. S. Biochem. Journ. 1928, 22, 779; 1929, 23, 1199.
Zilva S. S., Golding, Drummond and Coward. Biochem. Journ. 1921,
15, 427; (1) 1924, 18, 182; (2) 1924, 18, 632; 1925, 19, 589; (1) 1927, 21, 354; (2)
1927, 21, 689.
Zilva S. S. and Miura. Biochem. Journ. 1921, 15, 422.
Zilva S. S. and Welz. Proc. Roy. Soc. Ser. B. 1918, 90, 505.
Zucker T. and Barnett. Proc. Soc. exp. Biol. Med. 1923, 29, 375.
tucker T. and Matzner M. S. Proc. Soc. Exp. Biol. Med. 1924, 21, 186.

ОГЛАВЛЕНИЕ.
Стр.
Введение ................................................................... 3
Основное физиологическое	значение витаминов........................  6
Разделение витаминов ................................................. 9
Группа липорастворимых	витаминов............................ 10
Водорастворимые витамины............................................. 11
Витамины группы В.................................................. И
Витамин С......................................................... 13
Новый период исследований о витаминах................................ 16
Глава I. Новые данные о природе и свойствах отдельных витаминов
Группа липорастворимых витаминов..................................... 19
Природа витамина D................................................... 19
Местонахождение провитамина и образование вит. D в природных условиях .	26
Местонахождение вит. D............................................... 27
Новые данные о физиологическом действии вит. D....................... 31
Влияние вит. D на усвоение кальция и фосфора...................... 31
Действие очень больших доз вит. D................................. 33
О механизме физиологического действия вит. D...................... 35
Влияние вит. D на рост............................................ 36
Введение витамина D в организм......................................  37
Измерение вит. D пробами на крысах................................... 38
Реакции на вит. D.................................................... 40
Потребность в вит. D у различных животных............................ 41
Глава II. Вит. А. Липорастворимый фактор роста и антиксерофтальмиче-
ский фактор
Новые данные о получении препаратов вит. А............ . •........... 42
Сведения о химической природе вит. А................................  43
О достоверности цветных реакций как признака вит. А.................. 47
Витамин А и каротины................................................. 51
О химии каротинов................................................. 51
Витаминное действие	каротинов..................................... 54
Витамин А, каротины	и	цветные реакции......................... 56
О превращении каротина в вит. А внутри живого организма........... 59
Влияние света на внт. А.............................................. 62
Присутствие вит. А в веществах животного происхождения............... 63
' Образование вит А в растениях....................................... 63
Физиологические особенности действия вит. А.......................... 64
Действие очень больших доз вит. А...................................  66
Усовершенствование биологической пробы на вит. А.................... 67j
— 190 —
Стр^
Точность биологической пробы на вит. А........................• . . • .	71
Измерение вит. А цветными реакциями ..................................... 75
Физиологическое действие смеси вит. А и D................................ 77
Образов, камней в печени, желч. протоке, почках, мочеточниках, мочевом
пузыре и авитаминоз А и D....................................... 77
Злокачественные опухоли и авитаминоз А и D.................* . . .	78
Заживление кожных порезов и авитаминоз А и D.......................... 79
Глава III» Липорастворимые витамины Е
Факторы воспроизведения . ,............................................   79
Доказательства существования двух вит. Е................................. 79
Выявление двойственности вит. Е.......................................... 83
Распространение в природе вит. Е...............•......................... 85
Получение препаратов вит. Е. Указания па природу этих вит................ 85
Физиологические особенности действия вит. Ех—начала плодовитости ....	86
Глава IV. Водорастворимые витамины
Витамины В..............................................................  89
Двойственность вит. В и физиологическая характеристика отдельных фракций В .	91
О попытках выяснить химическ. природу вит. В............... • 98
Влияние витаминов В на усвоение глюсидов (углеводов), белков и жиров . .	105
Роль сахаров в авитаминозе В и техника исследования этого авитаминоза . .	108
Влияние витаминов В на усвоение белков.................................. 115
Некоторые особенности, характеризующие общее физиологическое действие
витаминов В .	.............................................. 121
Новые данные о местонахождении вит. В .... •.......................• .	122
Образование вит. В бактериями........................................... 123
Цветная реакпия на вит. В............................................... 124
Глава V. Витамин С—водорастворимый антицинготный витамин
Новая биологическая техника исследования вит. С . . • %................  124
О природе вит. С........................................................ 128
Способы получения препаратов вит. С.................................... 128-
Данные о химической природе вит. С...................................... 131
Указание на существование 2-ой фракции вит. С........................... 135
Восстановительная способность антицинготной жидкости и содержание в ней
вит. С...........................................................  135
Цветная реакция на вит. С..............................•................ 142
Образование вит. С в теле крыс и птиц.................................,	148
Сохранение растительными продуктами антицынготных свойств при долгом
хранении.......................................................... 149
Некоторые физиологические особенности	действия вит. С ................. 15(У
О непосредственном физиологическом действии вит. С и вообще водораствори-
мых витаминов..................................................... 152
Способ кратких испытаний физиологического действия водорастворимых вита-
минов ............................................................ 154
Определение и значение бромного	числа	мочи	  154
Результаты испытания взрослых	свинок................................ 156
Выяснение физиологического значения вит. С на основании данных, получен-
ных новым способом	кратких	испытаний...................... 159
Предельная и обычная дозы витамина С.................................... 161
Витамин С и малокровие.................................................. 163
— 191 —
Общее заключение	Стр.
Указания относительно непосредственного влияния витаминов на ход усвоения
веществ внутри тканей......................................... 164
Ступени физиологического действия и вЗаимвая зависимость отдельных вита*
минов......................................................... 166
Послесловие ............................................................ 176
Литература.............................................................  177

Н. А. БЕЗСОНОВ
ВИТАМИНЫ
2*ое дополненное Нэджина
ГОСУДАРСТВЕННОЕ НАУЧНО-ТЕХНИЧЕСКОЕ ИЗДАТЕЛЬСТВО
ЛЕНХИМСЕКТОР
ЛЕНИНГРАД
1931