ЛАБОРАТОРНЫЙ ПРАКТИКУМ МЕДИЦИНСКОЙ ПАРАЗИТОЛОГИИ
СОСТАВИЛИ
Н. И. АЛФЕЕВ, Н. Г. БРЕГЕТОВА, | В. Г, ГНЕЗДИЛОВ ], А. В. ГУЦЕВИЧ, Н. Н. КОСТЫЛЕВ, Б. П. НИКОЛАЕВ, Н. Г. ОЛСУФЬЕВ, Е. Н. ПАВЛОВСКИЙ, Г. С. ПЕРВОМАЙСКИЙ,
П. П. ПЕРФИЛЬЕВ, |б. И. ПОМЕРАНЦЕВ1, В. А. САЛЯЕВ, Б. П. СКВОРЦОВ, Г. Г. СМИРНОВ, И. К. ТЕРАВСКИЙ
Под редакцией
академика Е. Н. ПАВЛОВСКОГО
ГОСУДАРСТВЕННОЕ ИЗДАТЕЛЬСТВО МЕДИЦИНСКОЙ ЛИТЕРАТУРЫ МЕДГ ИЗ
ЛЕНИНГРАДСКОЕ ОТДЕЛЕНИЕ . 195»
ПРЕДИСЛОВИЕ
Паразитология является наукой, в которой особенно четко переплетаются зоологические и экологические основы изучения животных паразитов в отношении их прямого и косвенного вреда для здоровья человека и общепатологического и эпидемиологического процесса выявления их вредоносного значения. Завершающим этапом такого изучения является построение системы мероприятий по борьбе и предупреждению болезней, в возникновении и развитии которых повинны как возбудители, так и способствующие их распространению разные дикие и домашние животные и многие беспозвоночные, являющиеся переносчиками возбудителей трансмиссивных болезней или промежуточными хозяевами паразитов.
Распознавание взаимосвязей организмов, приводящих к заболеванию людей трансмиссивными болезнями, усложняется тем, что одни возбудители болезней потеряли связь с внешней средой как средой обитания, другие же часть своего жизненного цикла проводят во внешней среде (почва, водоемы, городская обстановка), часть возбудителей—в организме человека, переносчика или промежуточного хозяина паразита-Кроме этого, на течение жизненного цикла паразита, переносчика и промежуточного хозяина влияют абиотические, биотические факторы внешней среды и факторы социального порядка. Вследствие различий в сочетании этих факторов заболевания людей остаются единичными или же принимают более или менее массовый характер вплоть до развития эпидемий и эндемий. Следовательно, паразитология своими основными дисциплинами — паразитологической протозоологией, гельминтологией, акарологией и энтомологией с учением о переносчиках возбудителей трансмиссивных болезней — тесно смыкается с зоологией (систематика, биология, экология и др.) и с такими медицинскими теоретическими и клиническими науками, как гигиена, микробиология, эпидемиология, общая патология, патологическая анатомия и гистология, дезинфекция и дезинсекция, клиника многих болезней и другие медицинские специальности.
Получает ли будущий врач необходимый минимум сведений по паразитологии во время прохождения курса в медицинском институте? К сожалению и к ущербу интересов практики здравоохранения — не получает. Кафедра зоологии заменена кафедрой общей биологии; присовокупление к ней наименования «и паразитологии» не меняет дела уже по одному тому, что слушатель может правильно понять и достойно оценить значение паразитологии, если она преподается на одном ив старших курсов, когда студенты уже прошли общие медицинские дисциплины и побывали в клинике. Между тем жизнь социалистического государства, идущего к построению коммунистического общества,, властно предъявляет новые и новые требования к советскому здраво
1*	3/
охранению. Это нашло более конкретное выражение в постановлении XX съезда КПСС.
От врача требуется точная паразитологическая диагностика болезни на основе полного анамнеза и личного исследования больного с учетом данных анализов, проводимых в лабораториях. Однако качество и характер паразитологических заключений часто бывают недостаточными. Если лаборатории более или менее справляются с определением яиц банальных видов паразитических червей в фекалиях и малярийных плазмодиев в крови, то в отношении протозойного обследования кала и других выделений организма дело обстоит крайне неблагополучно, вплоть до полного отсутствия применения протозойного обследования больного. На санитарно-эпидемиологическую станцию ложится обязанность обследования внешней среды на наличие в ней внутренних паразитов человека (1), промежуточных хозяев гельминтов и заражения их соответственными паразитами (2) и переносчиков возбудителей трансмиссивных болезней человека (комары, москиты, слепни, мухи, клещи и др.) (3). Мало этого! Надо уметь обследовать внешнюю среду, знать где, кого, когда искать и владеть методами научного собирания материалов, которые должны в дальнейшем получить точное видовое определение. От последнего зависит правильное установление мероприятий по борьбе с паразитами и по профилактике трансмиссивных и инвазионных болезней человека.
Ближайший выход следует искать в самостоятельном освоении работниками клинических лабораторий и санитарных станций паразитологии в ее современном состоянии, в объеме, необходимом для диагностики болезней и для обследований внешней среды на паразитов, переносчиков возбудителей трансмиссивных болезней, животных — резервуаров возбудителей болезней. В этом направлении переработано первое издание «Практикума медицинской паразитологии» (1935), и выпускается второе издание как «Лабораторный практикум медицинской паразитологии» для работ в лаборатории и для обследований среды обитания людей и природного их окружения.
В настоящем издании материал сгруппирован по трем основным разделам медицинской паразитологии — протозоология, гельминтология, арахноэнтомология. В пределах каждого из этих разделов мы не стремились строго соблюдать систематическую последовательность и располагали материал, исходя из методических соображений, тем более, что наличие таких глав, как «Кишечные простейшие», «Амбарные вредители», исключает возможность расположения материала в точном соответствии с зоологической классификацией.
Как и в первом издании, практикум написан авторами, которые являются активными исследователями в своей специальности. Каждая глава составлена так, что она может быть использована отдельно. Рисунки, для которых не указан источник заимствования, являются оригинальными.
Авторы с признательностью примут замечания и пожелания лиц, пользующихся новым изданием «Лабораторного практикума медицинской паразитологии». Письма адресовать на кафедру общей биологии и паразитологии ВМОЛА им. С. М. Кирова, Ленинград, К-9, Клиническая ул., 2.
Коллектив авторов пользуется случаем поблагодарить д-ра Д. И. Благовещенского за большой труд по редактированию «Практикума».
Ленинград 8/1. 1957 г.
ВВЕДЕНИЕ
Мощное развитие паразитологии в СССР во всех ее главных направлениях является одним из основных достижений в деле здравоохранения и эволюции советских биологических и медицинских наук. В вопросах краевой патологии и паразитологического районирования СССР паразиты и связанные с ними и с их переносчиками некоторые инвазионные болезни часто занимают первое место. Этим, а также распространением различных инвазий и необходимостью организованной борьбы с ними было обусловлено быстрое нарастание действенного интереса со стороны врачей к паразитологии, которая как дисциплина не получила развития в дореволюционной России, несмотря на наличие отдельных талантливых и плодовитых исследователей. Первая мировая война дала заметный толчок в деле развития паразитологии в зарубежных странах. Это было вызвано необходимостью борьбы с переносчиками паразитарных тифов, передвижением войск в районы, злостные по малярии (например, на Македонском фронте), завозом большого числа новых и разнообразных паразитоносителей — аборигенов из тропиков в составе колониальных войск. Однако в России война не привела к аналогичным результатам, если не считать единичных исследователей, использовавших свое пребывание, в частности, на Кавказском фронте для паразитологических наблюдений (проф. Е. И. Марциновский и С. П. Канделаки). Лишь после Октябрьской революции выявляются такие требования растущего дела здравоохранения, на которые могла по специальности ответить только паразитология. На наших глазах произошел огромный рост этой науки и учения о тропических болезнях, сопровождаемый нарождением новых специальных учреждений и ячеек в форме тропических институтов, малярийных станций, отделений паразитологии в санитарно-бактериологических и микробиологических институтах, а также в специальных научно-исследовательских учреждениях, начиная с Академии наук СССР, бывш. ВИЭМ и АМН СССР.
Мобилизовались специалисты и прежде интересовавшиеся паразитологией, переквалифицировались многие работники, и еще большее количество их было подготовлено заново. В связи с успехами в деле борьбы с малярией и другими инвазионными болезнями структура упомянутых выше учреждений видоизменяется.
Подготовка паразитологов требует особой дифференциации материала и методов его изучения. Паразитология оперирует с животными, патогенными или косвенно вредоносными для человека и, как таковая, прежде всего связана с зоологией. Объекты ее изучения относятся к типам простейших, червей, членистоногих, моллюсков и позвоночных. Следовательно, в основе изучения паразитов лежит зоология; необходимо правильно определить вид паразита (что одновременно является
5
элементом диагностики инвазионных болезней), знать особенности организации и жизни паразита (биология), распространение его в природе (зоогеография), точные места его обитания, зависимость от внешней среды (экология) и многое другое. Эта основная сторона дела недостаточно осуществляется на практике. Главная причина лежит в ослаблении преподавания зоологии на I курсе медицинских институтов, где она входит в курс общей биологии. Недавнее предложение выделить зоологию в обособленный курс, ведущийся параллельно с курсом общей биологии, не успело еще проявить себя положительными результатами. Преподаванию зоологии стало уделяться больше внимания — это хорошо. Но неудачна идея параллельного проведения преподавания зоологии и общей биологии. Единственно целесообразным является проведение курса зоологии перед разделами программы по общебиологическим вопросам и по эволюционному учению.
Зоологической основой паразитологии и путями ее специального развития являются:
а)	изучение вредоносного влияния паразитов на человека (элементы общей и частной патологии, патоморфологии и клиники инвазионных болезней),;
б)	установление места, времени и формы контакта паразита с человеком (т. е. изучение моментов инвазии);
в)	обоснование и разработка практических мер разрыва этого контакта;
г)	выработка прямых и косвенных мер борьбы с паразитами в целях профилактики соответствующих инвазионных болезней (эпидемиология и профилактика, гигиена). В связи с зоологическим характером основ паразитологии все специальные направления в изучении паразитов должны вытекать из точного знания анатомо-физиологических особенностей их организации и их экологии.
Изучение особенностей паразитов применительно к человеку как к их естественному или случайному хозяину требует экскурсий в область патологии. Таким образом, в паразитологии как науке смьь каются зоологические и медицинские элементы, но паразитология ни в коем случае не представляет собою механическую смесь энциклопедических сведений зоологического и медицинского характера, касающихся паразитов и вызываемых ими болезней. В действительности она является цельной и самодовлеющей дисциплиной, захватывающей сопредельные области зоологии и медицины и выдвигающей такие кардинальные общебиологические проблемы, как изучение паразита и хозяина в их взаимных влияниях (ведущая проблема), паразитоценозы 1 и их совокупное действие на хозяина, организм как среда обитания (экологическая концепция), влияние абиотических факторов внешней среды на развитие паразитарных болезней в конкретных условиях, действие факторов социального характера на развитие паразитарных болезней, паразитоносшельство и другие.
Если рассматривать паразитологию человека в «служебном» соотношении к требованиям лечебной и профилактической медицины, то ни на минуту нельзя забывать, что эта дисциплина в своей основе является учением о животных организмах и что она должна быть усвоена прежде всего как таковая. Успех приложения достижений паразитологии к лечебной и профилактической практике зависит от глубины и точности изучения биологических и зоологических основ этой науки. Эту
1 Паразитоценозом называется все паразитарное население или определенных органов хозяина или хозяина в целом.
б
мысль необходимо подчеркивать при каждом удобном случае, потому что в сознание врачей далеко еще не вселилось представление о важности в борьбе с паразитами и их переносчиками наряду с лечебным и профилактического направления, в основе которого лежит именно знание биологической и зоологической стороны вопроса. Более того, далеко не всегда бывает даже ясна необходимость правильного научного определения вида паразита и знания его биологических особенностей. По отношению к патогенным бактериям это требование является само собой разумеющимся, тогда как к животным паразитам человека нередко проявляется крайне «легкое» отношение, и в медицинской печати проскальзывают иногда грубые ошибки, как, например, отнесение инфузории Balantidium или кишечных биченосцев к ... глистам. Более того, протозоологическое лабораторное исследование фекалий не сделалось еще обязательным методом диагностики кишечных и других болезней. Поэтому бывают такие парадоксальные случаи, когда в лечебном учреждении полгода безуспешно лечат сульфамидными препаратами упорную дизентерию, которая на деле является амебной, излечиваемой ятреном, или засылают больных амебной дизентерией в Ессентуки, что абсолютно бесполезно и т. д. Причина таких «клякс» на общем фоне мощного развития советской медицины зависит прежде всего от отсутствия преподавания паразитологии в медицинских институтах.
Длительная практика нашей научно-исследовательской и преподавательской работы в области паразитологии неоднократно убеждала нас в наличии прискорбных результатов такого разрыва между зоологической и медицинской сторонами паразитологии. Этот разрыв должен быть устранен для полного успеха практического приложения паразитологии. Зоологические методы систематического, биологического и экологического изучения животных паразитов человека в пределах необходимой меры должны войти в обиход повседневной работы паразитолога. Говоря другими словами, необходимо уменье пользоваться зоологическими определителями. Равным образом и зоологи-систематики и биологи не должны чуждаться паразитов как «медицинских» объектов, ибо систематика комаров, москитов, вшей и есть такая же «настоящая» систематика, как, например, классификация оболочниковых, иглокожих или кишечнополостных; изучение же биологии хотя бы вшей человека эквивалентно исследованию жизни свободно живущих насекомых.
Бурный рост паразитологии в СССР уже привел к комплексирова-нию таких проблем, как профилактика чумы или малярии или некоторых тропических болезней. Однако этот плодотворный и методологически правильный синтез биологического и медицинского направлений в исследовательской и в практической работе еще не получил всеобщего применения, особенно в повседневной диагностике инвазионных болезней.
Тридцатисемилетняя практика нашей преподавательской работы в Военно-медицинской академии (последнее время на всех факультетах), в Институте прикладной зоологии и фитопатологии и на различных курсах дала нам возможность рационально дифференцировать лекционную и практическую часть курса паразитологии и подобрать комплект объектов для практического усвоения основ паразитологии применительно к фауне Советского Союза. Параллельно велась работа и над составлением учебника и различных пособий по паразитологии и ее отдельным частям. Совершенно необходимой стороной преподавания паразитологии является практическое изучение необходимого круга паразитов на конкретном материале с параллельным усвоением зооло
7
гических методов исследования паразитов и паразитолого-диагностических приемов при инвазионных болезнях. Однако практика работы с паразитами распространяется от больного в ближайшее окружение его жилья и в поле. Представление об этой последней работе (обследование среды) также должно быть дано. в практической части курса паразитологии, равно как и понятие о характере обработки накопившихся при обследовательской работе анкетных и иных материалов.
В этом именно комплексе и спроектирован нами план предлагаемого практикума медицинской паразитологии. Следует подчеркнуть, что план этот и его конкретное содержание продиктованы и корригированы длительным опытом преподавания, что делает проведение его реально осуществимым и жизненным. Книга наша является оригинальной, ибо она родилась из опыта нашей работы, тем более, что аналогичных (по компоновке материала и детализации) изданий, охватывающих основы практического изучения паразитологии в ее трех ветвях (протозоология, гельминтология и арахноэнтомология), в литературе нам обнаружить не удалось, несмотря на значительное количество пособий этого рода, вышедших во Франции, Англии, США и других странах.
Преподавание паразитологии в медицинских институтах Советского Союза еще не достигло требуемого положения. Сделана была попытка связать его полностью с преподаванием курса обшей биологии;, но это не решало давно назревшей задачи. Понять и оценить и освоить на первом курсе медицинского института значение паразитологии для лечебной и профилактической медицины нельзя; для этого необходимо иметь представление об общемедицинских науках (общая патология, микробиология и др.). Поэтому освоение требуемых знаний по паразитологии раздваивается. В зоологической части общей биологии и в ее практикуме сведения о паразитах сообщаются как о животных, занимающих известное положение среди представителей фауны страны. Более специальные сведения, характеризующие паразитов как прямо и косвенно патогенных животных, целесообразно и необходимо сообщать на специальном курсе паразитологии, проводимом не ранее второго семестра третьего курса, и во всяком случае не позднее (лучше ранее) курса эпидемиологии. В таком распорядке преподавание микробиологии (учение о патогенных микробах) и паразитологии (учение о патогенных животных) являлось бы кардинальным устоем для преподавания эпидемиологии. Необходимо также помнить о прямой связи паразитологии с диагностикой паразитарных болезней, а также с гигиеной (обследование внешней среды на паразитов и переносчиков возбудителей болезней) и с общепрофилактическим направлением советской медицины.
ОБЩАЯ ЧАСТЬ
МЕТОД ПОЛНОГО СБОРА ПАРАЗИТОВ
Полное паразитологическое вскрытие имеет конечной целью последующее выявление всех видов паразитов исследуемого хозяина, для чего их надо прежде всего собрать. Этот метод имеет громадное теоретическое и практическое значение. Часто хозяева бывают заражены многими видами паразитов, причем несколько видов их бывает в одном и том же органе (например, в кишечнике). Помимо обилия разнообразного материала, полное вскрытие обеспечивает накопление данных о паразитоценозах, т. е. о «сообществе» паразитов в разных органах, а также о влиянии одних членов паразитоценоза на других и всего паризитоценоза в целом на организм хозяина Ч Между тем в современной паразитологии, особенно при тенденциях разрыва ее по трем типам паразитов (протозоология, гельминтология и арахноэнтомоло-гия), болезненное состояние хозяина нередко приписывается одному какому-либо паразиту, без учета возможности наличия у того же самого хозяина других не безразличных для него паразитов (например, одновременное паразитирование глистов и патогенных простейших в кишечнике человека).
Более того, выявление сочленов паразитоценозов должно распространяться и на бактерий, грибков и других микроорганизмов растительной природы как патогенных, так и безвредных для организма хозяина. Среди последних могут оказаться виды, ослабляющие или полностью снимающие действие заведомо болезнетворного микроба, являющегося признанным возбудителем соответственной инфекционной болезни, и, наоборот, могут оказаться сочлены паразитоценоза, усиливающие действие возбудителя болезни. Все это имеет крупнейшее значение для объяснения причин различного течения инфекционной болезни от бессимптомного бактерионосительства до тяжелых форм проявления заболевания.
Полное паразитологическое вскрытие должно обеспечить сбор паразитов всех типов, т. е. простейших, червей и членистоногих, во всех органах хозяина, начиная с поверхности его кожных покровов. К этому при специальных исследованиях паразитоценозов необходимо добавлять и одновременное бактериологическое исследование, производимое специалистом. Для примера опишем полное вскрытие мелкого млекопитающего— грызуна (крысы, суслика и др.). Вся процедура распадается на два этапа работы: 1) сбор наружных паразитов и взятие крови и 2) самое вскрытие для добывания внутренних паразитов.
1 Е. Н. Павловский. Организм как среда обитания. Природа, № 1, 1934.
9
СБОР НАРУЖНЫХ ПАРАЗИТОВ И ВЗЯТИЕ КРОВИ
С пойманного для вскрытия животного можно собирать эктопаразитов, находящихся в «сцепленном» с хозяином состоянии. Однако связь эктопаразитов с хозяином может носить различный характер: например, взрослые блохи быстро двигаются в шерсти животного и легко его оставляют, тогда как вши менее подвижны и постоянно живут на теле хозяина. При поимке животного необходимо обеспечить сохранность всех его наружных паразитов. Для этого сбор их делают по возможности тотчас после поимки хозяина, главным образом с целью своевременного вылова блох.
Способы сбора несколько варьируют в зависимости от величины хозяина. Если убито животное больших размеров, то в разных местах его тела раздвигают пинцетом или раздувают шерсть, разыскивают оживленно передвигающихся блох и вылавливают их, притрагиваясь кисточкой, смоченной хлороформом, спиртом или бензином. Мелких животных, как в нашем случае, кладут в прочно завязывающийся мешочек из плотной белой материи. Добычу приносят в лабораторию, пускают в мешочек несколько капель бензина или хлороформа (или серного эфира). Через некоторое время грызуна вынимают, стряхивают отпавших паразитов в белую ванночку, кисточкой собирают их и пинцетом «вычесывают» паразитов, оставшихся в шерсти хозяина. Собирать блох следует возможно скорее после смерти хозяина, чтобы они не успели разбежаться. С грызунов, выгнанных из нор заливанием водой, сбор должен производиться на месте, так как блохи убегают с живых и мокрых животных. При отсутствии анестезирующих веществ животных убивают уколом в мозг, сворачиванием головы, удушением и другими способами. Труп кладут в воронку подходящих размеров, под которую ставят баночку с водой или консервирующей жидкостью. Между трупом и воронкой должно оставаться пространство, чтобы блохи могли скатываться вниз и падать в баночку. Убитое животное более крупных размеров можно также подвесить над тазом с водой и собирать упавших с него блох.
Особенно важны сборы блох с различных грызунов. Блох собирают также в жилье человека (в платье), под кошмами, в логовах животных, в мусоре и подстилке нор, в гнездах и тому подобных местах. Прыгающих блох захватывают мокрой кисточкой и переносят в консервирующую жидкость — в 70° спирт или водный раствор формалина (1 часть на 10 частей воды). В крайнем случае блохи могут быть разложены на слой ваты и высушены (в коробке из-под папирос). Вату с блохами сверху прикрывают листком белой бумаги, на котором пишут паспортные сведения (см. ниже). Необходимо собирать всех встречающихся блох. С одного экземпляра хозяина эктопаразитов надо класть по дневнику вскрытия под общим номером хозяина в отдельную посуду: пробирку, склянку, баночку и т. п. Каждый такой сбор должен сопровождаться паспортом (этикеткой): на полоске плотной бумаги четко пишут мягким карандашом сведения: где, когда, с кого и кем сняты блохи.
Образцы записей („паспортные* сведения)
Полный сбор № 1	Полный сбор № 1
Блохи с ежа из леса	Блохи с пасюка
27/VII 1923 г.	1/VII 1946 г.
Княжий двор Новгородской обл.	Лнгр., Нижегородская ул., 10, кв 1.
Павловский	И. Петров
10
По снятии блох берут кровь на мазки и на толстую каплю, если это можно сделать по состоянию тушки животного. Отрезают кончик хвоста или прокалывают ухо. Выступившую каплю стирают и выдавли* вают другую каплю, из которой приготовляют несколько мазков (обработку см. стр. 35), затем в таком же порядке делают препараты толстой капли (стр. 36).
Далее продолжают поиски эктопаразитов; раздвигают пинцетом шерсть в разных местах тела и разыскивают вшей и власоедов, которых выбирают пинцетом и кладут в 70° спирт. Их удобно брать на кончик малого скальпеля, смоченного спиртом. Одновременно ищут и клещей. Могут быть гамазовые клещи, искодовые и другие (личинки, нимфы и взрослые). Клещи сидят свободно, или же хоботок их погружен в кожные покровы. В последнем случае клеща снимают осторожным потягиванием пинцетом, чтобы не деформировать его тело и не оторвать хоботок. Кроме того, вырезают кусочки кожи и подкожной ткани с прикрепившимися к ним клещами. Эти кусочки растягивают горизонтально и фиксируют в 5% водном растворе формальдегида для последующего исследования на гистологических срезах. Вырывают пинцетом и волосы, на которые приклеены яйца (гниды) вшей и власоедов.
Материал раскладывают в часовые стекла с 70° спиртом, мелкие пробирки или материальные баночки с соответствующими этикетками. Лучше сразу под лупой рассортировать клещей, блох и власоедов и разложить их по разным вместилищам.
В заключение осматривают покровы — нет ли мест с выпадающей шерстью или с наслоением ороговевших частей эпидермиса. Если таковые места есть, то с них счищают корочки и кладут их в 70° спирт (возможно присутствие чесоточных клещей).
Собирание наружных паразитов имеет громадное значение, ибо среди них могут оказаться переносчики возбудителей паразитарных и инфекционных болезней, как, например, блохи — переносчики чумы, гамазовые клещи — предполагаемые переносчики вируса инфекционного нефрозонефрита, аргасовые клещи (Ornithodorus) — переносчики клещевого возвратного тифа, иксодовые клещи (Dermacentor, Rhlplcepha-lus) — переносчики туляремии, риккетсиозов и др.1
ВСКРЫТИЕ И ФИКСИРОВАНИЕ
Грызуна привязывают брюхом кверху за растянутые ноги к доске для вскрытия. Разрез кожи делают по средней линии тела; лоскуты кожи отпрепаровывают возможно шире, осматривают подкожную клетчатку; вырезают несколько кусочков мышц из разных мест тела для исследования на трихин и на саркоспоридий. Вскрывают брюшную и грудную полости и делают общий осмотр органов (в печени у крыс могут быть белые участки — капсулированные финки цепеня). Перевязывают лигатурой пищевод и заднюю кишку перед самым анальным отверстием. Ножницами перерезают пищевод кпереди от лигатуры и заднюю кишку позади лигатуры. Извлекают весь пищеварительный аппарат и кладут его в фотографическую кювету. Освободив петли кишок от брыжейки, начинают их вскрытие сзади, вводя ветвь ножниц
1 Для определения клещей, снятых с грызунов, следует пользоваться книгой: Клещи грызунов фауны СССР, под редакцией Е. Н. Павловского. Изд. АН СССР, 1955.
11
в полость задней кишки. Вскрыв заднюю кишку, осматривают ее содержимое; берут каловые массы в физиологический раствор для последующего отыскания кокцидий,; из содержимого толстых кишок готовят также мазки на простейших и фиксируют горячей жидкостью Шаудина.
Если простым глазом видны какие-либо паразитические черви, то их выбирают пинцетом (нематод кладут в жидкость Барбагалло). Далее все содержимое кишки легко соскабливают шпателем и опускают в цилиндр с водой, где промывают и самую кишку для последующего отыскания паразитов методом декантации (см. ниже). Затем соскабливают скальпелем слизистую оболочку кишки и добытую массу сдавливают между двумя чистыми предметными стеклами (верхнее размерами 10 X 15, нижнее—13X18 см) для просматривания под препаровальной лупой в целях поисков мелких паразитических червей. В случае их присутствия замечают места их нахождения, разнимают стекла и под лупой препаровальной иглой осторожно забирают обнаруженных паразитов, которых кладут в часовое стекло с водой для последующей фиксации.
Таким же образом вскрывают слепую и тонкие кишки и приготовляют мазки из их содержимого. Ножницы всякий раз надо промывать чистой водой и насухо вытирать, чтобы не занести паразитических простейших из других частей вскрываемого кишечника.
Если встречаются паразитические черви, прочно прикрепившиеся к стенке кишки, то вырезают ножницами кусочек кишки и фиксируют его вместе с паразитом для последующего изготовления срезов и рассмотрения патологических изменений тканей.
Желудок вскрывают по большой кривизне и содержимое его выкладывают на стекло для просмотра простым глазом и под лупой. Затем делают соскоб слизистой с последующим ее просмотром. Так же поступают и с пищеводом. Желчный пузырь вскрывают над часовым стеклом или чашкой Петри с водой, со слизистой оболочки делают мазки на простейших и затем обмывают полость пузыря. При наличии паразитов их можно видеть на белом фоне (поставив часовое стекло на бумагу) или под лупой. Если при осмотре печени видны подозрительные места, отличающиеся по цвету и структуре, то их вырезают для фиксации; остальную печень разминают в воде и ищут паразитов методом декантации. Так же поступают и с поджелудочной железой.
Затем извлекают трахею и легкие. Трахею и бронхи вскрывают как можно глубже и с их слизистой делают соскобы. Легкие разрезаются на куски, которые разминаются в воде для последующей декантации.
Далее извлекают почки, мочевой пузырь. Последний вскрывают над чистым часовым стеклом, чтобы можно было под лупой просмотреть выпущенную мочу. Почки разрезают с выпуклого края до лоханок; в последних могут быть паразиты. Паренхиму почек раздавливают в воде для декантации. Так же поступают и с половыми железами, селезенкой, лимфатическими железами.
Сердце и крупные сосуды вскрывают над часовым стеклом и промывают водой для осмотра под лупой.
Освободив вскрываемый объект, поворачивают его спиной кверху, снимают всю кожу и вскрывают головной и спинной мозг. Вынутый мозг разрезают фронтально на тонкие пласты и рассматривают под лупой. Глаза после осмотра век и конъюнктивы вынимают и разрезают для просмотра под лупой и декантации. Наконец разрезают или распиливают носовую полость вдоль и осматривают ее, выскабливая мягкие части для исследования между сдавливаемыми стеклами. Трубчатые кости разрезают и делают мазки костного мозга.
12
Паразитов из каждого органа кладут в отдельное часовое стекло с временной этикеткой.
Разложенный материал обрабатывают следующими способами. Крупных паразитов отмывают в воде и сразу фиксируют. Смытое в воду содержимое полостных органов (например, различных частей пищеварительного канала) переливают в стеклянный цилиндр или в пробирку (смотря по количеству), доливают водой и, закрыв чистой пробкой, опрокидывают несколько раз, после чего дают отстояться; когда все тяжелые частицы осядут на дно, мутную жидкость осторожно сливают или отсасывают пипеткой,; доливают свежей воды и повторяют указанные процедуры несколько раз подряд, пока вода не станет чистой. Ее сливают, а осадок со дна просматривают под лупой в чашке Петри, всех замеченных паразитов извлекают и фиксируют (способ декантации). Так же поступают и с раздавленными органами.
Нематод фиксируют в жидкости Барбагалло (к физиологическому раствору поваренной соли — 97 частей — добавляют продажного формалина— 3 части). Сосальщиков и небольших ленточных червей, промыв в воде, укладывают на предметное или более крупное стекло и расправляют. Затем накладывают сверху другое стекло для некоторого сдавливания объекта, иногда кладут на стекло добавочный груз в виде гирек. Все это проделывают в чашке Петри или в ванночке, куда наливают 70° спирт для фиксирования объектов. Через сутки плоских червей освобождают из-под груза и кладут в 70° спирт. Нематод сохраняют в жидкости Барбагалло.
Все объекты, добытые от животного при полном сборе паразитов, снабжают этикетками с указанием номера вскрытого животного, места его нахождения, времени вскрытия, органа, откуда взяты паразиты, с упоминанием, что сбор был полный, и фамилией вскрывавшего. Под этим номером ведут общую запись вскрытия в дневнике работ.
Инструменты и принадлежности для полного сбора паразитов
1.	Банка емкостью 1 л или более с пробкой для хлороформирования небольших грызунов.
2.	Фарфоровая фотографическая ванночка 18 X 24 см.
3.	Доска для вскрытия с четырьмя вбитыми гвоздями.
4.	Пинцет тонкий.
5.	Кисточка акварельная № 2 или № 3.
6.	Частый гребень.
7.	Плоскодонные пробирки 1 X 4 см.
8.	Вата гигроскопическая.
9.	Банки материальные мелкие (25 мл).
10.	Банки материальные средней величины (100, 250 мл).
11.	Часовые стекла 7,5 см диаметром и солонки с крышечками.
12.	Инструменты для вскрытия: ножницы прямые, крепкие, пинцет анатомический, скальпели средний и малый.
13.	Кюветки фотографические малые 9X12 см.
14.	Прямоугольные куски стекла 10 X 15 см.
15.	Чистые предметные стекла.
16.	Чистые покровные стекла 18 X 18 мм.
17.	Чашки Петри.
18.	Пипетки глазные и с шариком.
19.	Ярлыки, плотная бумага, мягкий (не химический) карандаш.
20.	Хлороформ.
21.	Жидкость Барбагалло.
22.	Спирт 70°.
23.	Жидкость Шаудина.
24.	5% водный формалин.
25.	Тетрадь для записи.
13
ЛИТЕРАТУРА
Б ы х о в с к а я-П а в ловска я И. Е. Паразитологическое исследование рыб. Изд. АН СССР, 1952.
Догель В А. Проблемы исследования паразитологии рыб. Тр. Лен. об-ва естество-испыт., т. 62, в. 3, 1953.
Дубинина М. Н. Паразитологическое исследование птиц. Изд. АН СССР, 1955. Засухин Д. Н. и Колпакова С. Н. О методах учета эктопаразитов. Вести, микробиол., эпидемиол. и паразитол., т. 13, № 2, 1934.
Павловский Е. Н. Наставление к собиранию и исследованию блох (Aphaniptera). Изд. Зоолог, музея АН СССР, 1927.
Павловский Е. Н. Наставление к собиранию и исследованию клещей (Ixodoidea). Изд. Зоолог, музея АН СССР, 1928.
Павловский Е. Н. Методы учета наружных паразитов и переносчиков возбудителей заразных болезней домашних животных. Сельколхозгиз, М.—Л., 1931.
Павловский Е. Н. Методы изучения кровососущих комаров. Изд. АН СССР, 1935.
Рихтер А. А. Наставление по сбору насекомых. Изд. АН СССР, 1950.
Скрябин К. И. Метод полных гельминтологических вскрытий позвоночных, включая человека. М., 1928.
ОБЩИЕ ДАННЫЕ ПО ТЕХНИКЕ ИЗГОТОВЛЕНИЯ ПРОСТЕЙШИХ МИКРОСКОПИЧЕСКИХ И МУЗЕЙНЫХ
ПРЕПАРАТОВ
В этой главе даны основные сведения по общей технике изготовления микроскопических препаратов. Особенности техники, касающиеся обработки тех или иных отдельных объектов, указываются в соответственных главах текста.
Препараты делаются из консервированного материала, из сухих или реже из живых объектов. Обычной консервирующей жидкостью является 70° спирт, можно применять 5% водный формалин, но объекты в нем сильно затвердевают. Собранные живые объекты помещают в баночку со спиртом, который раз в 50 должен превышать объем объекта. Через сутки, если ткани объекта были сочными, спирт сменяют. Из консервированного таким способом материала изготовляют тотальные препараты без окраски, с окраской и обработанные едким кали. По мере надобности приготовляют также препараты из отдельных частей паразитов. Объекты заключают в канадский (пихтовый) бальзам, в гуммиарабиковые смеси или в глицерин-желатину.
Порядок последовательности этапов при разных способах обработки живого материала: 1
I.	Фиксирование — обезвоживание — просветление — заключение в канадский бальзам.
II	Фиксирование — отмывка в воде — гуммиарабиковая смесь.
III.	Фиксирование — отмывка в воде — глицерин — глицерин-жела-тина.
IV.	Живой объект — гуммиарабиковая смесь.
Для занятий запасают консервированный материал, из которого заранее приготовляют необходимое количество постоянных препаратов. Препараты каждого названия кладут в отдельную папку; чтобы после занятий было легче рассортировать перемешанные препараты, каждую серию их помечают значком из цветной бумаги (квадрат, треугольник,
1 Если работа идет с ранее фиксированным (консервированным) материалом, то в указанном выше порядке обработки материала фиксирование отпадает и изготовление препаратов начинают со следующего пункта.
14
полоска и т. д.), который и наклеивают на соответствующую папку. Так как препараты на занятиях нередко давят, то для облегчения их замены (если ремонт в виде перемены раздавленного покровного стекла на новое невозможен) запасают соответственный материал, доводя его до гвоздичного масла (просветление), в котором и сохраняют объекты (вшей, блох и др.) неограниченно долгое время. По мере надобности берут из масла объекты и заключают их в канадский бальзам. Препараты должны быть хорошо высушены, чтобы бальзам затвердел, и только в таком виде их можно давать в руки учащимся.
Тотальные препараты следует хранить в горизонтальном положении (не на ребре!) в коробках или в открытых папках, вдвигаемых в пазы специального шкафа. В противном случае с течением времени препарат может опуститься к краю покровного стекла.
ИЗГОТОВЛЕНИЕ ТОТАЛЬНЫХ МОРФОЛОГИЧЕСКИХ ПРЕПАРАТОВ ЧЛЕНИСТОНОГИХ
Без обработки едким кали. Для изучения наружной морфологии и определения насекомых и клещей необходимо приготовлять тотальные препараты самих членистоногих (взрослых, личинок и нимф) и отдельных частей их тела (ротовых органов, ног, крыльев, наружных половых органов и др.). Работа ведется: 1) на свежем материале, 2) на консервированном спиртом материале и 3) на сухих членистоногих и их шкурках. В качестве среды, в которую заключают препараты, употребляются: канадский или пихтовый бальзам, глицерин-желатина и гуммиарабиковые смеси, кроме того некоторые препараты могут сохраняться и сухими под покровными стеклами.
Заключению в канадский бальзам предшествуют: проведение через спирты (последовательное обезвоживание), вплоть до абсолютного, спирта, просветление гвоздичным маслом или проведение через ксилол (стр. 27). Бальзамные препараты очень прочны; к недостаткам их относится слишком сильное просветление некоторых тонких деталей, другие же детали, наоборот, видны очень хорошо. При изготовлении препаратов из цельных членистоногих необходимо прокалывать объект (не нарушая его внешнего вида) в одном или в нескольких местах острой иглой, чтобы дать спиртам и просветляющему реактиву доступ внутрь объекта. Иначе препараты в бальзаме со временем почернеют. Для исправления такого препарата бальзам растворяют в ксилоле, объект снова обезвоживают в 96° или абсолютном спирте (прокол хитина), проводят опять через гвоздичное масло или ксилол и заключают в бальзам.
Гуммиарабиковые смеси очень хороши для изготовления препаратов из личинок, нимф, частей тела многих членистоногих и их хитиновых покровов. Применяют смесь по следующей формуле: дистиллированной воды 50 мл, глицерина 20 мл, гуммиарабика 40 г, хлоралгидрата 50 мл, кокаина 0,5 г. Сначала растворяют в воде гуммиарабик, прибавляют хлоралгидрат и кокаин; по растворении добавляют глицерин; дают отстояться, если нужно, то фильтруют. Гуммиарабик берется в виде белого порошка. Спиртовые препараты перед заключением их в гуммиарабиковые смеси выдерживают в воде. Эти смеси умеренно просветляют препарат, все детали которого выступают весьма ясно. Пригодна также лактофеноловая смесь: кристаллического фенола (Ac. carbolicum) 1 г, молочной кислоты 1 г, глицерина 2 г, воды 1 г. Препарат переносят в эту смесь из воды или из спирта. Однако смесь эта не затвердевает;.
15
поэтому требуется наружное закрепление покровного стекла на предметном стекле.
Для приготовления глицерин-желатины растворяют 10 г листовой белой желатины на водяной бане или в горячей воде (100 мл), к раствору добавляют 25 мл глицерина и несколько капель карболовой кислоты. Все хорошо перемешивают и сохраняют в баночках с корковыми пробками. Препараты из воды или глицерина кладут на предметное стекло. На покровное стекло помещают кусочек глицерин-желатины и, держа его высоко над пламенем спиртовки, медленно расплавляют, следя, чтобы не образовывалось пузырей. Когда масса прогреется и станет жидкой, стекло быстро переворачивают на другую сторону и опускают каплю желатины на самый препарат (также предварительно подогретый), лежащий на предметном стекле. Слегка придавливают покровное стекло (если это нужно) и дают препарату застыть.
Некоторое неудобство упомянутых смесей (кроме бальзама)—это сохранение остающихся в них пузырьков воздуха. Гуммиарабиковые смеси подсыхают, что укрепляет покровное стекло. Лактофеноловые и глицерин-желатиновые препараты следует обводить по краям менделеевской замазкой, асфальтовым или железным лаком.
Расчленение свежего, а также спиртового материала производится в воде препаровальными иглами, копьевидной и лопатовидной иглами. Мелкие объекты безопаснее расчленять на том же предметном стекле, на котором будет приготовлен постоянный препарат. Необходимо только убрать все посторонние частицы и оставить только то, что нужно.
С вывариванием в едком кали. Сильно упитанные кровью и почерневшие клещи, а также высохшие клещи или насекомые (блохи) с твердым хитином могут быть использованы для препаратов после кипячения их в едком кали. Сухие объекты предварительно размягчают под колпаком на влажном песке с несколькими каплями карболовой кислоты (пока ноги не станут относительно гибкими). Прорезают копьевидной иглой бок тела или весь объект; если объект достаточной величины, его разрезают бритвой на верхнюю и нижнюю половины. Кипячение длится несколько минут. На половину пробирки берут кусочек едкого кали величиною с боб. Раствор легко выплескивается при кипячении, поэтому пробирку в деревянном держателе надо над огнем держать отверстием от себя. В едком кали приходится вываривать и спиртовые объекты, чтобы сделать их более прозрачными для микроскопического исследования. В ряде случаев — для более нежных» объектов — кипячение можно заменить выдерживанием объекта в 5—10% растворе едкого кали в течение суток при комнатной температуре. После вываривания препарат переносят в воду с несколькими каплями уксусной кислоты для нейтрализации щелочи. Затем следует заключение в канадский бальзам (стр. 28) или в гуммиарабиковую смесь.
ИЗГОТОВЛЕНИЕ ГИСТОЛОГИЧЕСКИХ ПРЕПАРАТОВ
ФИКСИРОВАНИЕ ЧЛЕНИСТОНОГИХ ДЛЯ СРЕЗОВ
Фиксирование членистоногих для срезов производится целиком или по отдельным частям тела и органам. В качестве фиксирующих жидкостей применяют:
1.	Жидкость Кар ну а (абсолютный спирт — 60 частей, ледяная уксусная кислота — 10 частей, хлороформ — 30 частей).
16
2.	Жидкость Левена (1% пикриновая кислота в абсолютном или 96° (автор) спирту— 12 частей, хлороформ — 2 части, формалин — 2 части, уксусная кислота— 1 часть).
3.	Жидкость Д ю б о с к а (А — 1 % пикриновая кислота в 90° спирту, Б — 40% формалин, В—ледяная уксусная кислота; перед употреблением смешать: А — 30 частей, Б — 12 частей и В — 3 части).
4.	Жидкость Отке (96° спирт — 60 частей, 40% формалин — 46 частей, ледяная уксусная кислота — 2 части).
5.	Жидкость Фрейлинга (вода — 120 частей, спирт 96° — 60 частей, формалин — 24 части, ледяная уксусная кислота — 4 части).
Фиксирование цельных членистоногих не всегда дает удовлетворительные результаты, так как хитин препятствует проникновению внутрь фиксирующих жидкостей. Фиксирование более крупных клещей целиком производят, впрыскивая живому клещу шприцем внутрь тела фиксирующую жидкость, причем клеща держат большим и указательным пальцами левой руки. Когда от давления жидкости ножки клеща расправятся, его опускают в чашечку с той же фиксирующей жидкостью, после чего извлекают из него иглу шприца. Фиксирование жидкостью Карнуа должно длиться до получаса, при этом лучше через несколько минут отрезать острыми ножницами ноги у их основания. Пикриновыми смесями фиксируют до 12 часов и до суток, в зависимости от величины объекта. Когда он перестанет двигаться в фиксаторе, то лопатовидной иглой отрезают ноги и отсекают в двух местах боковой край тела. Так поступают с более крупными объектами. Блох и вшей фиксируют, разрезав ножницами их тело пополам в области груди или в месте соединения груди с брюшком, или отсекая задний конец брюшка.
Фиксирование производят в широких чашечках, солонках или баночках. Фиксирующая жидкость по объему должна раз в 100 превышать объем объекта. При фиксировании жидкость вытягивает из него воду и раствор становится менее концентрированным, его время от времени перемешивают или заменяют новым, что приходится делать повторно, особенно, например, при фиксировании крупных клещей, кишечник которых переполнен кровью. Бывшую в употреблении жидкость выливают.
После жидкости Карнуа препараты выдерживают в 95° спирте, который сменяют несколько раз для вытягивания уксусной кислоты. 1_:ли материал не сразу идет в заливку, то его через 90° и 85° спирты переносят на хранение в 75° спирт. После жидкости Левена и Дюбоска препараты переносят в 85° спирт, который сменяют несколько раз, по мере его пожелтения. После жидкости Отке препараты промывают в 90° спирте. После жидкости Фрейлинга объект переносят в 70° спирт,
ПОСЛЕДУЮЩАЯ ОБРАБОТКА (УПЛОТНЕНИЕ, ОБЕЗВОЖИВАНИЕ) И ЗАЛИВКА В ПАРАФИН. РАЗМЯГЧЕНИЕ ХИТИНА
Объекты, фиксированные целиком, перед уплотнением в спиртах разрезают острой бритвой поперек или отрезают у них задний сегмент тела. Членистоногих для этого кладут на пробку и придерживают пальцем. Бритву, смоченную спиртом, влекут (как смычок) по объекту, но не давят на него. Уплотнение производят последовательно в 75°, 85° и 95° спиртах, выдерживая препарат часов по 12 в первых двух спиртах и несколько дней — в последнем.
Клещей и насекомых с крепким хитином обрабатывают диафано-лом, служащим для размягчения хитина. Уплотненных в спиртах клещей обмывают 63° спиртом и переносят в банку коричневого стекла
2 Зак. 3420, Лабораторный практикум медицинской паразитологии.	17
с диафанолом; время от времени пробуют иглой крепость хитина. Когда хитин станет мягким, объект переносят в 63° спирт. Если диафанол обесцветился (нормальный цвет его желтоватый), то раствор заменяют свежей порцией. Размягчение хитина длится не менее 12 часов. Далее следует новое уплотнение в спиртах и заливка в парафин через хлороформ.
После уплотнения объекта в спиртах возрастающей крепости его обезвоживают в диализаторе с 100° алкоголем, «абсолютность» которого поддерживается химически чистым медным купоросом, обожженным до белого цвета на спиртовой горелке. Белый порошок насыпают слоем в сантиметр толщиной на дно диализатора и наливают абсолютный спирт. Когда муть уляжется, диализатор готов к употреблению. Объект кладут во внутренний цилиндр, дно которого затянуто кисеей, марлей или какой-либо сеточной материей. Вода, вытягиваемая спиртом, захватывается медным купоросом, который при этом синеет. Когда синева станет заметна для глаз, насыпают новый слой свежепережженного купороса. Купорос, бывший в диализаторе, не годен для вторичного пережигания. В нем остаются жиры, которые при пережигании пригорают и окрашивают спирт в коричневато-желтый цвет.
Обезвоживание длится 12—24 часа, после чего приступают к заливке объектов в парафин. Обезвоженные препараты быстро переносят в смесь ксилола пополам с абсолютным спиртом или в такую же смесь хлороформа со спиртом. Часа через 3—4 их помещают в чистый ксилол или хлороформ. Когда объекты станут в ксилоле прозрачными (гуанин в ректальном мешке никогда не делается прозрачным) или потонут в хлороформе, их перекладывают в смесь парафина с ксилолом или с хлороформом и ставят на термостат (с внутренней температурой 55—56°) в закрытой чашечке. Часа через 2—3 чашечку открывают и переносят на 30—60 минут внутрь термостата. Затем препараты перекладывают нагретым пинцетом в расплавленный парафин 55—56° плавления. Через полчаса — час объект помещают в чистую порцию парафина и так поступают еще раз, после чего препарат кладут в последнюю порцию парафина и вынимают из термостата для застуживания.
Если объекты малы, то их застуживают на часовом стекле, которое вынимают из термостата и прижимают дном к ладони левой руки. Когда слой парафина у дна застынет, объекты раздвигают нагретой иглой и придают им желательное положение, после чего пускают стекло плавать в ванночку с холодной водой. Когда парафин застынет и сверху, стекло погружают осторожно в воду. Необходимо избегать очень холодной воды и не передерживать в воде остуживаемый материал, так как от холода парафин потрескается, вследствие чего потребуется перезаливка материала. Для снятия парафина со стекла последнее быстро прогревают на спиртовке, чтобы растаял самый нижний слой парафина, после чего пинцетом сдвигают парафиновую массу в ванночку с водой. Более крупных членистоногих заливают в парафин в бумажных промасленных коробочках надлежащих размеров, в которые предварительно на дно наливают парафин. Когда парафин на дне начнет застывать, на него укладывают в порядке объекты и доливают горячий парафин,; коробочку также пускают плавать на воду и погружают в нее. Все процедуры переноса объектов при заливке в парафин должны производиться быстро, чтобы вынутый парафин не успевал застыть. С другой стороны, совершенно необходимо не перегревать парафин выше точки плавления, так как чрезмерно высокая температура портит объекты.
По окончании остуживания препараты осматривают, масса пара
18
фина нигде не должна (ни в самой себе, ни в объекте) содержать беловатых участков; наличие последних говорит за то, что ксилол или хлороформ полностью еще не удалены. Такие препараты резать нельзя. Их надо перезалить, т. е. расплавить парафин в термостате, переложить в одну или две порции чистого парафина, выдержать в термостате 30—60 минут или более, снова заключить в парафин, как только что описано. Если белые пятна имеются под хитином объекта, то полезно соскоблить парафин и острым скальпелем или копьевидной иглой срезать часть хитина над пятном, после чего производят перезаливку указанным выше способом. При этой процедуре препарат надо положить срезанным местом кверху, чтобы облегчить выход из него ксилола и проникновение парафина.
Готовые препараты вырезают из парафина так, чтобы получились блоки, содержащие по 2—3 мм парафиновой каймы кругом препарата. Блоки хранят в пакетах, свернутых подобно аптечным порошкам, или в коробочках. К блокам должна быть положена записка со всеми данными о препарате: что залито, чем фиксировано, через что проведено в парафин и т. д.
ИЗГОТОВЛЕНИЕ И НАКЛЕЙКА СРЕЗОВ
Перед резкой на микротоме парафиновый блок прикрепляют расплавленным парафином к торцу деревянного кубика. По охлаждении блок обрезают скальпелем, чтобы придать ему четырехугольную форму. Вокруг препарата должна остаться кайма парафина Р/г—2 мм шириной. Препарат завинчивают в клемму микротома так, чтобы наибольшая его длина была параллельна острию бритвы. Бритва должна быть острая; ее перед резаньем наводят на ремне.
Хорошо вымытые и вытертые начисто предметные стекла перед резкой запасают в стеклянный цилиндр с крышкой. В зависимости от величины объекта, заранее определяют, какой размер покровных стекол необходимо взять. Наиболее употребителен для серии крупных препаратов размер 24X40 мм; меньшие объекты покрывают стеклами размером 24 X 32 мм,; для срезов отдельных органов можно брать стекла 20X20 мм или даже 18 X 18 мм.
Выбрав размер покровных стекол, на куске плотной бумаги рисуют острым карандашом прямоугольник, точно соответствующий величине покровного стекла. На этот чертеж кладут предметное стекло. При резке срезы должны идти лентой, т. е. каждый новый срез должен приклеиваться к старому и продвигать его вперед. Если срез закручивается, надо его при начале резанья придержать тонкой кисточкой (остерегаться, чтобы волосы кисточки не попали между бритвой и блоком). При следующем срезе надо бритвой ударить о блок чуть сильнее, чтобы произошло склеивание срезов. Если срезы придерживать кисточкой и далее, то лента в конце концов пойдет. Необходимо иметь в виду, что при относительно низкой комнатной температуре срезы не склеиваются в виде ленты. В таком случае надо подвинуть микротом ближе к лампе или горелке.
Середина препарата может крошиться. Это зависит от двух причин: а) в препарате остался ксилол или хлороформ (на блоке видны белесоватые участки), и в таком случае препарат можно попытаться исправить новой заливкой, положив его в чашечку с расплавленным парафином в термостат; б) ткани препарата стали хрупки сами по себе, и в таком случае перезаливка не поможет; можно извлечь кое-что из блока, если, перед каждым срезом наносить на блок коллодий в 0,5% растворе и
2*	19
срез делать после высыхания коллодия. Если в срезе остаются твердые хитиновые части, они могут выламываться бритвой и раздирать срез, ого отчасти можно избежать, зажимая в клемму микротома блок так, чтобы бритва проходила сначала через мягкие и потом уже через твердые части объекта (если структура последнего допускает такую установку). Если лента срезов идет хорошо, ее по мере удлинения срезают скальпелем на плоскости бритвы и по частям переносят на нумерованное предметное стекло. Для наклейки срезов на стекло помещают капельку, величиною с половину булавочной головки, смеси куриного белка пополам с глицерином (и с кусочком тимола, чтобы смесь не портилась при хранении) и равномерно растирают ее мякотью чистого пальца. На белок наносят 2—3 капли дистиллированной воды, которая легко растекается по натертому стеклу.
Срезы переносят кисточкой и иглой на воду и кладут их в порядке строчек книги, поворачивая передний конец ленты (по положению ее на микротоме) на левый край места наклейки. Если при переносе кусочек ленты упал, то его нужно уложить, отличая верхнюю, матовую поверхность среза от нижней, блестящей. Следят также и за тем, чтобы очертания самого объекта на срезах были ориентированы одинаково. При укладке первого ряда срезов ориентируются по чертежу прямоугольника. Длина ряда должна быть на два-три среза меньше длины покровного стекла. Под первым рядом кладут второй и т. д., пока вся площадь, соответствующая размерам покровного стекла, не будет покрыта срезами. Не надо наносить на предметное стекло очень много воды, иначе срезы будут плавать, отталкиваясь друг от друга, и ровно их уложить будет нельзя. Но нельзя брать и мало воды, иначе срезы хорошо не расправятся.
Расправление срезов производят над спиртовой горелкой. Стекло держат высоко, так, чтобы оно заметно прогревалось, но парафин срезов не расплавлялся. Стекло покачивают в направлении его ширины, причем волна воды должна пробегать под срезами. От тепла парафин расправляется, срезы делаются гладкими, и длина каждого ряда срезов увеличивается. Когда все срезы хорошо расправятся, воду отсасывают фильтровальной бумагой, исправляют иглой положение сдвинувшихся рядов и, прикрыв стекло от пыли, кладут его сушиться на теплый термостат (или в термостат с температурой 40°). При медленном подсушивании в условиях комнатной температуры срезы плохо приклеиваются к стеклу. Сушить препарат можно до следующего дня. Если серия срезов обрабатывается дальше не сразу, то предметные стекла завертывают пачкой плотно в чистую бумагу с соответствующей надписью.
ОКРАСКА СРЕЗОВ
Для окраски срезов из них предварительно удаляют парафин и переводят их в воду в следующей последовательности:
а)	растворяют парафин в ксилоле (препарат становится совсем прозрачным), обтирают лишний ксилол мягкой тряпочкой и переносят стекло,
б)	в абсолютный спирт, где срезы белеют,
в)	далее в 96° спирт и, наконец,
г)	в воду; если в воде срезы отлетают, значит они были плохо наклеены.
Из воды препараты переносят в ту или другую краску. Из множества красочных комбинаций в качестве основных можно рекомендовать нижеследующие способы окраски.
20
Г е м а то кс и л и н-э о з и н. Гематоксилин Делафильда. В 400 мл насыщенного водного раствора аммиачных квасцов вливают и размешивают раствор гематоксилина (4 г) в 25 мл абсолютного спирта. Смесь оставляют стоять на свету в открытой банке дня 4, после чего фильтруют. К фильтрату прибавляют по 100 мл метилового спирта и глицерина, перемешивают и хранят в хорошо закупоренной склянке. Красить раствор начинают через 1—2 месяца после изготовления. Эозин растворяют в воде в пропорции 1 : 1000.
При окраске срезов предметное стекло кладут горизонтально на стеклянные палочки, прикрепленные воском или пластилином параллельно друг другу над ванночкой или простоквашницей. На срезы профильтровывают гематоксилин и покачивают стекло, чтобы краска равномерно покрыла срезы. Длительность окрашивания устанавливают на опыте. В зависимости от зрелости краски бывает достаточно 3—5 минут, после чего краску сливают, препарат прополаскивают в воде и затем оставляют в водопроводной воде на несколько часов или до утра, чтобы срезы посинели. Если препарат оказался перекрашенным (гематоксилин должен окрасить только ядра), то стекло быстро проводят через 75° спирт с 0,5—1 % соляной кислотой. Кислота вытягивает лишнюю краску, после чего препарат переносят последовательно в свежие порции водопроводной воды. По окончании окраски на стекло тем же способом фильтруют эозин. Когда срезы покраснеют, эозин сливают и стекло промывают в воде. Если эозин красит плохо, к нему полезно прибавить чуть-чуть уксусной кислоты (например, на конце иглы). Эозин окрашивает фон препарата, т. е. протоплазму, в розовато-красный цвет.
После промывки препарата водой его переносят в цилиндрик с 96° спиртом, где препарат пинцетом двигают вперед и назад. Вытерев со стекла лишний спирт, препарат переносят в абсолютный спирт для обезвоживания (около 1 минуты). Удалив лишний спирт, стекло перекладывают в цилиндрик с ксилолом, где препараты должны просветлиться. Если это достигнуто, то, вынув стекло, на срезы наносят несколько капель чистого ксилола, и, покачав препарат, ксилол сливают. Затем на срезы наносят каплю канадского бальзама и закрывают предварительно вытертым покровным стеклом. Если в ксилоле некоторые места срезов оказались белесоватыми (под микроскопом — черными), то это значит, что в них осталась вода (см. выше о гуанине). Препарат переносят снова в абсолютный спирт, ксилол и бальзам. При недостатке абсолютного спирта, его можно опустить, перенося препараты прямо из 96° спирта в карбол-ксилол. Когда препарат просветлится, его переносят в чистый ксилол и заключают в канадский бальзам. Карбол-ксилол годен также при окраске железным гематоксилином, но не анилиновыми красками.
Железный гематоксилин Гейденгайна. Приготовление:
1.	Основной раствор краски: 1 г кристаллического гематоксилина растворить в 10 мл абсолютного алкоголя.
2.	10 мл основного раствора вылить в 90 мл дистиллированной воды и оставить в открытой посуде созревать недели три.
3.	Протравой является 1% раствор железоаммиачных квасцов (ferrum ammonium sulfuricum); для растворения годны только фиолетовые (не выветрившиеся) кристаллы.
Способ окраски:
1.	Стекло со срезами из воды переносят в протраву на 4—6— 12 часов.
2.	Быстро ополаскивают дистиллированной водой.
21
3.	Стекло кладут в раствор краски на 12—24 часа (срезы чернеют) „ 4. Стекло перекладывают в сосуд со сменяемой простой водой на полчаса.
5. Стекло срезами кверху кладут в чашечку Петри с протравой, которую для облегчения контроля окраски можно развести вдвое водой. Наблюдают за окраской препарата под микроскопом при слабом увеличении,; протоплазма должна приобрести гравюрный оттенок; на ее фоне ядра вырисовываются ясно.
6. На 1 час стекло кладут в проточную воду.
Далее — спирты и ксилол, как выше.
Если препарат очень открашен, его опять помещают в краску и снова дифференцируют в протраве.
Очень прочная и красивая окраска, выявляющая тонкие детали строения ядра.
Краска Романовского-Гимза. Готовый раствор держат в тепле (16—17°). Перед употреблением растворяют в пропорции: одну каплю краски на 1 мл дистиллированной воды. Смесь наливают в цилиндрик, куда стоймя опускают препарат, вынутый из дистиллированной воды, или в чашку Петри, укладывая препарат срезом вниз на палочки и подливая под него краску, чтобы избежать осаждения ее на срезы. Красят 12—24 часа. Стекло споласкивают в дистиллированной воде и переносят в цилиндр с 96° спиртом для дифференцировки. Покачивают стекло, и, когда краска будет вытянута из протоплазмы (установить опытом и быстрым контролем под микроскопом), срезы переносят в 100° спирт для обезвоживания (74—4z минуты); затем — ксилол и бальзам. Ядра — голубые, протоплазма — розовая. Если протоплазма не принимает розовой окраски, то в раствор краски прибавляют на кончике иглы ледяную уксусную кислоту. Краска в обыкновенном бальзаме со временем выцветает. Перекраска выцветших препаратов возможна после растворения канадского бальзама в ксилоле и проведения препарата через 100° и 95° спирты в воду. При окраске серии срезов на стекле обычно не удается все срезы дифференцировать в одинаковой мере.
Крезил-эхтвиолет. Очень хорошая ядерная краска, дающая метахромазию. В качестве основного раствора приготовляют насыщенный раствор в 96° спирту. Перед употреблением 17г части его смешивают с 10 частями анилиновой воды (в пробирку на 2/з наливают дистиллированную воду и добавляют 10 капель анилина, закрыв пальцем пробирку, сильно встряхивают много раз, затем фильтруют через влажный фильтр). Метахромазия в спирту пропадает; чтобы ее сохранить, препарат после промывания в воде заключают в сироп из левулезы (10 г левулезы растворяют в 8 мл горячей дистиллированной воды). Быстро дифференцированные 96° спиртом и заключенные в канадский бальзам препараты дают очень хорошую картину. Дополнительной окраски для протоплазмы не требуется. Препарат в левулезе обводят кантом из асфальтового лака или менделеевской замазки.
Полихромная метиленовая синька по У н н а. 1. Готовым (покупным) раствором краски препарат красят минут пять и споласкивают водой. На препарат наливают 33% раствор таннина в воде на 1 минуту и покачивают его. Далее промывка в воде, дифференцирование 96° спиртом, 100° спирт, просветление.
2. Красят срезы готовым раствором минут 10. Слив краску, препарат переносят в чашечку Петри с глицерино-эфирной смесью (покупается готовой), прибавив ее к воде до цвета портвейна. Чашечку покачивают. Когда краска будет более или менее вытянута из прото*
22
плазмы, препарат промывают водой, быстро дифференцируют в 96® спирту, обезвоживают в 100° спирту и через ксилол переводят в канадский бальзам.
Окраска по Манн-Голанду. Водные растворы эозина 0,8% —33 части, метиленовой синьки 1% — 19 частей, лихтгрюна 1% — 8 частей.
В смеси этих красок срезы выдерживают сутки, споласкивают водой и дифференцируют в смеси: 85° спирта 100 мл и пиридина 12 мл.
Далее промывают в 90° спирту и несколько секунд красят в смеси: оранж Г — 0,1 мл, спирт 90° — 50 мл и фосфорно-молибденовой кислоты — 1 мл. Сполоснув водой, быстро проводят через спирт в ксилол. Этот способ дает разнообразную цветовую раскраску тканей у членистоногих.
ИЗГОТОВЛЕНИЕ АНАТОМИЧЕСКИХ ПРЕПАРАТОВ
ОБЩИЕ ПРАВИЛА ВСКРЫТИЯ МЕЛКИХ НАСЕКОМЫХ И КЛЕЩЕЙ
Препаровка (вскрытие) различных паразитических членистоногих
в основных деталях описывается в соответствующих главах специаль
ной части практикума. Здесь же излагаются общие правила вскрытия. Препаровка паразитов имеет значение как метод наглядного изучения их анатомического строения, в особенности, если ее сочетать с наклейкой свежих препаратов на предметное стекло по способу Е. Н. Павловского (см. ниже). Выпрепарованные органы с большим удобством могут быть залиты в парафин и порезаны на микротоме для изучения их микроскопического строения.
Весьма разнообразны сферы приложения метода ручной препаровки в экспериментальных работах (см. список литературы): например, при изучении ферментов пищеварительных органов, влияния слюны на кровь (антикоагулины), токсических свойств органов (изготовление экстрактов из выпрепарованных свежих органов), фармакологических особенностей органов (то же), действия токсических начал на покровы и на другие органы человека и животных, установлении наличия заразных начал в органах переносчиков инфекции и инвазии, изучении циркуляции вируса
Рис. 1. Бинокулярный стереоскопический микроскоп МШ.
7 —окуляр; 2 —тубус; 3 — объектив; 4 — кремальера; 5 —зажимной винт; б — штатив;
7 —предметный столик; 8—зеркало; 9—шарнир.
в частности, для определения комаров паразитами малярии
в организме переносчика и механизма осуществляемой им инфекции и инвазии, исследовании над действием отравляющих веществ на насекомых и клещей.
Методика препаровки применяется, процента зараженности малярийных
23
(ооцистный и спорозоитный индексы). Несомненно, что сфера применения метода препаровки будет широко расти, что обеспечит более точное изучение физиологии, фармакологии мелких членистоногих и особенностей их как переносчиков инфекций и инвазий. Поэтому мы горячо рекомендуем введение этого метода в паразитологическую практику.
Общие правила вскрытия сводятся к следующему.
1.	Вскрытие производится под контролем оптических приборов. Наилучшим инструментом является бинокулярный препаровальный микроскоп МШ (рис. 1) или более новая и совершенная модель МБС (рис. 2). В случае отсутствия бинокуляра можно пользоваться любой
Рис. 2. Стереоскопический микроскоп МБС-1.
/ — окуляр, 2—винт для смены увеличений, 3— лампочка, 4 — кремальера, 5 —предметный столик, 6 — винт для поворота отражателя (зеркала), 7 —дополнительное зеркало, 8 — подлокотник, Р —трансформатор.
препаровальной лупой с увеличением от 10 до 20 раз, но препаровка под лупой является технически менее удобной.
2.	Вскрываемый объект должен быть хорошо освещен падающим дневным светом, ибо при таком нормальном освещении легче уловить «физиономию» того или другого органа или ткани. При искусственном освещении требуется большая наметанность глаза для быстрого отличения, скажем, слюнной железы вши от комочка ее жирового тела.
3.	Для вскрытия необходимы следующие инструменты: а) обыкновенные швейные иглы или, лучше, хирургические прямые; б) копьевидная игла; в) предложенная нами модель «лопатовидной препаровальной иглы» (которую можно изготовить, сточив острый край копьевидной иглы); г) мягкий пинцет с возможно более тонкими концами; д) тонкие ножницы; е) узкий шпатель; ж) пипетки с круглым резиновым шариком и шарообразным вздутием и пипетка глазная (рис. 3).
24
спиртом для очистки. При отсутствии
Рис. 3. Принадлежности для препаровки мелких объектов (в частности членистоногих).
/ — лопатовидная препаровальная игла, 2 —способ ее действия, 3 — пипетка с шарообразным вздутием, 4 — обыкновенная препаровальная игла до н после обточки*.
5 — большое предметное стекло с углублением.
Швейные иглы вставляются в металлические иглодержатели. Все иглы должны быть чисты и остры. Перед работой их необходимо отточить, лучше всего на ножном точильном станке. Швейные иглы стачивают с боков так, чтобы исчезла боковая округлая выпуклость у конца иглы и последняя походила на тонкий шпиц. Лучше заготовить сразу запас отточенных игл, чтобы во время работы иметь возможность немедленно заменять легко ломающиеся на концах острые иглы. После отточки игл их протирают 95% точильного станка можно с успехом пользоваться тонким крепким точильным камнем (например, арканзас) или различными сортами наждачной бумаги.
4.	Для вскрытия нужно иметь посуду: часовые стекла 5—7 см диаметром, с уплощенным дном; предметные толстые стекла с вышлифованным углублением (стекла для культуры тканей); чашечки Петри 7,5 см; физиологический раствор и прочие химикалии (см. ниже).
Для вскрытия берется живой или только что убитый эфиром объект и пинцетом опускается на 1 секунду в 96° спирт. Затем его тотчас переносят в чашку с физиологическим раствором и держат в жидкости, пока не утихнут диффузные токи. Этой манипуляцией обычно достигается смачиваемость хитиновой кути
кулы водой, благодаря чему объект тонет в физиологическом растворе. Если это почему-либо не достигнуто, то опускание в спирт повторяют. После этого объект переносят в препаровальную ванночку (часовое стекло и т. п.) с физиологическим раствором поваренной соли.
Самое вскрытие производится при помощи «лопатовидной иглы». Модель автора имеет широкий конец с полукруглым свободным краем (рис. 3,/), в профиль же игла имеет обычный уплощенный вид. Она удобна для работы именно в округлых углублениях (часовое стекло и т. п.), поверхность дна которых имеет кривизну. Надавив иглой на край вскрываемого объекта сверху и покачивая иглой из стороны в сторону, можно отсекать края тела, не производя влекущего движения,, что весьма важно для успеха вскрытия мелких объектов. Копьевидная игла здесь помогает мало, ибо ею нужно резать, как ножом, или же вспарывать кожицу сбоку. При первом приеме насекомое будет смято,-при втором — работа тянется долго и кропотливо.
С помощью лопатовидной иглы дело идет следующим образом. Вскрываемое насекомое придерживают препаровальной иглой (левой рукой) под физиологическим раствором у самого дна часового стекла. Правой рукой берут лопатовидную иглу и, держа ее отвесно, придавливают ею постепенно переднегрудь, чтобы оттеснить внутренние органы
25
кзади. Когда это достигнуто, сильно нажимают иглой и покачивают ею из стороны в сторону, чтобы своим полукруглым острым краем она отсекла голову и часть переднегруди. Затем, перевернув насекомое, таким же способом отсекают боковой кант тела с одной и с другой стороны, подобно тому как машинкой отсекают край конверта при вскрытии письма. Потом двумя препаровальными иглами раздвигают кожные покровы спинки и брюшной стороны тела, той же лопатовидной иглой отсекают их и приступают к препаровке клубка внутренних органов* Последняя состоит в разрывании трахей, удалении долек жирового тела, в расправлении сложенных или спутанных частей органов и др.
НАКЛЕЙКА СВЕЖЕОТПРЕПАРОВАННЫХ ОРГАНОВ НА ПРЕДМЕТНЫЕ СТЕКЛА И ДАЛЬНЕЙШАЯ ИХ ОБРАБОТКА
1.	Чтобы приготовить тотальные препараты, выпрепарованные органы насекомых переносят на шпателе на чистое (обезжиренное) предметное стекло. Мелкие органы можно переносить на плоскости лопатовидной иглы или скальпеля. Во всех случаях переноса шпатель опускают в жидкость, находящуюся в часовом стекле или ванночке, где производилось вскрытие членистоногого, и иглой приводят к нему предварительно расправленный орган, который в случае нужды изгибают (но не перекручивают) так, чтобы он весь уложился на шпателе. При вынимании шпателя орган придерживают иглой, чтобы он не соскользнул вновь в ванночку. Необходимо на шпателе с органом унести и физиологический раствор. Шпатель вынимают возможно более горизонтально, чтобы поверхность его была параллельна поверхности физиологического раствора. На предметное стекло заранее должно быть нанесено несколько капель той же жидкости. Шпатель опускают к краю «лужи» на предметном стекле так, чтобы капли жидкости на шпателе и на предметном стекле соединились друг с другом. Когда это достигнуто, то без труда и риска орган передвигают иглой на предметное стекло и убирают шпатель. Процедура переноса очень важна, так как при небрежности и неосторожности легко порвать с трудом отпре-парованные органы.
2.	Перенесенный орган расправляют иглами и придают его частям симметричное расположение. Если физиологического раствора на стекле так много, что орган в нем плавает или его части принимают нежелательное положение, то жидкость частично отсасывают тонкой пипеткой или узкой треугольной полоской фильтровальной бумаги. Затем следует ответственный момент — раздвигание частей органов иглой так, чтобы они были распластаны горизонтально и чтобы основные органы и части их не лежали друг на друге. Этого не избежать при расправлении многочисленных мальпигиевых сосудов. Яичники иногда приходится оставлять нетронутыми или слегка раздвигать яйцевые трубки. При окончательном расправлении органов к ним докладывают в надлежащем положении оторванные части, если таковые имеются.
3.	По окончании расправления отсасывают фильтровальной бумагой по возможности весь физиологический раствор, не сдвигая при этом частей препарата. Отсасывание следует производить осторожно длинным треугольным кусочком бумаги, так как при сильном всасывании воды мелкий или тонкий препарат может сорваться с места и прилипнуть к фильтровальной бумаге, что губит всю произведенную работу. Необходимо также следить, чтобы на предметном стекле не оставалось волокон или пыли от фильтровальной бумаги.
26
4.	По удалении физиологического раствора препарат фиксируют жидкостью Карнуа, нанося ее по каплям на самый препарат и вокруг него. Следует опасаться, чтобы ударом капли не сдвинуть части препарата с их мест. Из пипетки жидкость Карнуа выталкивается часто сама* Это необходимо иметь в виду, чтобы не сбить препарата. В зависимости от величины последнего берут шарообразную или глазную пипетку. Препарат должен быть весь хорошо покрыт фиксатором. Стекло покачивают для равномерного распределения фиксатора. В зависимости от величины фиксируемого препарата жидкость приходится осторожно сливать и заменять новой. Фиксирование препарата в горизонтальном положении длится от 72 до 5—10 минут, смотря по его толщине и величине. При большой работе полезно завести деревянный треугольник на трех винтах; на него кладут большое стекло, которое выравнивают горизонтально по ватерпасу, подвинчивая ту или другую ножку. На точно расположенное горизонтально стекло кладут фиксирующиеся препараты, в таком положении жидкость с них уже не стекает.
5.	При удачно произведенной работе объект оказывается приставшим к предметному стеклу. По окончании фиксирования с него сливают жидкость, наклонив стекло боком; затем пипеткой наливают на конец стекла 95% спирт так, чтобы он омыл весь препарат. Стекло покачивают, спирт сливают, заменяют новым и так поступают при больших препаратах 2—3 раза.
6.	На препарат наносят несколько капель смеси абсолютного спирта (если его нет, то 96° спирта) с серным эфиром. Слив жидкость, на препарат тотчас наливают 0,25% раствор фотоксилина, коллоксилина или целлоидина; стекло слегка покачивают для того, чтобы раствор покрыл препарат и подтек под все его части.
7.	Препарат оставляют на воздухе до начала загустения пленки (признак: от давления иглой на пленке начинает оставаться след), после чего стекло опускают в 85° спирт, где и оставляют до следующего дня, затем перекладывают в 75° спирт, где и хранят его неограниченное время или же оканчивают его изготовление.
8.	Для окраски тотальных препаратов стекло с пакленными органами перекладывают в воду на 5—30 минут, после чего опускают в квасцовый кармин.
9.	Длительность окраски препарата квасцовым кармином определяют на опыте (часто достаточно 5 минут).
10.	После окраски препарат последовательно проводят через несколько порций воды и оставляют в совершенно чистой воде на срок, пока излишняя краска не вытянется из протоплазмы клеток и ядра не будут хорошо видны. Можно оставить в чистой воде до следующего утра.
11.	Далее следует проведение препарата через 75° и 95° спирты (на 1—6 часов в зависимости от толщины препарата).
12.	Обезвоживание препарата производится в 100° спирту. Срок пребывания в нем препарата необходимо свести до минимума, так как абсолютный спирт растворяет удерживающую органы пленку. Бывает достаточно 1—2—3 часов обезвоживания.
13.	Вынув стекло из абсолютного спирта, его обтирают полотенцем снизу и со свободных краев; внимательно определяют нижнюю сторону стекла, чтобы не стереть наклеенный орган, и тотчас же (не дышать на препарат!) опускают в ксилол до полного просветления, т. е. прозрачности. При обезвоживании 96° спиртом просветление производится в карбол-ксилоле. В препарате нигде не должно оставаться белых мест* Просветление может длиться до нескольких часов. Если белесые места
27
есть, то препарат снова возвращают в абсолютный спирт для вытягивания остатков воды.
14.	Просветленный препарат переносят в чистую порцию ксилола на 10—15 минут, вынимают из цилиндра, обтирают ксилол с краев стекла, кладут на стол, наносят на препарат канадский бальзам (или дамарлак), кладут по бокам препарата ножки из воска, бристольского картона, полосок покровных или предметных стекол (смотря по толщине препарата) и закрывают препарат покровным стеклом. Оставшиеся в бальзаме мелкие пузырьки воздуха рассосутся сами. При усыхании бальзама подбавляют каплю его с краев и чернилами или тушью пишут на свободном конце предметного стекла название препарата. Чтобы надпись ложилась хорошо, предварительно смазывают конец предметного стекла жидким раствором канадского бальзама в ксилоле. Пишут по высохшему концу стекла, сверху надпись быстро покрывают тем же раствором канадского бальзама.
Процедуру заключения в бальзам можно упростить, перенося препарат из 95° спирта в карбол-ксилол (100 мл чистого ксилола + 22 г кристаллической карболовой кислоты) до полного просветления, затем следует порция чистого ксилола и канадский бальзам.
Вышеописанный способ приготовления тотальных препаратов, предложенный Е. Н. Павловским, с одной стороны, дает гарантию сохранения мельчайших препаратов, которые легко потерять в растворе краски и при последующих процедурах, и, с другой стороны, позволяет изготовить красивые цельные препараты из длинных и разветвленных органов в том расположении их, какое желательно для исследования (см. рис. 203).
КОНСЕРВИРОВАНИЕ АНАТОМИЧЕСКОГО МАТЕРИАЛА В ОБЩИХ ЦЕЛЯХ И ДЛЯ ПОСЛЕДУЮЩИХ РАБОТ
Выпрепарованные органы для своего сохранения и дальнейшей обработки должны быть консервированы. Наиболее удобной жидкостью для этой цели является 70% винный или денатурированный (тимолом, бензином, формалином) спирт. Окрашенный спирт для горения не годен для зоологических целей и может быть употреблен разве лишь в случае самой крайней нужды. Спирт, денатурированный прибавлением к нему древесного спирта, при массовом и длительном пользовании вреден для здоровья, так как вдыхаемые пары древесного спирта поступают в тело работающего и могут вызывать легкие явления хронического отравления. Спирт обычно продается 95° крепости, его можно разводить водой в желательных соотношениях. Существуют таблицы для разведения спирта. Они громоздки и едва ли необходимы, так как с полным успехом заменяются мнемонической формулой, которая дает всегда вполне точные результаты.
В общих выражениях формула излагается так. Всякий раз берется столько кубиков спирта исходной крепости, скольких процентов желают получить разведение, и смешивается с водою в количестве (см3), равном разности между процентом начальной крепости и процентом конечного разведения спирта. Количество кубических сантиметров получаемой смеси всегда равняется количеству процента разводимого спирта.
Воду для разбавления спирта предпочтительнее брать дистиллированную. В условиях домашней работы, а также в путешествиях это не всегда возможно делать. В таких случаях пользуются водой речной или дождевой, но не колодезной. Жесткая вода для разведения спирта совершенно непригодна, так как из нее спиртом осаждаются известко-28
вне соли, мутящие раствор и ложащиеся более или менее значительным слоем на дно сосуда и препарат.
Абсолютный спирт является очень важным реактивом, безводность которого следует поддерживать особыми мерами. Для этой цели берут химически чистый медный купорос (cuprum sulfuricum), толкут его кристаллы в ступке и нагревают на газовой или спиртовой горелке в фарфоровой чашке до полного испарения кристаллической воды. По мере прокаливания купорос перемешивают стеклянной палочкой. Постепенно он начинает терять свой синий цвет и белеть, рассыпаясь в порошок. Когда последний станет совершенно белым, нагревание прекращают, иначе купорос начнет пригорать и сереть. Ему дают остыть. Порошок безводного купороса сохраняют в очень хорошо закрывающейся банке. Он чрезвычайно гигроскопичен и, втягивая в себя воду, начинает снова синеть. Этим свойством купороса и пользуются для поддержания безводности абсолютного спирта. Этот спирт применяют для обезвоживания препаратов (см. стр. 27), что удобнее всего делать в особом сосуде, называемом диализатором. Последний состоит из 600—800—1000-граммовой банки с притертым колпаком. В горло банки опускается стеклянный цилиндр, затягиваемый с нижнего открытого конца кисеей и закрываемый стеклянной пробкой с другого конца. На дно сосуда насыпают прокаленный купорос слоем примерно в палец толщины и наливают почти до верху банки, из которой цилиндр вынут, абсолютный спирт. Когда муть совершенно осядет, цилиндр помещают на место, и диализатор готов. Обезвоживаемые препараты помещаются на кисейное дно цилиндра. Вода, вытягиваемая из них спиртом, тотчас поглощается купоросом, который по мере длительности работы диализатора начинает синеть. Когда синева становится заметной, вынимают цилиндр и насыпают новую порцию свежего пережженного купороса. Так поступают несколько раз по мере надобности. Благодаря такому приспособлению диализатор работает с одним и тем же спиртом год и более. В конце концов спирт становится негодным, так как извлекает из препаратов жиры. Упрощенный диализатор можно изготовить и самому из невысокой широкогорлой склянки, на дно которой насыпают пережженный купорос, а сверху кладут кружок из фильтровальной бумаги. Препараты помещают на нее. При подсыпании новой порции купороса кружок следует вынимать.
Смесь абсолютного спирта с эфиром приготовляется также с помощью прокаленного медного купороса, который насыпают на дно склянки, куда наливают в равных количествах смесь абсолютного спирта и абсолютного серного эфира (aether sulfuricus pro narcosi). Склянку несколько раз встряхивают и порошку дают осесть на дно. Склянку следует закрывать корковой плотной пробкой, так как притертую пробку от давления паров эфира иногда выбрасывает из горла. Чтобы того же не случилось и с корковой пробкой, ее время от времени приоткрывают, особенно после встряхивания банки или при нагревании комнаты, для выхода паров эфира. Жидкость по мере надобности осторожно сливают, стараясь не поднять мути со дна склянки, или насасывают во вместительную пипетку.
Формалин при консервировании органов насекомых находит себе меньшее применение, нежели спирт, так как делает препараты хрупкими. Продажный формалин (40% формальдегид) разводят водою в пропорции 1 :30 или 1 :40. Неудобство этого раствора заключается в том, что цельные насекомые не всегда хорошо и быстро им смачиваются, благодаря чему они не тонут в растворе, а плавают на его поверхности (см. выше, стр. 25).
29
Сохранять выпрепарованные органы насекомых, а также их личинок и тому подобный материал приходится в двояких целях. Его можно сохранить вообще впрок или же для дальнейшего микроскопического исследования. Соответствующие способы консервировки и последующее изготовление препаратов из собранного материала рассмотрим порознь.
ИЗГОТОВЛЕНИЕ (МОНТИРОВКА) МАКРОСКОПИЧЕСКИХ ПРЕПАРАТОВ
Анатомические препараты в сухом виде вообще не сохраняются. Удобнее всего выпрепарованные органы или фазы и стадии развития насекомого монтировать фотоксилином на стеклах в стеклянных сосудах. Для указанной работы необходимы посуда, некоторые инструменты и реактивы.
Стеклянная посуда. Наиболее употребительными сосудами являются: а) цилиндры (без горлышка) с притертыми пластинками или стеклянными пробками; б) четырехугольные сосуды с рантом, стеклянной ножкой и притертой крышкой — самые дорогие по сравнению с прочими сортами; в) четырехугольные сосуды для аккумуляторов (без ножки и без ранта)—самый дешевый сорт посуды и г) половинные цилиндры с ножкой и рантом для притертой крышки—самый удобный и экономный в смысле объема и вполне доступный по цене сорт сосудов. Размер потребной посуды определяется сообразно с характером монтируемых препаратов.
Стеклянные пластинки. Препараты наклеиваются на стеклянные пластинки, опущенные в соответствующий сосуд, так, чтобы они по возможности в нем не болтались. Стекло берется прозрачное — молочное или цветное. На прозрачное стекло наклеиваются такие объекты, которые необходимо рассматривать с обеих сторон, а также очень тонкие и нежные анатомические препараты, которые выигрывают, если их смотреть в проходящем свете. Прочие объекты наклеиваются на молочное стекло, дающее наиболее эффектные препараты. Ярко-белые препараты, плохо заметные на молочном стекле, укрепляются на темно-синем или черном стекле. Цветное стекло резать алмазом гораздо труднее, чем стекло простое. Поэтому выгоднее отнести посуду в стекольный магазин и заказать там нарезать для нее пластинки.
Шпатель. Для переноски нежных препаратов нельзя пользоваться пинцетом, так как им легко раздавить и порвать тонкие и нежные органы. В таких случаях применяют шпатель — различной ширины никелированную лопаточку на ручке. Чтобы взять какой-нибудь препарат на шпатель, последний подводят под препарат, который расправляют осторожно иглой. Придерживая ее концом орган, вынимают из жидкости шпатель в косом положении и опускают его в другой сосуд или опираются концом шпателя на стекло, на которое предварительно помещено несколько капель спирта или иной жидкости, смотря по надобности. Затем иглой перемещают препарат, одновременно вытаскивая из-под него шпатель, и в конце концов орган оказывается лежащим на стекле, где его и расправляют иглой для придания правильного положения (дальнейшую обработку см. на стр. 31). С другой стороны, шпатель необходим для перенесения объемистых и длинных и тяжелых органов, которые нельзя вынимать пинцетом, так как они порвутся на весу.
Иголки, нитки, трехгранный напильник. Взрослых насекомых куколок, личинок, некоторые биологические объекты можно привязывать нитками к стеклу. Для этого пользуются белыми нитками и обыкновенными швейными иголками, которыми прошивают объект. Концы ниток обвязывают вокруг стекла, предварительно подпилив трехгранным напильником желобки для ниток по острым краям стекла.
Раствор фотоксилина или коллоксилина. Гремучую вату растворяют в смеси равных количеств абсолютного спирта и серного эфира. 0,5—1% раствор фотоксилина сохраняют в хорошо закрывающейся банке, так как спирт и, особенно, эфир чрезвычайно летучи.
Наклейка демонстрационных и музейных спиртовых объектов фотоксилином на стекло производится следующим способом. Моют посуду для монтировки и стеклянную пластинку. Последнюю насухо вытирают и кладут в горизонтальном положении на края фотографической ванночки, на пробки или палочки, чтобы впоследствии удобно можно было приподнять и взять пластинку пальцами, 39
Помещают на середине ее соответствующий препарат, расправляют иглами и пинцетом и поливают несколькими каплями абсолютного алкоголя. Лишнюю жидкость отсасывают фильтровальной бумагой и пипеткой же наносят на препарат раствор фотоксилина, который должен покрыть весь объект и стечь по его сторонам на стекло. Некоторое время дают фотоксилину подсохнуть (слегка) на воздухе и в горизонтальном же положении осторожно (не тряся стекла) опускают стекло с препаратом на нем в эмалированную стеклянную или фаянсовую* ванночку с 70% спиртом так, чтобы он покрыл препарат. От действия; спирта раствор фотоксилина затвердевает и пленка его крепко удерживает объект на чистом стекле. Теперь стекло можно опустить в вертикальном положении в сосуд с 70% спиртом. Для большей сохранности препарата, который может быть придется передавать из рук в руки для осмотра, следует укрепить стекло с наклеенным препаратом, чтобы оно не болталось. С этой целью вырезают кусочек пробки и с силой, но осторожно, вдавливают его между верхним углом стекла и стенкой сосуда, если имеем дело с цилиндром. В больших четырехугольных сосудах стекло ставится наискось, в полукруглых же сосудах никаких специальных мер для закрепления стекла принимать не приходится. Если препарат со временем отскочит от стекла, его можно починить, поместив снова на сухое и чистое стекло,; полить сначала абсолютным спиртом, расправить, облить фотоксилином и поступать далее так, как только что было описано.
Наклейка формалиновых препаратов водным раствором желатины. Общий характер работы тот же, что и с фотоксилином. Отличие состоит в полном отсутствии спирта. Приготовляют густой раствор желатины в воде и обливают им препарат, положенный на сухое стекло. Последнее осторожно опускают в ванночку с водным раствором формалина (1 :40), от действия которого желатина переходит в нерастворимое состояние. Можно формалин наносить по каплям пипеткой и на самый объект. Препараты сохраняются в растворе формалина.
Замазывание посуды с препаратами. Монтированные препараты должны быть герметически закупорены, чтобы избежать испарения жидкости и порчи объекта. Для этой цели пользуются особой замазкой, изготовляемой следующим способом.
Отвешивают 1 часть мелко нарезанного каучука-пара (сырого) и 2—3 части легкоплавкого парафина. Каучук обливают в бутылке скипидаром и ждут, когда он растворится. Раствор выливают в чашку, прибавляют в него парафин и нагревают, помешивая, на легком огне в какой-нибудь металлической посуде, имея под рукой лист железа для покрывания сосуда, если смесь загорится. Нагревание продолжают до тех пор, пока смесь не перестанет пахнуть скипидаром.
Заделка банок и сосудов производится так. Вытирают насухо тряпочкой матовый рант сосуда и крышку или пробку. Разогревают замазку на огне и наносят ее каким-нибудь металлическим инструментом, например негодным скальпелем, на матовую часть крышки или обод притертой пробки. Затем берут крышку пинцетом (удобнее тигельными щипцами) и прогревают ее на газовой горелке или спиртовой лампе до расплавления замазки. Далее, быстрым движением перевертывают крышку на другую сторону, следя за тем, чтобы жидкая замазка не растеклась по ней, накладывают крышку на рант сосуда, крепко прижимают ее, придерживая тряпкой сверху, и ожидают, когда замазка затвердеет, а стекло остынет. Перестать давить на крышку раньше указанного момента нельзя, так как расширяющийся от нагревания воздух пробивает себе путь через жидкую замазку, в которой по застывании
31
остаются проходы, нарушающие герметичность закупорки. Нагретым ножом срезают выступившую по краям крышки замазку, наклеивают ярлык с надписью препарата, и монтировка заканчивается.
ЛИТЕРАТУРА
Вайль С. С. Практическое руководство к патолого-гистологической технике. Л., 1944. Павловский Е. Н. К методике исследования паразитических насекомых и подходящих к ним по величине членистоногих. Вести, микробол. и эпидемиол., т. 3, в. 1—2. 1924.
Павловский Е. Н. и Зарин Э. Я. Материалы к анатомии и физиологии органов пищеварения Arthropoda. Сообщ. 1. О строении пищеварительного аппарата и его ферментах у скорпионов. Рус. физиол. журн., т. 1, в. 3—4, 1918.
Павловский Е. Н. и Соловьев В. Д. О циркуляции вируса весенне-летнего энцефалита в организме клеща-переносчика (Haemaphysalts concinna). Тр. Воен-мед. акад., т. 25, 1941.
Павловский Е. Н. и Штейн А. К. Экспериментальное исследование над действием укуса черного таракана (Periplaneta orientalis) на кожу человека. Паразит, сборн., т. 2, 1931. (Приведен список всех аналогичных по направлению работ авторов с 1923 г.).
Павловский Е. Н., Штейн А. К. и Благовещенский Д. И. Экспериментальные исследования над действием слюны свиных вшей на покровы человека. Паразит, сборн., т. 6, 1936.
Павловский Е. Н., Штейн А. К. и Бычков В. А. Экспериментальное исследование над действием некоторых пищеварительных секретов комнатной мухи (Musca domestica) на кожные покровы человека. Паразит, сборн., т. 3, 1932. Павловский Е. Н., Штейн А. К. и Бычков В. А. Экспериментальные исследования над влиянием слюны личинок синей мясной мухи (Calliphora vomitoria) на покровы человека. Паразит, сборн., т. 4, 1934.
Павловский Е. Н., Штейн А. К. и Олсуфьев Н. Г. Экспериментальное исследование над действием слепней на покровы человека. Паразиты, пеоеносчики и ядовитые животные. Сб. к XXV-летию научн. деят. проф. Е. Н. Павловского, изд. ВИЭМ, 1935.
Павловский Е. Н. и Ходукин Н. И. О некоторых свойствах слюны Ornithodorus papillipes. Мед. мысль Узбекистана, № 7—8, 1928.
Полянский В. И. (ред.) Большой практикум по зоологии беспозвоночных, ч. 1., Л., 1941.
Ромейс Б. Микроскопическая техника. М., 1954.
СПЕЦИАЛЬНАЯ ЧАСТЬ
ПРОСТЕЙШИЕ—ТИП PROTOZOA МАЛЯРИЙНЫЕ ПЛАЗМОДИИ—РОД PLASMODIUM
ПРИГОТОВЛЕНИЕ ПРЕПАРАТОВ
Материал для препаратов
Для изучения малярийных паразитов человека требуются препараты крови больных малярией — мазки и толстые капли. Такие препараты можно заготовить самостоятельно или получить в паразитологических учреждениях и диагностических лабораториях.
В практической работе кровь исследуется на малярийные плазмодии для установления диагноза, при контрольных обследованиях больных малярией, при эпидемиологическом обследовании населения. Последнее проводится: а) в целях определения степени распространения малярии, б) при организации противомалярийных мероприятий, контроле и оценке их эффективности.
Препараты с большим числом паразитов (что необходимо для изучения мазков) могут быть получены только от больных, находящихся в периоде острых проявлений малярии. Но вообще брать кровь у больных только во время озноба или на высоте приступа не обязательно. Распространенное представление о значительном колебании численности паразитов в крови больного по ходу лихорадочных приступов не обосновано; поэтому для распознавания малярии кровь следует брать сразу же при подозрении на это заболевание, по возможности до назначения противомалярийных препаратов, так как уже на второй— третий день лечения число паразитов в крови резко уменьшается. Чтобы получить полное представление о стадиях развития паразитов, встречающихся в крови, желательно иметь серию препаратов, взятых от больных через определенные промежутки времени (например, через каждые 8 часов).
Взятие крови и приготовление препаратов
Заранее надо приготовить иглу, спирт, эфир, гигроскопическую вату, предметные стекла и стекла со шлифованными краями. Большое значение имеет чистота предметных стекол; их кипятят в слабом растворе соды, моют с мылом в теплой воде, длительно промывают в проточной воде и протирают чистым сухим полотенцем. Для приготовления тонких мазков предметные стекла должны быть, кроме того,
3 Зак. 3420. Лабораторный практикум медицинской паразитологии.	33
протерты тряпочкой, смоченной спиртом, или, лучше, выдержаны некоторое время в спирту.
Кровь берется иглой Франка или иглой от шприца. В последнем случае надо пользоваться толстой иглой, имеющей достаточную режущую поверхность. Иглу тщательно протирают спиртом (можно пользоваться формалинизированным или денатурированным спиртом); при массовых исследованиях иглы, во избежание передачи инфекции, перед каждым взятием крови надо обеззараживать погружением их на некоторое время в кипящую воду. Кровь берут из мякоти последней фаланги безымянного или среднего пальца левой руки. Место укола и иглу тщательно протирают спиртом. Брать кровь можно лишь после того, как место укола и игла будут сухими,; быстрое обсушивание достигается тщательным обтиранием ваткой, смоченной эфиром. У иглы Франка регулируют выдвижение лезвия; в зависимости от толщины рогового слоя кожи лезвие иглы выдвигается из обоймы на 1,5—2 мм, затем втягивают лезвие в обойму, плотно прижимают иглу к коже и надавливают на спуск. При пользовании иглой от шприца (ее следует предпочесть при массовом взятии крови) прокол кожи достигается быстрым колющим движением. Если кровь выступает обильно, то сразу приступают к изготовлению препаратов; в противном случае лицо, у которого берется кровь, просят сделать несколько энергичных движений рукой, кистью и слегка массируют палец в направлении к месту укола; иногда приходится сделать укол заново.
При взятии толстых капель палец поворачивают проколом вниз и к выступающим каплям крови подносят предметное стекло. На каждое стекло берут 2—3 капли крови, которые затем иглой (или краем другого стекла) распределяют в виде 2—3 кругов или в виде одной широкой продольной полосы длиной в 3—4 см. Слой крови должен быть достаточно толстым, но не превышать известного предела (после высыхания через слой крови должен быть почти неразличим крупный печатный шрифт),; если слой крови излишне толст, он при высыхании превращается в корочку, легко отстающую от стекла. Тотчас после изготовления толстых капель надо положить стекла на горизонтальную поверхность до полного высыхания, что в зависимости от температуры и влажности длится от получаса до 1,5 часов. Высыхание можно ускорить, поместив стекла в термостат при температуре 30—35°; нагревание выше 50° приводит к неисправимой порче препаратов. Очень важно предохранить толстые капли от загрязнения и запыления, так как это чрезвычайно затрудняет их микроскопирование. Следует помнить, что насекомые (мухи, тараканы) охотно пожирают как влажную, так и подсохшую кровь. Стекла с высохшими каплями надо тотчас сложить в пачки (не более чем по 50 стекол) так, чтобы нижняя поверхность одного препарата соприкасалась с верхней поверхностью другого. Если к окраске тотчас не приступают, стекла надо завернуть в бумагу. При пересылке пачки должны быть перевязаны, чтобы исключить трение одного стекла о другое.
При изготовлении мазков палец повертывают проколом вверх. К выступившей крови прикасаются нижней поверхностью предметного стекла так, чтобы капля, величиной немного больше булавочной головки, оказалась приблизительно на расстоянии 1,5—2 см от его узкого края. Затем стекло повертывают каплей вверх и берут в левую руку. Правой рукой берут предметное стекло со шлифованными краями и узким его краем под углом в 45° касаются капли крови. После того как кровь растечется вдоль края шлифованного стекла, его быстрым равномерным движением продвигают вперед вдоль первого стекла (для того, м
чтобы мазок не доходил до края препарата, у шлифованного стекла надо немного отломать углы). Если от одного больного берется несколько мазков, то, при свертывании выступившей из пальца крови, ее удаляют сухой ватой. Хорошо приготовленный мазок должен быть тонким (рис. 4), эритроциты в нем должны лежать изолированно, не налегая друг на друга. Толстые капли и, особенно, мазки надо готовить быстрой Приготовление мазков требует известной сноровки.
Рис. 4. Удачные и неудачные мазки (по Г. В. ЭпштейнуХ а—удачный мазок; 6 — неудачный мазок (капля крови слишком велика); в —неудачный мазок (мазок толст и широк, взято слишком широкое-стекло для размазывания); г —неудачный мазок (мазок с просветами — стекло плохо обезжирено).
а
Этикетировку препаратов целесообразно отложить до их окончательной обработки. В практической работе, при взятии крови от нескольких больных, препараты необходимо обозначать тотчас после их приготовления. На мазке можно прямо написать фамилию или порядковый номер больного тупой иглой, углом стекла или простым карандашом (лучше на первой половине мазка). Препараты с толстыми каплями можно обозначать восковым карандашом. При пользовании бумажными этикетками кровь надо брать на сторону, противоположную наклейке, чтобы исключить соприкосновение краски с клеем.
Фиксация и окраска мазков крови
Фиксировать мазки надо в день взятия крови или на следующий день. Мазки, длительно сохранявшиеся незафиксированными, окрашиваются плохо. Для фиксации применяются: а) метиловый спирт, б) этиловый 96° спирт, в) смесь Никифорова (абсолютный этиловый спирт и эфир пополам). Целесообразно пользоваться специальными стаканчиками, в которые погружают сразу несколько препаратов на 2—3 минуты. После фиксации мазки должны высохнуть. Окраска мазков может быть отложена на несколько дней; долго хранившиеся препараты могут оказаться вовсе негодными. Наиболее распространена и дает хорошие результаты окраска по Романовскому; обычно пользуются той ее модификацией, которую предложил Гимза. Раствор краски Романовского-Гимза готовится на глицерине и метиловом спирте; красящими компонентами в ней являются азур II и эозин; хранить раствор надо плотно закрытым.
Продажный раствор краски разводят перед употреблением дистиллированной водой (1—2 капли на 1 мл воды) и пипеткой наливают на горизонтально расположенные препараты на 30—40 минут; после этого препараты быстро споласкивают дистиллированной водой и высуши-
3*	3&
вают. Концентрация приготовляемого раствора (число капель на известный объем воды) и продолжительность окрашивания устанавливаются для каждой отдельной серии краски путем предварительных проб. Дистиллированная вода должна иметь нейтральную или слабо щелочную реакцию (pH = 7,0—7,2). Чтобы проверить пригодность для окраски, к 10 мл испытуемой воды прибавляют несколько крупинок гематоксилина. Не ранее одной и не позже пяти минут вода должна окраситься в бледно-фиолетовый цвет. Если эта окраска появляется позже 5 минут — вода имеет кислую реакцию и ее нейтрализуют прибавлением нескольких капель 1 % раствора двууглекислой соды на 2—3 литра воды. Слишком щелочная вода (фиолетовая окраска наступает ранее минуты) нейтрализуется несколькими каплями 1 % раствора уксусной кислоты. После нейтрализации нужна повторная проверка реакции воды. Лучше всего для получения нужной и стойкой реакции воды применять буферные фосфатные растворы. Иногда вполне удовлетворительные результаты получаются при пользовании водопроводной водой. Для разведения краски желательно пользоваться одним и тем же цилиндром и пипеткой с резиновым баллончиком; после работы их ополаскивают дистиллированной водой (мыть их каждый раз не рекомендуется).
Мазки-оттиски из органов обрабатываются так же, как и мазки крови.
Окраска толстых капель
Толстые капли не фиксируют. Техника окрашивания такая же, как и мазка; продолжительность окраски около 40—50 минут, а иногда и дольше. Красящий раствор выщелачивает гемоглобин из эритроцитов и одновременно окрашивает лейкоциты, кровяные пластинки и паразитов. Препараты, по ошибке зафиксированные, для исследования не годятся, так как гемоглобин из них не выщелачивается. Если толстые капли сохранялись неокрашенными в течение некоторого времени (например, более недели летом в умеренном климате), их предварительно надо обработать дистиллированной водой, так как в этом случае гемоглобин раствором краски полностью не удаляется. На препараты наливают дистиллированную воду. Через некоторое время (10—15 минут и больше, в зависимости от срока хранения капель) гемоглобин отходит в виде бурого облачка и толстая капля превращается в прикрепленную к стеклу белую пленку. После этого на стекла (лучше после их предварительного споласкивания дистиллированной водой) наливают красящий раствор; окрашиваются такие капли несколько скорее, чем при окраске без предварительного удаления гемоглобина. Свежеприготовленные толстые капли предварительно обрабатывать дистиллированной водой не следует, так как в этом случае плазмодии подвергаются более резкому деструктивному воздействию, чем при менее грубом удалении гемоглобина самим красящим раствором. Толстые капли, пролежавшие неокрашенными несколько месяцев, оказываются часто негодными для исследования, так как гемоглобин из них не выщелачивается.
После окраски препараты ополаскивают водой. При этом надо соблюдать осторожность (особенно, если окрашивание производится в день взятия крови), иначе можно смыть со стекла окрашенную каплю. Затем препараты высушивают в вертикальном или слегка наклонном положении; при высушивании надо избегать нагревания, которое (как и яркий прямой солнечный свет) изменяет окраску препаратов. При высушивании толстых капель нельзя пользоваться фильтровальной бумагой.
36
Хранение препаратов
Сохранение препаратов крови, обычно не заключаемых в канадский бальзам, требует ряда предосторожностей* Для того чтобы незащищенная поверхность препаратов не разрушалась, их надо тщательно охранять от повреждения и запыления. Иммерсионное масло должно быть нейтральным; тотчас после микроскопирования масло удаляют (после его растворения ксилолом или очищенным бензином) мягкой бархатной тряпочкой или мякотью ладони. Хранить препараты надо в сухом месте, завернутыми небольшими пачками в неворсинистую бумагу. Препараты, предназначенные для учебных занятий, целесообразно покрыть, как это было предложено Е. Н. Павловским и Д. В. Волжин-ским \ тонким слоем жидкого (органического) стекла, что значительно упростит уход за ними и увеличит срок пользования.
ИЗУЧЕНИЕ ПРЕПАРАТОВ
Плазмодии малярии в мазках крови
В удачных мазках форменные элементы крови и малярийные паразиты достаточно хорошо сохраняют особенности своего строения. Поэтому изучение плазмодиев и надо начинать с тонких мазков. К изучению малярийных паразитов целесообразно приступить после овладения техникой пользования иммерсионной системой и ознакомления с морфологией форменных элементов крови.
При рассматривании препаратов крови надо пользоваться объективом 90 и окуляром 7. Необходим достаточно яркий дневной или искусственный свет, отраженный плоским (а не вогнутым) зеркалом микроскопа. Диафрагма должна быть расширена, осветитель поднят до уровня столика микроскопа. Каплю иммерсионного масла надо поместить на тонкое ровное место мазка (обычно в его конце или во второй половине). Сделав установку и обнаружив эритроциты, надо, не отрывая глаза от поля зрения, отрегулировать высоту осветителя; наиболее четкое изображение может быть получено только при определенном (зависящем от толщины предметного стекла) положении осветителя. Одновременно надо выбрать и наилучшее положение зеркала. Надлежащее освещение препарата имеет очень большое значение, так как только при этом условии можно различать все тонкие детали строения малярийных паразитов. Нередко и при микроскопировании одного препарата приходится менять положение осветителя и зеркала. Обязательно непрерывное пользование микрометрическим винтом. При микроскопировании целесообразно пользоваться подвижным крестообразным столиком к микроскопу, что дает возможность быстро и ровно перемещать препарат в желательном направлении.
В крови плазмодии обнаруживаются в эритроцитах. Только в тяжелых случаях, обычно при большом числе паразитов, плазмодии иногда могут быть найдены в белых кровяных тельцах — моноцитах, гистиоцитах (явление фагоцитоза). В эритроцитах обнаруживаются: а) стадии бесполого развития (шизонты) и б) незрелые половые формы малярийных паразитов (гаметоциты).
Поселившийся в эритроците паразит-шизонт растет и постепенно заполняет собой большую часть эритроцита. За счет ассимилируемого гемоглобина эритроцита в протоплазме шизонта откладываются мелкие зернышки пигмента. Далее наступает деление паразита. Сначала ядро
1 Зоологический журнал, т. XXIX, в. 5, стр. 473—475, 1950.
37
шизонта путем ряда последовательных делений распадается на определенное число ядер, соответствующее количеству образующихся молодых особей (мерозоитов), затем паразит сразу распадается на соответственное число мерозоитов. Каждый мерозоит представляет собой овальный или круглый комочек протоплазмы, содержащий ядро. После разрушения эритроцита, наступающего вслед за разделением паразита, меро-зоиты попадают в плазму крови и внедряются в новые эритроциты, где проделывают аналогичное развитие. Таким образом осуществляется бесполое размножение малярийных паразитов в эритроцитах. В течение длительного времени считалось, что бесполое размножение малярийных плазмодиев в организме позвоночных происходит только в эритроцитах. Теперь известно, что наряду с шизогонией в эритроцитах бесполое размножение плазмодиев происходит и вне кровяного русла — тканевая шизогония. У малярийных паразитов птиц тканевые шизонты развиваются в клеточных элементах мезенхимы различных органов, у малярийных паразитов обезьян и человека — в печеночных клетках, где эти шизонты достигают крупных размеров (до 40—60 ц),; при своем разделении они образуют тысячи мерозоитов, поступающих в кровь и дающих начало бесполому поколению паразитов, развивающихся в эритроцитах.
В эритроцитах мы находим и незрелые половые формы малярийных паразитов (мужские — микрогаметоциты и женские — макрогаметоциты). Они образуются за счет некоторой части мерозоитов, превращающихся после внедрения в эритроцит не в шизонты, а в гаметоциты. В протоплазме гаметоцитов также откладываются зернышки пигмента. Для своего дальнейшего развития гаметоциты должны попасть в желудок самок комара рода Anopheles, В крови человека они циркулируют некоторое время и затем погибают.
Нередко в крови больного малярией встречаются паразиты, почти целиком заполняющие собой пораженный эритроцит, и в этом случае кажется, что такие паразиты непосредственно находятся в плазме крови. Кроме того, надо помнить, что во время приготовления мазка целостность отдельных эритроцитов может быть нарушена, и находящиеся в них паразиты оказываются вне эритроцитов.
Исследование крови на плазмодии имеет своей целью обнаружение и определение вида малярийных паразитов. У человека известны четыре вида малярийных паразитов — возбудителей соответственных заболеваний:
1.	Plasmodium vivax Grassi et — возбудитель трехдневной малярии, Fell.
2.	Plasmodium malariae Lav. — возбудитель четырехдневной малярии,
3.	Plasmodium falciparum Welch — возбудитель тропической малярии, 4. Plasmodium ovale Steph. — возбудитель малярии трехдневного типа.
В Советском Союзе обнаружены только три первых вида паразитов, причем возбудители тропической и, особенно, четырехдневной малярии имеют в последние годы очень ограниченное распространение. Указания ряда авторов на обнаружение Plasmodium ovale в СССР не подтвердились (Николаев, 1951).
Основные отличия малярийных паразитов от других образований, которые могут встретиться в мазке, следующие: плазмодии, как правило. находятся в эритроцитах, и в большинстве случаев (но не всегда) бывает видна часть того эритроцита (или его контур), в котором распо-38
лагается данный паразит; протоплазма паразитов окрашивается в голубой или серовато-синий цвет и благодаря этому отчетливо выделяется на фоне бледно-розовых эритроцитов; ядерная субстанция паразитов окрашивается в различные оттенки красного цвета; в протоплазме паразитов (за исключением ранних стадий их развития) находится пигмент — мелкие коричневые или более темные зернышки.
При определении вида плазмодиев принимаются во внимание морфологические особенности самих паразитов — различных стадий их бесполого развития и гаметоцитов, а также те изменения, которые могут быть (или не наблюдаются) в эритроцитах, содержащих плазмодии. Среди отличительных признаков, свойственных самим паразитам, имеют значение: а) форма и величина паразита на различных стадиях его развития, б) размер паразита, достигшего своей предельной величины, в) степень заполнения им пораженного эритроцита, г) число и величина образующихся при делении мерозоитов, д) количество, величина, форма, цвет и расположение зернышек пигмента (находящихся в протоплазме паразита) в шизонтах и в гаметоцитах. Содержащие паразитов эритроциты могут быть изменены в отношении: а) размера и формы, б) способности окрашиваться, в) наличия в них специфической зернистости. При определении размеров паразитов, а также и содержащих плазмодии эритроцитов, их сравнивают обычно со средним размером рядом лежащих эритроцитов (диаметр эритроцита около 7,5 ц).
Развивающиеся в эритроцитах бесполые формы малярийных паразитов подразделяют на следующие возрастные стадии.
1.	В мерозоите, проникшем в эритроцит, вскоре образуется вакуоль, благодаря чему такой паразит в оптическом разрезе принимает обычно вид перстня, место камня в котором занимает ядро, расположенное в наиболее истонченном месте ободка протоплазмы. Таких паразитов называют кольцами. В зависимости от размера кольца (сравнивается с диаметром среднего по величине эритроцита) различают мелкие, средние и крупные кольца. По мере своего развития диаметр кольца постепенно увеличивается, в основном за счет увеличения вакуоли. Увеличивается и масса протоплазмы, более крупным становится ядро. Стадия кольца является сравнительно кратковременной. Термин «кольцо» применяют и в том случае, когда паразит (как это нередко бывает) значительно уклоняется от кольцевидной формы. Наиболее характерным признаком кольца является сравнительно небольшая масса протоплазмы, не содержащая еще зернышек пигмента.
2.	Дальнейшее увеличение протоплазмы сопровождается появлением в ней зернышек пигмента. С этого времени паразит вступает в следующую возрастную стадию, называемую стадией собственно шизонта. Это наиболее продолжительная стадия,; в ней паразит достигает своих предельных размеров. Рост шизонта идет в основном за счет увеличения массы протоплазмы, в которой постепенно откладываются зернышки пигмента. По величине паразита и по накопленному им пигменту различают малые, средние и крупные шизонты. На стадии шизонта паразиты обладают более или менее выраженной амебовидной подвижностью, причем степень этой подвижности (определяемой на препаратах по очертаниям тела шизонта и наличию в нем одной или нескольких вакуолей) представляет существенный отличительный видовой признак паразитов. Наиболее характерный признак этой стадии — наличие пигмента в протоплазме и одно ядро.
3.	Паразитов, находящихся на стадии разделения ядра, называют делящимися шизонтами. Присутствие двух и большего числа ядер
39
позволяет четко отграничить эту возрастную группу от предшествующей стадии.
4.	Окончательно разделившегося паразита принято называть меру-ляцией. Этим термином, вопреки его прямому значению (обозначающему весь процесс деления паразита), обычно называют разделившегося на мерозоиты шизонта.
Начальные стадии развития гаметоцитов не всегда можно отличить от шизонтов. Считается, что вакуольную стадию (стадию кольца) они не проходят. Вполне развившиеся гаметоциты представляют собой крупные образования с одним ядром. Они имеют (за исключением Plasmodium falciparum) округлую форму. Для микрогаметоцита характерно большое рыхлое ядро, составляющее большую часть паразита, и бледно окрашенная протоплазма с коричневатыми зернышками пигмента. Макрогаметоциты имеют небольшое компактное ядро и интенсивно окрашенную протоплазму, в которой содержатся более темные зернышки пигмента.
Способ приготовления сухого мазка не является достаточно совершенным для тонкого цитологического исследования. При приготовлении мазка эритроциты распластываются на поверхности предметного стекла. Последующее подсыхание препарата нарушает прижизненное строение паразитов и нередко приводит к образованию артефактов. К изучению мазков крови следует приступить после ознакомления с приводимыми ниже описаниями морфологических особенностей плазмодиев.
Паразит трехдневной малярии (Plasmodium vivax, цветная табл. I). У больного с ежедневными приступами иногда (при большом числе паразитов) в одном препарате удается найти все стадии бесполого развития и гаметоциты. Обычно же для этого приходится пользоваться несколькими препаратами, взятыми от больного в различные фазы лихорадочного периода. При правильном ходе приступов (через день) развитие бесполых стадий в крови происходит не вполне равномерно и в препарате обнаруживаются различные по возрасту паразиты. Однако большая часть развивающихся в эритроцитах шизонтов по своему возрасту (определяемому в часах) соответствует тому сроку, который прошел от начала приступа — момента, когда основная масса паразитов заканчивает свое развитие образованием мерозоитов иг после разрушения эритроцита, переселяется в новые эритроциты.
Бесполое развитие продолжается приблизительно 48 часов. При делении образуется 14—22 мерозоита, но иногда встречаются нетипичные меруляции с 12, 10 и даже 8 мерозоитами. Мерозоит, величиной около 1,5 ц, представляет собой овальный или круглый комочек протоплазмы с ядром; протоплазма окрашена в голубой цвет, ядро — в красный. Мерозоитов находят в эритроцитах, так как свободное пребывание мерозоитов в плазме крови (после гибели эритроцита) столь кратковременно, что вне эритроцитов они практически не обнаруживаются. Нередко в момент приготовления мазка повреждаются эритроциты, содержащие мерозоитов, и последние обнаруживаются между эритроцитами. В этом случае, кроме свободно лежащих мерозоитов, часто удается найти обрывки эритроцита и вывалившийся из него пигмент. Иногда можно на препарате встретить мерозоита, приставшего к эритроциту и как бы распластавшегося на нем, — это начальная стадия, в которой происходит внедрение паразита в эритроцит.
После внедрения мерозоита в эритроцит он превращается в описанную выше стадию кольца. Величина кольца Plasmodium vivax вначале не превышает 7з диаметра эритроцита. Нередко в кольце бывает два
40
ТАБЛИЦА I
6
10
14
13
гз
1г
5


ц

б
Стадии развития Plasmodium vivax в мазке крови.
/—2 — кольца, 3—12 •— шизонты, 13—15 — делящиеся шизонты, 16— меруляция, 17— кольцо и шизонт в одном эритроците, 18 — два амебовидных шизонта в одном эритроците, 19—20 — две меруляции в одном эритроците, 21—22— микрогаметоциты, 23—24 — макрогаметоциты
3/184
ТАБЛИЦА II
Стадии развития Plasmodium malariae (1—15) и Plasmodium falciparum (16—30) в мазке крови.
7—2— кольпа. 3—9 — шизонты, 10—12 — делящиеся шизонты, 13— меруляции, 14 — микрогаметоцит, 75— макрогаметоцит, 16—19 — кольца, 20—21 — шизонты, 22—24 — делящиеся шизонты, 25 — меруля-ция, 26 — две меруляции водном эритроците, 27—28 — микрогаметоциты, 29—30 — макрогаметоциты.
ядра, расположенных рядом или на противоположных сторонах ободка. Наличие двух ядер в кольце следует рассматривать как артефакт — нарушение целости ядра, возникающее во время подсыхания мазка крови. У больного с приступами малярии через день такие кольца являются преобладающей стадией на протяжении первых 2—4 часов высокой температуры. В последующие 4—8 часов преобладают более крупные кольца, диаметр которых около 1/2 диаметра эритроцита; они имеют более массивный ободок протоплазмы и более крупное ядро. Часто в эритроцитах обнаруживаются образования, сильно уклоняющиеся от правильной кольцевой формы, а нередко и совсем непохожие на кольцо. Таких паразитов, имея в виду определенную возрастную стадию, также называют кольцами. Нередко в одном эритроците можно найти 2—3 и даже большее число колец; особенно часто это наблюдается при значительном числе паразитов в крови больного.
Кольцо — наиболее мелкая стадия паразита, найти которую можно только внимательно просматривая эритроциты и непрерывно пользуясь при этом микрометрическим винтом микроскопа. Вначале эритроциты, содержащие кольца, не представляют каких-либо особенностей. В эритроцитах с крупными кольцами часто обнаруживаются изменения, характерные для последующих стадий развития. Эритроциты несколько увеличены и бледнее окрашены; при удачной окраске в них можно различить специфическую для возбудителя трехдневной малярии зернистость Шюффнера — обильные, мелкие, красноватые зернышки, равномерно рассеянные по всему эритроциту.
При дальнейшем развитии паразита в нем, как правило, сохраняется одна большая вакуоль. На стороне, противоположной ядру, наблюдается постепенное накопление протоплазмы. В ней появляются немногочисленные, вначале с трудом различимые, мелкие коричневые зернышки пигмента. С этого времени паразит вступает в следующую возрастную группу — стадию собственно шизонта, она длится около 30—32 часов. В это время паразит достигает предельных размеров. Рост паразита идет в основном за счет постепенного увеличения массы протоплазмы, в которой откладываются зернышки пигмента. Более крупным становится и ядро. По величине паразита условно различают малых шизонтов, занимающих не более 1/з эритроцита, шизонтов средней величины, занимающих около */2 эритроцита, и более крупных шизонтов. С ростом паразита увеличивается и размер инвазированного эритроцита, диаметр которого на вторые сутки развития возрастает почти в 1,5 раза. Все более заметным становится побледнение (обесцвечивание) инвазированных эритроцитов. В эритроцитах, содержащих шизонтов,— в той их части, которая не занята паразитом, — видна зернистость Шюффнера. Инвазированный эритроцит часто кажется почти бесцветным и на нем четко вырисовываются мелкие красноватые зернышки. Способность эритроцитов так окрашиваться возникает в результате жизнедеятельности паразита. Выраженность этой специфической для Plasmodium vivax зернистости зависит и от возраста паразита. В не-докрашенных препаратах зернистость Шюффнера не выявляется, и в этом случае увеличение инвазированных эритроцитов сочетается только с их бледной окраской. Зернистость Шюффнера лучше выявляется при разведении краски на несколько щелочной воде (при pH выше 7,2), некоторые серии краски требуют кроме того добавления одного из красящих компонентов (азур II). В препаратах сильно перекрашенных зернистость Шюффнера может быть выражена так резко, что за ней трудно бывает рассмотреть очертания паразита, а при недостаточном опыте — даже и распознать его.
41
Характерной особенностью Plasmodium vivax на стадии шизонта является оживленная амебовидная подвижность живого паразита. На препаратах это находит свое отражение в том, что обнаруживаемые в эритроцитах шизонты часто имеют причудливый вид. Для молодого шизонта типично наличие одной большой вакуоли, по одну сторону которой расположено ядро, а на противоположной стороне находится более массивный участок протоплазмы, представляющий собой как бы псевдоподию. Пигмент у такого паразита представлен немногочисленными, вначале очень мелкими зернышками, которые улавливаются глазом только как неравномерно окрашенные участки протоплазмы. Затем шизонт принимает самые причудливые очертания. Отростки протоплазмы отходят в разные стороны. Вместо одной большой вакуоли, путем слияния соседних псевдоподий, образуются добавочные вакуоли. Иногда шизонт округляется, вакуоли исчезают и паразит принимает более правильные очертания. Постепенно увеличивается число зернышек пигмента, а также и размер каждого из них (пигмент лучше виден в не-докрашенных препаратах). К концу первых суток развития удается рассмотреть форму отдельных зернышек пигмента — они, по большей части, представляют собой мелкие палочки. Подвижность шизонта продолжается вплоть до заполнения им большей части увеличенного к этому времени эритроцита. Через 38—40 часов после внедрения мерозоита паразит принимает более или менее круглую форму, вакуоли исчезают и шизонт достигает своих предельных размеров, иногда почти целиком заполняет эритроцит. Обильный пигмент (обычно свыше 35—40 отдельных зернышек) остается либо рассеянным в протоплазме, либо собирается в отдельных ее участках в неплотно собранные скопления. Ядро шизонта к этому времени расположено обычно эксцентрично.
Затем наступает процесс деления паразита. Он длится около 6—8 часов. Вначале повторно делится ядро, и паразит временно становится многоядерным. При каждом делении ядра становятся все более мелкими; их число после окончательного разделения ядра варьирует от 14 до 22, но, как уже указывалось, иногда может не превышать 12, 10 и даже 8. Такое атипическое деление наблюдается обычно тогда, когда процесс деления ядра паразита начинается прежде, чем шизонт достигнет своего предельного размера. После того как ядро окончательно разделилось, происходит обособление соответственных участков протоплазмы и паразит сразу распадается на мерозоиты, продолжающие тесно прилегать друг к другу до тех пор, пока цел эритроцит, в котором они образовались. Пигмент к этому времени собирается в одну более или менее плотную кучку; иногда он оказывается собранным в две кучки или вовсе остается рассеянным.
При нахождении в одном эритроците двух и трех шизонтов совместно развивающиеся паразиты могут принадлежать к одной возрастной стадии или резко отличаться по возрасту; в последнем случае можно предполагать, что внедрение мерозоитов в эритроцит произошло неодновременно. Нередко можно найти в препаратах и две меруляции в одном эритроците; общее число мерозоитов в этом случае может достигать 36—40. При двойных и множественных инвазиях эритроцита граница между отдельными паразитами часто бывает не выражена; диаметр таких эритроцитов обычно в два раза превышает размер эритроцита; более резко бывают выражены также побледнение эритроцита и зернистость Шюффнера. Двойная инвазия эритроцита может дать повод для ошибочного определения возрастной стадии паразита. Так, например, два молодых шизонта в одном эритроците могут быть приняты за паразита, у которого уже произошло первое деление ядра; двух де-42
лящихся шизонтов, с восьмью ядрами у каждого из них, можно принять за паразита, у которого завершено деление ядра.
Вполне сформировавшиеся гаметоциты представляют собой крупные, как правило, круглые образования. Они находятся в увеличенных эритроцитах. Макрогаметоцит больше микрогаметоцита. Если гаметоциты не заполняют целиком эритроцита (что свойственно больше микрогаметоциту), то отчетливо заметно побледнение каймы эритроцита, а, при соответственной окраске, по свободному краю эритроцита видна зернистость Шюффнера. Среди шизонтов резко выделяется по своИхМ морфологическим особенностям микрогаметоцит. Он имеет большое рыхлое, расположенное часто по середине ядро и сравнительно узкую каемку бледно окрашенной протоплазмы, в которой виден обильный коричневатый пигмент. Молодые, окончательно еще не сформировавшиеся микрогаметоциты несколько меньше по величине, ядро у них также немного меньше (но все же по величине ядра микрогаметоцит резко выделяется среди шизонтов), протоплазма представлена более широкой каймой и более интенсивно окрашена, чем у вполне сформировавшегося микрогаметоцита. Вполне сформированный макрогаметоцит целиком заполняет увеличенный эритроцит. Он имеет небольшое компактное ядро, расположенное обычно эксцентрично (большей частью по краю паразита) и часто отделенное от протоплазмы узенькой бледно окрашенной зоной; протоплазма окрашена интенсивно, пигмент обильный, темный, палочковидный, равномерно рассеянный в протоплазме. Макрогаметоцит не всегда легко отличить от крупного шизонта,; особенно это относится к еще не вполне развившемуся макрогаметоциту. Нередко в одном эритроците обнаруживаются два макрогаметоцита или макрогаметоцит вместе с шизонтом на какой-либо стадии его развития. Двойные инвазии эритроцита двумя микрогаметоцитами или микрогаметоцитом совместно с какой-либо другой стадией встречаются редко. Число гаметоцитов в крови больного трехдневной малярией, как правило, невелико, оно составляет лишь небольшую долю по отношению к общему числу паразитов. Но в том или другом количестве гаметоциты почти всегда могут быть обнаружены. Более скудным гаметообразова-нием отличается подвид трехдневной малярии с длительной инкубацией. Появляются гаметоциты рано, часто уже на второй—третий день заболевания. Однако их никогда не удается обнаружить раньше чем через 13—14 дней после заражения.
Паразит четырехдневной малярии (Plasmodium mala-riae, цветная табл. II). Бесполое развитие паразита в эритроците продолжается около 72 часов. При делении образуется 6—12 (обычно 8—10) мерозоитов. На стадии кольца паразит вначале не отличается от соответственной стадии возбудителя трехдневной малярии. Двойные и множественные инвазии эритроцита не наблюдаются. Содержащие паразитов эритроциты не увеличены и их способность окрашиваться не изменена. Для стадии собственно шизонта характерна малая амебовидная подвижность паразита. В связи с этим шизонт имеет в общем правильную, чаще всего округлую форму. Шизонт растет медленно. Появляющиеся зернышки пигмента сразу становятся хорошо различимыми. У малого шизонта вначале около ядра еще имеется небольшая вакуоль. Затем она исчезает, и паразит представляет собой, как правило, плотное образование. Нередко встречаются шизонты, как бы перепоясывающие эритроцит — так называемые «лентовидные формы». Пигмент довольно обилен, представлен круглыми темными зернышками. У крупных шизонтов пигмент довольно грубый, причем крупные зернышки располагаются больше по краю паразита. Через 56—60 часов шизонт почти
43
целиком заполняет эритроцит; предельный его размер не превышает величины нормального эритроцита. Окончательно разделившийся паразит часто имеет вид «маргаритки» — мерозоиты как лепестки располагаются вокруг центрально расположенной кучки пигмента. Даже при правильном ходе приступов (через 2 дня на третий) в крови больного одновременно обнаруживаются различные возрастные стадии бесполого развития.
Гаметоциты по своему строению такие же, как у Plasmodium vivax, но меньше (находятся в не увеличенных и не измененных в своей окраске эритроцитах). Пигмент в гаметоцитах представлен круглыми, довольно грубыми зернышками, у микрогаметоцита они коричневые, у макрогаметоцита— почти черные. Гаметоциты в крови больных четырехдневной малярией обнаруживаются, как правило, в очень небольшом количестве. При первичном проявлении заболевания появляются они поздно, не ранее второй — третьей недели болезни.
Паразит тропической малярии (Plasmodium falciparum, цветная табл. II). Бесполое развитие паразита в эритроците продолжается около 48 часов. При делении образуется 12—18 мелких мерозои-тов. Эритроциты, в которых происходит шизогония, не увеличиваются и не обесцвечиваются. При окраске по Романовскому, при повышенном содержании азура и приготовлении красящего раствора на несколько щелочной воде (pH не ниже 7,5) в эритроцитах появляется пятнистость Маурера — немногочисленные, довольно крупные пятнышки красного цвета (в диагностической практике этот признак обычно не используется).
В циркулирующей крови удается, как правило, обнаружить только начальные стадии бесполого развития — кольца. Эритроциты, содержащие шизонты и делящиеся формы, задерживаются в капиллярах различных органов; только в тяжелых случаях заболевания эти стадии можно иногда находить в небольшом количестве (всегда наряду с большим числом колец). Из внедрившегося в эритроцит мерозоита образуется мелкое кольцо, его диаметр не более 7s диаметра эритроцита. Гак как кольца трех остальных видов плазмодиев никогда не бывают такими мелкими, то малый размер кольца Plasmodium falciparum имеет диагностическое значение. При большом числе мелких колец в препарате нередко попадаются мерозоиты, распластавшиеся на эритроцитах. Часто в одном эритроците находятся два, три и большее число колец. При дальнейшем развитии кольца увеличиваются до х/3—% диаметра эритроцита. Такие средней величины и крупные кольца Plasmodium falciparum сами по себе не представляют каких-либо особенностей и их нельзя отличить от колец остальных видов плазмодиев. Но при четырехдневной малярии в эритроците никогда не встречается более одного кольца, а при трехдневной малярии эритроциты, содержащие два или три кольца, обычно уже увеличены, немного обесцвечены и, при соответствующей окраске, содержат зернистость Шюффнера.
При первичном проявлении тропической малярии на протяжении всей первой недели болезни в крови больного обнаруживаются только кольца, по ходу температурной кривой изменяется лишь их величина. Наличие в препарате одних колец и является решающим признаком при распознавании тропической малярии на данном этапе болезни, так как при заражении остальными видами плазмодиев развитие паразитов никогда не идет столь равномерно, чтобы кроме стадии кольца в препарате нельзя было бы обнаружить одновременно какую-либо другую стадию бесполого развития или гаметоциты. Следовательно, наличие в препарате только одних колец (при достаточном их числе) всегда ука
44
зывает на Plasmodium falciparum. Для последующих стадий бесполого развития (в мазках обычно не обнаруживаемых) характерно быстрое исчезновение вакуоли, малая амебовидная подвижность шизонта, раннее деление ядра и небольшой предельный размер паразита — он заполняет не более 2/3 эритроцита. Деление ядра начинается рано, когда шизонт еще мал. Пигмент грубый, черный, отдельные зерна его сразу собираются в одну плотную кучку, которая по мере роста паразита увеличивается в размере и достигает 1,5 ц в диаметре. Меруляция заметно меньше эритроцита, мерозоиты очень мелкие. После разрушения эритроцита (что также происходит вне общей циркуляции) мерозоиты попадают в плазму и вымываются в циркулирующую кровь.
Начальные стадии развития гаметоцитов обнаруживаются редко. Они несколько напоминают малых шизонтов и отличаются тем, что появляющийся в их протоплазме пигмент не собран в плотную кучку, а остается рассеянным. Вполне сформировавшиеся гаметоциты представляют собой крупные вытянутые, обычно немного изогнутые образования с более или менее округленными концами; их принято называть полулуниями, хотя по своей форме они больше напоминают банан или изогнутую сигару. При удачной окраске препарата половые различия гаметоцитов выражены четко. Протоплазма микрогаметоцита красится в розоватый или сиреневый цвет, ядро его нечетко отграничено от протоплазмы, пигмент представлен немногочисленными грубыми коричневатыми зернами, которые обычно рассеяны по телу полулуния (больше в средней его части). Макрогаметоцит красится в голубой, синевато-серый цвет, немногочисленные'(не свыше 18) грубые черные зерна пигмента (каждое из которых в виде неправильной глыбки) обычно довольно плотно собраны в центре полулуния и прикрывают расположенное здесь ядро. Гаметоциты так заполняют и вытягивают эритроциты (в длину их размер достигает двух диаметров эритроцита), что при рассматривании полулуний эритроциты совсем не видны или же видна только узенькая пленка на вогнутой стороне полулуния. Не вполне сформировавшиеся гаметоциты меньше по величине (иногда с заостренными концами).
В случаях рецидивов тропической малярии, наряду с кольцами, в первые же дни обострения можно обнаружить и полулуния; но нередко их в крови бывает так мало, что найти их удается только при продолжительном микроскопировании толстой капли. В крови больных тропической малярией могут встречаться только одни гаметоциты (что не наблюдается при остальных формах малярии). Это объясняется тем, что полулуния отличаются большой устойчивостью к противомалярийным препаратам шизонтоцидного действия (хинин, акрихин, бигумаль) и поэтому, после проведенного лечения, они в течение некоторого времени только и обнаруживаются в крови больных, получивших указанные препараты.
Основные отличительные признаки трех видов малярийных паразитов человека приведены в табл. 1.
Плазмодии малярии в толстой капле
В препарате толстой капли слой крови во много раз толще, чем в тонком мазке. Одно поле зрения толстой капли соответствует примерно 60—80 полям зрения тонкого мазка. Благодаря этому большая порция крови может быть просмотрена в короткое время. Это и определяет значение метода толстой капли для исследования крови на плазмодии и других кровепаразитов (спирохет, трипанозом, микрофиля-
45
Таблица 1
Сравнительная таблица малярийных паразитов человека (тонкие мазки, окраска по Романовскому)
	Plasmodium vlvax	Plasmodium malarlae	Plasmodium falciparum
Стадии паразитов, обнаруживаемые в циркулирующей крови	Все стадии шизогонии и гаметоциты	Все стадии шизогонии и гаметоциты	Как правило, обнаруживаются только кольца и гаметоциты, при большом числе колец можно обнаружить шизонты и формы деления
Продолжительность шизогонии	48 часов	72 часа	48 часов
Кольца	Часто имеют правильную кольцевидную форму, размер равен у3—У2 диаметра нормального эритроцита; нередко по 2—3 кольца в эритроците	Такие же, как у Plasmodium vlvax. Не более одного кольца в эритроците	Вначале очень малы — У5 диаметра нормального эритроцита; затем достигают У2 диаметра. Часто два и несколько колец в эритроците
Шизонты	Обычно неправильной, причудливой формы, достигают больших размеров; пигмент обильный, мелкий, палочковидный. Нередко 2—3 шизонта в эритроците	Округлой или лентовидной формы, размер не превышает нормального эритроцита; пигмент в виде круглых, довольно грубых зернышек. Не более одного шизонта в эритроците	Округлой формы, малы — занимают около 1/2 нормального эритроцита; пигмент в виде одной компактной крупной глыбки. Как правило, не обнаруживаются
Меруляции
Больше нормального эритроцита. 14—22 (обычно 14—18) мерозоитов, расположенных беспорядочно
Пораженные эритроциты
Заметно увеличены, обесцвечены. При соответствующей окраске — зернистость Шюффнера
Гаметоциты
Круглые, почти заполняют увеличенный и обесцвеченный эритроцит. По краю его—зернистость Шюффнера. Микрогаметоцит с большим рыхлым ядром и небольшим ободком бледно окрашенной плазмы, содержащей коричневый пигмент; макрогаметоцит с небольшим компактным ядром и интенсивно окрашенной плазмой, содержащей равномерно рассеянный, более темный, палочковидный пигмент
Не превышают нормального эритроцита. 6—12 (обычно 8—10) мерозоитов, часто расположенных правильно вокруг центральной кучки пигмента	Малы, не более V2—% нормального эритроцита. 12—18 (сбычно 14—16) очень мелких, расположенных беспорядочно мерозоитов. Как правило, не обнаруживаются
Не увеличены, не обесцвечены. Зернистость отсутствует	Не увеличены, не обесцвечены. При соответствующей окраске — пятнистость Маурера
Такие же, как у Plasmodium vlvax, но не превышают размера нормального эритроцита. Зернистость Шюффнера отсутствует. Пигмент в виде довольно грубых круглых зернышек, коричневатых у микрогаметоцита и более темных у макрогаметоцита	Полулунной формы. Микрогаметоцит — розовато-сиреневый, с грубым, часто рассеянным пигментом; макрогаметоцит синевато-серый, с грубым, черным пигментом, собранным в центре клетки и прикрывающим расположенное здесь ядро
рий): толстая капля позволяет быстро обнаружить паразитов в таких случаях, когда их не удается найти в тонком мазке и при весьма продолжительном микроскопировании. Следовательно, исследуя мазок, мы можем считаться только с положительным результатом. Метод толстой капли является обязательным как для распознавания малярии, так и при эпидемиологическом обследовании.
Приступать к изучению малярийных паразитов в толстой капле следует после основательного ознакомления со строением и видовыми различиями плазмодиев в мазках. Первое время можно рекомендовать одновременно с толстыми каплями брать и мазки, к просмотру которых обращаться в сомнительных случаях,; это, однако, может помочь только при достаточном числе паразитов в крови больного.
Препараты толстой капли рассматриваются так же, как и мазки. Вначале необходимо заняться микроскопированием толстой капли, взятой от заведомо здорового человека. В удачно приготовленном препарате толстой капли на светлом фоне видны красновато-фиолетовые образования, в которых легко узнать ядра лейкоцитов. Число их колеблется, составляя при нормальном содержании лейкоцитов в крови около 30—50 в поле зрения. Общий фон толстой капли представляется почти однородным и слегка окрашенным в различные оттенки голубого или серого цвета. Этот фон образуется за счет стромы многочисленных эритроцитов, из которых удален гемоглобин. Если слой крови был слишком тонок, то, наряду с более резкой окраской, на общем фоне начинает вырисовываться строма отдельных выщелоченных эритроцитов (в этом легко убедиться, рассматривая«более тонкий край препарата); такой неравномерно окрашенный фон сильно затрудняет обнаружение паразитов. При просмотре толстой капли обращают внимание на присутствие (на общем фоне препарата) так называемых полихроматофильных сеточек. Это очень мелкие серые частицы или изорванные нити, которые располагаются в поле зрения в виде неплотных скоплений. Они образуются за счет сетчато-нитчатой субстанции молодых полихроматофильных эритроцитов (ретикулоцитов) после удаления из них гемоглобина. Большое число полихроматофильных сеточек является постоянным признаком анемии, вызванной малярией.
Среди лейкоцитов преобладают нейтрофилы. Их легко узнать по ядру, состоящему из отдельных сегментов, и полупрозрачной нежнорозовой протоплазме, в которой содержатся очень мелкие красноватофиолетовые зернышки (нейтрофильная зернистость). Круглые ядра лимфоцитов окрашиваются в темно-фиолетовый цвет; около ядра виден тонкий голубой ободок протоплазмы. Моноциты имеют крупное, более рыхлое ядро и серовато-голубую протоплазму, но далеко не всегда в толстой капле удается отличить моноцита от большого лимфоцита. Без труда распознаются в толстой капле эозинофилы. Их ядро состоит обычно из двух сегментов, протоплазма выполнена крупными зернами розовато-оранжевого цвета. Можно опознать также и базофилы. Под влиянием гипотонического раствора краски базофилы, как правило, повреждаются и представляются как бы распавшимися. Вокруг этих образований, в которых легко узнать развалившихся лейкоцитов, вырисовываются окрашенные в красный цвет тонкие нити фибрина; это особенно резко выражено в несколько перекрашенных препаратах, в недокрашенных препаратах этот признак отсутствует.
В толстой капле видны и кровяные пластинки (тромбоциты) — мелкие образования, располагающиеся изолированно или часто группами и целыми скоплениями. В удачных препаратах можно рассмотреть, что каждый тромбоцит по периферии окрашен в голубой цвет, а централь-48
ТАБЛИЦА 11!
Стадии развития Plasmodium vivax и Plasmodium malaria? в толстой капле.
А — Plasmodium vivax. Левая сторона: все стадии шизогонии, у средней линии макрогаметоцит, под ним два микрогаметоцита. Правая сторона (препарат перекрашен): паразиты лежат на розовых дисках (строма инвазированных эритроцитов), видны тромбоциты, около базофила окрашены нити фибрина.
Б — Plasmodium malariac. кольца, шизонты, две меруляции, микрогаметоцит (налево вверху)
ТАБЛИЦА IV
Стадии развития Plasmodium falciparum в толстой капле.
1 —мелкие кольца, шизонт, делящийся шизонт, две меруляции, 2 — средние по величине кольца, 3 — крупные кольца, в центре — пигментофаг, 4 — кольца, микро- и макрогаметоциты, 5 — микро- и макрогаметоциты, резкая полихроматофилия.
ная его часть, имеющая зернистое строение, окрашена в розовато-сиреневый или красный цвет. В перекрашенных препаратах тромбоциты красятся более интенсивно в различные оттенки красного цвета (часто с фиолетовым оттенком), а в недокрашенных не выявляются.
Малярийные паразиты выглядят в толстой капле несколько иначе, чем в мазке. Прежде всего они лежат в поле зрения свободно, так как эритроциты, в которых находятся паразиты, не видны (исключение в этом отношении представляет только Plasmodium vivax, см. ниже). Во время наступающего вскоре после взятия толстой капли свертывания крови, при последующем высушивании препарата и дальнейшей его обработке, связанной с воздействием гипотонического раствора на толстый слой крови, малярийные паразиты подвергаются значительным деструктивным изменениям. Они в общем заметно уменьшаются, изменяются их очертания. Однако эти изменения в различной степени проявляются на отдельных видах паразитов и в отношении различных стадий их развития. При определении размера паразитов их приходится сравнивать с нейтрофилами (имеющими в общем одинаковую величину) или с ядрами лимфоцитов. После необходимого ознакомления с морфологическими особенностями плазмодиев в толстой капле и приобретения практического навыка методом толстой капли можно не только установить наличие малярийных паразитов в крови, но и определить их видовую принадлежность.
Окрашиваются малярийные паразиты в толстой капле так же, как в мазке. Ядро красится в различные оттенки красного цвета, протоплазма — в голубой или серовато-синий. Просмотр препарата лучше начинать с того места, где слой крови наиболее толст. В практической работе при исследовании толстой капли надо просмотреть не менее 500 полей зрения.
Паразит трехдневной малярии (Plasmodium vivax, цветная табл. III, Л). Кольца в толстой капле сравнительно редко сохраняют свойственную им правильную форму. Они, как правило, оказываются разорванными и тогда к небольшому красному ядру, расположенному обычно отдельно, прилежит на некотором расстоянии комочек округлившейся протоплазмы. Часто протоплазма оказывается разорванной на два или на несколько очень мелких комочков. Нередко встречаются образования, в которых протоплазма вместе с ядром образуют фигуры, напоминающие восклицательный знак, запятую или силуэт летящей ласточки.
Очень характерно в толстой капле выглядят амебовидные шизонты. Их протоплазма обычно разорвана на отдельные части, среди которых находится ядро, лежащее или отдельно или в одном из комочков протоплазмы; в более крупных обрывках протоплазмы видны зернышки пигмента. Чем больше у паразита протоплазмы и чем больше в ней пигмента, тем шизонт старше по своему возрасту. Если среди нескольких рядом лежащих обрывков протоплазмы видны два ядра, то это два близко расположенных (часто в одном эритроците) шизонта. Стадия амебовидного шизонта наиболее продолжительная и поэтому почти всегда (даже при наличии в крови сравнительно небольшого числа паразитов) удается обнаружить этих разорванных шизонтов, которые служат основным отличительным признаком Plasmodium vivax в толстой капле. Следует, конечно, помнить, что часть амебовидных шизонтов может округлиться и иметь вид компактных (неразорванных) образований; следовательно, наличие таких компактных шизонтов само по себе отнюдь еще не исключает Plasmodium vivax. Крупные шизонты в толстой капле представляют собой массивные, богатые протоплазмой
4 Зак. 3420. Лабораторный практикум медицинской паразитологии	49
образования с обильным пигментом, ядро расположено обычно эксцентрично, часто по краю паразита. Так же выглядят и делящиеся шизонты, но в их протоплазме удается рассмотреть отдельные ядра. Хорошо сохраняются в толстой капле меруляции; мерозоиты или тесно прилегают друг к другу или, чаще, лежат порознь рядом с кучкой пигмента; в этом случае можно сосчитать количество мерозоитов.
Среди прочих паразитов резко выделяются микрогаметоциты. Их нежная протоплазма красится бледнее или вовсе не выявляется. Большое ядро окрашивается интенсивно (часто в вишневый цвет). Многочисленные коричневые зернышки пигмента лежат на некотором расстоянии от ядр’а и окружают его в виде венчика. Нередко ядро микрогаметоцита располагается отдельно от бледно окрашенных (иногда почти неразличимых) обрывков протоплазмы, содержащих пигмент. У молодых (не сформировавшихся окончательно) микрогаметоцитов ядро несколько меньше (хотя оно все же резко выделяется по своей величине), а небольшая каемка протоплазмы окрашивается более интенсивно* Макрогаметоциты представляют собой массивные и интенсивно окрашенные образования. Обычно они имеют более или менее правильную (круглую или овальную) форму, но иногда принимают неправильные очертания, с несколько надорванными участками протоплазмы. Небольшое ядро расположено большей частью эксцентрично. В протоплазме виден обильный, темный, палочковидный пигмент. Однако почти так же выглядят в толстой капле и крупные шизонты Plasmodium vivax, и в связи с этим следует считать, что о нахождении гаметоцитов в крови больного трехдневной малярией можно уверенно говорить только при наличии микрогаметоцитов.
При микроскопировании толстых капель нередко можно видеть, что паразиты (шизонты и гаметоциты) лежат на полупрозрачных дисках, окрашенных в розовый цвет и имеющих обычно не совсем правильную форму. Эти диски представляют собой строму тех эритроцитов, в которых находятся данные паразиты. Выявляются эти диски только в достаточно окрашенных и, особенно четко, в перекрашенных препаратах, тогда как в недокрашенной толстой капле строма инвазированных эритроцитов не выявляется. Этот признак является весьма надежным видовым отличием Plasmodium vivax, который как бы заменяет собой не выявляемую в толстой капле зернистость Шюффнера. Если при исследовании толстой части препарата строма инвазированных эритроцитов не видна, то для того, чтобы убедиться в наличии этого признака, часто бывает достаточно передвинуть препарат на край капли, где находится более прокрасившийся тонкий слой крови.
Паразит четырехдневной малярии (Plasmodium mala-riae, цветная табл. Ill, Б). Кольца Plasmodium malariae такие же, как и у возбудителя трехдневной малярии. Шизонты, как правило, имеют круглую или овальную форму и обычно представляют собой компактные, интенсивно окрашенные образования, в которых можно рассмотреть ядро, протоплазму и зернышки пигмента. Особенно характерны мелкие круглые шизонты (если эта стадия встречается в препарате), у которых, несмотря на их малый размер, сразу же становятся различимыми появляющиеся в протоплазме зернышки пигмента. Протоплазма шизонтов более плотная, чем у Plasmodium vivax, и поэтому паразиты в толстой капле менее деформируются, хотя отдельные шизонты могут оказаться несколько измененными и даже разорванными. Крупные шизонты значительно меньше соответственной стадии возбудителя трехдневной малярии; то же относится и к делящимся шизонтам. При соответствующей окраске (лучше в недокрашенных препаратах) 50
видно, что пигмент у крупных шизонтов представлен круглыми, темными и довольно грубыми зернышками, которые больше расположены по краю паразита. В меруляции 8—10 (редко 12) мерозоитов.
Микрогаметоциты выглядят почти так же, как при трехдневной малярии. Ядро красится в насыщенно-красный или вишневый цвет, а вокруг (иногда несколько в стороне) находятся круглые коричневые зернышки пигмента. Макрогаметоциты в толстой капле настолько сходны с крупными шизонтами, что отличить от последних их не удается. Паразиты никогда не лежат на розовых дисках, так как строма инвазированных эритроцитов не выявляется.
Среди признаков, позволяющих отличить в толстой капле Plasmodium malariae от Plasmodium vivax (с которым в наших условиях его только и можно смешать), наибольшее значение имеют: а) плотный, компактный характер большей части паразитов (отсутствие разорванных на части шизонтов), б) малые размеры паразитов, в) форма пигментных зернышек (круглые у Plasmodium malariae, палочковидные у Plasmodium vivax), г) малое число мерозоитов (если в препарате встречаются меруляции), д) отсутствие и в перекрашенных препаратах розовых дисков.
Паразит тропической малярии (Plasmodium falciparum, табл. IV). При тропической малярии весьма ответственным является определение вида паразита на первой неделе заболевания, когда в крови нет еще гаметоцитов (полулуний). Мелкие кольца Plasmodium falciparum в препарате толстой капли очень малы,; они представляют собой небольшую красную точку, около которой находится очень маленький, часто еле заметный обрывок протоплазмы. Кольца среднего размера и крупные кольца нередко сохраняют более или менее правильную форму перстня или выглядят так же, как кольца остальных видов плазмодиев. При обнаружении в препарате одних колец вопрос об определении паразита решается только после продолжительного микроскопирования, в результате которого необходимо убедиться, что в препарате действительно встречаются только кольца (у остальных видов паразита, наряду с кольцами, можно обнаружить и другие стадии бесполого развития, часто и соответственных гаметоцитов). Если в препарате колец так мало, что определение паразита представляет затруднение, то вопрос может быть разрешен путем повторного исследования. Кровь у больного должна быть взята через 12—24 часа после первого исследования. У больного тропической малярией при этом будут опять обнаружены кольца, а при трехдневной и четырехдневной малярии вместо колец — шизонты соответственной стадии.
Если в мазках последующие стадии шизогонии Plasmodium falciparum удается найти только в тяжелых случаях тропической малярии (когда они встречаются в небольшом количестве среди огромного числа колец), то, при тщательном микроскопировании толстых капель, отдельных шизонтов, делящихся паразитов и меруляции нередко можно найги и при небольшом числе колец в крови больного. Но и при продолжительном микроскопировании они обнаруживаются далеко не в каждом случае. Шизонты Plasmodium falciparum представляют собой очень мелкие, компактные, окрашенные в серовато-голубой цвет образования; в их гомогенной протоплазме четко вырисовываются одна грубая черная глыбка пигмента и небольшое красное (в недокрашенном препарате— розовое) ядро. Делящиеся шизонты имеют два или несколько ядер. По мере деления ядра паразит несколько увеличивается в размере, более крупной становится и глыбка пигмента. Меруляция Plasmodium falciparum мала; около крупной, черной как уголь» глыбки
4*	51
пигмента (принимающей к этому времени большей частью округлую форму) лежат, расположившись более или менее плотной группой, 12—18 очень мелких мерозоитов. Они имеют тонкую каемку протоплазмы и часто бывают видны только их ядра. Шизонты, делящиеся паразиты и меруляции Plasmodium falciparum выглядят столь характерно, что не дают повода для смешения их с соответственными стадиями остальных видов паразитов.
При наличии в препарате гаметоцитов (полулуний) распознавание тропической малярии обычно не вызывает затруднений. В толстой капле хорошо сохраняются макрогаметоциты. Они выглядят почти так же, как и в мазках, протоплазма окрашена в голубой или серовато-синий цвет, грубый черный пигмент собран в центре полулуния. Нередко макрогаметоциты в толстой капле округляются и принимают овальную или круглую форму; в этом случае их иногда принимают за крупные шизонты или макрогаметоциты Plasmodium vlvax или Plasmodium malariae. Однако грубые зерна пигмента и его расположение (собранные в более или менее плотное скопление глыбки пигмента всегда оставляют свободной по краю паразита некоторую часть протоплазмы) позволяют опознать в них макрогаметоцита Plasmodium falciparum. При дальнейшем микроскопировании (необходимо просмотреть и край препарата) почти всегда удается обнаружить и типичные полулуния. Протоплазма микрогаметоцитов в толстой капле обычно кажется полупрозрачной,; она окрашивается в красноватый тон; пигмент представлен немногочисленными, грубыми, коричневыми глыбками, обычно рассеянными по телу полулуния (больше в средней его трети). Нередко микрогаметоциты округляются, нежная их протоплазма становится почти незаметной, и тогда они выглядят почти так же, как микрогаметоциты Plasmodium vlvax и Plasmodium malariae (характерным представляется только пигмент— немного грубых зерен). Распознавание таких микрогаметоцитов (если они не единичны в препарате) облегчается тем, что одновременно в той же толстой капле всегда можно найти и макрогаметоциты.
Иногда при тропической малярии в циркулирующей крови появляются и самые начальные стадии развития гаметоцитов, причем на определенном этапе болезни (обычно на 8—10-й день первичного заболевания) только эти гаметоциты и могут обнаруживаться в крови больного (при одновременном нахождении, конечно, большого числа колец). Такие гаметоциты малы, имеют круглую или овальную (иногда с заостренными концами) форму. Пигмент представлен немногими, довольно грубыми, зернами, которые или рассеяны в протоплазме, или собраны в неплотную группу. В зависимости от окраски протоплазмы можно определить пол гаметоцита, но на более ранних стадиях это сделать не удается. При недостаточном опыте молодых округлившихся гаметоцитов Plasmodium falciparum иногда принимают за компактные шизонты Plasmodium malariae. В случаях паразитоносительства в крови больного при тропической малярии, наряду с гаметоцитами, всегда обнаруживаются и кольца.
ОФОРМЛЕНИЕ РЕЗУЛЬТАТОВ ИССЛЕДОВАНИЯ И ПОДСЧЕТ ПАРАЗИТОВ КРОВИ
В практической работе, при оформлении результатов исследования толстой капли, необходимо указать виды обнаруженных плазмодиев и среднее число паразитов в одном поле зрения препарата. Для этого достаточно подсчитать число паразитов в 10 полях зрения и взять среднее. Если паразитов мало, то указывают, через сколько полей зрения встре-52
чается один паразит. При обнаружении возбудителей трехдневной и четырехдневной малярии нет надобности выделять среди них гаметоциты — в толстой капле с уверенностью можно определить только микрогаметоциты двух названных паразитов. В случае нахождения возбудителя тропической малярии необходимо указать, что обнаружено — кольца, гаметоциты или то и другое, и отдельно отметить среднее число колец и полулуний в поле зрения толстой капли.
В связи с тем, что при малярии, неосложненной другими заболеваниями, наблюдается, как правило, лейкопения (число лейкоцитов в 1 мм3 крови обычно в пределах 4000—6000), ориентировочные данные о содержании паразитов в крови могут быть получены при подсчете паразитов, приходящихся в толстой капле на определенное число (500—1000) лейкоцитов.
Точное определение числа паразитов в 1 мм3 крови производится путем подсчета
паразитов, обнаруженных в мазках крови на 1000 (500) лейкоцитов, и одновременного подсчета в счетной камере лейкоцитов в крови больного. Пример: на 1000 лейкоцитов
в мазке приходится 300 паразитов; в 1 мм3 крови — 4500 лейкоцитов; в 1 мм3 крови 4500X300 1Q_n
содержится -----тугдт:-= 1350 паразитов.
1 UvU
ЛИТЕРАТУРА
Николаев Б. П. О четвертом виде малярийного паразита человека (Plasmodium ovale) и его обнаружении в СССР. Зоол. журн., т. 30, в. 3, 1951.
Павловский Е. Н. Учебник паразитологии человека. Медгиз, Л., 1951.
Эпштейн Г. В. Патогенные простейшие, спирохеты и грибки. Медгиз, М.—Л., 1931.
Brum pt Е. The human parasites of the genus Plasmodium. Chapter 4 in Malariology. Ed. M. F. Boyd, Philadelphia — London, 1949.
Field J. W. The microscopical diagnosis of human malaria. Part LA short descriptive atlas of thick-film diagnosis, Kuala Lumpur, 1948.
Field J. W. a. Shute P. G. The microscopical diagnosis of human malaria. Part IL A morphological study of the erythrocytic parasites. Kuala Lumpur, 1956.
Wilcox A. Manual for the microscopical diagnosis of malaria in man, 2-nd ed., Washington, 1950.
ЛЕЙШМАНИИ —РОД LEISHMAN1A
ЗАГОТОВКА МАТЕРИАЛА
Для изучения лейшманий необходимы препараты, приготовленные от больных, страдающих болезнью Боровского (кожный лейшманиоз), или от больных висцеральным лейшманиозом. Первое заболевание встречается в Советском Союзе чаще в Туркмении, второе — в Узбекистане и Закавказье. Можно также для изучения лейшманиальной стадии паразитов пользоваться препаратами, приготовленными от больных лейшманиозом собак (Узбекистан).
Мазки или препараты-оттиски из органов готовят на предметных стеклах. Необходимым условием является тонкое распределение материала на предметном стекле. Фиксируются и окрашиваются препараты так же, как и при исследовании мазков на плазмодии малярии. При взятии материала для исследования от больного кожным лейшманиозом необходимо по возможности избегать кровотечения. Бугорок или участок краевого инфильтрата язвы захватывается и ущемляется между большим и указательным пальцами левой руки таким образом, чтобы была выдавлена вся кровь, и подготовляемый для соскоба участок был полностью анемизирован. Не ослабляя давления пальцами и поддерживая обескровливание инфильтрата, на нем делают небольшой надрез
53
ткальпелем и концом последнего соскабливают небольшие кусочки ткани со стенок и дна разреза. Соскоб вместе с каплями серозной жидкости переносят на предметное стекло и размазывают; при этом следует избегать излишней травматизации клеточных элементов. При взятии материала от больного висцеральным лейшманиозом мазки готовят из пунктата костного мозга, лимфатической железы, селезенки, печени. Чаще всего с диагностической целью исследуют пунктат костного мозга (по Аринкину). Готовые препараты лейшманий можно получить в соответствующих научно-исследовательских и практических медицинских учреждениях.
Лейшмании хорошо растут на искусственных питательных средах. Для выделения первичной культуры обычно пользуются средой 3N (по начальным буквам фамилий трех авторов — Нови, Мак-Нил, Николь). Состав ее следующий: агар—14 г, соль морская или поваренная — 6 г, вода дистиллированная — 900 мл; pH среды 7,4—7,6. К остывшему до 50° и разлитому в пробирки (по 2—3 мл) агару добавляют около трети объема стерильно взятой дефибринированной крови кролика, перемешивают, вращая пробирки между ладонями (осторожно во избежание образования пузырей), и помещают в косом положении на сутки в термостат при 37° для контроля и получения конденсационной жидкости. С целью предупреждения высыхания пробирки покрывают резиновыми колпачками. Оптимальная температура для развития лейш-маний в культуре 22°. Рост начинается в конденсационной жидкости, но затем идет главным образом на поверхности агара. После того как жгутиковые формы лейшманий появляются в обильном количестве (через 8—10 дней), культуры лучше сохраняются при комнатной температуре. При более низких температурах (6—10°) культуры можно держать в течение нескольких недель. При висцеральном лейшманиозе в конденсационную воду засевают 1—2 капли пунктата костного мозга. Материал для посева от больного кожным лейшманиозом берется из инфильтрата (после очистки кожи спиртом и эфиром) шприцем с достаточно толстой иглой или пастеровской пипеткой, которую вводят в отверстие, предварительно проделанное иглой. Поступившая в пипетку, в силу капиллярности, жидкость выдувается в конденсационную воду, которой затем омывается поверхность агара.
Для пересевов культур обычно пользуются жидкими средами. Удобной средой для лабораторного поддержания жгутиковых форм лейшманий служит гемоглобиновая среда Роу: 1 часть дефибринированной крови кролика гемолизируется в 8—10 частях стерильной дистиллированной воды, после чего на каждые 100 мл жидкости добавляют 0,85 г стерильной поваренной соли. После обнаружения лейшманий в обильном количестве, культуры содержат при низкой температуре. В этих условиях пересевы можно делать через 25—30 дней.
ИЗУЧЕНИЕ ПРЕПАРАТОВ
Мазок из кожной язвы или из пунктата костного мозга
Мазок рассматривают под иммерсией. В организме позвоночного (человек, собака) паразиты находятся в лейшманиальной стадии, характеризующейся внутриклеточной локализацией и отсутствием жгутика (рис. 5). Паразиты обнаруживаются в протоплазме мононуклеаров, гистиоцитов и других клеток, обладающих фагоцитарной способностью. Количество лейшманий в одной клетке может варьировать от единич
54
ных экземпляров до многих десятков. При распаде клеток или их разрушении во время приготовления препарата лейшмании лежат в препарате группами в обрывках протоплазмы пораженной клетки или совершенно свободно.
Лейшмании имеют форму мелких овальных или круглых телец. Их размер варьирует от 2,5 до 5 ц. Протоплазма окрашивается в серовато-голубой цвет. В центральной части расположено ядро, которое имеет
Рис. 5. Схема строения и деления лейшмании.
а — о — безжгутиковые (лейшманиальные) формы: а, б, в—формы с палочковидным кинетопла-стом; г» д — формы с точечным кинетопластом, свободно лежащим или прилегающим к ядру (Э); е— паразит с ризопластом; ж — паразит с двумя вакуолями; з — мононуклеар с паразитами; п, к, л —деление паразита; м, «, о —скопление паразитов, напоминающее шизогонию; п — х — жгутиковые (лептомонадные) формы в переносчике и культуре; п, р — молодые формы; с, т — зрелые формы; у — аггломерация паразитов в виде розетки;
ф, дг —деление жгутиковых форм. Увеличение около 2000 раз (по Лаверану).
рыхлое строение и окрашивается в красный или красно-фиолетовый цвет. Около ядра находится кинетопласт — круглое зернышко или короткая палочка, лежащий эксцентрично и окрашивающийся интенсивно, часто в темно-фиолетовый цвет. В толстых участках препарата протоплазма лейшманий почти не окрашивается и, в этом случае, отчетливо видны только контур паразита, ядро и кинетопласт. Наличие ядра и кинетопласта является главным признаком, который позволяет отличить лейшмании от других образований (тромбоцитов, различных обрывков клеток, кокков и дрожжевых клеток — при загрязнении препарата). Размножение паразитов происходит путем деления, сначала делятся кинетопласт и ядро и затем, после разделения протоплазмы, образуются два паразита.
66
Мазок из культуры лейшманий
Мазок рассматривают под иммерсией. В культуре (как и в переносчике— моските) лейшманий обнаруживаются в жгутиковой лепто-монадной стадии. Это сравнительно крупные образования. Длина тела сформированных лептомонад, имеющих удлиненную веретеновидную форму, достигает 10—20 и, ширина 3—5 у*. Протоплазма окрашивается в серовато-голубой цвет. В средней части тела лежит овальное или круглое ядро красного или красно-фиолетового цвета. На переднем конце находится кинетопласт, окрашенный более интенсивно, чем ядро. От кинетопласта отходит тонкий жгутик 20—25 ц длины, окрашивающийся в красно-фиолетовый цвет. В культурах, особенно старых, леп-томонады часто собираются кучками в виде розеток, со жгутиками, обращенными к центру (явление аггломерации). Размножение лептомонад происходит путем продольного деления,; после разделения кинетопласта, жгутика и ядра паразит делится надвое.
При наличии в лаборатории культуры лейшманий, лептомонадные стадии следует изучить в живом виде. Для этого небольшую каплю культуры помещают под покровное стекло и рассматривают с помощью сильной сухой системы. Лептомонады легко обнаруживаются по их характерной, сильно выраженной, подвижности.
ЛИТЕРАТУРА
Кожевников П. В., Добротворская Н. В., Латышев Н. И. Учение о кожном лейшманиозе. Медгиз, М., 1947.
Павловский Е. Н. Руководство по паразитологии человека. М.—Л., 1946. Павловский Е. Н. Учебник паразитологии человека. Медгиз, Л., 1951.
ТОКСОПЛАЗМЫ —РОД TOXOPLASMA
Токсоплазмы (Toxoplasma gondii Nic. et Man.)—паразиты, точное систематическое положение которых не выяснено. Большинство авторов относит их к жгутиковым. Токсоплазмы широко распространены (почти во всех странах) и обнаружены у большинства домашних и очень многих диких животных.
Человек восприимчив к токсоплазмозу и может болеть в острой, подострой, хронической и скрытой формах. Заболевание наиболее ярко клинически проявляется у детей, причем чаще заражение токсоплаз-мами происходит внутриутробно. Ребенок рождается уродливым или нежизнеспособным, с поражением головного мозга, глаз и других органов.
Бессимптомное носительство токсоплазм у людей выявляется преимущественно серореакциями. Заражение человека чаще объясняют его тесным контактом с собаками, кошками, домашней птицей, у которых токсоплазмоносительство встречается часто.
КУЛЬТИВИРОВАНИЕ И МЕТОДЫ ОБНАРУЖЕНИЯ
Токсоплазмы на питательных средах не растут, но хорошо культивируются в куриных эмбрионах. Движение (скользящего типа) слабо выражено, питание осмотическое. Во внешней среде токсоплазмы мало устойчивы, но сохраняемость их еще недостаточно изучена (цисты?). Полное высушивание, многократное замораживание, обычные дезинфицирующие средства, дистиллированная вода и нагревание выше 60° губительны. В рефрижераторе (2—6°) токсоплазмы сохраняются до 2—3
56
мышеи (наиоолее восприим-
Рис. 6. Токсоплазмы в мазке из печени белой мыши (схема).
/ — различные формы свободных токсоплазм, 2 — эритроциты, 5 —ядро моноцита, / — в цитоплазме моноцита токсоплазмы в стадии продольного деления, 5 — типичные аркоподобные формы токсоплазм.
недель. Штаммы токсоплазм поддерживают на мелких лабораторных животных путем пассажей эмульсии внутренних органов или эксудата брюшной полости. При внутрибрюшинном или подкожном заражении белых мышей инвазия принимает генерализованный характер, мыши гибнут на 4—7-й день. Заражение возможно и многими другими путями.
Исследование животных на наличие токсоплазм и содержание больных производят изолированно, с соблюдением правил работы с заразным материалом. При наличии подозрения на заболевание возможно исследование ликвора, кала, мочи, молока, глазной слизи, мокроты, слюны и крови путем зара: чивы), морских свинок, кроликов, собак. Закономерности в появлении токсоплазм в крови, ликворе и органах нет, поэтому требуются повторные периодические исследования. Отрицательный результат не дает права исключать возможное наличие токсоплазм в организме. Токсоплазмы надо искать внутри клеток белой крови (моноциты и пр.) и вне их. Чаще и в большем количестве паразиты локализуются во внутренних органах, эксудатах брюшной и грудной полостей, в центральной нервной системе (ликвор, мозг). Ликвор исследуют после центрифугирования путем микроскопирования осадка в окрашенных мазках и толстых каплях иммерсионной системой. Одновременно заражают внутрибрюшинно белых мышей. За мышами ведут наблюдение
до 15—20 дней, а затем, даже при отсутствии заболевания, рекомендуется перепрививка от них эмульсии внутренних органов здоровым мышам внутрибрюшинно и подкожно. В трупах токсоплазмы легко обнаружить (в первые часы после смерти) в эксудатах и эмульсиях внутренних органов грудной и брюшной полостей, в мозговой ткани и ликворе путем микроскопирования мазков и заражения белых мышей. В полежавших трупах (до одних суток) в зависимости от степени их разложения жизнеспособность токсоплазм резко падает. Гистологическое исследование позволяет выявить наличие токсоплазм в мозгу, во внутренних органах, в мышцах сердца, языка (наличие псевдоцист — скоплений токсоплазм). Срезы окрашивают гематоксилин-эозином или по Романовскому. На срезах паразиты имеют несколько меньшие размеры, чем в мазках. Для диагноза заболевания и носительства токсоплазм у людей (и животных), кроме описанных методов, применяют комплекс серологических исследований: реакцию связывания комплемента (антиген получают из эксудата брюшной полости больной мыши, убитой на высоте инвазии), так называемую реакцию с красителем
57
и внутрикожную пробу. Учитывают анамнез, клинические, эпидемиологические данные и полный дифференциальный диагноз.
Вопросы о путях выделения токсоплазм из организма животных, способах естественного заражения, переносчиках недостаточно изучены., Специфических профилактических и лечебных средств пока не имеется.
ИЗУЧЕНИЕ ПРЕПАРАТОВ
В окрашенных мазках (по Романовскому) токсоплазмы чаще имеют типичную аркоподобную или полулунную форму (рис. 6). Протоплазма окрашивается в голубоватый цвет, ядро — в красный. Ядро обычно округлой формы, состоит из многих глыбок, расположено в средней части паразита. Размеры полулунных токсоплазм — 2—4 X 4—7 ц.
Размножение токсоплазм происходит внутриклеточно и частично вне клеток путем продольного деления пополам, что легко проследить на мазках; предполагают наличие шизогонии («псевдоцисты» в хронических случаях). В эритроцитах паразитов не бывает.
ЛИТЕРАТУРА
Засухин Д. Н. и Васина С. Г. Токсоплазмоз (обзор). Зоолог, журн.» т. 33, в. б»» 1954.
Засухин Д. Н. (ред.). Токсоплазмоз. Сборн. переводов. Медгиз, М., 1956.
К о з а р 3. Обзор польских исследований по токсоплазмозу. Зоолог, журн., т. 34, в. 5. 1955.
Паразитология. Сборник переводов и рефератов. Изд. ИЛ, в. 6 (13), 1950; в. 6 (19). 1951; в. 5 (28), 1954.
Реферативный журнал (биология). 1954, 1955, №№ 1, 2, 3, 5, 7, 11, 15, 21, 22. 1956, 1957.
Якимов В. Л. Болезни домашних животных, вызываемые простейшими. М.—Л., 1931.
ПРОСТЕЙШИЕ КИШЕЧНИКА
МАТЕРИАЛ ДЛЯ ЗАНЯТИЙ
В пищеварительном тракте человека встречаются, наряду с разнообразными бактериями, грибками и паразитическими червями, 15 видов одноклеточных животных организмов, относящихся к 4 классам типа простейших (Protozoa). Из этих видов к классу саркодовых (Sarcodina) принадлежат Entamoeba histolytica, Entamoeba coli, Entamoeba hart-mannl, Entamoeba gingivalis, Jodamoeba butschlii, EndoUmax папа и Dientamoeba fragilis\ к классу жгутиконосцев (Flagellata) — Chtlomastix mesnili, Trichomonas hominis, Trichomonas elongata, Embadomonas intes-tinalis, Enteromonas hominis и Lamblia (Giardia) lntestinalis\ к классу споровиков (Sporozoa)—Isospora belli;, к классу инфузорий (Infusoria) — Balantidium coli. Кишечные простейшие относятся к числу организмов, имеющих повсеместное распространение. Средними показателями общей зараженности населения простейшими можно считать 50—70%. Таким образом получение необходимого материала для изучения большинства видов простейших не представляет больших трудностей. Часто уже самообследование позволяет ознакомиться с определенными видами. Нередко у одного и того же обследуемого обнаруживается заражение тремя—пятью и иногда даже семью видами кишечных простейших.
При изучении простейших следует помнить, что в их жизненном цикле наблюдаются активные, подвижные, вегетативные формы (трофозоиты) и образуемые ими цисты. Активные формы приспособлены к жизни внутри хозяина, а цисты — к переживанию во внешней среде, 58
Большинство видов простейших являются комменсалами, живущими в просвете кишечника и питающимися бактериями, грибками и различными другими пищевыми частицами. Однако у некоторых из них в процессе эволюции выработалась способность при определенных изменениях условий существования (изменение организма хозяина как среды обитания паразита в широком понимании этого слова) приобретать качественно новые свойства — изменять источник питания и локализацию в организме хозяина, превращаться из комменсалов в тканепарази-тов. К числу таких факультативных тканепаразитов принадлежат дизентерийная амеба, балантидии и трихомонады. Поэтому следует помнить, что вегетативные формы могут быть обнаружены или с признаками ком-менсального типа питания или же истинно паразитического, тканевого (с эритроцитами). Нахождение простейших с последним типом питания отмечается только у больных кишечными заболеваниями, стул которых изобилует патологическими примесями (слизь, кровь). Протозойная этиология наиболее часто выявляется у больных с затяжными, хронически рецидивирующими формами кишечных заболеваний, протекающими по типу колитов, в частности язвенных, или энтероколитов. В анамнезе таких больных отмечаются частая обращаемость к врачам, безуспешность лечения и нередко длительная и многократная госпитализация.
Для диагностики кишечных простейших применяются различные методы, в связи с чем в лаборатории необходимо иметь определенный набор реактивов, растворов, красок и оборудования.
ОБОРУДОВАНИЕ, РАСТВОРЫ, КРАСКИ И ИХ ПРИГОТОВЛЕНИЕ
Нужные увеличения для изучения простейших дают микроскопы разных систем, в частности отечественный биологический микроскоп завода «Прогресо с объективами 8, 40, 90 и окулярами 7, 10 и 15. Размеры простейших относятся к числу дифференциальных признаков, поэтому использование окуляр-микрометра для измерений является обязательным. Значение одного деления окулярной линейки определяют при помощи объект-микрометра или по делениям камеры для подсчета кровяных телец (стр. 177). Для получения равномерного освещения целесообразно пользоваться специальными электролампами для микроскопирования, которые выпускаются отечественными заводами.
При исследовании кишечных простейших обычно применяются следующие растворы и краски:
1.	Физиологический раствор NaCl (0,85%).
2.	Раствор йода (Люголя): кристаллический йод—1,0, йодистый калий — 2,0 и дистиллированная вода — 75,0. Держать в склянке темного стекла с притертой пробкой или пипеткой с резиновым баллончиком.	I
3.	Фиксирующая жидкость Шаудина. Состоит из двух частей насыщенного раствора сулемы (растворяют при кипячении 8,5 г сулемы в 100 мл воды), одной части 96° спирта и 3—5% ледяной уксусной кислоты к общему объему смеси. Жидкость лучше готовить ex tempore, а насыщенный раствор сулемы держать готовым в запасе. Хранить эти растворы необходимо закрытыми в шкафах для ядовитых веществ.
4.	3% раствор железо-аммиачных квасцов в дистиллированной воде. Кристаллы квасцов должны быть слабо-фиолетового цвета. Окислившиеся квасцы желтого цвета непригодны для работы.
5.	Гематоксилин Гейденгайна (стр. 21).
6.	Спирты возрастающей крепости (50°, 70°, 85°, 96° и 100°).
59
7.	Карбол-ксилол (стр. 28).
8.	Спирт-йод. В 70° спирт добавляют настойку йода до цвета крепкого чая.
9.	Растворы эозина 1 : 100 и 1 : 1000.
10.	Водные растворы нейтральрота, мителенблау, янусгрюн (1 : 1000 до 1 : 50 000).
11.	Жидкость Барбагалло (стр. 13). Используется как консервирующая жидкость для сохранения цист простейших в фекальном материале.
12.	Нормальная лошадиная сыворотка.
13.	Рисовый крахмал.
14.	Мясо-пептонный бульон.
15.	Насыщенный раствор поваренной соли (400:1000 воды). Растворять при кипячении. Фильтровать.
Для работы требуются: стеклянная посуда, реактивные стаканчики, склянки, воронки, измерительный цилиндр, пробирки, чашки Петри, часовые, предметные, покровные стекла (толщина 0,15—0,17 и 0,2 мм), центрифуга с пробирками, весы и разновес, ножницы, пинцеты, препаровальные иглы, восковой и алмазный карандаш, вата, фильтровальная бумага, этикетки, тушь, бальзам, кедровое масло, длинные стеклянные пипетки, лучинки, щетки, «ерши» для чистки пробирок.
СБОР, ДОСТАВКА И ПРАВИЛА ПРОСМОТРА МАТЕРИАЛА
Сбор и доставка. Основным материалом для диагностики кишечных простейших служат фекальные массы. Брать фекалии рекомендуется в парафинированные картонные стаканчики емкостью 100 см3. Если стаканчики не парафинированы, их следует пропарафинировать в лаборатории, погружая на секунду в кастрюлю с расплавленным парафином. Заготовляют сразу сотни таких стаканчиков. Преимущества рекомендуемой тары: дешевизна, легкость и связанная с этим возможность заготовки в большом количестве (что особенно важно в экспедиционных условиях), возможность сжигать ее вместе с фекалиями по использовании. При отсутствии картонных парафинированных стаканчиков используют сухие стеклянные баночки, также аптекарские деревянные коробочки или плотную вощаную бумагу (для взятия густого стула). Собираемый кал не должен иметь примеси мочи.
В кале встречаются как вегетативные формы, так и цисты простейших. Вегетативные формы обычно находят у кишечных больных в кроваво-слизистом, жидко-водянистом, кашицеобразном и неоформленном стуле или- у здоровых после приема слабительного и клизм. Цисты встречаются в оформленном стуле, реже в кашицеобразном и совсем редко в жидком. В последних случаях иногда одновременно находят вегетативные формы и цисты.
Выживаемость во внешних условиях разных стадий простейших неодинакова. Вегетативные формы не приспособлены к выживанию во внешней среде. В выделенном стуле они, в зависимости от консистенции, свойств кала и температуры внешней среды, более или менее быстро дегенерируют. Вегетативные формы амеб при температуре выше 20° гибнут обычно через 2—3 часа, жгутиконосцы — через 2—5 часов и балантидии—через 4—8 часов. При более низкой температуре время выживаемости простейших удлиняется. В общем возможности обнаружения вегетативных форм снижаются по мере отдаления момента исследования от акта дефекации. Цисты, обладая защитной оболочкой и запасным питательным материалом, приспособлены к выживанию во внешней среде. При комнатной температуре и достаточной влажности они сохраняют
60
жизнеспособность в кале до 4 недель, а в условиях +1 —3° — до 2 месяцев.
Из сказанного следует, что кал для исследования на вегетативные формы должен быть доставлен в лабораторию сразу же после дефекации в теплом состоянии и подвергнут немедленной обработке и микроскопированию. В случае невозможности исследовать материал сразу же после доставки его рекомендуется оставлять при комнатной или еще более низкой температуре, но не помещать в термостат. В последнем случае в силу быстрого размножения бактерий и развивающихся гнилостных процессов вегетативные формы дегенерируют и исчезают из стула быстрее, чем при комнатной температуре. Жидкий стул через 2 часа после дефекации следует считать непригодным для целей диагностики простейших. Кал плотной консистенцйгй, исследуемый на цисты, не требует срочной доставки в лабораторию; тем не менее затягивать доставку и микроскопирование его не следует, поскольку в цистах при длительном пребывании во внешней среде наступают изменения. При необходимости сохранить фекальный материал, содержащий цисты простейших, на более длительный срок, его кладут в стеклянную баночку и заливают (в соотношении 1 :5) жидкостью Барбагалло. Цисты амеб в этой жидкости сохраняются свыше месяца, а цисты лямблий — в течение недели и больше, не теряя своей типичной структуры, за исключением гликогена. Последний при хранении в этой жидкости растворяется и потому при исследовании с раствором йода гликогеновые вакуоли оказываются бесцветными.
Диагноз простейших, поставленный по обнаруженным в оформленном стуле цистам, может быть проверен по вегетативным формам. Для этого пациенту дают солевое слабительное (но не касторовое масло) или ставят клизму и в жидком стуле ищут вегетативные формы.
Кроме фекалий, материалом для исследования могут быть: дуоденальное содержимое (лямблии), желудочный сок при раке желудка (иногда жгутиконосцы), гной из абсцессов печени, легких и других органов (дизентерийная амеба). В случае язвенного колита при ректороманоскопии рекомендуется брать для исследования выделения непосредственно с поверхности язв.
Одновременный просмотр нескольких мазков. Нередко кал, доставляемый для исследования, представлен оформленными частицами фекалий и жидкой частью с патологическими примесями — гноем, слизью, кровью. Иногда в фекалиях простейшие распределены неравномерно или количество их незначительно. Отсюда следует, что последовательный просмотр нескольких препаратов, изготовленных из разных участков фекалий, крайне желателен, а нередко совершенно необходим, особенно в случаях заболеваний, подозрительных на протозойную этиологию. Нахождение одного вида паразита не исключает находки других и дальнейшего просмотра препарата. Часто наблюдается одновременное заражение несколькими видами, которые могут встречаться в разнообразных комбинациях. Нахождение цист дизентерийных амеб в сочетании с другими амебами, как правило, указывает на паразитоносительство. Наоборот, одиночная инвазия дизентерийными амебами или инвазия ими в сочетании со жгутиконосцами Trichomonas hominis, а также с лямблиями, при наличии в стуле кристаллов Шарко-Лейдена, свидетельствуют об амебной этиологии заболевания.
Многократные повторные исследования. Доказано, что однократное исследование выявляет лишь одну треть фактического заражения простейшими. Это, в известной мере, объясняется периодич
61
ностью цистообразования и колебаниями активности размножения в жизненном цикле простейших. Для выявления полного заражения необходимо производить повторные исследования кала. Исследование рекомендуется повторять до шести раз с промежутками в 3—6 дней.
Для изучения и диагностики простейших кишечника в практике лабораторной работы материал обычно исследуют методом нативного мазка, методом мазков, окрашенных йодным раствором, и методом окраски железным гематоксилином по Гейденгайну (постоянные препараты). Наиболее полное представление об особенностях строения вегетативных форм и их цист дает исследование постоянных препаратов, окрашенных по способу Гейденгайна.
ИЗГОТОВЛЕНИЕ ПОСТОЯННЫХ ПРЕПАРАТОВ
Окраска железным гематоксилином по Гейденгайну. Для изготовления постоянных препаратов используют предметные или покровные стекла. Одновременно готовят не менее двух препаратов. Мазки делают сразу же из свежевыделенного стула, который должен быть доставлен в лабораторию не позже как через 30—40 минут после дефекации. Для нанесения материала на стекло берут лучинку длиной 8—12 см, конец ее пачкают в фекалиях и быстро «одним взмахом» делают мазок по стеклу, стараясь распределить материал возможно более тонким и равномерным слоем. Если стул кроваво-слизистый или содержит примесь кровянистой слизи, то для мазков выбирают комочек слизи, окрашенный кровью. В случаях жидкого, водянистого стула, который обычно плохо удерживается на стекле, небольшую каплю нормальной лошадиной сыворотки или яичного белка смешивают с такой же каплей исследуемого материала и тонким слоем размазывают на стекле. Как при нанесении материала на стекло, так и при всех последующих процедурах изготовления постоянных препаратов, необходимо следить за тем, чтобы мазки не подсохли. Обработка материала на всем протяжении проводится во влажном виде («влажные мазки»). Поэтому, как только материал нанесен на стекло, его сразу же помещают мазком вниз в фиксирующую жидкость Шаудина. Последняя, предварительно нагретая до 40—50°, наливается в чашку Петри или фотографическую кювету. Промедление с опусканием мазка в фиксатор приводит к тому, что простейшие в результате подсыхания быстро сморщиваются, и такие мазки обычно непригодны для исследования. Эта погрешность, так же как и «стремление сделать мазок потолще», особенно часто отмечается у начинающих.
Процедура изготовления постоянных препаратов состоит из следующих основных этапов: а) фиксация мазков и удаление из них фиксатора, б) протрава и окраска, в) дифференцировка, г) обезвоживание и заключение в канадский бальзам.
Фиксация
1.	Мазки фиксируют в жидкости Шаудина 15 минут.
2.	Переносят в 70° спирт на 5—10 минут.
3.	Для окончательного удаления сулемы помещают в спирт—йод на 5—10 минут.
4.	Снова переносят в 70° спирт на 5 минут.
(Если окраска не может быть произведена сразу, то препарат в этом спирте может сохраняться даже до нескольких месяцев.)
62
Протрава и окраска
5.	Препарат переносят в дистиллированную воду на 3—5 минут.
6.	Для протравы помещают в 3% водный раствор железо-аммиачных квасцов на 4—20 часов при комнатной температуре.
7.	Препарат вынимают из квасцов и быстро споласкивают (1—3 секунды) в дистиллированной воде.
8.	Переносят для окраски в 0,5% раствор гемотоксилина на 4—24 часа при комнатной температуре.
9.	Промывают водой 10—20 минут.
Дифференцировка
10.	Перекрашенный препарат для извлечения избытка краски помещают в 1 % раствор железо-аммиачных квасцов; обесцвечивание наблюдают под малым или большим увеличением микроскопа. Если в мазках имеются гнойные клетки или удается обнаружить цисты или вегетативные формы простейших, то дифференцировку ведут по этим объектам до появления в них отчетливой структуры ядер. Однако часто на препарате трудно найти подходящий объект для контроля за дифференцировкой. Поэтому рекомендуют дифференцировку производить по времени. 2% раствором квасцов препараты с амебами дифференцируются 3—4 минуты, со жгутиконосцами — 1—2 минуты и с инфузориями — около 5 минут. Дифференцировка по времени, как правило, требует по-правок на свежесть раствора краски, квасцов, длительность окраски, особенности исследуемого материала и т. п. Поэтому в практике часто производят дифференцировку по изменению общего фона окраски препарата. Черный фон препарата по мере оттягивания краски изменяется, и как только появляется серо-лиловый фон (но не коричневый и не желтый, что указывает на излишнее удаление краски; такой препарат будет негоден для диагностики), дифференцировку заканчивают. При некотором навыке таким способом легко удается получать хорошо дифференцированные препараты.
11.	По окончании дифференцировки препараты тщательно промывают для удаления квасцов в водопроводной воде (лучше проточной) в течение 20—40 минут.
Обезвоживание и заключение в бальзам
12.	Препарат последовательно выдерживают по 2—3 минуты в 70°» 85° и 96° спирту.
13.	Переносят в карбол-ксилол на 2 минутыс
14.	Помещают в чистый ксилол на 1 минуту.
’15	. На просветленный в ксилоле препарат наносят каплю канадского бальзама и накрывают его покровным стеклом. Толщина последнего не должна превышать 0,18 мм. Толстые покровные стекла делают невозможным микроскопирование с иммерсионным объективом. Если при заделке в канадский бальзам появляется муть — «молочко», это показывает, что обезвоживание было недостаточным и его надо повторить (часто при этом необходимо карбол-ксилол заменить свежим).
При желании иметь дополнительную окраску эозином препарат после дифференцировки и промывки в воде помещают на 1—3 минуты в водный раствор эозина 1 : 200, а затем проводят через спирты, карбол-ксилол и ксилол и заделывают в канадский бальзам.
Препараты, окрашенные железным гематоксилином, сохраняются без изменения в течение многих лет и позволяют в любое время провести
63.
изучение и точную диагностику отдельных видов простейших как по вегетативным формам, так и по цистам.
Ускоренная окраска железным гематоксилином. При необходимости ускорить диагностику простейших время на изготовление постоянных препаратов, окрашенных железным гематоксилином, можно значительно сократить за счет сроков протравы в квасцах и окраски в гематоксилине. Для этого, после удаления фиксатора, протравливание производят в течение 3—5 минут в подогретых на пламени спиртовки (до появления паров) железо-аммиачных квасцах. Затем, после споласкивания мазков в воде, их красят 5—10 минут при подогревании на пламени спиртовки до появления паров раствора гематоксилина. Дальнейшая обработка препарата проводится обычным путем— дифференцировка под контролем микроскопа, промывка в воде, обезвоживание и заключение в бальзам.
Окраска гемалауном Мейера (модификация). Приготовление краски. 1 г кристаллического гематоксилина растворяют в одном литре дистиллированной воды и добавляют 0,2 г йодистого натра (NaJO3) и 50 г алюминиевых квасцов. Раствор фильтруют и добавляют 20 мл ледяной уксусной кислоты.
Изготовление препарата. Фиксированные мазки после удаления фиксатора и промывки в воде красятся от 20 до 40 минут, затем вынимаются из краски, промываются в приточной воде, обезвоживаются в спиртах, просветляются и заделываются в бальзам. Если препараты оказываются перекрашенными, что наблюдается в случаях более длительных сроков окрашивания, то избыток краски оттягивается под контролем микроскопа 1 % солянокислым спиртом. Этот способ, хотя и не дает такой четкой окраски ядерной структуры, как окраска железным гематоксилином, может быть использован для быстрой диагностики простейших.
Окраска вольфрамовым гематоксилином Добелла. Окраска мазков такая же, как при окраске их железным гематоксилином Гейденгайна. Вместо раствора железо-аммиачных квасцов для протравы берется 2% водный раствор фосфорно-вольфрамовой кислоты. Протравливание длится всего 1—3 часа. Вегетативные формы амеб красятся около часа, а цисты их и жгутиконосцы в течение 2—3 часов. •Окрашенные препараты так же, как и при окраске гермалауном, не требуют дифференцировки. После окраски их промывают в воде, обезвоживают, просветляют и заключают в бальзам. Этот способ рекомендуется для быстрой диагностики простейших.
Вместо фосфорно-вольфрамовой кислоты для протравы можно пользоваться 2% раствором фосфорно-молибденовой кислоты или 2% молибденовокислым аммонием. Мазки, при использовании этих растворов в качестве протравы, имеют темно-фиолетовую окраску. Однако структура простейших, в частности ядро, часто не имеет той четкости, какая наблюдается при окраске гематоксилином по Гейденгайну.
Окраска фосфорно-вольфрамовым гематоксилином Маллори. Приготовление краски. Берут 0,1 г кристаллического гематоксилина и растворяют в 80 мл дистиллированной воды. К раствору добавляют вначале 20 мл 10% раствора фосфорно-вольфрамовой кислоты, а затем 7 мл 0,25% марганцевокислого калия.
Изготовление препарата. Мазки красятся 10—20 часов и переносятся из краски на 5—10 минут в 95° спирт, затем быстро обезвоживаются в абсолютном спирте, просветляются в ксилоле и заделываются в бальзам. Этот способ рекомендуется для окраски жгутиконосцев.
Окраска гематоксилином Делафильда. При окрашивании основной раствор краски (стр. 21) разводится дистиллированной водой в отношении 1 : 20 — 200. Фиксированные препараты в зависимости от степени разведения краски красятся от 1 до 24 часов. Перекрашенные препараты дифференцируются 2—3% солянокислым спиртом под контролем микроскопа, промываются в воде (можно дополнительно окрасить эозином 1 : 1000 в течение 2—3 минут), обезвоживаются, просветляются и заделываются в бальзам. Этот способ рекомендуется для окраски балантидиев.
Исследование постоянных препаратов, окрашенных тем или иным способом, проводится с иммерсионным объективом, при окуляре 10 (биологический микроскоп), обычно при полном освещении (диафрагма открыта, осветитель поднят). Если источник света сильный, то нужная степень освещения в микроскопе достигается регулированием диафрагмы и осветителя. Просмотр препаратов с иммерсией допускает изучение тонких цитологических особенностей и постановку точного диаг-
ноза. Исследование балантидиев позволяет наблюдать особенности их строения уже при большом увеличении сухой системы.
МИКРОСКОПИРОВАНИЕ ПРЕПАРАТОВ, ОКРАШЕННЫХ ЖЕЛЕЗНЫМ ГЕМАТОКСИЛИНОМ ПО ГЕЙДЕНГАЙНУ
Entamoeba histolytica Schaud.
Дизентерийная амеба, впервые обнаруженная в стуле больного дизентерией в Петербурге и описанная Лешем в 1875 г., относится к числу патогенных форм простейших как возбудитель амебной дизентерии, или амебиаза. Заболевание носит спорадический характер. Встречается преимущественно в странах с жарким и теплым климатом. На территории СССР эндемичными очагами являются закавказские республики, среднеазиатские республики и Приморский край. Однако отдельные случаи заболевания могут встречаться повсеместно. Дизентерийная амеба — факультативный, а не облигатный тканепаразит. Наиболее часто у человека наблюдается носительство этой амебы. Вегетативная стадия встречается в двух формах: мелкой, просветной, ком-менсальной, инцистирующейся — Entamoeba histolytica forma minuta — и крупной, тканевой, патогенной, эритроцитофагоцитирующей — Entamoeba histolytica forma magna.
Мелкая форма приспособлена к жизни в просвете толстого кишечника, по источнику питания относится к комменсалам. Является основной в жизненном цикле дизентерийной амебы. Образуя цисты, она обеспечивает сохранение вида. Активная, крупная форма, приспособленная к жизни в тканях хозяина, представляет качественно новую форму, возникающую из основной, мелкой просветной формы при изменениях (в широком смысле этого слова) в среде ее обитания (организм хозяина). Она отличается от мелкой более крупными размерами тела и ядра, способностью выделять протеолитический фермент, растворяющий ткани хозяина, питанием его соками, тканями, эритроцитами и т. д. Эти качественно новые особенности и определяют ее патогенные свойства. Таким образом дизентерийная амеба, соответственно выработавшимся у нее в процессе эволюции приспособлениям к жизни в различных биотопах хозяина (просвет кишечника, ткани) и во внешней среде, встречается в виде трех форм — двух вегетативных и цистной. Каждая из этих форм характеризуется своими морфо-физиологическими особенностями и приспособлена к жизни только в определенных условиях.
Соответственно двум вегетативным формам между дизентерийной амебой и организмом хозяина наблюдаются две основные формы взаимоотношений, которые выражаются у хозяина в виде носительства амеб и заболевания амебной дизентерией. При первой форме взаимоотношений человек остается здоровым, а дизентерийные амебы обнаруживаются в исследуемом фекальном материале только в виде мелких, просветно-комменсальных форм {Entamoeba histolytica forma minuta) и образуемых ими 1—2—4-ядерных цист. Носительство дизентерийных амеб в среднем отмечается у 10—15% обследуемых среди различных групп населения. При второй форме взаимоотношений у человека преимущественно наблюдается дизентерийный синдром, а паразит обнаруживается в исследуемом дизентерийном стуле больного в виде крупных, тканевых, патогенных форм {(Entamoeba histolytica forma magna) с фагоцитированными эритроцитами. Нахождение последних всегда является бесспорным показателем этиологического значения амеб в заболевании
5 Зак. 3420. Лабораторный практикум медицинской паразитологии
65
обследуемого. В эндемических очагах заболевание амебной дизентерией отмечается в среднем у 5% больных кишечными заболеваниями.
Нахождение в стуле мелких, просветных форм (Entamoeba histolytica forma minuta) и их цист, не только у здоровых людей, но и у больных желудочно-кишечными заболеваниями, обычно отражает явление носительства паразита и очень редко их этиологическое значение. Часто явление носительства не учитывается отдельно при обследованиях больных кишечными заболеваниями. Обычно в этих случаях ставится знак равенства между обнаружением дизентерийных амеб (независимо от находимых форм паразита) и их этиологическим значением. Это приводит к ошибочной диагностике, к неправильному пониманию клинической картины амебиаза и к ошибочным эпидемиологическим выводам. Поэтому при диагностике заболеваний амебной этиологии весьма важным и обязательным моментом должна быть паразитологическая характеристика и дифференцированная оценка обнаруживаемых форм амеб с указанием, по каким формам (цисты, forma minuta, forma magna) поставлен диагноз амебиаза.
Е. histolytica f. magna. На препаратах, изготовленных из кровянисто-слизистых испражнений больных острой амебной дизентерией, видно, что все поле зрения усеяно форменными элементами крови. Среди последних превалируют красные кровяные тельца, часто вытянуто-овальной формы, окрашенные в черный или в темно-фиолетовый цвет. Редко встречаются одиночно разбросанные белые кровяные тельца с фрагментированными ядрами, лимфоциты и безъядерные макрофаги. Ядра нейтрофилов обычно уплотнены (пикнотические ядра). В отдельных полях зрения встречаются ромбической формы кристаллы Шарко-Лейдена 1 различного размера. Всегда наблюдается кокковая и палочковая микрофлора. На этом фоне дизентерийные амебы выделяются своим крупным размером и светло-серой или светло-фиолетовой протоплазмой (рис. 7). Амебы вытянуты в длину или нередко округлые, с довольно ясно очерченными краями тела. Размер тела варьирует в довольно широких пределах в зависимости от штаммов. Встречаются штаммы амеб крупных, 22—42 р (в среднем около 30 р), и мелких, 12—28 р (в среднем около 17 р). Чаще средний размер тела амеб 23 р. В мелкозернистой протоплазме амеб различаются наружный светлый, прозрачный слой — эктоплазма и внутренний, более темно окрашенный — эндоплазма. Нередко имеются языковидные или мысообразные выступы эктоплазмы, представляющие собой псевдоподии. Однако часто амебы округлые, без псевдоподий и без четко выраженного деления протоплазмы на два слоя. Иногда встречаются амебы с резко выраженной грубой вакуолизацией протоплазмы.
В эндоплазме заметны круглые, окрашенные в черный цвет, фагоцитированные эритроциты (рис. 8, А). Количество их варьирует от одного до 20 и даже 35. В последних случаях амебы как бы нафаршированы эритроцитами, которые в зависимости от стадии переваривания имеют размер от 7—6 до 1 р в диаметре. Просматривая препарат, легко убедиться, что далеко не все амебы содержат в своем теле фагоцитированные эритроциты. Количество амеб-гематофагов сильно колеблется (от 5 до 100%) в отдельных штаммах в зависимости от тяжести, длительности и стадии заболевания. В эндоплазме, кроме эритроцитов, иногда можно найти фагоцитированные одиночные лейкоциты, а также
1 Кристаллы Шарко-Лейдена встречаются в стуле приблизительно у 50% больных амебной дизентерией, некоторыми авторами считаются образованиями, патогномоничными для амебной дизентерии.
66
бактерии. В протоплазме отчетливо вырисовывается круглое, кольцевидное ядро. Образования, сходные с амебами, но лишенные ядра, не должны приниматься за амебы. Размер ядра колеблется в пределах 3—9 ц в диаметре, в среднем 5,2 ц. Ядро имеет ясно выраженную ядер-ную оболочку, на внутренней стороне которой равномерным слоем, в виде зубчиков, расположены мелкие зерна хроматина. В центре ядра
Рис. 7. Микроскопическая картина стула при амебной дизентерии. Окраска железным гематоксилином по Гейденгайну. Иммерсия.
/ — тканевые формы амеб с фагоцитированными эритроцитами, 2— большое количество одиночно разбросанных эритроцитов, 3 — редкие лейкоциты, -/ — кристалл Шарко-Лейдена.
легко заметить небольшое (0,5—1 ц), центрально расположенное образование, называемое кариозомой. Форма ее чаще звездчатая, пятиугольная, реже круглая. От кариозомы к ядерной оболочке тянутся нежные радиальные нити. Между кариозомой и ядерной оболочкой разбросаны зернышки хроматина, которые часто образуют вокруг кариозомы концентрические кольца. В целом структура ядра подобна паутинообразной сети. Нередко зерна хроматина концентрируются вокруг кариозомы, принимая трапециевидную форму, и тогда пространство между ядерной оболочкой и сгруппировавшимися зернами хроматина около кариозомы выглядит в виде светлой зоны. От описанной типичной структуры ядра нередко наблюдаются уклонения. Кариозома может лежать несколько эксцентрично, зерна хроматина под ядерной оболочкой бывают в виде крупных глыбок.
5*	67
Количество амеб в препаратах колеблется от единичных на весь мазок до 5 и более в одном поле зрения. Иногда поле зрения сплошь усеяно амебами, а в смежном с ним не удается обнаружить и единичных амеб.
Е. histolytica f. minuta. В жидком стуле больных кишечными заболеваниями не амебной этиологии и с хроническим амебиазом, а также
Рис. 8. Дизентерийная амеба (Entamoeba histolytica}.
Д — вегетативные крупные, тканевые формы (Entamoeba histolytica iortna гпацпа). а, б — с фагоцитированными эритроцитами, в — без эритроцитов, с вакуолизированной протоплазмой.
7 —ядро, 2 — псевдоподия, 3— эритроцит, 4 — кариозома.
Б — вегетативные мелкие, просветно-комменсальные формы (Entamoeba histolytica forma minuta).
В —цисты, а — одноядерная, б — двуяаерная, в — четырехъядерная.
7 — ядро, 2 —псевдоподия, -/ — цистная оболочка, 5 — хроматоидные тела, 6 — гликогеновая вакуоль.
в стуле здоровых носителей после приема ими солевого слабительного. На постоянных препаратах от здоровых носителей эта форма дизентерийной амебы характеризуется следующими особенностями. Тело вытянутое, неправильной или, нередко, округлой (рис. 8, Б) формы, размерами от 8 де 24 р, в среднем 13 р. Деление на экто- и эндоплазму выражено слабо или отсутствует. У некоторых амеб удается видеть небольшие эктоплазматические псевдоподии. В мелкозернистой протоплазме отчетливо заметны пищеварительные вакуоли, которые большей частью свободны от пищевых частиц, редко в вакуолях видны фагоцитированные бактерии — кокки, палочки. Иногда вакуолизированная протоплазма амеб почти сплошь заполнена бактериями. В теле амеб отчет-
С8
ливо вырисовывается пузырьковидное ядро, диаметр которого варьирует^ от 2 до 5 и, в среднем — 3,3 На ядерной оболочке лежат мелкие4’' зерна хроматина, образующие на однОхМ из полюсов ядра серповидное утолщение. Мелкая, звездчатая кариозома находится в центре или, нередко, эксцентрично. На хорошо окрашенных препаратах удается заметить отходящие от кариозомы к периферии тонкие радиальные нити и, реже, концентрически расположенные зерна хроматина вокруг кариозомы.
Цисты. Резко очерченные, правильно округлой и, реже, овальной формы (рис. 8, В), 9— 16 ц (в среднем 12 ц) в диаметре. Тело цисты окружено двуконтурной оболочкой. Последняя на окрашенных препаратах заметна в виде светлого круглого пояска, непосредственно прилегающего к телу цисты. В серо-лиловой мелкозернистой протоплазме отчетливо выступают ядра в виде черных тонких колечек. На препарате могут быть обнаружены одновременно незрелые одно- и двуядерные, а также зрелые четырехъядерные цисты, которые являются типичными для дизентерийных амеб. Размер ядер различен и зависит от степени зрелости цист. В одноядерных цистах ядро наиболее крупное — 3—5 ц, в двуядерных — диаметр ядер 2,5—4 ц; наиболее мелкие ядра (2—3 ц) наблюдаются в зрелых четырехъядерных цистах. Структура ядра в общем сохраняет черты, типичные для ядра мелкой, вегетативной формы. Чаще в центре ядра или несколько эксцентрично помещается мелкая, звездчатая кариозома с отходящими от ее углов слабо заметными радиальными нитями. Под ядерной оболочкой расположены тонким равномерным слоем зернышки хроматина, которые, однако, на одном из полюсов ядра образуют серповидное утолщение. В двуядерных и зрелых четырехъядерных цистах отдельные ядра часто находятся не в одной плоскости, а в различных: одно из них может быть ближе к одному полюсу, другое к противоположному или примерно на равном от них расстоянии. Поэтому, чтобы видеть все ядра и подсчитать их, необходимо, вращая микрометрическим винтом, просмотреть цисту в различных плоскостях.
Кроме ядер, в цистах привлекают внимание окрашенные в черный цвет компактные, сигарообразные или палочковидные образования с округленными концами — так называемые хроматоидные тела, химическая природа и происхождение которых еще не ясны. Количество, размер, положение этих тел не закономерны, частота встречаемости зависит от степени зрелости цист. Наиболее часто и в большом количестве они встречаются в одноядерных и двуядерных цистах, реже и в меньшем числе в зрелых четырехъядерных. Нередко цисты не содержат хроматоидных тел. Иногда же эти тела бывают в большом количестве, налегают на ядра и тем затрудняют подсчет их. Хроматоидные тела играют роль запасных питательных веществ, необходимых для жизни цист во внешней среде. Поэтому в цистах, длительное время находившихся во внешней среде, они исчезают. Наряду с хроматоидными включениями в протоплазме цист заметны относительно крупные, светлые, ограниченные пространства — гликогеновые вакуоли. Наиболее отчетливы они в одноядерных цистах, слабее выражены в двуядерных, редко наблюдаются в четырехъядерных. Цисты часто обнаруживаются в кале здоровых лиц, нередко встречаются в сочетании с другими видами кишечных амеб и жгутиконосцами. Обнаружение их в стуле обследуемых обычно не дает основания ставить диагноз заболевания амебиазом.
Обращая внимание на важность точной диагностики заболеваний амебной этиологии и недопустимость постановки диагноза амебиаза только на основании находок цист и мелких просветных форм дизентерийной амебы, в то же время следует иметь в виду, что в относительно
69
редких случаях (несколько чаще в эндемических районах) нахождение в стуле этих форм безусловно является показателем их этиологического значения. Эти случаи относятся к больным хроническим амебиазом, находящимся в межрецидивном периоде после перенесенных длительных приступов острой амебной дизентерии, а также к больным в начальной стадии заболевания амебиазом. Тщательный учет анамнестических, клинических, паразитологических и эпидемиологических данных позволяет дать правильную оценку обнаруженным формам амеб и дифференцировать их от случаев носительства.
Препарат с цистами и мелкими просветными формами дизентерийных амеб, изготовленный из густокашицеобразного стула от больного хроническим амебиазом, яеренесшего заболевание острой амебной дизентерией, изображен на рис. 9.
2
Рис. 9. Микроскопическая картина стула при хроническом амебиазе. Окраска железным гематоксилином по Гейденгайну. Иммерсия.
1 — вегетативные мелкие, просветные формы дизентерийной амебы, 2 —одноядерные и <? —четырехъядерные цисты, 4 —кристаллы Шарко-Лейдена среди разнообразной бактериальной флоры.
При микроскопировании препарата обращает внимание наличие кристаллов Шарко-Лей лена, относительно большое количество мелких просветных форм дизентерийной амебы и типичных, 1—2—4-ядерных цист. Мелкие вегетативные формы от больных имеют более крупные средние размеры тела (13,3 р) и ядра (3,95 р), чем вегетативные формы от здоровых носителей (соответственно 12 р и 33 р). Средний диаметр цист—13 р. т. е. также заметно больше диаметра цист, обнаруживаемых в стуле здоровых носителей (11,5—12 р). Цисты как бы более «упитанные». Они почти все содержат обильное количество хроматоидных телец и отчетливо выраженные гликогеновые вакуоли. Никаких других видов кишечных амеб не обнаруживается. Приведенные паразитологические данные при наличии в стуле кристаллов Шарко-Лейдена всегда указывают на этиологическое значение найденных форм дизентерийных амеб. Как правило, паразитологический диагноз в этих случаях находит подтверждение в анамнестических и клинических данных обследуемого больного.
70
Entamoeba coli Schaud.
Считается непатогенной для человека. Имеет наиболее важное дифференциально-диагностическое значение, так как наиболее сходна с дизентерийной амебой. Распространена повсеместно и встречается одинаково часто в стуле как совершенно здоровых, так и страдающих кишечными заболеваниями лиц. В среднем около 40% обследуемых на простейших показывают наличие этой амебы. Живет в толстом кишечнике. Тканей хозяина не инвазирует. Обычно питается бактериями, грибками и пищевыми частицами, находящимися в просвете кишечника, т. е. является комменсальным организмом. Как и прочие формы кишечных простейших, существует в виде двух основных форм — вегетативной и цистной. Вегетативная форма в зависимости от особенностей условий существования в организме хозяина может встречаться, подобно дизентерийной амебе, в двух формах: обычной, мелкой, типичной, коммен-сальной Entamoeba coli и, редко, крупной, адаптивной, фагоцитирующей лейкоциты и эритроциты, т. е. с признаками истинно паразитического типа питания, Entamoeba coli forma magna. Обычная, комменсальная форма наблюдается у здоровых лиц и у кишечных больных с незначительными патологическими примесями в стуле. Крупная, адаптивная форма отмечается только у кишечных больных, в стуле которых имеется значительная примесь слизи, крови и гноя (при затяжных формах язвенного колита, хронической бациллярной дизентерии, папилломах, раке кишечника и др.). Эта форма в свое время была описана как новый вид кишечной амебы под названием Councilmania lafleuri (Kof. et Sw.).
Вегетативная обычная, комменсальная форма. На фиксированных и окрашенных препаратах размер тела колеблется от 9 до 30 ц, в среднем 18 ц. Равномерно окрашенная крупнозернистая протоплазма без выраженного деления на экто- и эндоплазму, сильно вакуолизирована (рис. 10). Пищеварительные вакуоли обычно круглые, различных размеров, содержат фагоцитированные бактерии (кокки, палочки), грибки, дрожжевые клетки, крахмальные зерна, иногда цисты и вегетативные формы простейших. Нередко в протоплазме наблюдаются колонии грибков Sphaerita, являющихся паразитами амеб. Часть вакуолей свободна от пищевых частиц. Часто наряду с круглыми вакуолями наблюдаются характерные для Entamoeba coli крупные продолговатые, веретеновидные вакуоли. Редко можно видеть короткие, широкие эктоплазматические псевдоподии (рис. 10,5). На фоне протоплазмы выступает круглое крупное ядро, 2,5—9,0 р (в среднем 4,8 ц) в диаметре. По структуре ядро Entamoeba coli в общем сходно с ядром дизентерийной амебы, но некоторые особенности позволяют без больших трудностей различать их между собой. По сравнению с ядром дизентерийной амебы ядро Entamoeba coli значительно богаче хроматином. Периферический хроматин на ядерной оболочке распределен неравномерно, в виде грубых глыбок или крупных зерен. Крупная, около 1,5 р в диаметре, круглая кариозома в виде черного тельца, окруженного светлой зоной, расположена эксцентрично, а не в центре, как у дизентерийной амебы. Между кариозомой и ядерной оболочкой распылены зерна хроматина, которые не имеют правильного радиально концентрического расположения, типичного для Entamoeba histolytica. Нередко в ядре Entamoeba coli, наряду с кариозомой, наблюдается эксцентрично расположенное второе нуклеарное тельце, иногда даже более крупное, чем кариозома.
71
Вегетативная крупная, адаптивная форма. Препарат из кровянисто-гнойного стула больного хронической дизентерией.
В препарате среди слизи, гнойных клеток и эритроцитов — вегетативные формы Entamoeba coli. Размер тела от 13 до 45 р,, в среднем 23 ц. Зернистая .протоплазма обычно резко и грубо вакуолизирована (рис. 11). Вакуоли круглые, крупные, до 15—18 ц в диаметре. Обычно у большинства амеб вакуоли свободны от пищевых включений, что указывает на преимущественно осмотическое их питание. У отдельных амеб
Рис. 10. Entamoeba coli.
А, Б — вегетативные обычные формы, В — двуядерная, Г — восьмиядерная циста.
в крупных вакуолях обнаруживаются фагоцитированные одиночные лейкоциты, лимфоциты и эритроциты (рис. 12). Нередко цитоплазма лейкоцитов оказывается лизированной, и тогда в вакуолях отчетливо заметны только их ядра, которые иногда также находятся в стадии распада. Красные кровяные тельца обычно встречаются внутри тела амебы в числе одного или, редко, двух. Они правильно круглой формы, черного цвета. У некоторых амеб отчетливо заметны широкие лопатообразные эктоплазматические псевдоподии. На фоне вакуолизированной протоплазмы ясно выступает крупное, кольцевидное ядро, размером от 3,2 до 10 ц. Средний размер ядра 5,7 р,, т. е. несколько крупнее диаметра ядра-обычной Entamoeba coli (4,8 р,). Эксцентрично, а нередко и в центре ядра, лежит крупная, круглая кариозома, вокруг которой сконцентрированы в виде трапеции зерна хроматина. Между сгруппировавшимися зернами хроматина и ядерной оболочкой нередко наблюдается более светлое пространство. Под ядерной оболочкой лежат в виде глыбок, а иногда и равномерным слоем, зерна хроматина. Второе
72
нуклеарное тельце нередко отсутствует. Эта форма амебы отмечалась многими авторами (Ш. М. Матевосян, В. Г. Гнездилов, Фауст — Faust, Тиссер и Нейман — Tisser a. Neumann, Линч — Lynch, Кессель — Kessel и др.) и ей приписывалось патогенное значение. Однако бесспорных доказательств ее патогенности еще не имеется.
Цисты. Правильной круглой формы, реже сферической или овальной. Диаметр цист от 10 до 28 ц, чаще 14—23 ц (в среднем 17—18 ц).
Рис. 11. Микроскопическая картина стула больного хронической дизентерией. Окраска по Гейденганну. Иммерсия.
Среди гнойных клеток (/) в большом числе крупные вегетативные, адаптивные формы Entamoeba coli forma magna (2) с грубо вакуолизированной протоплазмой; в отдельных особях фагоцитированные лейкоциты (<?) и эритроциты (4).
Циста окружена бесцветной неокрашенной оболочкой. Как правило, цисты дву- и восьмиядерные (рис. 10, В и Г), редко одноядерные и, как исключение, 4-, 6-, 12- и 16-ядерные. Ядра располагаются в различных плоскостях. В незрелых двуядерных цистах ядра круглой или, нередко,. овальной формы, располагаются по противоположным полюсам, в центре заметна светлая, занимающая большую часть цисты, крупная гликогеновая вакуоль. В зрелых восьмиядерных цистах гликогеновая вакуоль отсутствует, правильно круглой формы ядра разбросаны по всему телу цисты. Структура ядер в цистах та же, что и у вегетативных форм. Периферический хроматин под ядерной оболочкой обычно расположен глыбками. Кариозома занимает эксцентричное положение. Реже, чем у дизентерийной амебы, в цистах Entamoeba coli <
73-
Рис. 12. Вегетативные крупные, адаптивные формы Entamoeba coll forma magna,
A, £>, В — с фагоцитированными лейкоцитами и эритроцитами; Г—с фагоцитированной вегетативной формой EndoUmax папа; Д — свободная от включений, с резко вакуолизированной протоплазмой и псевдоподией.
обнаруживаются окрашенные в черный цвет палочковидные хроматоид-ные тельца, которые, в отличие от таковых дизентерийной амебы, имеют заостренные, нередко оскольчатые концы.
Entamoeba hartmanni Prow.
Имеет повсеместное распространение. Встречается в среднем примерно у 10% обследуемых. Живет в просвете толстого кишечника от слепой до прямой кишки. По источнику питания является комменсаль-ным организмом. В ткани хозяина не проникает, эритроцитов не фагоцитирует. Имеет важное дифференциально-диагностическое значение. Некоторыми авторами признается за мелкую расу дизентерийной амебы, что часто приводит к неправильным эпидемиологическим выводам. Поэтому Entamoeba hartmanni следует учитывать отдельно от дизентерийной амебы.
Вегетативная форма. Отыскание на препарате вегетативных форм часто требует значительного времени, в связи с тем, что они
Рис. 13. Entamoeba hartmanni.
а — вегетативная форма, б — з — одно-, дву- и четырехъядерные цисты.
быстро гибнут в выделенном стуле и обычно встречаются в небольшом числе. Амебы мелкие, не резко выступают на общем темном фоне препарата (рис. 13, а). Размер тела от 5 до 10 р. Форма чаще круглая. Редко видны псевдоподии. Мелкозернистая протоплазма не разграничивается на экто- и эндоплазму. В вакуолях протоплазмы — бактерии. Фагоцитированных эритроцитов никогда не отмечается. Мелкое, пузырьковидное, округлое ядро от 1,5 до 3,5 р, в диаметре, имеет чаще центрально расположенную звездчатую кариозому. Под ядерной оболочкой обычно равномерным слоем, а не серповидно, как у просветной формы дизентерийной амебы, располагаются зернышки хроматина.
Цисты. Имеют значительное сходство с цистами дизентерийных амеб, но отличаются более мелкими размерами — 5—10 р, в диаметре. По форме правильно круглые или, редко, овальные, окружены в виде каймы тонкой бесцветной оболочкой (рис. 13, б—з). Сравнительно с цистами дизентерийной амебы обычно окрашиваются более интенсивно. Эта особенность отчетливо выступает на препаратах с цистами обоих видов амеб. Цисты Entamoeba hartmanni бывают одно-, дву- и четырехъядерными. Круглые мелкие ядра, от 5 до 3 р в диаметре, имеют ту же структуру, что и ядра вегетативных форм. Серповидное расположение зерен хроматина под ядерной оболочкой наблюдается редко.
75
Незрелые одноядерные и двуядерные цисты имеют ядра бблыпего диаметра, чем зрелые четырехъядерные. Чаще и в значительно большем количестве, чем цисты дизентерийных амеб, они содержат окрашенные в черный цвет палочковидные, с округленными концами, хроматоидные включения. Обилие этих включений как в зрелых, так и в незрелых пистах нередко затрудняет определение числа ядер и их структуры. Гликогеновые вакуоли, в виде светлых участков в протоплазме, выражены наиболее отчетливо в одноядерных цистах.
Jodamoeba biitschlii Prow.
Относится к непатогенным кишечным амебам. Живет в просвете толстого кишечника. Питается бактериями, преимущественно кокками. Тканей кишечника не инвазирует, эритроцитов не фагоцитирует. Типичный комменсал. Распространена повсеместно. Встречается в среднем у 10% обследуемых. Имеет дифференциально-диагностическое значение.
Вегетативная форма. Тело обычно округлое, 5—25 ц в диаметре, чаще 8—13 ц. Мелкозернистая протоплазма не разграничена на
Рис. 14. Jodamoeba biitschlii.
а — одноядерная вегетативная форма, б — двуядерная, в, .’ — цисты.
экто- и эндоплазму, содержит много мелких, круглых вакуолей с большим количеством фагоцитированных бактерий (рис. 14). Иногда протоплазма как бы нафарширована бактериями. Пузырьковидное ядро, 3—5 в диаметре, содержит центрально расположенную, круглую, крупную, компактную кариозому, которая занимает приблизительно половину объема ядра. Ядерная оболочка обычно свободна от зерен периферического хроматина и потому слабо заметна. От кариозомы к ядерной оболочке тянутся короткие, нежные, тонкие нитевидные образования. Кариозома окружена светлой зоной. Иногда в ядре паразитируют грибки Sphaerita.
Цисты. По сравнению с цистами других видов простейших характеризуются неправильной формой, хотя бывают округлыми или овальными. Размер их 7—18 ц, чаще 8—12 ц. Цисты одноядерные. Ядро круглое, с выраженной ядерной оболочкой и с прилегающей к одной из ее сторон крупной компактной кариозомой. В светлой зоне ядра иногда заметны зерна хроматина. Характерным для цист этой амебы является наличие в протоплазме крупной гликогеновой вакуоли, занимающей почти половину, а иногда и большую часть цисты. В фиксированных и окрашенных препаратах гликогеновая вакуоль имеет вид резко ограниченного светлого, неокрашенного пространства. Хроматоидных телец не бывает.
76
Endolimax папа Wen. et O’Conn.
Карликовая амеба относится к числу непатогенных амеб. Живет в просвете толстого кишечника. Питается бактериями и прочими пищевыми частицами, находящимися в содержимом кишечника. Тканей не инвазирует. Эритроцитов не фагоцитирует. Распространена повсеместно. Встречается как у здоровых лиц, так и у кишечных больных, обнаруживается у 25 % обследуемых.
Вегетативная форма. Характеризуется мелкими размерами, от 5 до 12 ц. В постоянных препаратах чаще наблюдается в округленном состоянии, диаметром около 7 ц. Мелкозернистая протоплазма не дифференцирована на экто- и эндоплазму, вакуолизирована и обычно содержит значительное число мелких бактерий — кокков, реже палочек
Рис. 15. Endolimax папа, а, б — вегетативная форма, в, г —цисты.
(рис. 15). Ядро около 2 ц в диаметре, круглое, с центрально расположенной крупной, компактной кариозомой, состоящей из отдельных зерен хроматина. Ядерная оболочка слабо заметна. Кариозома, окруженная светлой зоной, имеет вид «глазка». На удачно окрашенных препаратах удается заметить тонкие нити, связывающие кариозому с ядерной оболочкой.
Цисты. Чаще овальной или сферической формы, редко круглой, нерезко выделяются на окружающем фоне. Размер от 5 до 9 ц. Встречаются незрелые одно-, двуядерные и зрелые четырехъядерные. В светлосерой протоплазме отчетливо заметны ядра с компактными кариозо-мами в виде «глазков». Кариозомы обычно прилегают к слабо заметной ядерной оболочке. Хроматоидных телец цисты не содержат. Редко удается видеть в двуядерных цистах нерезко ограниченные гликогеновые вакуоли.
Dientamoeba fragilis Jep. et Dob.
Непатогенная амеба. Живет в толстом отделе кишечника. Питается бактериями. Эритроцитов не фагоцитирует. Тканей сравнению с другими кишечными амебами встречается крайне редко. В Советском Союзе отмечены лишь отдельные случаи нахождения этой амебы. Обнаруживается только в жидком стуле. Цисты неизвестны. Вопрос о способе заражения остается открытым.
Вегетативная форма — от 4 до 12 ц (в среднем 8—9 ц). В отличие от других амеб характеризуется наличием в мелкозернистой, вакуолизированной протоплазме двух сходных по своему строению ядер (рис. 16), диаметр которых 1,0—2,5 ц. Крупная, компактная кариозома ядра состоит из шести хроматиновых зерен. Ядерная оболочка свободна от
зерен хроматина. Между кариозомой и ядерной оболочкой светлая зона. Наряду с двуядерными встречаются и одноядерные амебы. Вегетативные
77
не инвазирует.
Рис. 16. Вегетативная форма Dientamoeba fragilis.
формы Dientamoeba fragilis по своей морфологии весьма сходны с двуядерными вегетативными формами Jodainoeba butschlti, которые нередко встречаются (до 14% случаев), наряду с одноядерными, у кишечных больных в стуле, изобилующем патологическими примесями — слизью, кровью, гноем (Д. В. Волжинский, 1948). Отмечаемое сходство и отсутствие цист позволяют предполагать, что Dientamoeba fragilis, возможно, является адаптивной формой Jodamoeba biltschlii, возникающей в связи с изменением условий существования в организме хозяина.
Entamoeba gingivalis Gros
Открыта и описана в России Г. Гросом в 1849 г. (первый случай обнаружения амеб, паразитирующих у человека). Распространение всесветное. Встречается чрезвычайно часто как у здоровых лиц (до 80%), так и у стоматологических больных (при альвеолярной пиорее до 100% —А. Ф. Тумка, 1955). Типически живет в ротовой полости. Обнаруживается в зубном налете, в карманах десен, в гное при амфодонтозе. гингивитах и других заболеваниях полости рта. Питается бактериями, особенно часто ядрами лейкоцитов — «слюнными тельцами», которые обычно в большом числе обнаруживаются в протоплазме амеб. Редко фагоцитирует неповрежденные лейкоциты и эритроциты. Кроме ротовой полости, обнаруживается в мокроте при бронхоэктазиях (Н. Г. Алексеев), в гное абсцессов легких, при раковых заболеваниях в легких, при остеомиелитах челюстей (А. Ф. Тумка, 1955). Патогенное значение этой амебы оконча-
Рис. 17. Вегетативная форма Enta- тельно не выяснено. Есть основания moeba gingivalis.	думать о причастности ее в отдельных
случаях к затяжным заболеваниям полости рта (типа амфодонтозов), особенно, когда она встречается в большом количестве и имеет крупные размеры. Очевидно, амеба играет какую-то роль в паразитоценозе ротовой полости, хотя эта роль остается неизученной. В жизненном цикле амебы известны только вегетативные формы. Цист не образует. Заражение, видимо, происходит при поцелуях, через посуду, кружки, ложки и т. п.
Вегетативная форма в постоянных препаратах (рис. 17) имеет от 5 до 30 ц в диаметре, чаще 8—15 ц. Нередко отмечаются отчетливо выраженные эктоплазматические псевдоподии. Мелкозернистая, вакуолизированная протоплазма обычно содержит бактерии, ядра лейкоцитов («слюнные тельца») и в редких случаях эритроциты (при остеомиелитах челюстей). Пузырьковидное, круглое ядро около 3 ц в диаметре, по структуре в общем сходно с ядром дизентерийной амебы. Под ядерной оболочкой располагаются, часто равномерным слоем, зерна хроматина. В центре ядра или, реже, эксцентрично лежит круглая, мелкая кариозома.
Lamblia intestinalis Blanch.
(синоним — Giardia intestinalis Kunst.)
Лямблия относится к патогенным простейшим. Считается возбудителем кишечно-протозойного заболевания, известного под названием лямблиоза, клинические формы которого могут быть различными, 78
Лямблии, в отличие от других видов простейших, живут не в толстом, а в тонком кишечнике, главным образом в двенадцатиперстной кишке и верхней трети тощей кишки. В редких случаях поселяются в желчном пузыре, печени, в подвздошной кишке и, при отсутствии кислотности, иногда могут быть обнаружены в желудке. Тонкий кишечник всегда изобилует переваренной и готовой к усвоению пищей. С этой особенностью среды обитания связывают способность лямблий к осмотическому питанию. Цитостома у них нет и оформленных частиц пищи они не заглатывают. Прикрепляясь посредством присасывательного диска к эпителиальным клеткам слизистой кишечника, лямблии поселяются главным образом в пространствах между ворсинками, часто скапливаясь здесь в огромном количестве, и нередко эти пространства выглядят как бы нафаршированными паразитами. По подсчетам М. А. Яси-новского на 1 см2 слизистой кишечника кролика встречается свыше миллиона лямблий. На исключительно высокую интенсивность инвазии человека лямблиями указывает число их цист, выделяемых с фекалиями в течение суток. Количество цист обычно исчисляется в пределах одного миллиарда и нередко выше.
Лямблии не проникают в ткани хозяина. Однако, скапливаясь в огромном количестве на слизистой кишечника, они механически выключают определенную ее часть от переваривания и усвоения углеводов. Беспрерывно то прикрепляясь, то открепляясь от клеток слизистой кишечника и вызывая своими жгутиками постоянные раздражения нервных окончаний, лямблии могут быть причиной нарушения функций не только желудочно-кишечного тракта, но и функций печени и нервной системы. Возможно, что патогенное воздействие лямблий в известной мере определяется и продуктами метаболизма паразитов, а также и их антиферментативными свойствами, благодаря которым они, видимо, и могут жить в тонком отделе кишечника.
Лямблии имеют всесветное распространение, встречаются у здоровых групп населения и у страдающих теми или другими заболеваниями, особенно кишечными. При обследовании взрослого населения они обнаруживаются в среднем у 10% обследованных (при колебаниях от 4 да 25%). Значительно чаще заражены лямблиями дети, особенно дошкольного возраста, в среднем 25% при колебаниях от 10 до 70%, что позволяет характеризовать лямблий как паразитов преимущественно детского возраста. Подобно другим видам простейших кишечника, лямблии наблюдаются в двух формах — вегетативной и цистной.
Вегетативная форма. Обычно обнаруживается в препаратах, изготовленных из жидких фекалий с примесью комочков прозрачной, вязкой слизи, иногда окрашенной желчными пигментами в зеленоватый цвет. При просмотре препарата встречаются почти в каждом поле зрения одиночно разбросанные лямблии, а в некоторых полях зрения, особенно в комочках слизи, находят массовые скопления лямблий, как бы в чистой культуре. Нередко наряду с вегетативными формами в пре парате встречаются и цисты.
Тело вегетативной формы построено по двубоковой симметрии (рис. 18, Б, а). Со спинной и брюшной стороны оно грушевидное,, с округлым передним концом и заостренным задним, сбоку полугруше-видное, ковшеобразное или серповидное, с уплощенной вентральной поверхностью, выпуклой дорзальной и загнутым вверх задним, хвостовым концом. На вентральной поверхности, в передней ее половине, имеется глубокое вдавление, называемое присасывательным диском, или «присоской», посредством которой паразит прикрепляется к клеткам кишечного эпителия. Тело вегетативной формы 10—18 р в длину (в сред-
79
нем 12—14 ц) и 8—10 ц в ширину. Два круглых ядра и четыре пары жгутиков находятся симметрично от срединной линии тела. Ядра с отчетливо выраженной ядерной оболочкой и крупной, центрально расположенной кариозомой, окруженной светлой, прозрачной зоной, лежат
а
Рис. 18. Lamblia Intestlnalis.
А — срез тонкого кишечника мыши. Лямблии в просветах между ворсинками. Б —вегетативные формы и цисты.
а — вегетативная форма, вид вверху; б — то же, вид сбоку; в — циста.
1 — ядро, 2 — блефаропласт, 3 — аксостиль, 4— нарабазальное тело.
в передней трети тела под «присоской». Кариозомы ядер отчетливо выделяются на фоне тела в виде «глазков». На удачно окрашенных препаратах между ядрами можно видеть три пары базальных зернышек, называемых блефаропластами, от которых начинаются три пары жгутиков — передняя, средняя и вентральная. Передняя пара жгутиков 80
направляется вперед, перекрещивается так, что жгутик правой стороны идет на левую сторону и, наоборот, левый жгутик на правую сторону. Фибрилла переднего жгутика идет по краю присоски, ограничивая ее таким образом спереди. По выходе из протоплазмы, жгутик становится свободным. Средняя пара жгутиков начинается от второй пары бле-фаропластов, идет назад, частично ограничивая сбоку изнутри край присоски, расходится от середины тела в стороны и свободно выходит наружу. Вентральная пара жгутиков, также начинаясь от блефаропла-стов, направляется назад и выходит из тела свободно. Четвертая пара жгутиков — хвостовые, или каудальные — связана с парой блефаропла-стов, расположенных на заднем конце тела. На окрашенных гематоксилином препаратах заметна только та часть жгутиков, которая проходит внутри тела, свободные же части жгутиков обычно незаметны. Посередине тела видны две опорные продольные нити — аксостили. Приблизительно в средней части тела лежат в поперечном или косом направлении один или, реже, два окрашенных в черный цвет довольно крупных запятовидных, треугольных или полулунных образования, называемых парабазальными телами.
Цисты. Всегда правильной овальной формы, с ясно выраженной двуконтурной оболочкой. При фиксации содержимое цисты, нередко уже до этого уплотненное, еще больше сжимается и отслаивается от оболочки, в результате чего тело цисты обычно оказывается отделенным от нее светлой неокрашенной зоной. Часто эта зона имеет серповидные очертания. Цисты достигают 10—14 ц в длину и 6—10 ц в ширину. На одном из полюсов цисты отчетливо выступают тесно прилежащие друг к другу 2 или 4 ядра. Крупные, круглые кариозомы, окруженные светлой неокрашенной зоной и тонкими кольцевидными ядерными оболочками, выделяются на фоне протоплазмы, как и у вегетативных форм, в виде «глазков». Ядра часто лежат в различных плоскостях. Помимо ядер в протоплазме заметны свернутые остатки жгутиков, аксостиль и парабазальные тела. Общий вид и строение цист, как и вегетативных форм, настолько типичны, что трудностей для диагностики они обычно не представляют. Как правило, в препаратах цисты обнаруживаются в больших количествах, нередко до 3—5 в поле зрения при микроскопии с иммерсионным объективом.
Chilomastix mesnili Wen.
Непатогенный биченосец. Живет в толстом кишечнике и, возможно, в нижних отделах тонкого. Питается бактериями. Эритроцитов не заглатывает. Тканей не инвазирует. Распространен повсеместно. Встречается как у здоровых лиц, так и у страдающих кишечными заболеваниями. Частота обнаружения обычно колеблется в пределах 3—10% к числу обследуемых. Наблюдается в виде вегетативных форм и цист. Первые обнаруживаются в жидком, вторые — в оформленном стуле.
Вегетативная форма. Тело 6—18 ц в длину (чаще 13 ц) и 4—8 ц в ширину, удлиненно грушевидной формы, с широким, округлым передним концом и заостренным вытянутым задним (рис. 19, а). От переднего конца тела вперед отходят три тонких жгутика, четвертый — ротовой — идет назад и лежит в ротовом отверстии — цитостоме. Последний в виде углубления расположен в передней трети тела и снабжен двумя губами с опорными фибриллами по краям. Изогнутые опорные фибриллы губ цитостома обычно заметно выделяются на фоне протоплазмы. У переднего конца тела находится пузырьковидное ядро с небольшой, эксцентрично расположенной кариозомой. Между ядерной
6 Зак. 3420. Лабораторный практикум медицинской паразитологии.	81
Рис. 19. Chilomastix mesnili. a — вегетативная форма, б— циста
оболочкой и кариозомой в лининовой сети разбросаны мелкие хроматиновые зернышки, которые часто концентрируются в виде полулуния на одной из сторон ядерной оболочки. Впереди ядра лежат блефаро-пласты, в виде группы черных зернышек, от которых и берут свое начало жгутики. Мелкозернистая протоплазма жгутиконосца в вакуолях часто содержит большое число заглоченных бактерий — кокков и палочек.
Цисты. Одноядерные, грушевидной или лимонообразной формы («лимончики»), с двуконтурной оболочкой, 5—10 н в длину и 4—7 ц в ширину (рис. 19,6). На переднем суженном конце тела отчетливо заметно характерное утолщение оболочки в виде светлого колпачка. Чаще на границе передней и средней трети тела цисты, сбоку от
средней линии, расположено крупное, пузырьковидное ядро с большой кариозомой, вплотную прилегающей к оболочке. Впереди ядра — группа блефаропластов. Приблизительно посередине тела от переднего к заднему концу тянется в протоплазме черная, скобообразно изогнутая опорная фибрилла цитостома и иногда заметны вторая фибрилла и жгутик.
Рис. 20. Trichomonas elongata
Trichomonas elongata Steinb.
(синонимы — Trichomonas tenax Dob., Trichomonas buccalis Good, et Well.)
Считается непатогенным простейшим. Живет в ротовой полости, обычно в зубном налете, карманах десен при заболеваниях альвеолярной пиореей и др. Частота встречаемости в ротовой полости— до 35%. Этот жгутиконосец имеет всесветное распространение. Заражение — через слюну при поцелуях и через загрязненную посуду. Нередко обнаруживается одновременно с Entamoeba gingivalis.
Вегетативная форма Trichomonas elongata (рис. 20) по своему строению сходна с кишечной трихомонадой. Тело грушевидное, 5—18 ц в длину, в среднем — 6,5 ц. Овальное или круглое ядро лежит у переднего конца тела, имеет мелкую кариозому и рассеянные по ядру хроматиновые зерна. От блефаропластов отходят 4 передних жгутика. По свободному краю ундулирующей мембраны тянется аксиальная нить. Мембрана не доходит до заднего конца тела и не имеет свободного жгутика. Тонкий аксостиль идет посередине тела и заканчивается на заднем конце торчащим шипиком. На перед-нем конце тела помещается ротовое отверстие. В вакуолях протоплазмы заметны бактерии, иногда в препаратах от больных пиореей — заглоченные лейкоциты.
Имеется парабазальное тело, которое лежит между аксостилем и ундулирующей мембраной и тянется от переднего конца до середины тела. Обычно оно слабо заметно. Цист не образует.
82
Trichomonas hominis Dav.
Частый паразит кишечника человека. Обычно встречается у больных кишечными заболеваниями в жидком, кашицеобразном, водянистом или слизистом стуле (у 20% обследуемых) и очень редко в оформленном. При приеме солевого слабительного здоровыми лицами в их жидком стуле трихомонада обнаруживается так же часто, как и у кишечных больных. Обычно является безвредным комменсалом. Живет в толстом кишечнике, особенно в слепой кишке и, возможно, в нижнем отделе тонкого кишечника. Питается бактериями. При язвенных процессах в толстом кишечнике в случаях амебной дизентерии или язвенного колита невыясненной этиологии нередко обнаруживается с заглочен-
Рис. 21. Вегетативные формы Trichomonas hominis.
а —обычная, комменсальная, форма с заглоченными бактериями; б» в — с заглоченными эритроцитами.
ными эритроцитами, иногда с двумя и даже тремя (рис. 21). В литературе имеются указания, что этот жгутиконосец способен инвазиро-вать стенки кишечника. Таким образом, при определенных условиях существования в организме хозяина этот паразит, обычно безвредный, может приобрести болезнетворные свойства. Он часто обнаруживается в разнообразных сочетаниях с другими видами простейших. Тело грушевидное или овальное, 5—20 ц в длину (чаше 8 ц) и 5 ц в ширину (см. рис. 21). Имеет обычно 4 передних жгутика, которые на препаратах, окрашенных гематоксилином, незаметны или заметны весьма слабо. На переднем конце тела помещается одно круглое или овальное ядро с эксцентрично расположенной в нем мелкой кариозомой. Под ядерной оболочкой и внутри ядра находятся зерна хроматина. Впереди ядра лежит группа зернышек — блефаропластов, от которых и начинаются жгутики. Возле ядра на переднем конце тела заметно, в виде более светлого углубления, ротовое отверстие — цитостом. Посередине, вдоль тела проходит аксостиль, играющий роль опорной нити. Суженный задний конец тела вместе с заканчивающимся в нем аксостилем имеет вид торчащего шипика. По одной из сторон тела, начиная от переднего конца до заднего, тянется ундулирующая мембрана в виде более светлой серповидной полосы, прилегающей сбоку к телу паразита. По свободному краю мембраны проходит аксиальная нить, которая, начинаясь впереди от блефаропласта, идет назад и заканчивается на заднем конце тела свободной частью жгутика. Цисты неизвестны.
6*	83
Enteromonas hominis Da Fons.
(синоним — Tricercomonas intestinalis Wen. et O’Conn.)
Мелкий непатогенный жгутиконосец. Точная локализация его не установлена, вероятнее всего живет в толстом кишечнике. Статистических данных о распространении и частоте встречаемости у человека имеется мало. Несомненно, что этот вид обнаруживается значительно реже, чем другие жгутиконосцы. Встречается в виде вегетативных форм и цист.
Вегетативная форма. Имеет овальное или округлое тело, 4 8 и в длину и 3—6 р в ширину (рис. 22, Д, /). В округленно.м переднем
Рис. 22. Enteromonas hominis (Л) и Embadomonas intestl-nails (Б).
7 — вегетативная форма, 2 —циста.
конце его находится пузыревидное ядро с крупной, центрально расположенной кариозомой. Впереди ядра лежат блефаропласты, от которых берут начало жгутики. Из них три свободных направлены вперед, один жгутик, прикрепленный к поверхности тела, идет назад. Ундулирующая мембрана отсутствует. Цитостома нет. Пища (бактерии), видимо, фагоцитируется телом жгутиконосца, подобно тому, как это свойственно амебам.
Цисты. Овальные, 6—8 ц в длину и 3,5—5 ц в ширину. Своим внешним видом похожи на цисты Endolimax папа и более отдаленно — на цисты лямблий. Цисты бывают дву- и четырехъядерные. Ядра обычно расположены на полюсах, по одному в двуядерных цистах и по два в четырехъядерных. Крупная кариозома окружена светлой зоной, и потому ядра, как и у лямблий, имеют вид «глазков». На удачно окрашенных препаратах в протоплазме заметна фибрилла, представляющая остаток заднего жгутика. В некоторых цистах наблюдаются мелкие хроматоидные тела.
Embadomonas intestinalis Wen. et O’Conn.
Самый мелкий жгутиконосец из паразитирующих в кишечнике человека. Относится к непатогенным формам. Точная локализация в кишечном тракте неизвестна. Данных о степени заражения человека этим жгутиконосцем и его распространении недостаточно. В общем, можно сказать, что заражение им отмечается редко. Встречается в виде вегетативных форм и цист.
Вегетативная форма. Тело грушевидной формы (рис. 22, Б). Длина 4—5 ц, ширина 2,5—4 ц. Круглое ядро с центрально расположенной кариозомой лежит у переднего конца тела. Рядом с ним находится ротовое отверстие, края которого имеют опорные фибриллы. Впереди ядра находятся блефаропласты, от которых начинаются два жгутика. Один из них направлен вперед, а другой идет назад и частично 84
лежит внутри ротового отверстия. В протоплазме отмечаются заглоченные мелкие бактерии.
Цисты. Похожи на цисты Chilomastix mesnili, но меньших размеров, 4—5 ц в длину. Кроме ядра, в них также заметны опорные фибриллы цитостома в виде тонких темноокрашенных изогнутых нитей.
Balantidium coli Malm.
Единственная инфузория, паразитирующая в толстом кишечнике человека. Балантидий относится к числу патогенных форм, является возбудителем балантидиоза. Клинические формы заболевания варьируют и протекают при симптомах энтероколита, колита или кровавого поноса (балантидная дизентерия). Иногда имеет место паразитоноси-тельство. Таким образом, между хозяином и паразитом наблюдаются
1
Рис. 23. Микроскопическая картина стула при балантидной дизентерии. Окраска по Гейденгайну. Иммерсия.
Вегетативные формы балантидиев (7) среди эритроцитов (2) и гнойных клеток (3).
две основные формы взаимоотношений, выражающиеся у хозяина или только носительством паразита или вызываемым им заболеванием. У здоровых носителей балантидии более мелких размеров и содержат в пищеварительных вакуолях бактерии, грибки, крахмал и прочие пищевые частицы. У больных балантидной дизентерией паразиты более крупных размеров, включают в большом количестве эритроциты и лейкоциты (рис. 23) и всегда инвазируют ткани кишечной стенки, вызывая глубокие язвенные поражения. Инвазируют ли балантидии ткани
85
кишечника, когда балантидиоз протекает при явлениях энтероколита и колита, точно еще не установлено. Балантидии распространены повсеместно. Однако заражение ими человека наблюдается относительно редко — 0,5—1 % среди больных кишечными заболеваниями. Чаще заражение балантидиями отмечается в свиноводческих районах, у лиц, имеющих контакт со свиньями. Свинья — естественный хозяин балантидиев и источник заражения ими человека. Таким образом, балантидиоз является типичным зоонозом. Заражение свиней балантидиями повсеместно, чрезвычайно высоко (50—80%). Балантидии найдены также
Рис. 24. Balantidium coli.
А — вегетативная форма с заглоченными бактериями, Б — то же с заглоченными эритроцитами, В—циста.
у диких кабанов. Для свиней они являются безвредными комменсалами. В кале свиней обнаруживаются как вегетативные формы балантидиев, так и их цисты. У человека цисты образуются крайне редко.
Вегетативная форма. Имеет самые крупные размеры по сравнению со всеми простейшими кишечника человека. Длина овального тела колеблется от 30 до 200 ц (в среднем около 75ц), ширина — от 30 до 65 ц (в среднем 50 ц). Передний конец тела более суженный, чем широкий задний (рис. 24). Оболочка тела — пелликула — покрыта короткими ресничками, идущими параллельными рядами. На препаратах, окрашенных гематоксилином, они слабо заметны. На переднем конце расположено ротовое отверстие — цитостом; оно продолжается в виде воронкообразного углубления в более узкий пищевод — цито-фаринкс, который заканчивается в протоплазме. Ротовая область снаб-86
жена более длинными ресничками. На заднем конце тела иногда видно маленькое анальное отверстие — цитопиг. В протоплазме задней трети тела можно наблюдать сократительную вакуоль в виде светлого округлого образования, которая у дегенерирующих особей занимает почти половину тела. Протоплазма дифференцирована на более тонкий прозрачный слой, прилегающий к оболочке тела — эктоплазму, и остальную массу — эндоплазму. В последней много пищеварительных вакуолей, содержащих бактерии, грибки, зерна крахмала, заглоченные эритроциты и лейкоциты в различных стадиях их переваривания. На фоне протоплазмы, чаще посередине тела, отчетливо выделяется темной окраской и бобовидной формой крупное ядро — макронуклеус, около 20 ц в длину и 10 р, в ширину. В углублении макронуклеуса лежит второе ядро — микронуклеус в виде небольшого зернышка. Видеть его удается только при удачном положении макронуклеуса. Обычно макронуклеус покрывает микронуклеус и потому его не видно.
Цисты. Крупные круглые образования, 40—65 р в диаметре, с двуконтурной оболочкой. В зернистой протоплазме отчетливо заметно ядро — макронуклеус. Ресничного покрова нет (рис. 24, В).
ИССЛЕДОВАНИЕ ВЕГЕТАТИВНЫХ ФОРМ ПРОСТЕЙШИХ В ЖИВОМ СОСТОЯНИИ
Как отмечено выше, вегетативные формы кишечных простейших, как правило, встречаются в стуле жидкой или кашицеобразной консистенции. Способность вегетативных форм переживать определенное время в выделенных фекалиях и сохранять при этом типичные для каждого вида морфо-биологические особенности позволяет диагностировать их в живом состоянии. Дифференциальными признаками являются: для амеб — форма, размер тела, видимость ядра, способ образования псевдоподий, характер передвижения, деление протоплазмы на экто- и эндоплазму, характер включений — бактерии, эритроциты и др.; для жгутиконосцев — размер и форма тела, количество жгутиков, характер передвижения, наличие или отсутствие ундулирующей мембраны, число ядер и их видимость; для балантидиев — размер, форма, движение, реснички, цитостом и др. В целях диагностики простейших по вегетативным формам в живом состоянии обычно применяют исследование материала в нативном мазке.
Приготовление нативного мазка
Вначале производят внешний осмотр стула, отмечая консистенцию, цвет, запах, патологические примеси — слизь, кровь, гной. Затем изготовляют мазок. Если стул слизистый, кроваво-слизистый, кроваво-слизисто-гнойный или водянистый со слизью, то тонкой деревянной палочкой (10—12 см длины, лучше с оскольчатыми концами) берут небольшой комочек слизи, помещают на предметное стекло, накрывают покровным стеклом, слегка его придавливают и микроскопируют препарат. Простейшие в этом случае наблюдаются в их естественной среде. Если в стуле имеется кровь, то предпочтительно брать комочек слизи, окрашенный кровью. Если стул кашицеобразный или полуоформленный, то сначала на предметное стекло наносят каплю физиологического раствора (NaCl — 0,85%), затем пачкают конец палочки в фекалиях, обмывают его в растворе до появления равномерной мути и накрывают каплю покровным стеклом. Часто приходится добавлять каплю физиологического раствора и при микроскопии комочков слизи, что облегчает
87
нахождение простейших. Мазок должен быть равномерно тонким, прозрачным. Толстый мазок затрудняет микроскопирование, нахождение и тем более диагностику простейших. Слишком же тонкий мазок уменьшает шансы их обнаружения. В процессе работы приобретается необходимый навык изготовления хороших мазков.
Для исследования простейших в нативных мазках иногда используют витальные краски — нейтральрот, метилблау, бриллианткрезил-блау, янусгрюн и другие в разведении 1 : 1000, 1 : 5000 и даже 1 : 10 000. Для наблюдения за подвижностью амеб при низкой комнатной температуре следует предварительно нагреть микроскоп (без оптики) в термостате или же осторожно подогреть мазок над пламенем спиртовки. Необходимо приобрести навык микроскопирования нативного мазка вначале при малом увеличении (объектив 8, окуляр 10 X, микроскоп системы «Прогресс»). Простейшие выделяются на фоне мазка более сильной преломляемостью света, а также активной подвижностью или изменением формы. Затем объект рассматривают при большом увеличении сухой системы. Следует еще раз подчеркнуть необходимость регулировки освещения во все время микроскопирования, так как правильное освещение в значительной мере определяет успешность исследования. Необходимо добиться четкого изображения изучаемого объекта. При просмотре нативного мазка, изготовленного из кашицеобразного стула, отмечаются остатки непереваренной пищи—растительная клетчатка, измененные и неизмененные мышечные волокна, споры и т. п., а в мазках из стула с патологическими примесями — слизь, кровь, гной — лейкоциты, красные кровяные тельца, макрофаги, клетки кишечного эпителия и др. Основным отличием вегетативных форм простейших в живом состоянии от различных образований, встречающихся в стуле, является их подвижность. Образования, похожие на простейших, но неподвижные и не меняющие своей формы даже при подогревании мазка, не должны служить объектом протозоологической диагностики.
Метод нативного мазка отличается простотой и доступностью для каждой лаборатории. Исследование нативного мазка обычно позволяет поставить совершенно точный диагноз амебной дизентерии по нахождению тканевых форм дизентерийных амеб с фагоцитированными эритроцитами, лямблиоза и балантидиоза по обнаружению в исследуемом стуле лямблий и балантидиев.
Исследование нативного мазка Entamoeba histolytica Schaud.
Е. histolytica f. magna (вегетативная крупная, тканевая форма). В нативном мазке, приготовленном из кроваво-слизистого стула от больного амебной дизентерией, в типичном случае наблюдаем следующую картину. При малом увеличении все поля зрения сплошь усеяны разбросанными в одиночку, а не склеенными в виде монетных столбиков красными кровяными тельцами в виде точечных зеленовато-желтых образований. На фоне кровяных телец наблюдаются прозрачные, сильно преломляющие свет образования крупного размера. Рассматривая эти образования, уже при малом увеличении можно заметить изменение их формы и даже передвижение. Эти подвижные образования изучают под большим увеличением. Размер живых неподвижных дизентерийных амеб колеблется от 18 до 45 р, вытянутые при передвижении амебы достигают иногда до 60 ц. Внутри протоплазмы легко заметить круглые, такого же цвета, как и в окружении амебы, фагоцитированные эритроциты, количество которых варьирует. Характерной
88
особенностью является отсутствие видимости ядра у живой амебы. Ядро становится заметным лишь на стадии отмирания, обычно в конце исследования, или при исследовании материала спустя длительное время после взятия, когда амебы вяло движутся или совсем неподвижны.
Наблюдая за амебами при температуре выше 20°, убеждаемся в активности их движения, которое осуществляется путем быстрого, внезапного выбрасывания светлых, эктоплазматических пальцевидных псевдоподий. Псевдоподии возникают то на одном, то на другом участке тела. В образовавшуюся псевдоподию бурно, вихреобразно переливается эндоплазма с заключенными в ней эритроцитами, и амеба передвигается. Вновь образуется псевдоподия, повторяется то же переливание эндоплазмы и, таким образом, происходит прогрессивно-поступательное движение амебы. Наряду с активно подвижными амебами, отмечаются отдельные особи, которые как бы «топчутся на месте».
Вместе с амебами в мазке обнаруживаются белые кровяные тельца, макрофаги, и, во многих случаях, кристаллы Шарко-Лейдена, изредка клетки кишечного эпителия. Нахождение в кровянистом стуле кристаллов Шарко-Лейдена без амеб заставляет заподозрить амебную этиологию заболевания, предпринять самые тщательные поиски амеб и провести ряд повторных исследований. Важно, чтобы врач-лаборант, исследующий кал на простейших, был знаком с анамнезом больного. Длительно рецидивирующие кровавые поносы со стулом «малинового желе», не поддающиеся обычному неспецифическому лечению, многократная и длительная госпитализация, несоответствие объективных данных с субъективными ощущениями (отсутствие явлений интоксикации, нормальная температура, относительно удовлетворительное самочувствие, в известной мере сохраненная работоспособность), проживание больного в местностях, эндемичных по амебной дизентерии — все это должно заставить и лечащего врача, и лаборанта предпринять тщательное протозологиче-ское исследование в целях выяснения вероятной амебной этиологии заболевания. При наличии такого анамнеза необходимо произвести многократные, повторные исследования и взять материал непосредственно из язв при ректороманоскопии. Точным и достоверным диагноз амебной дизентерии может считаться только в случаях, когда в исследуемом стуле обнаружены крупные, тканевые формы дизентерийных амеб с описанными выше признаками. Постановка диагноза амебной дизентерии у больных, не подвергавшихся специфическому антиамебному лечению, на основании микроскопии нативного мазка обычно не представляет' больших трудностей.
Е. histolytica f. tninuta (вегетативная мелкая, просветно-комменсаль-ная форма). В мазках среди остатков пищи — растительных клеток, мышечных волокон и детрита — амебы выделяются более сильной светопреломляемостью. Размер их варьирует от 7 до 24 |ы ( в среднем — 13 ,а). Деление тела на экто- и эндоплазму выражено лишь при образовании псевдоподий, а в неподвижном состоянии слабо или вовсе не отмечается. Удлиненные, пальцевидные эктоплазматические псевдоподии образуются менее быстро и не так бурно, как у крупной тканевой формы,, поступательное движение более умеренное. В эндоплазме никогда не бывает фагоцитированных эритроцитов. В пищеварительных вакуолях содержатся бактерии. Ядро незаметно. Эти амебы чаще обнаруживаются в небольшом числе (3—15 экземпляров на весь мазок). Нахождение большого количества их в активно подвижном состоянии при выраженном полиморфизме в стуле с патологическими примесями (слизь) указывает на начальную стадию заболевания амебиазом. В мазках от больных, страдавших острой амебной дизентерией, мелкие вегетативные формы
89'
также обнаруживаются обычно в большом количестве и при этом часто одновременно находят 1-, 2-, 4-ядерные цисты и кристаллы Шарко-Лейдена (рис. 9).
Entamoeba moshkovskii Chai.
У человека не паразитирует. Обнаруживается в осадках сточных вод, естественных водоемов, в грязи канализационных люков. Найдена в Москве, Минске (Л. Е. Чалая, 1941), Ленинграде (В. Г. Гнездилов, 1948), и, видимо, распространена широко. Эта амеба очень похожа на дизентерийную. Сходство настолько велико, что в известном смысле можно говорить о ней, как о своеобразном «биологическом двойнике» дизентерийной амебы, существующем в природе в свободном состоянии. Она является вполне подходящей «моделью» дизентерийной амебы и по-
тому может быть использована в учебных целях при прохождении практикума по протозоологии. Использование ее тем более важно, что часто необходимого материала с вегетативными формами дизентерийных амеб под руками не имеется. Для получения
Рис. 2d. Вегетативная форма Entamoeba moshkovskii.
культуры Entamoeba moshkovskii засевают грязь канализационных труб или осадок сточных вод на среду, состоящую из стерильного физиологического раствора (NaCl, 0,85%) и нормальной лошадиной сыворотки в соотношении 1 : 15. Перед засевом в пробирку добавляется 1—2 петли рисового крахмала. Для посева в пробирку со средой
вносят материал (грязь сточных вод) величиною с горошину или вишню. Пробирка оставляется при комнатной тем-
пературе (в условиях 37° амеба растет плохо). В первые дни разви-
ваются в большом количестве различные виды жгутиконосцев, инфузорий, в поверхностной пленке — амебы типа Limax. Приблизительно на 10—15-й день на дне пробирки появляются вегетативные формы энтамеб. На 10—20-й день делают пересев в пробирку с той же средой. Для пересева берут длинной пипеткой около 1 см3 осадка со дна пробирки. Обычно во втором пересеве на 8—10-й день наблюдаются уже в большом количестве вегетативные формы амеб, а через 15—20 дней наряду с ними появляются и цисты. Пересевы делаются через 10—12 дней. Для
исследования изготовляют обычный нативный мазок из осадка на дне
пробирки.
В зависимости от возраста и штамма культуры наблюдаются или крупные амебы типа Entamoeba histolytica forma magna, до 25 p и больше, или же мелкие — типа Entamoeba histolytica forma minuta, в среднем 13 ц, или же промежуточные между ними, около 16—18 р. Обычно в мазке обнаруживается громадное число амеб. Все поля зрения сплошь усеяны ими — активно-подвижными, быстро выбрасывающими типичные для дизентерийной амебы пальцевидные, эктоплазматические псевдоподии (рис. 25). Внутри эндоплазмы — фагоцитированные круглые зерна крахмала, которые вихреобразно вместе с протоплазмой переливаются в возникающие псевдоподии. Зерна крахмала различного размера и очень напоминают фагоцитированные эритроциты у дизентерийных амеб. Характер движения и способ образования псевдоподий у амебы почти такой же, как и у дизентерийной. Ядро в живом состоянии также незаметно, как это свойственно и дизентерийной амебе.
50
Наблюдения над Entamoeba moshkovskii в живом состоянии дают достаточно полное представление о размерах, форме и характере передвижения дизентерийной амебы и способе образования ею псевдоподий. Образующиеся в культуре в громадном количестве цисты, подобно цистам дизентерийной амебы, размерами 10—16 ц (в среднем 12р), бывают также 1-,2-,4-ядерными, с гликогеновыми вакуолями и хромато-идными включениями, но отличаются более толстой двуконтурной оболочкой. На фиксированных и окрашенных гематоксилином постоянных препаратах ядерная структура у Entamoeba moshkovskii в общем такая, как и у дизентерийной амебы (рис. 25).
Entamoeba coli. Schaud.
Обычная, мелкая. Часто встречается в кале здоровых лиц после приема солевого слабительного и у больных с кишечными расстройствами в жидком и кашицеобразном стуле. Как правило, обнаруживается округлой (неподвижной); лишь у отдельных экземпляров при длительном наблюдении можно видеть медленное образование широких коротких псевдоподий и весьма вялое передвижение. Протоплазма зернистая, без деления на экто- и эндоплазму, часто грубо вакуолизированная, содержит бактерии, иногда дрожжевидные клетки и нередко золотистого цвета колонии грибков Sphaerita. Часто удается наблюдать вытянутые или веретенообразные вакуоли, свободные от каких-либо включений. В протоплазме довольно отчетливо выраженное пузырьковидное ядро. Видимость ядра в живом состоянии, вялое образование псевдоподий и медленное передвижение представляют характерную особенность этой амебы. В ядре просвечивает кариозома, занимающая обычно эксцентричное положение. Число амеб в мазке варьирует от единичных до 3—5 в поле зрения. Размеры амеб колеблются от 15 до 35 р, (в среднем— 18ц).
Крупная (forma magna). 20—50 р в диаметре (в среднем 24 ц). Как правило, обнаруживается только в стуле, изобилующем патологическими примесями — слизью, кровью, гноем. При малом увеличении в мазке отмечаются сплошь гнойные клетки, эритроциты, часто кишечный эпителий и на фоне этих элементов сами амебы в виде более крупных и сильно преломляющих свет образований. При большом увеличении обращает внимание грубая вакуолизация протоплазмы, внутри которой у отдельных экземпляров встречаются фагоцитированные одиночные эритроциты и лейкоциты. Круглые, крупные вакуоли достигают 15—20 ц в диаметре. В протоплазме отчетливо просвечивает крупное пузырьковидное ядро с эксцентрично или центрально расположенной кариозомой. При наблюдении за амебой можно видеть, как то на одном, то на другом участке тела довольно быстро возникают эктоплазматические псевдоподии. Однако поступательного движения нет. Амеба, как правило, «топчется на месте». Численность амеб в мазке обычно большая. Различение их в нативном мазке от крупных тканевых форм дизентерийных амеб требует определенного опыта исследователя. Entamoeba coli forma magna встречается у больных при раке прямой кишки, папилломах толстого кишечника, язвенных колитах невыясненной этиологии, хронической бациллярной дизентерии и др. Нередко наряду с вегетативными формами попадаются и типичные для Entamoeba coli 8-ядерные цисты. Дифференцировать эту форму амебы от крупной, тканевой дизентерийной амебы сравнительно легко удается при исследовании фиксированных и окрашенных гематоксилином препаратов.
91
Entamoeba hartmanni Prow.
Мелкая амеба (6—10 ц). Наблюдать в живом состоянии удается только в совершенно свежих фекалиях. Разграничение на экто- и эндоплазму в состоянии покоя или отсутствует или выражено слабо. При движении образуются относительно удлиненные эктоплазматические псевдоподии. В мелкозернистой протоплазме, в качестве включений, бактерии. Видимость ядра плохая.
Jodamoeba biitschlii Prow.
Размеры от 8 до 26 ц (в среднем 12р,). Обычно вяло подвижная, образующая широкие, короткие эктоплазматические псевдоподии. В спокойном, неподвижном состоянии разделения на экто- и эндоплазму не наблюдается. В мелкозернистой протоплазме — фагоцитированные бактерии, преимущественно кокки. Имеет меньшую светопре-ломляемость, нежели Entamoeba coli и Entamoeba histolytica.
Endolimax папа Wen. et O’Conn.
Мелкая, 5—12 ц в длину, активно подвижная амеба. Образует длинные, пальцевидные эктоплазматические псевдоподии. В мелкозернистой протоплазме бактерии. При комнатной температуре амеба обычно быстро округляется и прекращает движение.
Dientamoeba fragilis Jep. et Dob.
Обладает активной подвижностью. Образует плоские, листообразные эктоплазматические псевдоподии. Протоплазма вакуолизирована и содержит бактерии.
Entamoeba gingivalis Gros.
Для изготовления нативного мазка вместо физиологического раствора (NaCl) можно брать слюну обследуемого, в которой и эмульгируется соскоб с зубного налета или отделяемое карманов десен. При микроскопировании мазка среди обильной микрофлоры, большого числа белых кровяных телец обнаруживаются подвижные амебы, вытянутые или округлые, 6—22 ц длины. Они выделяются большей преломляемостью света и слабым поступательным движением. Передвижение осуществляется посредством широких округлых эктоплазматических псевдоподий. В вакуолях протоплазмы содержатся фагоцитированные бактерии, зернистые зеленоватые включения — ядра лейкоцитов, иногда красные кровяные тельца. Количество амеб колеблется от единичных экземпляров на мазок до 3—5 в поле зрения при большом увеличении.
Lamblia intestinalis Blanch.
Вегетативные формы передвигаются при помощи 4 пар жгутиков, которые можно заметить в затемненном поле зрения. Движение лямблий активное, поступательное, относительно ровное, плавное. У некоторых экземпляров движение на месте двоякого рода — «качающееся» и вращательное (вокруг своей оси). Различная форма в зависимости от изменения положения (грушевидная, ковшеобразная) характерна для лямблии (стр. 79). Слабо заметны два ядра в виде более светлых участков 92
у переднего конца тела. Лямблии имеют 10—28 ц в длину (чаще 13 ц). В мазках из фекалий они обнаруживаются, как правило, в большом количестве, нередко наряду с цистами; особенно много лямблий в мазках из дуоденального содержимого.
Chilomastix mesnili Wen.
Вегетативные формы редькообразные, 6—18 ц в длину (чаще 13 ц). Встречаются в жидком и кашицеобразном стуле. Наряду с ними нередко наблюдаются и их лимонообразные цисты («лимончики»). Передний конец тела снабжен 4 жгутиками. Задний конец заострен, но не имеет шипика, характерного для трихомонад. Движение жгутиконосца слагается из толчкообразного поступательного и вращательного вокруг продольной оси тела. В мелкозернистой протоплазме видны заглоченные бактерии. Ядро незаметно или заметно очень слабо. Этот жгутиконосец отличается в живом состоянии от трихомонад формой тела, обычно более крупными размерами, отсутствием шипика на заднем конце тела и ундулирующей мембраны по боковой поверхности.
Trichomonas elongata Steinb.
Часто встречается наряду с Entamoeba gingivalis в зубном налете и в отделяемом карманов десен при альвеолярной пиорее. По внешему виду, форме, размерам, жгутикам, а также активности и способу передвижения сходна с кишечной трихомонадой. Имеются сообщения о нахождении Trichomonas elongata в мокроте при бронхоэктатических абсцессах легкого (Е. А. Хрущева и В. И. Кряжева, 1951; Н. Г. Алексеев, 1951), раковых заболеваниях легкого (А. Ф. Тумка, 1955), в миндалинах при хронических тонзиллитах, в желудочном содержимом при раке желудка. Этого жгутиконосца надежнее можно выявить методом культивирования.
Trichomonas hominis Dav.
Уже при малом увеличении и слабом освещении эти жгутиконосцы отчетливо заметны благодаря активной подвижности. Тело их 5—18 ц в длину (в среднем около 8 ц), грушевидное или овальное. На переднем более тупом и округленном конце тела 3—4 жгутика, редко 5. Они направлены вперед и длина их может превышать длину тела. У вялоподвижных или неподвижных экземпляров на заднем конце тела выступает в виде острого шипика конец аксостиля. На одной из сторон тела по волнообразному движению легко заметить ундулирующую мембрану, которая тянется от переднего конца до заднего и заканчивается свободной частью жгутика. В мелкозернистой протоплазме заметны вакуоли, содержащие бактерий. Ядро незаметно. Толчкообразное активно поступательное движение трихомонад сочетается с их вращательным движением вокруг продольной оси тела.
В мазках, приготовленных из кровянистого стула, нередко наблюдаются трихомонады более крупных размеров. Заглоченные эритроциты особенно отчетливо заметны у живых трихомонад. Обычно наблюдаются один или, редко, два и даже три эритроцита. В последнем случае тело трихомонады принимает неправильную форму с выпячиванием боковой поверхности соответственно положению эритроцитов. У дегенерирующих трихомонад иногда удается видеть амебовидное движение за счет выпячивания боковых поверхностей тела. Трихомонады остаются живыми в мазке до нескольких часов и гибнут при его подсыхании.
93
Enteromonas hominis Da Fons. и Embadomonas intestinalis Wen. et O’Conn.
Встречаются редко. Имеют грушевидную или овальную форму, являются самыми мелкими жгутиконосцами кишечника человека. По характеру движения сходны с трихомонадами. Мелкий размер жгутиконосцев служит одним из отличительных признаков от трихомонад.
Isospora belli Wen.
Паразитирует в кишечнике человека. До последних лет находки этой кокцидии считались редкостью. В настоящее время благодаря более широкому внедрению протозоологического исследования сообщения об обнаружении ее у человека в разных странах, в том числе и на территории СССР, появляются все чаще. И. 3. Лейтман и Л. И. Рогова
Рис. 26. Isospora belli.
Л —незрелая ооциста; Б —то же с двумя споробластами; В —зрелая ооциста с двумя споробластами, в каждом из них по четыре спорозоита.
(1951) в Ташкенте при обследовании детей в 30 случаях обнаружили заражение кокцидиями. Кокцидии имеют, по-видимому, повсеместное распространение. Относятся к числу патогенных форм простейших. Считаются возбудителем заболевания, известного под названием кокцидиоза. Живут и развиваются в эпителиальных клетках тонкого кишечника и, следовательно, являются тканепаразитами. Патогенное воздействие изучено недостаточно. Считается, что жизненный цикл Isospora belli сходен с таковым кокцидий кроликов и состоит из бесполой и половой стадий размножения. Бесполая стадия протекает в тканях тонкого кишечника. С фекалиями человека выделяются незрелые ооцисты кокцидий. Во внешней среде внутри ооцисты в результате повторных делений образуются два споробласта, внутри которых в каждом развиваются по 4 червеобразных спорозоита (рис. 26). Незрелые ооцисты при благоприятных условиях дозревают в течение 1—2 дней. Ооцисты встречаются в густо кашицеобразном, полуоформленном стуле. Обнаружить и изучить их легче удается при просмотре нативных мазков. Однако нахождение их связано с трудностями, так как обычно количество ооцист незначительно (чаще единичные в мазке), а сами ооцисты имеют вид светлых,
94
слабо преломляющих свет, прозрачных образований, снабженных двуконтурной оболочкой. Отыскивать и рассматривать их следует при слабом освещении. Ооцисты удлиненно-овальной формы (один конец округлен, другой чаще шееобразно вытянут), 25—33 ц в длину и 12—16 р, в ширину. Крупнозернистая протоплазма сконцентрирована в середине. Ядро в виде большого светлого пятна. Ооцисты длительное время выживают во внешней среде. В пробах фекалий, в которых были обнаружены незрелые ооцисты, на следующий день встречаются ооцисты с двумя споробластами и иногда со спорозоитами. Ооцисты с двумя споробластами бывают и в свежевыделенном стуле. Наряду с ооцистами в кале нередко обнаруживаются кристаллы Шарко-Лейдена. При исследовании крови человека, зараженного кокцидиями, наблюдается высокая эозинофилия, до 20% и выше.
Редкость и трудность диагностики кокциодиоза у человека связана не только с малым числом ооцист и с их прозрачностью, но, видимо, и с особенностями жизненного цикла паразита и вызываемого им заболевания. Предполагается, что в острый период заболевания кокцидиозом, когда больные страдают поносом, паразит размножается бесполым путем (шизогония), и ооцисты в стуле отсутствуют. С наступлением полового размножения (спорогония) паразита, когда у больных отмечается улучшение состояния, ооцисты появляются в оформленном или полу-оформленном стуле, но в этот период исследование кала больных обычно не проводится.
Balantidium coli Malm.
Диагностика этой инфузории в нативном мазке, благодаря крупным размерам тела, в среднем 75 ц в длину и 40 ц в ширину, уже при малом увеличении не представляет трудностей. Распознавание облегчается тем, что инфузория очень подвижна и встречается в большом количестве. При просмотре под большим увеличением яйцевидное тело ее светложелтоватого или сероватого цвета (в зависимости от количества и характера заглоченной пищи), имеет более суженный передний конец и округленный задний. Все тело покрыто рядами ресничек, мерцание которых легко наблюдать по краям тела, особенно отчетливо в фазоконтрастном микроскопе. На переднем конце или несколько сбоку ясно заметно воронкообразное углубление — ротовое отверстие, или цитостом, окруженное рядами более длинных ресничек, которые благодаря своему постоянному движению загоняют в него пищевые частицы. Протоплазма дифференцирована на два слоя — на тонкий, более сильно преломляющий свет, прозрачный, прилегающий к оболочке тела — эктоплазму и остальную массу — эндоплазму. Последняя зернистая, нередко грубо вакуолизированная, содержит в вакуолях заглоченные бактерии, зерна крахмала, грибки и другие пищевые частицы. На фоне протоплазмы, чаще посередине тела, удается видеть более светлое, бобовидное ядро — макронуклеус. Микронуклеус незаметен. У балантидиев постоянно можно наблюдать сократительные вакуоли в виде розовых пузырьков. Их может быть несколько. Обычно отчетливо заметна такая вакуоль в задней трети тела; у дегенерирующих особей она занимает почти половину тела. Наблюдая за вакуолями, можно убедиться в их периодическом сокращении, опорожнении и последующем образовании новых вакуолей. На мазках из кровянистого стула от больных балантидной дизентерией внутри балантидиев наблюдаются заглоченные в большом количестве эритроциты и лейкоциты. Часто такие балантидии, как бы нафаршированные эритроцитами, имеют ярко-розовую окраску. Активное движение
95-
балантидиев слагается из поступательного и вращательного вокруг продольной оси тела. При прохождении их через препятствия тело сжимается, как бы деформируется, а затем вновь принимает свою типичную форму. У некоторых лиц, особенно у носителей, удается найти лишь единичные экземпляры при одновременном просмотре многих мазков.
Следует помнить, что в выделении балантидиев с калом отмечается периодичность. Наблюдаются промежутки в 1—3 дня, когда в испражнениях, несмотря на достоверное заражение, балантидии не обнаруживаются (В. Б. Сченснович, 1949). Это обстоятельство требует проведения ряда повторных исследований с промежутками в 3—4 дня.
ИССЛЕДОВАНИЕ ЦИСТ КИШЕЧНЫХ ПРОСТЕЙШИХ В ЙОДНОМ РАСТВОРЕ
Диагностика простейших может проводиться по цистам в мазках, окрашенных йодным раствором (стр. 59). Исследование в йодном растворе позволяет не только ознакомиться с особенностями, присущими цистам отдельных видов простейших, но и в большинстве случаев ставить точную их диагностику, что имеет особо важное значение в практической работе.
Приготовление мазка
Конец деревянной палочки пачкается в фекалиях и обмывается в капле йодного раствора, нанесенной на предметное стекло. Достигнув равномерности мути, каплю накрывают покровным стеклом и препарат микроскопируют. Количество йодного раствора и вносимого материала не должно быть большим. Толстый мазок затрудняет просмотр, слишком тонкий уменьшает возможности обнаружения цист. В случае избытка йодного раствора его удаляют фильтровальной бумагой или рядом с первым кладут другое покровное стекло. Исследование двух мазков в большинстве случаев бывает достаточным для установления наличия или отсутствия цист в пробе фекалий. Необходимо «набить глаз» в отыскивании простейших при малом увеличении, что значительно увеличивает число положительных результатов исследования. Диагностика видовой принадлежности простейших проводится под большим увеличением сухой системы.
Исследование мазков
При просмотре мазка на общем светло-желтом фоне наблюдаются окрашенные йодом в различные оттенки, от желтого до темно-коричневого цвета, остатки непереваренной пищи — мышечные волокна, растительная клетчатка (внутриклеточный и аморфный крахмал окрашивается в сине-фиолетовый цвет), бактерии, грибки, дрожжи, споры, йодофиль-ная флора (клостридии, Leptothrix), кристаллы трипельфосфатов, оксалаты и т. д. Среди этих образований цисты простейших, окрашенные в желтый, коричневый или зеленовато-желтый цвет, выделяются характерной для каждого вида формой, размерами, отчетливыми очертаниями, наличием гладкой, прозрачной, двуконтурной оболочки, содержимым протоплазмы, а также наличием ядер, структура которых, однако, выражена не всегда достаточно четко (табл. V). Удается подсчитать число ядер, что имеет важное значение для диагностики. В цистах амеб особенно заметны гликогеновые вакуоли, окрашивающиеся в светло-коричневый и темно-бурый цвета. Степень окраски, очертания и размер этих вакуолей варьируют в цистах одного и того же вида в зависимости от их зрелости. Обычно в зрелых цистах гликоген или отсутствует или 96
ТАБЛИЦА V
Вегетативная форма Entamoeba coli (1), цисты простейших кишечника человека (2—19), Blastocystls hominis (20—24) и дрожжеподобные грибки, окрашенные раствором йода.
Большое увеличение.
Цисты: 2— 3 — Entamoeba coli, двух- и восьмиядерные, 4 — 6 —Entamoeba histolytica, одно-, двух- и четырехядерные, 7 — 9 — Entamoeba hartmanni, то же, 10 — 12 — Jodamoeba butschlii, 13 — 15 — Endolimax папа, lb —18 — Lamblia intestinalis, коричневые, желтые и голубые, 19 — Chilo mastix mesnlll, 20 — 24 — грибки Blastocystls hominis', 25 — 26 — дрожжеподобные грибки рода Candida
Зак. 3|184
содержится в небольшом количестве, выступая на фоне желтой протоплазмы в виде светло-коричневых пятнышек. Хроматоидные включения йодом не окрашиваются и обычно незаметны.
Entamoeba histolytica Schaud.
Цисты правильной круглой формы, с двуконтурной оболочкой в виде светлого, прозрачного ободка, 9—16 ц в диаметре (обычно 12 ц), темножелтого или светло-коричневого цвета. Одно-, дву- и четырехъядерные. Ядра в виде колечек, отчетливо выступают в протоплазме. В зрелых четырехъядерных и незрелых двуядерных цистах ядра расположены в различных плоскостях. В них заметны кариозомы. В зрелых цистах гликоген чаще отсутствует. При наличии он выступает в виде светло-коричневых нерезко ограниченных пятнышек. Двуядерные цисты, чаще с гликогеном, выступают в виде коричневых не резкоочерченных пятен большого размера. Одноядерные цисты почти всегда содержат в большом количестве гликоген, который в виде крупной вакуоли с нерезкими очертаниями занимает обычно больше половины цисты (табл. V, 4, 5, 6).
Entamoeba coli Schaud.
Цисты правильной круглой, редко овальной формы, с двуконтурной оболочкой (табл. V, 2, 3), 14—28 ц в диаметре (чаще около 18 ц), т. е. по среднему размеру в полтора раза больше, чем цисты дизентерийной амебы. Ядер в незрелых цистах два, в зрелых — восемь. Ядра, расположенные в различных плоскостях, отчетливо вырисовываются в виде колечек на фоне протоплазмы. Внутри их заметна эксцентрично расположенная кариозома. Незрелые двуядерные цисты содержат крупную гликогеновую вакуоль, которая окрашивается в темно-бурый цвет с резко очерченными краями и занимает большую половину объема цисты. Ядра веретеновидной или круглой формы, расположены чаще на противоположных полюсах цисты в пристеночном слое* желтой протоплазмы. В зрелых восьмиядерных цистах удается подсчитать все ядра, лежащие в различных плоскостях. Гликоген в зрелых цистах обычно отсутствует, и потому сами цисты светло- или темно-желтого цвета. Диагностических трудностей типичные цисты Entamoeba coli обычно не представляют. Лишь в случаях одновременного присутствия в мазке мелкоцистной формы Entamoeba coli и крупноцистной Entamoeba histolytica (размером около 14 ц) возникают затруднения, которые, однако, разрешаются просмотром постоянных препаратов, окрашенных гематоксилином, или в результате повторных исследований; иногда диагностика уточняется по вегетативным формам, после дачи больному солевого слабительного.
Entamoeba hartmanni Prow.
Цисты правильной круглой формы, с двуконтурной оболочкой (табл. V, 7, 8, 9), 5—10 ц в диаметре (обычно 7,5 ц), светло- или темно-коричневого цвета. Одно-, дву- или четырехъядерные. Ядра в виде мелких колечек. В противоположность цистам дизентерийных амеб четырехъядерные цисты Entamoeba hartmanni обычно содержат в большом количестве гликоген, рассеянный по всему телу. Нередко гликогеновые вакуоли затрудняют подсчет числа ядер. В общем цисты этой амебы в мазках, окрашенных йодом, показывают большое сходство с цистами дизентерийной амебы, за исключением размера, который относится к числу дифференциальных признаков.
7 Зак. 3420. Лабораторный практикум медицинской паразитологии	97
Jodamoeba butschlii Prow.
Цисты неправильной, реже овальной или круглой формы (табл. V, 10, 11, 12), имеют диаметр 6—18 ц (чаще 10—12 ц). Всегда содержат одну (реже 2 или 3) крупную гликогеновую вакуоль, красящуюся в темно-бурый цвет и резко отграниченную от желтой протоплазмы. Вакуоль часто занимает половину цисты. Ядро одно, структура его видна неотчетливо.
Endolimax папа Wen. et (УСопп.
Цисты мелкие, овальной формы, окрашивающиеся в светло-желтый цвет, иногда с зеленоватым оттенком (табл. V, 13, 14, 15), диаметр — в среднем 5—8 ц. Одно-, дву- и четырехъядерные. Ядра слабо заметны. Относительно редко удается наблюдать гликогеновые вакуоли в виде коричневых пятен с нерезкими очертаниями. Чаще гликоген отсутствует.
Lamblia intestinalis Blanch.
Цисты правильно овальной формы, с двуконтурной оболочкой (табл. V, 16, 17, 18), 10—14 ц в длину и 6—10 ц в ширину. У отдельных цист вследствие сморщивания протоплазмы оболочка на одной из сторон нередко как бы отслоена от тела. Между оболочкой и протоплазмой в этом месте образуется светлая зона в виде щелевидного полулунного пространства. Цисты окрашены в желтый или светло-коричневый цвет. Наряду с коричневыми и желтыми цистами часто обнаруживаются еще серо-голубоватые (голубые) цисты, несколько меньшего размера. Последние некоторыми исследователями признаются за цисты отдельной расы лямблий. Однако этот вопрос остается нерешенным. Цисты дву- или четырехъядерные. Ядра слабо заметны. Внутри протоплазмы весьма отчетливо выступает сложно свернутый жгутиковый аппарат в виде искривленных тонких нитей, идущих вдоль тела от одного полюса к другому. Так же отчетливо заметно расположенное поперек и посередине цисты парабазальное тело полулунной или запятовидной формы. Типичная форма и особенности внутренней структуры цист, а также наличие их в фекалиях обычно в большом количестве позволяют легко диагностировать лямблию.
Для приобретения навыка диагностики лямблий по цистным формам в мазках с йодным раствором можно рекомендовать вначале исследовать фекалии лиц, у которых обнаружены вегетативные формы в дуоденальном содержимом. У этих же лиц в кале обнаруживаются и цисты.
Диагностика цист в мазках из фекалий, окрашенных йодным раствором, должна широко применяться в повседневной практике и заменить обременительную для больных и лабораторных работников процедуру анализа дуоденального содержимого.
Chilomastix mesnili Wen.
Цисты правильно грушевидной или лимоновидной формы (табл. V, 19), в среднем 6—9 ц в длину. Двуконтурная оболочка имеет характерное утолщение, отчетливо заметное в виде светлого прозрачного колпачка на суженном переднем конце тела.. Цисты красятся в желтый, серо-желтый или слегка зеленоватый цвет. Круглое, довольно крупное ядро прилегает к одной из сторон тела. В нем заметна кариозома. В протоплазме посередине тела находится цитостом. Фибрилла, окружающая его, отчетливо заметна в виде скобообразной нити, тянущейся посередине от одного полюса к другому. Типичная форма и строение цист позволяют легко диагностировать Chilomastix mesnili.
98
МЕТОД КОНЦЕНТРАЦИИ ЦИСТ ПРОСТЕЙШИХ
Количество цист, выделяемых с фекалиями, подвержено резким колебаниям не только у разных лиц, обследуемых одновременно, но и у одного и того же обследуемого на протяжении определенного промежутка времени. В течение нескольких дней цисты могут выделяться в большом количестве, затем численность их снижается и, наконец, они могут на некоторое время исчезнуть, а затем вновь появиться в большом числе.
Если в исследуемом кале имеется мало цист, то нередко обнаружить их в мазках с йодным раствором, приготовленных обычным способом, не удается. Применение метода концентрации цист облегчает их нахождение и увеличивает общий процент положительных анализов. Этот метод пригоден только для обнаружения цист. Он основан на разнице удельного веса цист и раствора, которым обрабатывается кал. Методика обработки кала сводится к следующему.
1.	Комочек кала, величиною с крупную горошину (весом около 1 г), помещается в стеклянный цилиндр или пробирку с 10 мл дистиллированной воды и измельчается в ней до равномерной эмульсии.
2.	Пробирка встряхивается, и эмульсия через металлическое сито или два слоя марли, положенные на воронку, процеживается в центрифужную пробирку.
3.	Смесь центрифугируют 2—3 минуты при 2000 оборотов. Цисты оседают на дно пробирки.
4.	Жидкая часть сливается, а к осадку добавляется насыщенный раствор медного купороса (удельный вес 1,2) или 33% раствор сернокислого цинка (удельный вес 1,18).
5.	Осадок встряхивается и снова центрифугируется 2—3 минуты. После 15—20-минутного отстаивания, цисты, имеющие меньший удельный вес, нежели примененный насыщенный раствор, всплывают на поверхность.
6.	Проволочной петлей берут поверхностную пленку и помещают на предметное стекло в каплю йодного раствора. Накрывают покровным стеклом и микроскопируют. Этот метод увеличивает число находок цист простейших и может быть применен для количественного учета выделяемых цист в исследуемом материале.
Применяется и более упрощенный метод концентрации, представляющий собой модификацию первого.
1.	Небольшой комочек кала помещают сразу в пробирку с насыщенным раствором сернокислого цинка и измельчают до равномерной эмульсии.
2.	Крупные частицы фекалий, всплывшие на поверхность раствора,, удаляют и смесь оставляют отстаиваться в течение 30—40 минут. За это время цисты всплывают на поверхность.
3.	Проволочной петлей берут поверхностный слой пленки, помещают в каплю йодного раствора на предметном стекле и исследуют.
По сравнению с первым методом, результаты несколько ниже. Растворы сернокислого цинка и медного купороса губительно действуют на жизнеспособность цист, что является отрицательным моментом этих методов, особенно в случаях, когда ставят задачей получение цист для выращивания культур. Устранение отмеченного недочета достигается использованием для концентрации цист раствора сахара, удельного-веса 1080. На каждые 2 мл осадка берут 14 мл раствора сахара, перемешивают и центрифугируют в течение 3 минут при 3000 оборотов в минуту. Цисты скапливаются в верхнем слое жидкости, который снимают затем пипеткой.
7*
99’
КУЛЬТИВИРОВАНИЕ КИШЕЧНЫХ ПРОСТЕЙШИХ
Культивирование простейших на искусственных средах находит широкое применение. Культуры дают возможность более разностороннего изучения свойств простейших — их изменчивости, выживаемости при различных воздействиях и условиях среды обитания, выяснение необходимых условий развития и условий существования, жизненного цикла, процессов эксцистирования, инцистирования и зависимости этих процессов от сопутствующей бактериальной флоры и т. д. Культуры используются для экспериментальных заражений опытных животных. Культивирование иногда применяется и с диагностическими целями, хотя преимущества этого метода перед прямым микроскопическим исследованием материала незначительны. Различными авторами предложено большое число разнообразных питательных сред, на которых выращиваются почти все виды простейших кишечника человека, за исключением лямблий и кокцидий. Культуры кишечных простейших удается получить на средах только в присутствии бактериальной флоры, которая сопутствует им в исходном материале. Флора изменяется в процессе культивирования.
Среда Бек и Дрбоглава. Хороший рост не только дизентерийных амеб, но и других видов кишечных амеб, а также и многих жгутиконосцев получается на питательной среде Бек и Дрбоглава, которая состоит из твердой и жидкой частей и готовится следующим образом.
1.	Заранее приготовляют стерильную посуду (бутыль или банку со стеклянными бусами, воронки, пипетки и пробирки с ватными пробками).
2.	Берут 4 свежих куриных яйца, тщательно обмывают снаружи 96° спиртом и содержимое их выпускают в стеклянную банку, емкостью 500 мл, с притертой пробкой и со стеклянными бусами.
3.	В банку добавляют 50 мл стерильной жидкости Локка (NaHCO — 0,2 г; СаОг — 0,2 г; КС1 — 0,4 г; NaCl — 9 г; глюкозы — 2,5 г; дистиллированной воды— 1000 мл) и содержимое тщательно встряхивают до получения равномерной эмульсии, которую разливают пипеткой по 2—3 мл в пробирки.
4.	Для получения скошенной поверхности среды пробирки в наклонном положении помещают на 30—40 минут в аппарат для свертывания и нагревают при 75—85° до затвердения эмульсии.
5.	На следующий день пробирки с затвердевшей средой вновь нагревают в аппарате для свертывания при температуре 80—90° в течение 30 минут.
6.	Затем в каждую пробирку к твердой части среды добавляют жидкую часть, состоящую из 10 частей стерильной жидкости Локка и одной части нормальной лошадиной сыворотки. pH жидкой части 7,2—7,6. Жидкая часть должна быть на 1—2 см выше верхнего уровня скошеной твердой части среды. После проверки на стерильность среда готова для посевов.
7.	Перед посевом в пробирку добавляется 1—2 петли стерильного рисового крахмала.
8.	Для посева берется комочек кала, величиною с горошину, и измельчается в пробирке в жидкой части среды; если стул жидкий, то он набирается пипеткой.
9.	Засеянные пробирки помещаются в термостат при 37°. Пересевы производятся вначале ежедневно, а затем через сутки. Для пересева пипеткой берется осадок со дна пробирки.
Многочисленные модификации этой среды сводятся к замене сыворотки яичным белком, замене жидкости Локка жидкостью Рингера, 100
яичной твердой части среды кровяным агаром, свернутой леффлеров-ской сывороткой и т. д. Рост амеб на этих средах также хороший.
Часто рост простейших тормозится, и культуру не удается получить, или она быстро гибнет в результате размножения грибков Blastocystis hominis (стр. НО). Дизентерийные амебы дают хороший рост и на жидких средах, без твердой подкладки. Из этих сред укажем следующие.
Сердечная среда Джона (John). Пригодна для культивирования дизентерийных амеб, балантидиев и трихомонад.
Состав среды
Порошок сердечной мышцы............1,0
Хлористый натр (NaCl)..............8,0
Двууглекислый натр (NaHCO3)........0,4
Хлористый кальций (СаС12)..........0,2
Хлористый калий (КС!)..............0,2
Хлористый магний (MgCl2)...........0,1
Дистиллированная вода.............. 1000 мл
Смесь стерилизуют текучим паром в течение часа, затем фильтруют и добавляют в нее 0,1 г фосфорнокислого натра (NaH2PO4). Разливают в пробирки и подвергают вторичной стерилизации в автоклаве в течение 30 минут при давлении в 1 атмосферу. Перед употреблением прибавляют лошадиную сыворотку 1 : 10 и петлю рисового крахмала.
Среда Павловой. Автор показала, что для роста амеб существенное значение имеет определенная концентрация водородных ионов в среде и что части среды могут быть значительно упрощены. Берут 10 мл фосфатной буферной смеси по Зеренсену 1 с pH = 6,5 и разбавляют физиологическим раствором (NaCl — 0,85%) до 100 мл. Стерилизуют. Добавляют лошадиную сыворотку в отношении 1 : 10 и перед посевом рисовый крахмал.
Среда Риса (Rees). Применяется для культивирования балантидиев. Берут 50 мл обыкновенного мясопептонного бульона и добавляют 200 мл физиологического раствора. Смесь стерилизуют. Добавляют нормальную лошадиную сыворотку в отношении 1 : 10. Разливают по пробиркам. Перед посевом добавляют 1—2 петли рисового или пшеничного крахмала. Помещают в термостат при 37°. Пересевы через 48 часов.
Аспарагиновая среда Френкеля (Frankel). Также применяется для культивирования балантидиев.
Состав среды
Аспарагин..........................4,0
Ammonium lactatum..................6,0
КоНРОа.............................2,0
NaCl...............................5,0
Дистиллированная	вода.............. 1000 мл
Смесь стерилизуют в автоклаве при давлении в 1 атмосферу в течение 20 минут. Добавляют нормальную лошадиную сыворотку 1:16. Разливают по пробиркам. Перед посевом добавляют 1—2. петли рисового крахмала.
КОПРОЗОЙНЫЕ ПРОСТЕЙШИЕ
При исследовании кала на паразитических простейших иногда обнаруживаются так называемые копрозойные формы простейших. Последние представляют собой свободноживущие одноклеточные организмы,
1 КН2РО4 — однометаллический фосфорнокислый калий — 0,3564 г Na2HPO4 — двуметаллический фосфорнокислый натрий — 0,6364 г Физиологический раствор (NaCl—0,85%)—1 л.
101
которые обладают способностью развиваться и размножаться на субстратах, богатых органическими веществами и бактериями, таких, как нечистоты, сточные воды, навоз и т. д. Попадая в человеческие фекалии, они могут размножаться в них и служить источником ошибочного
диагноза. Попадание копрозойных двояким путем: цисты могут быть водой, пройти транзитом кишечный ных фекалиях и размножаться, или
простейших в фекалии возможно заглочены человеком с пищей или тракт, эксцистироваться в выделен-же цисты могут попасть в фекалии
Рис. 27. Копрозойные простейшие.
1 — Hartmanella hyalina\ 2—3 — Dimastigamoeba gruberi (2 — амебоидная форма, 3 — жгутиковая форма); 4 — Bodo caudatus', 5 — Cercomonas longi-cauda; 6 —Balantiophorus minutus.
с пылью, загрязненной водой или быть занесены мухами. Однако наиболее часто они попадают в кал в случаях забора материала в нестерильную грязную посуду с остатками сырой воды, а также в случаях, когда кал разбавляется сырой водой или подвергается исследованию спустя длительное время.
В отдельных случаях источником загрязнения исследуемого материала свободноживущими простейшими может быть используемый для изготовления нативных мазков долго несменяемый, загрязненный физиологический раствор.
Следует помнить, что вегетативные формы паразитических простейших быстро гибнут в выделенном стуле, а копрозойные, наоборот, увеличиваются в числе в случае длительного хранения кала при комнатной температуре. Паразитические формы размножаются при температуре 37°. Копрозойные простейшие без труда культивируются на искусственных средах при комнатной температуре. В литературе имеется ряд примеров, когда копрозойные формы ошибочно принимались за паразитические и даже описывались в качестве новых видов простейших кишеч-102
ника человека. Известно много видов копрозойных простейших, встречающихся в выделенных фекалиях человека. Они относятся к различным классам Protozoa. Отметим лишь некоторые из них (рис. 27) ,
Hartmanella hyalina Dang.
В естественных условиях встречается во влажной, сырой почве и в воде, иногда в несвежих испражнениях человека. Это амеба размером 8—16 ц, медленно выбрасывающая широкие эктоплазматические псевдоподии. В протоплазме отчетливо заметна сократительная, или выделительная, вакуоль в виде розоватого пузырька. Эта вакуоль, свойственная свободноживущим копрозойным формам, у паразитических амеб и жгутиконосцев отсутствует, что служит дифференциальным признаком для определения. На окрашенных постоянных препаратах этой амебы обращает внимание круглое, кольцевидное ядро с крупной, компактной, центрально расположенной кариозомой, слабо выраженной ядерной оболочкой и большим числом хроматиновых зернышек между кариозомой и оболочкой ядра (рис. 27). Одноядерные цисты, около 12 ц в диаметре, характеризуются наличием толстой морщинистой оболочки.
Dimastigamoeba grub er i Schard.
Обнаруживается в долго хранившихся фекалиях человека. Интересна тем, что бывает в двух формах — амебоидной и жгутиконосной. Амебоидная форма имеет размеры от 8 до 15 ц. В нативном мазке в протоплазме хорошо заметна сократительная вакуоль. Пузырьковидное ядро содержит в центре крупную компактную кариозому, тонкую ядер-ную оболочку и нежные радиальные нити, идущие от кариозомы к оболочке ядра. Амебоидная форма может превращаться в биченосную. Последняя имеет удлиненное тело и снабжена двумя длинными жгутиками. Ядро такого же типа, как у амебоидной формы, находится на переднем конце тела, на котором расположены и жгутики. Жгутиконосная форма снова может превращаться в амебоидную. Амеба образует одноядерные цисты 8—10 ц в диаметре (рис. 27).
Bodo caudatus Duj.
В природе этот жгутиконосец встречается в сильно загрязненных водах. Иногда обнаруживается при исследовании кала человека, в который попадает с водой, используемой для разведения фекалий, или же с загрязненным физиологическим раствором, употребляемым для изготовления нативного мазка. Проверить последний источник попадания простейших в исследуемый кал легко путем микроскопирования используемого физиологического раствора.
Форма жгутиконосца продолговатая, нередко округлая. Тело, суженное к заднему концу, имеет в длину 10—20 ц. На переднем конце располагаются два длинных жгутика (один из них направлен вперед —-находится в активном движении, а другой направлен назад, вяло подвижен), небольшая сократительная вакуоль и мелкое углубление, соответствующее ротовому отверстию. В пищеварительных вакуолях протоплазмы содержатся бактерии. На окрашенных препаратах у переднего конца тела заметно пузырьковидное ядро с крупной, компактной, круглой кариозомой; ядерная оболочка выражена нерезко (рис. 27). Bodo caudatus образует мелкие, овальные цисты около 6ц в диаметре.
103
Cercomonas longicauda Duj.
Встречается в загрязненной воде. Может жить и размножаться в фекалиях человека, а также и других видов животных. Тело грушевидное, 5—13 ц в длину, без ротового отверстия. Жгутиконосец обладает способностью образовывать псевдоподии. Пищевые частицы фагоцитируют, подобно амебам, поверхностью тела. На переднем конце тела расположено пузырьковидное ядро с крупной центральной кариозомой и два длинных жгутика, начинающихся от блефаропластов. Один жгутик направлен вперед, другой тянется по поверхности тела до заднего конца и заканчивается свободной частью (рис. 27).
Копрозойные ресничные
В кале человека, кроме копрозойных форм амеб и жгутиконосцев, могут быть также обнаружены и свободноживущие формы ресничных. В литературе имеются отдельные сообщения с описанием нескольких видов инфузорий, найденных при исследовании фекалий человека и известных под названием Balantidium minutum, Nyctotherus faba, Uronema caudatum, Uronema nigricans, Colpoda steini, Chilodon uncinatus и др. В настоящее время перечисленные инфузории рассматриваются как ложнопаразиты, копрозойные формы ресничных, ошибочно признанные за паразитов кишечника человека. В свободном состоянии эти инфузории живут в загрязненной, пресной и соленой воде, в почве, богатой гниющими органическими веществами, а также в фекалиях человека и животных, в которых они находят в изобилии бактериальную флору, служащую им пищей.
В фекалии человека копрозойные ресничные попадают, видимо, только из внешней среды, вероятнее всего со стенок загрязненной посуды, используемой для забора материала, а также, возможно, с загрязненным раствором, употребляемым для изготовления нативных мазков.
Большинство копрозойных ресничных имеют почти вдвое меньшие размеры тела, чем истинные паразиты кишечника человека.
Все они в нативных мазках активно подвижны. Передвижение осуществляется посредством ресничного аппарата, покрывающего все тело. Кратко отметим описанную под названием Balantidium mlnutum свобод-ноживущую, копрозойную форму инфузорий Balantiophorus minutus.
В al ant to р ho г us minutus Schew. Овальное тело с суженным передним концом, 20—35 ц в длину и 15—25 ц в ширину, снабжено длинными, тонкими ресничками. В передней половине тела располагается сильно развитый цитостом. Макронуклеус правильно круглой формы, 6—7 ц в диаметре, с большим числом зерен хроматина, лежит посередине тела. Возле макронуклеуса располагается микронуклеус в виде небольшого округлого образования. В задней половине тела находится одна большая сократительная вакуоль (рис. 27, 6).
ПСЕВДОПРОТОЗОЙНЫЕ ОБРАЗОВАНИЯ
При исследовании кала кишечных простейших любым методом (нативный мазок, мазки, обработанные йодным раствором, или постоянные препараты, окрашенные гематоксилином) обращает на себя внимание обилие различных образований, не являющихся протозойными организмами. Это, прежде всего, остатки пищи, а именно, различные по форме и размеру измененные или неизмененные, с сохранившейся поперечной и продольной исчерченностью мышечные волокна, обрывки раститель-104
ной клетчатки, нередко растительные клетки с внутриклеточным крахмалом, растительные споры, сосуды растений в виде извитых спиралей и, наконец, жир в виде капель нейтрального жира или жирных кислот. Очень часто обнаруживаются грибки Blastocystls hominis, реже дрожжевые клетки и всегда обильная бактериальная флора. В препаратах, изготовленных из стула с патологическими примесями (слизь, кровь, гной), часто в большом количестве встречаются эритроциты, лейкоциты, макрофаги, клетки кишечного эпителия, которыми нередко сплошь усеяны- все поля зрения. При отсутствии необходимого опыта работы многие из перечисленных образований могут быть приняты за вегетативные формы или цисты кишечных простейших и явиться источником грубых диагностических ошибок. И в зарубежной и в отечественной литературе мы имеем ряд основанных на неправильной диагностике сообщений о кишечнопротозойных заболеваниях.
Приводим краткое описание встречающихся в кале некоторых псев-допротозойных образований, которые могут иметь значение для правильной диагностики простейших, а также для характеристики копрограмм.
Мышечные волокна
Встречаются почти в каждой исследуемой пробе фекалий. Количество, размеры, форма и структура их бывают различны. В одних случаях, преимущественно у лиц, не страдающих желудочно-кишечными заболеваниями, обнаруживаются хорошо переваренные, измененные мышечные волокна. Они имеют неправильную, овальную, круглую или удлиненно-цилиндрическую (с округленными углами форму) и при большом увеличении у них не удается видеть поперечной или продольной исчерченности. В других случаях, преимущественно у больных с нарушенной желудочно-кишечной секрецией, при недостаточности функции поджелудочной железы находят в большом количестве плохо переваренные, неизмененные мышечные волокна, часто крупных размеров, удлиненно-цилиндрической формы (с заостренными углами), с сохранившейся поперечно-продольной исчерченностью.
При микроскопировании нативных мазков с физиологическим раствором их легко отличить от простейших по желтому или коричневому цвету, благодаря окраске желчными пигментами. В мазках, окрашенных йодом, на первых порах исследования могут привлечь внимание как образования, симулирующие цисты простейших, мелкие, округлой или овальной формы, темно-желтые или коричневые остатки мышечных волокон. Их отличие—многообразие формы и размеров, равномерная окраска, отсутствие ядер, гликогеновых вакуолей, тонкой, окаймляющей в виде прозрачного ободка оболочки цисты и, основное, наличие у части волокон сохранившейся поперечной, а иногда продольной исчерченности.
Растительная клетчатка
Обычная составная часть фекалий. Плоские обрывки клетчатки, имеющие сетчатое строение, неправильной формы и различного размера, а также растительные волокна, спирали и волоски, относящиеся к не-переваримой растительной клетчатке, не могут служить предметом смешения с простейшими. Отдельные растительные клетки (преимущественно картофельные) —. неправильно округлые или овальные, крупные, бугристые, часто содержащие зерна крахмала (внутриклеточный крахмал), окрашивающиеся йодом в сине-фиолетовый цвет — также не могут быть приняты за простейших.
105
В редких случаях встречаются растительные клетки, которые по размеру, прозрачности и сходству формы, могут напомнить в нативном мазке ооцисты кокцидий. Однако внимательный просмотр при большом увеличении показывает наличие у этих клеток небольших угловатых изломов в грубой двуконтурной оболочке и отсутствие характерного для кокцидий расположения протоплазмы или споробластов.
Растительные споры
Довольно часто встречаются при исследовании фекалий (рис. 28). Форма, размеры, цвет, внутренняя структура и очертания краев различны у разных видов. Нередко обнаруживаются зрелые споры (хламидоспоры) головни (Tilletia tritici), паразитирующей на пшенице. В нативном мазке они коричневого цвета, шарообразные, с зубчатой поверхностью и сетчатым внутренним строением, размером до 20 [л (рис. 28, 1—2).
Часто в мазках из фекалий обнаруживаются в большом количестве дрожжеподобные грибки типа Candida (рис. 28, 4—14\ цвет. табл. V, 25—26). Это мелкие, овальные или лимоновидные образования, отдаленно напоминающие цисты Chilomastix mesnili, 2—6 р* (чаще — 3 и). В протоплазме — вакуоль и ядро. Редко наблюдается и мицелий грибка (рис. 28, 14). Иногда встречаются растительные споры, по размерам и форме напоминающие цисты Entamoeba coli (рис. 28, 5), но легко отличимые от них по строению наружной оболочки и отсутствию ядер. В некоторых мазках встречаются растительные споры, по внешнему виду отдаленно напоминающие вегетативные формы лямблий (рис. 28, 16—17) или ооцисты кокцидий (рис. 28, 18—22). Однако строение этих спор позволяет отличить их от простейших.
На поверхности фекалий на 2—3-й день после дефекации развиваются плесневые грибки (рис. 28, 23—34), которые и обнаруживаются в большом количестве в случаях позднего исследования материала.
Дрожжевые грибки
Относятся к семейству сахаромицетов {Saccharomycetaceae). Встречаются в кале относительно редко, но обычно в большом количестве, в виде одиночно разбросанных эллиптической или овальной формы клеток (рис. 28, 35—37), иногда соединенных в цепочки. Клетки имеют 3—8 ц (даже 10 ц) в длину и 2—8 р в ширину.
В нативном мазке они прозрачные, бесцветные и выделяются, как и простейшие, более сильной преломляемостью света. При большом увеличении в зернистой протоплазме каждой дрожжевой клетки отчетливо заметна в центре или ближе к одному из полюсов вакуоль с водянистым содержимым в виде крупного розового пузырька. Иногда отмечается две или больше вакуолей, из которых одна более крупная. Края клетки резко контурированы. Ядро незаметно. Нередко обнаруживаются размножающиеся клетки в различных стадиях почкования (рис. 28, 36—37).
В мазках, окрашенных йодом, дрожжевые клетки имеют зеленовато-желтую окраску. Вакуоль сохраняет розоватый оттенок и обычно не красится йодом. Наличие почкующихся клеток и вакуолей в виде крупных розовых пузырьков позволяет отличать грибки от цист Endolimax папа и Jodamoeba butchlii, за которые они могли бы быть ошибочно приняты.
106
Рис. 28. Псевдопротозойные образования.
L 2 — хламидоспоры грибка головни пшеницы; 3 — спора, напоминающая цисты Entamoeba ooli; 4 — 13 — дрожжеподобные грибки рода Candida} 14 — мицелий грибка рода Candida’, 16 — грибок рода Fusarium} 16 —17 — споры, напоминающие вегетативные формы лям('л!й; М—22—споры, сходные с ооцистами кокцидий; 23—34 — плесневые грибки, появляющиеся в фекалиях при длительном хранении; 35 — 37 — дрожжевые грибки семейства Sac» charomycetaceae.
Капли нейтрального жира
Различного размера, круглой или часто неправильной, расплывчатой формы, бесцветные, блестящие, бесструктурные. Оболочки нет. В большом количестве встречаются при недостаточности секреции поджелудочной железы, недостаточности желчеотделения, а также при приемах касторового масла. Наличие их не только затрудняет, но иногда делает невозможным исследование простейших в нативных мазках. Капли жира легко дифференцировать микрохимической реакцией с су-даном III.
Приготовление раствора: спирта 96°—10 мл, ледяной уксусной кислоты — 90 мл, судан III — 2 г.
В мазках с раствором Судана III капли нейтрального жира окрашиваются в красный цвет.
Пузырьки воздуха
Круглые, отчетливо очерченные, различных размеров, черные по краям и блестящие в центре. Привлекают внимание начинающих работать с микроскопом только на первых порах исследования.
Форменные элементы крови и кишечный эпителий
Лейкоциты, эритроциты, макрофаги, клетки кишечного эпителия встречаются в большом количестве и обычно занимают все поле зрения в мазках, изготовленных из кроваво-слизистого или гнойного стула больных кишечными заболеваниями — дизентерией, язвенным колитом и др. (рис. 29).
Лейкоциты. Часто превалируют среди других форменных элементов, встречающихся в стуле с патологическими примесями. По размерам, наличию нескольких ядер, светопреломляемости в нативных мазках и в мазках с йодом могут быть приняты за цисты дизентерийных амеб. Отличие от последних: отсутствие цистной оболочки, хроматоид-ных включений, гликогеновых вакуолей, нерезкое очертание краев, несколько меньшая преломляемость света, своеобразная структура и различное число ядер. Чаще наблюдаются 3 ядра, но нередко 4 и 6. Ядра соединены между собой тонкой нитевидной перемычкой, что отчетливо заметно в постоянных препаратах, окрашенных гематоксилином (рис. 29, 4—10).
Эритроциты. Встречаются в стуле с кровянистой слизью. Превалируют среди других элементов при амебной дизентерии. Характерный цвет, форма и размеры исключают возможность смешивания их с простейшими.
Макрофаги. По размеру, форме и включениям могут быть приняты за тканевые формы дизентерийных амеб, особенно когда в их протоплазме содержатся различных размеров эритроцитоподобные липоидные образования, так называемые «тельца Русселя», и фагоцитированные эритроциты. В нативном мазке отличаются своей обычно круглой формой, различными размерами, равномерной преломляемостью света, отсутствием псевдоподий и, особенно, неподвижностью. Наряду с ними в мазке обычно наблюдается большое скопление лейкоцитов. В постоянных препаратах, окрашенных гематоксилином, макрофаги характеризуются наличием крупного колесовидного ядра, иногда занимающего треть или половину их объема. Однако значительно чаще ядро у таких макрофагов наблюдать не удается. В выделенном стуле оно, видимо, 108
Рис. 29. Псевдопротозойные образования в стуле с патологическими примесями.
1 —3 — лимфоциты; 4 — 10 — сегментоядерные лейкоциты; 11 — 14 — ядерные макрофаги; 15 — 22 — безъядерные макрофаги с тельцами Русселя; 23 — 25— клетки цилиндрического кишечного эпителия; 26 — клетки плоского эпителия.
дегенерирует, и мы различаем крупные клетки без ядра, протоплазма которых содержит разное число «телец Русселя» и иногда эритроциты и лейкоциты. Отсутствие типичного для дизентерийной амебы ядра служит дифференциальным признаком макрофагов (рис. 29, 11).
Клетки плоского кишечного эпителия. Выстилают прямую кишку, откуда и попадают в испражнения. Встречаются в стуле с патологическими примесями в виде одиночных клеток или часто скоплениями, группами, пластами. Клетки круглые, крупных размеров, до 25 ц, с равномерно зернистой, но не вакуолизированной, лишенной каких-либо включений протоплазмой. Края клеток нерезко контуриро-ваны. Обычно в центре клетки заметно овальное крупное компактное ядро. Неподвижность, отсутствие псевдоподий, включений, одинаковые размер и форма, встречаемость пластами, группами в несколько клеток, прилежащих друг к другу — все это достаточно для отличия их от тканевых форм дизентерийных амеб (рис. 29, 26). Следует отметить, что перерожденные клетки мочевого пузыря и уретры иногда при исследовании мочи также признавались за амеб.
Клетки цилиндрического кишечного эпителия. Могут быть из любого отдела кишечника. Имеют цилиндрическую, вытянутую или неправильную по длине, форму с округленными концами. В зернистой протоплазме заметно ядро. Чаще в стуле встречаются перерожденные, дегенерировавшие клетки цилиндрического кишечного эпителия, без ядер. Иногда попадаются их ядра, без протоплазмы. Эти клетки в большом количестве обнаруживаются в кровянисто-гнойном стуле при бациллярной дизентерии, как следствие поражения поверхностных слоев кишечной стенки (рис. 29, 23—25)«
Blastocystis hominis Brum.
Растительные организмы, относящиеся, по-видимому, к низшим грибкам. Часто (более чем у 50% обследуемых) встречаются в кале здоровых лиц, а также больных, страдающих кишечными заболеваниями. Бластоцисты некоторыми авторами ошибочно рассматривались как цисты Trichomonas hominis. Часто у больных, страдающих поносами, особенно в стуле сливкообразной консистенции, со слизью, они обнаруживаются в громадном количестве (оставляя впечатление как бы чистой культуры этого организма) и могут быть приняты за гнойные клетки или цисты простейших.
Бластоцисты обычно правильно круглой формы, редко овальной (рис. 30). В стадии деления вытянуты по длине, с перехватом посередине, гантелеобразной формы. Размер их в зависимости от характера стула колеблется в весьма широких пределах; в оформленном стуле они чаще 5—10 ц, а в жидком с патологическими примесями значительно крупнее — 8—15 ц, иногда достигают 30—40 р и даже 80 р.
В мазках с физиологическим раствором бластоцисты, подобно цистам простейших и лейкоцитам, в виде круглых бесцветных телец различного размера, выделяются более сильной светопреломляемостью. При большом увеличении легко видеть, что очертания бластоциста, несмотря на отсутствие оболочки, отчетливо выражены. Большую половину тела занимает крупная, обычно круглая, центрально расположенная вакуоль. Она окружена со всех сторон тонким пристеночным слоем протоплазмы, или же последняя располагается только по полюсам в виде тонкого серповидного слоя.
110
В протоплазматическом слое, имеющем зернистую структуру, отчетливо вырисовываются несколько более крупных ядроподобных зернышек, различного размера, сильно преломляющих свет. Отсутствие видимых включений в вакуоли и периферически расположенный вокруг нее слой протоплазмы, содержащий зернышки, настолько типичны для бластоцистов, что дифференцировать их от цист простейших и лейкоцитов не представляет особых трудностей.
В мазках, окрашенных йодом, строение бластоцистов становится еще более отчетливо выраженным. Границы центральной вакуоли заметны лучше. В протоплазменном слое, окрашенном в желтый цвет, отчетливо вырисовывается несколько крупных зернышек. Вакуоль не окрашивается йодом в коричневый или бурый цвет; это свидетельствует о том, что она не содержит гликогена.
Рис. 30. Blastocystls hominis.
В постоянных препаратах, окрашенных железным гематоксилином, в бластоцистах отчетливо заметна периферически расположенная протоплазма, содержащая окрашенные в черный цвет зернышки ядерной природы, число которых варьирует от 1 до 5 и более. Центральная вакуоль обычно остается бесцветной, неокрашенной, реже окрашена в резко черный цвет. Содержимое вакуоли под влиянием фиксации нередко сжимается, сморщивается, на постоянных препаратах тогда заметна более светлая зона между содержимым вакуоли и периферическим слоем протоплазмы.
Значение бластоцистов остается невыясненным. Некоторые авторы склонны признавать их патогенными. Однако такая же частая встречаемость их у совершенно здоровых, как и у больных, не говорит в пользу этой точки зрения. Тем не менее у отдельных больных, страдающих кишечными заболеваниями, бластоцисты встречаются в таком большом количестве, что трудно исключить их причастность к этиологии кишечных заболеваний. Среда обитания и условия существования в организме хозяина для бластоцист, так же как и для других видов организмов, населяющих кишечник хозяина, не являются постоянными и неизменными. Очевидно, что иногда, при определенном комплексе условий,
1В
возникающих в организме хозяина, бластоцисты, встречая благоприятные условия для своего развития и размножения, приобретают качественно новые свойства, и тогда могут выступать по отношению к хозяину как патогенные организмы. Бластоцисты должны привлечь внимание и при изучении пар азитоценозов кишечника человека.
ПРОСТЕЙШИЕ ТРАНЗИТНОГО ХАРАКТЕРА
Кишечные простейшие паразитируют у многих видов беспозвоночных и позвоночных животных. Некоторые виды простейших, паразитирующие у позвоночных, в частности у крыс, мышей, свиней, обезьян, собак, кошек, весьма сходны с простейшими человека (лямблии, кишечные амебы). Дизентерийные амебы обезьян и крыс признаются идентичными с человеческими; допускается, что эти животные могут быть источником заражения человека. Однако практически эпидемиологическая опасность животных, как резервуаров простейших в природе, невелика и к тому же остается недоказанной.
Возможность заглатывания человеком с загрязненной водой и пищей цист простейших, паразитирующих у животных, не исключается. Однако не доказано, что они могут без изменения проходить транзитом кишечный тракт и быть обнаруженными в фекалиях. Наши опыты по самозаражению, с заглатыванием Р/2—2 миллиардов цист Entamoeba moshkovskii, показали, что часть цист проходит кишечный тракт транзитом, но выделяются они уже нежизнеспособными и при этом настолько сильно изменяются, сморщиваются, дегенерируют, что практического значения для диагностики не представляют.
Транзит копрозойных форм простейших через кишечный тракт человека нам кажется также маловероятным, и допущение такого транзита требует дополнительного исследования.
Среди простейших исключение в смысле возможности их транзита через кишечный тракт человека составляют ооцисты кокцидий, которые, в отличие от других видов простейших, обладают большой стойкостью к воздействиям внешней среды.
Как известно, кокцидии широко распространены среди различных видов животных, в частности рыб, которые потребляются человеком в пищу.
До недавнего времени признавалось, что истинными паразитами человека являются не только описанные выше кокцидии Isospora belli (стр. 94), но и другие виды кокцидий — Eimeria clupearum и Eimeria sardinae, ооцисты которых нередко обнаруживают в фекалиях. В настоящее время кокцидии рода Eimeria рассматриваются в качестве ложнопаразитов.
Исследования Томсона и Робертсона (Thomson a. Robertson, 1922, 1926) показали, что кокцидии Eimeria паразитируют в печени и семенниках рыб — сельди, салаки, сардин и макрели, и что найденные у человека ооцисты Eimeria тождественны ооцистам Eimeria у рыб. Поедание упомянутых рыб, зараженных кокцидиями, влечет за собой появление и случайное нахождение в кале неловка транзитных ооцист, что и приводит к ошибочной диагностике кокцидиоза у человека.
Ооцисты кокцидий Eimeria отличаются от ооцист Isospora тем, что они шаровидной формы и содержат по 4 споробласта с двумя спорозоитами в каждом (у ооцисты Isospora по 2 споробласта с четырьмя спорозоитами в каждом).
112
Eimeria clupearum Thel.
(синоним — Eimeria wenyoni Dob.)
В фекалиях человека встречаются турной оболочкой, шаровидной формы, ооцисты 4 овальных споробласта, в каждом и них по 2 червевидных спорозоита с остаточным телом.
транзитные ооцисты с около 20 g в диаметре.
двукон-Внутри
Eimeria sardinae Thel.
(синонимы — Eimeria oxyspora Dob., Eimeria snijdersi Dob.)
sardlnae
Рис. 31. Ооциста Eimeria с четырьмя споробластами, в каждом из них по два спорозоита.
Ооцисты шаровидные, с двуядерной оболочкой, около 36 р в диаметре, с 4 веретеновидными споробластами, в каждом из которых по 2 спорозоита с остаточным телом (рис. 31).
Eimeria snijdersi найдена в кале человека всего один раз. Шаровидные ооцисты с двуконтурной оболочкой, 40—48 р, в диаметре, с 4 споробла
стами, в каждом из них по 2 спорозоита. Нахождение у человека объ-
ясняется транзитностью ооцист.
ЛИТЕРАТУРА
Алексеев А. Г. Что нужно знать практическому врачу об амебной дизентерии. Клинич. мед., т. 4, № 7, 1926.
Винников М. Э. Лямблиоз. Совет, мед., № 12, 1949.
Гнездилов В. Г. Материалы по географическому распространению, эпидемиологии и профилактике амебиаза. Мед. паразитол. и паразит, болезни, № 5, 1947.
Гнездилов В. Г. О кишечных простейших и амебной дизентерии в Ленинграде по данным обследования 600 кишечных больных. Тр. Воен.-мед. акад. им. Кирова, т. 44, 1948.
Гнездилов В. Г. Биометрическое изучение вегетативных форм дизентерийной амебы. Тр. Воен.-мед. акад. им. Кирова, т. 44, 1948.
Гнездилов В. Г. Глистно-протозойные инвазии тонкого отдела кишечника человека в связи с вопросом межвидовых отношений паразитов. Усп. совр. биол., т. 31, в. 2, 1951.
Догель В. А. Общая протистология, М., 1951.
Лейтман М. 3. Распознавание цист дизентерийной амебы и цист непатогенных амеб серологическим путем. Узб. паразит, сборн., т. 11, 1939.
Лейтман М. 3. и Витлинская И. А. К вопросу о санации носителей патогенных простейших. Мед. паразит, и паразит, бол., т. 14, в. 6, 1945.
Маруашвили Т. М. Клиника и терапия амебиаза. Мед. паразит, и паразит, бол., т. 17, в. 4, 1948.
Матевосян Ш. М. О культивировании дизентерийной амебы и некоторых ее свойствах в культуре. Журн. микроб, и иммунол., т. И, в. 2, 1933.
Матевосян Ш. М. Амебиаз и его эндемия в Армении. Тр. Троп. Ин-та НКЗдрава Армении, в. 3, 1935.
Матевосян Ш. М. К вопросу о патогенности Е. coli. Тр. Троп, ин-та НКЗдрава Армении, в. 3, 1939.
Л1атевосян Ш. М. Паразитология и эпидемиология амебиаза. Изд. Айпетрат, 1951.
Мошковский Ш. Д. и Рашина М. Г. (ред.) Эпидемиология и медицинская паразитология для энтомологов. Медгиз, 1951.
Малярия, гельминтозы и паразитарные болезни. Организационно-методические материалы. Москва, 1955.
Павловский Е. Н. (ред.) Практикум медицинской паразитологии. Биомедгиз, Л., 1933.
8 Зак. 3420. Лабораторный практикум медицинской паразитологии	113
Павловский Е. Н. Учебник паразитологии человека, Л., 1951.
Павловский Е. Н. Руководство по паразитологии человека. Т. 1. М.—Л., 1946.
Патрик Н. П. Кишечные протозойные заболевания человека. Алма-Ата, 1955.
Сванидзе Д. П. Материалы по эпидемиологии амебиаза в Грузинской ССР. Мед. паразит, бол., в. 5, 1947.
Сченснович В. Б. Протозологическое обследование населения г. Ленинграда. Микробиол. журн., т. 10, прилож. 1, 1930.
Сченснович В. Б. Патогенез амебиаза. Мед. паразитол. и паразит, бол., в. 5, 1947.
Филипченко А. А. Кишечные простейшие и вызываемые ими заболевания. Госиздат, Л., 1933.
Чалая Л. Е. Об одном виде энтамеб, обнаруженном в сточных водах. Мед. паразитол. и паразит, бол., т. 10, в. 2, 1941.
Эпштейн Г. В. Патогенные простейшие, спирохеты и грибки, М., 1931.
Эпштейн Г. В. Практикум по паразитическим простейшим и спирохетам. Изд. АН СССР, 1940.
Щупак Н. В. Лямблиоз кишечника и желчных путей. Госмедиздат УССР, Киев, 1952.
TRICHOMONAS VAGINALIS DONNE —ВЛАГАЛИЩНАЯ ТРИХОМОНАДА
Большинством авторов признается за самостоятельный вид. Этот жгутиконосец живет в мочеполовых путях женщин и мужчин. Имеет всесветное распространение. За последние годы, в связи с частыми находками, привлекает внимание не только паразитологов, но и гинекологов, урологов и даже венерологов.
Влагалищные трихомонады обнаруживаются в среднем у 14—20% женщин, значительно чаще у гинекологических больных, страдающих воспалительными заболеваниями половой сферы и гормональными нарушениями. Так, при наличии выделений из влагалища трихомонад находят в среднем у 30% обследуемых, а в отдельных группах у 88%. Нередки они также в осадках мочи. В последние годы появились работы, указывающие на обнаружение Trichomonas vaginalis у мужчин в уретре и в секрете предстательной железы при не специфических, не гоноройных уретритах (в 20% случаев и выше). Частота встречаемости, точная локализация в различных отделах мочеполовой системы, а также и способы передачи этого паразита остаются еще не достаточно изученными. Очевидно, основным путем передачи следует признать половой. Женщины являются резервуаром, источником инвазии, а мужчины передатчиками Trichomonas vaginalis. Признается и непрямой путь заражения (при пользовании общим полотенцем, губками, постелью, бельем, общими тазами для подмывания, при купании в ваннах, в бане и т. п.), но он, видимо, имеет меньшее значение в эпидемиологии. Большинство гинекологов склонно признавать патогенность этого жгутиконосца и считать его за причинный фактор некоторых воспалительных состояний влагалища (трихомонадный кольпит, трихомонадный вагинит и др.), часто сопровождающихся жалобами на чувство жжения, зуд, «едучие» обильные гноевидные, серовато-желтые или иногда жидкие, пенистые, белого цвета влагалищные выделения. Однако экспериментальных патологоанатомических доказательств их безусловной патогенности почти нет. По аналогии с другими видами простейших (дизентерийной амебой, кишечными трихомонадами и др.) можно думать, что и этим трихомо-надам, типично являющимся комменсалами, может быть свойственна факультативная патогенность. При изменяющихся условиях существования в организме хозяина, поражениях и нарушениях мочеполовой системы, случайно оказывающихся благоприятными для размножения жгутиконосцев и появления у них качественно новых свойств, они, видимо, могут проявлять и свойства патогенности.
114
МОРФОЛОГИЯ
Тело Trichomonas vaginalis грушевидной, реже круглой формы (рис. 32), имеет в длину 5—25 ц (в среднем — 13 ц), покрыто оболочкой— пелликулой. В окрашенных постоянных препаратах ядро продолговато-овальной формы, расположено в передней трети тела, имеет четко выраженную ядерную оболочку, разбросанные в большом числе мелкие зернышки хроматина и слабо заметную небольшую кариозому. Впереди ядра на переднем конце тела лежит группа блефаропластов,
от которых берут начало направляющиеся вперед 4 свободных, равных длине тела, тонких жгутика, ундулирующая мембрана и аксостиль. Ундулирующая мембрана тянется от переднего конца по одной из сторон до половины или до двух третей длины тела. Свободный край мембраны окаймляет краевая фибрилла, а в основании мембраны, прилегающей к телу, лежит базальная нить, или опорная, поддерживающая, фибрилла. Аксостиль, начинаясь, так же, как и ундулирующая мембрана, от блефаропласта, на переднем конце тела, огибает ядро и идет посередине тела к заднему концу, на котором выступает из тела наружу в виде заостренного шипика. Между ядром и основанием ундулирующей мембраны лежит удлиненной формы крупное парабазальное тело, состоящее из парабазальных телец и парабазальной фибриллы, тянущееся от переднего конца до се-
Рис. 32. Т rlchomonas vaginalis.
1 — ядро; 2 — блефаропласт; 3 — аксостиль; -/ — парабазальное тело; 5—ундулирующая мембрана.
редины тела трихомонады. Цитостом, или ротовое отверстие, в виде маленькой щели расположен на переднем конце тела, обычно незаметен или слабо заметен.
Питание Trichomonas vaginalis недостаточно изучено. В протоплазме редко встречаются лейкоциты. Допускается, что для питания используется гликоген, находящийся в эпителиальных клетках вагины. Наблюдались случаи фагоцитирования трихомонад лейкоцитами. Живые трихомонады характеризуются относительно быстрым, активным, толчкообразным, прогрессивно поступательным и вращательным движением. Иногда наблюдается подобие амебоидного движения. Размножение бесполое, путем продольного деления. Развитие и размножение происходит лучше всего в кислой среде (в среднем при pH 4-5,5). Цисты неизвестны; в литературе описаны безжгутиковые, неподвижные и не имеющие цистной оболочки так называемые цистоидные стадии (Г. М. Ткаченко, 1955), более устойчивые к внешним воздействиям, чем вегетативные формы.
ДИАГНОСТИКА
Диагностика Trichomonas vaginalis обычно ставится путем микроскопического исследования «свежей капли» вагинальных выделений
8*
11£
в нативном мазке. После введения влагалищных зеркал берется капля выделений из заднего свода или другого участка слизистой оболочки влагалища и помещается в каплю физиологического раствора на предметное стекло, накрывается покровным и микроскопируется вначале при малом, а затем при большом увеличении сухой системы. В случае обильных выделений последние могут быть взяты для исследования непосредственно с наружных половых органов или с «резинового пальца» после осмотра больной. У мужчин для исследования лучше брать путем выдавливания из уретры капли выделений до мочеиспускания или же больному предлагают выпустить на часовое стекло 2—5 капель мочи, обычно содержащей хлопья слизи, которые и следует брать для исследования в нативном мазке. Для обнаружения трихомонад в мочевом пузыре рекомендуется брать мочу катетером и исследовать ее осадок после центрифугирования.
Микроскопирование мазка следует проводить сразу же, не позже, чем через 1—2 часа после взятия материала. Нужно избегать подсыхания мазков, так как трихомонады гибнут моментально. Перед просмотром нативных мазков рекомендуется слегка подогреть препарат над пламенем горелки или же, если имеется нагревательный столик микроскопа, то исследовать на нем. В нативном мазке на фоне бесцветных эпителиальных клеток, лейкоцитов и слизи трихомонады выделяются более сильной светопреломляемостью, активной подвижностью и характерным движением ундулирующей мембраны и жгутиков. Последние особенности легче заметить в тонких участках мазка при слабом освещении. Следует воздерживаться от диагностики трихомонад по неподвижным образованиям, и в случае подозрения прибегать к повторным исследованиям.
Диагностику трихомонад, кроме исследования их в живом состоянии (в нативных мазках), можно проводить в постоянных окрашенных препаратах, предварительно фиксированных сухим или влажным методом. Последний метод включает фиксацию мазка жидкостью Шаудина и окраску его гематоксилином по Гейденгайну (как при изучении простейших кишечника). При сухом методе фиксации мазок на предметном стекле подсушивается на воздухе и фиксируется смесью спирта с эфиром или над пламенем горелки или парами карболовой кислоты (Е. В. Сваричевская), затем окрашивается по Граму или, лучше, краской Романовского-Гимза. В «сухих» мазках трихомонады обычно деформируются, структурные особенности выражены слабо, нечетко. Диагностика трихомонад в таких мазках требует, кроме навыка исследования, еще и большого времени. Детали строения изучают на «влажных» мазках, в которых форма и структура трихомонад хорошо сохраняются.
КУЛЬТИВИРОВАНИЕ
Для культивирования трихомонад предложено много питательных сред. Однако, в отличие от кишечных трихомонад (Trichomonas hominis) и трихомонад ротовой полости (Trichomonas elongata), нетребовательных к питательным средам и обильно растущих на самых простых сывороточных средах (физиологический раствор NaCl 0,85% — 10 частей, нормальная лошадиная сыворотка — 1 часть и петля рисового крахмала), влагалищные трихомонады на этих средах размножаются очень слабо и кратковременно или, чаще, только выживают до 20—30 дней, максимум до 60. Культивирование влагалищных трихомонад производится при 37°. Длительное выживание наблюдается и при 26°. Пересевы через три дня.
116
Для получения чистой, безбактериальной культуры в последнее время предложена (Ю. X. Терас, 1953) питательная среда TV (Trichomonas vaginalis) следующего состава. К 200 мл печеночного бульона добавляют 600 мл раствора Рингера, затем 20 г пептона, 1 г агар-агара и 1,5 г солянокислого цистеина. Смесь стерилизуется при 120° в течение 20 минут. После фильтрации (в горячем виде через фильтровальную бумагу) добавляют 5 г мальтозы, после чего снова стерилизуют при 105° в течение 20 минут. После охлаждения добавляется 200 мл стерильной инактивированной сыворотки человеческой крови, и среда (pH 6—6,3) разливается в стерильные пробирки. Печеночный бульон готовится следующим образом: 1 кг коровьей печени пропускается через мясорубку и заливается 2 литрами воды. Смесь ставится на 12 часов в холодное помещение, после чего ее кипятят в течение 15 минут и процеживают через несколько слоев марли или фильтровальную бумагу.
Получение чистых культур достигается путем добавления на 1 мл питательной среды TV по 2500 единиц пенициллина и стрептомицина. После 48—72-часового выращивания при температуре 37° делается пересев в новые пробирки с питательной средой TV, к которой также добавляется по 2500 единиц пенициллина и стрептомицина. Теперь после 48—72-часового выращивания пересев на новую среду TV делается уже без пенициллина и стрептомицина. На этой среде предложивший ее автор получал обильные безбактериальные, чистые культуры влагалищных трихомонад (до 3—5 млн. в 1 мл).
ЛИТЕРАТУРА
Зерчанинов Л. К. Trichomonas vaginalis Donne. 1936. Тр. Свердлов, и Перм. ин-та микробиол. и эпидемиол., т. 2, в. 1, 1939, стр. 97—105.
Павловский Е. Н. Руководство по паразитологии человека. Т. 1, М.—Л., 1946. Теохаров Б. А. О трихомониазе мочеполовых органов у мужчин. Вести, венерол.
и дерматол., № 5, 1956, стр. 49—52.
Терас Ю. X. О выращивании Trichomonas vaginalis в чистых культурах. ЖМЭИ9 № 8, 1955.
Truss el R. Е. Trichomonas vaginalis and Trichomoniasis. Springfield, 1947.
ЧЕРВИ —ТИП VERMES
СОСАЛЬЩИКИ —КЛАСС TREMATODES
ИЗУЧЕНИЕ МАТЕРИАЛА
Fasciola hepatica L. — Печеночная двуустка, или фасциола1
Подготовка материала. Печеночная двуустка является весьма частым паразитом желчных путей печени коровы, а также овцы, козы, лошади, верблюда, кролика; поэтому печень, пораженную этими трематодами, нетрудно получить с бойни непосредственно к занятию. Может случиться, что будет доставлена печень, инвазированная гигантской двуусткой (Fasciola gigantlcd), встречающейся на юге нашего Союза (Закавказье, Средняя Азия); это не может служить помехой для работы, так как обе трематоды встречаются у одних и тех же хозяев и весьма близки между собой по своему анатомическому строению. Главнейшее отличие между ними состоит в том, что у гигантской двуустки тело по длине больше в 1,5—2 раза и несколько уже, чем у печеночной; форма печеночной двуустки продолговато-овальная, у гигантской — края тела почти параллельны. Изучение гигантской двуустки может быть дополнено изучением печеночной, материал по которой рекомен-
1 Наряду с названием фасциола сохраняем в тексте укоренившееся старинное наименование — печеночная двуустка.
117
дуется держать в запасе как в виде постоянных препаратов, так и в глицерине.
Для изготовления постоянных препаратов трематод свежую фас-циолезную печень, полученную с бойни, помещают в фотографическую ванночку или поднос и производят внешний осмотр. Даже при умеренной инвазии можно обнаружить патологоанатомические изменения желчных путей печени, являющиеся результатом механическо-токсиче-ского воздействия паразита и влияния микробной флоры. Нередко, благодаря сильному развитию соединительной ткани, крупные желчные пути просвечивают через печеночную капсулу в виде беловатых тяжей, примерно в толщину мизинца.
После наружного осмотра печень вскрывают ножницами по ходу желчных путей. Тупая ветвь ножниц должна скользить по верхней стенке желчного хода во избежание повреждения паразита. По сопротивлению, которое встречают ножницы при разрезе, легко заметить сильное развитие соединительной ткани в окружности желчных путей. Еще лучше это выявляется в случае поперечнего перерезания желчных путей скальпелем. При значительной и длительной инвазии в результате хронического воспаления в стенках желчных путей наблюдаются известковые отложения. Иногда встречаются значительные расширения (дивертикулы) желчных путей, происходящие вследствие закупорки их паразитами. Встретившихся двуусток извлекают пинцетом и бросают для промывки в широкую чашку (простоквашницу) или в чашку Коха (большого размера), наполненную подогретой водой. Если сосуд невелик, а трематод много, то воду необходимо несколько раз сменить. Вода освобождает двуусток от покрывающей их слизи; этот процесс ускоряют тем, что двуустку, захваченную пинцетом, споласкивают в воде или направляют на нее из пипетки струйку воды. Эта процедура занимает 10—20 минут. Если двуустки живы, что легко определить по медленному сокращению их тела, то их можно оставить в воде и до следующего дня. После промывания в воде двуустку переносят на предметное стекло и прикрывают вторым предметным стеклом; оба стекла крестообразно перевязывают нитками и опускают препарат для фиксации в 70° спирт, который имеет преимущество перед формалинсодер-жащими фиксаторами. Через полчаса двуустки освобождаются из-под стекол и оставляются для продолжения фиксации на некоторое время в том же самом спирте или в новой его порции, в которой они могут сохраняться неопределенно долгое время.
С полученным таким образом материалом можно поступить двояко: а) спирт заменить разведенным водой глицерином (1:1) и в таком состоянии (в широкогорлой баночке) хранить материал для практических занятий, на которых он и используется в виде временных глицериновых препаратов, или б) изготовить из него окрашенные тотальные препараты для микроскопического исследования. С этой целью из спирта трематод переводят в воду на 15—30 минут и затем для окраски помещают в квасцовый кармин на полчаса; далее следует тщательная промывка водой (лучше оставить в воде до следующего дня), проведение через спирты возрастающей крепости, обезвоживание в 96° или абсолютном спирту, просветление в гвоздичном масле или карбол-ксилоле и, наконец, заключение в канадский бальзам. Хорошие результаты дает также окраска по Романовскому. В этом случае двуусток, тщательно отмытых от спирта, переносят в краску Романовского (2—3 капли краски на 1 мл воды) и в ней сильно перекрашивают, имея в виду, что при последующем обезвоживании в спирте часть краски оттягивается; дальнейшая же дифференцировка производится в гвоздичном масле, которое 118
просветляет препарат и также вытягивает часть краски. Далее препа-
рат для полного удаления гвоздичного масла промывают в нескольких порциях ксилола и заключают в канадский бальзам. Окраска по Рома
новскому труднее, так как многое зависит от свежести материала, каче-
ства краски и опытности препаратора, но в опытных руках эта окраска
дает хорошие результаты.
Демонстрационный препарат пищеварительной системы печеночной двуустки приготовляют путем инъекции ее 1% водным раствором бер
линской лазури. Для этой цели тонкую стеклянную капиллярную трубочку наполняют инъекционной жидкостью и вводят в ротовое отверстие живой двуустки. Постепенно осторожно вдувают краску, пока не будут заполнены ею все ветви кишечника, что заметно по посинению двуустки. Инъецированную двуустку помещают между двумя предметными стеклами в 70° спирт, обезвоживают, просветляют и заключают в канадский бальзам. Подобным же образом можно произвести инъекцию и выделительной системы, которая иначе не может быть отчетливо обнаружена. Отверстие выделительного канала находится на заднем конце тела. В выделительное отверстие вводят очень тонко оттянутую стеклянную трубочку и производят инъекцию, как указано выше.
Тотальный препарат печеночной двуустки. Изучение производится под препаровальной лупой при увеличении в 8—10 раз. Удобнее комбинировать изучение живой двуустки, только что извлеченной из печени и обмытой водой или зафиксированной, с изучением тотального, окрашенного препарата (рис. 33). В первом случае трематоду помещают на предметное стекло брюшной присоской вверх и накрывают вторым
Рис. 33. Fasciola hepatica.
/ — ветви кишечника, 2 —матка, 3 — протоки желточников, 4 — семенники, 5 — жел-точники, 6 — семяпроводы, 7—яичник, 8 — брюшная присоска, Р—cirrus, 10 — ротовая присоска с ротовым отверстием, // — глотка. Слабое увеличение.
предметным стеклом, предпочтительно меньшего размера. Тело фасциолы плоское; расширенный передний отдел его имеет конусовидный, округленный на вершине выступ, снабженный ротовой присоской. Кзади тело постепенно суживается. Длина его 2—3 см, наибольшая ширина 1 —1,3 см. Кутикула печеночной и гигантской трематод покрыта мелкими шипиками, заметными лишь на срезах при большом увеличении микроскопа.
Ротовая присоска при обычном положении двуустки на предметном стекле сдавлена; центральная ее полость, в глубине которой находится ротовое отверстие, более светлая. Толстые края ее образованы мощно развитой мускулатурой. Брюшная присоска находится по средней линии у основания выступа переднего края тела. Присоска правильно диско-идальной формы, наружный ее край резко очерчен. К приему пищи брюшная присоска никакого отношения не имеет. Благодаря наличию присосок и шипиков на поверхности тела достигается прочная фиксация паразита на стенке желчных путей.
119
Пищеварительная система начинается ротовым отверстием, лежащим в глубине ротовой присоски. Далее отчетливо заметна, благодаря сильно развитой мускулатуре, продолговато-овальная глотка, переходящая в короткий, слабо заметный пищевод, от которого отходят две ветви кишечника. Боковые ветви их особенно отчетливо видны в начальной части пищеварительного канала, в области переднего выступа тела; они также дают ответвления, с различной отчетливостью заметные в отдельных участках. На живых экземплярах и неокрашенных глицериновых препаратах ветви кишечника имеют вид светлых жилок. Иногда они наполнены темно-бурым содержимым и тогда особенно отчетливо видны. В среднем поле тела двуустки они труднее заметны, так как их маскируют семенники. Наиболее полное представление о пищеварительной системе можно получить на препаратах фасциол, инъецированных через ротовое отверстие (стр. 119).
Половая система двуустки — гермафродитная. Изучение ее удобнее начать с женских половых органов. Непосредственно за брюшной присоской лежит матка, представляющая собой извитую трубку неравномерного калибра, который зависит от количества находящихся в данном участке матки яиц. Последние, благодаря значительной величине (0,13—0,145X0,07—0,09 мм), хорошо различимы под лупой. Канал матки идет в паренхиме вперед над брюшной присоской и открывается в половую клоаку вблизи деления кишечника на 2 боковые ветви. Позади матки по средней линии тела находится тельце Мелиса, представляющее комплекс одноклеточных железок. Направо и вперед от тельца Мелиса в виде непарной ветвящейся трубки виден яичник с яйцеводом, соединяющимся с оотипом близ тельца Мелиса. Желточники представляют гроздевидные образования, занимающие боковые поля всего тела, начиная от уровня основания его переднего выступа. На глицериновых препаратах их расположение отчетливо заметно благодаря буроватой окраске, просвечивающей через покровы тела. Желточные каналы видны в зависимости от заполнения их желточными клетками. Протоки жел-точников справа и слева направляются к середине тела, где, сливаясь, образуют желточный резервуар, находящийся в связи с оотипом.
Для уяснения соотношений частей женского полового аппарата необходимо коснуться его функций. Яйцеклетка оплодотворяется в особой небольшой камере, находящейся близ тельца Мелиса, одним из сперматозоидов, проникающих сюда из полости матки, в которую они вводятся мужским копулятивным органом; здесь же яйцевая клетка окружается слоем желточных клеток, выделяемых желточниками и поступающих сюда по желточным протокам. Желточники по своему происхождению являются видоизмененными яичниками, и вырабатываемые ими клетки содержат в своей протоплазме большое количество питательного материала, идущего на питание зародыша, развивающегося из оплодотворенной яйцевой клетки; скорлупа, т. е. оболочка последней, является также производной желточных клеток. Такие яйца, под скорлупой которых, помимо яйцевой клетки, имеются и желточные, получили название сложных. Они типичны не только для сосальщиков, но и для ленточных червей.
Мужская половая система состоит из парных, сильно разветвленных семенников, занимающих среднюю часть тела. Кзади от желточных протоков ветви извиты, мелкозернисты и слабо контурированы. Они видны на окрашенных препаратах лучше, чем на живых объектах. На удачнс окрашенных препаратах заметны и парные семяпроводы в виде двух тонких нитей, обходящих справа и слева брюшную присоску и соединяющихся сразу впереди в общий, семяизвергательный канал. Послед-120
ний заканчивается совокупительным органом (cirrus) в виде относительно длинной трубки мышечного характера, лежащей впереди брюшной присоски в сумке цирруса (bursa cirri).
Выделительная система фасциолы, как и у всех плоских червей, протонефридиального типа. Она представляет собою систему тонких канальцев, разветвленных в паренхиме и впадающих в общий продольный канал, идущий по длине тела и открывающийся на его заднем конце. На обычных препаратах, а также у живых двуусток центральный выделительный канал иногда заметен в виде продольно идущей от заднего конца тела светлой полоски. Лучше всего выделительная система видна на инъецированных препаратах.
Поперечный срез печеночной двуустки. Живых двуусток после промывания в воде фиксируют в 70° спирте, на 100 мл которого прибавлено 3 мл формалина. Для более быстрой и лучшей фиксации двуустку разрезают на 2—3 части; в фиксирующей жидкости кусочки оставляют на 8 и более часов, после чего их переносят в 70° спирт. Можно применить фиксацию сулемой. Для этой цели приготовляют насыщенный водный раствор сулемы (стр. 59). К полученному раствору добавляется 3 мл ледяной уксусной кислоты. Перед употреблением жидкость следует нагреть до появления пара. Фиксируемые кусочки переносят в фиксатор на 20—30 минут, споласкивают в воде и помещают в 70° спирт, к которому прибавлена йодная настойка в таком количестве, чтобы спирт имел окраску чая средней крепости. Раствор сменяют 2—3 раза, пока спирт не перестанет обесцвечиваться. Далее кусочки переносят в 70° спирт, откуда их последовательно помещают в спирты возрастающей крепости до 96°. В каждой порции спирта выдерживают по 2—3 часа. Для лучшего обезвоживания 96° спирт следует сменить 2—3 раза. Если имеется возможность, то для полного обезвоживания кусочки помещают на час или более в абсолютный спирт. Далее следует просветление в гвоздичном масле или карбол-ксилоле (1—2 часа). Карбол-ксилол и гвоздичное масло удаляют промыванием в чистом ксилоле. Из ксилола кусочки переносятся в чашечки со смесью парафина с ксилолом (1:1), нагретой до растворения парафина. Незакрытые чашечки с кусочками паразита помещают в термостат при температуре 48—56°, в зависимости от точки плавления парафина. Через час кусочки переносятся в дважды сменяемый чистый парафин. Вся процедура заливки занимает 6—8 часов. После заливки следуют приготовление на микротоме поперечных срезов толщиной в 6—8 ц и наклейка их белком на предметные стекла. Дальнейшая обработка производится обычным путем по правилам гистологической техники. Для окраски удобнее воспользоваться гематоксилином Делафильда; дополнительной окраской служит эозин. В конечном итоге препарат заключают в канадский бальзам.
Вначале препарат рассматривают при слабом увеличении микроскопа. Полезно сразу же сделать в возможно большем масштабе рисунок, который дополняют по мере изучения препарата при большом увеличении. Конечно, микроскопическая картина будет различна в зависимости от того, из какой части тела сделан срез. В настоящем описании срез взят на уровне яичника (рис. 34).
При слабом увеличении различаем кутикулу с расположенным под нею субкутикулярным слоем, глубже лежат мышечные слои, окрашивающиеся слабее, и, наконец, составляющая главную массу тела рыхлая паренхиматозная ткань, в которой заложены внутренние органы. Кутикула представляет бесструктурный, чрезвычайно тонкий слой. Над ее поверхностью возвышаются кутикулярные шипики. Они имеют вид
121
коротких, но довольно толстых конусов, направленных вершиной назад; своим широким основанием они глубоко погружены в субкутикулярный слой. Субкутикула является производной эпителиальных клеток. Глубже субкутикулы видна тонкая светлая полоска—основная (базальная) перепонка. За ней следуют наружный кольцевой слой мышечных волокон, идущих в поперечном направлении, и внутренний — продольный. Мышечные волокна последнего слоя на препарате перерезаны поперек, следовательно, имеют вид телец неправильно округленной формы, близко лежащих друг к другу. Вся толща тела состоит из рыхлой паренхимы. Образующие ее клетки сливаются друг с другом своими отростками и образуют синцитий губчатого характера. На препарате видны в большом количестве мелкие шарообразные ядра паренхимных клеток.
Рис. 34. Поперечный разрез Fasciola hepatlca на уровне яичника.
/ — кутикула с шипиками, 2 — субкутикулярный слой, 3 — пучки мышечных волокон, 4— паренхима, 5 — кишечник, 6 —яичник, 7 — желточники. Среднее увеличение.
Помимо мышечных волокон, образующих кольцевой и продольный мышечные слои, в паренхиме заложены пучки мышечных волокон, проходящих в дорзо-вентральном направлении.
Ветви кишечника рассечены в поперечном и косом направлениях. Кишечная стенка образована цилиндрическими эпителиальными клетками, окрашивающимися весьма интенсивно.
Ветви яичника перерезаны преимущественно в косом направлении, в них мы находим яйцевые клетки в различных стадиях развития. Желточники занимают боковую часть препарата. Желточные клетки лежат небольшими группами; в протоплазме их заметны многочисленные неправильной формы зерна питательного вещества — желтка и лежащее ближе к центру темно окрашивающееся ядро. Обычно удается найти боковой парный проток желточника, в просвете которого находятся желточные клетки.
Стадии развития печеночной двуустки. Фасциолу переносят на часовое стекло с небольшим количеством воды, препаровальной иглой выдавливают из ее матки яйца или расщипывают двумя препаровальными иглами канал матки у его выводного отверстия. Еще лучше живых двуусток поместить в чашечку с физиологическим раствором при температуре 24—28°. В течение ближайших часов происходит обильное отложение яиц на дно сосуда. Осадок сливают в чашку Коха, доливают профильтрованной речной или прудовой водой и помещают в термостат при температуре около 25—24° на 14—16 суток. При более низкой температуре развитие затягивается на 3—4 недели. Во время нахождения яиц в термостате нужно несколько раз сменять воду, так как для развития необходим кислород. Наиболее благоприятна среда с pH в пределах от 3,0 до 7,5. Вылупление из яиц мирацидиев — первой личиночной стадии (рис. 35) происходит только на свету, естественном или искусственном, в течение нескольких минут. Продолжительность жизни мирацидиев по вылуплении из яиц непродолжительна — около одних суток. Для изучения их вылавливают пипеткой, переносят с каплей воды на предметное стекло и накрывают покровным стеклом. Ми-
122
рацидии имеют удлиненное, расширенное впереди и постепенно суживающееся к заднему концу тело незначительной величины (около0,2 мм). Поверхность покрыта многочисленными ресничками, благодаря которым они быстро плавают в воде. На переднем конце видно пигментное пятнышко— глазок. Следующие стадии развития (рис. 35) получают из их промежуточных хозяев — пресноводных моллюсков (Lymnaea truncatula, Lymnaea stagnalis, Lymnaea palustris), встречающихся в небольших прудах, канавах и на растениях в заболоченной местности.
Удобнее вскрывать моллюсков с расслабленным телом. Для этой цели их помещают в 0,1% раствор хлоралгидрата, в котором они окончательно засыпают на следующие сутки, или же в воду, в которой они
Рис. 35. Стадии развития Fasciola hepatlca.
Д — мирацидий, Б — спороциста с редией, R — редия с развивающимися церкариями, Г— цер-кария, Д — адоле1 карий, большое увеличение.
при постепенном нагревании до 40—45° расслабляют свою мускулатуру. Умерщвленных моллюсков вынимают из воды, раздробляют раковину и остатки ее удаляют пинцетом. На правой стороне тела отыскивают дыхательное отверстие, ведущее в полость мантии, и, введя в него ветвь тонких ножниц, вскрывают полость, ведя разрез по месту прикрепления мантии к переднему краю стенки тела. Мантийную полость внимательно осматривают и промывают водой из пипетки. В дальнейшем разрез ведут от середины головного конца тела через дно мантийной полости, а затем по средней линии завитков тела. Лоскутки стенки тела прикалывают булавками к дну препаровальной ванночки; препаровальными иглами раздвигают органы и осматривают полость тела, где могут встретиться спороцисты и редии — следующие стадии развития фас-циолы.
Все подозрительные образования извлекаются пинцетом или всасываются пипеткой, переносятся на часовое стекло и затем рассматриваются под лупой или микроскопом. Найденных спороцист и редий фиксируют 70° спиртом, и в дальнейшем из них приготовляются тотальные препараты, окрашенные квасцовым кармином. Спороцисты имеют вид неправильно-овальных, мешковидных образований размером около 1,0 мм. Через их стенку просвечивает развивающееся внутри новое поколение—редии 1-го порядка (в числе нескольких десятков); впоследствии они разрывают стенку спороцисты и расселяются в полости тела
123
того же самого моллюска. Подвижность редий слабая. На переднем конце тела расположено ротовое отверстие, ведущее в мешковидный кишечник. Вблизи переднего конца находится небольшое, слабо заметное отверстие для выхождения следующего поколения — редий 2-го порядка, в теле которых в свою очередь образуется поколение церкарий.
Для получения церкарий собранных улиток помещают в стеклянную чашку с профильтрованной речной или прудовой водой и оставляют стоять при комнатной температуре (18—20°). По истечении нескольких часов, иногда на следующий день, в поверхностных слоях воды можно заметить мелкие подвижные точки. Их вылавливают пипеткой, помещают в капле воды на предметное или часовое стекло и рассматривают под микроскопом. Церкарии имеют овальную форму тела, которое кзади переходит в подвижный хвостовой отдел. Хорошо заметны ротовая и брюшная присоски, а также кишечник, образующий две боковые ветки.
Церкарии впоследствии инцистируются и в этой стадии называются адолескариями. Заражение окончательных хозяев происходит при заглатывании адолескарий.
Dicrocoelium lanceatum Stil et Hass.— Ланцетовидная двуустка
Подготовка материала. Ланцетовидный сосальщик чаще встречается в печени овцы, чем у крупного рогатого скота. Зараженную печень получить с бойни труднее, чем печень с печеночной двуусткой. Для занятий предпочтительно иметь готовые, окрашенные квасцовым кармином, препараты. После фиксации паразитов окраска их квасцовым кармином длится 10—20 минут, промывка в воде — от нескольких часов до суток; далее следует обезвоживание в спиртах возрастающих концентраций. В просветляющую среду (карбол-ксилол, гвоздичное масло), во избежание сильных диффузных токов жидкости, могущих деформировать сравнительно нежные объекты, двуусток предпочтительно переносить, слегка сдавливая их между двумя покровными стеклами, перевязанными крест-накрест тонкой нитью. Далее препарат заключают в канадский бальзам.
Хорошие препараты получаются также при окраске трематод по Блажину. После выдерживания в воде в течение суток (без предварительной фиксации) трематод окрашивают несколько часов в 0,3% растворе кармина в молочной кислоте; при изготовлении краски кармин растворяют в 30% молочной кислоте при кипении. Продолжительность окрашивания следует проверять под микроскопом. Затем червей промывают в проточной воде до приобретения ими ярко-красного оттенка и переносят в дистиллированную воду, к которой предварительно прибавляют 3 капли 15% раствора полуторахлористого железа и 2 капли 1% раствора карболовой кислоты (из расчета на 100 мл дистиллированной воды). Через 2—3 часа, после почернения трематод в указанном растворе, их тщательно промывают в дистиллированной воде, проводят через спирты возрастающей крепости, просветляют гвоздичным маслом или ксилолом и заключают в бальзам.
Тотальный препарат. Вначале производят беглый осмотр ланцетовидного сосальщика под лупой, а затем препарат более детально изучают при слабом увеличении микроскопа. При зарисовке контуры двуустки и положение ее главнейших органов лучше сделать в возможно большем масштабе (ХЮ—15).
Тело ланцетовидной двуустки удлиненное, сравнительно узкое (5—15 мм длины и 1,5—2,5 мм ширины), суживающееся к обоим концам, причем больше к переднему (рис. 36). Под лупой хорошо видна 124
Рис. 36. Dlcrocoelium lanceatum.
/ — кишечник, 2 — семенники, 3 — желточники, 4 — матка, 5 —яичник. Малое увеличение. (По Е. Н. Павловскому).
ротовая присоска (в глубине которой находится ротовое отверстие) с утолщенными, плотными мышечными краями. Несколько кзади от нее находится брюшная присоска в виде резко очерченного диска. Часть его покрыта овальными крупинками черного цвета — яйцами, находящимися в канале матки, расположенной в толще тканей. Между обеими присосками, ближе к задней, заметно продолговатое образование — копулятивный орган (cirrus). Непосредственно за брюшной присоской находятся два резко окрашенных кармином (или другой ядерной краской) семенника, неправильно-овальной формы, иногда слабо дольчатые, лежащие наискось по отношению друг к другу. За задним семенником лежит небольшой яичник, точно так же окрашенный, как и семенники. Все тело кзади занято сильно развитой маткой. По сторонам тела на относительно небольшом протяжении, начиная от уровня яичника назад, располагаются коричневые зернистые желточники. Наконец, при внимательном осмотре по сторонам передней половины тела на уровне брюшной присоски и семенников заметны продольные ветви кишечника.
При слабом увеличении микроскопа более детально изучаем ланцетовидную двуустку по системам органов. Сразу за роговой присоской лежит небольшая мышечная глотка, переходящая далее в не всегда хорошо различимый пищевод; от него отходят две боковые ветви кишечника, заканчивающиеся слепо, не доходя до заднего конца тела; в задней половине тела они покрыты желточниками, частично извивами матки, а потому не могут быть прослежены на всем протяжении. Отходящие от семенников семяпроводы незаметны. Зато хорошо виден мешок цирруса, занимающий пространство от переднего края брюшной присоски до места деления пищевода на две ветви кишечника, причем
половые отверстия, как мужское, так и женское, открываются рядом; женское половое отверстие является вместе с тем и отверстием матки. Яичник, округлой формы, прилегает сзади ко второму семеннику. Матка содержит громадное количество яиц, придающих ей своеобразную окраску; наиболее молодые яйца на препаратах золотисто-желтые, чем и обусловливается соответствующая окраска частей матки, в которых они находятся. С течением времени скорлупа яйца сильно буреет и настолько уплотняется, что не пропускает через себя просветляющие среды, и поэтому на бальзамных препаратах яйца выглядят черными, как и заполненные ими ветви матки. Прослеживая расположение яиц, можно видеть, что канал матки направляется, слегка извиваясь между обоими семенниками над брюшной присоской, вперед к мешку цирруса. Выделительная система, устроенная так же, как у печеночной двуустки, на препаратах не видна.
Характерные особенности ланцетовидной двуустки: а) кишечник в виде двух неразветвленных боковых трубок; б) семенники, неправильно-овальной формы, лежат непосредственно кзади за брюшной присоской; в) мешок цирруса открывается впереди брюшной присоски; г) яичник округлой формы лежит непосредственно за семенником; д) матка занимает всю заднюю половину тела; е) желточники расположены по боковым краям средней части тела.
125
Opisthorchis felineus Riv. — Кошачья двуустка, или описторхис
Подготовка материала. Кошачья двуустка встречается
у кошек, собак, свиней и у
Рис. 37. Opisthorchis felineus.
/ — ротовая присоска, 2— пищевод, 3 — ветви кишечника, 4 — брюшная присоска, 5 — матка, 6 — желточники, 7 — желточные протоки, 8 — яичник, 9— семеприемник, 10 — семенники, 11 — выдели 'ельный канал. Малое увеличение. 'По Н. Н. Плотникову).
человека, распространена преимущественно в Западной Сибири; в Европейской и Среднеазиатской части Советского Союза более редка.
Изучение препарата. Длина тела 8 мм или несколько больше, ширина — до 3 мм. Под лупой видна ротовая присоска (рис. 37), развитая слабее, чем у ланцетовидной двуустки. Брюшную присоску, нерезко выраженную, лучше искать под микроскопом. От глотки идет короткий пищевод, делящийся на две простые ветви кишечника, расположенные параллельно сторонам тела, до его заднего конца, где они несколько утолщаются и заканчиваются слепо. В задней трети тела заметны два слабо лопастных семенника, лежащих наискось один позади другого. Передний имеет четыре лопасти, задний — пять. Почти всегда между ними виден широкий, слегка извитой канал, оканчивающийся отверстием на заднем конце тела — общий канал выделительной системы. Семяпроводы незаметны. Половое отверстие различимо с большим трудом; оно находится у переднего края брюшной присоски. Впереди семенников находим два образования, лежащие почти рядом, окрашивающиеся одинаково интенсивно; меньшее образование овальной формы, лежащее по средней линии, является яичником; другое, более крупное, неправильноовальной формы, сдвинутое несколько в сторону— семеприемник. Вся средняя часть тела, между ветвями кишечника с боков, брюшной присоской спереди и яичником позади, занята сильно извитой маткой, наружное отверстие которой находится рядом с мужским, у переднего края брюшной присоски. По бокам тела, кнаружи от ветвей кишечника, на уровне расположения матки, находятся желточники с отходящими от них желточными протоками.
Характерные особенности кошачьей двуустки: а) кишечник в виде двух неразвет-
толстых трубок; б) семенники дольчатые,
вленных, сравнительно
лежат у заднего конца тела, один позади другого; в) мешок цирруса отсутствует, половые отверстия открываются у переднего края брюшной присоски; г) яичник округлой формы лежит впереди брюшной присоски; д) семеприемник хорошо виден; е) матка занимает среднюю часть тела; ж) желточники находятся по сторонам тела на уровне
матки.
126
После изучения препаратов всех трех видов двуусток полезно составить сравнительную таблицу признаков двуусток по следующей схеме:
Признаки	Двуустки		
	печеночная	ланцетовидная	кошачья
Размеры Форма тела Как разветвлен кишечник Семенники, их форма и положение Положение матки Положение желточников Мешок цирруса (есть или нет) Положение полового отверстия			
В означенную таблицу могут быть внесены дополнительные данные, например размеры яиц (см. соответствующую главу), географические районы распространения указанных трематод и их главнейшие окончательные хозяева.
ЛИТЕРАТУРА
Павловский Е. Н Практикум по зоологии (глава: Брюхоногие моллюски). Л., 1938.
Павловский Е. Н. Руководство по паразитологии человека. Т. I, М.—Л., 1946.
Павловский Е. Н Учебник паразитологии человека. Медгиз, Л., 1951.
Павловский Е. Н. и Лепнева С. Г. Очерки из жизни пресноводных животных.
Изд. Советск, наука, М., 1948.
Панова Л. Г. Фасциолез сельскохозяйственных животных. Сельхозгиз, Л., 1951.
Плотников Н. Н. Описторхоз (гельминтоз печени и поджелудочной железы). Изд. АМН СССР, 1963.
Подъяпольская В. П. и Капустин В. Ф. Глистные болезни человека. Медгиз, М., 1958.
Скрябин К. И. Трематоды человека и животных. Т. I. М., 1947.
ЛЕНТОЧНЫЕ ЧЕРВИ —КЛАСС CESTOIDEA
ПОДГОТОВКА МАТЕРИАЛА
Ленточных червей, паразитирующих в кишечнике человека, нетрудно достать, обратившись в терапевтическое отделение больниц, клиник или на гельминтологический пункт. Следует иметь в виду географическое и местное распространение гельминтозов. Так, широкий лентец наичаще встречается у населения Прибалтики, бассейна Финского залива, в Карелии и Сибири; значительно реже лентец встречается в средней полосе СССР. Невооруженный цепень распространен повсеместно, но особенно часто встречается на юге СССР и в некоторых районах Сибири; цепень вооруженный редок у горожан, чаще встречается у сельского населения, пользующегося иногда свининой, не прошедшей ветеринарно-санитарный надзор; более широкое распространение, особенно в южных районах, имеет карликовый цепень. Следовательно, нельзя
127
рассчитывать на то, что весь необходимый материал может быть всегда собран на месте.
Полученный материал помещают в широкий сосуд (банку от варенья) или широкую чашку (простоквашницу) и промывают несколько раз сменяемой водой. Первоначальную промывку можно произвести и под водопроводным краном, но предварительно необходимо завязать сосуд марлей, во избежание потери отдельных члеников и головки паразита, которая нередко бывает оторвана в области шейки. После промывки цестод помещают в плоскую кювету большого размера. Таковой может служить фотографическая ванночка черного цвета; если же ванночка из прозрачного стекла, то ее ставят на темный фон. Для предупреждения сморщивания червя в ванночку наливают подогретую до 22—25° воду, в которой с помощью двух пинцетов расправляют тело паразита, обычно во многих местах затянувшееся в узлы. Растянутого червя наматывают на поверхность стеклянного цилиндра или стеклянную пластинку и фиксируют 70° спиртом. Через несколько часов или на следующий день паразита освобождают и в дальнейшем сохраняют в новой порции жидкости, в которой он был зафиксирован. Части стробилы, предназначенные для изготовления микроскопических препаратов, фиксируют, сдавив их предварительно между двумя предметными стеклами и перевязав последние в двух местах крест-накрест ниткой. Через час членики освобождают из-под стекла и оставляют еще на некоторое время в фиксирующей жидкости. Помимо тотальных окрашенных препаратов, полезно приготовить несколько неокрашенных, заключенных в канадский бальзам. При изготовлении препаратов из отдельных члеников разрезы проводятся не по самой границе члеников, а несколько отступя, захватив часть обеих соседних проглоттид. Для окраски пользуются чаще всего квасцовым кармином. Лучшие результаты дает окраска по Блажину, но последняя применима лишь к материалу, не подвергнутому фиксации.
ИЗУЧЕНИЕ МАТЕРИАЛА
Diphyllobothrium latum L. — Широкий лентец
Внешний осмотр паразита. Широкий лентец достигает в длину 7—9 м и более, могут встретиться вполне зрелые экземпляры значительно меньшей длины. Цвет его серовато-белый или слабо-желтоватый. Головка (сколекс) продолговато-овальная, нерезко отграниченная от последующей за ней шейки. Все тело (стробила) слагается из большого количества коротких, широких члеников (проглоттид). К заднему концу тела членики увеличиваются в ширину и становятся более короткими. Приблизительно со второй трети длины тела в середине каждого членика просвечивает, в виде светло- или темно-бурого образования, наполненная яйцами матка, представляющая собой сильно закрученную трубку.
Тотальный препарат головки. Головка (рис. 38, Л) продолговато-овальной формы, округленная на переднем конце, постепенно суживающаяся кзади, где переходит в тонкую шейку. Головка сплющена с боков, поэтому ее широкая поверхность соответствует боковой, а более узкие поверхности — брюшной и спинной сторонам, по которым проходят глубокие присасывательные щели — ботрии. Так как на препарате головка лежит на своей широкой боковой поверхности, то эти присасывательные щели не всегда различимы с достаточной ясностью. Длина головки 2—2,5 мм. Следующая за головкой шейка тонка, в раз-
128
личной степени выраженная морщинистость ее зависит от степени сокращения продольной мускулатуры.
Поперечный срез через головку. Подготовка материала: После заливки в парафин головки лентеца, на микротоме получают поперечные ее срезы толщиной в 6—8 ц. Наклеенные на предметное стекло срезы освобождаются от парафина и окрашиваются гематокси-
лин-эозином.
сторон, соответствующих
На поперечном срезе головка овальная (рис. 38, Б). С боковых
дорзальной и вентральной поверхностям, глубоко вдаются присасывательные щели (ботрии). В толще головки, особенно по краям ботрий, видны пересеченные в продольном и поперечном направлениях мышечные волокна. Более нежные волоконца, состав< ляющие главную толщу головки, представляют собой паренхиму. Справа и слева в поперечном ее сечении видны симметрично расположенные боковые выделительные
Рис. 38. Головка Dlphyllobothrlum latum.
1
А
А — целиком, Б —поперечный разрез. Среднее увеличение. 1 — ботрии, 2 — выделительные каналы.
каналы. Так как в области головки каждый из них петлеобразно изгибается, то они выглядят двойными, однако одна из петель канала меньшего диаметра, а потому слабо заметна.
Членики из средней и задней частей стробилы. Изучение ведется с помощью лупы, дополнительно при слабом увеличении микроскопа.
Членики (рис. 39) широкие и короткие или квадратные, в зависимости от места их в стробиле. Прежде всего в них привлекает внимание матка, представляющая собой длинную, неравномерного диаметра трубку, заполненную яйцами и образующую несколько извивов. Занимает она в членике центральное положение и из всех органов половой системы является наиболее объемистым. В передней части членика, по средней линии тела, между двумя извивами матки, лежит округлое образование — мешок цирруса, в котором рядом открываются семявыносящий проток и влагалище. Последнее тянется от мешка цирруса назад в виде тонкой трубки по средней линии тела и впадает в оотип; в его полость открываются также яйцеводы, протоки желточников и от него же начинается матка, имеющая самостоятельное отверстие для выведения яиц. Позади матки расположено тельце Мелиса, а по сторонам
9 Зак. 3420. Лабораторный практикум медицинской паразитологии,
129
от него двудольчатый яичник в виде нежного, слабо окрашивающегося образования. Вся остальная часть проглоттиды занята многочислен-
6	7
Рис. 39. Членик Dlphyllobothrlum latum.
/ — желточники, 2—семенники, 5— общее половое отверстие, 4— матка, 5 — выделительный канал, 6 — яичник, 7 —тельце Мелиса. Слабое увеличение.
ными желточниками и семенниками. Те и другие имеют не вполне правильную форму округлых зерен. Желточники более интенсивно окрашиваются на препаратах, чем семенники, и занимают преимущественно боковые поля членика.
Рис. 40. Плероцеркоид Dlphyllo-bothrium latum в мышцах ерша.
Отметим особенности широкого лентеца, определяющие его положение в семействе Diphyllobothriidae\ 1) присасывательный аппарат на
Рис. 41. Плероцеркоид Diphylloboth-
rium latum. Малое увеличение. (По Е. Н. Павловскому).
сколексе (головке) представлен двумя присасывательными щелями — ботриями; 2) матка открытого типа, т. е. имеет отверстие для выделения яиц.
Плероцеркоиды (личинки). Технические замечания. На занятиях используют свежую, естественно зараженную рыбу. Живых плероцеркоидов изучают в часовых стеклах с водой. При отсутствии живого материала изучают фиксированные в 70° спирте, а также бальзамные тотальные микропрепараты, окрашенные квасцевым кармином, или же неокрашенные. Наиболее подходящей рыбой по частоте и обилию заражения являются молодые щуки, ерши, окуни, налимы. Процент заражения колеблется в широких пределах в зависимости от места улова и возраста рыбы.
Исследование рыбы на заражение плероцеркоидами начинают с внешнего осмотра, наиболее удобны для этой цели ерши. Рыба предварительно обмывается водой и для удаления слизи протирается ватным или марлевым тампоном. Лежащие под кожей плероцеркоиды просвечивают в виде белых узелков размером с конопляное зерно или продолговатых образований белого цвета (рис. 40). Кожу
подрезают в стороне от узелка острием скальпеля или разрывают препаровальной иглой; извлеченных плероцеркоидов помещают в чашечку с водой.
После наружного осмотра рыбу вскрывают и осматривают серозную оболочку полости тела, через которую также
бывают заметны поверхностно лежащие плероцеркоиды. Они встре-
чаются и во внутренних органах, например в печени или в яичнике.
130
Однако большая часть их находится в мышцах. Для обнаружения и сбора их следует снять с рыбы кожу и с помощью скальпеля соскоблить мышцы; плероцеркоидов не трудно найти среди обрывков мышечной ткани.
Извлеченных плероцеркоидов (рис. 41) изучают вначале в часовом стекле с водой. Они белого цвета, длиною около 1—2,5 см, слегка в поперечном направлении морщинисты благодаря сокращению продольной мускулатуры; при легком подогревании морщинистость сглаживается и тело несколько вытягивается. Последнее дряблое и мягкое, будучи приподнято посередине препаровальной иглой или пинцетом, свешивается вниз. На переднем конце тела имеются ботрии, которые могут быть обнаружены при малом увеличении микроскопа. Для этой цели плероцеркоида переносят с небольшим количеством воды на предметное стекло, слегка подогревают для полного расправления переднего отдела тела и при легком надавливании накрывают покровным стеклом. Внутренних систем органов мы у личинок лентеца не находим.
Микроскопические бальзамные препараты плероцеркоидов, как окрашенные, так и неокрашенные, менее демонстративны и ничего существенного не прибавляют к тому, что дает изучение живого объекта.
Taeniarhynchus saginatus (Ooeze)— Цепень невооруженный, Taenia solium L. — Цепень вооруженный
Внешний осмотр. Тело у обоих видов молочно-белого цвета, достигающее в длину у невооруженного цепня 6—8 м, у вооруженного 1,5—3 м. На переднем конце видна головка, ясно отличимая от следующей за нею более узкой шейки. Форма члеников (проглоттид), состав
ляющих стробилу, у обоих видов сходная. Проглоттиды, следующие за шейкой, незначительного размера, короткие, широкие; далее, постепенно увеличиваясь в размерах, они становятся квадратными, достигая у вооруженного цепня 4—5 мм, у невооруженного — 6—8 мм. Ближе к заднему концу размер их увеличивается, особенно в длину. Наиболее задние проглоттиды узкие, длинные. Каждая проглоттида, за исключением молодых, составляющих переднюю часть стробилы, на боковой стороне имеет половой бугорок, на вершине которого находится углубление— половое отверстие; по длине стробилы половые отверстия неправильно чередуются друг с другом.
Головка цепня невооруженного. Изучение производится при слабом увеличении микроскопа.
Головка (сколекс) угловато-округ-
Рис. 42. Головки цепней.
А — Taeniarhynchus saginatus, Б — Taenia solium. Малое увеличение. Помимо присосок виден хоботок с крючьями.
лая, диаметром 1,2 мм, с 4 при-
сосками, крест-накрест расположенными на боках (рис. 42, Л). При сильном сдавливании головки или когда она обращена к глазу наблюдателя своей вершиной, видны одновременно все 4 присоски. При слабом сдавливании препарата в одной плоскости одновременно заметны лишь 2—3 присоски; остальные видны при опускании тубуса микроскопа. Каждая присоска имеет вид правильного вогнутого диска, наружный
131
край которого резко отграничен от окружающих тканей. Край присоски исчерчен в радиальном направлении благодаря мощному развитию в ней мускулатуры. В профиль форму присоски можно сравнить с чашкой, края которой выступают над поверхностью покровов головки. При помощи присосок цепень своей головкой плотно прилегает к слизистой оболочке кишки хозяина. При расслаблении кольцевой мускулатуры присоски в полости последней создается отрицательное давление, вследствие чего в него втягивается соответствующий участок слизистой. Эта фиксация настолько крепка, что противостоит перистальтическим движениям кишечника. Хоботок на головке отсутствует. В паренхиме головки (лучше это видно на неокрашенных препаратах) разбросаны мелкие пепельно-черного цвета пигментные зерна, концентрирующиеся по
Рис. 43. Гермафродитные членики.
А — Taeniarhynchus saginatus, Б— Taenia solium.
/ — формирующаяся матка, 2—семяизвергательный канал, 3 — влагалище, 4 — тельце Мелиса, 5 — желточник, С — яичники, 7 — боковые каналы выделительной системы, 8— семенники, 9 — добавочная долька яичника. Малое увеличение.
краям присосок и впереди их в виде дугообразных полос; также, в особенности на свежем материале, заметны мелкие блестящие зерна — известковые тельца, они имеются и в паренхиме тела. За головкой следует морщинистая шейка; эта морщинистость симулирует сегментацию, но значительно грубее последней. Проглоттиды, следующие за шейкой, коротки, они наиболее молоды, а потому половая система в них не развита.
Головка цепня вооруженного. Отличается от головки невооруженного цепня меньшей величиной (0,8—1,0 мм в поперечнике). Помимо 4 присосок, головка (рис. 42, Б) снабжена хоботком, вооруженным 24—28 хитиновыми крючьями; иногда число крючьев достигает 32. Крючья располагаются в виде двойного венчика, причем наблюдается правильное чередование крючьев большего и меньшего размера. Каждый крючок состоит из основной широкой части, укрепленной на поверхности хоботка, и свободного острия, несколько изогнутого и направленного назад. Хоботок с его крючьями является добавочным органом прикрепления паразита к стенке кишечника.
Гермафродитный членик цепня невооруженного. Изучение препарата (рис. 43, Л) производится с помощью лупы с 8— 10-кратным увеличением; в заключение можно использовать слабое увеличение микроскопа.
Проглоттиды с вполне сложившимся половым аппаратом находятся в начале средней части стробилы. Шириной они несколько превосходят 132
Б
Рис. 44. Зрелые членики.
A —Taenia solium, Б— Taeniarhynchus saginatus. (Ио Е. Н. Павловскому).
длину или же квадратной формы. Установить передний и задний край проглоттиды не представляет особого труда, так как передний уже заднего. На одной из боковых сторон находится половой бугорок. В задней половине проглоттиды, симметрично от средней линии, расположен двудольчатый яичник. Доля, находящаяся на стороне, соответствующей половому бугорку, меньше доли противоположной стороны. Яичник состоит из многочисленных тонких, ветвящихся и анастомозирующих друг с другом трубок. Последние по средней линии тела, ближе к задней части яичника, сливаясь, впадают в непарный яйцевод, не всегда отчетливо заметный. Позади яичника, параллельно заднему краю проглоттиды, расположен желточник, имеющий вид сплющенной треугольной пластинки; благодаря тому, что желточник состоит из сильно анастомозирующих между собой трубок, он приобретает сетчатую структуру. Короткий проток желточника направляется вперед и впадает в яйцевод. У места впадения находится группа мелких железок, совокупность которых носит название тельца Мелиса, отчетливо различимого в виде темноокра-шенного образования, лежащего по средней линии непосредственно впереди желточника. Сюда же подходит влагалище, отверстие которого открывается в ямке полового сосочка; многочисленные шарообразные семенники располагаются по всему членику; их протоки собираются в семяизвергательный канал, идущий впереди влагалища
и заканчивающийся циррусом в глубине полового бугорка. Семяизвергательный канал извилист и отличается от влагалища большей толщиной.
Гермафродитный членик цепня вооруженного. Изучение производится так же, как указано для цепня невооруженного. Соответственно меньшей величине тела, проглоттиды меньшего размера, чем у невооруженного цепня, приблизительно в 2—2’/2 раза. Различие в половой системе (рис. 43,5) состоит в том, что яичник трехдольчатый. Наиболее крупная доля находится на стороне членика, противоположной половому бугорку. Вторая доля значительно меньше, лежит позади влагалища. Третья, добавочная долька, имеющая вид тонкой ветви, расположена на той же стороне параллельно средней линии тела впереди влагалища. В связи со зрелостью членика матка то вовсе не видна, то представляется в виде продольного стволика, иногда с короткими боко» выми ответвлениями.
Мелкие многочисленные шарообразные семенники находятся в передней половине и боковых частях членика, как у предыдущего вида.
Зрелый членик цепня невооруженного. Длина членика превышает ширину (рис. 44,5); самые задние членики узкие, длинные. На боковой стороне членика видна половая клоака, к которой подходит извитой семяизвергательный канал, заканчивающийся копулятивным органом, и влагалище. Матка представляет продольный ствол в виде тонкой трубки с боковыми ветвистыми ответвлениями, число которых свыше 16 на каждой стороне. Матка вытесняет остальные части половой системы, от которой больше всего сохраняются семенники.
133
Зрелый членик цепня вооруженного. Зрелые проглоттиды удлиненной формы; наибольшая длина задних проглоттид 15— 20 мм при ширине 4—6 мм. Невооруженным глазом матка видна в виде продольного ствола с 8—10 ответвлениями в каждую сторону, имеющими в свою очередь небольшие вторичные ветви, или лопасти (рис. 44, Д). На боковой стороне заметна половая клоака с впадающими в нее влагалищем и семяизвергательным каналом, оканчивающимся копулятивным органом.
Исследование мяса на финноз
Подготовка материала. Для получения финнозного мяса следует обратиться на бойню. Удобнее пользоваться свиным мясом, так как свиньи бывают чаще и более интенсивно инвазированы цистицер-ками (Cysticercus cellulosae), чем рогатый скэт (у которого паразитирует Cysticercus bovis). Помимо этого, цистицерки свиного цепня более
Рис. 45. Финка Taenia solium.
л —целиком; б, в н г—вскрытая (3 последовательные стадии); д — с вывернутой головкой. (По Е. Н. Павловскому).
демонстративны благодаря большей величине и вооруженному хоботку, чем цистицерки бычьего цепня. Мясо на занятие поступает свежим (нефиксированным). При необходимости оставить мясо на несколько дней его следует держать в прохладном месте, предохраняя влажной тряпкой от высыхания. Полезно приготовить из финок с ввернутой и вывернутой головкой тотальные микроскопические препараты, окрашенные кармином и заключенные в бальзам.
Осмотр мяса. На разрезах через мясо видны пузырьки овальной формы размером от горошины до зерна фасоли (рис. 45). Через тонкую, но плотную их стенку просвечивает внутренняя полость, наполненная прозрачной жидкостью, в чем нетрудно убедиться, проткнув стенку препаровальной иглой. Через оболочку финки хорошо также про-134
свечивает оформившаяся головка цепня, отходящая от внутренней поверхности пузырька и находящаяся во ввернутом состоянии. Размер ее с конопляное зерно или немного крупнее. При проведении разреза через исследуемое мясо часть финок повреждается и при этом, вследствие выхождения жидкости, головки часто бывают отчетливо видны в виде плотных белых узелков. Отдельные финки легко выделить из окружающих их тканей с помощью пинцета и препаровальной иглы. Отпрепарованную финку сдавливают между указательным и большим пальцами левой руки, производя скользящее движение по направлению головки; этим достигается выворачивание головки. Для возможно полного выворачивания финки боковой стороной препаровальной иглы поглаживают по направлению от пузырька к вершине головки. Выворачивания головок можно достигнуть и иным способом. Выделенных из мяса финок помещают по одной-две в пробирки с желудочным соком. Пробирки помещают в водяную баню или в сосуд с водой, температура которой поддерживается в пределах 37—40°. Через 20—30 минут можно заметить выворачивание головки, но оно не доходит до конца. Для полного выворачивания цистицерков переносят из желудочного сока в желчь или же процесс выворачивания заканчивают механическим давлением препаровальной иглой, как было указано выше.
Изучая при слабом увеличении микроскопа вывернутую головку цистицерка вооруженного цепня, мы находим 4 присоски и хоботок, снабженный крупными крючьями. В тканях живой головки видны в большом количестве овальные зерна — известковые тельца.
Род Hymenolepis W е i n 1.
Род Hymenolepis содержит значительное количество видов, встречающихся у различных теплокровных животных, но лишь один из них — карликовый цепень (Hymenolepis папа) свойствен человеку, другой вид — крысиный цепень (Hymenolepis dimlnuta) для человека является гостепаразитом. Удобнее начать изучение с последнего вида, так как строение полового аппарата, характерное для представителей Hymenolepis, может быть изучено на нем более отчетливо, чем на карликовом цепне.
Hymenolepis diminuta Rude — Цепень крысиный
Подготовка материала. Для получения материала вскрывается «дикая» крыса. После извлечения из кишечника и отмывки в воде от кишечного содержимого цепня фиксируют в 70° спирте в возможно расправленном состоянии. Для этой цели цепня слегка натягивают, навертывая на стеклянную пробирку, и опускают в спирт, или же растягивают на стекле, удерживая в растянутом состоянии легким надавливанием большого и среднего пальцев левой руки на передний и задний конец тела, и обливают из пипетки спиртом. По истечении 2—3 минут, когда можно считать паразита убитым, пальцы от стекла отнимают и на стекле же помещают лентеца в сосуд со спиртом для окончательной фиксации. Небольшие куски стробилы могут быть фиксированы между двумя предметными стеклами.
Изучение производится на препаратах, окрашенных кармином и заключенных в канадский бальзам, при слабом увеличении микроскопа.
Тотальный препарат. Полный экземпляр крысиного цепня длиной 20—40 см. Головка (сколекс) на переднем конце округлая, в поперечнике 0,2—0,5 мм, нерезко отграниченная от следующей за ней
135
шейки, снабжена 4 присосками; хоботок рудиментарен и находится в ямке на передней поверхности головки; крючья отсутствуют (рис. 46).
Продвигая препарат по длине стробилы от переднего конца к заднему, можно проследить постепенную закладку органов половой системы (рис. 47). Прежде всего закладывается в средней части членика яичник, слагающийся из многочисленных коротких трубок зернистой структуры. Половые пути выражены хорошо и открываются наружу на
Рис. 46. Головка Hymenolepis di-mlnuta. Среднее увеличение.
Рис. 47. Членики Hymenolepis dlminuta.
1 — 3 — семенники, 2— яичник, 4 — желточник, 5 — половое отверстие. Слабое увеличение.
одной и той же стороне тела. В более зрелых члениках видно по три округлых семенника. На боковой стороне членика, соответствующей половому отверстию, находится один, на противоположной стороне —два. В этих члениках яичник достигает большего развития и позади частично обхватывает желточник, имеющий вид мелкозернистого, более интенсивно окрашивающегося образования. Половые пути образуют здесь значительные расширения. Латерально лежит расширение мужского выводного канала — семенной пузырек; другим расширением, значительно большего размера, достигающим средней линии тела, является семеприемник. Задние, зрелые, членики также остаются короткими и широкими. Их максимальная ширина 5—6 мм. Мешковидная матка, содержащая в своей полости многочисленные яйца, вытесняет остальные части половой системы.
Hymenolepis папа Blanch. — Цепень карликовый
Подготовка материала. Для получения материала следует обратиться в соответствующие лечебные учреждения. Полученные от больного, после приема противоглистных средств, испражнения подлежат исследованию в ближайшие часы, так как стробила цепня карликового в течение короткого времени мацерируется и легко распадается на отдельные проглоттиды. Часть фекалий помещают в плоскую чашку Петри, разводят водой и рассматривают при помощи ручной лупы, дающей малое увеличение. Белые образования, напоминающие нити слизи, извлекаются с помощью препаровальной иглы и для промывки переносятся в чистую воду. Убедившись с помощью лупы или микроскопа в том, что они действительно являются цепнями, их помещают на предметное стекло для фиксирования.
Ввиду возникающей иногда трудности в получении материала от человека, для учебных целей может быть использован цепень мышиный— 136
Hymenolepis jraterna (Stiles), морфологически неотличимый от карликового. В препаровальной ванночке под поверхностью воды тонкими ножницами вскрывают кишечник домовой мыши. Если найденные цепни
остались прикрепленными к стенке кишечника, то удалить их можно струей тепловатой воды с помощью пипетки. Цепней отмывают от кишечной слизи, фиксируют и используют для изготовления тотальных, окрашенных кармином, препаратов.
Тотальный препарат. Длина червя в пределах 1—3 см, ширина — 0,1—0,15 мм в начале стробилы и 0,5—0,8 мм в ее задней части. Стробила (рис. 48) слагается из широких, коротких проглоттид, число которых достигает 100 и более. Самые последние проглоттиды становятся удлиненными, однако они легко отрываются и на препарате обычно отсутствуют. Головка имеет 4 присоски и втяжной хоботок с 24—30 мелкими крючьями, расположенными в один ряд; если хоботок втянут, крючья просвечивают через ткань головки. По строению половая система сходна с таковой крысиного цепня, но она менее отчетливо видна, чем у последнего, вследствие незначительной величины проглоттид. Для ее изучения следует просмотреть всю стробилу, начиная с головки. Половые пути открываются лишь на одной и той же стороне стробилы. Мешок копулятивного органа (цирруса) грушевидной формы, находится в передней части проглоттиды. С ним граничит лежащий более центрально семенной пузырек. Семенники неправильно шарообразной формы, в числе трех, расположены в ряд у заднего края членика, из них один лежит на стороне, на которой находится половое отверстие, остальные на противоположной стороне членика. Яичник помещается непосредственно впереди семенников, иногда даже налегает на них и представляет образование, вытянутое в поперечном направлении с перетяжкой в средней части, позади которой лежит округлой формы желточник. Находясь впереди среднего семенника, желточник может частично прикрывать последний. Задние членики почти целиком заполнены разросшейся мешковидной маткой, наполненной яйцами в различных стадиях развития. Из других частей половой системы в задних члениках дольше всего сохраняются семенники.
Dipylidium caninum L. — Цепень тыквовидный
Рис. 4<8.
Hymenolepis папа. Среднее увеличение. (По Е. Н. Павловскому).

Обычный паразит кишечника собак и кошек; у человека встречается редко в качестве гостепаразита.
Подготовка материала. Вскрывается кишечник собаки или кошки (предпочтительно брать животное в возрасте нескольких месяцев, так как молодые бывают инва-зированы чаще и более обильно, чем взрослые). Головка плотно укреплена на слизистой и при неосторожном удалении паразита пинцетом легко отрывается. Фиксация и
дальнейшая обработка обычные. Задние членики легко отделяются от стробилы и при вскрытии кишечника оказываются свободно лежащими. Их собирают отдельно и фиксируют сдавленными между двумя пред-
метными стеклами.
137
Рис. 49. Головка £>/-pylldlum cardnum. Среднее увеличение.
Тотальный препарат. Длина тела паразита 10—20 см и более. Головка небольшая, но хорошо отличимая от более узкой шейки. Членики в начальной части тела короткие, широкие, трапециевидные. Вскоре они становятся удлиненными, а затем приобретают очень характерную форму, напоминающую семена огурца или тыквы, откуда и произошло название этого червя — тыквовидный.
Головка. Изучение производится при слабом, а затем при сильном увеличении микроскопа.
Сколекс (рис. 49) небольшой, в 1,5—2 раза шире следующей за ним шейки (в поперечнике 0,35—0,40 мм), округлый, с 4 присосками в виде продолговато-овальных ямок. Впереди головка несет втяжной хоботок; при полном выпячивании последний имеет полушаровидную форму и покрыт 4 рядами мелких крючьев. Крючья, находящиеся ближе к вершине хоботка, крупнее задних. При втянутом хоботке крючья просвечивают через покровы сколекса.
Гермафродитный членик. Членик (рис. 50) вытянуто-овальной формы. По обеим сторонам его симметрично расположены половые отверстия. Эта двойственность половых путей, как и всего полового аппарата, характерна для представителей рода Dipylidium. В половую клоаку открываются два канала. Передний канал, идущий в косом направлении и спереди назад — мешок цирруса, в который впадает более извитой семявыносящий канал изменчивого диаметра. В него открываются протоки семенников. Семенники шарообразной формы, многочисленны (до 150 и более), залегают в паренхиме всего членика кнутри от боковых каналов выделительной системы. Задний канал представляет влагалище. Открываясь наружу рядом с мужским половым отверстием, он вначале идет параллельно мешку цирруса, но затем почти под прямым углом поворачивает назад по направлению к яичнику соответствующей стороны. Гроздевидный яичник состоит из двух долей. Позади него лежат желточники; они более массивны и более интенсивно окрашиваются, чем яичник. В более зрелых члениках видна сетеобразная матка; в таком случае семенники представляются как бы лежащими в петлях сети.
Зрелый членик. Длина зрелого членика 6—8 мм. Форма его удлиненно-овальная;
на боковых сторонах отчетливо заметны парные половые каналы. Половые органы под влиянием сильно разросшейся матки редуцированы. Яйца в матке лежат группами, окружаются общей оболочкой и таким образом сформировываются в яйцевые капсулы (коконы), заключающие по 8—16 яиц.
Рис. 50. Членик Dipylidium canlnum.
1 — мужское половое отверстие, 2 —женское половое отверстие, 5—выделительный канал, 4 — семенники, 5 —желточники, б —яичники. Слабое увеличение.
138
Echinococcus granulosus Rud. — Цепень эхинококка
по частям, про-
Рис. 51. Echtroco ecus granulosus.
/ — хоботок, 2—присоска, 3 — выделительный канал, 4 — матка, 5 — половое отверстие с копулятивным органом, б —яичник. 7—желточник, 8 — зрелые яйца в матке, 9 —мешок копулятивного органа, ]О — влагалище. Среднее увеличение. (По Е. Н. Павловскому).
Подготовка материала. Ленточную форму эхинококка легче всего получить из кишечника собаки. Предпочтительно использовать собак из сельских местностей, где убой скота производится самим населением и выброшенные органы с финками эхинококка легко могут быть съедены собаками.
Тонкая кишка вскрывается ножницами по месту прикрепления брыжейки в ванночке с водой. Удобнее вскрывать кишечник мывая вскрытые участки; если содержимого кишечника мало, то для лучшего осмотра слизистой на нее направляют из пипетки струю воды. Промывная вода должна быть собрана и осмотрена на присутствие в ней паразитов. При находке паразитов, плотно держащихся на слизистой, соответствующий участок кишечника вырезается и помещается на некоторое время в плоскую чашечку с теплой водой. Собирать паразитов из промывных вод и со стенки кишечника удобнее с помощью пипетки. Фиксация и дальнейшая обработка обычные. Необходимо отметить, что, ввиду возможности инвазии человека яйцами эхинококка, при вскрытии должны быть соблюдены соответствующие предосторожности, тщательно промыты или прокипячены предметы, приходившие в соприкосновение с ин-вазированным материалом; промывные воды должны быть обезврежены кипячением.
Тотальный препарат. Изучение препарата (рис. 51) следует производить последовательно при малом и большом увеличении микроскопа.
Длина стробилы эхинококка незначительная — 4—6 мм. Сколекс снабжен четырьмя присосками и хоботком, несущим два ряда мелких крючьев, число которых варьирует; в среднем их 36—40. Нередко на препаратах крючья отсутствуют вследствие их отпадения при сборе и фиксации материала. Стробила слагается из трех или, иногда, четырех члеников; первый членик широкий, иногда почти квадратный; второй продолговатый; последний, наиболее крупный, нередко составляет половину длины стробилы. Половые отверстия в члениках неправильно чередуются.
Для изучения полового аппарата наиболее удобен средний членик. Небольшие многочисленные (до 50) шарообразные семенники заложены преимущественно в передней половине членика, в задней занимают краевое положение, так как в центральной части находятся женские органы. От каждого семенника
идет тончайший семявыносящий канал (на препарате не виден); каналы семенников впадают в семяизвергательный канал, переходящий в цир-рус, открывающийся в клоаку. Непосредственно позади него от клоаки отходит тонкий канал — влагалище, дугообразно заворачивающийся к месту соединения боковых долей яичника, лежащего в задней половине членика. Здесь же по средней линии тела просвечивает в виде интенсивно окрашенного образования тельце Мелиса; еще далее назад, почти у границы членика, находится желточник. Иногда заметна и ко-
139
Рис. 52. Головка Echinococcus granulosus из выводковой капсулы. Сильное увеличение.
роткая матка, расположенная по средней линии членика кпереди эт яичника.
Половое отверстие на боковой стороне зрелого членика сдвинуто ближе к заднему концу. Видны многочисленные, резко контурированные яйца с толстой оболочкой, лежащие в полости матки, представляющей собой тонкостенный продолговатый мешок с небольшими боковыми выпячиваниями.
Ф и н н а э х и н о к о к к а. Пузырчатые формы эхинококка наичаще встречаются среди домашних животных: у крупного рогатого скота, овец, коз и свиней. Локализация их — печень, легкие, реже прочие органы. С бойни легко получить соответствующий материал, который поступает на занятие в живом, нефиксированном виде. По миновании надобности материал сжигают или закапывают в землю, по возможности глубже, предварительно облив его керосином во избежание поедания собаками.
Помимо сырого материала, к занятию подготовляются микропрепараты с выводковыми капсулами и головками эхинококка. Для этой цели ножницами вскрывают пузырь и с внутренней его стенки, путем соскабливания шпателем, собирают выводковые капсулы и одиночно сидящие головки в чашечки с водой. Для лучшей отмывки их можно подвергнуть центрифугированию в дважды сменяемой воде. В этой же пробирке они фиксируются в 70° спирте с добавлением формалина в течение 30 минут—1 часа. В дальнейшем полученный материал хранят в 70° спирте. Окраска при надобности производится квасцовым кармином с последующим заключением, после обезвоживания и просветления, в бальзам.
Осмотр эхинококкозной печени. Наиболее демонстративна печень, пораженная эхинококками. Уже при наружном осмотре на темном фоне капсулу просвечивают плотные образования белого
печени через ее цвета, иногда с буровато-желтоватым оттенком, размером от вишни до крупного яблока (в зависимости от возраста финн эхинококка и глубины их локализации). При эхинококкозе легких картина сходная, по на светло-розовохм фоне легкого финны не столь резко отличаются от окружающей ткани. В случае множественности их поверхность легкого представляется крупнобугристой.
При ощупывании чувствуется напряженность стенок пузыря. После прокола иглой из его полости выбивает фонтанчиком светлая, прозрачная жидкость, одной из характерных особенностей которой является отсутствие белка, в чем легко убедиться, прибавив в пробирку с собранной жидкостью 3% уксусную кислоту. Осадок при кипячении не образуется, тогда как в жидкости, содержащей белок, выпадает осадок.
Стенка пузыря состоит из двух слоев. Поверхностный кутикулярный слой белого, матового, цвета, микроскопически слоистый. Внутренний зачатковый, или герминативный, слой незначительной толщины; за счет тканей его происходит формирование головок и выводковых капсул. Последние имеют вид беловатых пузырьков размером с мелкую булавочную головку; они могут находиться также в свободном состоянии в пузырной жидкости. Часто в эхинококковых пузырях у домашних животных выводковых капсул и головок не образуется (у крупного рогатого скота в 80% случаев). Такие финны, называемые стерильными или ацефалоцистами, не могут служить источником заражения для окончательного хозяина,
140
Головка эхинококка. Изучение производится при сильном увеличении микроскопа. Головки (рис. 52) овальной или яйцевидной формы, резко очерчены. Через ткани втянутой внутрь головки просвечивает ряд мелких крючьев. Группируются они вокруг продольной оси головки, в среднем ее отделе. При положении вершиной к глазу наблюдателя видно, что крючья образуют правильный венчик.
ЛИТЕРАТУРА
Павловский Е. Н. Руководство по паразитологии человека, т. I, М.—Л., 1946. Павловский Е. Н. Учебник паразитологии человека. Л., 1951.
Павловский Е. Н. Практикум по зоологии. Л., 1938.
Подъяпольская В. П. и Капустин В. Ф. Глистные болезни человека. Медгиз, М., 1958.
СОБСТВЕННО КРУГЛЫЕ ЧЕРВИ - КЛАСС NEMATODES
ИЗУЧЕНИЕ МАТЕРИАЛА
Ascaris lumbricoides L. — Аскарида человеческая
Подготовка материала. При невозможности иметь для занятий в качестве объекта человеческую аскариду ее можно заменить тождественной в морфологическом отношении свиной аскаридой (Ascaris suum). Еще более удобно вскрывать большую по размеру лошадиную аскариду (Parascaris equorum), анатомически близкую к указанным двум видам. Материал получают на мясокомбинатах или бойнях. Человеческую аскариду достают для занятий из терапевтических отделений больниц, клиник и, особенно, гельминтологических пунктов. Наружную морфологию паразитов изучают на свежих объектах или на фиксированных предварительно в жидкости Барбагалло (стр. 13). Ознакомление с внутренним строением лучше проводить на аскаридах, зафиксированных спиртом; при этом аскарид первоначально помещают в 5% спирт и в течение месяца переводят через спирты возрастающей крепости в 50% спирт, в котором и сохраняют. Для получения микроскопических препаратов (срезов) живых аскарид разрезают бритвой на кусочки не более 1 см и фиксируют формалином (5%), спирт-формали-ном (5% раствор продажного формалина в 70° спирте) или лучше в жидкости Ценкера с формалином. Заливка в парафин-целлоидин или целлоидин. Срезы окрашивают железным гематоксилином и эозин-гема-токсилином.
Наружный осмотр. Живые аскариды желтого цвета с розоватым оттенком, мертвые — бледно-желтые. Веретеновидное тело, покрытое плотной, блестящей кутикулой, равномерно слегка суживается к обоим концам. Отмечаем, что у одних аскарид хвостовой конец тела загнут крючком; соответствующий отдел более крупных аскарид — прямой и конически заострен (рис. 53). На переднем конце тела находится ротовое отверстие в виде трехгранной щели, окруженное тремя хорошо различимыми валикообразными выростами, или «губами»; одна из губ лежит на спинной стороне и две другие занимают брюшно-боковое (ла-теро-вентральное) положение.
Вынув более крупную аскариду из воды, обтираем ее полотенцем и рассматриваем невооруженным глазом. При осмотре наружных покровов обращаем внимание на две просвечивающие, продольно идущие
' 141
вдоль всего тела боковые линии. Значительно слабее выражены две
другие продольные линии, расположение которых соответствует спинной
и брюшной сторонам тела. Все 4 продольные линии образованы выдаю-
щимися внутрь тела выступами субкутикулярного (гиподермического) слоя, делящими площадь поперечного сечения тела аскариды на 4 равных сегмента (рис. 54). В боковых выступах заложены выделительные каналы
>	5
Рис. 53. Ascarls lumbrlcoldes.
Л —самец и самка, Б— задний конец самца. Видны сосочки и две спикулы, одна нэ них лежит внутри тела.
аскариды, а на спинной и брюшной сторонах проходят соответствующие нервные стволы. Брюшная сторона аскариды легко определяется
2	3	4
Рис. 54. Поперечный разрез самки Ascarls lumbrlcoldes.
/ — кутикула, 2 —гиподерма, 3— гиподермальные валики, 4— кишечник, 5 —яичник, 6 — мышечные клетки, 7—матка, 8 — выделительный канал.
положением анального отверстия, находящегося в виде поперечной щели несколько кпереди от заостренного заднего конца тела. На расстоянии 2 мм от переднего конца на брюшной стороне можно найти, 142
при рассматривании под лупой, выделительное отверстие. У свежих червей сквозь покровы тела отчетливо видны переплетающиеся, более или менее тонкие белые нити отдельных частей половой системы.
Определение пола. Самки крупнее самцов (20—30 смХ ХЗ—6 мм), с почти прямым, конически заостренным, задним концом. На границе первой и второй трети тела находится кольцевидная перетяжка, и на ней с брюшной стороны видно (под лупой) точечное наружное половое отверстие (vulva)/окруженное выступающим ободком. Самцы мельче (15—20 см\2—4 мм), их задний конец крючкоообразна изогнут на брюшную сторону. При рассматривании хвостового конца, в боковом положении видны две тонкие, равные по длине (около 2 мм) и слегка изогнутые вентрально щетинковидные спикулы — копулятивные придатки полового аппарата. Иногда, впрочем, спикулы бывают-втянуты внутрь тела, или наружу выступает лишь одна из них. Половое отверстие является общим с анальным; местонахождение последнего указывают спикулы, выступающие из клоаки.
Закончив ознакомление с внешним видом аскарид, следует приступить к изучению отдельных деталей их наружной морфологии, имеющих систематическое значение.
Губы аскариды. Острым скальпелем или бритвой срезают у самого основания губы аскариды, помещают препарат в боковом положении на предметное стекло в капле глицерина или молочной кислоты и, накрыв покровным стеклом, легким давлением препаровальной-иглы разъединяют губы под контролем микроскопа. Рассматривают сердцевидную форму и зубовидный край губ. Через наружный кутикулярный слой, покрывающий губы, явственно заметен более темный рисунок гиподермы, образующий так называемую пульпу губ в виде двух лопастей, разъединенных продольно идущей бороздой. У основания губ хорошо видны чувствительные сосочки. Следует обратить внимание на число и различное расположение сосочков на дорзальной и латеро-вен-тральных губах. Дорзальная губа несет два двойных сосочка, а каждая из латеро-вентральных губ — по одному двойному и, кроме того, па паре простых сосочков. Несколько иное строение имеют губы лошадиной аскариды.
Задний конец самца. Просматривают под микроскопом отрезанный и просветленный в глицерине или молочной кислоте задний конец тела самца (рис. 53, Б).
Плотность и толщина наружных покровов аскариды требуют нескольких часов для просветления препарата. Поэтому лучше заготовить материал накануне. Отрезают задние концы тела паразитов длиной 1,5—2 см, погружают их в чашечку с молочной кислотой (прижать покровным стеклом!). Препараты из них приготовляются на занятии самими учащимися.
При боковом положении объекта рассмотрим длинные ножевидные и слегка изогнутые спикулы. Хорошо заметна поперечная исчерченность кутикулы. Обратить внимание на значительное число кутикулярных сосочков, расположенных преанально (около 70 пар) и постанально (7 пар); один непарный сосочек лежит по срединной линии перед клоакальным отверстием (рис. 53,Б).
Задний конец самки. Хвостовой отдел самки также предварительно просветляют в глицерине или молочной кислоте и исследуют под микроскопом. На конически заостренном конце тела видны два симметрично лежащих сосочка. При вентральном положении объекта находим анальное отверстие в виде поперечной щели.
Вскрытая самка. Вскрытие производится под водой в ванночке с восковым дном. Вначале разрезают острым скальпелем покровы
143
тела по средней линии спинной стороны на 2—3 см и далее продолжают скальпелем или малыми ножницами надрез кпереди и кзади. Края разреза фиксируют косо направленными булавками.
Полость тела у аскариды мнимая, так как все пространство между внутренними органами и стенкой тела заполнено нежной «изоляционной» тканью, легко разрываемой при вскрытии. Пищеварительная трубка расположена по средней линии на всем протяжении тела. Рот ведет в цилиндрический мышечный ‘ пищевод (передняя кишка), имеющий на поперечном разрезе трехлучевую форму; в его просвет открываются три пищеводные железы. За пищеводом следует средняя, затем задняя кишка, последняя заканчивается анальным отверстием. Передний и задний отделы кишечника выстланы кутикулой; стенка энтодер-мальной средней кишки состоит из клеток однослойного эпителия, расположенных на бесструктурной мембране.
Выделительная система состоит из двух каналов, заложенных в хорошо заметных боковых линиях гиподермы. В передней части тела оба канала соединяются в один непарный, открывающийся наружу выделительным отверстием. Нервная система представлена окологлоточным и анальным нервными кольцами, связанными рядом продольно идущих нервных стволов; из них лучше выражены стволы, расположенные на брюшной и спинной сторонах. Половая система парная, т. е. имеются два яичника, два яйцевода и парная матка. Половые органы имеют вид белых извитых нитей и шнуров, заполняющих большую часть тела. Нитевидные, длинные яичники переходят в несколько расширенные яйцеводы, последние продолжаются в трубчатые матки, являющиеся самыми широкими участками половых путей. В верхней трети тела обе матки образуют непарный короткий рукав (vagina), открывающийся наружным половым отверстием на брюшной стороне.
Вскрытый самец. Половой аппарат самца состоит из одной непарной трубки. Извитая начальная часть ее является семенником. К нему примыкает семяпровод, который заканчивается семяизвергательным каналом, впадающим в заднюю кишку.
Поперечный срез самки. Предпочтительнее изучить срез, изготовленный из средней части тела аскариды (рис. 54). 1 Наружную стенку тела составляет трехслойная кутикула, под которой залегает более интенсивно окрашенная гиподерма, утратившая клеточное строение и представляющая протоплазматический пласт с рассеянными в нем ядрами. Гиподерма в четырех местах образует выступы, которые разделяют площадь поперечного сечения аскариды на 4 равных сегмента. Хорошо развитые боковые валики гиподермы пронизаны выделительными каналами; прочие два, т. е. спинной и брюшной, развиты слабо, в них проходят нервные стволы. Промежутки между выступами гиподермы заполняют крупные мышечные клетки. Кнутри от мышечного слоя, т. е. в средней части препарата, находим неправильной формы разрез кишечника и многочисленные срезы отдельных участков половой системы. Яичники представлены небольшими округлыми образованиями с интенсивно окрашенными стерженьками и отходящими от них ооцитами с периферически расположенными ядрами; такое строение придает срезу яичника вид колесика. Округлые срезы большего диаметра, без стержня, заполненные свободно лежащими ооцитами, являются разрезами яйцеводов. Два крупных, почти круглых среза с тон-
1 Технику приготовления срезов см. стр. 16.
144
недели до занятия готовят культуру передний отдел матки паразита, со-
ким слоем колБцевой мускулатуры и с большим количеством яиц на различных стадиях развития представляют срезы матки аскариды.
Если позволит время, следует рассмотреть срезы аскариды на уровне пищевода, а также срезы самца на уровне задней четверти тела.
Развитие яйца. За 3—4 аскаридных яиц (рис. 55). Берут держащий оплодотворенные яйца, разрезают его на части и помещают в чашку Коха на увлажненный животный уголь (carbo animalis puris). Культура хранится в термостате при температуре 28—30°. Влажность среды поддерживается регулярным приливанием воды. Освобожденные из матки яйца можно культивировать также во влажной камере в жидкости Барбагалло или в 1% растворе формалина. Примерное время, необходимое для «созревания» яиц и сформирования в них личинок при указанной температуре колеблется для Ascaris lumbricoides и Ascaris suum от 20 до 14 дней. К этому сроку в культурах можно наблюдать различные стадии созревания яиц, так как не все яйца развиваются одновременно. Конечной стадией является яйцо с подвижной личинкой, свернувшейся кольцевидно или перекрестно.
Аскаридное яйцо, закончившее развитие и содержащее живую личинку, называется инвазионным. Фактически зрелость яиц
наступает лишь после линьки находящихся в них личинок. Следовательно, не всякое яйцо с подвижной личинкой может быть названо инвазионным. В условиях лабораторного опыта яйца в культурах при 33° содержат личинку на 12-й день, однако заразить ими животных удается только спустя 4 дня, т. е. после линьки личинок. На занятии демонстрируется культура и серия временных микроскопических препаратов, показывающих процесс развития яйца до стадии зрелой личинки. Для получения препаратов личинок зрелые яйца переносят из культуры на предметное стекло и накрывают покровным; при легком нажатии на последнее препаровальной иглой личинки выходят из яиц. Свободные личинки можно получить также следующим путем. Яйца, выделенные из матки, культивируют в чашках Петри с дистиллированной водой при комнатной температуре в течение пяти недель; к концу этого срока развитие заканчивается, и в яйцах появляются подвижные личинки. Вода должна часто сменяться во избежание бактериального загрязнения и сопутствующего токсического действия продуктов микробного
Рис. 55. Яйца и личинка Ascaris lumbricoides.
Л—свежевыделенное яйцо, Б — инвазионное яйцо, содержащее слинявшую личинку, В — передний конец личинки, /’ — личинка.
10 Зак. 3420. Лабораторный практикум медицинской паразитологии
145
метаболизма. Затем зрелые яйца помещают в жидкость Тироде1 (pH—7,4—7,6) при температуре 38—40°. Через 15 часов в указанной среде самостоятельно выходит из яиц 10% личинок, и число последних значительно возрастает в последующие 2—3 дня.
Вылупление личинок в жидкости Тироде происходит вследствие изменения внутренней оболочки яиц при действии энзимов личинок, чему
способствуют благоприятствующие условия среды. Изменение внутренней оболочки яйца (рис. 56, а) может произойти в любом ее участке, и тогда на этом месте появляется выпячивание яйцевых оболочек, постепенно принимающее почти сферическую форму (рис. 56,6 и в); личинка последовательными толчками разрывает передним концом истонченную внутреннюю оболочку (рис. 56, г) и, прорвав активными движениями внешние оболочки, покидает яйцо (рис. 56, д и е). Инвазионная аска-ридная личинка имеет 0,19—0,25 мм длины и 0,013—0,017 мм в диа-
1 Раствор Тироде: хлористый натрий — 0,8 г, хлористый кальций — 0,02 г, хлористый калий — 0,02 г, хлористый магний — 0,01 г, одноосновный натрий фосфата — 0,005 г, двууглекислый натрий — 0,1 г, глюкоза — 0,1 г, дистиллированная вода— 100 мл. Для стерилизации фильтруют через свечу Беркфельда.
146
метре; ее тело после линьки в яйце одето чехликом цилиндрической формы с округленным передним концом и заостренным задним, слегка обращенным дорзально. Спереди на небольшом выступе различимы три губы. Пищевод занимает около трети длины тела, кишечник заканчивается тонкой прямой кишкой.
Для демонстрации живых личинок пользуются микроскопом с нагревательным столиком и наблюдают личинок при 30—35°. Нагревание среды вызывает быструю реакцию со стороны личинок — оживленные движения тела, типичные для зрелых аскарид.
Миграция личинок. Объектами изучения являются окрашенные срезы кишечника, печени и легких мыши или морской свинки, зараженных зрелыми аскаридными яйцами.
Методика заражения животных. Заражение лабораторных животных производится per os. Мышей и крыс заражают с пищей: нарезают, например, несколько кусочков сыра (1X0,5 см), в центре каждого кусочка делают достаточно глубокий треугольный разрез и в него помещают зрелые аскаридные яйца. Морским свинкам и кроликам культура вводится небольшой деревянной лопаточкой в рот, раскрытый и фиксированный пинцетом. Летальная доза для свинок колеблется от 30 до 50 яиц на грамм веса тела и в среднем определяется в 35 зрелых яиц; обычно свинки после приема такой дозы гибнут на восьмой день после заражения. При благоприятном исходе животные полностью освобождаются от инвазии через 25—28 дней. Для получения препаратов, показывающих внедрение личинок в кишечную стенку, зараженное животное (удобнее, мышь) вскрывают спустя 7—10 часов после инвазии. Для обнаружения личинок в печени вскрытие производится через 20—24 часа; удачные препараты легких получаются при вскрытии зараженных животных в период с 5-го по 7-й день после заражения. Наличие мигрирующих аскаридных личинок во внутренних органах животных устанавливается прессованием кусочков печени и легких между двумя предметными стеклами. Кроме того, личинок из органов получают способом экстракции по Фюллеборну (стр. 189).
Описание микроскопических препаратов. Кишечник мыши. Кровеносные и лимфатические сосуды расширены и местами заметны небольшие кровоизлияния. Рассеянные очаговые инфильтраты из полинуклеаров и единичных эозинофилов. Личинки располагаются преимущественно в капиллярах и в ткани слизистой, встречаясь иногда в muscu-laris mucosae и очень редко в подслизистом слое.
Печень мыши (рис. 57,Д). В начальных стадиях миграции личинок (24 часа) наблюдаются расширение печеночных капилляров и небольшие очаговые инфильтраты из полинуклеаров, одноядерных и эозинофильных клеток по соединительнотканным промежуткам и в окружности расширенных капилляров; местами видны ограниченные кровоизлияния. Личинки встречаются преимущественно в капиллярах, частью в печеночной ткани.
Легкое морской свинки (рис. 57, Б). Обширные кровоизлияния в полости альвеол и бронхов. Инфильтраты из полинуклеаров,. одноядерных, эпителиоидных и единичных гигантских клеток. Обилие альвеолярных фагоцитов; эозинофильная инфильтрация перибронхиаль-ной ткани. Личинки в бронхах, трахее и легочной ткани (на 10-й день после инвазии).
Демонстрация легких морской свинки (фиксация по Кайзерлин гу).
1.	Нормальные легкие.
W*	117
Рис. 57. Мигрирующие личинки аскариды.
Л —личинка в печени мыши через сутки после заражения; Б —личинка в дыхательных путях легких. Масса эритроцитов из сосудов, прорванных личинками при миграции. Большое увеличение.
2.	Легкие морской свинки на 5-й день после заражения.
Легкие имеют характерный мраморный вид, будучи усеяны с поверхности многочисленными кровоизлияниями в виде разбросанных красных пятен различной величины.
3.	Легкие морской свинки, погибшей в результате массивной инвазии на 10-й день опыта.
Легкие сильно уплотнены. На общем однородном по окраске темнокрасном фоне вкраплено большое количество черных или яркокрасных пятен.
Trichocephalus trichiurus L. — Власоглав
Подготовка материала. Достать для занятий власоглава, паразитирующего у человека, не всегда возможно; изгонять этого паразита трудно, и даже в случае успешного лечения не всегда удается получить целые, неповрежденные экземпляры. Скорее можно рассчитывать на получение власоглавов при вскрытии трупов в больничных учреждениях. Полезно также установить связь с патологоанатомическими и судебномедицинскими кабинетами (кафедрами). За неимением Trichocephalus trichiurus пользуются власоглавом свиным (Trichocephalus suis) или овечьим (Trichocephalus ovis), которых сохраняют в жидкости Барбагалло. На занятии целесообразно давать власоглавов в часовом стекле с водой и власоглавов, просветленных в молочной кислоте. Для просветления паразитов помещают в чашечку с молочной кислотой. Временные препараты на занятии приготовляются самими слушателями: паразитов кладут на предметное стекло и, прилив достаточно молочной кислоты, накрывают их покровными стеклами.
Наружный осмотр. Просмотр самца и самки власоглава (рис. 58) ведут под лупой. Живые власоглавы сероватые, фиксированные— белого цвета. Тело явственно разделяется на две различные по толщине части: передний, более длинный участок волосовидный, более короткий задний — утолщенный; наружный диаметр переднего отдела, где проходит пищевод, колеблется от 165 до 180 ц, утолщенная задняя часть тела 550—650 ц ширины. У самца утолщенная часть тела свернута спирально, у самки конец этой части дугообразно изогнут. Размер самца обычно колеблется от 30 до 45 мм, волосовидный участок значительно длиннее утолщенной части тела (3:2). Самка 35—40 мм, соотношение тонкой и утолщенной частей тела выражается как 2 : 1. Утонченный, нитевидный конец тела является передним и лишен каких-либо придатков; последние, впрочем, не видны под лупой и на заднем конце тела. Плотная кутикула, одевающая тело, лишает возможности видеть внутреннее строение червей.
Ознакомившись под лупой с наружной морфологией власоглава, переходят к рассмотрению самца и самки в молочной кислоте. Просматривают препараты сначала при малом увеличении микроскопа. Для изучения подробностей строения обращаются к большому увеличению. Из двух предложенных паразитов определяют самца и самку, после чего приступают к микроскопическому изучению самца. Тело паразита просматривают последовательно, начиная с переднего отдела. Уже при осмотре начальной части головного конца хорошо заметна поперечная исчерченность кутикулы. На одной стороне нитевидного отдела тела, несколько отступя от переднего конца, поперечная исчерченность кутикулы прерывается; на этом участке располагается довольно широкая полоса, образованная точкообразными выступами, которые являются вершинами мелких палочковидных элементов, находящихся в клетках
149
А	Б
Рис. 58. Trlchocephalus trichlurus.
Л—самка (X 5), /> — самец (х 5). 7 — анус, 2 —пищевод, 3 — семяизвергательный канал, 4 - - кишечник, 5 — яичник, 6 — яйцевод, 7 — семяпровод, 8 — семенник, 9 — матка, 10— вульва, 77 —вагина (Belding, 1952).
Рис. 59. Детали строения власоглава.
А — поперечный срез передней, волосовидной части тела Trichocephalus trichiurus (х 270$: J —клеточное тело, 2—пищевод. Б —задний конец самца Trichocephalus trichiurus'. 1 — спикула в спикулярном влагалище.
субкутикулярного слоя (гиподермы) и проникающих в кутикулярный слой; данная сторона тела является вентральной. Ротовое отверстие, открывающееся на переднем конце, лишено губ и каких-либо других придатков и переходит в пищевод, имеющий вид длинной капиллярной трубки.
Продвигая препарат кзади, можно заметить, что пищевод позади нервного кольца, постепенно расширяясь, образует удлиненный псевдо-бульбус без клапанов. Далее пищевод вступает в группу расположен-
ных в один ряд четковидных клеток (так называемое «клеточное тело») и, проходя через последние, постепенно принимает эксцентрическое положение (рис. 59,А). Имея в основном трехгранное сечение, пищевод в задней своей половине, благодаря неравномерному развитию мышечного слоя, местами в разрезе неправильно округлой формы. На границе утолщенной части тела пищевод переходит в кишечник, однако проследить последний на всем протяжении затруднительно, так как в этом же отделе расположена половая система, представляющая длинную петлистую трубку, опутывающую своими извивами пищеварительный канал. Как и у всех самцов нематод задний отдел кишечника (rectum) и конечный отдел половых путей открываются в общую полость (клоаку). На спирально изогнутом заднем конце тела видна одиночная (2,5 мм) спикула, саблевидно изогнутая и заостренная на конце (рис. 59,Б); последняя вместе со спикулярным влагалищем, покрытым многочисленными шипиками, обычно выступает из клоаки и хорошо заметна при малом увеличении микроскопа.
Рис. 60. Яйца и личинка Trichocephalus trichiurus.
При просмотре самки на границе перехода нитевидной части ее тела
А — свежевыделенное яйцо, Б — инвазионное яйцо, В — передний конец личинки со стилетом, Z’—личинка, вышедшая из яйца.
в утолщенную заднюю видно выступающее наружу полусферическое образование, усеянное шипиками. Пользуясь большим увеличением микроскопа, можно заметить на этом выпячивании отверстие, ведущее в изогнутый канал, стенки которого покрыты такими же шипиками. В просвете канала обычно лежат единичные яйца характерной боченковидной формы с гладкой толстой оболочкой и двумя выступами на обоих срезанных полюсах в виде пробочек. Если двигать препарат по направлению к заднему концу тела, обнаруживается большое количество яиц, компактно лежащих в просвете длинной трубки, образующей многочисленные извивы и петли в теле самки. Постепенно правильная форма яиц утрачивается, они встречаются все реже и совершенно исчезают в задних участках трубки, имеющих значительно меньший диаметр. Наружный, покрытый шипиками, отдел половых путей заканчивается половым отверстием. Примы-
151
кающий к последнему короткий канал с шиповатыми стенками служит влагалищем, дальнейшим продолжением которого является наполненная яйцами, относительно широкая трубчатая матка. Непосредственно следующий за маткой суженный отдел половой трубки представляет яйцевод, соединяющий матку с тонким извитым яичником. Таким образом, влагалище власоглава, в отличие от аскариды, переходит в непарную половую трубку. Подобная структура половой системы встречается у самок круглых червей значительно реже и носит название простого или одиночного полового аппарата. В задней, слегка изогнутой вентрально части тела виден кишечник, доходящий до конца тела и открывающийся наружу анальным отверстием.
После изучения препаратов паразиты промываются в воде и возвращаются в жидкость Барба-галло. Хранить власоглавов следует в отдельных пробирках, так как нитевидные концы паразитов легко переплетаются, образуя иногда трудно распутываемый клубок.
Развитие яиц. Различные стадии развития яиц власоглава представлены на рис. 60. Осторожно разрезают утолщенную часть тела самки и яйца, добытые из матки, помещают в 1 % раствор соляной кислоты при 28—30°. При большом количестве яиц власоглава в фекалиях их собирают по способу Фюллеборна (стр. 180), тщательно отмывают от поваренной соли и культивируют, как указано выше. Яйца выделяются из кишечника с еще неслившимися половыми ядрами; последние сливаются при температуре 28—30° через 14—28 часов. За слиянием половых ядер следует период покоя (13—18 часов), после чего наступает дробление яйца. Подвижные личинки в яйцах при 30° появляются через три недели. Полезно просмотреть все стадии развития яиц на одном препарате, приготовленном из разновременно поставленных культур. Размеры боченковидных яиц: 0,05—0,054X0,023—0,026 мм.
Enterobius vermicularis L. — Острица
Подготовка материала. Для получения остриц обращаются в терапевтические отделения больниц, клиник и в гельминтологические пункты; паразитов можно получить также в хирургических отделениях лечебных учреждений. Острицы нередко встречаются в червеобразном отростке слепой кишки. По Н. И. Соловьеву (1927), из 144 исследованных отростков, удаленных оперативным путем, острицы оказались в 67 (46,5%), и число паразитов колебалось от единичных экземпляров до 113. По данным С. И. Банайтиса (1929), при исследовании 640 иссеченных отростков острицы были обнаружены в 258 (40,31%), причем общее количество найденных паразитов составило 1580. Значительно реже в отростках встречаются власоглавы. Для получения остриц могут быть взяты как свежеудаленные аппендиксы, так и консервированные в формалине. Отросток укрепляют на доске и осторожно вскрывают го длине малыми ножницами (свежие отростки) или скальпелем (консервированные). Сравнительно крупные самки остриц, видимые невооруженным глазом, извлекаются непосредственно из отростков. Для обнаружения более мелких самцов все содержимое отростка помещают в часовое стекло с водой и просматривают под лупой. Подобным же образом исследуют и соскоб со слизистой оболочки отростка. Собранных паразитов сохраняют в жидкости Барбагалло.
Микроскопическое исследование содержимого отростка и соскоба слизистой обнаруживает также яйца остриц и, реже, других кишечных паразитов (аскарид, власоглава, ленточных червей). Наиболее зараженные острицами отростки целесообразно использовать в качестве демон-152
страционных препаратов. Локализация остриц в отростке вызывает часто патологогистологические изменения его стенок. Для показа патогенного влияния паразита на хозяина следует несколько отростков исследовать на срезах (заливка в парафин или целлоидин) и приготовить серию микроскопических демонстрационных препаратов.
Наружный осмотр. Самец и самка остриц рассматриваются в часовом стекле с водой. При осмотре невооруженным глазом на черном фоне видно, что острицы — мелкие глисты белого цвета. Более крупный экземпляр, длиной от 8 до 13 мм при поперечном диаметре 0,3—0,5 мм, является самкой; заостренный хвостовой конец ее шило-видно вытянут или слабо изогнут в сторону. Второй червь, задний конец которого тупой и спирально свернут, меньшего размера (2,5 мм X Х0,1—0,2 мм) —самец. Дальнейший осмотр остриц ведется под лупой (рис. 61). На переднем конце кутикула образует короткие, симметрично расположенные с обеих сторон полулунные расширения (головные везикулы); размер их у самки (7,6 мм)—0,25X0,198 мм. Через тонкую кутикулу у самцов и незрелых самок хорошо видно внутреннее строение. Идущая в передней части тела в продольном направлении трубка (пищевод) постепенно грушевидно расширяется кзади. Далее пищевод образует хорошо заметное луковицеобразное расширение (бульбус), являющееся границей между пищеводом и кишечником. Отчетливо заметна лишь начальная часть кишечника, большая же его часть закрыта многочисленными (особенно у самки) извивами петлистой половой системы. Конечный отдел кишечника становится видимым лишь в задней трети тела, где кишечная трубка заканчивается анальным отверстием, не доходя до заднего конца тела.
Остриц (самку и самца) в молочной кислоте последовательно рассматривают при малом увеличении микроскопа, пользуясь большим увеличением лишь для уяснения мелких деталей строения.
Самка (рис. 61). Ротовое отверстие окружено тремя втягивающимися внутрь губами, одетыми по краю более плотным кутикулярным покровом. Боковые части тела, кроме головных везикул, несут острый кутикулярный рант, продолжающийся почти до анального отверстия. Приблизительно на линии, соответствующей задней границе везикул, в области начального участка пищеводной трубки при большом увеличении микроскопа видно кольцевидное утолщение — глоточное нервное кольцо. Граничащий с кишечником бульбус пищевода имеет так называемый зубной аппарат, состоящий из трех кутикулярных пластинок; бульбарный зубной аппарат подвижен благодаря сильным мышцам, прикрепленным с внутренней стороны зубцов. Бульбус не является жевательным аппаратом, а функционирует как насос и, как полагают, способствует прикреплению паразитов к слизистой кишечника. Несколько позади бульбуса, отделенного от переднего отдела пищевода промежутком, можно заметить сбоку короткий выделительный канал, открывающийся наружу. Если его не видно, следует осторожно подвинуть покровное стекло препаровальной иглой и попытаться под контролем микроскопа изменить положение объекта. Позади бульбуса начинается кишечник, несколько расширенный в начальной своей части. Большая часть тела занята половым аппаратом, образующим систему переплетающихся трубок различного диаметра. Две параллельно идущие широкие трубки, заполненные массой яиц, — матки. Отсюда следует сделать вывод, что половой аппарат самки двойной.
Почти прозрачные яйца имеют форму неправильного овала, так как одна сторона яйца уплощена. Длина яиц 0,05—0,06 мм, ширина — 0,02—0,032 мм. Приблизительно на границе первой и второй трети тела
153
находим короткий канал — влагалище, заканчивающийся половым отверстием. Следующие за матками участки половых путей меньшего
калибра образуют парные яйцеводы и яичники, располагающиеся в виде
Рис. 61. Самка (слева) и самец Enterob las ver-mlcularis.
1 - головные везикулы, 2-нервное кольцо, 3 — пищевод, 4 — бульбус, 5 — кишечник, 6 — выделительное отверстие, 7 — 8 — два яичника, 9 — вульва, 10 — матка, //—анус, 12— семенник, 13 — спикула. (По К. И. Скрябину и Р. С. Шульцу)
петлистых трубок в передней половине тела. Заметим, что у половозрелой самки наполненная яйцами матка сильно растянута и заполняет почти все тело. В задней четверти тела легко обнаружить конечный отдел кишечной трубки, анальное отверстие которой открывается на вентральную сторону.
Самец. Половая система расположена преимущественно в задней половине тела, состоит из семенника, семяпровода и семяизвергательного канала. На слегка притупленном и загнутом вентрально заднем конце хорошо заметна при малом увеличении одиночная длинная спикула (0,09—0,093X0,0075 мм), косо лежащая при боковом положении паразита. Спикула чаще лежит внутри тела и лишь редко выступает наружу из клоакального отверстия. Рассматривая задний конец самца под большим увеличением, находим при боковом положении 4 парных сосочка, из них 3 лежат постаналь-но, причем особенно хорошо выражены терминальные (концевые) со-преанальных сосочков расположена отверстия.
сочки. Пара крупных впереди клоакального
Головной конец острицы. Острым скальпелем под бинокулярным микроскопом (или лупой) срезают край переднего конца самки и помещают в молочную кислоту, так, чтобы ротовое отверстие было обращено к наблюдателю (апикальное положение). При этом отчетливо видно ротовое отверстие, окруженное тремя губами. Самая крупная из них лежит дорзально, две другие — латеро-вентральные, с периферически расположенным сосочком.
Хвостовойконец самца. На предметное стекло в молочную кислоту помещают отрезанный задний конец тела самца и придают ему вентральное положение, т. е. помещают его клоакальным отверстие^м кверху. Накрыв объект покровным стеклом, находят и рассматривают оди-
ночную спикулу.
Окрашенные срезы червеобразного отростка с острицами. На слизистой оболочке отростка ясно видно полулунное углубление с клиновидным как бы вырезанным участком на его поверхности. В этом месте к слизистой прилегал головной конец острицы; клиновидный дефект соответствует острым кутикулярным расширениям паразита. В просвете отростка находят поперечный срез острицы; последняя деформировалась при обработке и несколько отошла от сде-
154
ланного ею углубления. При большом увеличении видно, что в области полулунной выемки поверхностный эпителиальный слой почти весь исчез, местами же значительно истончен (атрофирован). В подэпителиальном слое — лейкоцитарная инфильтрация с преобладанием эозинофильных элементов и разрастание соединительнотканных элементов; ядра клеток лимфоидной ткани дегенеративно изменены и обнаруживают явления пикноза (сморщивание) и кариорексиса (распад на глыбки).
Ancylostoma duodenale Dub. — Кривоголовка двенадцатиперстная
Подготовка материала. Анкилостома, как и некатор (Ne-cator americanus), 1 эндемична в нашей стране лишь в некоторых южных республиках (Азербайджан, Грузия, Туркмения, Киргизия). Для получения этих нематод следует обращаться в гельминтологические отделы институтов малярии, медицинской паразитологии и гельминтологии и на санитарно-эпидемиологические станции названных географических районов (Баку, Тбилиси, Сухуми, Батуми, Ашхабад, Фрунзе).
Наружный осмотр. Самка и самец изучаются в часовом стекле с водой. Просмотр ведут под лупой. Кривоголовки, фиксированные в жидкости Барбагалло, белого цвета с сероватым оттенком, а свежие— бледно-розовые или красноватые, особенно в задней половине тела. Цилиндрическое тело дугообразно изогнуто. Головной конец искривлен дорзально. У самки задний конец тела заостренный, у самца — расширенный, лопастевидный, с двумя выступающими наружу тонкими длинными нитями (спикулы). Самки несколько крупнее и толще самцов. Длина самок от 9 до 15 мм, ширина — около 0,6 мм. Самцы мельче (7—10X0,45 мм). Заметим, что размеры тела не всегда являются надежным критерием для дифференциации пола кривоголовок.
Далее следует рассмотреть самку и самца в молочной кислоте под микроскопом.
Самка. Кутикула, образующая наружный покров, поперечно исчерчена, что особенно хорошо заметно по краям тела. На головном конце, при наличии хорошо выраженной ротовой полости (ротовой капсулы), губы отсутствуют. Благодаря изогнутости головного конца рот направлен косо дорзально, и при боковом положении анкилостомы ее ротовое отверстие не видно. Длина капсулы несколько превышает ее ширину (0,21X0,19 мм).
Следует обратить внимание на просвечивающие сквозь тонкую стенку ротовой капсулы большие, крючкообразно загнутые внутрь зубцы, отходящие от вентральной стенки капсулы и у основания одетые кутикулой (рис. 62,А). При боковом положении паразита ясно видны лишь 2 зубца, глубже лежащую вторую пару обычно рассмотреть не удается. Навстречу вентральным зубцам от нижнего края ротовой полости поднимаются 2 мелких заостренных зубца (дорзальная пара). В глубине ротовой полости, на дне ее, симметрично расположены две треугольные листовидные пластинки (так называемые ланцеты), выступающие свободно в ротовую полость; верхне-передний угол их клювовидно заострен.
Ознакомившись со строением ротовой полости в боковом положении, необходимо рассмотреть ротовую капсулу спереди. Легким нажимом препаровальной иглы на покровное стекло придают анкилостоме надлежащее положение, стараясь повернуть червя ротовым отверстием
1 Анкилостома и некатор объединяются нередко термином «анкилостомиды» (семейство Ancylostomidae).
155
кверху; легче это удается сделать, если предварительно коротко отрезать головной конец тела. Указанную манипуляцию следует производить осторожно и обязательно под контролем лупы или микроскопа.
Рассматривая ротовую капсулу спереди (рис. 62, Д) под большим увеличением микроскопа и вращая микрометрический винт, находим поверхностно расположенное овальное отверстие, ведущее в ротовую полость. В последней отчетливо видны две пары крупных вентральных зубцов и два рудиментарных дорзальных зубца. Ниже в глубине ротовой капсулы заметна пара широких листовидных пластинок, расположенных по сторонам серединного дорзального выроста, прилегающего
Рис. 62. Ancylostoma duodenale.
Л —ротовая капсула» Б — задний конец тела самца с копулятивной бурсой и двумя спикулами (7).
(Faust, 1949.)
к передней стенке ротовой капсулы; на вершине его открывается отверстие дорзальной пищеводной железы. От ротовой капсулы идет хорошо заметный пищевод, грушевидно округленный в своей задней части. Общая протяженность пищевода составляет около !/б длины тела анкилостомы. Мускулистая стенка его имеет снаружи три борозды, из которых одна дорзальная и две латеро-вентральные. В этих бороздах лежат 3 «пищеводные» железы. Дорзальная железа открывается в непарный вырост на спинной стороне ротовой капсулы; две другие впадают в пищевод.
Пищевод представляет у анкилостомид мощный сосательный аппарат. Мышцы пищеводной трубки расположены почти радиально и, ритмически сокращаясь от 120 до 150 раз в минуту, присасывают втянутый в ротовую капсулу участок слизистой оболочки кишечника хозяина. Сокращение мускулов пищевода одновременно стимулирует работу пищеводных желез, выделяющих секрет, разрушающий связь между клетками слизистой хозяина. При расслаблении мышц эластическая пищеводная трубка опускается книзу, давит на содержимое, и через открывающиеся клапаны в нижнем отделе пищевода поступившая в него кровь продвигается в кишечник паразита.
Ближе к середине тела располагаются две «головные» железы, от-крывающиеся двумя маленькими отверстиями в ротовую капсулу. Секрет этих желез препятствует свертыванию крови, заглатываемой анкилостомой. Наконец, существуют еще две «шейные» железы, протоки которых входят в так называемую мостовидную клетку (экскреторный пузырек), принимающую также протоки боковых выделительных каналов. На расстоянии 0,9 мм от переднего конца, приблизительно близ середины пищевода, можно обнаружить нервное кольцо. Почти на уровне последнего имеются два коротких кутикулярных выроста (шейные сосочки). Если их не видно, осторожно изменяют положение ан-156
Рис. 63. Задний конец самца Ancylo-stoma duodenale.
/ — боковая лопасть, 2—лучи вентральной лопасти, 5 —дорзальная лопасть бурсы, 4 — спикулы.
переднего конца тела. Прямая
килостомы и ищут сосочки на указанном месте; позади нервного кольца таким же образом можно обнаружить открывающийся наружу выделительный канал.
Продвигая препарат по направлению к хвостовому концу, в задней половине тела можно найти короткий канал — влагалище, открывающееся половым отверстием. Иногда удается проследить, что примыкающие к влагалищу две трубки — матки — сразу же расходятся в разные стороны, т. е. в переднем и заднем направлении. Ближайшие к половому отверстию части маток, называемые яйцеметами, имеют утолщенные мышечные стенки и выстланы кутикулярной оболочкой. Матки обычно бывают наполнены яйцами, хотя могут встретиться самки и без яиц.
Рассмотреть строение яиц в матках затруднительно. Легче это сделать, если яйца лежат в просвете влагалища. Яйца правильной эллипсоидной формы, с округленными полюсами, имеют прозрачную тонкую оболочку. Большая часть отложенных яиц находится в стадии четырех бластомеров. Между оболочками яйца и бластомерами имеется свободный промежуток. Длина яиц 0,056—0,076 мм (в среднем около 0,06 мм), ширина — 0,34—0,40 мм. Яйцеводы и яичники сильно извиты и переплетаются со стволами маток. На заднем конце тела (на расстоянии 0,125 мм от хвостового конца) без труда находим конечный участок кишечной трубки, заканчивающийся анальным отверстием. Задний конец тела несет острый шип, около 0,02 мм длиной.
Самец. Ротовая капсула немного меньше, чем у самки. Нервное кольцо расположено на расстоянии 0,6 мм от
пищеварительная трубка в задней части тела открывается анальным отверстием в общую полость (клоаку) с концевым отделом половой системы. Средняя треть тела занята извивами семенника и семяпровода, образующего близ середины тела заметное веретенообразное расширение — семенной пузырек. К последнему примыкает семяизвергательный канал, окруженный почти на всем протяжении большой «цементной железой», клейкий секрет которой способствует прикреплению самца к самке при копуляции. Следует обратить внимание на расширенный и сложно устроенный задний конец тела. Рассматривая его под малым увеличением микроскопа, видим, что он колоколообразно расширен и образует как бы полость — совокупительную сумку, или бурсу (bursa copulatrix), ограниченную тонкими кутикулярными стенками. Внутри бурсы легко заметить несколько пар удлиненных сосочков, расположенных симметрично в виде отходящих лучей (так называемые ребра бурсы). На фоне почти прозрачных стенок бурсы бледно-желтоватые сосочки выделяются довольно резко, так как, будучи одеты снаружи кутикулой, каждый из них имеет внутри слой гиподермы («пульпа») s «Ребра» (costae) образуют каркас или поддерживающий
157
остов бурсы. Различают четыре группы лопастей бурсы: одна из них расположена вентрально и состоит из двух ребер (costae ventrales'), расщепленных на вершине (рис. 62 и 63), две латеральные (costae late-rales) образованы каждая тремя ребрами (наружно-боковые, средне-боковые); последняя состоит из одиночного дорзального ребра (costae dorsalis) с двумя отходящими от него близ основания боковыми лучами (наружно-дорзальные), на свободном (дистальном) конце непарный дорзальный луч расщеплен на две короткие ветви, из которых каждая в свою очередь разветвляется на три веточки1. Руководствуясь прилагаемым рисунком (рис. 62, Б со схемой бурсы, рис. 63), следует найти прежде всего характерную дорзальную лопасть и, изменяя положение анкилостомы осторожным давлением на покровное стекло препаровальной иглы, отыскать вентральные и латеральные ребра бурсы. Из полости бурсы, т. е. клоаки, раздельно выступают одинаковой (около 2 мм) длины нитевидные спикулы, заостренные на концах.
Necator americanus Stil. — Некатор американский
Наружный осмотр. При просмотре самки и самца под лупой видно, что красноватая окраска живых некаторов выражена слабее, чем у анкилостомы, консервированные экземпляры — белые с сероватым оттенком. Цилиндрическое тело сужено кпереди и слегка изогнуто. Головной конец резко искривлен под углом 90°, и ротовое отверстие обращено на дорзальную сторону. Ротовая капсула, сравнительно с таковой анкилостомы, меньших размеров. Половые отличия следующие: самка имеет 8—13,5 мм (в среднем 10—11 мм) длины и 0,38—0,45 мм (в среднем около 0,415 мм) в диаметре, задний конец ее тела заострен, но лишен острого шипа (ср. с анкилостомой); самец — 5,2—10 мм длины и 0,18—0,27 мм (в среднем 0,23 мм) в диаметре, тело заканчивается небольшой воронковидной бурсой (bursa copulatrix). Последняя, в отличие от бурсы анкилостомы, менее широка, но несколько больше в длину. Если ширина бурсы анкилостомы значительно превышает диаметр прилегающей части тела, то у некатора это соотношение выражено менее отчетливо. Две тонкие, длинные спикулы соединены на дистальном конце.
Самка. При рассматривании самки на предметном стекле в молочной кислоте, под малым увеличением микроскопа, отчетливо заметна нежная поперечная исчерченность кутикулы. Вследствие изогнутости переднего конца полушаровидная ротовая капсула некатора видна в боковом положении. Она почти в 2 раза меньше, чем у анкилостомы, в диаметре 0,105 мм. Обращают на себя внимание 4 пары сосочковидных выростов в передней части ротовой капсулы: дорзальная пара состоит из коротких тупых сосочков, дорзо-вентральную пару составляют два тонких и длинных сосочка; латеральная и вентральная пары состоят из широких и коротких сосочков. Отмечается отсутствие в ротовой капсуле крючковидных вентральных зубцов, свойственных анкилостоме. Близ основания дорзальной стенки капсулы расположен конической формы зубовидный вырост, свободно выступающий в ротовую полость и соответствующий так называемому дорзальному выросту анкилостомы. Несколько кзади со дна ротовой полости поднимаются
1 Общепринятая терминология ребер бурсы: A. Costae ventrales (2) состоят из двух внутренних лучей (ventro-ventrales) и двух наружных (latero-ventrales). Б. Costae laterales (6) распадаются на три пары лучей: costae laterales externae, laterales mediae, laterales posteriores. B. Costae dorsales состоят из основного непарного ствола (costa dorsalis) и двух боковых (externo-dorsales).
158
два заостренных зубца (дорзальные ланцеты), глубже которых расположены 2 более широких вентральных ланцета треугольной формы. При большом увеличении микроскопа можно видеть в области сосоч-
ков контуры двух острых режущих пластинок.
Просмотр ротовой капсулы в боковом положении должен быть дополнен рассмотрением ее спереди. Как указывалось выше, головной конец у некатора более резко загнут на дорзальную сторону, чем у анкилостомы. Поэтому придать некатору искомое положение является делом более сложнымЧ Осторожным давлением препаровальной иглы на покровное стекло стараются изменить боковое положение паразита и повернуть его ротовым отверстием кверху. Вращая микрометрический винт, находим на периферии ротовой капсулы поверхностно лежащие четыре пары сосочков. В ротовую по
лость ведет центрально расположенное овальное ротовое отверстие; непосредственно примыкая к последнему, в ротовой капсуле залегают две острые пластинки с округлыми краями, свободно выступающими в просвет ротового отверстия (рис. 64). Обе пластинки, соприкасающиеся между собой кверху и внизу по средней линии, в боковых частях имеют симметричные вырезки, благодаря чему ограниченный ими вход в капсулу принимает сердцевидную форму. В глубине ротовой полости хорошо заметен кониче
ский дорзальный вырост, по сторонам
которого находятся 2 несколько глубже Рис. 64. Ротовая капсула Necator лежащих, заостренных «дорзальных лан- amerlcanus (спереди).
цета». Вращая микрометрический винт
в задней части капсулы можно обнаружить пару более мощных «вентральных» ланцетов, поднимающихся со дна ротовой полости в виде треугольных пластинок, заостренных на свободном конце.
Пищевод значительно короче (0,715 мм длины и 0,163 мм в диа-
метре), чем у самки анкилостомы, но сходен с ним по своему строению. Проследить кишечник на всем протяжении не удается. Анальное отверстие самки открывается близ заднего конца тела и обычно хорошо видимо в виде поперечной щели. Половое отверстие расположено несколько кпереди от середины тела; короткое влагалище соединяет 2 удлиненных мышечных яйцемета, открывающихся в тонкостенную парную матку. В отличие от анкилостомы, многочисленные извивы половых трубок (матки, яйцеводы и яичники) лежат более сближенно и образуют косо идущие петли, занимающие большую часть тела.
Овальные яйца некатора очень напоминают яйца анкилостомы, отличаясь лишь менее округленными полюсами и несколько большей длиной при одинаковом поперечном диаметре. Однако вариации в размерах яиц довольно значительны, поэтому дифференциация обоих видов анкилостомид по яйцам затруднительна (см. выше размеры яиц анкилостомы).
Самец. Ротовая капсула немного меньше, чем у самки; средний диаметр ее равен 0,085 мм. Размеры пищевода — 0,585X0,139 мм. Половой аппарат одиночный (см. анкилостому). Большое значение для
1 При недостатке материала ограничиваются демонстрацией соответствующего препарата под большим увеличением микроскопа (с диафрагмой).
159
видового диагноза имеет структура бурсы. Как отмечено выше, бурса некатора по отношению к бурсе анкилостомы характеризуется большей длиной при меньшем поперечном диаметре. У некатора мы находим те же 4 группы ребер бурсы, однако их взаимное расположение, а также форма отдельных лучей представляют некоторые особенности. На вентральной стороне бурсы располагаются 2 глубоко расщепленных вентральных ребра (рис. 65), образующих собственно две пары лучей — наружную (costae latero-ventrales) и внутреннюю (costae ventro-ventrales). Каждая из двух боковых лопастей (costae laterals) состоит, как и у анкилостомы, из трех лучей (costa lateralis externa, costa lateralis media, costa lateralis posterior), однако наружнобоковое ребро (costa lateralis externa) несколько изогнуто и начинается ближе к основанию бурсы. Прочие же два ребра точно прилегают друг к другу, представляя как бы один глубоко расщепленный луч. Дорзальная лопасть зна-
Рис. 65. Задний конец самца Necator americanus.
J —наружный дорзальный луч бурсы, 2 — лучи вентральной лопасти, 3 — боковая лопасть с тремя лучами, 4 —дорзальная лопасть бурсы, 5 — спикулы.

чительно меньших размеров, чем у анкилостомы, состоит из двух дорзальных ребер (costae dorsales), самостоятельно отходящих от общего основания, причем каждое из них на конце
раздвоено, образуя две маленькие, различной формы, веточки; выше места отхождения дорзальных лучей можно заметить 2 длинных и тонких наружных боковых ребра (costae latero-dorsales), утолщающихся дистально. Наконец, на вентральной
стороне у основания бурсы лежат 2 небольших пребурсальных луча.
Рис. 66. Схема хвостовой бурсы самца Ancylostoma duode-nale (слева) и Necator americanus (справа).
/—вентральные лопасти бурсы, 2—4 — три луча боковой лопасти бурск (наружный, средний и задний), 5 —дорзальная лопасть бурсы, состоящая кг трех лучей у кривоголовки и из четырех —у некатора.
Следует иметь в виду, что при вентральном положении препарата небольшая дорзальная лопасть иногда бывает неразличима; в этом случае паразита с помощью препаровальной иглы необходимо повернуть таким образом, чтобы предать бурсе дорзальное положение. Длинные, нитевидные спикулы 0,943—1,066 мм. Каждая спикула состоит из осевого стержня и идущей вдоль него тонкой мембраны, которые соединены на свободном (дистальном) конце. Стержень одной 160
Таблица 2
Сравнительно-диагностическая таблица
Ancylostoma duodenale и Necator amerlcanus
Признаки	Ancylostoma duodenale	Necator amerlcanus
Размеры тела	Больше Самка: 9—15 мм X 0,6 мм Самец: 7—10 мм X 0,45 мм	Меньше Самка: 8—13,5 мм X 0,415 мм Самец: 5,2—10 мм X 0,23 мм
Форма тела	Тело вместе с головным концом изогнуто дорзально	Тело изогнуто на вентральную сторону, головной конец обращен дорзально
Ротовая капсула	Больше (0,21 X 0,19 мм)	Меньше (0,105 X 0,105 мм)
Ротовая полость	В ней две пары крупных крючкообразно загнутых зубцов. Два дорзальных зубца („ланцета*) рудиментарны	В ней две острые режущие пластинки. Дорзальные зубцы хорошо развиты
Пищевод	Длиннее, конец его отстоит от головного конца на 1,5 мм	Короче, на расстоянии 0,8 мм от переднего края
Vulva	Открывается в задней половине тела и отстоит от головного конца на расстоянии свыше 8 мм (при длине червей 11—12 мм)	В передней половине тела, на расстоянии свыше 4 мм от переднего конца
Задний конец тела самки	Несет острый шип (0,02 мм)	Острый шип отсутствует
Хвостовая бурса самца	Широкая и короткая (рис. 66)	Узкая и длинная
Латеральная лопасть бурсы	Состоит из трех симметрично расположенных лучей	Состоит из двух симметрично расположенных лучей; третье ребро одиночно
Дорзальная лопасть бурсы	Крупная, состоит из трех лучей	Небольшая, состоит из четырех лучей
Дорзальные лучи бурсы	Одиночный (costa dorsalis) в своей задней части расщеплен на две короткие ветки, из которых каждая делится на три веточки	Два; каждый из них на конце раздвоен, образуя две маленькие, неодинаковые по форме веточки
Спикулы	Около 2 мм длиной; на концах заострены и свободны	Около 1 мм; на концах соединены и заканчиваются крючочком
И Зак. 3420. Лабораторный практикум медицинской паразитологии
161
спикулы заканчивается крючочком, напоминающим по форме вязальный, дистальный конец стержня второй спикулы слегка изогнут (рис. 65).
Для дифференциальной диагностики анкилостомы и некатора можно руководствоваться табл. 2.
Развитие яиц и личинок анкилостомид
ди и (раодитовидные;; инвазионные,
Рис. 67. Личинки анкилостомид на влажной почве (Belding, 1952).
На занятиях изучаются различные стадии развития яиц и личинки анкилостомид.
Для культивирования яиц анкилостомид фекалии больных смешивают с животным углем и прокаленным речным песком в пропорции 1:1:3; увлажненная культура распределяется тонким слоем в больших чашках Коха. Оптимальная температура для яиц и личинок— 25—30°; уже через сутки при 30° в культурах появляются личинки первой ста-или филяриовидные, личинки наблюдаются в большем числе к концу четвертых суток (рис. 67). Рабдитовидная личинка длиной 0,25 мм имеет наибольшую ширину на уровне нервного кольца (0,017 мм). Передний конец ее тела тупой, задний — резко заострен. Ротовое отверстие, окруженное шестью маленькими сосочками, ведет в узкую цилиндрическую ротовую полость (0,010X 0,002 мм). Пищевод (0,085 мм) рабдитовидный, т. е. напоминает пищевод свободноживущих нематод рода Rhabditis, состоит из трех частей: утолщенной передней, составляющей половину всей
его длины, или переднего бульбуса, узкой средней и грушевидно вздутой задней, или заднего бульбуса. Кишечная трубка почти прямая, анальное отверстие открывается близ начала заостренной задней части тела. Посередине между концом пищевода и анальным отверстием заметно овальное тело (размером Юр,) — половой зачаток, образованный двумя косо расположенными клетками. Личинка растет, линяет и, сохраняя рабдитные черты, переходит во вторую стадию (0,4 мм). Достигнув размеров 0,6X0,025 мм, личинка вторично линяет и превращается в стронгилоидную, у которой передний бульбус становится цилиндрическим. При третьей линьке старая кутикула не сбрасывается, а одевает личинку чехликом. Такая «инцисттхрованная», непитающаяся филяриовидная личинка способна проникать через кожу человека. При этом личинка выходит из чехлика, разрывая его спереди, и чехлик остается на поверхности кожных покровов.
Инвазионная личинка анкилостомы достигает 0,6—0,7 мм в длину, т. е. несколько превышает длину личинки некатора (0,475—0,630 мм); диаметр личинок обоих видов колеблется от 0,023 до 0,025 мм. Другие дифференциальные признаки для личинок см. на рис. 79. За неимением анкилостомид человека, можно культивировать яйца анкилостомид собаки (Ancylostoma caninum, Uncinaria stenocephala). Для показа личинок удобно собирать их из культур не пипеткой, а пользоваться ме
162
тодом Бермана (стр. 78). При наличии богатых культур личинками заражают лабораторных животных (кроликов, морских свинок, хомяков и др.) с последующим гистологическим изучением их кожи, легких и других органов. Для заражения животных через кожу их привязывают к станку, волосы на брюшной стороне быстро удаляют выщипыванием и наносят пипеткой на кожу нужное количество личинок в воде. Через полчаса животное освобождают. Вскрытие инвазированных животных производят по истечении намеченного срока. Для извлечения
Рис. 68. Мигрирующие личинки.
Личинка Ancylostoma duodenale под эпидермисом (последний разрушен) при экспериментальном накожном заражении хомяка. Большое увеличение. (По Г. Г. Смирнову и Н. Г. Камалову).
личинок из органов при вскрытии также применяют аппарат Бермана или прибор Фюллеборна (стр. 189).
Описание микроскопических препаратов по миграции личинок анкилостомид. Кожа хомяка. На срезах кожи, зафиксированной через два часа после заражения, личинки встречаются почти в каждом поле зрения (рис. 68). Роговой слой эпидермиса (stratum corneum) местами разрушен или пузыревидно приподнят; личинки лежат или под ним, или в поврежденных волосяных влагалищах. Единичные личинки встречаются в соединительнотканной части кожи (corium), в лимфатических и кровеносных сосудах. Через сутки личинки обнаруживаются во всех слоях кожи. Заметна инфильтрация corium нейтрофильными полинуклеарами, не образующими, впрочем, очаговых скоплений даже по соседству с личинками; количество моноцитов и фибробластов увеличено.
И*	163
Легкие хомяка. Через 48 часов после заражения отдельные альвеолы выполнены эритроцитами (рис. 68а). Соседние здоровые участки расширены. Местами отмечается отечность межуточной ткани и
Рис. 68а. То же.
Личинка в легких хомяка на пятый день после накожного заражения. Альвеолы заполнены излившейся кровью. Большое увеличение.
слущивание альвеолярного эпителия. Личинки обнаруживаются в кровеносных сосудах и в легочной паренхиме.
Trichinella spiralis Owen. — Трихинелла
Подготовка материала. Трихинеллы имеют большое число различных хозяев, паразитируя у человека, крыс, свиней и различных хищных животных (медведи, волки, лисицы, барсуки, собаки, кошки и др.); экспериментально легко заражаются кролики, зайцы, белые крысы, мыши и морские свинки. Трихинеллезное свиное мясо достают на свинобойне или мясокомбинате, зараженные пробы мяса запасают впрок в формалине (5% раствор) или сохраняют в водном растворе глицерина (равные объемы). Исследование свежего трихинеллезного мяса имеет значительные преимущества. Если позволяет обстановка, целесообразно постоянно поддерживать трихинеллез в лаборатории путем заражения экспериментальных животных; из них особенно восприимчивы к заражению морские свинки и крысы. Трихины после выхода 164
из капсул под воздействием желудочного сока достигают половозрело-
сти через 72 часа (рис. 69). На второй день после животных самцы трихинеллы достигают 1,2—1,5 мм длины и 0,04 мм ширины. Более крупные самки 1,5—1,8 мм длины. Оплодотворенные самки (3— 4 мм X 0,06 мм) внедряются в слизистую оболочку тонких кишок и в течение 4—5 недель дают большое число личинок. У крыс каждая самка трихины при слабой инвазии1 отрождает 200 личинок, при тяжелой — до 400. На каждую самку трихинеллы у мышей приходится от 230 до 507 личи
заражения опытных
Г
Рис. 69. Trichinella spiralis.
А — взрослый самец Trichinella spiralis (х 90), Б — взрослая самка (X 90), В —личинка (X 660) (Faust, 1949), /'—передний коней тела Trichinella spiralis. Показано соотношение пищевода и клеточного тела, / — пищевод, 2 —нервное кольцо, 3 — псевдобульбус, 4 — клеточное тело, 5 —вульва, 6 —кишечник (X 270) (Chitwood, 1950).
нок, в среднем 315. Плодовитость трихинелл у морских свинок значительно выше — от 1350 до 1500 личинок на каждую самку. Личинки
1 Слабая инвазия — не свыше 20 трихинелл на 1 г веса крысы; при массивном заражении соответственно дается от 40 до 50 личинок.
165
трихинелл (0,08—0,12 мм X 0,005 — 0,006 мм) поступают через лимфатическую систему в кровь, разносятся по всему телу и оседают в поперечнополосатой мускулатуре. Здесь они проникают через сарколемму мышечного волокна и медленно продвигаются вдоль него до места перехода в мышцы сухожилия, поэтому наибольшее количество трихинелл обычно обнаруживается в области, граничащей с сухожилием. Первые следы образования капсулы отмечаются по истечении четырех недель. Через 7 недель после заражения можно обнаружить вполне сформированные капсулы со спирально закрученными личинками. Однако личинки трихинеллы являются инвазионными начиная с 17-го дня инвазии, т. е. еще до образования оформленной капсулы. Наиболее часто поражаются трихинеллами у крыс и мышей жевательные мышцы, ножки диафрагмы и диафрагма, мышцы языка, мышцы гортани, брюшные и межреберные мышцы.
Таким образом, вскрытие подопытных животных через 10—15 дней после заражения дает возможность обнаружить кишечных трихинелл в срезах кишечника. По истечении трех недель мясо убитых крыс можно использовать для заражения других животных, а также для демонстрации молодых мышечных форм личинок. Первые фазы закручивания тела личинок наблюдаются через 18 дней после заражения. Для демонстрации зрелых трихинеллезных капсул зараженных животных вскрывают, начиная с 8-й недели и позднее. Принимая во внимание, что половозрелая самка иногда остается в кишечнике крыс до 1’/2 месяца и отрождает новые порции личинок, мясо инвазированных крыс может быть использовано с максимальной эффективностью для заражения других животных спустя 10—12 недель после первичного заражения; однако у мышей взрослые трихинеллы живут в кишечнике лишь 16 дней.
На занятии учащимся предлагают для исследования мясо зараженных животных. Свежее мясо можно просматривать без применения просветляющих реактивов (глицерин, уксусная кислота), которые нужны для анализа консервированного мяса.
Необходимые принадлежности для исследования:
1.	Микроскоп с увеличением до 80 раз.
2.	Кривые ножницы (10—12 см длиной) для срезания кусочков мяса.
3.	Небольшие пинцеты с острыми концами.
4.	Препаровальные иглы для расщипывания мяса (в двойном количестве на группу). 5. Предметные стекла в количестве, достаточном для повторных исследований.
6. Реактивы для просветления в капельницах (глицерин, 1 % раствор уксусной кислоты, 5% раствор соляной кислоты).
Желательно иметь для демонстрации трихинеллоскоп и компрессорий.
Личинки трихинеллы в мышцах. Приготовление препарата. Вырезают кривыми ножницами по ходу мышечных волокон кусочек мышцы размером с овсяное зерно и помещают его на предметное стекло. С помощью двух препаровальных игл расщипывают взятую пробу мяса в перпендикулярном направлении к ходу мышечных пучков и накрывают препарат сверху вторым предметным стеклом. Если для исследования пользуются консервированным мясом (5% формалин), предварительно прибавляют к нему для просветления несколько капель глицерина или 1% уксусной кислоты. На мясоконтрольных станциях для просмотра мяса применяют специальные компрессо-рии, состоящие из двух стеклянных пластинок (22 см X 6X9 мм), приспособленных по своей длине для предметного столика трихинелло-скопа (рис. 70). Нижнее стекло разделено на 24 равных поля и служит для размещения проб мяса, а на верхнем нанесены цифры, соответствующие каждому полю нижнего стекла. На концах оба стекла скре-166
плены винтами или металлическими скобами. На убойных пунктах от каждой туши берут две пробы из ножек диафрагмы, ближе к сухожилию, из реберной части диафрагмы или из шейных мышц и приготовляют из каждой пробы 12 срезов, т. е. всего 24 препарата1.
Применение компрессория значительно облегчает исследование, так как все срезы получаются одинаковой толщины. Однако употреблять
Рис. 70. Исследование на трихинеллез.
А — набор инструментов для трихинеллоскопии.
В i ередине — прибор для взятия проб мяса; слева вверху—трихинеллезное мясо под микроскопом; слева внизу— трихинеллоскоп, справа — компрессорий: а, ^ — разобранный, в — сбоку, г —сложенный. Б—прибор Березанпева для исследования мышечного трихинеллеза методом переваривания.
ЧффМог
'5/6/7/в/9 р0р1/(21
\\\\\\\\\\\\\\\\\\\\\\^^^
б
а
б
в
г

компрессорий при работе с обыкновенным микроскопом неудобно ввиду его значительной длины, и для учебных целей пользуются обыкновенными предметными стеклами или, еше лучше, специально нарезанными стеклами (12X5 см). Прижимая верхнее стекло левой рукой, устанавливают микроскоп (увеличение 60—80 раз) и медленно передвигают препарат, стараясь сохранить равномерное давление на стекло, что можно обеспечить также стягиванием предметных стекол резиной на концах.
1 По существующим правилам ветеринарно-санитарной экспертизы мяса и мясопродуктов при обнаружении в 24 срезах хотя бы одной трихинеллы, независимо от ее жизнеспособности и стадии развития, тушу и субпродукты, имеющие мышечную ткань, подвергают технической переработке или уничтожают. Наружный жир (шпиг) в обоих случаях перетапливают для пищевых целей при температуре не ниже 100° в течение 20 минут, внутренний жир выпускают без ограничений. (Сборник руководящих материалов по ветеринарии, т. I, Сельхозгиз, 1954 и изменения, внесенные в 1956 г. в статью 43 Правил ветеринарно-санитарной экспертизы мяса и мясопродуктов).
167
Описание препарата. При рассматривании среза видно большое количество длинных цилиндрических волокон темно-красного цвета, расположенных параллельно друг другу и на всем протяжении одетых тонкой бесструктурной оболочкой (сарколеммой); вращая микрометрический винт микроскопа, можно легко обнаружить поперечную исчерченность волокон, придающую им рубчатый рисунок. Между волоконцами залегает соединительная ткань. Местами расположены группы больших округленных клеток в виде пузырьков с тонкими оболочками, наполненных большими каплями жира (жировая ткань). При внимательном просмотре препарата встречаем по ходу мышечных волокон резко выделяющиеся, неправильно овальные образования, похожие по форме на лимон. Эти образования и являются трихинеллезными капсулами; величина их: 0,4—0,6 мм X 0,2 — 0,3 мм.
Сквозь прозрачную двуконтурную оболочку капсулы заметна спирально свернувшаяся трихинелла, погруженная в мелкозернистое содержимое капсулы. Под влиянием внедрившегося паразита мышечное волокно дегенерирует и превращается в мелкозернистую массу. Первичная оболочка трихинеллезной капсулы образуется за счет сарколеммы мышечного волокна. В дальнейшем продуктивно воспалительный процесс завершается образованием реактивной соединительнотканной капсулы вокруг паразита. На полюсах капсулы иногда лежат 2— 3 жировые клетки. Заметим, что лимоноподобная форма капсулы не является постоянной. В зависимости от давления прилегающих мышечных волокон капсула может быть овальной, округлой или грушевидной.
Обычно в капсуле заключена одна трихинелла, спирально свернутая в 2,5 оборота (0,9—1,28X0,035—0,040 мм), но при значительном заражении капсула может содержать 2 или даже 3 трихинеллы. Смежные с капсулой мышечные волокна теряют свою поперечную исчерченность и принимают гомогенный вид.
Нередко в мясе можно встретить обызвествленные капсулы. Пропитывание трихинеллезной капсулы известковыми солями наблюдается спустя 14—18 месяцев после заражения; первично этот процесс начинается с ее полюсов. В обызвествленных капсулах личинки не всегда погибают и могут оставаться жизнеспособными в течение многих лет. С другой стороны, могут встретиться обызвествленные трихинеллы в нормальных капсулах. В старых обызвествленных капсулах личинки обычно видны очень слабо. Для растворения отложений извести в капсуле следует прибавить к препарату 5% соляной кислоты, после чего трихинеллы становятся заметными. Обнаружить трихинеллы при полном обызвествлении иногда не представляется возможным, несмотря на действие соответствующих реактивов, растворяющих известковые соли. В подобных случаях обращают внимание на характерную форму капсул, их размер, положение, совпадающее с направлением мышечных волокон. Распознавание облегчается при наличии, наряду с измененными капсулами, и нормально обызвествленных, т. е. капсул, содержащих личинки.
Если имеется в распоряжении экспериментальный материал, демонстрируют препараты трихинеллезного мяса зараженных животных в первые 2—3 недели после заражения. Личинки лежат под сарколеммой мышечного волокна, вытянувшись в длину, или обнаруживают различно выраженную изогнутость тела. Пораженные мышечные волокна изменены, без рубчатости и веретенообразно вздуты. Соединительнотканная капсула вокруг паразита отсутствует. На 17-й день после заражения личинка вырастает до 0,4—0,7 мм в длину и на 30-й день достигает 1X0,035 мм.
168
Вылупление трихинелл из капсул. Несколько мышечных пучков с трихинеллезными капсулами помещают в часовое стекло с натуральным желудочным соком при 37—40° и через 10—15 минут наблюдают выход личинок. Для демонстрации следует пользоваться микроскопом с нагревательным столиком.
Изоляция личинок трихинелл. Взвешенное предварительно трихинеллезное мясо (3—5 г), мелко нарезанное ножницами или пропущенное через мясорубку, помещают в натуральный или в искусственный (1 г пепсина, 0,7 мл соляной кислоты на 100 мл воды) желудочный сок при 37°. Через сутки переваренное мясо исследуют по способу Бермана (стр. 87) и через час или более воду центрифугируют и осадок микроскопируют. Исследование по Берману обязательно повторяют. Весь плотный осадок в воронке высушивают на пропускной бумаге и также микроскопируют1. Паразиты остаются живыми в желудочном соке свыше 24 часов, а в воде при 20° до 15 дней, в физиологическом растворе единичные личинки живут свыше месяца.
Эксцистированных личинок после показа можно использовать для заражения лабораторных животных. Для крысы десять личинок на 1 г веса составляют 0,25 минимальной летальной дозы.
Окраска трихинелл. Кишечных трихинелл фиксируют в смеси 5% формалина (97 мл) и ледяной уксусной кислоты (3 мл), промывают в воде и сутки окрашивают паракармином Майера (карминовая кислота 1 г, хлористый алюминий 0,5 г, хлористый кальций 4 г, 70° спирт до 100 мл).
Мышечных трихинелл окрашивают карболфуксином (фуксин 1 г, абсолютный спирт 10 мл, 5% карболовая вода 100 мл). По П. М. Ямщикову (1952) срезы с мышечными трихинеллезными капсулами окрашивают в течение часа 3% водным раствором метиленовой синьки. После высушивания фильтровальной бумагой срезы погружают в глицерин и затем переносят в 2% водный раствор двууглекислого натра, который подогревают до появления паров. Через несколько часов охлажденные срезы обрабатывают на предметных стеклах 1 % раствором красного стрептоцида в уксусной или молочной кислоте. Окраска продолжается 8—10 минут, после чего препараты обезвоживают в спиртах возрастающей крепости, просветляют ксилолом и заключают в бальзам между двумя предметными стеклами. Для приготовления постоянных препаратов под покровными стеклами необходимо делать более тонкие срезы. Окраска мышечной ткани светло-зеленая, трихинеллы — темно-синие, капсулы — темно-зеленые.
Очень контрастная окраска получается по Грюнеру1 2. Сперва тонкие срезы трихинеллезного мяса, после просмотра их под микроскопом, красят 48 часов в первом растворе следующего состава: розоловая кислота — 1 г, спирт 96° — 170 мл, метиленовая синька — 1,5 г, глицерин — 20 мл. После тщательного промывания в проточной воде срезы переносят на несколько минут в 70° спирт и затем дополнительно красят 10 минут во втором растворе: эозин —1 г, спирт 96°— 30 мл, вода дистиллированная— 70 мл. После окраски препарат проводят через спирты, ксилол и заключают в канадский бальзам. При этой окраске мышечная ткань ярко-розовая, трихинеллы синие.
Отличные препараты получаются при импрегнации личинок йодистым серебром по способу Кальварийского (Kalwaryjski, 1936).
1 По предложению Ю. А. Березанцева (1953) переваривание трихинеллезного мяса желудочным соком можно производить непосредственно в приборе Бермана, что сокращает процесс исследования до 12—16 часов.
2 Грюнер С. А. Архив ветеринарных наук, том X, 1915, стр. 745—754.
169
Отмытых в воде личинок, предварительно освобожденных из капсул пу-тем переваривания последних желудочным соком, помещают костяным шпателем в раствор йода (йод металлический — 2 г, калий йодистый — 4 г; вода дистиллированная — до 100 мл). Затем личинок промывают холодной дистиллированной водой, дифференцируют в 2,5% растворе тиосульфита (гипосульфита) и переносят в 10% раствор азотнокислого серебра с равным количеством крепкого нашатырного спирта, в котором личинок содержат до исчезновения следов йода. В течение минуты промывают личинок дистиллированной водой и помещают для просветления в 5% раствор гипосульфита. Далее следует снова промывка в воде, и личинок проводят через две смены глицерина. Препарат заключают в глицерин-желатину.
ЛИТЕРАТУРА
Мозговой А. А. Аскаридаты животных и человека. В кн.: Основы нематодологии п/ред. К. И. Скрябина. Изд. АН СССР, 1953.
Павловский Е. Н. Учебник паразитологии человека. Л., 1951.
Подъяпольская В. П. и Капустин В. Ф. Глистные болезни человека. Медгиз, М., 1958.
Скрябин К. И., Шихобалова Н. П. и Мозговой А. А. Определитель паразитических нематод, т. 2, Оксиураты и аскаридаты. Изд. АН СССР, 1951.
ГЕЛЬМИНТОЛОГИЧЕСКАЯ ДИАГНОСТИКА
ПОДГОТОВКА МАТЕРИАЛА
Для занятий необходимо иметь отдельные экземпляры крупных цепней (Тaenia solium, Taeniarhynchus saginatus), лентеца (Diphyllobothrium latum), а также фекалии с мелкими формами паразитических червей (Hymenolepis папа). Прочие паразиты могут быть представлены в качестве демонстрационных объектов (в порядке повторения). Полезно практически познакомить слушателей с омеопаразитами, т. е. с образованиями, по внешности похожими на паразитов и представляющими собой остатки животных или растительных организмов, симулирующие истинных паразитов. Для изучения копрологической методики необходимы свежие или консервированные человеческие экскременты, содержащие яйца различных паразитических червей. Перечисленные материалы могут быть получены из терапевтических отделений больниц, клиник, гельминтологических пунктов.
Ввиду важности ознакомления занимающихся с дифференциальной диагностикой яиц глистов, желательно иметь в запасе консервированный материал (испражнения в формалине, дуоденальный сок, мокроту и пр.) с яйцами более редких паразитов (анкилостомиды, трематоды). При отсутствии последних ограничиваются демонстрацией п стоянных или временных препаратов яиц глистов (в 50% глицерине). Если невозможно практически ознакомить учащихся со всеми нижеуказанными методами качественного и количественного гельминтологического исследования, необходимо показать на занятиях соответствующую аппаратуру и наиболее употребительную методику гельминто-копрологического анализа.
ГЕЛЬМИНТОСКОПИЯ
В испражнениях человека встречаются цельные паразитические черви, обрывки их, членики и яйца. Гельминтоскопия, т. е. диагностика по целым экземплярам червей и их фрагментам, для некоторых видов 170
червей более надежна, чем поиски яиц в фекалиях. Острицы, например, почти не откладывают яиц в кишечнике, но выбрасывают их в пе-рианальной области. Затруднительно отыскание в экскрементах яиц бычьего и особенно свиного цепней, матка которых не имеет выводного отверстия Дифференциальная диагностика обоих видов цепней по их яйцам невозможна, и вид паразита определяется по отходящим зрелым членикам. Паразитические черви могут выделяться с калом, независимо от лечения. Сравнительно часто самопроизвольно отходят аска-
риды и особенно острицы. В некоторых случаях кишечные паразиты выходят при острых инфекциях, сопровождающихся высокой температурой. Контрольный макроскопический просмотр фекалий является обязательным после дегельминтизации; мелкие формы цестод (карликовый цепень), трематод и нематод (самцы остриц) могут быть обнаружены лишь в случае тщательного просмотра экскрементов. При макроскопическом исследовании фекалий необходимо производить учет изгнанных глистов (см. количественный гельминтологический анализ) , дифференцировать анкилостомид, отыскивать головки тениид, а также выявлять прочих глистов, которые могут встретиться в фекалиях, независимо от того, производилось ли лечение или нет.
Техника гельминтоскопического исследования различна. Для облегчения поисков мелких паразитов после дегельминтизации фекалии разводят водой (1:1) и отдельными порциями рассматривают при хорошем освещении на черном фоне фотографической кюветы (18\24 см) или стеклянной ванночки с подложенной черной бумагой. Несколько кропотлив, но более надежен способ отстаивания или отмучивания фекалий. Измельченная фекальная масса смешивается
Рис. 71. Аппарат Воскресенского для обработки экскрементов (объяснение в тексте, стр. 171). В правом цилиндре вынута часть передней стенки, витпы сита.
в нескольких высоких стеклянных цилин-
драх с большим количеством воды и отстаивается; эта процедура повторяется до получения прозрачных промывных вод, после чего осадок в небольшой ванночке исследуется под лупой. При поисках в испражнениях мелких паразитов необходимо просматривать и слив. Применяется также способ «отсеивания» паразитов с помощью одно-
временного применения нескольких сит с отверстиями различных диаметров. Для этой цели удобен аппарат, предложенный Воскресенским (рис. 71). Внутри цинкового цилиндра (30X15 см) вставлены одно над другим три металлических сита, верхнее сито имеет наибольший диаметр, нижнее наименьший. Дно цилиндра снабжено отверстием с резиновой трубкой для удаления промывных вод; короткая
1 При тениаринхозе гельминтоовоскопический анализ дает отрицательный результат в 30% случаев (Штром, 1938).
171
отводная трубка на крышке цилиндра соединяется с краном водопровода. Разведенные водой и измельченные испражнения помещают на верхнее сито и, закрыв крышку, пускают воду. Паразиты в зависимости от размера оседают на разных ситах. Для обнаружения мелких глистов сита споласкивают и просматривают слив под лупой на черном фоне. Обработка заканчивается через 5—6 минут.
Определение круглых червей
Распознавание нематод (аскарид, власоглава) не представляет затруднений и производится макроскопически. Диагностика остриц и ан-килостомид также проста — вполне достаточно просмотреть червей под лупой.
Из личинок паразитических круглых червей в испражнениях могут еще встретиться личинки кишечной угрицы (0,25 мм X 0,017 мм). Они очень подвижны (наблюдать следует в воде), имеют короткую ротовую капсулу и характерный пищевод с двумя расширениями. Передняя цилиндрическая часть пищевода в конце незначительно расширена, задний же отдел его, начинающийся после перетяжки, приблизительно посередине пищевода заканчивается грушевидным вздутием, позади которого начинается кишечник, занимающий среднюю и заднюю трети тела. Хвостовой конец тела сужен и заострен. Для обнаружения личинок рекомендуется развести порцию испражнений физиологическим раствором до кашицеобразной консистенции и поместить сосуд во влажной камере в термостат при 28°. Через несколько часов следует периодически брать пипеткой и исследовать под микроскопом поверхностный тонкий слой жидкости. При этом необходимо оберегать кожу рук от случайного попадания на них жидкости, так как личинки способны проникнуть в тело человека через кожные покровы.
Определение ленточных червей
Распознавание крупных цепней (вооруженного и невооруженного), а также широкого лентеца по их фрагментам производится следующим образом. Промытые водой членики паразитов помещают на предметное стекло, накрывают сверху другим предметным стеклом и, при легком надавливании большими пальцами на края препарата, рассматривают под лупой или невооруженным глазом на свет. Вид цепня легко определяется по степени ветвистости матки, содержащей яйца. Зрелые членики обоих видов цепней белого цвета, прямоугольной формы, причем длина их значительно превышает ширину. Замкнутая матка занимает весь членик в виде продольного ствола с боковыми ответвлениями, которые дают небольшие вторичные ветви. Матка в зрелом членике у вооруженного цепня имеет с каждой стороны 8—10 ветвей, у невооруженного цепня—18—30 ветвей (считать от основания). Белые, с легким серым оттенком, членики широкого лентеца короткие, но широкие. Наполненная яйцами матка свернута в виде бурой петлистой розетки посередине каждого членика. Распознавание крупных цестод по их сколексам (головкам) практически производится после дегельминтизации. При просмотре передней части стробилы постепенно переходят к тонкой шейке червя, заканчивающейся утолщением, округлой (цепни) или продолговатой (лентецы) головкой. Промывать паразитов следует осторожно, так как тонкая часть стробилы легко разрывается и при сливе воды обрывки ее легко потерять.
Самостоятельного отхождения карликового цепня (Hymenolepis папа) не наблюдается; он обнаруживается при дегельминтизации или по
172
путно при изгнании других ленточных червей. Паразитов нетрудно обнаружить невооруженным глазом. Белое членистое тело карликового цепня имеет вид слизистой нити длиной 1—2 см, шириной 0,5—0,6 мм. Мягкой кисточкой паразита захватывают и переносят в плоскую чашечку с физиологическим раствором. Затем для установления вида, паразита рассматривают через лупу или под малым увеличением микроскопа. Сколекс (диаметр 0,25 мм) имеет четыре присоски и хоботок, вооруженный одним венчиком крючьев (24—30); если хоботок втянут, крючья его просвечивают через ткань головки. Число члеников достигает 200, все они короткие, ширина их превышает длину, особенно в задней половине тела; половые отверстия лежат на одной стороне стробилы. Задние членики заполнены яйцами, находящимися в полости мешковидной замкнутой матки. Отходящие зрелые проглотиды разрушаются при прохождении через кишечник, и яйца можно легко обнаружить при микроскопическом исследовании испражнений.
Определение сосальщиков
Практически производится только после дегельминтизации в случаях нахождения цельных экземпляров. Размер сосальщиков различных видов колеблется от 1 мм до 8 см. Точное определение вида паразита производится по специальным руководствам.
Омеопаразиты
Следует иметь в виду образования, симулирующие паразитических червей (омеопаразиты). В патологических случаях в испражнениях встречается слизь в виде крупных удлиненных тяжей, бесцветных или окрашенных, напоминающих по форме аскарид или фрагменты ленточных червей. Иногда встречаются похожие на паразитов различные растительные остатки или отдельные элементы растений; например, волоски некоторых растений могут быть ошибочно приняты за личинок нематод. Подобные сомнительные образования легко распознаются под лупой (отсутствие членистости, гомогенная структура).
Сбор и консервирование паразитов
Мелкие экземпляры глистов собирают мягкой кисточкой, промывают водой и переносят в чашечки с физиологическим раствором. После определения плоских червей (трематод и цестод) их промывают в воде, кладут на предметное или более крупное по размерам стекло и расправляют, а затем закрывают сверху другим стеклом. Препарат перевязывают с обоих концов, кладут в ванночку с 70° спиртом и сверху помещают груз для дополнительного сдавливания. Через сутки груз снимают, а препарат сохраняют в 70° спирте или в жидкости Боля. Последняя состоит из двух растворов: А—жидкости Барбагалло (стр. 13) и Б — уксусно-глицериновой смеси (в 1 л дистиллированной воды растворяют 20 г уксуснокислого калия). Через сутки раствор фильтруют и прибавляют к нему 30 мл глицерина. Паразитов на пять дней помещают в жидкость А, затем переносят в жидкость Б до просветления, для чего требуется несколько дней или даже недель в зависимости от величины объекта. После просветления паразитов возвращают в жидкость А.
Нематод сохраняют в жидкости Барбагалло. Плоских червей можно фиксировать в горячем (около точки кипения) 5% растворе формалина, причем до нагревания к нему прибавляют глицерин (1 :10).
173
Для последующего гистологического изучения, особенно паразитов в тканях, материал фиксируют в абсолютном спирте или в 10% растворе формалина. Очень хорошие результаты дают сложные фиксирующие жидкости, например Ценкер-формол или пикро-формол.
Ценкер-формол: сулема — 5 г, двухромокислый калий — 2,5 г, сернокислый натр—1 г, дистиллированная вода — 100 мл; перед употреблением прибавляют 10 мл неразведенного формалина. Для фиксации берут кусочки не толще 0,3 см, фиксируют в течение 6—10 часов. Сулему отмывают в йодированном 70° спирте и объекты сохраняют в 80° спирте.
Пикро-формол: насыщенный водный раствор пикриновой кислоты — 15 мл, формалин— 5 мл, уксусная кислота — 1 мл (смешать перед употреблением). Фиксация до 24 часов. Сохраняют материал в 80° спирте, который дважды сменяют. Насыщенный водный раствор пикриновой кислоты получается при соотношении 1,225 г кислоты на 100 мл дистиллированной воды.
Дальнейшую обработку материала (заливка в парафин или целлоидин, окраска и заключение в бальзам) производят по общим правилам патологогистологической техники.
Для сохранения естественной окраски пораженных органов применяют консервирующую жидкость Кайзерлинга. После обмывания водой объект помещают на срок от 1 до 7 дней в раствор А (азотнокислый натр—15 г, уксуснокислый кали — 30 г, формалин — 200 мл, вода— 1000 мл); после ополаскивания в воде объект кладут в 80° раствор спирта (Б) до восстановления естественной окраски органа и затем переносят в раствор В (уксуснокислый калий —100 г, глицерин — 200 мл, вода— 1000 мл).
ГЕЛЬМИНТООВОСКОПИЯ
Диагностика гельминтозов на основании нахождения в фекалиях яиц глистов имеет преимущественное практическое значение. В большинстве случаев больной не замечает отхождения паразитов, и анализ, производится по совету врача, предполагающего наличие глистной инвазии. Практическому освоению техники микроскопического исследования экскрементов должно предшествовать ознакомление со специфическими особенностями яиц различных видов паразитических червей.
Постоянные препараты. Для приготовления постоянных препаратов яиц глистов применяется глицерин-желатина (стр. 16). На предметное стекло наносят частицу испражнений с яйцами глистов, берут покровное стекло, помещают на последнее небольшой кусочек глицерин-желатины и, держа стеклышко пинцетом или пальцами, слегка нагревают его на пламени спиртовки; когда желатина распустится (без пузырьков), быстрым движением стекло перевертывают и осторожно кладут на объект, подлежащий заделке. Для прочности препарат окантовывают (стр. 16).
Для яиц с тонким рисунком (например, карликового цепня, остриц, анкилостомид) глицерин-желатина непригодна, так как в этой среде быстро происходит их сморщивание и разрушение. Такие яйца рекомендуется поместить на предметное стекло в жидкость Барбагалло и, накрыв покровным стеклом, окантовать препарат (стр. 16). Фиксирующую жидкость с яйцами нематод предварительно следует нагреть в водяной бане до 60°, чтобы предотвратить их дальнейшее развитие.
Временные препараты. Для начинающего более полезен просмотр временных препаратов, допускающих возможность манипуляции с объектом при помощи препаровальной иглы.
174
Приготовление: Мелко измельченные членики цестод, содержащие матку, мелких нематод (самок, фрагменты с маткой трематод, гонады крупных нематод) помещают отдельно в пробирки с разведенным глицерином (1:2) и из полученной эмульсии приготовляют временные препараты; на предметных стеклах делают соответствующие условные обозначения. Практично вместо покровных стекол использовать для подобных препаратов слюду или целлулоид (например, кинофотопленку).
Техника микроскопирования
Для начинающего применение покровного стекла обязательно, так как при распознавании яиц паразитов потребуется просмотр препарата под большим увеличением, что при отсутствии покровного стекла может легко повлечь загрязнение линз микроскопа. Как правило, просмотр препарата начинают при малом увеличении (объектив 8); удобнее всего брать окуляр 10, что при достаточном навыке почти освобождает от необходимости пользоваться большим увеличением. Препарат просматривают полностью в пределах покровного стекла; во избежание пропусков рекомендуется «чтение» препарата, т. е. просмотр его по горизонтали или вертикали производить в определенном направлении. Полезно поле зрения слегка затемнить, что особенно важно для нахождения яиц с тонкой бесцветной оболочкой, легко ускользающих от наблюдения на ярко освещенном поле зрения.
Характеристика яиц
Яйца глистов, независимо от вида паразита, характеризуются следующими особенностями: определенным размером, специфической формой, различной структурой оболочки, своеобразной внутренней организацией (эмбриональные крючья, различное число бластомеров, наличие желточных клеток, филаментов и пр.). Указанные признаки позволяют распознавать яйца паразитических червей и отличать их от похожих образований, могуших ввести наблюдателя в заблуждение. Неопытный исследователь иногда принимает за яйца червей сильно преломляющие свет пузырьки воздуха, круглые блестящие капельки жира, плоские и овальные растительные клетки, споры, зерна детрита, кольца растительных сосудов и пр. Структура подобных образований бывает однородной, оболочка отсутствует или никогда не бывает сложного строения. Полезно легким движением покровного стекла изменить положение наблюдаемого объекта, что дает возможность составить о нем более полное представление. Следует отметить, что в испражнениях иногда можно обнаружить яйца клещей (мучных, сырных); белые яйца этих клещей (0,12X0,08 мм) эллиптической формы с широко овальными полюсами, тонкая оболочка их легко дает складки, содержимое однородно, на поздних стадиях развития в яйцах заметны зародыши. В сомнительных случаях прибегают к измерению подозрительных объектов (см. ниже).
Для сохранения фекалий с яйцами гельминтов их тщательно смешивают в равном объеме с горячим 10% раствором формалина или прибавляют этот раствор к фекалиям после получасового нагревания их в водяной бане при 60°; высокая температура исключает возможность развития в дальнейшем яиц нематод до стадии личинки. Характерные особенности яиц паразитических червей, наиболее часто встречающихся у человека, приведены в следующей ниже таблице.
175
ОПРЕДЕЛИТЕЛЬНАЯ ТАБЛИЦА ЯИЦ ВАЖНЕЙШИХ ПАРАЗИТИЧЕСКИХ ЧЕРВЕЙ, ИМЕЮЩИХ МЕДИЦИНСКОЕ ЗНАЧЕНИЕ
1	(8).1 На верхнем полюсе яйца имеется крышечка.
2	(3). Длина яиц больше 100 ц,. Яйца овальные, крупные (130—145X70—85). Оболочка толстая и гладкая. Яйцеклетка окружена многочисленными желточными клетками. На нижнем полюсе имеется плоский бугорок.................................
......................................Fasciola hepatica L.
3	(2). Длина яиц меньше 100 р.
4	(5). Яйца с толстой темно-бурой оболочкой, без бугорка на нижнем полюсе, 38—45 X 25—30 ц, асимметричные. Содержат зрелый мирацидий с двумя крупными клетками................................
....................Dicrocoelium lanceatum Still, et Hass.
5	(4). Яйца светло-желтые или светло-серые.
6	(7). Яйца мелкие: 26—32X И—15 ц. Отношение длины к ширине 2,5: 1. Верхняя часть яйца (с крышечкой) слегка сужена. На нижнем полюсе находится мелкий конусовидный выступ. Внутренняя структура мелкозернистая . . Opisthorchis felineus Riv.
7	(6). Размеры яиц: 68—75 X 45—50 ц. Отношение длины к ширине 1,5: 1. Яйца сероватые, широко овальные. Оболочка относительно тонкая, гладкая, с небольшим бугорком, расположенным слегка эксцентрически на нижнем полюсе. Яйцевая клетка окружена желточными клетками . . Dlphyllobothrlum latum L.
8	(1). На верхнем полюсе яйца крышечка отсутствует.
9	(10). Яйца асимметричные (50—60X30—32 ц). Одна сторона яйца заметно уплощена, другая выпукла. Оболочка тонкая, гладкая и бесцветная. Яйца на различных стадиях дробления, до головастикоподобной личинки включительно.............................
.................................Enterobius vermlcularis L.
10	(9). Яйца симметричные.
11	(18). Яйца не содержат эмбриональных крючьев.
12	(13). Яйца лимонообразные. Оболочка темно-коричневая, толстая. На обоих полюсах светлоокрашенные пробковидные образования. Размеры яиц: 50—54 X 23—26 ц,.................................
...............................Тrichocephalus trlchiurus L.
13	(12). Яйца овальные или шаровидные.
14	(17). Оболочка более или менее бугристая.
15	(16). Наружная оболочка крупнобугристая1 2, толстая, коричневая. Яйца овальные, реже шаровидные (50—70X40—50 ц). Яйцеклетка мелкозернистая и шаровидная, в центре яйца . . . ............................................Ascaris lumbricoides L.
16	(15). Оболочка мелкобугристая и более тонкая. Яйцо чаще удлиненное (50—100X40—50 ц). Форма его изменчива, часто неправильная. Все внутреннее пространство заполнено большим количеством желточных зерен..........................................
...........Ascaris	lumbricoides L. (неоплодотворенное яйцо).
17	(14). Оболочка тонкая, прозрачная. Яйцо выделяется на стадии четырех бластомеров, не заполняющих его полностью (56—76 X X 34—40 ц). . . . Ancylostoma duodenale Dub., Necator americanus Stil.
1 Цифры, стоящие вне скобок и в скобках, указывают, под каким номером определительной таблицы расположены взаимно исключающие друг друга признаки яиц.
2 Иногда встречаются аскаридные яйца без наружной бугристой оболочки (цвет. табл. VI), 176
18	(11). Яйца содержат 6 эмбриональных крючьев.
19	(20). Оболочка яйца желто-коричневая, толстая, с радиальной ис-черченностью. Яйца (эмбриофоры) 1 почти шаровидные (31—40X20—30 ц) . . . Taenia solium L., Taeniarhynchus saginatus Goeze.
20	(19). Оболочка яйца бесцветная, тонкая, гладкая. Яйца овальные (40X50 ц), эмбриофора почти шаровидная (29X30 ц), с длинными нитевидными придатками на полюсах.......................
.........................Hymenolepis папа (Sieb.) Blanch.
Измерение яиц
В затруднительных случаях при определении яиц глистов прибегают к их измерению. Практически это бывает необходимо при нахождении яиц паразитических червей, сравнительно редко встречающихся в наших широтах, например анкилостомид, трематод и др. Во всех сомнительных случаях определение следует обязательно подтверждать измерением яиц. Для микроскопического измерения необходимо иметь: а) микрометрический окуляр и б) объективную микрометрическую линейку.
Микрометрический окуляр отличается от обычного наличием в нем измерительной линейки длиной в 1 см с делениями, соответствующими 0,1 мм; очевидно, что при наложении окулярного микрометра видимая величина каждого деления окулярной линейки будет различна в зависимости от увеличения микроскопа, т. е. длины его тубуса и оптической системы (рис. 72). Для определения линейного значения делений
Рис. 72. Окуляры с измерительной линейкой.
А — объект (яйцо печеночной двуустки) занимает при малом увеличении микроскопа 8 делений линейки. Б — объект (яйдо анкилостомид) занимает при большом увеличении микроскопа 18 делений линейки.
окулярной линейки для данного микроскопа применяется объективная микрометрическая линейка (объектмикрометр). Последняя помещена на специальном предметном стекле, имеет обычно длину в 10 мм, причем каждый миллиметр разделен на 100 равных частей, следовательно, каждое деление равно 0,01 мм. Вставив микрометрический окуляр в микроскоп и поместив объективную линейку на предметный столик, производят установку микроскопа, т. е. помещают объектив на определенном расстоянии от
1 Следует иметь в виду, что в экскрементах встречаются не яйца этих паразитов, а шаровидные зародыши (онкосферы), заключенные в особую оболочку (эмбриофора); наружная яйцевая оболочка легко разрушается и практически отсутствует (цвет, табл. VI).
12 Зак, 3420. Лабораторный практикум медицинской паразитологии,	177
ТАБЛИЦА VI
Яйца важнейших паразитических червей, имеющих медицинское значение.
Яйца трематод: 1 — Fasciola hepatica, 2 — Dicrocoelium lanceatum, 3 — Opisthorchis fellneus. Яйца цестод: 4 — Diphylobothrium-latum, 5—Taenia solium (и Taeniarhynchus saginatus), 6 — Hymenolepis папа. Яйца нематод: 7 — Trichocephalus trichiurus, 8 — Enterobius vermicularis, 9 — Ancylostoma duodenale и Necator americanus. Яйца Ascaris lumbricoides’. 10 — неоплодотворенное, 11 — зрелое, в оптическом разрезе, 12 — то же, с поверхности
предметной линейки, дающем наиболее ясную видимость. Видимые в поле зрения линейки (окулярная и объективная) накладываются в вертикальном положении одна на другую, устанавливают число делений микрометрического окуляра, точно совпадающее с определенным числом делений объективной линейки, после чего вычисляют в микронах величину одного деления окулярной линейки.
Пример: 26 делений окулярного микрометра соответствуют 10 делениям объективной линейки; так как каждое деление последней равно 0,01 мм, то 26 делений окулярного микрометра равны 0,1 мм и, следовательно, величина одного деления окулярной линейки будет равна 0,00385 мм (0,1 :26), двух делений — 0,00770 и т. д. Для точности измерения рекомендуется пользоваться сильными оптическими системами и вычислять деления до пяти десятичных знаков. В дальнейшем для производства регулярных измерений объективная линейка уже не требуется, и для постоянной работы с данным микроскопом пользуются заранее составленной таблицей, например:
Микроскоп №....	Длина тубуса ....
Окуляр II; объектив 6.
1	деление окулярного микрометра равно	0,00385	мм
2	»	»	»	равны	0,00770	»
3	»	»	»	»	0,01155	»
4	»	»	»	»	0,01540	» и т. д.
При измерении какого-либо объекта сменяют обыкновенный окуляр на микрометрический и, определив в делениях последнего длину и диаметр объекта, находят в таблице искомую величину в микронах.
Задачи: а) определить микрометрический коэффициент для данного микроскопа, б) определить на препарате размеры яиц аскариды (Ascaris lumbricoides) и фасциолы (Fasciola hepatica), проверив результаты измерений по таблице (стр. 176).
Качественные методы исследования испражнений
На предшествующем занятии учащимся раздаются гельминтологические карточки (анкеты) для обследования на глистоносительство и стеклянные баночки в 25 г или фанерные коробочки для фекалий. На занятии анкеты сдаются, и занимающиеся под руководством преподавателя проводят самообследование на глистоносительство, практически знакомясь с методикой гельминто-копрологического обследования. В начале занятия демонстрируется необходимая аппаратура и даются технические указания. При обследовании небольшой группы лиц нельзя рассчитывать на значительное разнообразие гельминтофауны обследуемых, и поэтому самообследование следует обязательно дополнить параллельным просмотром препаратов яиц различных глистов. Результаты самообследования регистрируются преподавателем.
Наиболее удобен для повседневных работ способ исследования необработанных фекалий. Частицу испражнений величиною в спичечную головку помещают на предметное стекло в 2—3 капли воды или раствора глицерина с водой (1:1), размешивают деревянной палочкой, удаляют нерастворимые крупицы и накрывают покровным стеклом. Для исследования большей по объему пробы фекалий пользуются более крупными предметными стеклами. Техника приготовления препарата, предложенная Шульманом, дает лучшие результаты. Небольшую пробу фекалий (15—20 г) тщательно размешивают в небольшом стаканчике и 2—Зг испражнений переносят во второй стаканчике водой (1 : 1), где их также быстро размешивают до получения густой эмульсии. После этого палочку сразу же вынимают и наносят каплю эмульсии на предметное стекло, накрывают покровным стеклом и исследуют препарат под микроскопом. Описанный способ исследования технически весьма прост, но недостаточно надежен. При интенсивной инвазии или значительном числе яиц, выделяемых паразитами (аскарида, широкий лен-тец), наличие последних может быть установлено без труда. В случаях же, когда яиц бывает мало, приходится просматривать большое количество препаратов, что связано со значительной тратой времени. Од-178
нако этот способ исследования на практике применяется, но всегда в сочетании с другими, более эффективными; в частности, применение этих способов может исключить необходимость дополнительного исследования осадка в стаканчике при анализе по методу Фюллеборна.
Прочие способы исследования на яйца глистов, технически более сложные, основаны на принципе концентрации яиц (группа так называемых методов «обогащения»). Концентрация яиц достигается применением реактивов и соответствующей аппаратуры, благодаря чему яйца
Рис. 73. Лабораторный набор для осаждения яиц по способу Телемана (объяснение в тексте, стр. 179).
или осаждаются (исследуется осадок) или всплывают (исследуется поверхностная пленка). Из многочисленных методов обогащения, основанных на осаждении яиц, иногда применяют способ Телемана. Концентрация яиц, достигаемая при всплывании их, также осуществляется различными способами, из которых особенно широко применяется способ Фюллеборна.
Способ Телемана (рис. 73). Кусочек фекалий, величиной примерно с лесной орех, растирают в маленькой ступке или стаканчике со смесью равных объемов эфира и 50% соляной кислоты1 (или 25% раствора антиформина). Соляная кислота растворяет слизь и известковые соли, эфир экстрагирует нейтральные жиры и жирные кислоты. Полученную эмульсию процеживают через металлическое сито, надетое на стеклянную воронку, и центрифугируют приблизительно в течение 1 минуты. В пробирке образуются три слоя: верхний — эфир и растворенные в нем жиры, средний — соляная кислота с растворенной в ней слизью и, наконец, нижний слой, т. е. осадок, который состоит из нерастворимых частиц кала. Так как удельный вес яиц глистов больше
1 Имеется в виду крепкая соляная кислота (продажная), которая содержит кис-аоты по весу 37,4% (уд. вес 1,19).
12*	179
ведение анализа требуется много времени.
Рис. 74. Лабораторный набор для исследования по способу Фюллеборна (объяснение в тексте).
удельного веса применяемых реактивов, то яйца следует искать в осадке, который берут пипеткой, помещают на предметное стекло, накрывают покровным стеклом и исследуют под микроскопом.
Недостатки данного метода: 1) приходится просматривать значительное число препаратов; 2) методика сама по себе относительно сложна; 3) применяются дорогостоящие реактивы; 4) нередко происходит деформация яиц, особенно с тонкой структурой; 5) пары соляной кислоты оказывают вредное действие на линзы микроскопа; 6) на про-Все это делает способ Телемана мало пригодным для массовых обследований, но применимым для индивидуальных анализов.
Способ Фюллеборна (рис. 74). Приготовляют насыщенный раствор NaCl (уд. вес—1,2): берут 400 г поваренной соли на 1 л воды, нагревают до кипения, и раствор фильтруют через слой ваты и марли. Размер фекальной пробы зависит от вместимости употребляемого сосуда. Обычно применяют стеклянные пробирки с плоским дном, 6X2 см, или стаканчики в 100 мл. Фекальную пробу тщательно размешивают в растворе поваренной соли до получения интенсивно окрашенной взвеси, причем раствор приливают постепенно. Для размешивания удобнее всего пользоваться деревянными лопаточками, каждый раз новыми. Крупные частицы, всплывшие на поверхность жидкости, удаляют и оставляют сосуд на 1—1,5 ча
са. Вследствие разницы в удельном весе, яйца, как более легкие, всплывают, а крупные нерастворившиеся частицы кала осаждаются. По истечении указанного времени проволочной петлей диаметром в 1 см, изогнутой под прямым углом, прикасаются к поверхности раствора и переносят тонкую пленку жидкости на предметное стекло; петлю же после этого погружают в воду и затем прокаливают на пламени спиртовки. При просмотре препарата рекомендуется использовать покровное стекло, под которое помещают 2 капли (пленки); всего приготовляют не менее четырех препаратов.
Способ Фюллеборна вследствие его технической простоты, дешевизны и быстроты исполнения является весьма ценным. Однако метод всплывания яиц неприменим в случаях, когда яйца сравнительно тяжелы (например, у трематод и широкого лентеца) или оболочка не-оплодотворенных яиц проницаема для солей (у аскарид). Это требует исследования также и осадка со дна стаканчика.
180
В. Г. Кузнецов (1955) предложил при исследовании по способу Фюллеборна пользоваться комбинированным раствором солей следующего состава: хлористого натрия—100 г, гипосульфита натрия—100 гг сернокислой магнезии—100 г, воды — 300 мл; удельный вес раствора: 1,33—1,34. В кипящей воде при тщательном размешивании растворяют указанные соли и употребляют остывший раствор. Для уменьшения расхода применяемых реактивов автор проводит исследование в стаканчиках небольшой емкости, изготовленных из широких пенициллиновых флакончиков. Через 45 минут поверхностную пленку снимают (15—20 «петель») и переносят во второй стаканчик-камеру, изготовленный из узкого пенициллинового флакончика; предварительно стаканчик наполняют тем же солевым раствором. Просмотр под микроскопом поверхностной пленки производят непосредственно в стаканчике-камере. Автор считает предложенную им модификацию более эффективной и производительной, чем обычную процедуру исследования по способу Фюллеборна (нативный препарат, пленка и осадок); в течение 6 часов работы ему удавалось производить до 80 гельминтоовоскопических анализов.
Способ Калантарян представляет незначительно видоизмененную методику Фюллеборна. Вместо насыщенного раствора поваренной соли готовят такой же раствор азотнокислого натра (уд. вес 1,4) г для чего берут равные объемы селитры и воды. После кипячения, до образования металлической пленки, остуженный раствор применяют для обработки испражнений, которая производится так же, как по способу Фюллеборна. При исследовании всплывают также яйца широкого лентеца и неоплодотворенные яйца аскарид. Недостатком способа является более высокая стоимость анализа.
Способ С. Н. Горкиной (1928). Берут чайную ложку фекалий из нескольких мест, размешивают в стаканчике с водой (6—10 мл) до полужидкой консистенции, затем полученную эмульсию фильтруют через металлическое сито в центрифужную пробирку, приливают в последнюю 1 мл концентрированной соляной кислоты и 1—2 мл эфира; пробирку закупоривают корковой пробкой и оставляют на 10—15 минут, время от времени перемешивая жидкость путем опрокидывания пробирки. Жидкость центрифугируют в течение 1—2 минут, а затем сливают. К осадку прибавляют 8—10 мл смеси равных объемов насыщенного раствора поваренной соли с глицерином (готовый раствор перед употреблением следует взбалтывать). После тщательного размешивания жидкость снова центрифугируют в продолжение 2—8 минут (при 2—3 тысячах оборотов в минуту). Вслед за этим петлей, изогнутой под прямым углом, снимают по возможности весь верхний слой, распределяя материал на одном-двух препаратах, и производят микроскопическое исследование.
Автор этого способа наблюдала по 200—300 яиц в поле зрения; при контрольном исследовании по Фюллеборну отмечались лишь единичные яйца. Способ этот весьма эффективен, но трудоемок.
Способ Фауста (1939) состоит в следующем. Приготовляют взвесь фекалий в теплой воде (1 : 10); 10 мл эмульсии фильтруют через один слой влажной ткани; фильтрат центрифугируют 45—60 секунд при 2500 оборотах в минуту. Верхний слой жидкости сливают и заменяют чистой водой, пробирку встряхивают и содержимое ее повторно центрифугируют (3—4 раза) до получения над осадком чистой жидкости* К осадку добавляют до 4 мл 33% сернокислого цинка (уд. вес 1,180)» размешивают, после чего этот реактив доливают до верха пробирки и
181
тельные данные
центрифугируют в течение минуты. После этого поверхностную пленку снимают проволочной петлей и микроскопируют. Позднее этот способ •был несколько упрощен: исключена фильтрация фекалий через ткань, -анализ производят в стеклянном цилиндрике (5 смХЪ8 см), пленку снимают покровным стеклом, наложенным на поверхность жидкости в сосуде.
Из рассмотренных способов гельминто-копрологического анализа в работе обследователя наиболее целесообразно применение способа Фюллеборна в сочетании с просмотром нативного препарата. Дополни-) методике исследования указаны в разделе об организации и проведении обследовательской гельминотоло-гической работы.
Диагностика энтеробиоза (Enterobius vermicularis). Острицы откладывают свои яйца в пе-рианальной области, поэтому обычные методы микроскопического анализа для их обнаружения недостаточны. Для диагностики энтеробиоза практика выдвинула специфический метод перианального соскоба, заключающийся в следующем. Шпателевидной деревянной палочкой (10 см X 5 мм), смоченной в 50%! растворе глицерина, делают соскоб в перианальной области и полученный материал исследуют под микроскопом на яйца паразита. При невозможности быстрого исследования палочку помещают в пробирку с небольшим количеством дистиллированной воды; позднее последнюю центрифугируют и осадок исследуют под микроскопом. Шпатель после однократного употребления сжигают.
Применим также соскоб с помощью влажного тампона. После употребления его помещают в пробирку с дистиллированной водой, которую тщательно взбалтывают вместе с тампоном, жидкость центрифугируют и осадок исследуют под микроскопом. Иногда дополнительно делается ректальный соскоб деревянным полированным или стеклянным шпателем. Очень удобен в практической работе и дает хорошие результаты прибор Холла (рис. 75, А). На нижний конец стеклянной палочки (10 см — 4 мм), пропущенный пробку в пробирку, надевают квадратный кусочек
мягкого целлофана (3X3 см) и прекрепляют его узкой полоской липкого пластыря или резиновым кольцом. Перианальный соскоб делают сухим целлофаном, после чего последний стягивают пинцетом книзу вместе с резиновым кольцом, не снимая полностью с полоски, и отрезают ножницами центральный участок целлофана (приблизительно 1,5 XI>5 см). Затем кладут последний на предметное стекло в небольшое количество децинормального раствора едкого натра, накрывают покровным стеклом и исследуют под микроскопом. Для этой же цели удобна также трубочка Шахматова (рис. 75, Б), которую вводят вращательными движениями в прямую кишку на 3—5 см; добытую ректальную слизь микроскопируют. На препарате могут встретиться яйца не только остриц, но и других паразитических червей, особенно крупных цепней (Taenia solium, Taeniarhynchus saginatus), яйца которых выделяются из матки паразитов при выхождении члеников.
Рис. 75. Приборы для диагностики энтеробиоза.
Л —прибор Холла для перианального соскоба, Б — прибор Шахматова для взятия ректальной слизи (объяснение в тексте, стр. 182).
через резиновую
182
Количественный анализ
Все предложенные способы количественного гельминтологического анализа имеют своей задачей путем подсчета яиц, выделяемых паразитами, установить число особей данного вида, паразитирующих в кишечнике человека или животных. Количество яиц, выделяемых паразитическими червями, зависит от ряда эндо-экзогенных факторов: возраста паразита (и в частности, наступления его половозрелости), интенсивности инвазии, постоянного или цикличного типа откладки яиц, от особенностей, связанных с хозяином (пол, возраст, питание, состояние здоровья), наличия в кишечнике хозяина других сочленов паразито-ценоза, остаточного действия противоглистных средств при дегельминтизации и т. п. Несмотря на недостаточную изученность вопроса о плодовитости паразитических червей, существующие методы количественного анализа при массовом обследовании населения дают вполне удовлетворительные результаты при некоторых гельминтозах.
В настоящее время методика исследования разработана преимущественно по отношению к анкилостомидам, аскаридам и власоглаву.1 Установлено, что каждая самка некатора выделяет за сутки 9000 яиц и на каждый грамм оформленных фекалий в среднем приходится 44 яйца. Следовательно, для определения числа самок некатора, находящихся в кишечнике данного больного, общее число яиц, обнаруженных в 1 г фекалий, делят на 44. Число самцов принимают равным числу самок, т. е. 22 яйца в 1 г фекалий падает на каждого паразита (табл. 3).
Таблица 3
Определение инвазии некатором по количеству яиц
Степень инвазии	Количество яиц в грамме испражнений	Число некаторов
Очень слабая		1— 600	1— 25
Слабая 		601— 2 100	26— 100
Умеренная		2101—11 100	101— 500
Тяжелая 		11 101—22 100	501—1 000
Очень тяжелая ....	Свыше 22 100	Свыше 1 000
Самка анкилостомы откладывает приблизительно в 5,5 раз больше яиц, чем самка некатора, и на каждую анкилостому (самку) в 1 г фекалий приходится 238 яиц. Принимая во внимание, что обычно встречается инвазия обоими видами паразитов и видовая дифференциация яиц анкилостомид затруднительна, практически для целей количественного гельминтологического анализа можно пользоваться табл. 4 1 2.
Ежедневная продукция яиц для аскариды< определяется в 190 000 — 200 000, т. е. в среднем на одну самку приходится 1900 яиц в 1 г кала (табл. 5).
1 Для ленточных червей (Taenudae), у которых яйца выделяются лишь при разрыве или распаде перезрелых члеников, или для остриц (Enterobius vermicularis), почти не выделяющих яиц в просвет кишечника, количественные методы исследования, конечно, неприменимы.
2 Считая, что на самку в 1 г фекалий приходится 200 яиц, или 100 яиц на каждого паразита (самца или самку).
183
Таблица 4
Определение инвазии анкилостомидами по количеству яиц
Степень инвазии	Количество яиц в грамме испражнений	Число анкилостомид
Очень слабая		1— 2 500	1— 25
Слабая 		2 501— 10 000	26— 100
Умеренная		10 001— 50 000	101— 500
Тяжелая		50 001—100 000	501—1000
Очень тяжелая ....	Свыше 100000	Свыше 1000
Таблица 5
Определение степени инвазии аскаридами по количеству яиц
Степень инвазии	Количество яиц в грамме испражнений	Число аскарид
Слабая 	 Умеренная	 Тяжелая	 Очень тяжелая ....	1— 10 000 10 001— 50 000 50001—190 000 Свыше 190 000	1— 10 11— 50 51—200 Свыше 200
Если в отдельных случаях целесообразность применения количественного гельминтологического анализа является спорной, то при групповых обследованиях (50—100 человек) получаются средние цифры, достаточно характеризующие интенсивность глистной инвазии. Обычно обследуемое население распределяется на группы в зависимости от числа яиц, обнаруженных в 1 г фекалий, и для каждой группы определяют средний коэффициент яиц, выделяемых паразитическими червями.
Самка власоглава ежедневно откладывает до 150 яиц1 (табл. 6).
Таблица 6
Определение степени инвазии власоглавом по количеству яиц
Степень инвазии	। Количество яиц в грамме испражнений	। Число власоглавов
Очень слабая		1— 2 000	1— 25
Слабая 		2 001— 7 500	26— 100
Умеренная		7 501—37 500	101— 500
Тяжелая 		37 501—75 000	501—1000
Очень тяжелая ....	Свыше 75 000	Свыше 1000
Из известных в настоящее время методов количественного гельминтологического анализа наибольшим распространением пользуется способ Столла (Stoll, 1923—1926), заключающийся в следующем (рис. 76). В стеклянную колбочку наливают децинормальный раствор NaOH (приблизительно 0,4% раствор) до первой метки (56 мл), прибавляют
1 Количество яиц, приходящееся на одного паразита, колеблется в зависимости от тяжести инвазии. Так, например, М. С. Парецкая (1947) изучала соотношение между числом самок власоглава, обнаруженных при вскрытиях трупов людей, и числом яиц, выявленных в 1 г фекалий. Согласно данным автора, чем выше зараженность глистами, тем меньшее количество яиц приходится в среднем на одну самку.
184
фекалии до тех пор, пока уровень жидкости не достигнет 60 мл (приблизительно 4 г фекалий), затем опускают в колбочку 10 стеклянных дробинок (диаметром 3 мм) и, закрыв пробкой, взбалтывают в течение минуты. Набирают пипеткой 0,075 мл фекальной эмульсии, что равняется 0,005 г кала. Содержимое пипетки переносят на предметное
Рис. 76. Количественный гельминтологический анализ. Лабораторный набор для работы по способу Столла (объяснение в тексте, стр. 184).
стекло, покрывают покровным стеклом (22X30 мм) и сосчитывают яйца под микроскопом. Удвоенную сумму яиц, содержащихся в 0,0075 мл эмульсии умножают на 100 (или сумму яиц умножают на 200); в результате получают число яиц, содержащихся в 1 г кала.
В практической работе можно пользоваться также следующими примерными схемами (табл. 7).
Таблица 7
Определение степени инвазии анкилостомой и аскаридой по количеству яиц
Вид	Степень инвазии	Количество яиц в 0,075 мл фекальной эмульсии	Число паразитов
Ancylostoma duodenale	Группа 1 .	2 3 „	4	1—10 11—20 21—40 Свыше 40	1—18 19—34 35—68 Свыше 68
Ascarls lumbricoides I	1 Группа 1 „	2 „	3 .	4	1—20 21—40 41—60 Свыше 60	1— 3 4— 6 7—10 Свыше 10
Для облегчения счета яиц рекомендуется пользоваться предметным стеклом со стеклянной пластинкой, разделенной на квадраты в 2 мм
185
(принцип гематологической счетной камеры). После просмотра 20 квадратов на трех препаратах и подсчета яиц выводят среднее их количество и умножают полученный результат на площадь покровного стекла (22X30 = 660 мм).
Задача. На основании исследования по методу Столла определить количество аскаридных яиц в 1 г фекалий и вычислить ожидаемое число паразитов (самцов и самок).
Гельминтологическое исследование дуоденального сока и мокроты
Исследование дуоденального сока и мокроты имеет наибольшее практическое значение.
Исследование дуоденального сока. Исследование содержимого двенадцатиперстной кишки, представляющего собой смесь желчи, кишечного и панкреатического сока с большей или меньшей примесью желудочного, является особенно ценным диагностическим методом при трематодозах печени; в этих случаях находят яйца Opisthorchis felineus и других более редких трематод, паразитирующих в желчных ходах печени (Fasciola hepatica, Dicrocoelium lanceatum и др). Из
Рис. 77. Яйца Paragonimus westermani в мокроте.
круглых червей могут встретиться личинки Strongyloides stercoralis, также возможны находки яиц аскарид при извращенной локализации этих паразитов в желчных путях печени. Анализ дуоденального сока производится по общим правилам лабораторной техники. Рекомендуется проведение микроскопического исследования осадка всех трех порций дуоденального сока (А, В, С), причем исследование его производят немедленно после получения; при необходимости консервации к дуоденальному содержимому прибавляют 10% формалин (1/з объема).
Исследование мокроты. В мокроте могут быть обнаружены яйца легочной трематоды Paragonimus westermani (рис. 77), личинки мигрирующих нематод (аскарид, анкилостомид, кишечной угрицы), а также, при эхинококкозе легких, крючья эхинококка, обрывки оболочки его кисты и, реже, выводковые капсулы с головками эхинококка. При макроскопическом исследовании мокроты обращают внимание на ее запах, прозрачность, консистенцию, цвет и на отдельные составные части. Мокрота бывает слизистой, слизисто-гнойной, гнойной или в различной степени кровянистой. При парагонимозе легких мокрота часто окрашена кровью и обычно содержит мелкие комочки ржавого цвета, состоящие из золотисто-коричневых яиц паразита. Отобранные частицы помещают на предметное стекло, накрывают его покровным стеклом и 186
легким нажимом ручки препаровальной иглы на середину покровного стекла распределяют мокроту по возможности тонким слоем. Для лучшего отделения яиц от слизи мокроту обрабатывают 2% раствором соды.
Личинки аскарид, анкилостомид и кишечной угрицы встречаются также чап*'. в кровянистой мокроте. Аскаридные личинки в период своего временного пребывания в легких попадаются в течение четырех недель после заражения. Размер личинок колеблется в широких пределах в зависимости от срока пребывания в дыхательных путях. В конце миграции личинки достигают длины 1,5—2 мм. Микроскопическое исследование следует производить на свежих препаратах мокроты. Определяют аскаридных личинок по строению округленного переднего конца тела, на котором заметны три губы. В отличие от личинок анкилостомид, живые аскаридные личинки при комнатной температуре мало активны, но при нагревании среды до 35° они становятся весьма подвижными. В случае прорыва кист эхинококка в бронхи мокрота становится янтарно-желтой и, по словам больных, приобретает горький вкус; иногда при этом наблюдаются обильные кровотечения. Размер сколексов эхинококка 0,160 ХОЛ 15 мм; длина крючьев варьирует от 0,020 до 0,040 мм.
МЕТОД ОБНАРУЖЕНИЯ ЛИЧИНОК АНКИЛОСТОМИД И КИШЕЧНОЙ УГРИЦЫ (STRONGYLOIDES STERCORALIS BAY.)
на нижний конец воронки надевают ре-
Рис. 78. Прибор Бермана для исследования почвы на личинок анкилостомид (объяснение в тексте, стр. 187).
Способ Бермана (рис. 78). 12 стеклянных воронок диаметром не свыше 8 см размещают в специальном штативе; в каждую из них вставляют мелкоячеистое (около 1 мм) металлическое сито, выстланное бязью или мадаполамом; зиновую трубку длиной до 10 см, снабженную зажимом Гофмана. На ткань, покрывающую сито, деревянной лопаточкой накладывают 50—60 г фекалий, к которым добавляют воду температуры до 45°, так, чтобы она покрывала содержимое воронки. Прибор помещают в теплой комнате на 3— 4 часа. За это время личинки мигрируют в теплую воду и скапливаются в силу геотропизма в резиновой трубке; воду из последней выпускают и центрифугируют. Осадок исследуют под
микроскопом. Каждый раз после окончания исследования сита и воронки тщательно промывают горячей водой (сита — до 3—4 раз, ткань же всякий раз заменяют новой).
В условиях наших субтропиков, особенно во время экспедиций, когда летом температура воздуха в лаборатории нередко свыше 30°, рекомендуется культуру с личинками (копрокультуру или исследуемую почву) предварительно охлаждать до 15—17°; полезно также при работе с приборами Бермана помещать над охлажденной средой стаканчик со льдом (Ф. Ф. GonpyHpB, 1950).
187
Дифферециальное распознавание личинок первой стадии (рабдитовидных) анкилостомид и кишечной угрицы (рис. 79) производится под большим увеличением микроскопа (табл. 8).
Рис. 79. Личинки Strongyloldes stercoralls и Ancylostoma duodenal».
А, Б — рабдитовидные личинки Strongyloides stercoralls', В» Г— рабдитовидные личинки Ancylostoma duodenale\ Д — филяриовидная личинка Strongyloldes stercoralls, JK— филяриовидная личинка Ancylostoma duodenale в чехлике после линьки; Б —Г—передний конец личинок обоих паразитов в стадии первой линьки (видна слинявшая кутикула —6); Е — задний конец филяриовидной личинки Strongyloides stereo г alls. J —нервная система, 2—пищевод, 3— кишечник, 4 — половой зачаток, 5 —анус, 6 — чехлик.
Заметим, что личинок анкилостомид можно встретить в испражнениях лишь в жаркое время года при исследовании стула больного через 30—40 часов после дефекации, так как из кишечника во внешнюю среду яйца выделяются на разных стадиях развития; личинки же кн-
188
шечной угрицы обнаруживаются у инвазированных лиц уже в свежевыделенных фекалиях. Поэтому в случаях, когда нет возможности исследовать свежие испражнения, целесообразно держать их на холоду и тем предупредить созревание яиц анкилостомид и выход из них личинок.
Таблица 8
Дифференциальные признаки рабдитовидных личинок анкилостомид и кишечной угрицы
Признаки	Личинки	
	анкилостомид	кишечной угрицы
Размер (в микронах)	 Длина ротовой полости 		250 X 16 10	250 X И 2—3
Отделы пищевода	 Длина узкого отрезка задней части тела	 Половой зачаток (овальное тело на середине расстояния от конца пищевода до ануса) 		Разграничены менее резко Больше Меньше	Разграничены более резко Меньше Больше
ПриборФюллеборна (рис. 80,Л). В основу прибора Фюллеборна, предложенного для извлечения личинок нематод из тканей раз-
б
Рис. 80. Приборы для извлечения личинок нематод из тканей различных органов.
А —прибор Фюллеборна, Б — модификация прибора Фюллеборна (Chandler, 1929).
личных органов, положен способ Бермана. Прибор состоит из цилиндрической широкогорлой склянки (12—15 см в диаметре), в которую вкладывают второй, более узкий сосуд (10—12 см), открытый с обоих
189
концов, причем нижняя часть его, затягиваемая марлей, отстоит от дна наружного сосуда на 1 см. На марлю помещают мелко разрезанные кусочки органов, содержащие личинок (легкие, печень и др.), а во внешнюю склянку наливают нагретый до 37° раствор Рингера (NaCl — 0,85 г, КС1 — 0,025 г, СаСЬ — 0,03 г, дистиллированная вода 100 мл, или физиологический раствор NaCl), примерно на 0,5 см выше дна внутреннего сосуда. Прибор на 3 часа помещают в термостат, и личинки в силу свойственного им положительного термотропизма переходят в физиологический раствор, который затем центрифугируют. Для прибора пригоден диализатор соответствующего размера.
Хорошие результаты дает также следующая модификация описанного выше прибора (рис. 80,Б). В центре невысокой стеклянной чашки устанавливается цилиндр из металлической сетки, выстланной изнутри бумагой, пропитанной агаром. Нижнюю часть цилиндра обвязывают мягкой тканью (сатин, бязь), а в наружный сосуд на 0,5 см наливают расплавленный 2% агар, который после застывания вырезают непосредственно вокруг внутреннего цилиндра. Образовавшееся углубление в агаре наполняют водой температурой 50° и поддерживают эту температуру в течение двух часов. На поверхность агара над тканью кладут фильтровальную бумагу и помещают на последнюю тонкий слой (2 мм) мелкозернистого песка. Сверху кладут кусочки исследованных органов, покрывая их водой комнатной температуры. Личинки мигрируют через песок и агар и скапливаются в воде, наполняющей вырезанный участок поверхности агара во внешнем сосуде.
Внеся незначительные изменения в этот прибор, можно применить его при исследовании почвы для отделения личинок анкилостомид от личинок свободно живущих нематод. Последние, не обладая положительным термотропизмом, не мигрируют в нагретую воду во внешнем сосуде. Температура воды во внутреннем цилиндре должна быть не выше 38°. Воду в приборе нагревают в течение 20 минут в водяной бане при температуре 60°. В дальнейшем при охлаждении ее нагревание повторяют до получения указанных температур. Исследование продолжается не менее двух часов.
МЕТОДИКА ОРГАНИЗАЦИИ И ПРОВЕДЕНИЯ ОБСЛЕДОВАТЕЛЬСКОЙ ГЕЛЬМИНТОЛОГИЧЕСКОЙ РАБОТЫ СРЕДИ НАСЕЛЕНИЯ
ПОДГОТОВКА МАТЕРИАЛА
Являясь заключительной в цикле гельминтологических занятий, данная тема, на основе знакомства с методикой обследовательской работы, дает весьма благодарный материал для суммирования и закрепления знаний, полученных при прохождении гельминтологического практикума. Для занятия широко используются наглядные пособия (карты по гельминтогеографии СССР, диаграммы, фотографии, макеты ит. п.). Демонстрируется походная гельминтологическая лаборатория, показываются важнейшие противоглистные средства, разнообразные образцы гельминтостатистических карточек (анкет), печатные труды гельминтологических экспедиций, пособия по гельминтологии и пр.
Для проведения обследования организованных групп населения на занятиях подробно разбирается примерная программа вопросов, подлежащих уточнению в практической работе: организация обследо-190
вания, лабораторная методика, проведение дегельминтизации, различные способы гельминтологического обследования внешней среды и определение жизнеспособности яиц и личинок паразитических червей.
ОРГАНИЗАЦИЯ ОБСЛЕДОВАНИЯ
Лабораторное оборудование. Оборудование гельминтологической лаборатории (походного типа) зависит от объема намеченного обследования и избранной методики гельминто-копрологического исследования. Ниже мы приводим примерный перечень необходимых предметов лабораторного имущества для работы по способам Фюллеборна и Столла с учетом материалов и аппаратуры для гельминтологического обследования внешней среды.
Оптика, аппаратура
1.	Микроскоп
2.	Микрометры, окулярный и объективный
3.	Лупа штативная
4.	Лупы складные ( X 10,20)
5.	Центрифуга
6.	Воронка Гольдмана с фильтрами
Реактивы и
1.	Азотнокислый натр
2.	Антиформин
3.	Бальзам канадский
4.	Двухромокислый натр
5.	Глицерин
6.	Глицерин-желатина
7.	Менделеевская замазка
и инструментарий
7.	Водяная баня
8.	Ареометр
9.	Ножницы
10.	Пинцеты
11.	Петли металлические для исследования по способу Фюллеборна
12.	Лопаточки деревянные для исследования по способу Фюллеборна.
химикалии
8.	Спирт (винный и денатурированный)
• 9. Формалин
10.	Хлористый натр
11.	Щелочь едкая, натронная
12.	Бриллианткрезилблау
13.	Сафранин
14.	Синька метиленовая
Стекло и посуда разная
1.	Стекла предметные и покровные
2.	Измерительные цилиндры
3.	Воронки
4.	Пипетки обыкновенные и для способа Столла
5.	Колбочки (для способа Столла)
6.	Бусы (дробинки) стеклянные (для способа Столла)
7.	Спиртовая лампочка
8.	Бутыли емкостью 1—5 л
9.	Посуда разного объема для исследования воды и овощей
10.	Посуда разная для консервирования материала
11.	Посуда для взятия кала (стеклянная, деревянная, фанерная или из парафинированной бумаги)
1.	Марля
2.	Вата
3.	Этикетки
4.	Анкеты
5.	Примус
V а г i а
б.	Кастрюли
7.	Ведра
8.	Халаты
9.	Полотенца
10.	Канцелярские принадлежности
Анкетный материал. Типовой анкеты, т. е. пригодной для обследования разнородных групп населения, не существует. Содержание анкеты зависит от обследуемого контингента лиц (гражданское население, военнослужащие, рабочие различных профессий, колхозники, дети и т. д.), так как анкета должна отражать главные специфические бытовые и производственные особенности данного коллектива. Анкета должна быть всегда краткой и четкой. Кроме личных данных (фамилия, имя, отчество), в нее следует заносить сведения о национальности и возрасте обследуемого, указывать, уроженцем какой местности он является, откуда и когда прибыл к месту обследо-
191
вания, род работы в прошлом и в настоящее время. Результаты исследования указываются отдельно по каждому применявшемуся способу (нативный препарат, способ Фюллеборна, метод Столла и т. д.); кроме того, обязательно отмечаются результаты лечения, если последнее проводилось.
Помимо индивидуальных анкет, желательно иметь специальные карты, в которых отражены санитарно-гигиенические условия труда и быта населения в обследуемом районе, а также дана характеристика климатических и почвенно-гидрологических особенностей данной местности или объекта обследования.
Для описания населенного пункта предложена следующая схема (В. П. Подъяпольской— 1932, дополненная нами):
1.	Название пункта обследования.........................................
2.	Направление и расстояние от ближайшего административного центра (какого) .
3.	Река, озеро, арык (какой водной системы).............................
4.	Высота над уровнем моря..............................................
5.	Чигло жителей и дворов...............................................
6.	Национальный состав..................................................
7.	Занятия населения (подробная характеристика).........................
8.	Домашние животные (видовой состав, количество, способ содержания — зимой, летом)..................................................................
9.	Типовое жилище (двор, жилая площадь, высота, освещение, вентиляция, мебель) 10. Одежда, обувь.......................................................
11.	Характер растительности и ее распределение (тень)...................
12.	Огороды (перечень овощей, способ удобрения и поливка)...............
13.	Питание (состав, способ и место приготовления пищи, хранение продуктов). . . 14. Водоснабжение (источники — питьевые, хозяйственные; способ хранения питьевой воды)...................................................................
15.	Баня. Купанье (место, частота). Прочие гигиенические навыки (мытье рук, смена белья и т. д.)..........................................................
16.	Отхожие места (подробное описание)..................................
17.	Способ удаления нечистот (подробно) ................................
18.	Отмечаемые болезни (признаки, местные названия).....................
19.	Медицинская помощь (организация ее — врач, фельдшер, народные противоглистные средства) ..........................................................
20.	Школа (описание помещения, число учащих и учащихся).................
21.	Базар...............................................................
22.	Источники, из которых получены сведения (фамилия и занятия лиц, названия учреждений и книг)..................................................
23.	Примечания и дополнения.............................................
Ориентировочный рабочий план. Намечается в соответствии с количеством и контингентом обследуемых и в зависимости от объема и продолжительности работы. При обследовании по возможности следует выявить гельминтофауну разнородных категорий населения (завод, колхоз, школа, домохозяйки, пришлое и коренное население и т. д.). При возможности в план работ нужно включать также гельминтологическое обследование внешней среды.
Календарный план работы. Составляется по договоренности с соответствующими организациями (администрация, профорганизация, здравотдел и пр.). В военных частях план обследования утверждается командованием и объявляется приказом по части.
Санитарн о-п росветительная работа. Перед обследованием необходимо проводить широкую санитарно-просветительную работу — лекции, собеседования (желательно с иллюстративным материалом), выпуск листовок, помещение статей в печати, посещение выставок, музеев и т. п. Форма изложения должна быть общедоступной и понятной широким слоям населения. На лекциях и собеседованиях в популярной форме следует сообщать сведения о роли паразитических червей в патологии, о значении глистного фактора для здоровья, осве-192
щать задачи предстоящего обследования, а также разъяснять технику получения материала для исследования.
Лабораторная работа. Оборудование помещения. Удобнее всего развернуть работу, если позволяет обстановка, на базе медицинских учреждений (больница, госпиталь, амбулатория). Необходимо иметь изолированное помещение, по крайней мере из двух комнат: препараторскую и комнату для микроскопического исследования.
Техника раздачи и сбора посуды. Для собирания применяется стеклянная посуда (специальные копрологические пробирки, деревянные баночки для пилюль, лубочные коробочки для мазей или стаканчики из парафинированной бумаги. Посуду нумеруют, наклеивают на нее этикетки, на которых пишут фамилию обследуемого. В соответствующей анкете отмечают номер посуды. Раздачу посуды, а также заполнение анкет удобнее всего производить после проведения лекции или собеседования. Для сбора фекалий в определенном месте нужно поместить ящик, который по заполнении на следующий день доставляется в лабораторию.
Методика исследования. Как указывалось выше, наиболее удобным и эффективным методом гельминто-копрологического анализа следует считать исследование по способу Фюллеборна (комбинированное). Анализ начинается просмотром нативного препарата (мазок) и дополняется исследованием по Фюллеборну. Рабочий минимум на каждую пробу фекалий: два мазка и просмотр шести препаратов при анализе по способу Фюллеборна, из них два препарата готовятся изосадка. При отрицательном результате исследование повторяется через 10—12 дней. При указанной методике гельминто-копрологического исследования лаборант-микроскопист без помощника в течение рабочего дня делает 20 анализов, при наличии технического помощника число анализов возрастает до 30. Если позволяют условия, желательно введение в план работы специфической методики исследования на энтеробиоз, а также количественного гельминтологического анализа (способ Столла).
Регистрация результатов исследования. Результаты исследования заносятся в специальный журнал по следующей схеме:
Журнал гельминтологического обследования
7 .	8	9	10	11
+	I II III IV — 2 6	4	I II 2 31		Мазок и пленка яйца власоглава; в осадке 5 неоплодо-творенных аскаридных яиц
1 Количество яиц в препарате.
13 Зак. 3420. Лабораторный практикум медицинской паразитологии.	193
Практически такая детальная регистрация очень незначительно усложняет анализ, но зато дает возможность приблизительно выявить интенсивность инвазии и, кроме того, судить о сравнительной ценности применявшихся методов исследования. Если дополнительно работают по Столлу, то количественный учет по Фюллеборну можно опустить.
Обработка результатов обследования. При обработке полученных материалов обследованное население подразделяется на основные группы — коренное население и вновь прибывшие; военнослужащие и гражданское население; рабочие, колхозники, служащие, домохозяйки, дети и т. п. Эти группы в свою очередь распределяются по постоянному местожительству, национальности, возрасту и полу; для военнослужащих указывается продолжительность службы в армии. Определяется процент заражения, процент одиночных и множественных инвазий, видовой состав паразитов в отдельных группах и дается общая сводка гельминто-копрологического обследования. При обработке результатов обследования целесообразно применять методы статистического анализа. В случаях госпитализации больных указываются гематологические и клинические показатели. Если производится дегельминтизация, приводятся сведения о ее методике и результатах. Данные обследования иллюстрируют таблицами, диаграммами, фотоснимками и т. д.
В заключение, на основе эпидемиологического анализа полученных материалов обследования, делаются соответствующие практические предложения, осуществление которых необходимо для оздоровления населения.
ОБСЛЕДОВАНИЕ ВНЕШНЕЙ СРЕДЫ НА ЗАРАЖЕННОСТЬ ЯЙЦАМИ ПАРАЗИТИЧЕСКИХ ЧЕРВЕЙ
Выявление гельминтофауны населения следует сочетать с гельминтологическим обследованием внешней среды. В своей практической работе врач-гельминтолог должен стремиться не только выяснить гель-минтофауну определенной группы населения, но и изучить эпидемиологию обнаруженных глистных инвазий, т. е. установить основные пути и источники распространения гельминтозов человека, проанализировать их соотношение и тем самым определить ведущее звено в эпидемиологии гельминтозов. Для этого необходимо располагать подробными сведениями о климате данной местности (максимальная и минимальная средняя температура, количество осадков и пр.), ее орографии и гидрографии, а также сведениями о характере почвы, растительности и животном мире. В процессе обследования выявляются санитарно-гигиенические условия быта и труда, состояние источников водоснабжения, уборных (конструкция, расположение, защита от мух и т. п.), жилых и хозяйственных построек. Все эти данные дают представление о степени возможного загрязнения внешней среды инвазионным материалом. Немаловажное значение имеет состояние ветеринарно-санитарного надзора, в частности обстановка работы на бойнях и сведения о заражении убойных животных. Следует также обращать внимание на наличие домашних животных и огородных хозяйств.
В конечном итоге эпидемиологический анализ дает возможность составить план проведения мероприятий по оздоровлению данной местности и предупреждению глистных инвазий. В процессе изучения эпидемиологии гельминтозов большое значение имеют данные гельминтологического исследования внешней среды: почвы, воды, предметов бытовой обстановки и т. д.
194
Исследование почвы
Пробы почвы для исследования берутся на дворе, в подвалах, се* нях, сараях, саду; исследуют пол жилищ, сор после подметания школ, клубов и т. д. Рекомендуется с участка в 50 м2 брать по диагонали не менее десяти проб почвы. Затем взятые пробы смешивают вместе и исследуют из общей массы 200 г земли.
Для обработки почвы можно применять следующие методы.
Способ Спиндлера. 10 г земли помещают в центрифужную пробирку емкостью в 50 см3, прибавляют около 10 см3 30% антиформина, тщательно размешивают и оставляют на час в покое. Затем избыток антиформина сливают и землю смешивают с насыщенным раствором двухромокислого натра (уд. вес 1,35), наполняя пробирку почти доверху; после основательного размешивания центрифугируют в течение 1—2 минут (при 1000 оборотах в минуту).
Вместо насыщенного раствора двухромокислого калия другие авторы рекомендуют применять насыщенный раствор поваренной соли, или 2,13% раствор едкого натра, или насыщенный раствор азотнокислого натрия (уд. вес 1,39).
Всплывшие на поверхность после центрифугирования яйца снимают петлей, считают и классифицируют по стадиям их развития: а) неразвившиеся, б) развивающиеся, находящиеся в различных стадиях дробления, в) зрелые с подвижной личинкой и г) мертвые.
Способ Васильковой-Гефтер (1948) дает значительно лучшие результаты. В центрифужную металлическую пробирку (50 см3) помещают 10 г исследуемой почвы, опускают 10 стеклянных бусинок, наполняют пробирку 5% раствором едкого натра и в течение часа 4—5 раз энергично встряхивают пробирку для лучшего размешивания почвы. После центрифугирования в течение 1—2 минут избыток едкого натра сливают. Затем пробирку наполняют насыщенным раствором азотнокислого натрия (уд. вес 1,39) и после повторного размешивания почвы центрифугируют в течение двух минут. Поверхностную пленку переносят петлей в стаканчик с небольшим количеством воды, землю в пробирке размешивают с тем же раствором азотнокислого натрия и снова снимают поверхностную пленку, повторяя эту процедуру до пяти раз в течение 4—5 часов. Воду со снятой поверхностной пленкой фильтруют через один планктонный предварительный фильтр в воронке Гольдмана; при отсутствии последней, воде дают отстояться или ее центрифугируют, а затем осадок микроскопируют. Влажный фильтр исследуют под микроскопом; если же его предварительно подсушивают, то затем просветляют кедровым, вазелиновым или касторовым маслом. Яйца подсчитывают и определяют стадии их развития. Авторы этого способа указывают, что через один фильтр можно профильтровать пленку после обработки 100—200 г почвы, что соответствует 10—20 центрифужным пробиркам. Просмотр одного фильтра занимает не более 3—4 минут. При такой методике исследования почвы обнаруживается от 34 до 60% яиц паразитических червей (в среднем 44,6) ч
Исследование овощей
Описанный принцип исследования почвы на заражение ее яйцами глистов положен 3. Г. Васильковой и В. А. Гефтер (1941) в основу гельминтологического исследования овощей. Овощи замачиваются на сутки в стеклянных банках, причем рекомендуется их тщательно взбалтывать в течение 5 минут не менее четырех раз в час. Затем воду 13*	195
через металлическую сетку сливают в другую банку и в новой порции воды производят соскоб с овощей кисточкой из металлических струн. Обе порции воды сливаются вместе и отстаиваются сутки. Обработку осадка производят так же, как при анализе почвы. Применяется также и другой способ исследования овощей. Последние замачивают лишь в течение двух часов в 2% растворе щелочи, осадок же после отстаивания сразу обрабатывают насыщенным раствором азотнокислого натра.
Исследование воды
В зависимости от характера источника водопользования (мелкие или крупные водоемы со стоячей или проточной водой, ручьи, оросительные канавы, пруды, озера, реки) применяются более или менее сложные способы гельминтологического исследования воды.
Исследование воды из оросительных каналов— арыков (Г. Я. Змеев, 1935). В арыке устанавливают большую во-
ронку, имеющую форму конусовидного ведра, без дна; ведро снизу затягивают двумя слоями марли, между которыми находится слой ваты. Такая воронка с фильтром устанавливается так, чтобы текущая вода фильтровалась через марлю и вату. Через сутки осадок с фильтра распределяют по стаканчикам и исследуют по способу Фюллеборна. Небольшие по объему
1
Рис. 81. Фильтровальный прибор с предварительным фильтром для исследования воды на яйца гельминтов.
J —воронка, 2 —колба-приемник, 3— контрольный сосуд, 4 — масляный насос, 5 —место фильтра.
пробы воды можно фильтровать через простую или обеззоленную фильтровальную бумагу; затем фильтры разрезают на кусочки по размеру покровного стекла и после просветления в кедровом или гвоздичном масле микроскопируют. При возможности испытуемую пробу воды центрифугируют: незначительный осадок распределяют на несколько предметных стекол и микроскопируют, большой осадок исследуют по способу Фюллеборна.
Фильтрация через планктонные фильтры. По 3. Г. Васильковой (1941) фильтрацию воды производят в воронке Гольдмана с водоструйным насосом или с ручным насосом Шинца через мембранный крупнопористый (предварительный) фильтр (рис. 81), который затем исследуют под микроскопом во влажном состоянии или после подсушивания на воздухе с последующим просветлением. По 196
этому способу требуется час для фильтрации 10 л речной воды при смене 10—20 фильтров. Этот же метод применяется для гельминтологического исследования сточных вод; при этом за час, в зависимости от объема осадка, фильтруется от 2 до 3 л сточной воды.
При гельминтологическом исследовании текучих и стоячих естественных водоемов (реки, озера, пруды, болота) воду можно фильтровать через ткань с ячейками диаметром не более 0,02—0,03 мм (3. Г. Василькова, 1937). Для взятия проб воды употребляют гидробиологическую планктонную сетку из сатина, в дно которой вставлена
широкая стеклянная или металлическая трубка (рис. 82). На отогнутые наружные края трубки прикрепляют резиновым или металлическим кольцом двойной сатиновый фильтр. Пробы воды берут с глубины 5—20 см. В зависимости от густоты осадка
Рис. 82. Металлическая воронка с сатиновым фильтром для фильтрации воды из стоячих водоемов (налево) и рамка с сатиновым фильтром внутри для фильтрации воды. (По 3. Г. Васильковой, 1955).
влажный фильтр после расправления на стекле сразу же исследуют под микроскопом, а обильный осадок — по способу Фюллеборна с 48%' раствором азотнокислого натра. При исследовании мелких водоемов с проточной водой (ручьи, канавы) сатиновый фильтр вставляют между засетченными сторонами деревянной рамки (рис. 82), которую на определенное время ставят на дно водоема.
Из рассмотренных способов гельминтологического исследования воды наиболее эффективна методика фильтрации воды через мембранные крупнопористые фильтры. При отсутствии фильтровального прибора в практической работе можно применять и другие, менее сложные способы гельминтологического исследования воды.
Обследование предметов бытовой обстановки
Для выяснения степени загрязнения яйцами глистов различных предметов бытовой обстановки (мебель, школьные парты, полы, ручки дверей, игрушки и т. п.) поступают следующим образом. Акварельной кисточкой, смоченной в 10% растворе глицерина, проводят несколько раз по исследуемому предмету, после чего кисточку помещают в пробирку, в которую наливают дистиллированную воду. Тщательно вымытую в этой же воде кисточку просматривают под микроскопом, содержимое же пробирки центрифугируют.
197
Определение жизнеспособности яиц и личинок паразитических червей
Обнаруженные при исследовании яйца паразитических червей могут быть жизнеспособными или мертвыми. Очевидно, что только жизнеспособные яйца глистов имеют практическое значение в эпидемиологии гельминтозов.
Жизнеспособность яиц определяется различными способами. При небольшом навыке живые яйца можно распознать под микроскопом по внешнему виду: оболочка их сохраняет правильные очертания, не имеет складок, прогибов, разрывов, а внутренняя структура видна достаточно отчетливо. При наблюдении зрелых яиц нематод осторожное нагревание предметного стекла вызывает быструю реакцию в виде оживленных движений личинок. Менее подвижными при таком воздействии оказываются зародыши в зрелых эмбриофорах цепней. Естественный дуоденальный сок человека (желчь А) без предварительного воздействия желудочным соком освобождает живых зародышей невооруженного цепня от оболочек в течение 4—8 часов.
Для выяснения жизнеспособности цистицерков вооруженного и невооруженного цепней финок этих паразитов помещают в 80% раствор желчи в физиологическом растворе при температуре 37—38°. Через 5—30 минут у живых паразитов наблюдается самостоятельное выворачивание подвижных сколексов. Еще быстрее это происходит при помещении финок в смесь профильтрованного свиного желудочного сока [(5 мл) с 50% свиной желчью в физиологическом растворе.
Жизнеспособность яиц можно также проверить методом витального окрашивания. Огата (Ogata, 1925) предложил для контроля аска-ридных яиц применять краску Судан III. Оплодотворенные, нормально развивающиеся аскаридные яйца Суданом не окрашиваются, в то время как мертвые яйца и яйца, имеющие морфологические изменения [(перерождение), окрашиваются.
Для определения жизнеспособности онкосфер невооруженного цепня освобождают после искусственного переваривания радиальной оболочки [(эмбриофоры) зародышей 1 и окрашивают их сафранином или бриллиант-крезилблау в разведении 1 :4000. Сафранин окрашивает мертвые зародыши в ярко-красный или интенсивно розовый цвет, при окраске бриллианткрезилблау мертвые зародыши — синие; живые зародыши в обоих случаях остаются бесцветными. Те же краски в разведении 1 :3000 применимы для дифференциации живых и мертвых яиц карликового цепня. Бриллианткрезилблау и сафранин окрашивают при часовом и двухчасовом воздействии мертвые яйца Hymenolepis папа. Пирогалловая кислота также окрашивает мертвые яйца этого паразита, живые же остаются без изменений. Одним из признаков того, что зародыши карликового цепня мертвы, является изменение расположения крючьев; боковые пары их отклоняются от средней пары на угол в 45° и больше, или исчезает симметрично парное расположение крючьев.
Простой способ определения жизнеспособности яиц карликового цепня предложен А. И. Гущиной (1956). Яйца карликового цепня в воде, накрытые покровным стеклом, подвергают охлаждению в течение 5—10 минут при температуре от —5 до —10°. Затем препарат быстро переносят на нагревательный столик микроскопа при температуре от 35 до 40°; при этом в живых яйцах наблюдается оживленное движение онкосферы. В яйцах, не подвергавшихся охлаждению, движение зародышей отсутствует.
1 Подробности даны в работе В. П. Подъяпольской (1948).
198
Живые личинки широкого лентеца стойко окрашиваются в розовый цвет водным раствором нейтральрота (1 : 1000) в течение 10 минут. Прижизненная окраска плероцеркоидов сохраняется 5 суток и не снижает их инвазионной способности (В. Г. Гнездилов и Ф. Ф. Талызин, 1936). Жизнеспособность личинок описторхисов (метацеркариев) определяют по их подвижности при нагревании или путем окрашивания мышц рыбы с метацеркариями розоловой кислотой (0,3:100 мл 70% спирта) в щелочной среде; при этом мертвые метацеркарии и мышечная ткань окрашиваются в розовый цвет, а живые метацеркарии не окрашиваются (А. М. Шумилова, 1954). Инвазионность плероцеркоидов и метацеркариев проверяют заражением подопытных животных. Методика витального окрашивания применима и для личинок нематод. Живые и мертвые аскаридные личинки при легком нажиме на покровное стекло препаровальной иглой легко могут быть выдавлены из зрелых яиц. При температуре 10—12° живые личинки почти неподвижны; нагревание среды до 25—30° вызывает оживленное движение личинок, типичное для взрослых аскарид.
Жизнеспособность личинок можно также проверить методом окрашивания водным раствором краски бриллианткрезилблау в разведении 1 : 10 000. К жидкости, содержащей личинок, на предметном стекле прибавляют в равном объеме указанный раствор краски. Живые личинки не окрашиваются, мертвые же личинки окрашиваются частично или полностью. Хорошие результаты для проверки жизнеспособности яиц нематод и личинок трихинелл дает также применение 1% раствора метиленовой синьки. Например, зрелые яйца остриц окрашиваются этим раствором лишь снаружи, живые же зародыши остаются бесцветными; мертвые же зародыши хорошо прокрашиваются (Э. Р. Геллер, 1934, 1944).
Из других столь же надежных, но менее быстрых методов определения жизнеспособности яиц можно рекомендовать культивирование их при благоприятствующих условиях внешней среды. Особенно этот метод заслуживает внимания для определения жизнеспособности яиц аскариды и власоглава в тех случаях, когда при отсутствии признаков деформации этих яиц появляется сомнение в их жизнеспособности. Приводим примерные сроки развития яиц различных паразитических червей при оптимальных лабораторных условиях.
Аскаридные яйца в жидкости Барбагалло при температуре 28° заканчивают свое развитие через 20 дней, в 1 % растворе формалина при 33° достигают инвазионной стадии спустя 16 дней. При этой же температуре в 1 % растворе соляной кислоты развитие яиц власоглава продолжается 22 дня и затягивается до 54 дней при 22—24°.
Яйца остриц в физиологическом растворе при оптимальной температуре 30° созревают через 5—6 часов. Оптимальная температура для созревания яиц анкилостомид находится в пределах 25—30°; границы же температуры, благоприятствующей развитию, более широки — от 20 до 35°. При комнатной температуре 24—34° рабдитовидные личинки появляются в культурах через сутки и инвазионные личинки наблюдаются в большом числе к концу четвертых суток. Яйца широкого лентеца в проточной воде при 25° заканчивают свое развитие и дают выход 75% корацидиев через шесть дней. Наибольшее число свободных корацидиев (97%) наблюдается при температуре 10—15°, что, впрочем, значительно удлиняет сроки их развития; при 10° корацидии появляются в воде через месяц и при 15° — на 16-й день (И. В. Неуймиш 1952). Яйца фасциолы при температуре около 30° созревают через две недели; вылупление мирацидиев из яиц происходит лишь на свету.
199
о
Свежевыделенные яйца Dicrocoelium lanceatum и Opisthorchis felineus содержат развитых мирацидиев, которые в воде не вылупляются.
При значительном числе зрелых аскаридных яиц, жизнеспособность которых вызывает сомнение, вопрос можно разрешить опытами на мелких лабораторных животных (мыши, крысы, морские свинки, кролики) с последующим вскрытием их на 4—5-й день для подтверждения миграции личинок.
ЛИТЕРАТУРА
Василькова 3. Г. Основы санитарной гельминтологии. Медгиз, М., 1950.
Василькова 3. Г. Методы гельмунтологических исследований. Медгиз, М., 1955. Гущина А. И. К методике определения жизнеспособности яиц карликового цепня.
Лаборат. дело, 3, 1956.
Ионина Н. С. Наблюдения за движением зародыша карликового цепня (Hymenolepis папа) в условиях эксперимента. Тр. Ин-та малярии и мед. паразитол. Нарком-здрава Тадж. ССР, в. 1, 1944.
Н е у й м и н И. В. Влияние факторов внешней среды на развитие яиц лентеца широкого. Чтения пам. Н. А. Холодковского. Изд. АН СССР, 1952.
Павловский Е. Н. Учебник паразитологии человека. Медгиз, Л., 1951.
Павловский Е. Н. (ред.). Животные паразиты и некоторые паразитные болезни человека в Таджикистане. Изд. АН СССР, 1929.
Павловский Е. Н. (ред). Мургабская паразитологическая экспедиция. Изд. АН СССР и Наркомздрава Туркменск. ССР, Л., 1930.
Павловский Е. Н. (ред.). Труды Каракалинской и Кзыл-Атрекской экспедиции 1931 г. Матер, по фауне Туркмении, изд. АН СССР, 1934.
Павловский Е. Н. (ред). Материалы по паразитологии и фауне южного Таджикистана. Тр. Таджике, комплек. экспед., 1932, X, изд. АН СССР. 1935.
Павловский Е. Н. (ред.). Труды паразитологического отдела ВИЭМ, III, Медгиз,. М.—Л., 1938.
Подъяпольская В. П. Определение жизнеспособности онкосфер Taeniarhynchus saginatus. Сб. раб. по гельминтологии (К 40-летию научн. деят. акад. К. И. Скрябина), Сельхозгиз, М., 1948.
Подъяпольская В. П. и Городилова Л. И. Определение жизнеспособности яиц карликового цепня методом окрашивания. Мед. паразитол., 2, 1943.
Подъяпольская В. П. и Капустин В. Ф. Глистные болезни человека. Медгиз, М., 1958.
Правдина О. Л. К методике определения жизнеспособности аскаридных яиц. Мех паразитол., 2, 1950.
Сборник организационно-методических материалов. Малярия, гельминтозы и паразитарные болезни. Медгиз, М., 1955.
Скрябин К- И. Строительство советской гельминтологии. Изд. АН СССР, 1946.
Скрябин К- И. Девастация в борьбе с гельминтозами и другими болезнями человека. Фрунзе, 1947.
Скрябин К. И. (ред.) Труды экспедиции по изучению глистных заболеваний горнорабочих Донецкого бассейна в 1925 г. Харьков, 1928.
Скрябин К. И. (ред.) Работы 35-й союзной гельминтологической экспедиции в Среднюю Азию. Ташкент, 1928.
Шумилова А. М. Экспериментальные исследования по вопросу профилактики описторхоза. Автореф. докт. дисс., М., 1954.
ЧЛЕНИСТОНОГИЕ-ТИП ARTHROPOD А
НАСЕКОМЫЕ-КЛАСС IN SECTA КОМАРЫ —СЕМЕЙСТВО CULICIDAE СБОР МАТЕРИАЛА
Взрослые насекомые
Взрослых комаров можно раздобыть в любое время года. Летом их иногда можно найти в жилье или в помещениях для домашних животных, особенно в темных, укромных углах. Зимою комаров следует искать в подвалах, погребах, конюшнях, коровниках или в природных 200
посадку. У малярийных
Рис. 83. Посадка комаров.
Л— немалярийный комар, Б —малярийный комар.
убежищах — пещерах. При температуре ниже 0° комары находятся в состоянии оцепенения, но при перенесении в теплое помещение большая часть их оживает. Обычно комаров ловят химическими пробирками, В одну пробирку можно поместить 5—8 комаров, разделяя их небольшими ватными тампонами. Чтобы сразу узнать, с какими комарами мы имеем дело, следует обратить внимание на их комаров (т. е. комаров рода Anopheles) части тела — голова с хоботком, грудь и брюшко— располагаются на одной линии; тело комара образует с поверхностью, на которой он сидит, угол в 45—70°. У немалярийных комаров (Culex, Аёйез и др.) тело «горбатое», т. е. голова с хоботком, грудь и брюшко образуют ломаную линию, вследствие чего комар как бы прижимается к поверхности, располагаясь по отношению к ней приблизительно параллельно (рис. 83). При низкой температуре и малярийные комары сидят прижавшись к поверхности стены или потолка.
Более обильный материал можно добыть, собирая комаров в теплое время года под открытым небом, где-либо в лесу или в кустарнике; нападающих комаров накрывают пробиркой. Лов «на добычу» дает только самок. Самцов можно найти в тех же местах (в траве, в кустах, среди прибрежной растительности) и ловить энтомологическим сачком.
Если собранный материал предполагается использовать для определения вида, важно сохранить в целости чешуйки, покрывающие тело насекомого. Комаров, предназначенных для определения, умерщвляют, смачивая ватный тампон хлороформом или серным эфиром так, чтобы эти жидкости не попали на тело комара. Для получения безупречных
в смысле сохранности экземпляров, комаров выводят в лаборатории из личинок и куколок; выведенных комаров накалывают на булавки не ранее, как через сутки после окрыления.
Фазы развития (яйцо, личинка, куколка)
Материал по фазам развития комаров собирают в теплое время года, так как, хотя некоторые (немногие) виды комаров зимуют в фазе личинки, найти их зимою трудно. Комары выплаживаются в разнообразных водоемах со стоячей или слабо текучей водой (пруды, болота, ямы, канавы, лужи, кадки с водой, скопления воды в дуплах деревьев-и пр.). Чаще личинки малярийных комаров могут быть найдены в неглубоких водоемах, богатых водной погруженной растительностью. Для лова личинок пользуются водяным сачком, ковшиком, фотографической ванночкой, эмалированной тарелкой и т. д. Пробы берут с поверхности, поближе к берегу, у скоплений водной растительности. Уже при собирании материала легко узнать, с какими личинками мы имеем дело. Для личинок Anopheles характерно горизонтальное положение у поверхности воды. Личинки немалярийных комаров располагаются под углом; к поверхности, головой книзу. Отличия у куколок выражены слабее.
201
Найти яйца Anopheles труднее. Легче отыскать «лодочки» Culex, т. е. склеенные друг с другом, в числе 100—200, яйца, отложенные одной самкой. Летом они попадаются в кадках с водой, бассейнах, канавах и т. п. Чтобы получить яйца Anopheles, напившихся кровью самок по* мещают в садок из марли или тюля. В садок надо поставить сосуд с водой. Обычно через несколько дней некоторые из самок отклады* вают яйца.
Подробнее о собирании личинок, куколок и взрослых комаров см, в разделе «Противомалярийное обследование водоемов».
ХРАНЕНИЕ И ОБРАБОТКА МАТЕРИАЛА
Взрослые комары
Рис. 84. Садок для комаров: проволочный каркас кубической формы обтянут тюлем или марлей.
талин, чтобы не допустить
Чтобы сохранить комаров живыми, их помещают в садок. Удобны садки в виде проволочного каркаса, обтянутого тюлем (или марлей), на одной из сторон вытянутым в виде рукава (рис. 84). Размеры садков могут быть различны, например 8X^X8 или 12 X 12 X 12 см. Необходимо обеспечить комарам достаточную влажность и питание: в садок ставят чашку с водой и кладут на часовом стекле ватный тампон, обильно смоченный сахарным сиропом. Садок ставят так, чтобы на него не падал прямой солнечный свет. В жаркую погоду садок, хотя бы раз в сутки, смачивают водой.
Для ознакомления с наружным строением и систематикой нужны комары, наколотые на энтомологические булавки. Лучше накалывать только что убитых комаров. При вынужденном сохранении сухих комаров до накалывания, их оставляют в пробирках или раскладывают на вату в коробках. На дно коробки кладут слой ваты, а на вату раскладывают комаров так, чтобы они не налегали друг на друга. Здесь же помещают этикетку с точным указанием места и времени собирания материала. Комаров покрывают листом бумаги, поверх бумаги кладут второй слой ваты с комарами и т. д. По углам коробки насыпают наф-повреждения материала личинками жуков
или другими вредителями. Для защиты от муравьев пробирки или коробки с комарами рекомендуется уложить в плотно закрывающийся ящик. Материал хранят в сухом месте.
Для наколки высохших комаров предварительно размачивают. В кристаллизатор, чашку или тарелку насыпают песок, обильно смачивают его водой, но не до избытка; песок покрывают фильтровальной бумагой, поверх которой на вату раскладывают комаров. Надо иметь в виду, что сухие комары очень хрупки; у них легко обламываются ноги, усики и пр. Комары не должны касаться песка или мокрой бумаги. Чтобы не появилась плесень, на песок наливают 1—2 мл крепкой карболовой кислоты. Чашку покрывают колпаком и оставляют на сутки. Если ‘булавка легко проходит сквозь тело насекомого и части его при этом не ломаются, можно приступить к накалыванию всех экземпляров дан
202
Рис. 85. Комар, наколотый на минуцию.
ной серии. Оставлять комаров во влажной камере надолго не следует.
Для накалывания комаров удобны энтомологические булавки средней толщины — № 1 и 0. Булавку вкалывают в среднеспинку комара (объяснение терминов дано на стр. 205) или в боковую поверхность груди справа (наколка боком). Первый способ более подходит для свежих экземпляров, второй — для высохших, размягченных. Булавку пропускают сквозь тело комара до тех пор, пока насекомое не окажется на границе между верхней и средней третью булавки. Затем энтомологической булавкой расправляют крылья и ноги, чтобы все части комара можно было хорошо рассмотреть. При этих манипуляциях следует соблюдать осторожность, учитывая хрупкость материала.
Лучше накалывать комаров на минуции — очень тонкие короткие булавки. Минуции с комарами накалывают на пластинки, вырезанные из сердцевины высохших стеблей подсолнечника или бузины; стандартный размер пластинок 11 (длина) X 5 (высота) X 2 (ширина) мм. Пластинки в свою очередь укрепляются на толстых энтомологических булавках № 2 или 3 (рис. 85). Удобен следующий прием: мину-цию сперва пропускают через сердцевинную пластинку, а затем прокалывают грудь комара снизу, между основаниями ног, или сбоку, с левой стороны. Вместо сердцевины подсолнечника минуции могут быть укреплены на пластинках из тонкого картона или целлоидиновой ленты (фотопленка, отмытая от светочувствительного слоя). При отсутствии энтомологических булавок их отчасти, по предложению А. И. Лисовой, можно заменить высохшими колючками некоторых растений, например Centaurea iberica, Centaurea solstitialis, Xantium spinosum
(из семейства сложноцветных). Колючку пропускают сквозь пластинку, а затем конец колючки втыкают в грудь комара. Пластинки же могут быть монтированы, в крайнем случае, на обычных канцелярских булавках.
Наколотые комары снабжаются каждый этикеткой из плотной бумаги размером примерно 16X7 мм с указанием места и даты сбора. Этикетку помещают на булавке под комаром. Для хранения наколотых насекомых служат ящики с торфяным или, что много хуже, пробковым дном. Комаров расставляют в ящике не слишком тесно, чтобы удобно было вынимать отдельные экземпляры, не задевая соседних. Для предохранения наколотых насекомых от вредителей в углу ящика накалывают пакетик или марлевый мешочек с нафталином. Оставлять наколотый материал вне ящика, не покрытым, не рекомендуется.
Для ознакомления с деталями наружного строения комаров готовят микроскопические препараты — головы, ног, крыльев. Голову отрезают у свежих или консервированных в спирте комаров. Для обезвоживания голову помещают в 96% спирт на 15—30 минут, затем переносят во вторую порцию 96% спирта примерно на такой же срок; в спирте объекты без вреда могут оставаться длительное время. Далее переносят голову на 15—30 минут в карбол-ксилол для просветления, затем кладут на предметное стекло, удаляют фильтровальной бумагой избыток карбол-ксилола, прибавляют одну-две капли канадского бальзама и покрывают покровным стеклом. Крылья без какой-либо обработки помещают на сухое предметное стекло и покрывают покровным, на углы которого нанесены очень маленькие капельки густого канадского бальзама с таким расчетом, чтобы бальзам не касался крыльев-
203
Фазы развития (яйцо, личинка, куколка)
Собранный при обследовании водоемов материал по комарам может быть весьма разнообразным: яйца, личинки разных стадий, куколки. Отличить малярийных комаров от немалярийных можно по любой из названных форм. Точное определение вида возможно по взрослым комарам и по личинкам последней (четвертой) стадии. Поэтому возникает необходимость сохранить материал в живом виде, чтобы проследить ход метаморфоза и получить нужные формы.
Пробы воды с личинками и куколками помещают в какие-либо сосуды: кристаллизаторы, чашки, стаканы, банки. Сосуды с куколками должны быть помещены в садок или закрыты марлей или ватой, чтобы окрылившиеся комары не улетели. Лучшей средой для личинок является вода того водоема, откуда они взяты, или из других аналогичных водоемов. Из сосудов должны быть удалены животные, поедающие личинок (рыбы, жуки и их личинки, водяные клопы, личинки стрекоз и т. д.). В сосуд добавляют ил и водяные растения из соответствующих водоемов. Искусственным кормом для личинок могут служить, например, растертые в порошок сушеные дафнии или сухие дрожжи. Условием нормального хода превращения является температура около 20—25° (для большинства видов).
НАРУЖНОЕ СТРОЕНИЕ
Отличия малярийных и немалярийных комаров указаны в табл. 9.
Таблица 9
Отличительные признаки малярийных и немалярийных комаров
	Признаки	Anopheles	Немалярийные комары
	Щупики самки	По длине примерно равны хоботку	В несколько раз короче хоботка
	Щупики самца	По длине равны хоботку, с булавовидным утолщением на конце	Обычно длиннее хоботка, без булавовидного утолщения
	Щиток	Равномерно выпуклый,	Трехлопастный, каждая ло-
и <0		щетинки образуют непрерывный ряд	пасть несет ряд щетинок
О	Продольная	Пересекает поперечную	Упирается в поперечную ра-
о 3	жилка крыла r4+5	радиомедиальную	диомедиальную, не пересекая ее
о	Пятна на	У большинства видов	Отсутствуют (у подавляюще-
Q. со	крыльях	имеются	го большинства видов)
CQ	Чешуйки на брюшке	Отсутствуют (за исключением Anopheles pulcher-rimus)	Имеются
	Количество сперматек	Одна	Три
	Посадка	Под углом к поверхности (брюшко приподнято)	Почти параллельно поверхности (брюшко опущено)
	Сифон	Нет	Есть
СО Я S S	Звездчатые (пальмовидные) волоски	Есть	Нет
	Положение в воде (в покое)	Параллельно поверхности	Под углом к поверхности (головой книзу)
204
Продолжение табл. 9
	Признаки	Anopheles	Немалярийные комары
СО	Дыхательные трубки	В виде воронки, с широким раструбом	В виде трубки, узкие или с незначительным расширением
О а	Шипы по бокам брюшных сегментов	Есть	Нет
Взрослые комары
Anopheles maculipennis Mg. — Обыкновенный малярийный комар
Самка. Наколотый на булавку экземпляр рассматривают под бинокуляром при падающем свете (увеличение в 20—30 раз). Объект должен быть сверху хорошо освещен. При отсутствии бинокуляра следует воспользоваться штативной или, в крайнем случае, ручной лупой с увеличением в 15—20 раз. При рассматривании либо держат булавку за нижний конец, либо втыкают ее в пробку или в небольшую торфяную пластинку, обернутую тонкой белой бумагой. Надо помнить о чрезвычайной хрупкости сухих комаров и не касаться их руками или инструментами.
Тело комара (рис. 86), как и всякого насекомого, разделено на три отдела: голову, грудь и брюшко. Границы этих отделов выражены отчетливо.
По бокам головы видны занимающие большую часть ее поверхности сложные фасеточные глаза, хорошо заметные благодаря темной окраске. Между глазами над основанием хоботка виден пучок относительно длинных волосков («хохолок») кремового цвета. Длинный тонкий колющий хоботок характерен для подсемейства кровососущих комаров (Culicinae). По бокам хоботка располагаются парные нижнечелюстные щупики; у комаров рода Anopheles они по длине приблизительно равны хоботку (рис. 87). Над щупиками к голове прикрепляются покрытые волосками многочлениковые усики (сяжки, антенны).
Грудь комара состоит из трех слившихся сегментов: передне-, средне- и заднегруди. Самый крупный из них — среднегрудь. Дорзальная (спинная) поверхность груди почти целиком относится к среднегруди и поэтому называется среднеспинкой. Для Anopheles maculipennis характерно наличие на среднеспинке серовато-коричневой широкой продольной полосы, в то время как боковые части среднеспинки имеют несколько более темную коричневую окраску. У южного подвида Anopheles maculipennis sacharovi (Средняя Азия, Кавказ) среднеспинка одноцветная светло-коричневая. По бокам груди имеются две пары дыхательных отверстий — дыхалец, или стигм; лучше видны передние. При рассматривании груди комара сверху находят щиток, представляющий собою пластинку, ограничивающую среднеспинку сзади. У малярийных комаров задний край щитка образует ровную дугу, усаженную щетинками, составляющими сплошной ряд (рис. 88). К среднегруди причле-няются крылья; их одна пара, что характерно для отряда двукрылых (Diptera), в состав которого входит семейство комаров (Culicidae)< Крыло имеет вид донкой прозрачной пластинки, исчерченной линиями— жилками. Вдоль жилок и по краю крыла располагаются чешуйки. Невооруженным глазом или в слабую лупу можно заметить посреди
205
крыла 4 темных пятна, представляющих собою более густые скопления чешуек. По этому признаку и дано латинское наименование вида (macula — пятно, регига — крыло). У подвида Anopheles maculipennls sacharovi пятна на крыльях выражены слабо. Расположение и названия
Рис. 86. Anopheles maculipennis, самка. (По А. А. Шта-кельбергу).
/ —бедро, 2 —голень, 5 —лапка.
жилок см. на рис. 89. Менее заметны короткие поперечные жилки; жил* кование крыльев отчетливее выступает в проходящем свете. У малярийных комаров последняя из радиальных жилок r4+s (самая короткая продольная жилка, упирающаяся в вершину крыла) пересекает в направлении к основанию крыла радиомедиальную поперечную жилку, 206
Рис. 87. Головы комаров.
А—самка, Б —самец Anopheles-, В —самка, Г —самец Calex. Слабое увеличение. 1 — хоботок, 2—щупики, 3 — усики, 4 — глаз.
что лучше можно рассмотреть под микроскопом (рис. 89, Б). Позади основания крыльев следует найти два небольшие булавовидные образования — жужжальца, рудименты задней пары крыльев; они являются придатками заднегруди. Снизу к груди причленяются 3 пары ног, как у всех насекомых, соответственно трем сегментам груди. Нога состоит из следующих частей, считая от места прикрепления: тазик (короткий,
Рис. 88. Щиток.
Слева — малярийного комара, справа — немалярийного i омара.
утолщенный отдел, непосредственно причленяющийся к груди), вертлуг (короткий, маленький), бедро, голень и пятичлениковая лапка, заканчивающаяся парой коготков (рис. 86).
Рис. 89. Крыло комара.
Л —крыло немалярийного комара, Б —область поперечных жилок немалярийного комара, Б —область поперечных жилок Anopheles. Продольные жилки: с — косчальная (краевая), sc—субкостальная (подкраевая), г —радиальные, т — медиальные, си — кубитальные, ап — анальная. Поперечные жилки: гт — радиомеди а льная, тси — медиокубитальная. Малое увеличение.
Брюшко состоит из 8 явственно различимых сегментов. Хитиновый покров каждого сегмента состоит из двух пластинок — спинной (тергит) и брюшной (стернит), соединенных эластичными перепонками, на которых располагаются брюшные дыхальца, незаметные при данном увеличении. Тергиты и стерниты густо усажены волосками. Чешуйки на брюшке у большинства видов малярийных комаров, в том числе у Anopheles maculipennis, отсутствуют.
Самец. Отыскивают признаки, отличающие самца от самки. Главнейшее отличие — строение усиков, которые покрыты очень густыми длинными волосками (рис. 87). По этому признаку («пушистые» усики у самцов) и невооруженным глазом можно определить пол малярийных и немалярийных комаров любого вида. Щупики самца Anopheles по длине примерно равны хоботку; два последние членика щупиков резко утолщены в виде булавы и густо усажены относительно длинными во-208
лоскамй. Отличием от самки является также строение последних сегментов брюшка (9-го и 10-го), образующих наружные гениталии — гипопигий.
Cutex pip tens L. — Немалярийный комар
Самка. Немалярийных комаров легко отличить от Anopheles по строению щупиков. У самок немалярийных комаров (рис. 90) щупики очень коротки, в 4—7 раз короче хоботка, к основанию которого они
Рис. 90. Culex piplens, самка. (По А. А. Штакельбергу).
прилегают. Усики устроены так же, как и у самки Anopheles, Пятен на крыльях нет; у некоторых видов малярийных комаров также крылья без пятен (см. Anopheles blfurcatus, Anopheles plumbeus); с другой стороны, пятнистость крыльев свойственна и немногим видам немалярийных комаров (Theobaldia annulata, Theobaldia alaskaensis). Последняя радиальная жилка r4+5 (рис. 89) упирается в поперечную радиомедиальную жилку, но не пересекает ее, вопреки тому, что мы видели у Anophe^ les. Задний край щитка, в отличие от Anopheles, трехлопастный (рис. 88)4 Волоски щитка образуют три пучка, соответственно его лопастям.
14 Зак. 3420. Лабораторный практикум медицинской паразитологии
209
Задний конец брюшка закругленный, церки не видны, что является отличительным признаком рода Culex от видов другого рода немаля* рийных комаров — Аёйез (ср. Aedes vexans, Aedes caspius, Aedes pun-ctor). Тергиты и стерниты брюшка у неповрежденных экземпляров сплошь покрыты чешуйками; это характерно для всех родов немалярийных комаров. Окраска же чешуек является видовым признаком. У Culex piptens светлые желтоватые чешуйки образуют перевязи при основании (т. е. в передней части) каждого тергита; остальная часть каждого из тергитов покрыта темными бурыми чешуйками.
Самец. Пол комара распознается даже невооруженным глазом, по усикам, усаженным, как и у самцов других видов, густыми пучками длинных волосков (рис. 87). Щупики, в отличие от Anopheles, длиннее хоботка, причем толщина их на всем протяжении примерно одинакова. В дистальной части щупики покрыты длинными волосками. Гипопигий у Culex относительно небольших размеров (ср. Aedes — стр. 219).
Строение головы и ротового аппарата
Голова самки не малярийного комара (Culex или Aedes). При приготовлении препаратов головы на некоторых из них можно рассмотреть и части колющего аппарата.
При слабом увеличении микроскопа (рис. 91) видны большие сложные глаза. На передней поверхности головы имеется выступ — наличник
Рис. 91. Строение хоботка самки комара.
Л —голова с расщепленным хоботком; Б — окончания колющих частей при сильном увеличении: 7— нижняя губа, 2—верхняя губа, 3 — нижние челюсти, 4 — верхние челюсти, 5 — гипофаринкс, 6 — нижнечелюстные щупики. (По О. Н. Виноградской).
(clypeus), прикрывающий основание хоботка. Усики состоят из 15 члеников. Первый членик очень мал, имеет вид пластинки; второй, так называемый торус, — крупный, шаровидный. Последующие 13 члеников удлиненные, тонкие, цилиндрической формы. У основания каждого из них прикрепляется 4—6 относительно коротких волосков (ср. усики самца, стр. 212). Щупики имеют вид членистых коротких палочковидных образований, располагающихся по бокам основания хоботка. Щупики покрыты чешуйками и короткими волосками.
Хоботок образован нижней губой (labium), имеющей форму желоба, в котором находятся собственно колющие части: пара нижних челюстей (maxillae), пара верхних челюстей (mandibulae), язык (hypopharynx) и верхняя губа (labrum). Не на каждом препарате видны все 210
перечисленные части. Нижняя губа имеет вид широкой темной пластинки, покрытой чешуйками и короткими волосками. На конце ее заметны два тесно сближенных выступа листовидной формы (labellae) с несколько более длинными чувствительными волосками — рудименты нижнегубных щупиков. Колющие части, имеющие вид узких пластинок или игол желтоватого цвета, при ярком освещении поля зрения выделяются нерезко (сузить диафрагму!). Подробно строение колющих частей рассматривают при сильном увеличении (рис. 91, £>). Верхняя губа — непарная, узкая, заостренная пластинка. Челюсти и язык имеют вид игол. Верхние челюсти на концах слегка расширены в виде не-
сколько асимметричной пластинки с острым концом. Нижние челюсти на концах саблевидной формы с зубчиками. Непарный язык, или гипофаринкс, на конце заострен.
При сильном увеличении видно, что глаз состоит из большого количества отдельных фасеток; каждая из них на поверхности покрыта прозрачным выпуклым слоем, играющим роль хрусталика.
Поперечный срез хоботка самки комара. Заливают в парафин целого комара или комара с отрезанным брюшком (при перенесении из жидкости в жидкость не брать за хоботок). Готовят поперечные срезы хоботка в средней его части; толщина их — около 10 ц. По растворении парафина срезы заключают в канадский бальзам без окраски или окрашивают какой-либо из обычных гистологических красок, например гематоксилином и эозином. Рассматривают при сильном увеличении микроскопа.
Рис. 92. Поперечный разрез хоботка самки комара.
/ — нижняя губа, 2 —верхняя губа, 3 — канал верхней губы, 4 — нерв верхней губы, 5 —верхняя челюсть, 6 — нижняя че.иость, 7 —канал гипофаринкса (слюнной проток), 8— гипофаринкс, 9 —нерв нижней губы, 10 — трахеи, 7/ —мышцы. Большое увеличение. (По О. Н. Виноградской).
Основу хоботка (рис. 92) составляет нижняя губа. В толще ее видны перерезанные продольные мышечные пучки, а также трахейные стволы, округлые в поперечном сечении. В дорзальной половине нижней губы видна округлая глубокая вырезка — разрез желобка, в котором помещаются колющие части. Большая часть полости желобка занята верхней губой, образующей почти замкнутую трубку, по которой течет кровь во время кровососания. Под верхней губой расположен язык в виде поперечно вытянутой пластинки с утолщением в центре, пронизанным каналом, по которому стекает слюна. Диаметр этого канала в десятки раз меньше диаметра канала верхней губы. По бокам, между верхней и нижней губой, помещаются челюсти: верхняя в виде тонкой
пластинки и нижняя — с утолщением по внутреннему краю.
Голова самки Anopheles. Отличием самки Anopheles, по сравнению с самкой немалярийного комара, является длина щупиков, примерно равная хоботку (рис. 87). Щупики состоят из пяти члеников; первый мал и нерезко отграничен. Толщина их на всем протяжении почти одинакова. Щупики покрыты чешуйками и короткими волосками. Чешуйки особенно развиты в основной трети щупиков, волоски сгруппированы преимущественно вблизи их вершины. По строению-усиков и ротового аппарата комары Anopheles сходны с немалярийными комарами..
14*
211
Голова самца Anopheles. Наиболее характерно для самца строение усиков (рис. 87). На каждом членике, кроме базального, торуса и последнего членика, располагаются мутовки весьма многочисленных, очень длинных волосков (ср. усики самки, стр. 210). Последние два членика усиков значительно длиннее прочих. Длина щупиков примерно равна длине хоботка. Два последних членика щупиков булавовидно утолщены и покрыты довольно длинными густыми волосками (отличие •от самки Anopheles). Если при приготовлении препарата часть волосков отпадет, видны все же места их прикрепления в виде густо расположенных многочисленных мелких кружков.
Голова самца немалярийного комара. Усики (рис. 87) устроены так же, как и у самца Anopheles. Зато щупики существенно отличны. Они длиннее хоботка и не имеют булавовидного вздутия в дистальной части. У самцов Culex щупики значительно длиннее хоботка и вовсе не утолщены. У самцов Аёйез щупики лишь незначительно превышают длину хоботка; конец третьего членика, четвертый и, особенно, пятый членики щупиков образуют нерезко выраженные отдельные утолщения. Длинные волоски в дистальной половине щупиков самца имеются почти у всех видов комаров.
Anopheles bifurcatusL. — Лесной, или родниковый, малярийный комар
Для ознакомления с отличительными признаками важнейших видов Anopheles рассмотрим наколотые экземпляры под бинокуляром ( X 20— 30) или лупой.
Главным отличительным признаком Anopheles bifurcatus является отсутствие пятен на крыльях, что видно и невооруженным глазом. Посреди среднеспинки проходит широкая серая или желтоватая продольная полоса (отличие от Anopheles maculipennis sacharovi)\ боковые части среднеспинки темно-коричневого цвета. Общая окраска тела относительно светлая — коричневая или сероватая. Ноги бурые. Скопление чешуек в передней части среднеспинки, а также пучок волосков и чешуек между глазами («хохолок») желтоватого или кремового цвета.
Anopheles plumbeus Hal. — Черноногий, или дупловой, малярийный комар
Выплаживается в дуплах деревьев. Отличается небольшой величиной, темной окраской и своеобразной посадкой — тело располагается почти под прямым углом (70—80°) к поверхности. Отсутствие пятен на крыльях сближает его с Anopheles bifurcatus, от которого Anopheles plumbeus отличается следующими признаками: общая окраска тела черная или бурая; ноги черные; продольная полоса на среднеспинке свинцово-серая; боковые части среднеспинки темно-бурые; скопление чешуек в передней части среднеспинки, а также «хохолок» чисто белого цвета.
Anopheles hyrcanus Pall. — Палласов малярийный комар
От рассмотренных видов отличается пестрой окраской крыльев (рис. 93). Помимо темных чешуек, составляющих основной фон крыла, имеются светлые чешуйки, образующие пятна белого или светло-желтого цвета (смотреть на темном фоне!). Проксимальная часть костальной жилки покрыта темными чешуйками; в дистальной ее половине 212
имеются два светлых пятна; одно расположено сразу за серединой переднего края, другое—перед вершиной крыла. Таким образом, на переднем крае крыла находится всего два светлых пятна, не считая бахромки светлых чешуек на вершине крыла. Светлые участки есть и на других жилках, причем рисунок крыла сильно варьирует у многочисленных разновидностей данного вида.
По расположению и окраске чешуек на щупиках Anopheles hyrcanus также отличается от ранее рассмотренных видов. Чешуйки, густо покрывающие щупики, не прилегают к их поверхности, а торчат под углом, благодаря чему щупики, особенно вблизи основания, кажутся толстыми, мохнатыми. Щупики самки Anopheles hyrcanus имеют три узких белых
Рис. 93. Крылья Anopheles.
A —Anopheles hyrcanus, Б —Anopheles superpictus, В —Anopheles pulcherrimus. (По В. Н. Казанцеву).
колечка и белую вершину. Основания передних бедер утолщены. На члениках лапок, особенно задних, при рассмотрении на темном фоне видны узкие белые колечки.
Посадка Anopheles hyrcanus — под большим углом, как Anopheles plumbeus.
Anopheles superpictus Or. — Украшенный малярийный комар
По пестроте крыльев и наличию светлых колечек на щупиках обнаруживает известное сходство с Anopheles hyrcanus, но отличается меньшими размерами и другими признаками. На переднем крае крыла не менее трех светлых пятен, обычно четыре, не считая двух маленьких белых пятен вблизи основания костальной жилки (рис. 93). Щупики
213
самки с двумя белыми колечками и белой вершиной. Чешуйки щупиков не торчащие, а прилегающие, благодаря чему щупики кажутся тонкими, нитевидными. Основания передних бедер не утолщены. Белые колечки на лапках выражены слабо или отсутствуют. Светлая продольная полоса среднеспинки покрыта белыми чешуйками.
Anopheles pulcherrimus Theo. — Белый малярийный комар
Сходен с Anopheles superpictus, отличаясь более яркой окраской с преобладанием белого цвета. Наиболее характерно наличие желто-
Таблица 10
Отличительные признаки важнейших родов немалярийных комаров
Признаки	ASdes	Culex	Theobaldia
Щупики самца	Обычно немного длиннее хоботка, с небольшими утолщениями	Явственно длиннее хоботка, без утолщений	У большинства видов немного длиннее хоботка, с небольшими утолщениями
Дыхальцевые волоски	Отсутствуют		Имеются
Зубчики на коготках самки	Имеются	Отсутствуют	
Церки (самки) (рис. 94)	Явственно выступают (у большинства видов); брюшко кажется заостренным	Не выступают; задний конец брюшка самки «тупой», закругленный	
Пучки волосков на задней поверхности сифона (личинки)	Одна пара (вблизи середины сифона)	Несколько пар	Одна пара (у основания сифона)
Яйцекладка	Яйца откладываются поодиночке, обычно на влажную землю	Яйца откладываются склеенными в виде лодочки, на поверхности воды	
вато-белых чешуек, сплошь покрывающих брюшко и образующих по бокам его сегментов выступающие пучки. У прочих встречающихся в СССР видов Anopheles брюшко покрыто волосками и лишено чешуек (за исключением гипопигия самцов некоторых видов).
Щупики покрыты торчащими чешуйками, как и у Anopheles hyrca-nus. Белые чешуйки покрывают среднеспинку, а также усики в основной их половине. Наличие на переднем крае крыла, по крайней мере, 3—4 белых пятен позволяет сразу отличить Anopheles pulcherrimus от всех рассмотренных видов, кроме Anopheles superplctus, от которого белый малярийный комар отличается наличием чешуек на брюшке, а также окраской ног: задние лапки, начиная с середины 2-го членика, сплошь белые.
Отличия важнейших родов немалярийных комаров указаны в табл. 10д
214
Culex tritaeniorhynchus Gil. — один из переносчиков японского энцефалита
Д	5
Рис. 94. Брюшко самки комара.
A — Aedes punctor, Б—Culex pi pleas, 1 — церки. (По Лангу).
Мелкий темно-коричневый комар, похожий по общему облику на Culex piplens (стр. 209), но отличающийся окраской хоботка и лапок. Темный хоботок имеет светлое кольцо посередине. При основании члеников лапок расположены очень узкие светлые колечки (смотреть на темном фоне!), более отчетливо выраженные на передних лапках, Среднеспинка покрыта очень мелкими одноцветно-темными чешуйками, крылья без пятен. Эти признаки отличают Culex tritaeniorhynchus от тех дальневосточных видов Culex, которые характеризуются наличием светлого кольца на хоботке.
Aedes togoi Theo. — один из переносчиков японского энцефалита
Темный комар средней величины с широкими светлыми кольцами на лапках. Щупики самки темные, с маленьким белым пятном на вершине. Щупики самца немного короче хоботка, с узкими белыми колечками. Среднеспинка в бурых чешуйках, среди которых разбросаны золотистые, образующие нерезко выраженные пятна. Крылья в темных чешуйках. Лапки с кольцами кремового оттенка, каждое из них охватывает 2 членика: вершину одного и основание следующего. Коготки на концах лапок самки с зубчиками (родовой признак, характерный для самок рода Аёйез). Брюшко с расширяющимися по бокам белыми поперечными полосками по переднему краю сегментов.
Aedes vexans Meig. — один из важнейших представителей гнуса — комплекса кровососущих двукрылых насекомых
Комар средней величины с узкими белыми колечками на лапках. Щупики темные, с небольшой примесью светлых чешуек; щупики самца, как у большинства видов АёйеБ, немного длиннее хоботка. Среднеспинка в красновато-бурых или золотистых чешуйках. Крылья темные, без светлых чешуек. Лапки с очень узкими белыми колечками при основании члеников. Коготки самки с зубчиками. Брюшко сверху с поперечными светлыми полосками при основании сегментов, иногда и с продольными светлыми пятнами на темной части тергитов. Задний конец брюшка самки сужен, на конце отчетливо видны два удлиненных выступа — церки (родовой признак, характерный для большинства видов АёйеБ\ у самок комаров других родов церки не видны, рис. 94).
215
Aedes caspius Pall. — один из массовых кровососов, особенно в зонах степи и пустыни (в оазисах)
Относительно светло окрашенный комар средней величины, со светлыми кольцами на лапках (рис. 95). Щупики с большой примесью
Рис. 95. ASdes caspius, самка. (По Н. Г. Олсуфьеву).
светлых чешуек. Окраска чешуек среднеспинки весьма изменчива; у южного подвида Aedes с. caspius среднеспинка желтоватобурая или золотистая, с двумя узкими продольными белыми полосками. Крылья в перемешанных светлых и темных чешуйках. Лапки с белыми кольцами, иногда нерезко отграниченными; каждое охватывает два членика. На брюшке сверху преобладают светлые чешуйки, образующие, в частности, серединную продольную полосу. Церки отчетливо выступают.
Aedes punctor Kir. — один из массовых кровососов в зонах леса и тундры
Темный комар средней величины, без колечек на лапках. Хоботок, щупики, крылья и лапки целиком темные, без светлых чешуек. Окраска среднеспинки варьирует, обычно она покрыта чешуйками бронзово-коричневого цвета, иногда с более темной продольной полосой. Брюшко с белыми пятнами по бокам сегмен-
тов, соединенными поперечной полоской по переднему краю каждого тергита. Церки хорошо выражены.
Aedes (Stegomyia) aegypti L. — Желтолихорадочный комар
Мелкий темный комар с резким белым рисунком (рис. 96). Домовое насекомое — выплаживается в искусственных водоемах в населенных пунктах (черноморское побережье Кавказа; ныне в пределах СССР почти полностью истреблен).
Щупики самки темные у основания, белые у вершины. Щупики самца без длинных волосков, тонкие на всем протяжении, с четырьмя белыми кольцами. Среднеспинка бурая, с характерным рисунком в виде лиры: две изогнутые серебристые полоски по бокам и две менее отчетливые, прямые, светлые продольные полоски ближе к средней линии. Крылья темные. Лапки с резкими белыми кольцами при основании члеников. Брюшко с серебристо-белыми пятнами по бокам сегментов и со светлыми поперечными полосками по переднему краю тер-гитов.
216
Theobaldia annulata Schr., Theobaldia alaskaensis Ludl.
Среди собранных немалярийных комаров иногда попадаются очень крупные экземпляры с темными пятнами на крыльях и светлыми кольцами на лапках. Это комары рода Theobaldia: Theobaldia annulata (преимущественно южный вид) или Theobaldia alaskaensis, распространенный главным образом на севере. Другие виды рода Theobaldia характеризуются иными признаками.
Пятна, образованные скоплениями темных чешуек, находятся в средней части крыла, как и у Anopheles maculipennis. Светлые кольца на лапках расположены при основании члеников. У Theobaldia annulata, кроме того, есть широкое белое кольцо посреди первого членика задних лапок и узкое светлое колечко в вершинной трети каждого бедра. Брюшко со светлыми поперечными полосками при основании тергитов. Задний конец брюшка закругленный, церки не видны (как у Culex).
217
Строение гипопигия самцов
Гипопигий самца Anopheles. Приготовление препарата. Тонкими ножницами отрезают задний конец брюшка примерно на одну четверть его длины, кладут на минуту в 96% спирт, а затем переносят в 10% раствор едкого кали. Продолжительность пребывания в щелочи зависит от температуры и других обстоятельств. Если гипопигий взят от свежего экземпляра, достаточно держать его в едком кали 4—8 часов, если от сухого комара, надо оставить в щелочи на сутки. Далее переносят объект на 10—15 минут в воду, обезвоживают 15—20 минут в двух порциях 96% спирта, просветляют 10—15 минут в карбол-кси-лоле и заключают в канадский бальзам. Препарат нумеруют и такой
Рис. 97. Гипопигий самца:
A — Anopheles maculipennis, Б — ASdes flavescens.
1 — класпеты, 2 — гонококсит, 3— шипы при основании гонококсита, 4 — гоностиль, 5 — вдеа-гус, 6— базальная бородавка, 7—вершинная бородавка.
же номер ставят на этикетке наколотого комара, чтобы знать, какому экземпляру принадлежит данный гипопигий. Препарат рассматривают при среднем или сильном увеличении микроскопа. Удобен объектив Х20 фабрики «Прогресс» или аналогичные объективы других систем.
Гипопигием называется совокупность наружных половых частей (гениталий) насекомого, образованных у комаров придатками девятого и десятого сегментов брюшка. Строение гипопигия самцов сложно и разноообразно у разных видов. Этот признак играет большую роль в систематике. В ряде случаев для точного определения вида комаров (особенно некоторых немалярийных) необходимо исследовать гипопигий самца (рис. 97, Л). Самая крупная часть гипопигия — парные щипцевидные выросты девятого сегмента, состоящие из двух члеников; первый (гонококсит)—широкий, закругленный на конце, второй (гонэ-стиль)—удлиненный, саблевидной формы, причленяется к вершине первого. Гонококсит густо покрыт длинными волосками, а у некоторых видов и чешуйками (Anopheles pulcherrlmus, Anopheles hyrcanus). На гонококсите у основания имеются шипы; их число, строение и расположение характерны для каждого вида. Так, у Anopheles maculipennis, Anopheles hyrcanus и Anopheles plumbeus имеется два простых (одиночных) шипа. У Anopheles bifurcatus три шипа: внутренний — простой, два наружных сильно ветвятся в своей вершинной части. Кроме того, у перечисленных видов каждый гонококсит несет по одному более тон
218
кому шипу у середины внутренней ее поверхности. Anopheles superpic-tus и Anopheles pulcherrimus характеризуются наличием пяти шипов вблизи основания гонококсита.
Таким образом, по числу и строению шипов легко отличить Anopheles btfurcatus от других видов. Для определения прочих видов необходимо обратить внимание на остальные части гипопигия: класпеты и эдеагус. Класпеты расположены между гонококситами и представляют собой короткие парные выросты основной части гонококсита. На вершине класпеты несут шипы (Anopheles maculipennls, Anopheles plum-beus) или прозрачные пластинчатые придатки (Anopheles hyrcanus). Эдеагус — непарный орган, имеющий вид небольшой хитиновой пластинки, продольно ориентированной между основаниями гонококситов. У Anopheles maculipennls эдеагус относительно длинный, узкий, на конце несет венчик узких листовидных придатков; у Anopheles plumbeus эдеагус короче и шире, без придатков. Сходные по числу шипов гонококсита гипопигии Anopheles superpictus и Anopheles pulcherrimus также отличаются строением эдеагуса: у первого он снабжен на конце короткими придатками, у второго придатки отсутствуют.
Гипопигий самца Aedes. Комары рода Aedes, обычно составляющие основную массу комаров, нападающих под открытым небом, в ряде случаев не могут быть точно определены по самкам. Особое значение имеет исследование гипопигия, который представляет исключительное разнообразие у многочисленных видов этого рода.
Гипопигий у Aedes (рис. 97,5) крупный; гонококсит массивный, покрыт длинными волосками; гоностиль узкий, несет на конце шиповидный придаток. Гонококсит имеет на внутренней стороне два выступа— бородавки: базальная расположена у основания, вершинная — близ вершины. У некоторых видов одна или обе бородавки могут отсутствовать. Гонококсит у большинства видов несет шипы (1, 2 или 3), отличающиеся от соседних волосков более значительной толщиной и определенным положением. Шипы располагаются на базальной бородавке или непосредственно на поверхности гонококсита. Класпеты у Aedes, как правило, состоят из удлиненного цилиндрического стволика и крыла с прозрачным пластинчатым расширением. Форма крыла характерна для каждого вида.
Фазы развития (яйцо, личинка, куколка)
Яйцо Anopheles maculipennls
С наибольшей достоверностью принадлежность комара к определенному подвиду Anopheles maculipennis может быть определена по окраске и строению яйца (рис. 98). Для получения индивидуальных яйцекладок берут стаканы или небольшие баночки, наливают воду примерно до одной трети объема; на воду бросают кусок листа какого-нибудь растения и опускают в стакан палочку такой длины, чтобы она торчала из воды. Стакан покрывают марлей. В заготовленные таким образом сосуды опускают по одной самке, выбирая напившихся кровью или имеющих желтоватое полное брюшко. Марлю обвязывают резинкой или ниткой. Вместо чайных стаканов можно взять малые стаканчики или широкие короткие пробирки. Комары могут класть яйца и на влажную вату или фильтровальную бумагу. Ежедневно проверяют, не отложены ли яйца. Отдельное яйцо менее миллиметра длиной, но благодаря темной пепельной окраске выделяется на поверхности воды и может быть замечено невооруженным глазом. Комар откладывает за один
219
раз от 80 до 400 яиц, не склеенных друг с другом (ср. яйца Culex), но при сближении образующих характерные фигуры: ленты, звездочки, треугольники и т. д. При встряхивании сосуда с яйцами фигуры распадаются, но затем формируются вновь, в ином порядке.
Отложенные яйца помещают в часовое стекло с водой и рассматривают их в бинокуляр (Х40—60) или при слабом увеличении микроскопа. Форма яйца удлиненная; концы сужены. Край верхней поверхности яйца окаймлен тонкой, прозрачной, заполненной воздухом
Рис. 98. Яйца подвидов Anopheles macultpennis.
a — Anopheles macultpennis melanoon, б, в—Anopheles maculipennis теччепе, г, д — Anopheles maculipennis maculipennis, e, ж — Anopheles maculipennis atroparvus, з—Anopheles maculipennis sacharovi. (По А. А. Штакельбергу).
оторочкой, расширяющейся по бокам в виде двух поплавков или воздушных камер, способствующих удержанию яйца в определенном положении на поверхности воды. Поплавки пересечены ребристыми выступами; перепонка между ними может быть гладкой или морщинистой, исчерченной. Окраску яйца рассматривают при падающем свете. Она зависит от особенностей строения экзохориона, т. е. наружного слоя скорлупы яйца. Экзохорион верхней поверхности яйца состоит из множества мельчайших столбиков различной высоты. Участки, где эти столбики ниже и мельче, выделяются в виде темных пятен или полос.
Отличия яиц встречающихся в СССР пяти подвидов Anopheles macultpennis заключаются в следующем (рис. 98). У Anopheles maculipennis sacharovi воздушные камеры отсутствуют или рудиментарны, едва заметны. Верхняя поверхность яйца одноцветная, серебристопепельная, без темных пятен и полос. Яйца остальных четырех подвидов имеют хорошо развитые воздушные камеры; верхняя сторона яйца с темным рисунком. Характерной его частью являются темные поперечные полоски на уровне концов воздушных камер; они имеются у Апо* 220
pheles maculipennis messeae и Anopheles maculipennis maculipennis (t у picas'}, но у первого между нерезко обозначенными поперечными полосками, т. е. в средней трети яйца, хорошо выражены темные пятна, в то время как у второго между отчетливо выраженными поперечными полосками пятен нет (изредка одно-два пятна). У Anopheles atroparvus поперечных полос на уровне концов воздушных камер нет. Поверхность яйца покрыта темными пятнами, идущими от краев и суживающимися по направлению к центру. У встречающегося на Кавказе Anopheles maculipennis subalplnus (melanoon) яйца либо сплошь темные, без рисунка, либо на ярком белом фоне имеется контрастный рисунок из темных пятен, в средней части яйца, и поперечных полосок на уровне концов воздушных камер.
Указанные признаки наилучше различимы на свежем (т. е. неконсервированном) материале. При необходимости сохранить материал нз длительное время яйца консервируют 2% формалином.
Яйца Culex
6
6
Рис. 99. Яйца Culex.
я —„лодочка" из склеенных яиц сверху, <5 —то же сбоку (слабое увеличение), в — яйцо сбоку (большое увеличение). (По Е. Н. Павловскому).
широкий и тупой, другой — более
Ш'МШ
В отличие от Anopheles, у Culex яйца, отложенные за один раз одним комаром в количестве 60—300 штук, склеены друг с другом наподобие лодочки (рис. 99), плавающей на поверхности воды и хорошо заметной простым глазом. Под бинокуляром или в лупу можно различить и отдельные яйца. При рассмотрении сверху обнаруживается мелкоячеистое строение, так как мы видим только обращенные кверху концы яиц; в лодочке яйца ориентированы в общем вертикально.
Отделив препаровальной иглой несколько яиц, поместим их в каплю воды на предметном стекле и расмотрим под микроскопом. Отдельное яйцо имеет удлиненную форму, с округленными концами; один — более узкий. При нормальном положении на поверхности воды расширенный конец обращен книзу, чем и обусловливается форма лодочки с выпуклой нижней стороной и вогнутой верхней. На нижнем конце яйца имеется крышечка. Для длительного хранения лодочки можно консервировать в 70° спирте.
Комары Aedes откладывают яйца поодиночке, как Anopheles, но в большинстве случаев не в воду, а на землю по краям водоемов.
Личинка Anopheles maculipennis IV стадии
Препарат (рис. 100) рассматривается под микроскопом. Тело личинки разделяется на голову, грудь и брюшко. Голова резко отграничена; граница груди брюшка менее отчетлива. Тело покрыто волосками, особенно длинными на груди, на передних сегментах брюшка и на заднем его конце.
Голова имеет округло-квадратную форму; передняя ее часть по форме напоминает широкий усеченный конус. Хорошо видны сложные (фасеточные) глаза. У переднего края головы по бокахМ располагаются
221
несет пару расходящихся
палочковидные усики (антенны). Ротовой аппарат находится на брюшной стороне; он лучше виден, если личинка лежит брюшной стороной кверху. Основными частями ротового аппарата являются верхняя губа, две пары челюстей и нижняя губа (рис. 101). Верхняя губа по бокам веером пучков чрезвычайно густых тонких волосков — щетки или «веера»; их движения создают токи воды, направляющие ко рту взвешенные в воде частицы. Щетки могут распрямляться и складываться, в последнем случае они не выступают за контур головы, а просвечивают сквозь ее хитиновые покровы в виде двух темных пятен. Верхние челюсти — овальные пластинки с шипами и крепкими темными зубцами, играющими роль в соскабливании пищевых частиц с поверхности подводных предметов — стеблей растений и т. п. Нижние челюсти, снабженные короткими щупиками, по внутреннему краю усажены многочисленными густыми волосками разнообразного строения, играющими роль фильтра; взвешенные в воде пищевые частицы подходящего размера задерживаются и проглатываются. Нижняя губа имеет сложное строение; наиболее заметной ее частью является темная треугольная пластинка, зазубренная на вершине.
Голова личинки усажена волосками; их расположение и строение имеют большое значение для систематики. Некоторые волоски трудно рассмотреть при слабом увеличении микроскопа. Применять сильное увеличение не всегда можно из-за толщины препарата. Здесь пригодится объектив средней силы (X 20 и т. п.). На переднем крае конусовидного выступа головы находится наличник, здесь расположены две пары клипеальных или наличниковых волосков (рис. 102); наружные — в виде разветвленных кустиков; тесно сближенные внутренние — простые или слабо ветвятся только в вершинной части. Если личинка зафиксирована с расправленными щетками, наружные клипеальные волоски могут быть плохо видны. Антеннальные волоски рас-каждом усике в его проксимальной трети; из 3—5 веточек; длина его не превышает
четверти длины усика. Лобных (фронтальных) волосков шесть. Они образуют ряд, идущий поперек дорзальной поверхности головы на уровне переднего края глаза, чуть позади воображаемой линии, соединяющей основания усиков; каждый волосок имеет перистое строение, т. е. стержень волоска усажен с обеих сторон боковыми веточками.
Грудь, состоящая из трех слившихся сегментов, шире головы и брюшка. По бокам грудных сегментов сквозь кожный покров просве-222
Рис. 100. Личинка Anopheles со спинной стороны. Малое увеличение. (По А. С. Мончад-скому).
а — голова, б — грудь, в — брюшко. Римскими цифрами обозначены сегменты брюшка.
полагаются по одному на каждый волосок состоит
чивают компактные клеточные массы — имагинальные диски, из которых образуются крылья и ноги насекомого.
Брюшко состоит из 9 сегментов. На спинной поверхности каждого сегмента, с третьего по седьмой, располагается пара звездчатых или пальмовидных волосков (рис. 102,В); каждый состоит из 14—24 удлиненных, постепенно суживающихся к вершине листочков, расположенных веерообразно в виде розетки. На спинной стороне предпоследнего
Рис. 101. Ротовые части личинки Anopheles.
А —верхняя губа, Б — верхняя челюсть, В — нижняя челюсть, Г—нижняя губа. Большое увеличение. (По Н. К. Шипициной).
сегмента находятся парные дыхательные отверстия, стигмы, ведущие в органы дыхания (трахеи) личинки. Видны и главные трахейные стволы, просвечивающие сквозь покровы в форме пары широких продольных трубок.
В связи со стигмами находятся особые образования, составляющие так называемый стигмальный аппарат (рис. 102,5); строение его играет большую роль в систематике. Главная его часть — стигмальная пластинка — тянется от уровня стигм назад; пластинка, особенно по краям, окрашена несколько темнее поверхности брюшка. Передняя часть стигмальной пластинки сужена и имеет треугольную форму, В переднем углу этого треугольника, по средней линии пластинки, на очень небольшом протяжении видна продольная темная полоса — деталь,
223
имеющая значение при определении вида личинки. Между стиг-мальной пластинкой и стигмами остается отчетливо выраженный просвет. Впереди стигм располагается передняя лопасть стигмальной пластинки в виде полукруга, выпуклый край его обычно обращен вперед. Хорошо видна только более темная задняя часть лопасти. При боковом положении личинки стигмальный аппарат не виден, а при рассматривании личинки с вентральной стороны он неясно просвечивает сквозь толщу брюшка.
По бокам предпоследнего сегмента располагаются гребни, по одному с каждой стороны. Гребень состоит из ряда тесно сближенных зубцов различных размеров; крупные чередуются с более многочисленными мелкими. Гребень хорошо виден при боковом положении личинки.
Рис. 102. Части тела личинки Anopheles maculipennis:
А — наличник, Б — стигмальная пластинка, В —звездчатый волосок. Большое увеличение.
(По А. С. Мончадскому).
На последнем (анальном) сегменте брюшка имеется плавник из расходящихся веером разветвленных волосков. На конце тела видны четыре удлиненных прозрачных придатка — анальные жабры (сузить диафрагму!).
В груди и брюшке личинки может быть видна идущая вдоль средней линии тела темная широкая полоса или отдельные темные пятна; это пища, заполняющая кишечник. Нередко даже при хорошем просветлении препарата личинка обличается темным цветом, что зависит от наличия пигмента в просвечивающем сквозь кожные покровы жировом теле. Прижизненная окраска личинок данного вида варьирует в широких пределах в зависимости от внешних условий; встречаются различные оттенки черного, коричневого и зеленого цвета; иногда на темном фоне спинной поверхности личинки видны светлые пятна.
Личинки Anopheles maculipennis I, II, III, IV стадий для демонстрации хода развития личинки
Личиночная фаза развития комаров слагается из четырех стадий (иногда называемых возрастами), разграниченных линьками. При четвертой линьке личинка превращается в куколку. В летнее время при обследовании водоемов, заселенных личинками Anopheles, обычно
224
одновременно попадаются личинки разных стадий. Легко собрать материал, в котором были бы личинки различной величины, начиная от самых мелких и кончая крупными, близкими к окукливанию. Распределить этот материал по стадиям — задача, которая имеет практическое значение при энтомологическом контроле противоличиночных мероприятий. Это может быть сделано невооруженным глазом или при помощи слабой лупы.
Отличительным признаком стадий ширина головы. Длина тела личинки время как ширина головы в промежутках между линьками остается почти неизменной, а во время линьки сразу резко увеличивается (рис. 103). Из доставленного материала выбирают личинок с примерно одинаковой шириной головы, отсаживая их широкой пипеткой в отдельные сосуды. В конце концов все личинки распределяются на 4 группы, соответственно четырем стадиям, если все они представлены в добытом материале. Первое время возможны, конечно, неточности и сомнительные случаи. Но при некотором навыке можно почти безошибочно определить стадии головы.
Для
комления особенностями каждой стадии следует заготовлять микроско-
является величина, в частности увеличивается
постепенно, в то
невооруженным глазом личинки по величине
более детального озна-с отличительными
/И
Рис. 103. Возрастные изменения головы л> чинки Anopheles. Слева — начало стадии (без воротничка), справа — конец стадии (с воротничком). Малое увеличение. (По Ю. Г. Митрофановой).
пические препараты личинок всех стадий, на одном предметном стекле.
Первая стадия, помимо очень малого размера, отли-
чается рядом существенных
признаков. Так, плавник у личинок первой стадии отсутствует; вместо него на конце анального сегмента торчат четыре простых (нераз-ветвленных) длинных волоска. У личинок II—IV стадий плавник есть, причем с каждой стадией возрастает сложность составляющих его пучков волосков; волоски плавника личинки II стадии ветвятся 1—3 раза, у личинки III стадии 5—7 — раздельные волоски; волоски плавника личинки IV стадии ветвятся еще сильнее.
У личинки I стадии звездчатые волоски отсутствуют, но имеются только ей свойственные волоски в виде прозрачной узкой листовидной пластинки; они располагаются на 2—3-ем сегментах груди и на 2—7-ом сегментах брюшка.
У личинок I стадии все волоски простые, за исключением так называемых субантеннальных волосков, помещающихся кнаружи от основания усика. Наружные клипеальные волоски также, в отличие от
15 Зак. 3420. Лабораторный практикуем медицинской паразитологии
225
последующих стадий, не разветвлены. Внутренние клипеальные волоски раздвинуты, расстояние между ними больше, чем расстояние между внутренним и наружным волосками одной стороны. С каждой линькой внутренние клипеальные волоски как бы приближаются друг к другу.
У личинок первых двух стадий глаза простые. Сложные (фасеточные) глаза появляются только в III или IV стадии. Близкие к окукливанию личинки IV стадии отличаются значительной шириной груди, что зависит от развития имагинальных дисков.
Личинки малярийных комаров других видов в отношении ряда признаков представляют некоторые отличия, но способ определения стадии личинки по ширине головы применим к любому виду Anopheles.
Личинка Culex (IV стадия)
Личинок этого комара (рис. 104) летом и осенью легко найти в кадках с водой, ямах, канавах, бассейнах и тому подобных водоемах вблизи жилья.
При рассмотрении невооруженным глазом или в лупу можно видеть так называемый сифон — дыхательную трубку, отходящую косо
под углом от предпоследнего сегмента брюшка, благодаря чему задний конец личинки кажется как бы раздвоенным. Наличие сифона позволяет легко отличать личинок немалярийных комаров всех видов от лишенных сифона личинок Anopheles. Прочие особенности строения личинки Culex рассмотрим под микроскопом.
Форма головы несколько иная, чем у Anopheles', обычно она поперечно-овальная: ширина больше длины. Звездчатые волоски брюшка отсутствуют, как и у личинок всех немалярийных комаров. На предпоследнем сегменте брюшка видны щетки (парные образования), состоящие из многочисленных чешуевидных зубцов, расположенных в несколько рядов. Стигмы находятся на вершине сифона и сбоку не видны. Удается заметить идущие от стигм вдоль сифона два трахейных ствола; можно проследить и их продолжение в теле личинки. Хорошо видна густая поперечная (точнее спиральная) исчерченность трахей. В проксимальной трети сифона располагается два ряда зубцов, образующих гребень сифона. В срединной и дистальной третях сифона на его вентральной поверхности находится несколько пар пучков волосков. Если волоски отломаны, видны места их прикрепления в виде небольших кружков. На последнем сег-
Рис. 104. Личинка Culex.
/ — боковые лопасти верхней губы („веера"), 2—щетка, 3 — плавник, 4 — трахея, 5 — сифон, 6 — анальные жабры. Малое увеличение.
менте находятся плавник и довольно длинные, суженные к вершине анальные жабры.
Личинка Anopheles bifurcatus (IV стадия)
Мы укажем здесь только те признаки, которые имеют существенное значение при определении вида.
Внутренние клипеальные волоски сближены (рис. 105). Наружные клипеальные волоски, в отличие от Anopheles maculipennis, простые» 226
иногда лишь в вершинной части имеется несколько боковых веточе Стигмальная пластинка не касается стигм. По ее средней линии тянете интенсивно хитинизированная темная полоса, состоящая в средней
Рис. 105. Наличник и стигмальная пластинка личинки Anopheles bifurcatus. Большое увеличение. (По А. С. Мончадскому).
задней третях пластинки из резко очерченных ячеек. Передняя лопает стигмальной пластинки, в отличие от Anopheles maculipennis, интев сивно хитинизирована на всем протяжении.
Личинка Anopheles plumbeus (IV стадия)
Личинки обитают в скоплениях воды в дуплах деревьев. Добыты личинок переносят в чистую воду, а затем уже консервируют в спирт;
Рис. 106. Голова и стигмальная пластинка личинки Anopheles plumbeus. Большое увеличение. (По А. С. Мончадскому).
Лобные волоски (в отличие от прочих, встречающихся в СССР bi дов Anopheles) простые (неразветвленные), очень мелкие, видны лиш при среднем или сильном увеличении. Наружные и внутренние кл! пеальные волоски слабо ветвятся в дистальной части, иногда простьк
15*	2S
наружные вдвое короче внутренних (рис. 106). Весьма характерны длинные перистые волоски по бокам передних сегментов брюшка. Стиг-мальная пластинка соприкасается со стигмами; вдоль средней линии опа занята хитинизированными ячейками.
Личинка Anopheles hyrcanus (IV стадия)
По строению клипеальных волосков почти неотличима от личинки Anopheles maculipennls — наружные клипеальные волоски многократно ветвятся. Зато характерны строение и расположение антеннальных волосков (рис. 107); они относительно велики, длина волоска составляет
В
Рис. 107. Усики и стигмальная пластинка личинок:
A —Anopheles maculipennls, Б —Anopheles hyrcanus, В — стигмальная пластинка Anopheles hyrcanus. Большое увеличение. (По А. С. Мончадскому).
около половины длины усика. Каждый антеннальный волосок имеет до 10 ответвлений и располагается примерно посередине усика (ср. Anopheles maculipennls, стр’ 222).
Строение стигмального аппарата весьма сходно с таковым у Anopheles maculipennls. Отличие заключается в том, что темная хитинпзи-рованная линия проходит на всем протяжении треугольной части стиг-мальной пластинки, а у Anopheles maculipennls — лишь у переднего ее конца.
Личинка Anopheles superpictus (IV стадия)
Внутренние клипеальные волоски удалены друг от друга: расстояние между ними больше, чем между внутренним и наружным клипе-альным волоском каждой стороны (рис. 108). Как наружные, так и внутренние клипеальные волоски простые. Лепестки звездчатых волосков в вершинной половине вытянуты в виде длинных заостренных ни-228
A
Рис. 108. Личинка Anopheles superpictus.
А —наличник, Б —звездчатый волосок, В — стигмальная пластинка. Большое увеличение. (По А. С. Мон-чадскому).
Рис. 109. Наличник (Л) и стигмальная пластинка (Б) личинки Anopheles pulcherrlmus. Большое увеличение. (По А. С. Мончадскому).
тей. Стигмы посредством хитинизированного выступа соприкасаются со стигмальной пластинкой.
Взрослая личинка IV стадии Anopheles superpictus по размеру меньше, нежели у обыкновенного, лесного или палласова малярийного комара,
Личинка Anopheles pulcherrimus (IV стадия)
Внутренние клипеальные волоски удалены друг от друга, простые; наружные разветвлены (рис. 109). Стигмальная пластинка непосредственно соприкасается со стигмами. В средней ее части довольно отчетливо выражен светлый, удлиненно-овальный участок — «медальон», отсутствующий у личинки Anopheles superpictus. Звездчатые волоски — как у Anopheles superpictus.
Личинка Aedes (IV стадия)
Личинок Аёйев весной или в начале лета легко найти в небольших временных лесных или луговых водоемах. Готовят тотальные препа-
Рис. ПО. Задний конец брюшка личинок комаров.	]
A — Aedes рч actor» Б—Culex tritaeaioryachas, B — Theobaldia alaskaensis. Большое увеличение.1 (По А. С. Мончадскому).	<
раты личинок или отрезают для приготовления препарата только п лову и заднюю часть брюшка с сифоном.
230
У личинок Aedes всех видов на брюшной стороне сифона имеется только одна пара пучков волосков, расположенная у середины или ближе к вершине сифона (рис. НО, Д); у Culex — несколько пар пучков сифональных волосков (см. стр. 226). Гребень сифона образован многочисленными, относительно крупными зубцами. Длина сифона превышает его ширину, измеренную у основания (так называемый сифо-нальный индекс), примерно в 2—3,5 раза (у Culex в 4—7 раз). В отношении прочих признаков личинки разных видов Aedes обнаруживают большое разнообразие.
Личинка Theobaldia (IV стадия)
Важнейшим отличительным признаком является расположение сифонального пучка волосков: имеется только одна пара пучков, как и у Aedes, но расположены эти пучки не по середине сифона, а у его основания (рис. 110, В).
Куколка малярийного комара
Готовят обычные микроскопические препараты; вследствие значительной толщины препарата пользоваться сильным увеличением не следует. Форму тела куколки (рис. 111) обычно сравнивают с запятой.
Рис. 111. Куколка.
А — Anopheles. Дыхательные трубки: Б — Anopheles, Б — Culex.
Тело состоит из двух отделов. Передний, яйцевидной формы, соответствует голове и груди насекомого; задний, суженый и членистый, отдел соответствует брюшку. В естественном положении брюшко изогнуто; при фиксации оно может выпрямиться.
На спинной стороне переднего отдела куколки расположены парные дыхательные «рожки», через которые воздух попадает в трахейную систему куколки. «Рожок» имеет форму воронки — узкое основание и широкий раструб. На боковой поверхности средних сегментов брюшка, обычно с третьего по седьмой, расположены шипы, по одному с каждой стороны сегмента. На конце брюшка имеется пара прозрачных овальных хвостовых плавников.
У куколок, близких к окрылению (они отличаются более темным цветом), сквозь покровы можно видеть формирующиеся части взрослого насекомого: глаза, хоботок, усики, крылья, ноги.
231
Куколка немалярийного комара
Отличается от Anopheles отсутствием шипов по бокам сегментов брюшка и формой дыхательных «рожков»: они имеют вид не воронки, а довольно длинной трубки и заканчиваются не широким раструбом, а относительно небольшим отверстием (рис. 111).
ВНУТРЕННЯЯ АНАТОМИЯ ВЗРОСЛЫХ КОМАРОВ
Препаровка
Основным методом изучения внутренней анатомии является вскрытие комаров и препаровка отдельных органов. Важным дополнительным методом служит ознакомление с расположением и строением органов на срезах.
Прежде чем приступить к препаровке, целесообразно ознакомиться по схеме с общим расположением внутренних органов комара (рис. 112).
16
Рис. 112. Схема внутреннего строения комара.
1 — надглоточный ганглий, 2 —глотка, 3 — подглоточный ганглий, 4 — слюнный проток, 5—слюнные железы, 6 — грудные ганглии, 7 — зоб, 8 — брюшные ганглии, Р —задняя часть желудка, 10— пилорическая камера, 11 — ректум (прямая кишка), 72 —кишечник, 13 — мальпигиевы сосуды, 14 — сердце, 75 —передняя часть желудка, 16 — аорта, 17 — преджелудок, 18— пищевод.
В самых общих чертах оно таково. Пищеварительный канал состоит из ротовой полости, глотки (в голове), пищевода (переходит из головы в грудь), преджелудка, желудка (в груди и брюшке) и слегка извитого кишечника. Кроме того, к пищеварительной системе относятся слюнные железы, а также отходящий от заднего конца пищевода зоб (помещается вентральнее желудка) и два небольших дорзальных придатка пищевода. Органы выделения представлены пятью мальпигиевыми сосудами, впадающими в кишечник. Кровеносная система — сердце и аорта — расположены выше пищеварительного канала. В состав нервной системы входят 2 головных ганглия (надглоточный и подглоточный), 3 грудных и 6 брюшных. Все они, кроме надглоточного, находятся на брюшной стороне. Органы дыхания — трахеи — начинаются от стигм (2 пары грудных и 6 пар брюшных) крупными стволами, дающими множество ответвлений. Половые железы — яичники или семенники— располагаются в брюшке. Главная масса мускулатуры сконцентрирована в груди. В промежутках между органами лежат дольки жирового тела, а свободные пространства заполнены гемолимфой.
Для препаровки нужны живые комары; консервированный материал для вскрытия не годится. Приступая к препаровке, следует зара-232
нее приготовить все необходимое, а именно: микроскоп и бинокуляр (отчасти может быть заменен препаровальной лупой); пинцет и ножницы (глазные), пипетку; препаровальные иглы (остро отточенные); хлороформ или серный эфир, спирт 96°; физиологический раствор (хлористый натрий 0,75%); предметные и покровные стекла, солонку или часовое стекло; пробку, вату, фильтровальную бумагу.
Комаров, предназначенных для вскрытия, оглушают эфиром или хлороформом, капнув несколько капель жидкости на вату, которой закрыта пробирка с комарами. Ножницами отрезают у комара крылья и ноги у основания. Захватив пинцетом за хоботок комара погружают на несколько секунд в 96° спирт, в результате чего хитиновый покров приобретает способность смачиваться водой или физиологическим раствором. Коснувшись комара фильтровальной бумагой, удаляют избыток спирта и переносят насекомое на предметное стекло в каплю физиологического раствора; при отсутствии последнего можно обойтись обыкновенной (не дистиллированной) водой.
Существует несколько приемов препаровки; опишем один из них. Грудь комара препаровальными иглами рассекается поперек; передняя часть ее, содержащая слюнные железы, остается в соединении с головой, задняя часть — с брюшком. Передняя половина комара переносится на другое предметное стекло в каплю физиологического раствора.
Дальнейшие процедуры производятся под контролем бинокуляра или препаровальной лупы, при увеличении в 15—20 раз, на темном фоне. Надрывают иглой хитиновый покров брюшка между вторым и третьим сегментами, считая сзади. Одну иглу втыкают в грудь, другой придерживают задний конец брюшка. Осторожными движениями постепенно раздвигают иглы; покровы брюшка снимаются как футляр,
освобождая желудок, кишечник, мальпигиевы сосуды и органы размножения, остающиеся в соединении с последними сегментами брюшка. Желудок имеет вид беловатого удлиненного мешка (рис. 113). Сзади к нему примыкают пять извитых ярко-белых нитей — мальпигиевы сосуды. Между ними виден более широкий прозрачный кишечник, обычно
Рис. 113. Внутренние органы самки комара.
7 — глотка, 2—пищевод, 3 — придаток пищевода, 4— передняя часть желудка, 5 — задняя часть желудка, 6 — мальпигиевы сосуды, 7 —яичник, 8 — ректум (прямая кишка), 9 — кишечник, 10— трахея, 77 —зоб, 72—слюнные железы.
233
обнаруживающий перистальтические движения. По бокам лежат органы размножения; у самки — пара яичников, величина которых различна в зависимости от стадии созревания яиц. Перед яйцекладкой яичники достигают значительных размеров; заключающиеся в них многочисленные яйца видны невооруженным глазом. Если яичники велики, удаляют их иглами и переносят на другое предметное стекло. Осторожно расщепляют последние сегменты брюшка, чтобы рассмотреть содержащиеся в них органы. Затем покрывают препарат покровным стеклом. Капля физиологического раствора должна быть не слишком малой, чтобы желудок не был раздавлен покровным стеклом.
Для ознакомления со строением внутренних половых органов вскрывают комара описанным способом, удаляют желудок и прилегающую к нему часть кишечника с мальпигиевыми сосудами, расщепляют последние сегменты брюшка и покрывают препарат покровным стеклом.
Слюнные железы находятся в передней половине груди, удаленной вместе с головой. Под контролем бинокуляра или лупы одной иглой придерживают грудь, а другой легкими движениями оттягивают голову; вместе с ней обычно выходит пищевод с его отростками, преджелудок, передняя часть зоба и слюнные железы. Все эти органы имеют вид беловатого комочка; его осторожно отделяют от головы. Голову и остаток груди удаляют, препарат покрывают покровным стеклом.
Другой способ препаровки слюнных желез заключается в следующем. Отрезают у комара крылья и ноги, погружают его в спирт и переносят на предметное стекло в каплю физиологического раствора. Затем удаляют иглами голову; иглой, ориентированной плашмя, слегка надавливают боковую поверхность груди от середины к переднему ее краю. Из отверстия выступает беловатый комок органов, в котором обычно содержатся и слюнные железы. Осторожно выделяют их препаровальными иглами под контролем бинокуляра; необходимо увеличение около 60—80, иначе приходится действовать «на ощупь». Удалив лишние части, покрывают препарат покровным стеклом. Приготовив, в процессе вскрытия комара, указанные препараты (желудок и кишечник, яичники, слюнные железы), рассматривают их под микроскопом.
Желудок, кишечник, мальпигиевы сосуды (рис. 113). Стенка желудка состоит из однослойного эпителия, оплетенного снаружи густой сетью мышечных пучков. При сильном увеличении и на неокрашенном препарате различимы границы клеток, их ядра. К желудку подходят многочисленные разветвления трахей, имеющих вид тонких, поперечно исчерченных трубок различного калибра. Стенка кишечника имеет сходное строение. Задний отдел кишечника — прямая кишка (rectum) —образует вздутие, внутри которого помещаются шесть конических выступов — так называемые ректальные железы. В передний отдел кишечника, у места его отхождения от желудка, впадают мальпигиевы сосуды. Это слепые на внутреннем конце трубки, образованные весьма крупными клетками; протоплазма их набита мелкими зернышками, вследствие чего мальпигиевы сосуды кажутся под микроскопом темными; ядра клеток выделяются в виде светлых пузырьков.
В полости тела, в промежутках между органами, располагаются скопления жира в большем или меньшем количестве, в зависимости от степени ожирения комара. Дольки жирового тела видны на нашем препарате в виде скоплений прозрачных капель жира различного размера. На препарате может быть видна, целиком или частично, находящаяся в брюшке часть нервной системы — 6 ганглиев (нервных узлов), соединенных продольным нервным стволом. Шестой, т. е. самый задний из ганглиев, наиболее крупный.
234
6
Внутренние половые органы самки. Половой аппарат самки (рис. 114) состоит из яичников, яйцеводов, непарного яйцевода* сперматеки и придаточной половой железы. Размеры яичника весьма различны в зависимости от степени развития яиц. Строение яичника легче рассмотреть, если яйца находятся на ранних стадиях развития. Яичник имеет овальную форму, покрыт тонкой оболочкой, вытянутой на внутреннем конце в виде нити. В стенке и в толще яичника много мышечных волокон; их сокращения можно видеть на свежеприготовленных препаратах.
Каждый яичник состоит из большого числа тесно сближенных коротких яйцевых трубочек. Ко времени яйцекладки в каждой трубочке развивается одно яйцо. Яйцевая клетка постепенно выделяется среди так называемых фолликулярных клеток (первая фаза развития яичников); вокруг прозрачного ядра яйцеклетки появляется скопление темных зерен желтка (вторая фаза); желточные зерна, увеличиваясь в количестве, закрывают ядро яйцевой клетки (третья фаза); яйцо вытягивается в длину (четвертая фаза) и приобретает характерное для него строение — у Anopheles появляются поплавки и пр. (пятая фаза). По строению яйцевых трубочек можно определить, сколько раз комар клал яйца, так как количество расширений на трубочках возрастает с каждой яйцекладкой (В^ П. Половодо-ва, Т. С. Детинова).
Для определения физиологического возраста самки комара, по методу В. П. Полово-довой и Т. С. Детиновой, насекомое, усыпленное эфиром или хлороформом и проведенное через спирт (стр. 233), помещают на предметное стекло в каплю физиологического раствора. Препаровальной иглой слегка надрывают хитиновый покров брюшка, отступя примерно на 2—3 сегмента от заднего конца. Одной пре
паровальной иглой осторожно оттягивают задний конец позади места надрыва, другой придерживают остальную часть комара. Вместе с задними сегментами выходят яичники. Когда они будут полностью вытянуты, перерезают иглами кишечник и убирают переднюю, большую часть комара. Далее приступают к исследованию яичников при увеличении бинокуляра в 60—80 раз. Надорвав мышечную стенку яичника, действуя двумя препаровальными иглами, осторожно выделяют несколько яйцевых трубочек, стараясь не оторвать их от канала, идущего по оси яичника.
Помимо имеющегося в каждой яйцевой трубочке фолликула, содержащего развивающееся яйцо, на яйцевой трубочке могут быть небольшие расширения — места, где помещались фолликулы, в которых ранее сформировались уже отложенные яйца (рис. 115). Эти расширения, значительно более мелкие, чем развивающийся фолликул, находятся между ним и осевым каналом яичника. Не покрывая объект покровным стеклом, продолжают препаровку, стараясь просмотреть нс менее пяти целых яйцевых трубочек каждого яичника. Если при исследовании одной самки на разных яйцевых трубочках отмечено неодинаковое число расширений, принимают, что комар проделал такое
Рис. 114. Половой аппарат самки Anopheles.
/ — яичники, 2 — парный яйцевод, 3 — ампулы непарного яйцевода, 4 — влагалище, 5 —сперматека, 6 — придаточная железа. Среднее увеличение. (По О. Н. Виноградской).
235
Рис. 115. Схема образования расширения яйцевых трубочек.
/ — 5 — развитие фолликула от его образования до полной зрелости; б—яйцевая трубочка, растянутая в виде мешочка, сразу после выхода зрелого яйца; 7 — 9 — процесс сокращения мешочка и образования расширения; 10 и // — начало и конец развития фолликула во втором цикле; /2 —образование второго расширения, 13 и 14 — яйцевые трубочки самки, проделавшей второй и третий циклы. I —первый развивающийся фолликул и место, оставшееся после его выхода; П, III, IV —то же для последующих фолликулов; а — концевая ножка яйцевой трубочки; б— интима в виде мешочка, растянутого после выхода зрелого яйца; в — зона роста. (По Т. С. Цетиновой).
количество гонотрофических циклов, которое соответствует наибольшему обнаруженному числу расширений. Обнаружение разного количества расширений объясняется либо повреждением некоторых трубочек при препаровке, либо (у комаров рода Aedes) неполным насыщением комара кровью, что привело к развитию только части фолликулов.
Существует более простой способ, позволяющий при вскрытии отличить самок, уже клавших яйца (Т. С. Детинова). В каждый яичник входят два трахейных ствола, распадающихся на все более мелкие ветви,
А	б
Рис. 116. Яичник самки Anopheles.
Л — новорожденной, Б— клавшей яйца. Сильное увеличение. (По T. С. Детиновой).
вплоть до мельчайших разветвлений — трахеол. У самок, еще не клавших яиц, трахеолы извиты в виде клубочков, которые распрямляются по мере развития яичников, а после яйцекладки снова становятся извитыми, но не образуют клубочков (рис. 116). Для рассмотрения трахейной системы рекомендуется вскрывать комара не в физиологическом растворе, а в воде. Каплю с отпрепарованными яичниками, не покрывая покровным стеклом, оставляют подсохнуть; трахеолы заполняются воздухом и становятся лучше заметными; сухой препарат рассматривают под микроскопом при среднем увеличении. Определить количество яйцекладок по строению трахейной системы нельзя.
От яичников отходят короткие яйцеводы, соединяющиеся в непарный яйцевод. В месте соединения непарный яйцевод образует два
237
расширения — ампулы; размеры их возрастают с каждой яйцекладкой.
Сперматека (семеприемник) представляет собой темно-коричневую хитиновую капсулу яйцевидной формы. У Anopheles одна сперматека, у немалярийных комаров их три. Если самка оплодотворена, в сперматеке имеются живые сперматозоиды. При удалении фильтровальной бумагой части жидкости из-под покровного стекла сперматека расплющивается и вышедшие из нее сперматозоиды движутся в окружающей жидкости.
Слюнные железы. У комара две слюнные железы трубчатого типа (рис. 113). Каждая железа состоит из трех долек — двух более длинных боковых и более короткой средней. Дольки состоят из довольно крупных прозрачных клеток. При сильном увеличени и суженной диафрагме хорошо видны границы клеток и слюнной проток, вокруг которого располагаются железистые клетки. Протоки всех трех долек сливаются в один. Общие протоки обеих желез соединяются вместе в голове. Нередко встречаются самки Anopheles с добавочными дольками слюнных желез, являющимися укороченными отростками основных долек.
Чтобы приготовить постоянные препараты внутренних органов, комаров вскрывают, как описано выше. Отпрепарованным органам придают желаемое положение, удаляют фильтровальной бумагой избыток физиологического раствора (не покрывая покровным стеклом), фиксируют жидкостью Карнуа и приклеивают объект по способу Павловского (стр. 26). Окрашивают какой-либо из обычных гистологических красок, например гематоксилином Бемера или квасцовым кармином. Яичники окрашиваются гораздо интенсивнее прочих органов; поэтому, во избежание перекрашивания, надо сократить время пребывания их в краске.
Изучение анатомии комаров на срезах
Многие особенности внутреннего строения с наибольшей полнотой можно уяснить при изучении серий срезов. Для приготовления препаратов выбирают голодных самок с неразвитыми яичниками. Комаров фиксируют жидкостью Буена, Карнуа или сулемой с уксусной кислотой (стр. 16). Рекомендуется предварительно не только удалить крылья и ноги, но и разрезать комара пополам, отделив брюшко от головы с грудью. Заливают в парафин. Несмотря на наличие относительно плотного хитинового покрова груди, в большинстве случаев удается получить удовлетворительные срезы и без применения специальных приемов размягчения хитина (если объект хорошо обезвожен). Готовят серии продольных (сагиттальных) и поперечных (фронтальных) срезов; о технике — см. стр. 19. Для окраски можно рекомендовать гема-токсилин-эозин.
Продольный срез через голову и грудь. Рассматривают срезы передней половины тела комара (рис. 117), проведенные возможно ближе к плоскости симметрии. Весьма трудно получить срез, на котором были бы отчетливо видны, скажем, все находящиеся в голове и груди отделы пищеварительного канала. Поэтому для получения полной картины надо рассмотреть и сравнить целую серию или хотя бы несколько смежных срезов.
Проследим части пищеварительного канала. В голове располагается глотка в виде интенсивно хитинизированной трубки с двумя расширениями, играющими роль насосов. Переднее, меньшее по размеру расширение («ротовая полость») расположено в наличнике. За ним глотка 238
сужйватся и образует поворот градусов на 45. Далее следует более объемистое второе расширение. Из мышц, обслуживающих глотку, хорошо видны дорзальные расширители, идущие в виде довольно многочисленных пучков от верхней поверхности обоих расширений глотки к стенке головы. В задней части головы глотка переходит в тонкостенный пищевод; большая часть его находится в груди. Примерно на границе передней и средней трети груди, считая по ее длине, пищевод переходит в луковицеобразный преджелудок, имеющий более толстую стенку. Со стороны пищевода в просвет преджелудка вдается впячивание,
Рис. 117. Продольный разрез через голову и грудь самки комара.
/ — надглоточный ганглий, 2—мышцы —расширители глотки, 3 — железа внутренней секреции, corpus alla-tnm, 4— продольные мышцы груди, 5 — дорзовентральные мышцы, 6 — жировое тело, 7—слюнные железы, 8 — зоб, 9 — грудные ганглии, 10 — преджелудок, 7/ —пищевод, 12 — глотка, 13 — подглоточный ганглий, 14 — ротовая полость. Среднее увеличение.
играющее роль клапана. Кзади преджелудок, постепенно суживаясь, переходит в трубчатую часть желудка. От заднего конца пищевода с брюшной стороны отходит тонкостенный зоб; он начинается узким каналом, затем расширяется. В углу, образованном преджелудком и передним концом зоба, видны перерезанные продольно дольки слюнных желез. Составляющие их крупные клетки обычно заполнены зернами секрета. Средняя долька выделяется более интенсивной окраской.
Из частей нервной системы видны объемистый надглоточный ганглий, несколько меньший подглоточный и три тесно сближенных, почти слитых ганглия на вентральной стороне груди. В ганглиях клетки расположены главным образом на периферии. При окраске гематоксилином и эозином они выделяются интенсивно фиолетовым цветом. Центральная часть каждого ганглия занята преимущественно волокнами (розовые). Волокна особенно хорошо различимы в толще нервного ствола, соединяющего подглоточный ганглий с первым грудным.
На удачно ориентированных срезах можно проследить аорту в виде тонкой трубки, проходящей параллельно желудку и пищеводу выше их. В задней части шеи над пищеводом к аорте примыкает небольшое,
239
интенсивно окрашенное образование — corpus allatum, железа внутренней секреции (парный орган); выделяемый железой гормон стимулирует развитие яичников после кровососания.
Из мышц груди хорошо видны мощные продольные пучки летательных мышц, проходящие над пищеварительным каналом, параллельно ему. Жировое тело видно во многих местах; особенно оно развито вокруг пищевода и желудка. Так как жир в процессе приготовления препарата растворяется, крупные клетки жирового тела выглядят прозрачными, «пустыми».
Рис. 118. Поперечный разрез через брюшко самки комара.
А— в средней части, Б— в задней части. / — сердце, 2 — перикардиальные клетки, 3 — жировое тело, 4 — желудок, 5 —брюшной ганглий, 6 — стерши, 7—плевры, 8— тергит, 9 — ренту м, 10 — сперматека, // — ректальная железа, 12 — яйцеводы. Среднее увеличение.
Поперечный срез брюшка в средней его части. В поперечном сечении брюшко (рис. 118, Л) имеет более или менее округлую форму. Между тергитами (дорзальная сторона) и стернитами (вентральная) по бокам видны складчатые участки более тонкого хитина — плевры. Над ними свешиваются края тергитов; по этому признаку легко отличить спинную сторону от брюшной.
В центре расположен желудок, перерезанный в его широкой части. У голодного комара просвет желудка невелик; он имеет в поперечном сечении неправильные очертания. Стенку желудка составляют высокие клетки однослойного цилиндрического эпителия; ядра клеток лежат на разных уровнях. На внутренней поверхности эпителия видна бледно окрашенная каемка. Кнаружи от эпителиальных клеток можно различить перерезанные небольшие мышечные пучки преимущественно округлой или трехугольной формы.
Над желудком, ближе к хитиновому покрову, расположено сердце — тонкостенная трубка, округлая или многоугольная в поперечном сечении. По бокам и несколько ниже сердца могут быть видны крупные перикардиальные клетки.
240
Под желудком можно найти на срезе нервный ствол или один из брюшных ганглиев. Последние отличаются большими размерами, имеют округлые или треугольные очертания; на периферии лежат скопления нервных клеток. Нервный ствол в разрезе очень мал; в виде кружочка или овала он виден в выемке жирового тела примерно на равном расстоянии от желудка и хитинового покрова. Степень развития жирового тела зависит от физиологического состояния комара; как правило, оно занимает большую часть пространства между желудком и кожным покровом.
Поперечный срез брюшка самки Anopheles в задней егочасти. В средней части среза (рис. 118, Б) видна прямая кишка. Стенка ее состоит из невысоких эпителиальных клеток; кнаружи от них расположен тонкий слой кольцевой мускулатуры. В просвет кишки вдаются ректальные железы, образованные очень крупными клетками с зернистой протоплазмой. На каждом срезе видна одна железа, реже две.
Просмотрев серию срезов, можно найти такие, на которых ниже прямой кишки видна сперматека округлой или овальной формы с толстой хитиновой стенкой. Кнаружи от хитина расположен клеточный слой стенки сперматеки. Если самка была оплодотворена, внутри сперматеки виден клубок сперматозоидов с темными (при окраске гематоксилин-эозином), очень мелкими палочковидными головками и длинными бледно-розовыми хвостиками. Рядом со сперматекой лежат две овальные в поперечном сечении трубки — яйцеводы, соединяющиеся ближе к заднему концу тела в непарный яйцевод. Вокруг перечисленных органов расположены дольки жирового тела.
ПРОТИВОМАЛЯРИЙНОЕ ОБСЛЕДОВАНИЕ ВОДОЕМОВ И ИХ ОКРУЖЕНИЯ
Цель обследования. Противомалярийное обследование местности является существенным звеном санитарно-эпидемиологической разведки; оно также необходимо при планировании и проведении всякого рода работ по борьбе с комарами как кровососами и как переносчиками болезней — малярии, японского энцефалита, туляремии. Практически ознакомиться с условиями развития и обитания комаров, с биологическими предпосылками и методами контроля противокомариных мероприятий можно лишь путем обследования водоемов, помещений и собирания соответствующего материала в природе. При этом паразитолог, занимающийся вопросами борьбы с малярией, не может ограничиться нахождением личинок и куколок комаров. Важное значение имеет более широкое знакомство со средой их обитания — с общим характером водоема, его животным и растительным населением. Кроме того, некоторые из водных животных (рыбы, циклопы, прудовики) представляют для паразитолога специальный интерес, как возможные промежуточные хозяева паразитов человека — широкого лентеца, печеночной двуустки.
Ниже даются краткие сведения о методике противомалярийного обследования водоемов и их окружения, проводимого в порядке сан-эпидразведки и энтомологического контроля противокомариных мероприятий.
Снаряжение. Ниже описаны предметы снаряжения, которые могут понадобиться при проведении малярийной разведки местности. Конечно, каждый раз из приведенного списка придется выбирать то, что понадобится именно в данном случае, в зависимости от цели
16 Зак. 3420. Лабораторный практикум медицинской паразитологии
241
обследования, его продолжительности, количества участников, характера водоемов, времени года и т. д.
1.	Водяной сачок является почти универсальным орудием лова водных животных. Широко применяется для противомалярийного обследования водоемов, особенно при необходимости проведения количественного учета личинок и куколок комаров. Сачок состоит из обода, укрепленного на нем мешка и палки. Обод изготовляют из проволоки, по возможности латунной или луженой, 4—6 мм толщиной. Проволока гнется с таким расчетом, чтобы остающиеся свободными концы можно было использовать для прикрепления обода к палке. Стандартные размеры сачка: диаметр — 20 см, глубина мешка — 25 см, длина палки — 1 м. Лишь при обследовании труднодоступных водоемов с заболоченными берегами может понадобиться более длинная палка. Мешок изготовляют из белой материи, хорошо пропускающей воду и в то же время достаточно прочной и плотной, лучше всего из шелкового мельничного сита № 29—35; годятся и некоторые сорта хлопчатобумажной ткани. Мешок должен иметь цилиндрическую (а не коническую) форму и плоско закругленное дно. Для собирания крупных водных животных (рыб, земноводных и др.) употребляют сачки больших размеров.
2.	Ковшик изготовляют из белой жести или оцинкованного железа в форме низкой кастрюльки с носиком и ручкой (рис. 119). Удобные размеры: диаметр—12—14 см, высота — 4—5 см, длина ручки — 12—15 см. Носик должен быть слева от ручки, в противном случае при работе придется держать ковшик левой рукой. В правой (от ручки) половине дна пробивают многочисленные мелкие отверстия для стока, каждое около 0,5 мм диаметром. В левой, т. е. обращенной к носику половине дна, отверстия не пробивают, чтобы при слегка наклонном положении ковшика в нем оставалось немного воды с попавшими в ковшик животными. Посредством ручки, которая имеет вид трубки диаметром 2—2,5 см, ковшик перед употреблением надевается туго на палку. Рекомендуется сделать на палке зарубки через каждые 10 см для определения глубины водоема и других измерений. При обследовании мелких скоплений воды и легко доступной прибрежной полосы водоемов можно обойтись и без палки. Преимущества ковшика: портативность, удобство пользования (обследование идет быстрее, чем при других способах) и возможность легко изолировать личинок и куколок в малом объеме воды, которую можно перелить в любой сосуд, хотя бы и с узким горлышком. Если личинок в ковшике оказалось немного, их можно быстро выловить широкой пипеткой. Для количественного учета личинок, а также для лова крупных и быстродвижущихся животных ковшик неудобен.
3.	Марлевый плоский сачок также пригоден для собирания личинок и куколок комаров. Металлический ободок туго обшивают марлей, так, чтобы она не вытягивалась в виде мешка, а образовала слабо выпуклую поверхность. Обод лучше сделать из легкой металлической (жестяной) трубки. Сплющенный свободный конец такого ободка перед употреблением вставляют в легкую металлическую трубку, служащую палкой. Можно заготовить сачки разного размера, например 10, 15 и 20 см диаметром. Самые малые удобны при обследовании мелких луж, ямок и т. п. При вынимании сачка из воды личинки остаются на марле. Их собирают в пробирку с водой или ополаскивают сачок в ванночке (тарелке).
4.	Эмалированные тарелки или фотографические ванночки размером 9Х 12 (13X18) см употребляются для ополаскивания сачка после взятия им пробы воды. На светлом фоне ванночки прекрасно видны темные 242
личинки и куколки. Воду с ними сливают в банку или вылавливают личинок пипеткой. Ванночку или тарелку можно использовать и для взятия проб воды. Недостаток — невозможность использовать принцип, фильтрации.
5.	Выкачиватель для добывания воды из дупел деревьев (рис. 120). Он состоит из резиновой груши с трубкой стеклянного резервуара с отходящими от него трубками и стеклянного наконечника, соединенного резиновой трубкой с резервуаром. Длина всего приспособления, включая грушу и наконечник, около 60—80 см, диаметр трубок — 8—10 мм, емкость стеклянного резервуара— 100—200 мл. Наконечником может служить наконечник для клизм (выбирать с более широким1 отверстием). Для резервуара можно использовать химические пипетки на 100 мл, обрезав длинные концы трубок. Выкачивателем может также!
Рис. 120. Выкачиватель для1 добывания воды из дупел деревьев.
Рис. 119. Ковшик для собирания личинок и куколок комаров.
служить резиновая груша с трубкой и широким стеклянным наконечником или большая пипетка с широким отверстием и хорошим колпачком.
6.	Посуда для доставки собранного материала в лабораторию. Обычно пользуются широкогорлыми стеклянными материальными банками емкостью от 0,5 до 1 л и более. К банкам подбирают корковые пробки; горлышко банки обвязывают бечевой, петля которой должна быть выпущена в виде ручки. При непродолжительных обследованиях банки могут быть заменены бутылками. Для переноски относительна крупных водных животных, например рыб, для доставки растений и т. п. желательно иметь металлическую банку (ведерко) из жести или оцинкованного железа емкостью 2—3 л с крышкой и ручкой. В крышке или на горлышке сбоку пробивают дырки для доступа воздуха и сливания избытка воды.
Если предполагается собирать материал только по комарам, нет надобности брать емкую посуду, тем более, что обычно за один выход приходится осматривать несколько водоемов, а пробы из каждого водоема лучше брать в отдельные сосуды. В таких случаях необходимо иметь побольше баночек или склянок емкостью от 50 до 200 мл с корковыми пробками. Банки следует перенумеровать, проставив номера на этикетках или прямо на стекле с помощью воскового карандаша. Надписи на этикетках делают простым карандашом, а не химическим и не чернилами (расплываются от воды).
7.	Пипетка в виде стеклянной трубки диаметром 4—5 мм с резиновым колпачком. Пинцет обыкновенный анатомический или малый, глазной.
16*
243
8.	Лупа, желательно с большим полем зрения.
9.	Воздушный сачок для собирания окрыленных комаров и других насекомых (рис. 121). Удобные размеры: диаметр 15—20 см, глубина мешка 40—50 см. Мешок шьют из тюля или марли
по такому же образцу, как и для водяного сачка, т. е. цилиндрический, с закругленным, не суженным дном. Целесообразно обмотать обод какой-либо материей и к ней пришить марлю, которую надо сменить, когда она запачкается или порвется.
Для собирания комаров в природе удобнее иметь воздушный сачок без палки; она мешает при работе в густых зарослях растительности, где обычно и приходится ловить комаров. В этом случае свободные концы проволоки обода свивают в стержень длиною в 15 см, который служит рукояткой.
10. Химические пробирки. Их рекомендуется брать побольше. Пробирки заранее нумеруют и снабжают ватными тампонами. Ввиду хрупкости
Рис. 121. Воздушный сачок.
пробирок, лучше носить их в каком-либо фут-
ляре или коробке. На дно и под крышку футляра кладут слой ваты, которой заполняют и промежутки между пробирками.
11. Простейшим специальным приспособлением для быстрого вылавливания комаров в помещениях является стеклянная трубка-ловушка длиною 30—40 см и диаметром 8—10 мм, на которую плотно надета резиновая трубка такого же диаметра, длиною около 50 см (рис. 122.). Конец стеклянной трубки предварительно обвязывают кусочком густой металлической сетки. Пользуясь ловушкой, резиновую трубку берут в рот, а конец стеклянной трубки приближают к комару. При втягивании воздуха ртом комар увлекается в трубку, откуда не может вылететь вследствие малого ее диаметра. При перерыве в работе трубку закрывают ватой. По окончании лова комаров выдувают в садок (см. стр. 202).
Приспособлением для собирания комаров может также служить широкогорлая банка емкостью 100— 200 мл, через пробку которой пропущен короткий отрезок стеклянной трубки шириной 10—15 мм. Это же приспособление может быть использовано в качестве морилки, т. е. для умерщвления пойманных насекомых. В трубку, пропущенную сквозь пробку, кладут ватный тампон, смоченный хлороформом. Затем трубку закрывают пробкой.
12. Приборы, которые могут понадобиться при полевых работах: часы, компас, термометр для определения температуры воды (желательно в металлической оправе или сетке), психрометр Асманна для определения относительной влажности воздуха, театральный бинокль для отыскания комаров в высоких помещениях, карманный электрический фонарь (необходимый при обследовании подвалов, пещер и т. п.), фотографический
Рис. 122. Трубка-ловушка для собирания окрыленных комаров (резиновая трубка изображена не целиком).
Справа — момент изготовления: конец стеклянной трубки перед надеванием на него резиновой трубки обвязывают густой металлической сеткой.
аппарат с запасом кассет. Важны снимки ландшафтов, анофелогенных
водоемов, мест нахождения комаров, а также фотографии различных
244
противомалярийных работ. Увеличения с таких негативов (на размер 18\24 или 13X18 см) являются прекрасными учебными пособиями и музейными экспонатами.
Ход обследования. Поставив целью «малярийное» обследование какой-либо местности, следует осмотреть все водоемы, находящиеся в ее пределах: озера, пруды, болота, реки, ручьи, канавы, лужи, оросительные каналы, рисовые поля, бассейны, противопожарные кадки и т. д., вплоть до незначительных скоплений воды. Рекомендуется заранее наметить маршрут обследования; можно использовать план местности, если он имеется; расспросить жителей; осмотреть местность с какого-либо возвышенного пункта.
Особое внимание обращают на неглубокие, незатененные стоячие или слабо проточные водоемы, богатые погруженной водной растительностью и не слишком загрязненные. Но и водоемы, не обладающие указанными признаками, тоже не должны быть оставлены без внимания, особенно при первичном обследовании. Как правило, можно ограничиться взятием проб воды с берега. Подойдя вплотную к берегу водоема (если тому не препятствует вязкость грунта), следует внимательно осмотреть поверхность воды. При этом можно увидеть личинок и куколок комаров, которые спокойно «висят» в поверхностном слое воды или оживленно двигаются в ее толще, что особенно ясно видно, если водоем хорошо освещен солнцем. В этом случае рекомендуется подходить к берегу с теневой стороны, чтобы тень наблюдателя не спугнула личинок. Личинки Anopheles в спокойном состоянии держатся горизонтально у самой поверхности воды. Личинки же немалярийных комаров свешиваются головой вниз под углом 30—60°, касаясь поверхности воды только концом сифона. Куколки малярийных и немалярийных комаров при подобном осмотре с достоверностью неразличимы.
Независимо от результатов общего осмотра необходимо взять пробы воды для более тщательного исследования. Воду берут с поверхности. Обод сачка погружают примерно до половины и продвигают его горизонтально, примерно на расстояние одного метра. Затем вынимают сачок и выворачивают его, ополаскивая в банке или тарелке. Ковшиком забирают воду посредством резкого горизонтального движения. Затем рассматривают содержимое ковшика и вылавливают личинок широкой пипеткой или сливают в банку остаток воды с пойманными личинками. Не следует в одном месте брать много проб. Не сходя с места достаточно зачерпнуть воду 3—4 раза, а затем, если водоем не слишком мал, продолжать обследование, останавливаясь время от времени для взятия проб (например, через 20, 50, 100 шагов), сообразуясь, конечно, с характером данного участка. Всего из каждого водоема берут от 10 до 50 и более проб, в зависимости от цели обследования и величины водоема. Закончив обследование, ополаскивают сачок или ковшик, чтобы не занести личинок в другой водоем. Результат обследования целесообразно сразу же записать, не откладывая до возвращения в лабораторию и не полагаясь на память.
При контроле эффективности противокомариных мероприятий ведется систематический количественный учет личинок и куколок. Необходимо полное единообразие методики учета. Пробы следует брать в одних и тех же контрольных водоемах и даже в определенных их точках. При взятии каждой пробы нужно подсчитать число попавшихся личинок и куколок Anopheles, а также определить стадии развития личинок по размеру головы. Результат подсчета записывают; итог выводят м ,	13 + 51+22 + 4 + 1 = 91
в виде «личиночнои формулы», например-------------ел---------,где
245
цифры числителя обозначают количество личинок I, II, III, IV стадии и куколок, а также общее количество личинок и куколок; знаменатель показывает число взятых проб.
В южных и западных областях Советского Союза, а также на Дальнем Востоке приходится считаться с наличием видов комаров, выпла-живающихся в дуплах деревьев. Для их нахождения осматривают дуплистые деревья. Отверстие дупла может быть очень небольшим; иногда юно находится на высоте нескольких метров. Обычно лишь немногие дупла содержат воду. Иногда приходится осмотреть очень много деревьев, прежде чем удастся найти дупло с водой. Личинки комаров иногда
Рис. 123. Карта водоемов окрестностей Княжего Двора (Шимск, Новгородской области).
Черные кружки — места нахождения личинок Anopheles; белые кружки — места, где личинки Anophe.es не обнаружены.
встречаются в скоплениях воды у основания стволов, между корнями, а также в дуплах срубленных стволов. Редко попадаются дупла настолько объемистые, что из них можно брать воду сачком или ковшиком. Зато выкачивателем (стр. 243) легко добыть воду из любого дупла. После употребления выкачиватель нужно тщательно промыть. Если нет выкачивателя, вылавливают личинок стеклянной трубкой с резиновым баллоном. В темной дупловой жидкости трудно увидеть личинок: рекомендуется смотреть сверху или разлить жидкость в пробирки.
При первичном обследовании местности следует, не ограничиваясь поисками личинок комаров, ознакомиться с общим характером водоема, его физическими свойствами, растительным и животным населением, чтобы судить о значении водоема как места выплода малярийных комаров и о возможных способах обезвреживания данного водоема. Обследование целесообразно вести по определенной схеме. Желательно иметь отпечатанные бланки — карточки обследования водоемов. Указывают название или номер водоема, его точное местонахождение, пло-246
шадь и общий характер (болото, пруд, река, канава и т. д.). Отмечают скорость течения (в проточных водоемах) и глубину, если обстоятельства позволяют ее измерить. Карточка обследования водоема может содержать, помимо указанных, и ряд других пунктов. Результаты обследования отмечают на карте (плане) местности (рис. 123).
Важное значение имеет растительность. Следует записать, в какой степени водоем затенен деревьями или надводной растительностью, какие водные растения преобладают, особенно в местах, богатых личинками Anopheles. Если растение незнакомо, следует взять его для определения. В зависимости от характера и распределения растительности численность личинок комаров может быть весьма различна даже в разных частях одного водоема. Поэтому по возможности подробно отмечают общий характер, облик растительности — принадлежность ее к определенным физиономическим типам !.
Из фауны водоема наше внимание привлекают животные, поедающие личинок и куколок комаров. Таковы некоторые рыбы, особенно гамбузия, акклиматизированная в южных областях Советского Союза; утки, тритоны, жуки, в частности плавунцы и их личинки; водяные клопы, особенно плавающий брюшной стороной кверху гладыш (Notonecta); личинки стрекоз, червеобразные личинки ручейников, живущие в построенных ими трубках. Отмечая наличие тех или иных видов рыб, выясняют, имеет ли данный водоем значение в отношении рыбного промысла. Для собирания упомянутых выше хищников следует брать пробы не только у поверхности, но из толщи воды, а также у дна. Достают водные растения и ополаскивают их в банке с водой. Хищных животных надо отсаживать отдельно, не помещая их вместе с личинками комаров.
Из прочих водных животных для паразитолога представляют специальный интерес моллюски, в частности прудовики, а также мелкие рачки из отряда веслоногих (циклопы, диаптомусы). Прудовики, отдельные виды которых могут быть промежуточными хозяевами печеночной двуустки (стр. 123), характеризуются спирально завитой конической раковиной с заостренной верхушкой; отверстие раковины без крышки. В стоячих заросших водоемах прудовиков можно найти на растениях, часто у поверхности воды. Такие водоемы почти всегда изобилуют также различными низшими ракообразными, свободно плавающими в толще воды; среди них обычно попадаются циклопы и диаптомусы — промежуточные хозяева лентеца широкого (стр. 128). Циклопов, несмотря на их малые размеры (1—3 мм), легко узнать по быстрым движениям и паре длинных, направленных в стороны сяжков. На заднем конце некоторых экземпляров заметна пара мешочков — развивающиеся яйца, вынашиваемые самкой.
При повторных посещениях водоема записывают результаты обследования на наличие личинок и куколок комаров, а также отмечают возможные изменения характера водоема: разлив, частичное или полное высыхание, смену растительных форм и т. д. Водоемы, выбранные в качестве «контрольные», необходимо обследовать периодически, скажем, через каждые 5 дней.
Обследование водоемов целесообразно сочетать с собиранием взрослых комаров. Лов комаров в природе может дать ценные материалы, особенно для выявления экзофильных («диких») видов. Во время
1 В. Н. Беклемишев (ред.). Медицинская энтомологии, ч. 1, Медгиз, 1949.
247
пребывания у водоемов часто приходится подвергаться нападению комаров, преимущественно немалярийных. Нападающих насекомых собирают пробирками. Чтобы улов был более обильным, следует расположиться вблизи стоячего водоема в каком-либо защищенном месте: в лесу, кустарнике, густой траве. Наиболее активны комары в сумерки, в безветренную погоду. Лов насекомых, нападающих на людей и животных, дает только самок. Более разнообразный материал, включающий самцов, которые нужны для точного определения некоторых видов, получают в результате активного лова воздушным сачком. Медленно двигаясь по траве, ловят замеченных насекомых быстрым движением сачка. Такой прием при собирании комаров дает лучшие результаты, чем обычное в энтомологической практике кошение «вслепую». Взмахнув сачком, поворачивают его так, чтобы пойманный комар не мог вылететь. Затем вводят внутрь сачка руку с пробиркой, которой вылавливают комара, стараясь не повредить его при этом. Ценные материалы могут также дать сборы комаров в таких природных убежищах, как пещеры, сухие дупла и т. д. Необходимым элементом малярийного обследования являются поиски комаров в жилищах, помещениях для домашних животных, надворных постройках и пр. Комаров из помещений различных типов следует собирать отдельно. Результаты обследования записывают, отмечая также дату и место (населенный пункт, улица, номер дома), характер помещения (дом, конюшня, коровник и т. д.).
Для контроля эффективности противокомариных мероприятий ведется точный количественный учет путем вылавливания всех комаров в определенных контрольных помещениях через известные промежутки времени, например раз в 5 дней. Подсчитывают малярийных и немалярийных комаров, самцов и самок; среди последних указывают количество напившихся кровью. Попутно с обследованием помещений целесообразно обойти двор (усадьбу) и осмотреть такие водоемы, как бочки с водой, бассейны, ямы для полива огородов и т. д. Наличие в помещениях большого количества комаров, особенно самцов, говорит о близости места выплода, которое должно быть найдено и обследовано.
Перед отправлением в обратный путь надо позаботиться о сохранности собранного материала, особенно если предстоит длительный переход или поездка. Комаров, которых предстоит сохранить живыми, лучше поместить в небольшие садки (стр. 202), рукава которых перевязывают бечевой. Полезно слегка смочить марлю садка, чтобы комары не погибли от сухости. Посуда, в особенности пробирки, должна быть плотно уложена. По возвращении в лабораторию корковые пробки в банках с живой добычей заменяют ватными тампонами или марлевыми повязками. При этом надо следить, чтобы не улетели комары, которые могли окрылиться за время транспортировки материала. Коробки с пробирками должны быть открыты. Комаров, которых нет надобности сохранять живыми, лучше умертвить эфиром или хлороформом; о дальнейшей обработке материала см. стр. 203.
Известные особенности представляют обследования, производимые в холодное время года. Такие обследования могут дать ценный материал и углубить наши еще недостаточные знания об условиях зимовки различных видов комаров. Технически несложно ранневесеннее обследование водоемов. Его удобно приурочить к тому времени, когда таяние снега подходит к концу, водоемы почти очистились ото льда и температура днем держится выше нуля. Могут быть найдены личинки тех комаров, которые зимуют на этой фазе развития {Anopheles blfurcatus, Anopheles algeriensis, в Средней Азии — Anopheles pulcherrlmus и др.).
248
Их надо искать обычным способом, забирая, однако, воду не только с поверхности, но и глубже. Anopheles bifurcatus встречается преимущественно в ручьях, в родниковых заболоченностях, неглубоких колодцах и т. п. В мелких, хорошо прогреваемых водоемах в это время года могут появиться молодые личинки Aedes, вышедшие из перезимовавших яиц. Чтобы собрать перезимовавшие яйца Aedes, нужно с помощью ножа, совка или ложки соскоблить поверхность земли вместе с опавшими листьями, мхом по краям и со дна ям, канав и т. п. Если в лаборатории эти пробы земли залить водой, обычно в некоторых из них появляются личинки Aedes. При ранневесеннем обследовании дупел могут быть найдены перезимовавшие личинки Anopheles plumbeus, а при помещении в воду субстрата из дупел могут вылупиться личинки дупловых Aёdes. Наконец, при ранневесеннем обследовании следует поискать комаров, зимующих в природе во взрослом состоянии в пещерах и расщелинах, в норах животных, под опавшими листьями, в камышах и пр. Находки зимующих комаров в таких местах представляют большой интерес и должны тщательно регистрироваться.
Известное практическое значение имеет обследование помещений для выявления мест зимовки комаров. Осматривают подвалы, погреба, помещения для домашних животных, сараи, склады, овощехранилища и пр. Необходимо иметь фонарь. Особенно тщательно осматривают ниши, углубления и другие укромные места. При низкой температуре комары неподвижны и кажутся мертвыми. Комаров, принесенных с зимовки, на некоторое время лучше оставить в прохладном месте; в противном случае насекомые могут погибнуть от слишком резкой перемены температуры. Результаты обследования записывают примерно по такой же схеме, как и при летних обследованиях.
ЛИТЕРАТУРА
Беклемишев В. Н. (ред.) Учебник медицинской энтомологии. Ч. 1 и 2. Медгиз, М., 1949.
Беклемишев В. Н. Экология малярийного комара. Медгиз, М., 1944.
Детинова Т. С. Физиологические изменения яичников у самок Anopheles maculipen-nis. Men. паразитол., т. 18, в. 5, 1949.
Детинова Т С. Возрастной состав комаров Anopheles как критерий оценки эффективности противокомариных мероприятий. Нов. мед., в 27, изд. АМН СССР, 1952.
ЛипинА. Н. Пресные воды и их жизнь. Учпедгиз, М., 1950.
Мончадский А. С. Личинки кровососущих комаров. Изд. АН СССР, 1951.
МончадскийА. С. и ШтакельбергА. А. Малярийные комары Таджикистана и меры борьбы с ними. Сталинабад, 1943.
Павловский Е. Н. Методы изучения кровососущих комаров (Culicidae). Изд. АН СССР, 1936.
Павловский Е. Н. Учебник паразитологии человека. Медгиз, Л., 1951.
Павловский Е. Н. В помощь санитарно-эпидемиологической разведке эндемичных трансмиссивных болезней на юге и в субтропиках. Медгиз, 1944.
Павловский Е. Н. (ред.). Паразитология Дальнего Востока. Медгиз, Л., 1947.
Павловский Е. Н. Руководство по паразитологии человека. Т. I, II. Изд. АН СССР, 1946, 1948.
Павловский Е. Н. и Лепнева С. Г. Очерки из жизни пресноводных животных. Изд. Сов. наука, 1948.
Перфильев П. П. Некоторые данные по сравнительной анатомии малярийных комаров. Паразит, сборн. Зоол. ин-та АН СССР, т. 1, 1930.
Полово лова В. П. Определение физиологического возраста самки Anopheles. Men-паразитол., т. 18, в. 4, 1949.
Райков Б. Е. и Римский-Корсаков М. Н. Зоологические экскурсии, 1956.
Шахматов А. П. и Попов В. М. Руководство по малярии, ч. 2. Эпидемиология и переносчики малярии. Томск, 1941.
Шта кельберг А. А. Кровососущие комары Палеарктики. Изд. АН СССР, 1937. Жизнь пресных вод СССР. Изд. АН СССР, ч. 1, 1940; ч. 2, 1948; ч. 3, 1950.
249
МОКРЕЦЫ —СЕМЕЙСТВО HELEIDAE1
Мокрецы напоминают внешним видом комаров, отличаясь от них мелкими размерами (1—3 мм) и более коренастым сложением.
СБОР И ХРАНЕНИЕ
Сбор взрослых мокрецов в природе производится с весны до осени (с мая по сентябрь) в тихие вечера перед заходом солнца. Лов свободно летающих насекомых затруднителен вследствие их малых размеров. Для мокрецов характерно паразитирование в волосистых покровах млекопитающих. Поэтому лучше собирать несекомых на крупных домашних животных (предпочтительно белой масти). При сборах следует пользоваться пробиркой, осторожно накрывая ею насекомых, двигая пробирку против шерсти животного. В одну пробирку можно собрать несколько десятков и даже сотен насекомых. В период копуляции мокрецов на животных можно собирать и самцов. Местами довольно обильный материал дают сборы мокрецов на людях. В живот
Рис. 124. Cullcoldes fasclpennls. Общий вид по тотальному препарату. Малое увеличение.
новодческих помещениях мокрецов иногда можно найти на окнах. Обильный и разнообразный материал дает лов на свет.
Для целей систематики мокрецов сохраняют в сухом виде на вате или накалывают на минуции как комаров (стр. 203). Другую часть материала фиксируют 70° спиртом для изготовления в дальнейшем микроскопических препаратов. Если предполагаются анатомо-гистологические исследования, следует при-применять специальные фиксаторы (стр. 16).
НАРУЖНОЕ СТРОЕНИЕ
(Описание дано применительно к представителям рода Culicoides, широко распространенного и наиболее обычного в СССР).
Наружное строение изучают на тотальных микроскопических препаратах в канадском бальзаме (рис. 124), при слабом и сильном увеличениях, или на наколотых насекомых под бинокуляром при увеличении 30—60 раз.
Тело мокреца явственно подразделено на три отдела — голову, грудь и брюшко.
Голова гипогнатической постановки (наклонена вниз по отношению к продольной оси тела), несет пару 15-члениковых нитевидных усиков. Первый членик маленький, пластинчатый; второй крупный, шаровидный; последующие короткие, различной формы; последние 5 члеников отличаются от предыдущих более значительной длиной; наиболее длинный вершинный членик у некоторых видов несет на
1 Глава просмотрена и дополнена для настоящего издания А. В. Гуцевичем.
250
пятичлениковые парные
Рис. 125. Наружное строение груди Cullcoldes (вид сбоку).
/ — среднеспинка; 2 —щиток, 3 — postscutellum, 4 — переднегрудь, 5 — эпистерны среднегруди, 6 —эпимеры среднегруди, 7 —эпистерны заднегруди, 8 — эпимеры заднегруди, 9—жужжальце, /—переднее дыхальце, II — заднее дыхальце.
конце палочку. Все членики усиков, кроме двух первых, покрыты розетками волосков, более редких и коротких у самки, очень густых и длинных у самца. Фасеточные глаза почковидные.
В передней части головы причленен довольно массивный хоботок, примерно равный длине головы. На препарате можно видеть просвечивающие в хоботке режущие хитиновые части (см. ниже описание ротового аппарата). По бокам хоботка вил нижнечелюстные щупики. Третий членик щупиков более или менее утолщен и в своей дистальной части несет чувствительный орган.
Грудь, типичная для длинноусых двукрылых, подразделяется на передний, средний и задний отделы. Каждый из них делится на спинку, грудку и бочки; эти последние в свою очередь состоят из двух частей: передних — эпистерн и задних — эпимер. На препарате можно рассмотреть следующие части груди (рис. 125): среднеспинку, занимающую большую часть дорзальной поверхности грудного отдела и подразделяющуюся на praescutuni — часть, лежащую впереди зачаточного поперечного шва, собственно scutum — от поперечного шва до щитка (scutellum) и postscutellum — часть, лежащую за щитком; маленькую
переднеспинку, эпимеры и эпистерны переднегруди, эпистерны (они в свою очередь подразделяются на верхний и нижний отделы) и эпимеры среднегруди, эпистерны и эпимеры заднегруди. На тотальных препаратах не всегда удается рассмотреть переднеспинку и эпимеры заднегруди. Грудной отдел с каждой стороны несет по два дыхальца:
т
Рис. 126. Крыло Cullcoldes.
Ячейки: 1, 2 —первая и вторая радиальные, 3— RB, 4 — медиальная, кубитальная, б —анальная, 7 — базальная. Жилки: гт — поперечная радиомедиальная, т — медиальная, си — кубитальная, ап — анальная.
первое помещается у переднего края верхнего отдела эпистерн среднегруди, второе лежит в верхней части эпистерн заднегруди близ места прикрепления жужжалец (рис. 125). Щетинки имеются только на средне-спинке. При рассмотрении сухих экземпляров сверху в передней части среднеспинки по бокам видна пара углублений, так называемых плечевых ямок — родовой признак Culicoides.
По бокам среднегруди между спинкой и эпимерами среднего отдела прикреплены крылья в числе одной пары. Их жилкование имеет существенное значение в систематике Heleidae. Считая от переднего края, крылья несут следующие продольные жилки (рис. 126): косталь-
251
ную, радиальную, медиальную, кубитальную и рудиментарную анальную. Между радиальной и медиальной имеется поперечная жилка. Участки крыла, отграниченные жилками, называются ячейками; их
Рис. 127. Последний членик лапки самки Cull-coides fascipetints.
1 — эмаддий, 2 — коготки. Сильное увеличение.
расположение и названия показаны на рис. 126. Крыловая пластинка покрыта очень мелкими микротрихиями и более крупными волосками (макротрихиями), различно группированными у разных видов. Помимо волосков у большинства видов Ctiliciodes на крыльях имеются пигментные пятна, образующие рисунок, характерный для каждого вида. Позади крыльев на заднегруди, между эпимерами и postscutellum причленены булавовидные жужжальца.
Ноги стройные, состоят из тазика (или коксы), вертлуга, бедра, голени и пятичлениковой лапки. На вершине последнего членика лапки расположена пара коготков (рис. 127). Пульвиллы (присоски при основании коготков) отсутствуют. Эмподий (в виде пластинки или перистого волоска) налицо не у всех представителей семейства; его форма, а также наличие или отсутствие играют роль в систематике Heleidae.
Брюшко слагается из 10 сегментов; покровы каждого из них подразделяются на тергит и стернит. По бокам брюшных колец на межсегментальной перепонке расположены дыхальца, по одной паре на первых 8 сегментах (их не всегда удается рассмотреть на тотальных препаратах). Последние специализированные генитальные сегменты дыхалец не имеют. Наружные гени
талии (или гипопигий) самцов, строение которых играет важную роль в систематике Heleidae, образованы видоизмененными в совокупительные органы 9 и 10-м брюшными сегментами (рис. 128). После вы-
хода из куколки гипопигий самца поворачивается на 45—90°, переходя таким образом из горизонтальной плоскости в наклонную или вертикальную. Для более удобного рассмотрения гипопигия задний конец брюшка отрезают перед заключением его в канадский бальзам и монтируют под отдельным покровным стеклом (удобнее пользоваться «четвертушками»: покровное стекло режут алмазным карандашом на 4 части).
При подробном ознакомлении наружные гениталии самца могут быть подразделены на четыре части (рис. 128).
1.	Хитиновое кольцо, образованное слившимися 9-м стернитом и 9-м терги-том. Тергит сильно развит (напоминает своей формой фартук), с неглубокой выемкой на заднем крае. По бокам зад-
Рис. 128. Гипопигий самца Cull-coldes (по просветленному препарату).
9 — 9-й стернит, 9^ — 9-й тергит, 1 — вальва (коксит), 2 — 2-й членик вальвы (стиль), 3— выступы 9-готергита, 4 — расширитель (дилятатор), 5 — пенис (эдеагус). Среднее увеличение.
него края 9-го тергита расположена пара
выступов, имеющих различную форму у разных видов. 9-й стернит хорошо развит; по заднему краю он несет выемку, образующую вместе
с остальными частями гипопигия так называемое окошко.
2.	Вальвы гипопигия — парные придатки 9-го сегмента, состоят из двух члеников. Первый (гонококсит), более массивный, имеет в ос
252
новной части придатки — аподему и крючки. Второй членик (гоно-стиль) в вершинной части сужен и саблевидно изогнут. Вальвы покрыты различной величины щетинками и волосками.
3.	Анальный конус является видоизмененным 10-м сегментом брюшка; он несет анальное отверстие и по бокам небольшие кругловато-овальные церки. Анальный конус вместе с церками образован
Рис. 129. Внутренние части гипопигия самца Cullcoldes nubeculosus.
А — дилятатор (парамеры), Б —пенис (эдеагус). Большое увеличение.
тонкой бесцветной хитиновой мембраной, вследствие чего на просветленных препаратах не всегда бывает виден.
4.	Хитиновые части генитальной трубки состоят из расширителя, или дилятатора (парамеры, рис. 129), различной формы у разных видов, и копулятивного органа (penis) , гомологичного эдеагусу комаров. Обе эти части налегают друг на друга, причем расширитель лежит выше.
Гипопигий самки, к которому относятся 9-й и 10-й
St
Б
Рис. 130. Гипопигий самки Cullcoldes nubeculosus.
А —со спинной стороны. Б — с брюшной стороны. 8g —8-й стернит, 9g —9-й стернит, 9^ —9-й тергит, / —анальный конус, 2 — церки. Сильное увеличение.
сегменты, а также стернит 8-го, представляет собой менее специализированное, по сравнению с гипопигием самца, образование (рис. 130). На конце брюшка лежат кругловато-овальные церки — придатки 10-го сегмента.
Ротовой аппарат самки Culicoides. Детальное ознакомление с ротовым аппаратом производится по специально изготовленным препаратам. Препаровку делают на предметном стекле в капле дистилли-
253
рованной воды острыми препаровальными иглами при максимальных увеличениях бинокуляра. Спиртовой материал перед препаровкой
Рис. 131. Ротовой аппарат самки Cullcoldes pullcarls.
/ — верхняя губа, 2 — гипофаринкс; 3 — верхняя челюсть, 4 — нижняя челюсть, о —нижняя губа.
лучше слегка мацерировать, выдерживая в 10% растворе КОН от 2 до 12 часов. Отпрепарованные части промываются 96° спиртом, при-
Рис. 132. Поперечный разрез через хоботок самки Cullcoldes. / — верхняя губа, 2 —эпифаринкс, 3 — верхние челюсти, 4 —нижние челюсти, 5—гипофаринкс, 6 — нижняя губа.
клеиваются к стеклу коллодием и после обработки карбол-ксилолом заключаются в канадский бальзам.
Хоботок самки мокреца слагается из 7 частей (рис. 131). Трехчленистая массивная нижняя губа несет функции футляра для режущих стилетов. Конечные членики нижней губы густо покрыты чувствительными волосками и несут осязательную функцию. Комплекс режущих частей подразделяется на верхнюю губу, пару верхних челюстей, пару нижних челюстей и гипо-
фаринкс, или подглоточник.
Верхняя губа представляет собой сложное образование, подразделяемое на собственно верхнюю губу (рис. 132), сочлененную с наличником, и нижележащий, сросшийся с верхней губой эпифаринкс, являющийся
непосредственным продолжением верхней стенки глотки. Таким образом, верхняя губа вместе с эпифаринксом составляет массивное, полое внутри образование. На переднем конце верхняя губа несет
254
зубчатую хитиновую «коронку», а по бокам — хитиновые лезвия с очень, острыми, направленными вперед зубцами. Боковые края верхней губной пластинки имеют желобообразную форму и подвижно сочленены посредством перепонки с основной пластинкой губы. При основании верхней губы в месте сочленения ее с головной капсулой, перпендикулярно к продольной оси тела, расположена пара небольших изогнутых склеритов, построенных по принципу двуплечного рычага 1-го рода.. При прокалывании кожи неподвижной остается пластинка эпифаринкса; все остальные части, относящиеся к верхней губе, будучи подвижно сочлененными, приходят в движение относительно друг друга,, что значительно повышает интенсивность внедрения хоботка в кожные покровы.
Верхние челюсти имеют форму широких, тупо приостренных на вершине хитиновых ножей, с внутренней стороны (близ вершины) снабженных зубцами, направленными назад. Зазубренные участки челюстей при нормальном положении хоботка выступают на противоположную сторону, т. е. зазубренный участок правой челюсти выступает с левой стороны хоботка, близ его вершины, а левой челюсти — на правую сторону.
Нижние челюсти представлены узкими, полулунными в поперечном сечении образованиями. Их вершина косо срезана и усажена мелкими зубчиками, направленными назад. При прокалывании кожи нижние челюсти совершают вращательные движения.
Гипофаринкс, будучи неподвижно (подобно эпифаринксу) сочленен с нижней стенкой глотки, является непосредственным ее продолжением. Он имеет форму широкой мечевидной пластинки, мягко приост-ренной у вершины. Последняя снабжена острыми, направленными вперед зубцами. На нижней поверхности помещается трубчатый канал (рис. 132), соединенный в полости головы со слюнным насосом. Таким образом, хоботок Culicoides, подобно хоботкам других кровососущих насекомых, имеет два канала: верхний, образованный верхней губой (точнее эпифаринксом), замкнутый с нижней стороны верхними челюстями, и нижний канал гипофаринкса. Через первый поступает кровь хозяина в пищеварительный тракт насекомого, через второй выделяется секрет слюнных желез в тело хозяина.
ВСКРЫТИЕ И ЗНАКОМСТВО С ВНУТРЕННИМ СТРОЕНИЕМ
Знакомство с внутренним строением (рис. 133) производится по микроскопическим препаратам, изготовленным обычными способами из отдельных органов, либо по срезам (стр. 16 и поел.). Препаровку производят на предметном стекле в капле физиологического раствора. Наиболее простыми способами препаровки кишечника, гениталий и слюнных желез являются методы передней и задней тракции. При пользовании методом задней тракции необходимо разрушить острыми иглами межсегментальную перепонку на границе 7-го и 8-го сегментов брюшка, отсечь голову лопатовидной иглой и, придерживая насекомое за грудь, осторожно вытягивать внутренние органы назад; при этом извлекаются кишечник и внутренние гениталии. Кишечник можно извлечь и передней тракцией. В этом случае отсекают один или два последних брюшных сегмента, разрушают переднегрудь, после чего извлекают кишечник, вытягивая его за голову вперед. Слюнные железы также извлекаются передней тракцией, однако здесь следует проявлять максимальную осторожность, потому что слюнные протоки очень тонки и легко обрываются; обычно перед извлечением желез необходимо
25л
бывает разрушить большую часть грудного отдела. Если важно получить кишечный тракт целиком, то пользуются другим способом препаровки, заключающимся в последовательном разрушении препаровальными иглами всех отделов наружного скелета и выделении кишечного тракта от хоботка до анального конуса. Препаровка нервной системы ручным способом требует исключительных
/2
навыков; доступнее изучение ее производить по срезам. Срезами же пользуются для изучения трахей, сердца, жировой ткани, хода различных протоков органов, а также микроскопической анатомии всех систем.
Выпрепарованные органы очищаются от посторонних частей (обрывков хитина, жирового тела и пр.), расправляются на стекле, фиксируются жидкостью Карнуа, наклеиваются по способу Павловского, окрашиваются и заключаются в канадский бальзам (стр. 26).
Кишечный тракт Cullcoides, как и у других кровососущих двукрылых, начинается ротовым отверстием, лежащим между верхней губой (точнее — эпифаринксом) и гипофаринксом. Далее идет хитиновая коленчатая глотка, снабженная системой всасывающих и нагнетательных мышц (дилятаторов, сфинктеров и др.), переходящая через тонкий и короткий пищевод в желудок. На границе пищевода и желудка лежит так называемый преджелудок, имеющий форму небольшого узла; перед ним впадает продолговатый мешковидный зоб. В месте перехода от желудка к кишечнику пищеварительный канал принимает пару довольно толстых мальпигиевых сосудов. Кишечник заканчивается короткой прямой кишкой (rectum), несущей внутри пару яйцевидных ректальных желез. Анальное от-
Рис. 133. Схема внутреннего строения самки Cullcoides.
/ — основание усиков, 2 — глаз, 5 —слюнная железа, -/ — преджелудок, 5 — мыщцы, 6 — желудок. 7—мальпигиев сосуд, 8 — яичник, Р —трахея, 10— кишечник, 11 — сперматека, 12 — добавочная железа сперматеки, 13— яйцевод, // — зоб, /5 —пищевод, 16 — надглоточный нервный узел. /7 — глотка.
верстие открывается на последнем (10-м) сегменте брюшка, который невидим снаружи, так как втянут внутрь предыдущего.
Парные слюнные железы помещаются в грудном отделе. У самок они колбасовидной формы, с розеткой сферических пузырьков впереди; последние представляют собой резервуары для слюнного секрета, построенные из однослойного эпителия. Колбасовидная секреторная часть состоит из ромбических, сильно вакуолизированных клеток. Из центра розетки выходят слюнные протоки, сливающиеся в общий проток, впадающий в слюнный насос, сочлененный с гипофаринксом и лежащий в полости головы непосредственно под передним отделом глотки. Слюнный насос построен из хитина и имеет форму вогнутого двухстороннего
256
очередь подразделяется
диска. У самцов слюнные железы меньших размеров и яйцевидной формы.
Дыхательная система образована двумя продольными, латерально расположенными трахеальными стволами, от которых отходят ветви к дыхальцам и ответвления ко всем органам. Продольные стволы иногда бывают видны на тотальных просветленных препаратах.
Дорзально в полости тела лежит сердце в виде тонкостенной трубки. Обнаружить его можно только на срезах.
Центральная нервная система имеет два крупных ганглиозных скопления — головное и грудное, последнее в свою на передний отдел, лежащий в передне- и среднегруди, и заднегрудной узел, отделенный от предыдущего вилкообразным эндосклеритом. В брюшке расположено 6 нервных узлов, из них первые 5 равной величины, а последний, генитальный, самый крупный.
Внутренние гениталии самок представлены парными мешковидными яичниками, состоящими из наружного мешка и помещенного внутри гроздевидного собственно яичника. Через тонкую стенку мешка хорошо видны просвечивающие яйцевые клетки. При недоразвитых яичниках конечная часть мешка бывает стянута в виде длинного жгута, который расправляется по мере созревания яиц и увеличения яичника в размерах. Парные яйцеводы сливаются в общий яйцевод, канал которого открывается между 8 и 9-м брюшными стернитами. Выше яйцевода лежат сперматеки в виде хитиновых темнопигменти-рованных капсул сферической, грушевидной или ретортовидной формы. Число капсул от одной до трех; в последнем случае третья сперматека обычно бывает рудиментарной. Сперматеки имеют придаточную железу сфе
рической или яйцевидной формы. Протоки сперматек открываются отдельно от яйцевода на 9-м стерните.
Гениталии самцов (рис. 134) состоят из парных продолговато-овальных или грушевидных семенников, семяпроводов, впадающих в сложную по строению придаточную железу; ее строение находится в связи со сперматофорным оплодотворением, характерным для представителей рода Culicoides. Придаточная железа переходит в семяизвергательный канал, впадающий в копулятивный орган.
При вскрытии насекомых в промежутках между органами можно видеть беловатые куски рыхлой жировой ткани.
Рис. 134. Внутренние гениталии самца Culicoides nubeculosus.
1 — семенник,	2 — семяпровод,
3 — придаточная железа, 4 — семяизвергательный канал, 5 —мышца. Большое увеличение.
НЕКОТОРЫЕ НАИБОЛЕЕ РАСПРОСТРАНЕННЫЕ ВИДЫ
Для ознакомления с видовыми признаками наколотых мокрецов рассматривают при падающем свете под бинокуляром при увеличении 30—60 раз. Щетинки крыла (макротрихии) лучше видны при проходящем свете — под бинокуляром или под микроскопом (слабое увеличение). Длину крыла измеряют под микроскопом, при слабом увеличении, с помощью измерительного окуляра.
17 Зак. 3420. Лабораторный практикум медицинской паразитологии.	257
Culicoides pulicaris L.
Основной фон крыла светлый. Темные пятна выделяются резко, особенно пятно, расположенное посередине переднего края крыла. Темное пятно, находящееся у переднего края ближе к вершине крыла, имеет характерную форму — с перетяжкой посередине. Вершинная часть второй радиальной ячейки светлая. Ячейка между ветвями кубитальной жилки с темным пятном. Макротрихии покрывают большую часть пластинки крыла. Окраска спинки изменчива: изредка она одноцветная, чаще на сером фоне видны коричневые пятна сложных очертаний. Длина крыла от основания до вершины 1,5—2,0 мм.
Culicoides obsoletus Mg.
Основной фон крыла темный. Светлые пятна нерезко выражены; более четко выделяются 2 (иногда 3) светлых пятна у переднего края. Вершинная часть второй радиальной ячейки светлая. Отличительная особенность — слабое развитие макротрихий, которые имеются только в дистальной половине крыла, особенно у переднего края и вдоль жилок. Среднеспинка одноцветная, бурая. Мелкий мокрец: длина крыла 1,3—1,4 мм.
Culicoides fascipennis Staeg.
Крыло темное, лишь у переднего края имеется два светлых пятна — первое в виде поперечной полоски, второе округлое. Вторая радиальная ячейка целиком темная. Макротрихии густо покрывают почти все крыло, единичные макротрихии имеются и в базальной ячейке. Среднеспинка одноцветная, бурая. Размер средний: длина крыла 1,5—1,7 мм.
Culicoides nubeculosus Mg.
Отличается от предыдущих крапчатой среднеспинкой: у основания покрывающих ее волосков имеются небольшие темнокоричневые пятна, местами сливающиеся друг с другом. Щиток с коричневььм пятном, имеющим светлый центр. Рисунок крыла расплывчатый, темные и светлые участки занимают примерно одинаковую площадь. Вторая радиальная ячейка сплошь темная. Макротрихии покрывают большую часть поверхности крыла. Размер относительно крупный: длина крыла 2,2—2,5 мм.
ЛИТЕРАТУРА
Гуцевич А. В. К анатомии Leptoconops borealis Gutz. (Diptera, Heleidae). Паразит, сборн. Зоол. ин-та АН СССР, т. 10, 1948.
Гуцевич А. В. Мокрецы. Кровососущие двукрылые семейства Heleidae. Изд. АН СССР, 1956.
Долев Е. В. К экологии кровососущих насекомых рода Culicoides (мокрецов). Зоол. журн.» т. 31, в. 4, 1952.
Померанцев Б. И. К морфологии гениталий Culicoides (Diptera Nematocera). Паразит. сборн. Зоол. ин-та АН СССР, т. 3, 1932.
МОСКИТЫ - РОД PHLEBOTOMUS
Москиты — мелкие насекомые, 1,5—3 мм длиной, относятся к семейству бабочниц Psychodidae отряда двукрылых Diptera.
258
СБОР И ЗАГОТОВКА МАТЕРИАЛА
В СССР москиты встречаются в Крыму, на Кавказе и в Средней Азии. Они держатся в жилых домах, помещениях для домашних животных и птиц, заброшенных строениях, норах грызунов, расщелинах гор, пещерах.
Сбор москитов удобнее всего производить специальными москито-ловками. Москитоловка — стеклянный цилиндр длиною 180 мм и диаметром 40 мм (могут быть и другие размеры). С одной стороны внутрь цилиндра обращен стеклянный усеченный конус с вершинным отверстием 3 мм в диаметре,; с другой стороны в цилиндр вставлена, пробка, через которую пропущена стеклянная трубка; внутренний коней, трубки затянут марлей, а на наружный надета резиновая трубка.. Москитоловку подносят к насекомому и втягивают его в нее током воздуха при насасывании ртом через резиновую трубку. В одну москитоловку можно наловить 200—300 москитов. Особенно удобны москитоловки, приготовленные из небьющегося стекла. Если москитоловку оставляют на какой-то срок с живыми москитами, отверстие конуса-затыкают ватой. Для умерщвления москитов на вату капают эфир или хлороформ. Погибших москитов осторожно высыпают на лист белой бумаги (вынув пробку из цилиндра) и увлажненной кисточкой перекладывают в 75° спирт. Сбор можно производить химической пробиркой,, смоченной водой. Пробиркой накрывают москита, который при взлете-прилипает к ее влажным стенкам. Собранный материал смывают в 75° спирт. На дно пробирки можно помещать ватный тампон, смоченный эфиром. В этом случае после накрытия москита пробирку держат несколько секунд прижатой к стенке, затем стряхивают насекомое на дно. Собрав 10—15 москитов, осторожно перекладывают их в спирт. Если сбор делают сухой пробиркой, то после поимки насекомого между пробиркой и стеной пропускают лист плотной бумаги, которую прижимают пальцем к отверстию пробирки и затем отнимают ее от стены. Удалив бумагу, в пробирку вводят ватный тампон, оттесняемый пинцетом или палочкой ко дну пробирки, на расстояние одного сантиметра до дна. Ватные тампоны вводят после каждого пойманного москита,, оставляя расстояние между ними в один сантиметр. Когда пробирка заполнена, на верхнюю ватку капают эфир или хлороформ и москитоа перекладывают в спирт.
Для сбора москитов используют также листы бумаги, смазанные смесью касторового масла с канифолью (2:1). С этой целью один лист смазывают смесью, плотно притирают к нему второй, после чего листы разнимают. Размеры листов могут быть разные. Липкие листы развешивают по углам помещений, пещер или вставляют в норы животных свернутыми в трубку. Прилипших москитов собирают кисточкой,, смоченной крепким спиртом, перекладывают для отмывки в 95° спирт (минут на 25—30) и сохраняют в 75° спирту. Следует заметить, что для приготовления хороших тотальных препаратов такой материал мало пригоден, так как все волоски спадают с тела москита, ноги, крылья и другие придатки часто обламываются. Для систематического определения по внутренним органам он может быть использован почти полностью. Липкие листы — хороший способ не только для массовых сборов, но и для выявления москитов там, где их трудно заметить. Лист липкой бумаги можно прикалывать кнопками к прямоугольному листу фанеры размером 25 X 30 см, прочно прикрепленному к длинной палке. По углам к фанерному листу приклеивают пробки или кубики высотою в 3 см. Такой ракеткой (предложенной Е. Н. Павловским)
17*
259,
покрывают места стен, где сидят москиты, или проводят под углом вдоль стены, под потолком и т. д. Прилипших москитов собирают, как указано выше.
Некоторые виды москитов летят на свет, чем можно воспользоваться для их сбора. Источник света, около которого расстилают лист белой бумаги, устанавливают в комнате или вне помещения. Среди многочисленных насекомых, слетающихся на свет, москитов легко узнать по характерным прыжкам и «волосистости» тела. Их ловят быстрым прикосновением кисточки, смоченной спиртом, и сразу помещают в 75° спирт. Можно смазывать колпаки ламп керосином; из прилипших насекомых выбирают москитов и переносят в спирт.
Из нор диких грызунов москитов выгоняют дымом или тонкой длинной палочкой. Вылетающих москитов собирают в садок (трубчатый, продолговатый из марли или металлической сетки), который быстро приставляют к отверстию норы. В солнечный день потревоженные москиты «прыгают» при входе в нору, в тени, а не летят в пространство, освещенное прямыми солнечными лучами. Со стенок норы их собирают кисточкой, смоченной спиртом.
Для длительного хранения весь собранный материал помещают в небольшие цилиндрические пробирки с 75° спиртом, затыкаемые ватными тампонами так, чтобы между ними и спиртом не было бы воздуха. Пробирки укладывают рядами в большие банки с притертыми пробками. На дно банки кладут слой ваты, на который ставят первый ряд пробирок, затем новый слой ваты и новый слой пробирок и т. д. Банки заливаются 75° спиртом. В каждой пробирке должна быть этикетка, где •отмечают дату сбора, место, район поимки и фамилию собравшего. Например: Ашхабад, крольчатник при Хим.-бак. ин-те, 8/VII 1930, Иванов; Аул Нере, Кара-Калинский район, Туркмения, в кибитках, 10/VII 1930, Петров. При упаковке пробирок в банки рекомендуется составлять их опись.
ПРИГОТОВЛЕНИЕ ПРЕПАРАТОВ
Из материала, хранящегося в 75° спирту, готовят обычные бальзамные препараты, проводя москитов последовательно через 95° спирт, карбол-ксилол, ксилол. Москитов переносят в солонки или небольшие стеклянные чашечки с 95° спиртом, плотно закрывающиеся стеклом или крышками (при отсасывании и смене жидкости москитов не высушивать!). Хорошие тотальные препараты получаются, если перед заключением в канадский бальзам недавно убитых москитов наклеивать на предметные стекла целлоидином. Для этого еще гибкого москита кладут на предметное стекло, капают на него 95° спиртом и осторожно расправляют иглами (если необходимо; нередко насекомые ложатся так удачно, что расправлять их не приходится). В спирту выдерживают около пяти минут, сменяя его 2—3 раза. Последнюю порцию спирта сливают, наклоняя предметное стекло, и наносят на москита каплю 1/4% раствора целлоидина. Обсушив препарат на воздухе до появления пленки (около 7г минуты), опускают предметное стекло в банку с 95° спиртом на один час (можно и на более длительный срок), переносят в карбол-ксилол до полного просветления, споласкивают ксилолом и заключают в канадский бальзам.
Самок москитов, с целью систематического определения, необходимо предварительно обработать едким кали. Материал переносят из спирта в воду, минут на 10, затем в химическую пробирку с 3% раствором КОН (при переносе из спирта сразу в едкое кали в теле москита отлагаются кристаллы, портящие препарат). Кипятят на спиртовке до 2б(>
просветления глаз или оставляют в термостате часов на 10—15 при температуре 40—50° С. Просветленных москитов для промывки перекладывают в воду (минут на 10), меняя ее 2—3 раза, и переносят в гуммиарабиковую смесь, в капле которой отделяют голову от тела, поворачивают ее дорзальной стороной вверх и покрывают покровным стеклом. Если материал сразу после обработки едким кали не используется, то он может храниться в 75° спирту. Из этого материала готовят или бальзамные препараты (соблюдая последовательную смену жидкостей) или гуммиарабиковые. На препаратах, изготовленных указанным способом, структура шиповатого поля и особенности строения стенок ротовой полости хорошо видны. Сперматеки же не всегда отчетливы, несегментированные или слабо сегментированные вообще не видны. Для изучения сперматек материал, обработанный едким кали, кладут в смесь, состоящую из 5 частей уксусной кислоты и одной части 20% созревшей (т. е. потемневшей) пирогалловой кислоты (смесь готовят перед употреблением), и оставляют в термостате часов на 15—20 при температуре 60°. Перекрашенный материал обесцвечивают 10% раствором КОН в течение 1—2—3 часов. Окрашенных пирогалловой кислотой самок переносят в хлоралфенол (смесь из двух частей хлоралгидрата и одной части кристаллической карболовой кислоты), оставляя минут на 20 в термостате при температуре 60—70°, и заключают в канадский бальзам. При изготовлении хлоралфенола смесь ставят в термостат до образования жидкости. В эту смесь можно помещать свежий материал, спиртовой, размоченных засохших москитов и москитов без предварительной обработки едким кали и окрашивания. Минут через 20 москиты просветляются. Хорошо видна структура стенок ротовой полости, глотки (при надлежащем положении головы), сперматеки. Постоянные препараты готовят путем заключения просветленных самок в канадский бальзам.
Для приготовления препарата изолированной глотки самку москита, обработанную КОН, кладут на обезжиренное предметнее стекло в каплю воды, отделяют голову, поворачивают ее дорзальной стороной вверх и удаляют брюшко. Одну препаровальную иглу втыкают ниже глаза в боковую поверхность головы, прижимая ее к стеклу, другую — в наличник. Отводя последнюю иглу быстрым движением в сторону, извлекают глотку из головной капсулы. Оттягивая избыток воды фильтровальной бумагой, наносят на глотку каплю гуммиарабиковой смеси, так, чтобы глотка оказалась в центре капли, и покрывают покровным стеклом, осторожно прижимая его иглой к предметному стеклу. Препаровка проводится под бинокуляром или с помощью 10-кратной штативной препаровальной лупы. Положение глотки проверяют под микроскопом. Если глотка поворачивается боком, ей придают надлежащее положение (дорзальной стороной вверх), для чего двигают иглой покровное стекло в ту или иную сторону (до прижатия его к предметному). При извлечении сперматеки (что сложнее) одну иглу втыкают в грудь или в начало брюшка самки, обработанной КОН и лежащей в капле воды на обезжиренном предметном стекле, а вторую — в конец брюшка над стернитом восьмого сегмента, между ним и церками. Первой иглой москита прижимают к предметному стеклу, вторую иглу быстрым движением отводят в сторону, извлекая при этом сперматеку. Отсасывая лишнюю воду, на сперматеку капают смесью Карнуа и через минуту, не давая препарату высохнуть, каплю 95° спирта и приклеивают к стеклу !/4% раствором целлоидина. Если сперматека предварительно была окрашена пирогалловой кислотой, то препарат заключают в канадский бальзам, соблюдая последовательность переносов из
261
жидкости в жидкость, как указано выше. Капсулы сперматек можно окрашивать квасцовым кармином. В этом случае стекло с наклеенной сперматекой из 95° спирта переносится в 75°, потом в воду и на несколько часов в квасцовый кармин. Дальше приготовляют бальзамный препарат. Заключать отпрепарованные сперматеки в гуммиарабико-вую смесь не рекомендуется.
МЕТОДИКА ВЫПЛАЖИВАНИЯ
Самок москитов помещают в химические пробирки (длина 7 см, ширина 2 см), на одну треть заполненные чистым, мелким, хорошо увлажненным, но не перемоченным (лучше мелким морским) песком, поверх которого насыпают хорошо истолченный кварцевый песок. Сверху пробирка затягивается металлической сеткой или марлей, плотно охваченной резиновым кольцом (нарезается из резиновых трубок). Влажность песка поддерживается путем смачивания его по мере надобности водой, посредством тонкой стеклянной пипетки. Удобно пользоваться в качестве садков стеклянными цилиндрами (высота 6 см, диаметр 2 см), края концов которых отогнуты кнаружи. С обеих сторон цилиндр затягивают металлической сеткой или марлей (нижний конец— двойным слоем марли). Песок насыпают слоем в 2 см, кварцевый— 0,5 см. Для поддержания влажности садки устанавливают в ванночки с хорошо смоченным песком (не допускать его высыхания!). Внутренние стенки садков должны быть все время сухими. Если на них появляются капли воды, что нередко бывает при закрывании свободного конца ватным тампоном, москиты прилипают к стенкам и погибают. В садки пускают зрелых самок, которых узнают по раздутому беловатому брюшку. Откладка яиц может начаться в день посадки или на следующий, в других случаях яйцекладка начинается через три-пять дней или более длительные сроки. Отложенные яйца хорошо заметны на белом кварцевом песке. Вместо песка можно пользоваться кружками белой фильтровальной бумаги, но при этом чаще развивается черная плесень, губящая яйца и личинок.
Обычно на седьмой день, при температуре не ниже 20°, вылупляются личинки, которые хорошо видны в садке через 10-кратную лупу. В это время в садок закладывают питательный субстрат (лучшим являются экскременты кроликов, коз, овец, которые заранее собираются, хорошо просушиваются на солнце и хранятся в закрытых банках). Перед закладкой в садки экскременты измельчают, хорошо промачивают водой, после чего кладут между листами фильтровальной бумаги, которые слегка сдавливают. При этом получается в меру увлажненный субстрат, пригодный для помещения в садки. После появления личинок садки можно затыкать ватными тампонами, сохраняющими влажность, необходимую для их развития. Во время развития личинок питательный субстрат не должен пересыхать, иначе личинки неизбежно погибают. Лишь в период окукливания субстрат должен быть более сухим. Есть и другие типы садков, на которых останавливаться здесь не будем. Большое удобство садков-пробирок заключается в их портативности.
ИЗУЧЕНИЕ ПРЕПАРАТОВ
Самка москита. Наружное строение
Тотальный препарат самки москита (рис. 135), безразлично какого; вида, рассматривают при малом увеличении микроскопа.
Глаза, занимающие большую часть боковой поверхности головы,j большие, черные, круглые, по окружности различимы светлые фасетки1 262	'
(большое увеличение!). Усики — длинные, нитевидные, состоят из 16 члеников, прикреплены перед глазами, густо покрыты волосками разной длины и коленчатыми шипами (с 13 по 15-й членик), парными у самок и непарными у самцов (рис. 136); коленчатые шипы видны (под
Рис. 135. Москит, самка. Малое увеличение.
большим увеличением!) на препаратах, заключенных в гуммиарабико-вую смесь, если с усиков счищены волоски. Первый членик усиков очень короткий (большое увеличение!), лежит между глазом и вторым шаровидным члеником, всегда хорошо видимым и под малым увеличением; последующие членики удлиненно цилиндрические, слегка расширенные при основании; последний членик наиболее короткий, более или менее удлиненно овальный. Передний конец головы переходит в утолщенный
263
Рис. 136. Усики Phlebotomus с коленчатыми шипами. III и IV членики. Большое увеличение.
валик-наличник, дистальная часть которого покрыта торчащими волосками. К вентральной поверхности наличника прилегает нижняя губа. Она представляет собой широкую вытянутую пластинку с отчлененными концевыми дольками, несущими чувствительные волоски. Нижняя губа — мясистый орган с желобком на дорзальной поверхности, в котором залегают колющие части ротового аппарата. Комплекс их просвечивает вдоль верхнего края губы в виде удлиненной тонкой желтой полоски, обычно выдающейся за свободный конец нижней губы. Членистые, густо покрытые волосками, несколько изогнутые образования, расположенные над хоботком — пятичлениковые нижнечелюстные щупики. Их первый членик, очень короткий, лежит на нижней губе перед глазом и под проксимальным концом наличника (большое увеличение!). Остальные, сравнительно крупные членики, заметны хорошо (малое увеличение!). Чешуйки, покрывающие эти членики, рассматриваются при большом увеличении. Дорзальная часть и боковые поверхности головы несут торчащие волоски. При заделке препарата волоски головы, так же как и другие, легко спадают. Светлые площадки на наружном хитине, ограниченные плотным ободком (большое увеличение!), являются местами их прикрепления.
Грудь покрыта пучками длинных рыжеватых волосков. Границы между сегментами плохо различимы. Слабо выраженная поперечно лежащая бороздка за головой— граница передне- и среднегруди. На дорзальной поверхности груди, ближе к брюшку, заметен выступ, обращенный вершиной назад. Это щиток среднегруди, наиболее развитой, массивной части грудного отдела тела. Кпереди от основания щитка проходит вторая бороздка — граница средне-и заднегруди. Граница между грудью и брюшком выражена отчетливо. Бороздка,
разделяющая эти два отдела, начинается за щитком, идет вертикально вниз, сходя на нет при основании третьей пары ног. К боковой поверхности среднегруди прикреплены крылья. Крыло — большая, удлиненная, расширяющаяся пластинка, покрытая волосками. Жилкование отчетливо выступает, если волоски во время изготовления препарата спали или были предварительно счищены. Жилки верхней половины крыла называются радиальными. Вдоль середины крыла, упираясь в его вершину, проходит пятая радиальная жилка. Первая идет параллельно верхнему краю крыла. Между пятой и первой, ближе к основанию, легко заметить вторую продольную жилку, от которой приблизительно в середине отделяется четвертая радиальная, а ближе к вершине — третья. Эта двойная бифуркация второй радиальной жилки является признаком рода Phlebotomus.
264
Два булавовидных образования — рудименты второй пары крыльев — прикреплены к спинной стороне заднегруди и обычно направлены вверх, иногда во время заделки препарата они ложатся на тело москита и вершиной обращены вниз. С брюшной стороны к каждому из грудных сегментов причленена пара длинных ног. Граница между грудью и первым члеником ноги — тазиком обозначена хорошо заметной поперечной полоской. Тазик — несколько удлиненный., наиболее утолщенный членик, соединяется с очень коротким, но отчетливо различимым вертлугом, за которым следует длинное бедро. Все три членика покрыты короткими волосками. Голень, следующий членик,
Рис. 137. Конец брюшка самки Phlebotomus. Большое увеличение.
1 —тергит восьмого сегмента, 2 —тергит девятого сегмента, 3 — тергит десятого сегмента, 4 — стернит восьмого сегмента, 5 — церки.
уже и длиннее бедра. На голени, кроме волосков, имеются шипы, расположенные на дистальном конце этого отдела. Лапка, начинающаяся за этими шипами, состоит из пяти члеников, покрытых волосками и мелкими шипиками. Длина члеников постепенно уменьшается, начиная от первого. Пятый членик, наиболее короткий, заканчивается парой коготков.
Брюшко состоит из семи отчетливо различимых сегментов, покрытых многочисленными волосками, торчащими кверху — «стоячими» — или прилегающими — «лежачими». Границы сегментов найти легко. Овальная пластинка, выдающаяся на конце брюшка с вентральной стороны,— стернит восьмого сегмента (рис. 137,4). Тергит — очень узкая пластинка в своей верхней части и несколько расширенная в нижней. Тергит девятого сегмента представлен четырехугольной пластинкой, слегка вытянутой в поперечном направлении и лежащей перед церками. Последние — парные, более или менее овальные пластинки, расположенные на самом конце брюшка. Если конец брюшка сильно растянут, то между церками и тергитом девятого сегмента видна очень маленькая, удлиненно овальная пластинка, расположенная у верхнего края брюшка, — тергит десятого сегмента. Стернит восьмого сегмента и церки всегда хорошо видны.
265
На тотальном препарате самки просвечивают некоторые внутренние органы. В голове, позади глаз, иногда можно заметить (большое увеличение!) контуры расширяющегося в груди образования грушевидной или бутылковидной формы. Это — глотка. В ее расширенном основании
Рис. 138. Голова самки Phlebotomus papatasll. Большое увеличение.
1 — усик, 2 — нижнечелюстной щупик, 3 — хоботок. — наличник, 5 — глаз, 6 — глотка.
находятся многочисленные шипики, чешуйки и т. д., в целом образующие «шиповатое поле» — важный систематический признак, изучение которого, как указано выше, производится на особо приготовленных препаратах. В груди просвечивают широкие ленты — грудные мышцы. В брюшке заметны различные внутренние органы. Если для препарата взяты незрелые самки, недавно сосавшие кровь, виден мешковидный, наполненный кровью желудок. В зависимости от стадии пищеварения
2G6
Рис. 139. Глотка (справа) и сперматека (слева) самки Phlebotomus papatasii.
Большое увеличение.
в цилиндрические кап-
кровь представляется красно-бурой или черной массой. По краям желудка, если в нем мало крови, заметны длинные, узкие, изогнутые, темно- или светло-зернистые ленты — мальпигиевы сосуды. Если на препарате зрелая самка, то в ее брюшке просвечивают заполненные яйцами яичники в виде крупных удлиненно овальных тел. лежащих наискось друг над другом, во втором-восьмом сегментах брюшка. В зрелых яичниках хорошо видны (большое увеличение!) контуры яиц и даже характерная структура их оболочек.
Самка Phlebotomus papatasii Scop.
Рассматривают под большим увеличением (то же и при изучении следующих пяти препаратов). Голова отделена от тела и лежит дорзальной стороной кверху; тело рассматривается сбоку.
По краям головы расположены большие черные глаза (рис. 138), перед ними усики; между основаниями усиков наличник в виде крупной овальной части, переходящей в хоботок. В стороны от наличника отходят челюстные щупики. При вращении микрометрического винта в средней части головы появляются контуры бутылковидной глотки (рис. 138,5). Между глазами лежит передняя, суженная часть глотки. Вдоль всей глотки тянутся полоски— края хитиновых боковых пластинок, крышеобразно (под углом) сходящихся под дорзально лежащей пластинкой (на поперечном срезе глотка в форме треугольника, основание которого — дорзальная пластинка, а стороны — боковые пластинки). Приблизительно половина расширенного основания глотки несет на всех трех пластинках мелкие шипики, кутикулярные складки, чешуйки, которые налегают друг на друга и в целом образуют «шиповатое поле» глотки. Шиповатое поле Phlebotomus papatasii (рис. 139) более или менее однородное, состоит из’поперечно лежащих чешуек; тонкие контуры их переплетаются наподобие сети.
При рассматривании области седьмого-восьмого сегментов ближе к вентральной стороне тела заметен хитиновый стержень, относящийся к «вилке» хитиновой пластинки, охватывающей пузыревидное расширение вагины, в которое открываются короткие выводные протоки сперматек (рис. 139). Около стержня видны поперечно исчерченные каналы — выводные протоки сперматек. Они переходят
сулы, состоящие из 9—10 сегментов. В переднем из них — небольшая выемка, в ней «головка», маленькое округленное расширение, по краям которого выдаются два мелких шипа. Это характерный для Phlebotomus papatasii тип капсулы.
Самка Phlebotomus sergenti Parr.
Рассматривая голову со спинной стороны, следует обратить внимание на шиповатое поле глотки (рис. 140). Шипы удлиненные, изогнутые, расположены вдоль глотки. В средней части поля они многочисленны,
267
лежат густо, налегая друг на друга; по краям расположены реже. В самом основании поля — несколько неправильных рядов прерывистых точечных линий. В целом поле занимает широкий лентовидный участок, выражено отчетливо. Сперматека (рис. 140) с короткими выводными протоками. Капсула сегментирована, состоит в среднем из пяти сегментов. Первый, наиболее широкий, несет округленную головку, по краям которой шиповатых образований, как у Phlebotomus papata-sii, нет.
Самка Phlebotomus caucasicus Marz.
Шиповатое поле глотки (рис. 141) широкое, выражено нерезко. Задние ряды неправильных мелко точечных линий прерывистыми полосками лежат более или менее параллельно основанию глотки. Основная часть поля состоит из разнородных элементов — изогнутых тонких
Рис. 140. Глотка (справа) и сперматека (слева) самки Phlebotomus sergenii. Большое увеличение.
Рис. 141. Глотка (справа) и сперматека (слева) самки Phlebotomus caucasicus. Большое увеличение.
шипов, чешуек, небольших зазубренных полосок, расположенных наклонно к средней линии глотки. В целом картина -поля, благодаря разнообразию образующих его элементов, сложная. Отсутствие крупных однородных в своей массе шипов позволяет отличить Phlebotomus Caucasians от Phlebotomus sergenti. Phlebotomus caucasicus отличается от Phlebotomus papatasii отсутствием ясно выраженного сетевидного рисунка, с поперечным положением чешуек, глотки. Сперматека (рис. 141) типа Phlebotomus sergenti. Строение капсул сходно, 11исло же сегментов варьирует.
268
Самка Phlebotomies major An.
Шиповатое поле (рис. 142) занимает широкий лентовидный участок не вполне правильных рядов точечных линий, идущих от одного края поля до другого. Кпереди по средней линии глотки выдаются вперед широкие округленные чешуйки. Линии, лежащие в основании поля,
Рис. 142. Глотка (справа) и сперматека (слева) самки Phlebotomus major. Большое увеличение.
Рис. 143. Глотка (справа) и сперматека (слева) самки Phlebotomus chinensls. Большое увеличение.
имеют мелко точечную структуру, остальные — крупно точечную. Капсула сперматеки с 15 отчетливо выраженными валикообразными сегментами. Передний несет узкую, удлиненную трубку, свободный конец которой вздут и снабжен радиально расходящимися волосками. Это шейка и головка сперматеки. Выводные протоки исчерченные, короткие.
Самка Phlebotomus chinensls Newst.
Шиповатое поле (рис. 143) занимает большую часть расширенного основания глотки. В начале его хорошо заметны изогнутые линии, сплошные или прерывистые, без точечной структуры. Кпереди от них много острых шипов, особенно густо расположенных в центре поля. Они занимают более или менее треугольный участок, обращенный вершиною вперед. В целом поле выражено резко и на препарате вырисовывается отчетливо. Капсула сперматеки (рис. 143) бутылковидная. Сегментация неясная и неправильная. Обособленной шейки, как у Phlebotomus major, нет. Ей соответствует небольшой передний участок, лишенный следов сегментации, кончающийся маленькой головкой с отходящими от нее мелкими волосками. Выводные протоки очень длинные.
269
Самка Phlebotomus sogdianus Parr.
Перед глоткой (рис. 144), приблизительно на уровне середины глаз, заметна светлая щель, окруженная хитиновым ободком. Здесь глотка переходит в ротовую полость, задняя стенка которой снабжена зубцами; число, форма и расположение последних имеют существенное значение при определении самок группы minutus. У Phlebotomus sogdianus ротовое вооружение состоит в среднем из 35 хорошо выраженных, сравнительно широких зубцов, расположенных по слабо выгнутой линии
Рис. 144. Голова самки Phlebotomus sogdianus, Среднее увеличение.
Рис. 145. Глотка и вооруженная стенка ротовой полости (справа) и сперматека (слева) самки Phlebotomus sogdianus. Большое увеличение.
(рис. 145). При их основании заметен второй ряд маленьких, конусовидных зубчиков, имеющих вид точек, числом около 20. Следует обратить внимание на отчетливо выраженное коричневатое пигментное пятно, лежащее поперечно по линии зубцов. Шиповатое поле выражено резко, состоит из однородных, длинных острых шипов, расположенных полукруглыми рядами. Сперматека (рис. 145) с несегментированной овальной капсулой. Выводные протоки короткие, в конце сливающиеся в один.
Самец Phlebotomus papatasii
Рассматривают препарат под малым увеличением, москита ориентируют ногами назад. Голова и грудь, с их придатками, как у самки. Самец отличается наличием на конце брюшка наружного копулятивного аппарата. Двучлениковые образования — верхние щипцы. Оба членика 270
удлиненные; базальный (рис. 146,1) суживается к вершине и, помимо длинных торчащих волосков, несет, несколько отступя от вершины, пучок более коротких и обращенных вниз. При основании членика заметен маленький выступ приблизительно с десятью бугорками, из которых каждый несет очень короткий волосок. Концевой членик узкий, по длине почти равный первому, имеет, помимо волосков, 5 коротких шипов (т. е. длина шипа в несколько раз меньше длины членика), из которых 3 апикальные, а 2 помещаются несколько отступя от его вершины. Ввиду наличия шипов этот членик называется вооруженным. Все части наружного копулятивного аппарата парные. На препарате базальные членики верхних щипцов часто налегают друг на друга, тогда как вторые членики расходятся. Это приводит к неправильному представлению—будто бы от одного базального членика отходят два концевых.
Рис. 146. Наружный копулятивный аппарат самца Phlebotomus papatasii.
I —базальный членик верхних щипцов, 2—конечный членик верхних шипцов. 3 — промежуточные придатки, 4— копулятивная створка, 5 —нижние щипцы, 6 — срединные придатки. Большое увеличение.
Под основанием базального членика видны промежуточные придатки (рис. 146,5), по существу представляющие нижнюю ветвь верхних щипцов. Дистальная часть их блюдцевидпая, сжатая с боков, дорзально покрыта короткими волосками. Над этой частью имеется дугообразно изогнутый палочковидный придаток, вентральная сторона которого несет волоски, короткие и редкие при основании придатка, более длинные и густые при его вершине (большое увеличение!). Второй придаток, тоже палочковидный, но менее изогнутый, находится между обоими описанными. Это тип сложных промежуточных придатков, характерный для Phlebotomus papatasii. При основании этих придатков отчетливо видна небольшая темная треугольная пластинка — копулятивная створка (рис. 146,4). На препаратах копулятивные створки чаше налегают одна на другую. Узкие, удлиненные одночлениковые образования, лежащие ниже промежуточных придатков, — нижние щипцы (рис. 146,5). Помимо обычных длинных волосков они несут на конце 2—3 шипа, ввиду чего называются вооруженными. Такие щипцы встречаются только у Phlebotomus papatasii. Нижние щипцы окружают срединные придатки (рис. 146,5). На вершине последних открывается задняя кишка. Следовательно, нижние щипцы и срединные придатки имеют отношение к органам пищеварения, а не к наружному копулятивному аппарату.
271
В двух последних сегментах брюшка заметно своеобразное хитиновое образование, состоящее из стержня с конечными утолщениями, от которого отходят две хитиновые нити, упирающиеся в копулятивные створки. Это половой насос и копулятивные нити — части, относящиеся к внутреннему половому аппарату.
Самец Phlebotomus sergenti
Препарат рассматривают под большим увеличением. Базальный членик верхних щипцов укороченный, с суженной тупой вершиной (рис. 147). Особенность членика — узкий, удлиненный выступ на внутренней стороне, ближе к основанию, несущий 12—14 коричневатых, несколько изогнутых волосков. В целом образование называется «кисточкой». Концевой членик короткий, овальный, несет 4 длинных шипа
Рис. 147. Наружный копулятивный аппарат самца Phlebotomus sergenti. Большое увеличение.
(т. е. по длине шип равен членику или больше его). Шипы расположены на буграх, один на конце членика, второй несколько отступя от первого, третий в средней части членика, четвертый ближе к его основанию. Промежуточные придатки с четырехугольным основанием и широким блюдцевидным расширением, дорзальная часть которого покрыта мелкими волосками. Копулятивные створки как у Phlebotomus papatasiL Нижние щипцы невооруженные.
Самец Phlebotomus caucasicus
Наружный копулятивный аппарат (рис. 148) как у предыдущего вида, но более массивный. Под малым увеличением видно, что в том месте, где у Phlebotomus sergenti была узкая кисточка, у Phlebotomus caucasicus расположена более широкая. Рассматривая кисточку под большим увеличением, замечаем контуры широкого бугра, несущего пучок многочисленных волосков. Наличие кисточки говорит за принадлежность Phlebotomus caucasicus к группе «.sergenti», а форма ее характерна для этого вида.
272
Самец Phlebotomus major
Рассматривают препарат под малым увеличением. Членики верхних щипцов (рис. 149) сравнительно узкие, удлиненные. Базальный членик покрыт торчащими волосками, с пучком коротких, тонких, обращенных
Рис. 148. Наружный копулятивный аппарат самца Phlebotomus caucaslcus. Большое увеличение.
вниз волосков на средней части. Концевой членик с пятью сидящими на буграх длинными шипами, из которых 2 расположены на конце, а 3 в средней части членика, причем один шип обращен вперед,
Рис. 149. Наружный копулятивный аппарат самца Phlebotomus major. Большое увеличение.
а 2 шипа, сидящие на общем бугре, направлены назад. Если членики налегают друг на друга, их лучше рассматривать при большом увеличении. При сильном развитии бугров членик принимает не вполне
18 Зак. 3420. Лабораторный практикум медицинской паразитологии	273
правильную форму. Промежуточные придатки длинные, несколько суженные посередине. Основание их с вентральной стороны округленное. Здесь имеется 6—7 обращенных вниз щетинок. Дальше начинается дистальная часть придатков, сверху покрытая короткими волосками. Копулятивные створки в виде узких палочек, округленных на конце, почти равных по длине промежуточным придаткам. Нижние щипцы покрыты волосками, невооруженные.
Самец Phlebotomus chinensis
Препарат рассматривают под малым увеличением. Верхние щипцы наружного копулятивного аппарата (рис. 150) как у Phlebotomus major. Но членики длиннее, пучок волосков базального членика гуще и больше. На концевом членике сильно развиты бугры, на которых сидят шипы, вследствие чего членик имеет несколько неправильную форму. Промежуточные придатки по типу соответствуют таковым Phlebotomus major.
Рис. 150 Наружный копулятивный аппарат самца Phlebotomus chinensis. Большое увеличение.
От широкого основания они немного, но равномерно суживаются к концу. Срединного перехвата нет. Отсутствуют срединные вентральные щетинки, характерные для промежуточных придатков Phlebotomus major. С последними не следует путать волоски, покрывающие дорзально дистальную часть придатков, если при изготовлении препарата, вследствие надавливания, часть их поворачивается. В этом случае заметны обращенные вниз короткие волоски, расположенные в ряд вдоль всего края дистальной части промежуточных придатков. Копулятивные створки длинные, на самом конце имеют широкую вырезку или треугольный выступ (большое увеличение!). Половой насос лежит во втором и третьем сегментах, а не в последних, как у Phlebotomus major. Копулятивные нити очень длинные, образуют в брюшке многочисленные изгибы. По строению верхних щипцов Phlebotomus chinensis похож на Phlebotomus major. Вид определяется по деталям строения промежуточных придатков и копулятивных створок.
274
Сравнительные признаки строения наружного копулятивного аппарата самцов Phlebotomus
Таблица 11
	Наружные гениталии	Phlebotomus papatasil	Phlebotomus sergenti	Phlebotomus caucasicus	Phlebotomus major	Ph'ebotomus chinensls	Phlebotomus sogdlanus
	Верхние щипцы	Членики удлиненные. Базальный с пучком обращенных вниз волосков, расположенных в дистальной части членика. Концевой несет 5 коротких шипов	Членики укороченные. Базальный несет узкую «кисточку». Концевой членик более или менее овальный, несет 4 длинных шипа	Членики укороченные. Базальный несет широкую «кисточку». Концевой членик более или менее овальный, несет 4 длинных шипа	Членики удлиненные. Базальный с пучком обращенных вниз волосков, расположенных в средней части членика. Концевой членик несет 5 длинных шипов: два на конце, три в средней части	Членики удлиненные. Базальный с пучком обращенных вниз волосков, расположенных в средней части членика. Концевой членик несет 5 длинных шипов: два на конце, три в средней части	Членики удлиненные. Базальный членик без кисточки и без пучка волосков. Концевой членик несет 4 длинных шипа, расположенных при его вершине. Один или два шипа могут несколько смещаться кверху, но не заходят за границу задней трети членика
	Промежуточные придатки	Сложные	Простые, расширенные, укороченные	Простые, расширенные, укороченные	Удлиненные, на конце расширены, в середине перехват, перед ним вентрально пучок из 6—7 волосков	Удлиненные, на конце слегка сужены, перехвата и вентральных волосков нет	Удлиненные, в задней половине сужены, конец заострен, клювообразно загнут вниз
	Копулятивные створки	I u । Небольшие треугольники	Небольшие треугольники	Небольшие треугольники	Значительно удлиненные, с гладкими краями, на конце округлены	Значительно удлиненные, на конце вырезка или небольшой шип	Удлиненные, к концу сужены
3 ел							
Самец Phlebotomus sogdianus
Рассматривают препарат под большим увеличением. Размеры частей наружного копулятивного аппарата (рис. 151) небольшие. Базальный членик верхних щипцов не имеет ни пучка волосков, ни кисточки. Покрывающие его волоски наклонны к членику. Концевой членик несет 4 длинных шипа, сконцентрированных у вершины. Апикальных шипов
Рис. 151. Наружный копулятивный аппарат самца Phlebotomus sogdianus. Большое увеличение.
два, два субапикальных; один из последних может сильнее смещаться к средней части членика. На внутренней поверхности членика, между задней и средней третью, имеется тонкая длинная щетинка. Промежуточные придатки удлиненные, конец их загнут вниз, напоминает клюв ворона. Копулятивные створки длинные, тонкие, к концу сужены.
Сравнительные признаки строения копулятивного аппарата самцов рассмотренных выше видов даны в табл. 11.
Личинка Phlebotomus papatasii (IV стадия)
Личинка (рис. 152) рассматривается сбоку под малым увеличением. Она не окрашена. Голова хорошо обособлена, покрыта коричневатым хитином. Глаз нет. Треугольное, с загнутой вершиной, образование темного, почти черного, цвета — верхняя челюсть. При большом увеличении
Рис. 152. Личинка москита четвертой стадии. Большое увеличение.
отчетливо видны 4 зубца, характерные для верхней челюсти личинки этой стадии. Над верхней челюстью лежит крупное, светлое образование — верхняя губа, выдающаяся из-под наличника. С вентральной стороны голова ограничена продолговатой, почти черной пластинкой — нижней губой, или гребешком. При большом увеличении видны 5 зубцов, 276
лежащих друг над другом вдоль свободного края гребешка. Между гребешком и верхней челюстью заметна удлиненная светлая пластинка с зубчиками и волосками — нижняя челюсть (большое увеличение!). Голова несет несколько пар волосков. Различают волоски простые и шиповатые. Последние (большое увеличение!) состоят из стержня с многочисленными мелкими шипиками. Усики заметны лишь при большом увеличении. Их следует искать несколько отступя от основания верхних челюстей. Усики трехчлениковые. Третий членик наиболее крупный, в виде удлиненно овального светлого образования, с продольной бороздкой посередине, первые два членика маленькие, светлые, прямоугольные. Грудь состоит из трех сегментов, брюшко — из девяти. Все сегменты имеют по нескольку рядов шиповатых волосков, за исключением последнего, несущего 4 длинные хвостовые нити, по две на общем бугорке. Границы груди не всегда ясны благодаря различным бороздкам, ограничивающим особые кутикулярные площадки (структуры кутикулы здесь не рассматриваем). Между первым и вторым сегментами лежит переднее дыхальце, или стигма. Границы брюшных сегментов выражены отчетливо. Семь первых сегментов с ложными ножками, отходящими от дистального края. Последний сегмент имеет две вентральные лопасти, между которыми помещается анальное отверстие. Восьмой сегмент несет заднюю стигму (большое увеличение!) в дистальной части, на границе с девятым сегментом. Стигма находится на небольшом выступе, окружена светлыми розетками. Вдоль всего тела тянется трубка, обычно заполненная зернистой массой. Это кишечный канал личинки.
Личинки различных видов москитов по своему строению весьма сходны между собой.
Куколка Phlebotomus
Куколка (рис. 153) рассматривается сбоку под малым увеличением. Она не окрашена. Передний конец ее широкий. Грудь
выдается назад в виде бугра. Над ней голова с округленными пятнами желтого, красного или черного цвета — формирующимися глазами. Наличие черных глаз говорит за скорый вылет москита. Вентрально к голове и груди прилегают удлиненные пластинки. Здесь формируются усики, ноги и крылья москита. Брюшко — наиболее узкая часть — обычно несколько изогнуто. На самом конце брюшка — сброшенная шкурка личинки четвертой стадии, которую легко узнать по головной капсуле и хвостовым нитям.
ЛИТЕРАТУРА
Павловский Е. Н. Руководство по паразитологии человека. Т. II. Изд. АН СССР» 1948.
Перфильев П. П. Москиты. Фауна СССР. Насекомые двукрылые. Т. III, в. 2. Изд. АН СССР, 1937.
Петрищева П. А. Полевые методы изучения москитов и противомоскитные мероприятия. Медгиз, М., 1954.
277
МОШКИ—СЕМЕЙСТВО SIMULIIDAE
СБОР И ХРАНЕНИЕ МАТЕРИАЛА
Для отыскания личинок и куколок обследуют реки и ручьи, где происходит метаморфоз мошек. Осматривают стебли и листья водных растений, погруженные в воду ветви прибрежных кустарников, камни и т. д. Личинок узнают по характерным червеобразным движениям, грязно-зеленой или желтоватой окраске. Неподвижные куколки характеризуются башмаковидной (у большинства видов) формой коконов. В местах с быстрым течением поверхность извлекаемых из воды ветвей, палок, камней иногда почти сплошь бывает покрыта личинками и куколками мошек. В местах с медленным течением стадии развития мошек обычно менее многочисленны, а в стоячей воде они никогда не встречаются. При собирании материала отмечают характерные особенности соответствующих водоемов: скорость течения, температуру воды, характер субстрата, на котором оказались личинки и куколки (о методике измерения скорости течения см. И. А. Рубцов, 1956 а).
Личинки мошек в лабораторных условиях не развиваются. Поэтому их помещают в 95° спирт — на месте собирания или по возвращении в лабораторию, куда личинок доставляют, с субстратом или без него, в сосуде с водой. Собранных же куколок рекомендуется сохранять живыми для получения взрослых насекомых. С этой целью субстрат с куколками помещают без воды в банку, закрытую плотным ватным тампоном. Во влажном пространстве куколки дозревают и дают имаго. Через несколько дней помещают в спирт окрылившихся насекомых, куколок, не закончивших развитие (если такие окажутся), а также опустевшие коконы с оболочками куколок — они вполне пригодны для изучения наружного строения и для определения вида.
Наиболее простой способ получения взрослых мошек — отлов пробиркой или эксгаустером при нападении их на людей или домашних животных — коров, лошадей и др. Мошек, вьющихся около людей и животных, ловят сачком. Для определения численности нападающих насекомых применяют один из вариантов учетного колокола (А. С. Мон-чадский, 1952). Собранных взрослых мошек сохраняют в спирту или в сухом виде — в пробирках или на вате. Часть сухого материала рекомендуется наколоть на минуции. Для общего ознакомления с наружным строением мошек из спиртового материала (личинки, куколки, имаго) готовят микроскопические препараты в канадском бальзаме. На тотальных препаратах имаго насекомое обычно ложится боком. Чтобы рассмотреть спинную поверхность головы, последнюю перед заключением в бальзам отделяют и кладут спинной стороной кверху (надо проверить под бинокуляром или микроскопом).
Подробности, касающиеся методики изучения мошек, можно найти в специально посвященной этому вопросу книжке И. А. Рубцова (1956 а).
ИЗУЧЕНИЕ ПРЕПАРАТОВ
Для ознакомления с внешним строением мошек берут тотальные микроскопические препараты, а также насекомых, наколотых на минуции.
Самка Simulium sp.1
Тело насекомого (рис. 154) относительно толстое, ноги и усики более короткие, чем у других мелких кровососущих двукрылых (моски-
1 Имеется в виду род Simulium в прежнем понимании. В настоящее время семейство мошек разделено на большое число родов (И. А. Рубцов, 1956 б).
278
б
Рис. 154. Мошка (Slmuliuin ornatum). А —самец, Б — самка. (По И. А. Рубцову).
прилегают друг к дру-Первый членик уси-меньше других; члени-4—11-й приблизитель-одинаковы по вели-
соб-части: верх-
тов, мокрецов), вследствие чего мошки по общему облику напоминают мух. Мошки крупнее мокрецов и москитов; длина тела у большинства видов составляет 2,5—4 мм. Окраска, различимая только у сухих экземпляров, преимущественно темная, черноватая.
Голова сплющена в передне-заднем направлении. Большую часть поверхности ее занимают фасеточные глаза, разделенные сверху лобной полоской (рис. 155). Все фасетки у самок приблизительно одинаковы по величине. Усики 11-члени-ковые, короткие, не длиннее головы; членики плотно гу. ка ки но чине и форме; концевой членик, к вершине суженный, не выделяется своими размерами. Длинные волоски на усиках отсутствуют (отличие от мокрецов, москитов и комаров).
Хоботок короткий, значительно короче головы. В углублении нижней губы лежат ственно колющие две пары челюстей, няя губа и подглоточник. Мандибулы (верхние челюсти) имеют вид стинок, узких при вании ких в вине, много сидящих по обе стороны от вершины. Максиллы (нижние челюсти), в отличие от мандибул, сужены к вершине и на конце усажены более крупными узкая пластинка с мелкими волосками у вершины, конце несет 2 крепких зубца, каждый из них разделяется на 3 зубчика. Щупики длиннее усиков, пятичлениковые. Первые 2 членика малы и нерезко разграничены; поэтому некоторыми авторами щупики мошек описываются как состоящие из четырех члеников. На 3-м членике, как у москитов и мокрецов, помещается чувствительный орган, полость которого открывается наружу круглым или овальным отверстием; 4-й и 5-й членики длиннее предыдущих, причем последний членик уже, но длиннее предпоследнего. Оба вершинных членика усажены рядами мельчайших зубчиков, создающих впечатление поперечной исчерченности.
пла-осно-широ-поло-несут
и довольно вершинной
на конце мелких зубчиков,
зубцами. Гипофаринкс (подглоточник) — Верхняя губа на
279
1
Грудь относительно массивная, верхняя ее поверхность (средне спинка) выпуклая, «горбатая».
Крылья прозрачные, без пятен, широкие, относительно крупные будучи вытянуты вдоль тела, крылья заметно заходят за конец брюшк; Жилки лучше различимы в передней части крыла. Костальная (крае вая) жилка, немного не доходящая до вершины крыла, усажена много численными короткими, но крепкими шипиками. Субкостальная при соединяется к костальной у середины передней края крыла; на ней, у некоторых видов, такж-имеются шипики. Хорошо видна и первая ра диальная жилка, упирающаяся в край крыл; в месте окончания костальной жилки; радиаль ная жилка обычно покрыта волосками. Осталь ные жилки (задняя радиальная, медиальные кубитальные, анальная) слабо различимы; онг лучше видны у сухих экземпляров. Пластинка крыла покрыта мелкими волосками-микротри-хиями, различимыми лишь при сильном или среднем увеличении микроскопа. Более крупные волоски — макротрихии — на пластинке крыла отсутствуют.
Тазики ног относительно короткие и толстые; вертлуги почти неразличимы. Бедра и голени удлинены; голень в вершинной части значительно толще, чем при основании. Лапки состоят из 5 члеников, из них первый наиболее длинный, последующие укорочены; 4-й членик у некоторых видов имеет сердцевидную форму. Последний членик, обычно причленяющийся к пред
последнему под углом, несет 2 коготка, строение которых играет большую роль в систематике. Эмподий небольшой, в виде нежного стерженька, усаженного по бокам тонкими волосками. Пульвиллы отсутствуют. Голени и лапки передних, средних и задних ног устроены неодинаково. Их строение, а также окраска имеют большое значение для определения видов.
Брюшко состоит из 9 сегментов, причем 2 последних образуют наружные гениталии. В задней части брюшка просвечивает темная, хитинизированная сперматека грушевидной или шаровидной формы.
Рис. 155. Голова самки мошки сверху.
7 —лоб, 2 — усик, 3 — глаз, 4 — лицо, 5 — щупик, 6 — чувствительный орган, 7— максиллы, 3 — верхняя губа, 9 — подгло-точник, 10— мандибулы. Среднее увеличение. (По И. А. Рубцову).
Самец
Ниже указаны только отличия от самок. Глаза на спинной стороне головы соприкасаются. Фасетки верхней (большей) части глаза примерно вдвое крупнее фасеток нижней (меньшей) части. Строение усиков почти такое же, как у самок, длинных волосков на усиках нет. Щупики как у самки, но 3-й членик у самца короче, а находящийся на нем чувствительный орган слабее развит. Самцы мошек не являются кровососами; их ротовые органы характеризуются меньшим развитием челюстей, несущих на конце вместо крепких зубчиков нежные волоски. Зубцы на конце верхней губы не выражены. Задние сегменты брюшка изменены, образуя сложно устроенные наружные гениталии — гипопигий, строение которого играет важную роль в систематике.
280
Личинка последней стадии
Строение личинок (рис. 156, Л) изучают на микроскопических препаратах. Длина взрослой личинки достигает 5—6 мм. Удлиненное тело состоит из головы и И туловищных сегментов, границы которых неясно выражены. Голова квадратно-округлая, хитинизированная. Окраска (рисунок) верхней поверхности головы различна у разных видов, что используется при определении личинок. Привлекают внимание «веера» — расположенные по бокам переднего края головы придатки верхней губы, служащие для улавливания пищи. Каждый из вееров состоит из двучленистого стебелька и густого пучка изогнутых волосков, которые хорошо видны, если веера зафиксированы в расправленном
В
Рис. 156. Личинка и куколка мошки.
А —личинка, 2> —куколка, извлеченная из кокона, В —куколка в коконе. Среднее увеличение. (По И. А. Рубцову).
виде. Прочие ротовые органы на тотальных препаратах отчетливо не видны. Усики имеют вид относительно коротких, тонких, суживающихся к вершине стерженьков, состоящих из 4 члеников.
Следующие за головой 3 сегмента составляют грудной отдел, несущий на нижней стороне непарный мускулистый придаток («ложную ногу»), посредством которого личинка прикрепляется к субстрату. Придаток имеет вид усеченного конуса,; вокруг его вершины (функционирующей как присоска) расположены многочисленные острые шипики, образующие радиальные ряды. «Нога» способна укорачиваться и удлиняться; она состоит из двух члеников, причем вершинный может втягиваться внутрь основного. По бокам грудного отдела заметны 2 темных пятна; это спирально свернутые нити — формирующиеся органы дыхания будущей куколки.
Брюшной отдел имеет наибольшую толщину в задней трети. На заднем конце находятся присоска и 3 анальные жабры. Задняя присоска по строению сходна с присоской на конце ложной ноги, но отличается более крупными размерами и большим количеством радиально расположенных шипиков. Анальные жабры представляют собой короткие
281
нежные пальцевидные или разветвленные выросты, могущие впячиваться внутрь кожной складки, находящейся у анального отверстия.
Сквозь покровы личинки просвечивает заполненный пищей кишечник. Ниже его расположены 2 паутинные железы, обычно хорошо заметные на препаратах благодаря темной окраске. Железы имеют вид трубок, расширенных и петлеобразно изогнутых в средней части личинки, ближе к заднему концу. В передней части личинки железы суживаются и открываются наружу на брюшной стороне головы. Секрет паутинных желез служит для прикрепления личинки к субстрату и для построения кокона перед окукливанием. Иногда на тотальных препаратах видны и другие внутренние органы: мышечные пучки, ганглии брюшной нервной цепочки, а также мальпигиевы сосуды (числом 4), имеющие вид длинных извитых трубок приблизительно одинакового на всем протяжении диаметра.
Куколка
Тотальные препараты (под микроскопом) и спиртовые экземпляры (бинокуляр).
Куколки (рис. 156, Б и В) заключены внутри коконов, сплетаемых личинками перед окукливанием. Со строением кокона можно ознакомиться на препаратах, изготовленных из пустых оболочек, оставшихся после окрыления мошек. У разных видов коконы очень разнообразны по строению и форме. Чаще они имеют вид башмака. Стенка состоит из рыхло переплетающихся нитей. К заднему концу кокон сужен, на переднем конце расширен и открыт. У ряда видов в передней части кокона имеются окончатые отверстия, роговидные выросты, утолщенная каёмка («воротничок»).
Все тело куколки заключено внутри кокона, из которого торчат только дыхательные нити — органы кожного дыхания. Количество дыхательных нитей (2, 4, 6, 8 или больше) характерно для каждого вида и является важным признаком при определении куколок, так же, как и характер ветвления нитей, их длина, толщина и т. д. На хорошо просветленных препаратах куколок можно различить некоторые части формирующегося насекомого; особенно хорошо видны фасеточные глаза.
ЛИТЕРАТУРА
Берзина А. Н. Нападение мошек на человека в природе. Паразит, сборн Зоол. ин-та АН СССР, т. 15, 1953.
Мончадский А. С. Летающие кровососущие двукрылые — гнус (способы защиты и методы исследования). Изд. АН СССР, 1952.
Рубцов И. А. Мошки европейской части СССР и меры борьбы с ними. Изд. АН СССР, 1954.
Рубцов И. А. Методы изучения мошек. Изд. АН СССР, 1956 а.
Рубцов И. А. Мошки, Simuliidae. Фауна СССР. Насекомые двукрылые, т. 6, в. 6. Изд. АН СССР (2-е), 1956 б.
СЛЕПНИ - СЕМЕЙСТВО TABANIDAE
СБОР МАТЕРИАЛА
Сбор взрослых слепней
Для занятий нужны взрослые слепни, их яйца, личинки и куколки. Заготовку взрослых насекомых производят летом в июне-июле, в местностях, где они достаточно обильны. Для сборов нужно выбрать жаркий тихий день и проводить их около полудня в самое жаркое время: слепни 282
прилетают для нападения к человеку или к животным и в этот момент могут быть легко пойманы обычным энтомологическим сачком. Очень удобно слепней собирать просто руками на лошадях, привязанных к дереву или находящихся в упряжи. В жаркие дни слепни часто залетают в помещения — конюшни, скотные дворы, веранды, станционные помещения и т. д. и здесь скопляются на окнах, где они могут быть легко собраны руками.
Слепни живут в неволе сравнительно недолго, максимум 3—4 недели, поэтому материал для зимних занятий должен быть законсервирован. Если необходимо иметь зимой живой материал, то взрослые слепни могут быть выведены в лаборатории из собранных осенью личинок (см. ниже). Пойманных слепней немедленно умерщвляют в морилке (наиболее удобны морилки, заряженные цианистым калием или кусочками резины, пропитанными хлороформом) и затем накалывают на булавки или кладут на вату (стр. 10). Часть материала следует собрать в 70° спирт для последующего изучения строения ротового аппарата.
Перечисленными выше способами улавливаются лишь ищущие крови самки, тогда как самцы слепней, питающиеся растительной пишей, требуют иных способов поимки. Легче всего их ловить, пользуясь «лужами смерти», т. е. небольшими водоемами, поверхность которых покрыта керосином или нефтью. В жаркий день слепни (самцы и самки) прилетают сюда пить и, соприкасаясь с маслянистой пленкой, погибают и остаются плавать на поверхности. Погибших слепней немедленно извлекают и затем тщательно отмывают от керосина (или нефти) в нескольких порциях серного эфира (или хлороформа, бензина и т. п.). Полученные таким путем экземпляры почти не изменяют своего вида. Следует иметь в виду, что некоторые виды слепней, например дождевки, в «лужи смерти» не летят. Живыми самцы слепней могут быть пойманы на цветах, на стволах деревьев, на изгородях, затем парящими в воздухе и т. д. Но нахождение их требует специальных навыков и часто является случайным.
В тех случаях, когда нужно на некоторое количество времени поддержать жизнь взрослого слепня, поступают следующим образом. Насекомое помещают в небольшую стеклянную баночку (удобны, например, пилюльные баночки с отверстием диаметром в 4 см), на дно которой насыпают слой влажного песка и втыкают несколько стебельков злаков или осоки. Ежедневно насекомое подкармливают сахарным сиропом. Сосуды со слепнями лучше держать в полутемноте (прикрыть сверху листом бумаги!), чтобы насекомые вели себя спокойнее. Для этой же цели у слепней можно подстричь крылья.
Сбор кладок яиц
В местностях, изобилующих слепнями, сбор кладок яиц не представляет особых затруднений, нужно только знать, когда и где их искать. Самки слепней, насосавшиеся крови, откладывают компактные кучки склеенных между собой яиц на различных растениях, растущих в воде или по берегам ручьев, рек, озер, прудов, канав, заболоченных ям, по окраинам болот и т. д. Места яйцекладок обычно располагаются по соседству с пастбищами скота, проезжими дорогами и т. д. Для откладки самки выбирают растения, хорошо освещаемые солнцем. Яйца обычно помещаются на известной высоте над водой на нижней поверхности листа или на стебле растения. Одна кладка содержит несколько сот яиц. Яйца вначале молочно-белого цвета, но затем на солнце быстро темнеют и становятся бурыми, серыми или блестяще-черными
283
(в зависимости от вида слепня). Благодаря своему темному цвету кладки легко бросаются в глаза при осмотре растений. Наиболее успешны поиски кладок яиц в самое жаркое время лета, т. е. в конце июня и в первой половине июля, когда происходит наиболее энергичная яйцекладка, тогда как позже и ранее этого периода яйца слепней обнаруживаются с большим трудом. Найденные кладки срезают вместе со стебельком или листом, на котором они расположены, и помещают в банку с 70° спиртом. Следует иметь в виду, что кладки некоторых видов слепней при неосторожном прикосновении легко отскакивают от субстрата, к которому они приклеены, и затем рассыпаются. Поэтому нужно избегать класть в одну банку много материала.
Сбор личинок
Сбор личинок слепней легче всего проводить весной, с наступлением теплого времени (конец апреля—начало мая), когда перезимовавшие личинки заканчивают свое развитие и имеют наиболее крупные размеры. Но если нужно заготовить к зимним занятиям живой материал, сбор личинок может быть с успехом сделан и в осеннее время—-в сентябре и в начале октября. Личинки большинства видов слепней ведут водный или полуводный образ жизни, обитая в воде или в прибрежных частях ручьев, рек, озер, прудов, канав, в болотах и в заболоченной почве и т. д. Личинки хищничают за счет мелких моллюсков, насекомых и червей или питаются полуразложившимися органическими остатками. По мере роста личинки могут переместиться в более сухие места и закончить свое развитие в почве на некотором расстоянии от водоемов. Личинок добывают путем тщательного просмотра проб. Почвенные пробы берут лопатой, моховые — металлическими граблями,; взятую массу тут же тщательно перебирают руками. Пробы берут из поверхностных частей субстрата, на глубину не свыше 4—6 см. Размер проб V2 м2. Пробы со дна или из береговых частей водоемов берут лопатой, помещают в сито с металлической сеткой (с ячейками в 2 мм) и затем промывают в проточной воде.
Нахождение личинок довольно затруднено их одиночным образом жизни в природе, однако тщательные и настойчивые поиски всегда вознаграждаются успехом. Так как личинки многих видов слепней в неволе проявляют каннибализм (кроме некоторых Chrysops), собранных личинок необходимо размещать поодиночке в небольшие стеклянные сосуды. Для этой цели удобнее всего применять упомянутые выше пилюльные баночки или колбы Эрленмейера емкостью 25 см3, отверстие которых затягивают бязью и закрепляют ее с помощью резинового кольца; на дно сосуда кладут субстрат, в котором личинка была найдена (мох, песок, ил и т. д.), и приливают немного воды. Хищных личинок по мере надобности подкармливают нарезанными на куски дождевыми червями, моллюсками и т. д.
Собранные осенью личинки могут жить месяцами, причем их кормление не обязательно; для этого личинок нужно держать при температуре, не превышающей комнатную, лучше даже немного ниже (8—12°), и время от времени приливать на дно немного воды. В зимнее время из достаточно крупных личинок можно получить при желании куколок и взрослых слепней. Для этого личинок подкармливают и держат в термостате с температурой около 28°. Если нет необходимости содержать личинок живыми, их фиксируют крутым кипятком (или одной из жидкостей, рекомендованных на стр. 28) и перекладывают для хранения в 70° спирт.
284
Сбор куколок
Куколок слепней следует искать теми же методами и в тех же местах, что и личинок. Куколки обычно располагаются в несколько более сухих, поверхностных частях субстрата, головным концом вверх. Несмотря на плотную оболочку, они очень нежны и легко гибнут при неосторожном надавливании на поверхность тела. Наилучшим временем для сбора куколок является середина — конец мая, когда их легче всего обнаружить. Собранных куколок фиксируют крутым кипятком и перекладывают в 70° спирт. Если нужно вывести имаго, куколку помещают головным концом вверх в какой-либо стеклянный сосуд, колбу Эрленмейера, чашку Коха и т. д. В качестве субстрата можно положить мох, который слегка увлажняют по мере надобности. Фаза куколки длится в зависимости от температуры от 5—7 дней до 3 недель.
Живые куколки могут быть получены в лаборатории зимой из собранных заранее личинок. Следует иметь в виду, что для общего ознакомления с куколкой на занятиях можно с успехом использовать пустые куколочные шкурки, из которых вышли взрослые слепни. В таких случаях можно совершенно точно установить видовую принадлежность куколки и ее пол. Пустую куколочную оболочку отмывают от приставших к ней посторонних частиц субстрата, подсушивают на фильтровальной бумаге, накалывают на энтомологическую булавку и этикетируют.
ИЗУЧЕНИЕ ПРЕПАРАТОВ Взрослые слепни Наружное строение
Изучается на сухом материале, заготовленном летом. Слепни должны быть предварительно наколоты на энтомологические булавки. Рассмотрение слепней следует производить, пользуясь ручной лупой с увеличением 12—16 раз.
Тело слепня явственно разделено на три отдела: голову, грудь и брюшко.
Голова (рис. 157, 158) большая, спереди выпуклая, равная по ширине груди или шире её. Сложные, или фасеточные, глаза (рис. 157, 158) занимают по бокам большую часть головы, при жизни красиво и ярко окрашены в различные цвета с металлическим оттенком: зеленый, коричневый, пурпуровый, синий и т. д. Часто на глазах имеются более темные пятна или поперечные полоски, число и расположение которых имеет известное систематическое значение. У сухих коллекционных экземпляров раскраска глаз и полоски исчезают, но могут быть восстановлены после непродолжительного (несколько часов) выдерживания в камере с влажным песком. Фасетки глаз у самок почти одинаковой величины, тогда как у самцов фасетки верхних частей глаз часто значительно крупнее фасеток нижних, с резкой границей между теми и другими. У некоторых видов слепней глаза бывают совершенно голые, тогда как у других покрыты короткими густыми волосками. Для того чтобы лучше разглядеть этот признак, необходимо глаза слепня рассматривать в лупу сбоку против света. Помимо сложных глаз, у многих слепней (Chrysops, Silvius, Pangonia) на темени имеются 3 простых глазка (ocelli) (рис. 158), обычно расположенных треугольником на плоскохм возвышении или бугорке. У других слепней {Tabanus) глазки редуцированы и заменены небольшим глазковым бугорком (рис. 157). Наконец,
285
у ряда видов слепней (Chrysozona, частью Tabanus) темя лишено каких-либо образований. У самок сложные фасеточные глаза разделены лобной полоской (рис. 157), тогда как у самцов глаза соприкасаются. По этому признаку самцы очень легко отличаются от самок при самом поверхностном осмотре. Лобная полоска самки покрыта матовым налетом
Рис. 157. Голова самки Tabanus fulvlcornls.
1 — срълутя лобная мозоль, 2 —глазковый бугорок, 3 — лоб, 4— глаз, 5 — щека, 6 — наличник, 7 — нижнечелюстные щупики, 8 — хоботок, 9 —усиковая ямка — место прикрепления усиков, 10 — лобный треугольник, 11 —нижняя лобная мозоль.
Рис. 158. Голова самки Chry-sops caecutlens.
1 —глазки, 2—лобная мозоль, 3 — глаз, 4 — усиковая ямка, 5 — лицевая мозоль, 6 — наличник, 7 — нижнечелюстные щупики, 8 — хоботок, 9—щечная мозоль.
и обычно несет отграниченные участки выпуклого и блестящего хитина — лобные мозоли. По месту их расположения на лбу различают среднюю и нижнюю лобную мозоль (рис. 157). Задняя сторона головы, включая узкую полоску позади глаз, носит название затылка. Верхний
край затылка иногда бывает снабжен рядом длинных волосков, выступающих над поверхностью глаз.
Усики (рис. 159) прикрепляются спереди к центральной части головы и имеют вид двух торчащих вперед рожков. Они сближены основаниями, длинные и явственно разделены на три членика. Третий (т. е. концевой) членик в свою очередь поделен на несколько вторичных члеников, или колец, причем базальный членик, назы-обычно сжат с боков и удлинен, тогда
Рис. 159. Усик Tab anus fulvlcornls.
I — III — членики, 1 — дорзальный угол, 2 — площадка, 3— палочка.
ваемый площадкой (рис. 159),
как маленькие концевые членики имеют более или менее цилиндрическую форму и в совокупности образуют палочку (рис. 159). У рода Heptatoma вследствие наличия резких перемычек между отдельными члениками палочки, усики кажутся 6-члениковыми, а у Pangonia — даже 10-члениковыми. У рода Tabanus площадка в основании сильно дорзовентрально расширена и несет на верхней стороне выступ—дорзальный угол (рис. 159), за которым часто следует вырезка.
286
Над местом прикрепления усиков расположен лобный треугольник (рис. 157). У самок он имеет форму трапеции и вершиной граничит с основанием лобной полоски. Лежащая ниже места причленения усиков часть головы носит название лица. Последнее состоит из слегка выпуклой средней части — наличника (рис. 157) и резко отграниченных от него глубокими бороздками щек. Обычно у слепней лицо покрыто матовым налетом и волосками, но у некоторых видов (Chrysops) на лице имеются хорошо развитые участки выпуклого и блестящего хитина —
лицевые мозоли; у немногих видов налет может совершенно отсутствовать, и в таком случае лицо целиком блестящее, как бы покрытое
лаком.
Снизу к голове причленяется ротовой аппарат, имеющий вид массивного хоботка. Обычно хоботок не превышает длины головы, но
у слепней из рода Pango-nia он очень сильно развит и иногда бывает равен по длине всему телу. К основанию хоботка прилегают нижнечелюстные щупики, по одному с каждой стороны (рис. 157). Щупики состоят из двух члеников, причем у самцов конечный членик короткий, конусовидный, яйцевидный или шарообразный, тогда как у самки он вытянут и заострен
Рис. 160. Крыло Tab anus rust teas.
Жилки: С —костальная, SC — субкостальная, г — радиальные,-т — медиальные, си — кубитальные, ап— анальная, ар —придаток жилки r4, гт — радиомедиальная. Ячейки:	—радиальные,
Р — заднекрайние, D — дискоидальная, В — базальные, Ап — анальная; 1 — закрыловая пластинка, 2— крылышко.
на конце.
Грудь широкая и массивная, с большим треугольным щитком позади. Как и у всех двукрылых, она состоит из неясно разграниченных между собой трех сегментов: передне-, средне- и заднегруди; средне-грудь развита наиболее сильно. На спинной стороне в передних углах бороздкой отграничены плечи. Кроме того, кпереди от места прикрепления крыльев расположены хорошо заметные нотоплевры, по одной с каждой стороны, представляющие собой треугольные выступы, плоско прижатые к бокам спинки. Боковые стороны груди (плевры) состоят из отдельных пластинок, из них наиболее крупная носит название мезоплевры. На боках передне- и заднегруди хорошо заметны крупные дыхальца, или стигмы. Грудной отдел покрыт более или менее густыми и тонкими волосками; в систематике некоторую роль играет их окраска, тогда как число и расположение не имеют существенного значения.
К боковым сторонам среднегруди присоединены крылья, в числе 1 пары (рис. 160). У слепней крылья широкие, с обильным жилкованием, более или менее однообразным в пределах семейства. Жилкование хорошо удается рассмотреть в лупу уже при небольших увеличениях. Различают следующие жилки: костальную, обходящую наружный передний край крыла, субкостальную, 4 радиальные, 3 медиальные, 2 кубитальные и анальную. Между 5-й радиальной (4-й по счету, не считая костальной) и 1-й медиальной имеется короткая поперечная радиомедиальная жилка. Кроме того, третья по счету радиальная жилка в месте изгиба часто имеет небольшую придаточную жилку, направленную к основанию крыла. Перечисленные жилки образуют на крыле следующие ячейки: костальную, субкостальную, 3 радиальные, 2 базальные (верхняя и нижняя базальные ячейки), дискоидальную,
287
5 заднекрайних и анальную. В основании крыла снизу имеется хорошо заметное крылышко (allula) и пара закрыловых пластинок, налегающих друг на друга. У различных видов слепней крылья бесцветные или с темными перевязями, пятнами, или серые со светлым сетчатым рисунком (мраморные). Позади основания крыльев на груди расположены жужжальца, т. е. рудименты задней пары крыльев. Жужжальца состоят из узкого стебелька и булавовидной головки, окрашены в белый, желтый или черно-коричневый цвет.
Снизу к груди причленяются ноги в числе трех пар. Они умеренной длины, покрыты волосками, без грубых щетинок. Каждая нога состоит из следующих частей, считая от основания: тазик (утолщенный членик, соединяющий ногу с грудью), вертлуг (маленький, плохо заметный), бедро, голень и пятичлениковая лапка. На конце последнего членика лапки имеется пара крепких коготков и под ними три хорошо развитые присоски: боковые — пульвиллы и расположенный между ними эмподий (рис. 161). Обычно голени средней пары ног на самом конце бывают снабжены парой сидящих рядом крепких щетинок, так называемыми шпорами. Эти же шпоры у некоторых видов слепней имеются и на задних голенях. Этот признак требует внимательного рассмотрения и весьма существен, так как характеризует целое подсемейство Pango-niinae, куда Silvias и др.
Брюшко широкое, сжато сверху вниз, состоит из семи пар видимых полуколец: верхних— тергитов и нижних — стернитов. На границе полуколец, на интерсегментальной перепонке, расположены брюшные стигмы, по паре на каждом сегменте. У самцов брюшко имеет коническую форму, у самок — округлую. У некоторых видов Tabanus последние сегменты брюшка бывают слегка сжаты с боков. Окраска брюшка, играющая большую роль при определении ряда видов, состоит обычно
из темного (черного) фона с более светлыми красно-желтыми боковыми пятнами, в той или иной мере вытесняющими темную окраску. Рисунок дополняется налетом и коротким волосяным покровом, образующим в комбинации каймы, ряды различной формы пятен и т. д. Слепней часто ошибочно называют оводами, от которых слепни легко отличаются уже при поверхностном осмотре своими большими красивыми глазами и наличием колющего хоботка.
Наиболее обычными у нас являются слепни родов Tabanus, Chry-sops и Chrysozona,
Z
Рис. 161. Задняя нога Chry-sops.
А —нога, Б— последний членик лапки при сильном увеличении. 1 —бедро, 2—голень, 3 — шпоры, 4 — лапка, 5 — пульвилла, 6 — коготок, 7 — эмподий.
входят роды Pangonia, Chrysops,
Род Tabanus L. — настоящие слепни
Коренастые, большей частью крупные виды. Крылья бесцветные или слегка затемненные по переднему краю, в покое слегка расставлены. Усики (рис. 159) длиною с голову или слегка длиннее; первые два членика маленькие, бокаловидные, 3-й членик неправильной формы, сильно 288
сжат с боков, площадка с угловидным дорзальным выступом. Палочка состоит из четырех вторичных члеников. На темени часто имеется хо-рошо заметный глазковый бугорок (рис. 157). Глаза у живых насекомых часто с 1—4 горизонтальными полосками. Задние голени без концевых шпор.
Род Chrysops Mgn. — пестряки, златоглазики
Стройные, средних размеров, пестро окрашенные мухи. Усики длиннее головы. Первый и второй членики цилиндрические, длинные, второй лишь едва короче первого. Третий членик узкий, длинный; площадка без дорзального выступа; палочка 4-члениковая. Глазки на темени имеются, в числе трех (рис. 158). Лицо с более или менее развитыми блестящими мозолями. Глаза при жизни очень яркие, с пятнами и небольшими вертикальными полосками. Крылья с резким рисунком из темных поперечных полос и пятен, в покое расставлены в стороны. Задние голени с концевыми шпорами (рис. 161),
Род Chrysozona Mgn. — дождевки
Мелкие, с узким телом, одноцветно-серые виды. Усики длиннее головы; их первый членик яйцевидный или цилиндрический, второй —-короткий, бокаловидный, третий — веретеновидный, с слегка расширенной площадкой. Палочка состоит из трех вторичных члеников. Темя без глазков или глазкового бугорка. Глаза при жизни неяркие, с горизонтальными волнистыми полосками. Крылья серые или буроватые, с более светлым сетчатым рисунком, как бы «мраморные», в покое сложены кровлеобразно вдоль тела. Задние голени без концевой шпоры.
Строение ротового аппарата
Для изучения ротового аппарата необходимо иметь слепней, законсервированных в спирту. В крайнем случае можно использовать сухой
материал, но его предварительно вымачивают сутки в 10% растворе едкого кали. Препаровку производят под лупой (на штативе) или под бинокуляром при помощи двух препаровальных игл. На предметное стекло наносят 1—2 капли дистиллированной воды, кладут туда отсеченную голову слепня и приступают к препаровке. Ротовой аппарат при-членен к нижней стороне головы и имеет вид хоботка (рис. 162). Голову поворачивают затылочной стороной вверх и иглами последовательно отчленяют отдельные части ротового аппарата. Отпре-парованные ротовые органы рассматривают под лупой в капле воды или же из них приготовляют постоянный препарат в канадском бальзаме (способ приготовления см. стр. 26). Такие препараты могут быть затем детально рассмотрены под микроскопом при небольших
Рис. 162. Ротовой аппарат самки Tabanus tarandlnus in situ.
1 — наличник, 2 — нижнечелюстные щупики, 3— нижняя губа, 4 — колющая часть хоботка.
увеличениях и зарисованы.
Хоботок слепня слагается из массивной, мягкой, черно окрашенной нижней губы (рис. 162, 163), в желоб которой вложен крепкий, хитиновый
19 Зак. 3420. Лабораiирный практикум медицинской паразитологии.
289
колюще-режущий аппарат (рис. 162). Нижняя губа на свободном конце разделяется на две широкие лопасти (labellae), которые с внутренней стороны изборождены лежащими параллельно друг другу поперечными желобками (псевдотрахеями), наподобие таковых у хоботка комнатной мухи. Колющий аппарат состоит из шести тонких, стилетообразных, коричневоокрашенных пластинок, образующих сосальце: желобчатой верхней губы (рис. 163), пары саблевидных или ножевидных, верхних челюстей, пары тонких, в поперечном сечении трехгранных нижних челюстей, снабженных двухчлениковыми нижнечелюстными щупиками, и узкого пятигранного подглоточника, пронизанного на всем
Рис. 163. Изолированные ротовые части самки Tabanus tarandlnus.
1 —нижние челюсти, 2 —верхние челюсти, 3 — верхняя губа, 4 — гипофаринкс (язык), 5 —нижняя губа, 6 — кардо, 7 —стипес, 8— нижнечелюстной щупик.
протяжении слюнным протоком. Вершинная треть внутреннего края верхних челюстей, шиловидные концы нижних челюстей и кончик верхней губы снабжены тонкими зазубринами, направленными остриями назад (рассматривать под микроскопом!). Колющий аппарат служит для прокалывания кожи и сосания крови, тогда как нижней губой слепень подлизывает различные сладкие соки или утоляет жажду. У самцов верхние челюсти редуцированы, что находится в связи с особенностями их питания (только растительными соками).
Внутреннее строение
Общее ознакомление с внутренними органами слепня может быть произведено посредством препаровки живых насекомых. В зимнее время живых слепней можно получить путем выведения их в лаборатории из личинок, заранее собранных осенью в природе (см. выше). Препаровку производят препаровальными иглами в стеклянной ванночке с восковым дном, куда наливают физиологический раствор. Слепня помещают спинной стороной кверху и прикрепляют к восковому дну энтомологическими булавками (рис. 164). Вскрытие ведут под лупой или, еще лучше, под бинокуляром.
Остро отточенной препаровальной иглой на брюшке слепня разрывают межсегментальную перепонку на границе 2 и 3-го тергитов и продолжают разрыв далее до предпоследнего сегмента по линии соедине-290
Рис. 164. Линии разрезов хитиновых покровов. 1, 2, 3 — точки прикрепления булавками.
мышц, насасы-
ния верхних и нижних полуколец. Отсеченную верхнюю стенку брюшка осторожно отводят назад, обнажая внутренние органы, и прикалывают ее булавкой к восковому дну, при этом нижнюю часть брюшка несколько растягивают (рис. 164). Далее копьевидной иглой рассекают продольно посередине грудной отдел и при помощи булавок разворачивают его лодочкой в стороны (рис. 164). При вскрытии грудной полости бросаются в глаза мощные летательные мышцы, занимающие большую часть ее объема. Рассекают мышцы по всей толщине и под ними обнажают переднюю часть пищеварительного тракта. В передней части брюшка расположена пара крупных воздушных мешков, которые имеют вид неправильных по форме белых пузырей, с очень тонкой оболочкой, легко рвущейся при вскрытии и всплывающей на поверхность. По бокам полости тела видна пара продольных трахейных стволов, ветвящихся на более мелкие боковые трахеи, пронизывающие всю полость тела. Трахеи имеют вид серебристых трубок. Особенно густо оплетены трахеями желудок и половые органы самки.
Внутренние органы (рис. 165), в особенности находящиеся в полости брюшка, оплетены тонким слоем беловато-желтого жирового тела, внешний вид которого слегка напоминает кружево. Дорзально в полости тела расположена тонкая, полупрозрачная, желтовато окрашенная трубка — сердечный сосуд; при вскрытии свежего насекомого можно легко проследить его пульсацию. Задним концом сердце прикреплено к границе 6-го и 7-го тергитов брюшка, тогда как передний конец трубки открывается в голове.
Удалив осторожно иглами жировое тело, воздушные мешки, сердечный сосуд и порвав более крупные трахеи, переходят к рассмотрению пищеварительного тракта (рис. 166). Последний начинается ротовым отверстием, лежащим в голове в основании хоботка. За ним следует короткая глотка, окруженная сложной системой
вающих и перегоняющих кровь в желудок через следующий за ней короткий пищевод. В месте соединения желудка с пищеводом в последний открывается зоб, имеющий вид тонкой трубки, на свободном конце расширенной в двойной резервуар. Зоб служит для воды и сладкой растительной пищи, из зоба жидкость поступает затем в желудок. Последний довольно длинный, состоит из двух отделов — переднего и заднего. Передний отдел имеет форму длинной трубки с рыхлыми стенками, расширенной на переднем конце в два плоских крыла. Задний отдел представляет собой объемистый мешок, растягивающийся от поступающей в него крови в несколько раз. В просвете заднего отдела имеется очень тонкая перитрофическая мембрана, которая отделяет кровь от стенки желудка. Желудок переходит в заднюю кишку, на их границе впадают четыре мальпигиевых сосуда, соединенных вершинами попарно. Задняя кишка переходит в короткую и расширенную прямую кишку, снабженную шестью ректальными железами. Анальное отверстие открывается на заднем конце брюшка и расположено непосредственно над половым.
Под пищеварительным трактом находятся парные слюнные железы в виде прозрачных, более или менее прямых трубок (рис. 166); через короткий общий слюнной проток железы открываются в подглоточник, У самцов слюнные железы сильно редуцированы, в виде очень тонких трубок.
19*
291
1
Рис. 165. Вскрытие самки слепня Tabanus.
А и Б — последовательные стадии вскрытия.
X—передний отдел желудка. 2—слюнные железы. 3 — зоб, 4 — задний отдел желудка, яичмикн, О— мальпигиевы сосуды, 7—задняя кишка.
Рис.
166. Внутренние органы Tabanus tarandlnus.
I —хоботок, 2—пищевод, 3 — передний отдел желудка, 4 — зоб, 5—желудок, 6 — мальпигиевы сосуды, 7 — задняя кишка, 8— рек-тум, 9—ректальные железы, 10—анальное отверстие, 11— слюнные железы. ^По Е. Н. Павловскому, А. К. Штейну и Н. Г. Олсуфьеву).
Центральная нервная система представлена крупным головоглоточным ганглием, расположенным в голове, и идушей от него нервной цепочкой из шести сильно сближенных узлов. Цепочка лежит вентрально в грудной полости и частью в первых двух брюшных кольцах; от нервной цепочки во все стороны расходятся многочисленные нервные нити.
При рассмотрении половых органов самки бросаются в глаза довольно крупные, овальной формы яичники (рис. 167), состоящие из множества яйцевых трубок с заключенными в них яйцевыми клетками. От яичников отходят короткие яйцеводы, сливающиеся в общий, довольно широкий яйцепровод. Последний оканчивается половым отверстием.
Рис. 167. Половые органы самки дождевки Chrysozona.
1 —семеприемник, 2 — яичник, 3— яйцевод и матка, 4 — клеевая железа.
В нижнюю часть яйцепровода открываются три семеприемника и несколько ниже — пара клеевых желез. Все 3 семеприемника одинаковы по величине и каждый из них представляет собой тонкую, согнутую пополам полупрозрачную трубку с продолговатой хитинизированной капсулой на свободном конце. Клеевые железы сильно развиты, в виде малопрозрачных изогнутых трубок. Их окраска у разных видов слепней варьирует от белого до желтого и коричневого цвета. Снаружи половое отверстие прикрыто короткой лопатообразной хитиновой пластинкой — яйцекладом.
Внутренний половой аппарат самца имеет следующее строение. От продолговатых семенников отходят довольно тонкие выносящие протоки, которые впадают в небольшой резервуар. Этот резервуар двойной, выстлан довольно крупными клетками железистого характера и соответствует придаточным железам прочих двукрылых. От резервуара отходит короткий парный семяизвергательный канал, который сливается в один общий более узкий проток, открывающийся наружу на конце пениса. Гипопигий представляет собой видоизмененный 9-й сегмент и устроен сравнительно просто. Он сильно хитинизирован и снабжен по бокам ларой пальцевидных выростов, называемых вальвами. Каждая вальва на конце вооружена коротким подвижным придатком, вторым члеником вальв. Эти придатки в паре представляют собой щипцы и служат для защемления конца брюшка самки в момент спаривания. В средней части гипопигия дорзально расположен пенис. Он хитинизирован и имеет форму короткого кинжала. По бокам его, несколько дорзально,
293
причленена пара длинных, перекрещивающихся концами, крепких придаточных щетинок. Пенис и его придатки прикрыты особым хитиновым чехлом, образованным парой соединенных между собой боковых пластинок. Этот чехол имеет форму конуса.
Отпрепарованные внутренние органы слепня переносят шпателем из ванночки в часовое стекло и здесь рассматривают в физиологическом растворе. По желанию из отпрепарованных органов могут быть затем сделаны постоянные препараты, для чего их фиксируют, окрашивают и заключают в канадский бальзам.
Яйцо
Кладку яиц слепня в 70° спирту.
Кладка
рассматривают под лупой в часовом стекле представляет собой компактную кучку яиц, склеенных между собой большей частью в виде пирамидки или округлой бляшки (рис. 168). Обычно кучка состоит из трех-четырех слоев яиц, расположенных один над другим, но у некоторых видов кладки бывают однослойными (некоторые Chrysops). Количество яиц в кладке у Tabanus составляет 500—900, у Chrysops 400—500. Для лучшего рассмотрения от кладки осторожно отделяют иглами несколько яиц и изготовляют из них постоянный препарат в канадском бальзаме.
Яйцо слепня — длинное, узкое, цилиндрическое или слегка суженное к переднему концу; на переднем конце сверху и на заднем снизу яйцо слегка косо срезано и тупо округлено. Размеры яйца зависят от вида, для средней величины слепней Tabanus длина яйца 1,8—2 мм, толщина 0,3—0,4 мм. Оболочка яйца гладкая, бесструктурная, блестящая. Окраска колеблется в зависимости от вида от буро-серых цветов до угольно-черных; только что отложенные яйца молочно-белого цвета, но вскоре затем темнеют, принимая нормальную окраску.
Рис. 168. Кладка яиц Tabanus
Личинка
autumnalis.	для знакомства с наружным строе-
нием необходим спиртовой материал, но для подробного изучения желательно иметь также живых личиною Крупных личинок (фиксированных) рассматривают в спирту или дистиллированной воде в часовом стекле под лупой или бинокуляром. Мелких личинок (2—5 мм) следует заключить в канадский бальзам, предварительно обработав их едким кали и окрасив. У взрослых личинок рассмотрение головы и ее придатков удобнее производить после того, как головной конец выпрепарован из тела личинки и обработан щелочью. Рассмотрение производят под бинокуляром в часовом стекле в дистиллированной воде. Последующее заключение в канадский баль
294
зам позволяет рассмотреть ряд деталей строения головы под микро скопом.
Тело личинки узко веретеновидное, с заостренными обоими концами, в поперечном сечении круглое или слегка дорзо-вентрально сжатое, состоит из 11 явственно разделенных сегментов (3 грудных и 8 брюшных), головы и дыхательной трубки. Размеры личинки колеблются в зависимости от возраста и вида слепня. У средней величины Tabanus только что вылупившаяся личинка 2,5—2,7 мм длины и 0,4—0,5 мм толщины, тогда как взрослая личинка достигает 25—30 мм длины и 4—5 мм толщины. У крупных Tabanus взрослые личинки до 4!/2 см длины.
Окраска личинки белая, бледно-зеленая, бурая или розово-коричневая. На теле часто имеются более темные поперечные кольцевые полосы
Рис. 169. Личинка Tabanus autumnalls.
А —личинка целиком, Б — голова личинки, I —глаз, 2 —площадка с шипи-ками, 3 — усик, 4 — верхняя губа, 5 —нижняя губа, 6 — щупик, 7 — верхняя челюсть, 8— нижняя челюсть.
или пятна, образующие рисунок. Они представляют собой участки кутикулы, густо покрытые мелкими волосками. У живой личинки сквозь кутикулу ясно просвечивают темный головной склерит и жировое тело, оплетающее внутренние органы, с дорзальной стороны — главные трахейные стволы. Кутикула с тонкой продольной исчерченностью, заметной при более сильных увеличениях. Эта исчерченность зависит от того, что кутикула имеет ребристую или гофрированную поверхность, повышающую ее упругость. На границе брюшных сегментов, по их переднему краю, расположены валикообразные утолщения и довольно крупные мягкие бородавчатые выступы, которые служат для передвижения личинки. Эти бугорки и утолщения покрыты короткими шипиками. На последнем анальном сегменте снизу у его основания находится анальное отверстие, которое имеет вид продолговатой щели с двумя полушаро-видными утолщениями по бокам. Задне-верхняя часть анального сегмента вытянута в узкую дыхательную трубку (сифон) и несет на конце вертикальную щель, в которой помещается соединенная между собой пара стигм. На переднем конце тела, на границе первого и второго колец по бокам, имеются еще передние стигмы, по одной с каждой стороны, но эти стигмы очень сильно редуцированы и могут быть обнаружены лишь при препаровке под бинокуляром.
295
рый состоит
—ц
Рис. 170. Внутренние органы личинки Tabanus autumnalis.
1 — голова, 2 — центральный нервный узел, 3— пищевод, 4 — пилорический клапан, 5— желудок, 6 — мальпигиевы сосуды, 7 —задняя кишка, 8— ректум, 9— анальное отверстие, 10 — слюнные железы. ^Малое увеличение. (По Е. Н. Павловскому, А. К. Штейну и Н. Г. Олсуфьеву).
—J
Голова личинки вытянута в трубку и сильно хитинизирована '(рис. 169). На ее переднем конце расположен ротовой аппарат, который состоит из следующих частей: крючковатой, сильно уплощенной с боков верхней губы, пары тонких, изогнутых и сильно заостренных верхних челюстей, пары более широких в основании и менее хитинизирован-ных нижних челюстей и раздвоенной на конце нижней губы. По бокам головы, возле основания нижних челюстей, прикреплены короткие трех-члениковые усики с вильчатым третьим члеником и ниже их — более длинные двучлениковые нижнечелюстные щупики. Между основанием усика и верхней губой имеется с каждой стороны площадка, покрытая густо сидящими шипиками или щетинками, в основании нижней губы — пара одночлениковых нижнегубных щупиков. По бокам головной трубки в ее передней трети расположены рудименты глаз в виде небольших черных пятен.
Внутреннее строение личинки изучается на живом материале, запасенном с осени. Перед вскрытием личинка должна быть частично парализована, иначе она своими движениями будет мешать процессу препаровки. Для этого личинку опускают на несколько секунд в кипяток или же обжигают пламенем, предварительно окунув на несколько секунд в 95° спирт. Вскрытие производят остро отточенными препаровальными иглами в часовом стекле под бинокуляром или лупой. В часовое стекло наливают немного физиологического раствора. Отпрепарованные органы желательно зафиксировать, окрасить и заключить в канадский бальзам.
При вскрытии прежде всего бросается в глаза пищеварительный тракт (рис. 170), и с него необходимо начать рассмотрение анатомии личинки. Между ротовыми органами находится ротовое отверстие, которое ведет через хитинизированную глотку, расположенную в головной капсуле, в довольно длинный и тонкий пищевод. За пищеводом следует муфтообразный преджелудок, представляющий собой сложно устроенный пилорический клапан. Далее идет длинный желудок, состоящий из 296
двух частей, разделенных пополам перетяжкой в виде узкой трубки. В просвете желудка имеется тонкая перитрофическая мембрана. Желу* док на заднем конце переходит в тонкую кишку; на их границе впадают четыре мальпигиевых сосуда в виде длинных, извитых, тонких трубок, окрашенных в желтовато-коричневый цвет. Тонкая кишка переходит в более широкую и довольно длинную прямую кишку, заканчивающуюся анальным отверстием. В передней части тела, по бокам желудка, лежат очень длинные слюнные железы, имеющие вид полупрозрачных извитых трубок, сложенных пополам. Слюнные железы на переднем конце переходят в длинные, тонкие слюнные протоки, которые затем соединяются в общий проток, открывающийся в ротовую полость при основании нижней губы.
Органы пищеварения на всем протяжении от заднего конца пищевода до ануса заключены в особый длинный мешок, стенки которого состоят из тонкого слоя жирового тела. Этот мешок, поддерживаемый упругими ветвями трахей, лежит свободно в полости тела. Он сохраняет более или менее неизменное расположение внутренних органов и устраняет их трение о кожно-мускульную оболочку при сократительных движениях тела личинки во время ползанья. При сокращении тела главным образом изгибаются те части органов, которые расположены вне мешка, в пространстве между последним и головой, т. е. пищевод и слюнные протоки. Над мешком с внутренними органами дорзально проходят два главных трахейных ствола, которые у многих личинок (Tabanus'} очень сильно расширены и играют роль гидростатического приспособления, позволяющего им плавать на поверхности воды. От главных трахейных стволов отходят боковые ветви, которые ветвятся в сторону кожномускульной оболочки и к внутренним органам. На заднем конце оба трахейных ствола сложены вместе и открываются наружу в вертикальной щели на конце дыхательной трубки. В передней части личинки центральные стволы сильно петлеобразно изогнуты и ветвятся в разные стороны, причем на обеих сторонах одна из мелких боковых ветвей оканчивается передней стигмой. Между главными трахейными стволами расположен сердечный сосуд, представляющий собой длинную полупрозрачную трубку. Задним концом трубка прикреплена к спинной стороне на границе 10 и 11-го сегментов, а передним концом— к головоглоточному ганглию.
Центральная нервная система представлена общим нервным узлом, состоящим из головоглоточного ганглия и плотно слитых с ним последующих 8 ганглиев брюшной цепочки. Центральный нервный узел лежит сразу же позади головной капсулы, окружая кольцом пищевод (рис. 170). От центрального нервного узла отходят тонкие нервные нити. В 11-м сегменте между главными трахейными стволами расположен орган Грабера, который, очевидно, представляет собой чувствительный орган, но точное назначение его еще не выяснено. Этот орган микроскопических размеров, имеет вид маленькой груши, направленной узким концом к заднему концу тела; он полупрозрачен, с темными округлыми включениями в середине.
Фаза личинки длится от нескольких месяцев до двух лет. За этот промежуток времени личинка линяет шесть-девять раз, имея таким образом семь-десять личиночных стадий. Последний раз личинка линяет в куколку. Пестряки (Chrysops) имеют пять личиночных стадий.
Личинки Tabanus характеризуются сравнительно хорошо развитой дыхательной трубкой, довольно толстой головной капсулой и хорошо заметной продольной исчерченностью кутикулы. У личинок дождевок Chrysozona дыхательная трубка сильно укорочена и тупая на конце,
297
сна едва выступает из анального сегмента. Продольная исчерченность кутикулы очень тонкая, заметная лишь при сильном увеличении. Личинки пестряков Chrysops, в отличие от личинок Tabanus и Chrysozona, более стройные, с длинной, заостренной на конце дыхательной трубкой и узкой головой. Исчерченность кутикулы хорошо заметна.
Куколка
Для изучения строения куколки необходим спиртовой материал, но он в ряде случаев может быть заменен куколочными оболочками, из которых слепни уже вывелись. Куколок рассматривают в часовом
стекле в спирту под бинокуляром или под лупой, пустые куколочные оболочки накалывают на энтомологиче-
ис. 171. Куколка Tabanus autum-nails.
А — целиком, Б—вид последнего сегмента сзади.
ские булавки и рассматривают в ручную лупу. Следует лишь иметь в виду, что голово-грудной отдел у пустых оболочек несколько деформирован, поскольку он порван в нескольких местах по шовным линиям в момент выхода слепня.
Куколка слепня (рис. 171) напоминает до некоторой степени куколку бабочки (pupa obtecta). Она цилиндрическая, длинная, слегка выгнута со спинной стороны. Голова у наших видов без шипов и резких выступов. Сверху на темени расположены 2 небольших теменных бугорка, снабженных каждый щетинкой. На лбу в верхней части имеются два двойных поперечных выступа—лобных зубца, по их сторонам лежат короткие конусовидные усики. На спинной стороне головы — два затылочных бугорка, несущих каждый по щетинке-Грудной отдел с хорошо намеченными крыловыми зачатками и ногами. На спинной стороне возле заднего края головы помещается пара крупных грудных стигм в форме ушков. Брюшко состоит из восьми сегментов, каждый из которых,
кроме первого и последнего, возле заднего края снабжен густым рядом щетинок или волосков, образующих вокруг кольца непрерывный круг. На каждом сегменте, кроме последнего, по бокам
расположены хорошо заметные брюшные стигмы. Последний сегмент короткий, на конце снабжен шестью крупными отростками, образую-
щими характерную розетку. Форма и расположение этих отростков
варьируют у различных видов, и поэтому строение розетки имеет - большое систематическое значение. Строение последнего сегмента ку-
колки несколько различается у самцов и самок. Куколка вначале желтовато-белая или зеленоватая, в последующие дни принимает более темную окраску. Первыми окрашиваются глаза, затем постепенно темнеют прочие части головы и туловище. Окраска куколки варьирует в зависимости от вида, причем преобладают коричневые, бурые или грязно-
зеленые тона,
296
Фаза куколки длится в зависимости от окружающей температуры ст 5—7 дней до 2—3 недель. В момент вылупления слепня куколочная оболочка лопается на переднем конце в нескольких направлениях: 1) продольно вдоль спины и задней части головы до вершины затылка, 2) поперек головы по большой дуге, пересекая темя, и 3) кругом всего основания головы. Кроме того, имеются дополнительные более короткие линии разрывов спереди, под местом расположения ротовых органов. Перед тем как слепню вылететь, куколка начинает энергично двигаться, поднимается на поверхность почвы и здесь наполовину высовывает свое туловище.
ЛИТЕРАТУРА
Олсуфьев Н. Г. Слепни (Tabanidae). Фауна СССР. Насекомые двукрылые, т. 7, в. 2, изд. АН СССР, 1937.
Олсуфьев Н. Г. К микроскопической анатомии головы и пищеварительного тракта личинок Tabanus. Паразит, сборн. Зоол. ин-та АН СССР, т. 6, 1936.
Павловский Е. Н. Руководство по паразитологии человека. Т.П. Изд. АН СССР, 1948.
Скуфьин К. В. Материалы по исследованию мест выплода слепней в окрестностях Воронежа. Зоол. журн., т. 28, в. 6, 1949.
Скуфьин К. В. Слепни Воронежской области. Докт. дисс. М., 1952.
Тамарина Н. А. К биологии слепня-златоглазика Chrysops relictus Mgn. Вести. МГУ, № 6, 1951.
Cameron A. The Life-History and Structure of Haematopota pluvialis L. Trans. Roy. Soc. Edinburg, 58(1), 1933—34.
Marchand W. An. Improved Method of Rearing Tabanid Larvae. J. Econ. Ent., 10, 1917.
Philip С. B. Methods of Collecting and Rearing the Immature Stages of Tabanidae^ J. Parasitology, 14(4), 1928.
S t a m e г H. Die Larven der Tabaniden. Z. Wiss. Biol. Abt. A. I, 1924.
СИНАНТРОПНЫЕ МУХИ
ПОДГОТОВКА МАТЕРИАЛА
Изучению подлежат взрослые мухи, их яйца, личинки и куколки. Взрослых мух можно наловить в кухнях, столовых, жилых и хозяйственных помещениях, где имеются какие-либо пищевые продукты. Личи* нок собирают в навозе и пищевых отбросах или выводят в лаборатории, устроив несложное приспособление. На дно широкогорлой литровой банки насыпают слой влажного песка (толщиной в 2—3 см) и помещают туда небольшую чашку Коха со свежим конским навозом или куском сырого мяса. Сюда же ставят поилку в виде стеклянной U-об-разной трубки, рыхло заполненную мокрой ватой, и к металлической сетке — покрышке садка подвешивают на нитке кусок бисквита или белого хлеба. В садок впускают около десятка половозрелых самок комнатной мухи и несколько самцов. Уже через несколько часов (при температуре 18—25°) самки начинают откладывать в навоз яйца. Примерно через сутки из яйца вылупляется личинка I стадии. Через 1—2 дня эта личинка линяет на личинку II стадии, которая через 2— 4 дня линяет на личинку III стадии. Личинка III стадии превращается в куколку, заключенную в пупарий (наружную оболочку), из которого вылупляется взрослое насекомое. Часть личинок каждой стадии (предварительно проколов у них кожу иглой) консервируют в 70° спирту для изготовления тотальных препаратов.
Отдельно делают препараты из задних дыхалец личинок, из хоботка и лапки взрослой мухи. Зафиксированных личинок проводят через спирты возрастающей крепости, просветляют в ксилоле и заливают 299
в канадский бальзам. Для изготовления препарата задних дыхалец у личинки ножницами отрезают заднюю часть последнего сегмента, очищают ее изнутри от мягких тканей и подвергают вышеуказанной обработке. Такой же обработке подвергаются изолированные хоботок и лапка мухи. В целях изучения наружного строения взрослых насекомых, убитых хлороформом, накалывают на энтомологические булавки, расправляя ноги и крылья, чтобы хорошо были видны все отделы тела. Внешняя морфология личинок изучается на спиртовом или свежем материале. Для вскрытия взрослой мухи и личинок необходим живой материал. С учебной целью полезно рассмотреть все фазы развития мухи, а также препараты внутренних органов взрослых мух и личинок.
ИЗУЧЕНИЕ ПРЕПАРАТОВ
Взрослые насекомые
Наружное строение
Взрослую комнатную муху (Musca domestica L.), наколотую на булавку и укрепленную на торфяной или пробковой пластинке, рассматривают под лупой или бинокуляром (с увеличением в 20—30 раз).
Тело мухи разделяется на три отдела: голову, грудь и брюшко. Все эти отделы, а также три пары ног, прикрепленные к грудным сегментам, густо усеяны волосками и щетинками, которые имеют важное значение в систематике.
Голова (рис. 172) полушаровидная, выпуклая спереди и уплощенная сзади. Боковые части ее заняты большими сложными, или фасеточными, глазами, между которыми остается довольно широкая лобная полоса, усаженная двумя рядами щетинок, образующих «аллейку». К верхнему краю головы лобная полоса несколько расширяется и образует мысовидный участок, на котором расположены 3 простых глазка; книзу полоса упирается в арку дуговидного шва, ограничивающего «лицо», обычно почти целиком прикрытое усиками. Края дуговидного шва, огибающие нижнебоковые части лица, усажены толстыми щетинками — вибриссами. Между дуговидным швом и нижним краем глаз находятся атласно-желтые скулы; от них отходят узкие пластинки (такой же окраски), окаймляющие глаза по всей их окружности. Нижнебоковые части головы (непосредственно под глазами) носят название щек. Усики короткие, трехчлениковые; последний (третий) членик раза в три больше второго, несет чувствительные ямки (органы обоняния) и трехчлениковую метелковидную щетинку. На темени (верхний край головы) между глазками видны так называемые оцеллярные щетинки, а кзади и по бокам от них расположены крепкие наружные и внутренние теменные и затеменные щетинки. С нижней поверхности головы выдается хоботок, служащий органом принятия пищи, вкуса и осязания. В недеятельном состоянии он складывается под углом и втягивается в особое углубление. Так как хоботок у мухи, наколотой на булавку, ссыхается и теряет свою форму, то лучше рассматривать бальзамный препарат его под малым увеличением микроскопа.
Хоботок (рис. 173) состоит из конусовидной основной части (rostrum), прилежащей непосредственно к голове, и желобоватой вершинной части — сосальца (haustellum) с раздвоенными на конце большими сосательными лопастями. Сосальце представляет собой видоизмененную нижнюю губу, образующую спереди углубление в виде желоба, в котором помещаются язык и верхняя губа. Сзади и с боков сосальце 300
спереди.
Рис. 1 —усики, 2 —
172. Голова комнатной мухи, вид Д>5_фасе.
_.аллейка-,3-ВД"“7Й	‘‘«•‘«^вибртсТы.
1 — усипп, -	• г простой глазок, ' £'ая щетинка, Ж/ »
В- А- ЬынковУ).
Рис 173. Хоботок комнатной мухи, в Д * лопасть ’	rvfia 5 —нижняя губа» «	у _ фасеточный
глаз, в-вибриссы, » “ А Бычкову).
покрыто большим склеритом — подбородком (mentum). Поверхность сосательных лопастей изборождена параллельными хитинизированными желобками — псевдотрахеями, по которым жидкая пища поступает в ротовое отверстие, находящееся в глубокой выемке между лопастями. Для соскабливания сухой и полусухой пищи мухе служат хитиновые предротовые зубы, расположенные по бокам ротового отверстия. Спереди желоб нижней губы прикрывается также желобчатой верхней губой, образуя вместе с ней трубкообразную полость, в которой помещается непарный орган — язык (гипофаринкс), пронизанный слюнным
Рис. 174. Musca domestlca, вид сверху.
1 — поперечный шов, 2 — плечевой бугорок, 3 — щиток, 4 — акростихальные щетинки, 5 — дорзонентралъные щетинки, 6 — интраалярные щетинки, 7—плечевой ряд щетинок, 8 — заплечевые щетинки, Р—нотоплевральные щетинки, 10 — крылышко, 11 —крыловая и грудная чешуйки, г —костальная жилка, sc—субкостальная жилка, г —радиальные жилки, т — медиальная жилка, си — кубитальная жилка, ал—анальная жилка, Ва — передняя базальная ячейка, Brf —дискоидальная ячейка, Вр — задняя базальная ячейка, А — анальная ячейка. (По В. А. Бычкову).
протоком. На передней поверхности основания хоботка сидят одночле-никовые нижнечелюстные щупики, густо усеянные волосками.
Грудь со спинной стороны (рис. 174) имеет вид удлиненной пятиугольной пластинки, разделенной двумя поперечными швами на 3 неравные части. Вся видимая сверху часть груди относится к средне-спинке. Слабо выраженный поперечный шов перед основанием крыльев отделяет переднюю часть среднеспинки от более крупной средней ее части; более глубокий второй поперечный шов отделяет нависающий над брюшком щиток треугольной формы. Передние углы среднеспинки — плечевые бугорки — выпуклые. На серо-буром фоне среднеспинки выделяются 4 темные продольные полосы. Покров ее несет следующие, размещенные рядами, щетинки: акростихальные — на срединной свет-
302
Рис. 175. Musca domestica, вид сбоку.
1 —среднеспинка, 2 — поперечный шов, 3 — переднее дыхальце, 4 — заднее дыхальце, 5 — проплевра, 6 — мезоплевра, 7 — птероплевра, Я —стерноплевра, 9— гипоплевра, 10 — тергит, 77—стернит, 12— брюшные дыхальца, 13 — тазик, 14 — вертлуг, 75—бедро, 16 —голень, 17 —лапка. (По А. А. Штакельбергу).
лой полосе, в числе двух (перед вторым поперечным швом); дорзоцент-. ральные — вдоль светлых промежутков между темными полосами; ин-1 траалярные — кнаружи от них; надкрыловые — еще ближе к месту прикрепления крыльев; плечевые — на плечевых бугорках, и, несколько ' кзади, — заплечевые.
Сбоку грудь представляет собой ряд различной формы пластинок, или склеритов, отделенных друг от друга более или менее выражен-
' ными швами (рис. 175). Кзади и книзу от плечевого бугорка откры-' вается переднее дыхальце, или стигма, которое имеет вид темноватой пластинки с продольной ще-
 лью. Впереди от него находится проплевра, а кзади— хорошо выраженная, большая мезоплевра.
• Нижний конец проплевры и передний конец мезоплевры соединяются с основанием передних ног; под нижнем краем мезоплевры лежит треугольная- стерноплевра, прикрывающая собой основание средней пары ног. Позади стерноплевры расположена гипоплевра, над верхним краем которой помещается заднее дыхальце. Непосредственно под крылом находится птероплевра, а кзади от нее — метаплевра. Рядом с задними дыхальцами си
дят булавовидные жужжальца — рудименты второй пары крыльев. На стерноплевре имеются три крепкие щетинки.
Ноги причленены к нижней поверхности груди. Каждая нога состоит (считая от основания) из тазика, вертлуга, бедра, голени и пяти-члениковой лапки; тазики второй пары сильно сближены между собой. На последнем членике лапки, под коготками, находятся клейкие подушечки (пульвиллы), позволяющие мухе легко удерживаться и передвигаться по гладкой отвесной поверхности. Между ними расположен третий (непарный) придаток — эмподий, который у представителей Mus-cidae недоразвит и имеет вид довольно крепкой светлой щетинки, хорошо заметной с нижней стороны лапки (рис. 176).
Одна пара крыльев прикрепляется к боковым поверхностям среднегруди (рис. 174, 175). Крылья представляют удлиненные прозрачные пластинки (боковые выпячивания стенки тела) с округлой вершиной и узким основанием, образующим 3 листовидные лопастинки: крылышко (рис. 174), крыловую и грудную чешуйки. Увеличению прочности крыла способствуют жилки — полые трубки с проходящими в них нервами и трахеями. Среди продольных жилок различаются: костальная, огибающая передний край крыла; субкостальная, сливающаяся с ней примерно на расстоянии одной трети от его основания; радиальные, отходящие общим стволом и соединяющиеся с костальной на
303
середине переднего края, близ вершины и на вершине крыла; медиальная, делающая излом в сторону радиальной жилки и сливающаяся с костальной рядом с последней; кубитальная и анальная, направленные к заднему краю крыла. Некоторые продольные жилки соединены поперечными жилками. Между последней радиальной и медиальной жилками есть поперечная радиомедиальная жилка, ограничивающая вместе с ними переднюю базальную ячейку. Две поперечные жилки между
Рис. 176. Лапка комнатной мухи.
А —вид сверху, Б — вид снизу.
медиальной и кубитальной жилками замыкают меньшую заднюю базальную и большую дискоидальную ячейки. Поперечная жилка между кубитальной и анальной жилками ограничивает вместе с ними анальную ячейку. Кроме того, продольные жилки разделяют поверхность крыла на костальную, субкостальную, первую и вторую радиальные и заднекрайние ячейки.
Брюшко состоит из четырех видимых сегментов. Остальные три сегмента у самца представлены околоанальными пластинками, у самки образуют яйцеклад. Верхние полукольца брюшка—тергиты (рис. 175) — в общем сероватого цвета, с неясно выраженной темной полосой посередине и темными пятнами на боках. Каждый тергит имеет пару дыхалец; на первом тергите их две пары (в результате слияния двух первых брюшных сегментов). Нижние полукольца — стерниты — желтовато-серые.
Внутреннее строение
Вскрытие. Для ознакомления с внутренним строением мухи необходимо отпрепаровать ее органы и изготовить из них препараты (стр. 15). Муху вскрывают под бинокуляром с малым увеличением,
304
в стеклянной солонке или небольшой чашке Петри с физиологическим раствором. Тело мухи плохо смачивается водой, поэтому муху, убитую хлороформом, перед опусканием в раствор рекомендуется окунуть в спирт, предварительно обрезав у нее ноги и крылья. Очень удобно прикрепить муху, чтобы избавиться от необходимости во время препаровки придерживать ее иглой. Этого можно достичь двумя путями: либо
Рис. 177. Вскрытие комнатной мухи.
Д — первый этап: удален хитиновый покров груди, рассекается покров брюшка; левой иглой удерживают „муху и оттесняют внутренние органы от места разреза. £> —второй этап: удален покров брюшка; правой И1лой обрывают трахеи, связывающие внутренние органы с покровом тела.
залить дно ванночки воском и приколоть к нему муху энтомологическими булавками, либо приклеить муху органическим стеклом. Для приклеивания обычная стеклянная посуда непригодна, так как органическое стекло легко отстает от гладкой поверхности. Следует приобрести солонку из органического стекла. На дно такой ванночки наносится небольшая капля жидкого органического стекла (метил-метакрилат, или плексигласе, растворенный в хлороформе) и тотчас же на каплю кладется муха с обрезанными ногами и крыльями спинкой кверху. Муху слегка прижимают пинцетом и держат в таком положении секунд 30—40, пока жидкость загустеет. Только после подсыхания жидкого стекла, что происходит через 4—5 минут, приклеенную муху смачивают каплей спирта и тотчас заливают физиологическим раствором. Можно муху приклеить просто к пластинке из органического стекла, которую затем опускают в обычную стеклянную посуду (чашку Петри) с физиологическим раствором.
20 Зак. 3420. Лабораторный практикум медицинской паразитологии.
305
Вскрытие сводится к удалению покрова груди и брюшка мухи. Для ггого острой препаровальной или копьевидной иглой делают надрывы покрова по окружности среднеспинки (рис. 177, Л) и удаляют весь <горб» мухи вместе со щитком. Далее лопатовидной иглой (как показано стрелками на том же рисунке) обрезают покров по бокам брюшка, которое все время придерживают левой иглой вблизи производимого надреза, чем достигается и оттеснение органов ковнутри (чтобы не повредить их). Обрезанные с обоих боков тергиты приподнимают левой
Рис. 178. Вскрытие комнатной мухи.
А — третий- этап: после освобождения внутренних органов от опутывающих их трахей и жировой ткани производят разрыв хитино- $ вого кольца в области перехвата („талии") между грудью и брюшком.
иглой (рис. 177, 5), а правой отслаивают внутренние органы, обрывают веточки трахей, связывающие органы с покровом, удаляют по кусочкам жировое тело. Отпрепарованный таким путем покров брюшка отрезают остроконечными ножницами у самой груди (в области первого брюшного сегмента) и удаляют. Обычно с покровом удаляется трубчатое сердце насекомого, показанное на рисунке в виде прозрачной трубки на приподнятых тергитах брюшка. Дальнейшая препаровка заключается, главным образом, в освобождений органов от опутывающих 306
трахей. Это делается гладко отшлифованными на оселке иглами с большой осторожностью, чтобы не порвать тонкие трубки мальпигиевых сосудов, которые по своей толщине нередко уступают крупным трахеям.
Распутанные и освобожденные от трахей органы брюшка, вместе с яйцекладом (если это самка), отделяют от последнего брюшного стернита, затем удаляют мышечные пучки в грудной полости; при этом также необходима осторожность, чтобы не повредить лежащие под ними пищеварительные органы. Далее производят разрыв хитинового кольца в области «талии» мухи, т. е. в месте перехода груди в брюшко
Рис. 178а. То же.
Б —четвертый этап: освобождение органов груди от подлежащих тканей; игла поддета под желудок, слюнные железы и зобный проток.
'(рис. 178, Л), и лопатовидной иглой отсекают боковые части груди, после чего отслаивают органы этого отдела от подлежащих тканей. С этой целью правую иглу подводят под органы (рис. 178, Б) и легкими движениями кзади освобождают их от связывающих трахей и соединительнотканных волокон. Заключительным этапом является освобождение переднего отдела пищеварительного тракта (пищевода, прото* ков слюнных желез) от хитинового покрова и мягких тканей головы,, для чего острой иглой удаляют по частям глаза, лоб, скулы и другие части головы, оставляя неповрежденным лишь хоботок. Выделенные органы переносятся пипеткой на предметное стекло, расправляются,
20*	307
окончательно очищаются от обрывков трахей и фиксируются обычным способом.
Органы пищеварения. Пищеварительный тракт начинается хоботком, со строением которого мы уже познакомились (стр. 300). Ротовое отверстие, расположенное в глубокой выемке между губными
Рис. 179. Внутренние органы самки комнатной мухи.
А — пищеварительная и половая система, Б — зоб, В —ректальный пузырь; 1 — глотка» 2 — пищевод, 3 — преджелудок, 4 — передняя часть желудка, 5 —зоб, б — задняя часть желудка, 7—мальпигиевы сосуды, 8 — ректальный пузырь, 9 — слюнные железы, /0 —ректальные железы, 11 — яичник, 12— матка, 13 — придаточные железы.
лопастями, ведет в ротовую полость, образованную за счет сложенных вместе желобчатых верхней и нижней губ. На дне ротовой полости, как указывалось выше, расположен язык, пронизанный слюнным протоком. В основании хоботка ротовая полость переходит в объемистую глотку (рис. 179, Л), снабженную группой мышц, действующих по принципу насоса. Следующий за глоткой узкий пищевод делает в голове
308
крутой изгиб и проходит через окологлоточное кольцо головных нервных узлов в грудную полость, где впадает в мускулистый преджелудок. Обычно всасываемая пища сперва заполняет зоб — двулопастный мешок с узким каналом (рис. 179, Б) и затем поступает в преджелудок и желудок, служащий собственно пищеварительным органом. Желудок имеет вид слегка расширенной трубки, переходящей без резких границ в тонкую кишку. Началом кишечника является место впадения выделительных органов — четырех мальпигиевых сосудов, сливающихся перед впадением попарно в два общих протока. Перед анальным отверстием кишка расширяется в ректальный пузырь, в просвет которого вдаются 4 ректальные железы. Заканчивается пищеварительный тракт заднепроходным отверстием, расположенным у самцов на последнем сегменте брюшка, у самок — на конце яйцеклада.
Рис. 180. Половые органы комнатной мухи.
Л —самка, Б — самец; 1 —яичник, 2 — яйцевод, 3 — матка, 4 — влагалище, 5 — семеприемники, 6 —трубчатая ридаточная железа, 7 —мешковидная придаточная железа, 8 — семенник, 9 —семяпровод, 10 — семяизвергательный канал, // — семяизвергательный мешок.
К придаткам передней кишки относятся слюнные железы, губные и язычные. Губные железы представляют собой группы крупных железистых клеток, находящихся у основания губных лопастей (вблизи рта). Эти железы могут быть изучены только на срезах. Язычные слюнные железы развиты намного сильнее и имеют вид двух длинных извитых трубок, лежащих по бокам кишечника в грудной и брюшной полостях. По направлению к голове железы утончаются и, сливаясь вместе, впадают общим протоком в канал языка на дне ротовой полости.
Половые органы самки. Женские половые органы состоят из двух крупных яичников (рис. 180, Л), коротких яйцеводов, непарной матки, влагалища, оканчивающегося половым отверстием на конце яйцеклада, и придаточных желез.
Яичник содержит много (до 70) яйцевых трубочек, разделенных перетяжками на несколько камер, в которых происходит созревание яиц. В матку, на границе ее с влагалищем, впадают дорзально 3 семеприемника и две трубчатые придаточные железы, по бокам от них — 2 короткие мешковидные железы. Семеприемники (два левых и один правый) состоят из головчатых резервуаров и тонких протоков и на препарате бросаются в глаза черной окраской резервуаров. В них задерживается семенная жидкость, впрыснутая самцом, до момента прохождения созревших яиц через матку, где последние и оплодотворяются. Яйцеклад образован сильно видоизмененными VI—VIII брюшными сегментами,
309
связанными друг с другом хорошо развитой сочленовной перепонкой, •Оканчивается он рудиментарным IX сегментом в виде маленькой заднепроходной пластинки и двух концевых бугорков. Обычно яйцеклад втянут внутрь IV сегмента брюшка и наружу высовываются лишь упомянутые концевые бугорки.
Половые органы самца. Мужские половые органы без придаточных желез. Они представлены парными грушевидными семенниками (рис. 180, Б), покрытыми плотной пигментированной оболочкой, тонкими и короткими семяпроводами, семяизвергательным каналом, семяизвергательным мешочком и хитинизированным копулятивным органом (на рисунке не показан). Половое отверстие, лежащее несколько ниже анального, окружено рудиментарными полукольцами VI—VIII брюшных сегментов.
Яйцо
Яйца (рис. 181,0) удлиненно-овальные, с одним более заостренным концом, белого цвета; от одного полюса к другому идут две узкие бороздки, соединяющиеся на суженном конце. Длина около 1 мм.
Личинка
Наружное строение
Личинка I стадии. Только что вылупившаяся из яйца личинка (рис. 181,/) имеет вид белого, почти прозрачного червячка, с заостренным передним и утолщенным задним концом, около 2 мм длины. Тело состоит из 13 сегментов. На переднем конце находится ротовое отверстие, из которого выступает непарный крючок ротоглоточного скелета, называемый дорзальным склеритом (гомолог верхней губы). Задняя часть ротоглоточного скелета представлена парными, серповидными глоточными склеритами, расположенными вертикально по бокам глотки. На брюшной поверхности сегментов VI—XIII находятся вооруженные шипиками валики, служащие личинке для ползания. Последний сегмент как бы косо обрублен; на нем открываются парные дыхальца сердцевидной формы. Ниже дыхалец находится заднепроходное отверстие. Передних дыхалец нет.
Личинка II стадии. Тело (рис. 181,//) длиной до 4 мм, с более заостренным передним концом и утолщенным задним. Состоит из 12 явственно различимых сегментов (второй и третий сегменты слитые). На боках заднего края второго сегмента лежат 5—7-лучевые передние дыхальца. Ротоглоточный скелет усложняется, в нем появляются добавочные хитиновые образования. Существенно изменяются и задние дыхальца: они имеют вид округлых хитиновых пластинок, из которых каждая с двумя косыми щелями.
Личинка III стадии. Тело достигает в длину 1,0—1,2 см. Состоит также из 12 хорошо выраженных сегментов (второй и третий сегменты слитые). На переднем сегменте с брюшной стороны расположено ротовое отверстие, окруженное радиально идущими ротовыми бороздками, аналогичными по функции псевдотрахеям хоботка взрослой мухщ В передней части сверху этот сегмент разделен продольной щелью на две дольки (рис. 181), каждая из которых несет короткий двучленико-вый усик (антенну), нижнечелюстной щупик и пару чувствительных бугорков. Из ротового отверстия высовываются парные серповидно изогнутые челюстные склериты (ротовые крючки), служащие личинке для передвижения и соскабливания питательного субстрата. Вслед за
310
челюстными идут гипостомальные склериты, которые сочленяются с наиболее мощно развитыми глоточными склеритами. Все эти образования вместе составляют ротоглоточный аппарат. На боках заднего края второго сегмента расположены 5—7-лучевые передние дыхальца. Ползательные валики на брюшной поверхности сегментов V—XII
Рис. 181. Развитие комнатной мухи.
О — яйца, 1 —личинка первой стадии, а’ — ее головной конец, б' — задние дыхальца личинки первой стадии, ZZ —личинка второй стадии, б" — задние дыхальца личинки второй стадии, III — личинка третьей стадии, а'" — ее головной конец (ротоглоточные склериты), 6,ff — задние дыхальца личинки третьей стадии. (По Hewitt и Л. С, Зимину).
сильно выражены, покрыты рядами мелких шипиков, число и расположение которых имеет систематическое значение (Л. С. Зимин). На задней поверхности последнего сегмента видны округло-почковидные пластинки задних дыхалец с сильно склеротизированными перитремой (ободком) и выступающим ковнутри от нее стигмальным диском. В центре стигмального диска есть так называемое линочное отверстие, через которое во время линьки вытаскивается хитиновая выстилка трахей. Сами дыхальца имеют вид трех зигзагообразных щелей
311
с поперечными перегородками. Форма и расположение этих щелей у личинок других видов мух различны и имеют систематическое значение (рис. 182). Между щелями на дыхальцевой пластинке открывается
Рис. 182. Задние дыхальца личинок мух.
1 — Musca, 2 — Miscina, 3 — Stomoxys, 4 — Phormia, 5 — Calliphora, 6 — Lucilia,
7 — Sarcophaga, 8 — Wohlfahrtia. (По Hegner, Cort и Root).
небольшое округлое отверстие стигмальных желез, выделения которых препятствуют смачиванию дыхалец водой. По мере созревания личинки дыхальца становятся почти черными.
Внутреннее строение
Вскрытие. Отобранных для вскрытия живых личинок отмывают в воде, опускают на несколько секунд в 96° спирт и быстро проводят через пламя горелки (для дезинфекции), после чего кладут в часовое стекло с физиологическим раствором, где производится вскрытие.
Лопатовидной иглой разрезают дорзально покров личинки по всей ее длине (от второго до последнего сегмента), а затем производят разрывы покрова между вторым и третьим и между последними двумя сегментами. Для этого препаровальные иглы накладывают на соседние 312
Рис. 183. Вскрытие личинки комнатной мухи.
Л —тело рассечено по всей длине (видны вывалившиеся наружу внутренние органы); отделяется головной конец. Z> — головной конец отделен; производится отделение последнего сегмента тела и освобождение внутренних органов от хитинового покрова.
Рис. 184. Внутренние органы личинки комнатной мухи.
/ — глотка, 2 —пищевод, 3 — преджелудок, 4 — трубчатые придатки, 5 —желудок, 6 — средняя кишка, 7—мальпигиевы сосуды, 8 — задняя кишка, 9 — прямая кишка, 10 — анальные дольки, 11 — слюнные железы, 12 — трахеи, 13 — задние дыхальца.
сегменты, между которыми производится разрыв (рис. 183), одной иглой удерживают личинку, другой делают легкие подергивающие движения, как бы растягивая ее тело, до тех пор, пока сегменты не отделятся друг от друга. Таким же способом отделяют и последний сегмент, только в этом случае личинку удерживают правой иглой. Далее освобождают • внутренние органы от кожного покрова. Придерживая левой иглой' среднюю часть вскрытого покрова, правой иглой осторожно отводят с головным концом личинки весь комплекс органов вправо, пока он не отделится от окружающей его кутикулы. Выделенный таким путем клубок органов постепенно очищают от жирового тела, трахей, распутывают и переносят пипеткой на предметное стекло, где фиксируют жидкостью Карнуа и далее обрабатывают по общепринятой методике (стр. 26).
Пищеварительные органы. Пищеварительный тракт личинки начинается ротоглоточным аппаратом (стр. 311), снабженным специальной мускулатурой, обеспечивающей заглатывание пищи. В глотку (рис. 184) с брюшной стороны впадают общим протоком парные трубчатые слюнные железы; секрет их обладает протеолитическим действием, что позволяет личинке принимать пищу в жидком виде (внеки-шечное пищеварение). Кзади глотка переходит в узкий пищевод, который проходит сквозь окологлоточное нервное кольцо (на рисунке не показано) и открывается в преджелудок овоидной формы. Впячиваясь в преджелудок, пищевод образует рукавовидную складку с двойными стенками, препятствующую выходу пищи из желудка обратно в пищевод. Зоба личинка не имеет. Желудок, или средняя кишка, наиболее длинная часть пищеварительного канала, принимает впереди 4 трубчатых слепых придатка, многократно извивается и переходит в заднюю кишку. В переднюю часть задней кишки открываются 4 мальпигиевых сосуда, которые перед впадением в кишку попарно сливаются. Сделав несколько изгибов, кишка заканчивается прямой кишкой, открывающейся заднепроходным отверстием на последнем сегменте тела между двумя анальными дольками.
Кукол ка
Зрелая личинка в период, предшествующий непосредственно окукливанию, носит название предкуколки (ргаерира). В этот период личинка перестает питаться, кишечник ее освобождается от экскрементов. Сперва личинка энергично ползает в поисках места для окукливания, а затем становится неподвижной, укорачивается и несколько утолщается, изменяясь по форме из червеобразной в боченкообразную. В таком виде личинка и линяет, превращаясь в куколку. Отслоившаяся, но не сброшенная личинкой кутикула темнеет, затвердевает и превращается в ложный кокон (пупарий), в котором происходит дальнейшее превращение мухи. Пупарий сохраняет внешние черты строения предыдущей фазы: боченкообразную форму, следы сегментации, передние и задние дыхальца, шипики на брюшных сегментах и т. д. Новообразованием являются так называемые рожки — небольшие конусовидные выросты на границе первого и второго брюшных сегментов ложного кокона с мелкими отверстиями на вершине. Это грудные дыхальца куколки.
Если вскрыть пупарий через 30—40 часов после окукливания, то под оболочкой находим собственно куколку с чертами уже сформировавшегося взрослого насекомого. Куколка неподвижна.
314
ГЛАВНЕЙШИЕ ПРЕДСТАВИТЕЛИ
Семейство Muscidae - Настоящие мухи Musca domestica L. — Комнатная муха
Различают два подвида комнатной мухи: северный — Musca domestica domestica L. и южный — Musca domestica vicina Macq. Все описан* ные выше признаки относятся к северному подвиду, который очень сходен с южным, отличаясь от него лишь некоторыми морфологическими и экологическими особенностями. У самца северного подвида ширина лба равна примерно !/2
ширины глаза, тогда как у самца южного подвида ширина лба составляет не более 7з—7б ширины глаза (рис. 185), окраска брюшка более светлая. Самка Musca domestica
vicina также отличается	рис. 185. Головы самцов.
ОТ СеверНОГО подвида бо-	д_Musca domestica domestica и Б — Musca domestica vicina
лее светлым, ПО бокам	(По Л. С. Зимину).
красновато-желтым брюш-
ком и слабо выпуклым затылком. В пределах СССР Musca domestica vicina распространена в Закавказье, Средней Азии, в низовьях Амура и южном Приморье. Местами выплода комнатной мухи являются конский и свиной навоз, бытовой мусор; южный подвид может выплажи-ваться также и в человеческих экскрементах. Личинка нередко является причиной миаза человека и животных.
Musca sorbens Wd. — Базарная муха
Несколько мельче комнатной мухи (5—7 мм). Среднеспинка в сероватом налете с двумя широкими черными полосками, раздвоенными впереди поперечного шва (рис. 186); I брюшной стернит лишен волосков. Базарная муха широко распространена на юге в республиках Средней Азии и в Азербайджане, где встречается преимущественно на открытом воздухе в местах торговли пищевыми продуктами (базарные площади, киоски, ларьки), но может залетать и в дом. Размножается в подсыхающих скоплениях фекалий в уборных и в изолированных порциях экскрементов человека, реже в свином помете. Взрослые мухи, нападая на человека и животных, охотно слизывают с кожи пот, гной, выделения из носа и особенно из глаз, являясь часто переносчиком возбудителя острого эпидемического конъюнктивита. Массовый вылет мух наблюдается в августе.
Musclna stabulans Flln. — Домовая муха
Домовая муха крупнее комнатной (7—9 мм), атласно-серого цвета с четырьмя темными полосами на среднеспинке и пятнами на брюшке. Щупики, голени ног и вершина щитка среднеспинки красновато-желтые. Медиальная жилка дугообразно изогнута по направлению к переднему краю крыла (рис. 187,2). Распространена повсеместно. Выплаживается на самом разнообразном субстрате: в бытовом мусоре, кухонных отбросах, навозе, фекалиях человека, трупах животных и даже в предима-гинальных стадиях саранчовых (паразитический образ жизни). Таким
315
образом, личинки домовой мухи всеядны; они могут вызывать миазы у человека и животных. Взрослые мухи часто обитают в домах наравне
Рис. 186. Musca sorbens, самка. (По Л. С. Зимину).
с комнатной мухой, постоянно встречаются на пищевых продуктах в местах открытой их продажи.
Fannia canicularis L. — Малая комнатная муха
Мелкая муха (5—6 мм), темно-серого цвета с тремя черными полосами на среднеспинке и срединной темной полосой на брюшке. У самцов голова белая, с узким черным лбом; передние сегменты брюшка с боков просвечивающие, желтоватые. У самок голова серая, лоб широкий, брюшко более однотонное, темно-серое, у основания желтоватое. Медиальная жилка крыла прямая, образует небольшой излом в месте отхождения от нее поперечной (медиокубитальной) жилки (рис. 187,3). Очень распространенный вид. Мухи выплаживаются в уборных, свином навозе, во влажных отбросах, в земле, пропитанной мочой и т. д. Взрослые мухи постоянно залетают в дома, кружась под потолком вокруг свисающих предметов; в больших количествах встречаются в хлевах и уборных. Личинки характеризуются коричневатым цветом, уплощенной формой тела и длинными отростками на спине и по бокам. Будучи проглочены с овощами, нередко служат причиной кишечного миаза, 316
Stomoxys calcitrans L. — Жигалка
По внешнему виду жигалка похожа на комнатную муху, отличаясь от нее наличием торчащего впереди тонкого и длинного колющего хоботка с короткими и тонкими щупиками. Среднеепинка светло-серого цвета с четырьмя темными продольными полосами; брюшко с темными округлыми пятнами. Медиальная жилка дугообразно изогнута по направлению к переднему краю крыла (рис. 187, 4). В спокойном состоянии крылья широко расставлены. Жигалка широко распространена во
Рис. 187. Жилкование крыльев синантропных мух.
1 —Musca domcstica, 2 — Muscina stabulans, 3 — Fannia canicularis, 4 — Stomoxys calcitrans.
всех частях света (в СССР не найдена только в Сибири). Местами выплода ее являются навоз домашних животных и гниющие растения (солома, сено, опавшие листья). Массовый лёт наблюдается в августе и сентябре. Взрослые мухи обитают преимущественно в коровниках и конюшнях, но могут встречаться и в других помещениях для скота, залетать в жилье человека. Мухи очень осторожны, сосут кровь в местах, трудно доступных для самообороны животного (на внутренних поверхностях передних ног, на брюхе); человека жалят преимущественно в ноги. Согнанные с человека мухи прячутся обычно под кроватью, под стулом, на внутренних поверхностях ножек стола и т. д. Кровососущи самцы и самки.
Семейство Calliphoridae
Calliphora erythrocephala Meig. — Синяя мясная муха
Крупная муха (7—14 мм) темно-синего цвета с металлическим отливом, покрыта крепкими черными волосками. Лицо и щеки оранжевожелтого цвета с черными волосками; передние грудные дыхальца оранжевые. Встречается повсеместно как в дикой природе, так и в населенных пунктах. Размножается в трупах животных и мясных отбросах, реже в фекалиях человека. Личинки часто служат причиной кишечного и тканевого миазов. Взрослые мухи могут залетать в дом и откладывать яйца на пищевые продукты, особенно мясные.
Близкий вид — Calliphora uralensis Vill. — отличается от предыдущего черным цветом передних грудных дыхалец. В средней полосе
о17
СССР по численности занимает одно из первых мест. Это типичный копрофаг: фекалии человека являются не только основным субстратом для выплода личинок, но и пищей для взрослых мух, которые на мясо садятся редко и яиц на нем не откладывают.
На юге встречается еще один вид синей мясной мухи — Calliphora vomitoria L., отличающийся от предыдущих двух видов черной окраской щек с черными и светло-оранжевыми волосками. Выплаживается в трупах животных и экскрементах человека. Взрослые мухи охотно садятся на фрукты, овощи и сладости.
Lucilia caesar L. — Зеленая падальная муха
Муха средних размеров (6—10 мм), темно-зеленого цвета с металлическим отливом: лицо и щеки желто-белые, щупики желтые, глаза красные, передние грудные дыхальца темные. За поперечным швом среднеспинки имеются две пары акростихальных щетинок. У самцов лоб очень узкий, уже глазкового треугольника (у близкого вида Lucilia illustris Meig. — шире глазкового треугольника). Встречается повсеместно, выплаживается в трупах животных, гниющей рыбе, реже в экскрементах человека. Личинки часто служат причиной миазов.
На юге СССР и Дальнем Востоке широко распространена Lucilia sericata Meig., отличающаяся от предыдущего вида наличием трех пар акростихальных щетинок за поперечным швом и светлыми предкрыло-выми чешуйками (участком крыла у основания костальной жилки).
Protophormia terrae-novae R. D. (= Phormia grenlandica Zett.) — Весенняя падальная муха
Крупная или средних размеров муха (8—11 мм), металлически-синего цвета с зеленоватым отливом; лицо и усики черные, щупики красно-желтые, ноги черные, закрыловые пластинки частично затемненные. Акростихальные щетинки отсутствуют, за исключением одной пары перед самым щитком. Распространена преимущественно в северных и средних широтах. Встречается, главным образом, в городах и поселках городского типа, что связано с определенными местами выплода и характером пищи этой мухи. Хотя муха и носит название падальной, однако основными местами выплода ее являются помойки, мусорные ящики, свалки и значительно реже навоз и трупы животных-Личинки нередко служат причиной миазов. Взрослые мухи зимуют, появляются ранней весной (в марте-апреле); возможны случаи вылета мух зимой из прогретых солнцем зимовок и появления их на снегу.
Семейство Sarcophagidae
Sarcophaga carnaria L. — Серая мясная муха
Крупная серая муха (10—14 мм) с 5 темными продольными полосами на среднеспинке и шашечным рисунком на брюшке. Скулы и щеки золотисто-желтые, широкие, выдаются вперед. За поперечным швом среднеспинки имеется одна пара акростихальных щетинок (перед щитком) и 4 пары дорзоцентральных; второй тергит брюшка посередине заднего края несет пару крепких щетинок; два последних сегмента брюшка черные. Муха распространена повсеместно (чаще на севере и в средней полосе). Развивается на мясе, в трупах животных, реже — в экскрементах человека. Живородяща. Личинки могут вызывать миазы-318
На юге вытесняется другим близким видом — Coprosarcophaga haemorr holdalls Fall., отличающимся полным отсутствием акростихаль-ных щетинок, наличием только двух пар хорошо развитых дорзоцен-тральных щетинок позади поперечного шва (остальные щетинки развиты слабо) и красным цветом двух последних сегментов брюшка. Основным местом выплода этой мухи являются экскременты человека.
Wohlfahrtia magnifica Sehin. — Вольфартова муха
Крупная муха (9—13 мм), светло-серого цвета, с 3 темными продольными полосами на среднеспинке; по бокам срединной полосы в
передней части идут две тонкие линии (рис. 188). Скулы и щеки серебристо-серые, усики черные, третий членик их раза в 1,5 длиннее второго. На светло-сером брюшке темные пятна: треугольной формы —
319
посередине и округлой — по бокам. Распространена преимущественно на юге. Живородяща. Личинки развиваются в ранах и полостях тела животных и человека, вызывая тяжелые разрушения пораженных органов (истинный паразитизм).
Семейство Syrphidae — Цветочные мухи
Erystalis tenax L. — Иловая муха
Крупная муха (до 15 мм), пестрой коричневатой окраски, напоминает пчелу или шмеля. Питается нектаром цветов и с человеком соприкасается мало, но ее личинки часто встречаются в уборных, сточных канавах, сильно загрязненных фекалиями водоемах и т. д. Личинка имеет характерный вид: на заднем конце червеобразного тела находится длинный (до нескольких сантиметров) дыхательный сифон, напоминающий хвост крысы, из-за чего в народе личинка получила название «крыски». Благодаря наличию сифона личинка может находиться в очень загрязненных водоемах, выставляя свой сифон над поверхностью жидкости для дыхания. Возможны случаи кишечного миаза при заглатывании личинок с питьевой водой.
ЛИТЕРАТУРА
Беклемишев В. Н. (ред.). Учебник медицинской энтомологии. Ч. 1, Медгиз, М., 1949.
Дербенева-Ухова В. П. Мухи и их эпидемиологическое значение. Медгиз, М., 1952.
Зимин Л. С. Определитель личинок синантропных мух Таджикистана. Изд. АН СССР, 1948.
Зимин Л. С. Семейство Muscidae. Настоящие мухи. Фауна СССР, Насекомые двукрылые, т. 18, № 4, изд. АН СССР, 1951.
Павловский Е. Н. Мухи. Изд. НКЗ РСФСР, М., 1921.
Павловский Е. Н. Насекомые и заразные болезни человека. Медгиз, М.. 1928. Сухова М. Н. Синантропные мухи. Изд. АМН СССР, 1952.
Штакельберг А. А. Определитель мух Европейской части СССР. Изд. АН СССР, 1933.
Штакельберг А. А. Синантропные двукрылые фауны СССР. Изд. АН СССР, 1956.
БЛОХИ - ОТРЯД APHANIPTERA
Блохи — отряд насекомых, включающий большое количество видов, паразитирующих на млекопитающих и птицах.
СБОР И ОБРАБОТКА МАТЕРИАЛА
Блох собирают с их хозяев, в гнездах, норах, логовах, в различных жилых помещениях, особенно типа глинобитных построек с земляным полом, в кибитках и т. д. Личинок находят в мусоре из клеток лабораторных животных (особенно крыс и мышей), нор диких животных, под подстилками собак и кошек, под кошмами и т. п. Мусор просеивают через сита разного диаметра или просто разбрасывают на большие листы гладкой бумаги и выбирают личинок тонким пинцетом или кисточкой, смоченной водой или спиртом (в зависимости от цели — сохранение личинок живыми или консервированными). Личинки беловатого цвета, очень подвижны, поэтому их легко обнаружить.
320
Взрослых блох с собак можно собирать, предварительно обмыв животных теплой водой, к которой прибавлен керосин (6—8 ложек на ведро воды). Шерсть прочесывают гребешком, обездвиженных или убитых блох собирают в банку с 70° спиртом. Для вылавливания блох с мелких животных последних сажают в жестяные баки, стенки которых обильно смочены керосином. Сверху бак прикрывают стеклом. Минут через 15 все блохи покидают хозяина, после чего его удаляют, а блох собирают в спирт. От пребывания в парах керосина в течение 15—20 минут животное не погибнет, но за это время все же следует несколько раз приподнимать стекло, чтобы дать доступ воздуху. С животных, выгнанных из нор водою, блох собирают прямо на месте. Животных держат щипцами или сажают в клетку, которую ставят посредине разостланной простыни. С мокрых животных блохи обычно уходят. Расползающихся блох собирают кисточкой, смоченной спиртом. Блохи довольно быстро покидают остывающий труп хозяина. Мелких животных подвешивают над большими воронками, трубки которых вставлены в банки, куда блохи и скатываются по стеклу, спрыгивая с мертвого хозяина. Труп (например, в полевых условиях) можно помещать на разостланные простыни и расползающихся блох быстро собирать мокрой кисточкой. Можно помещать убитое животное в хорошо закрывающуюся коробку или в кисет из плотной материи, куда через некоторое время пускают несколько капель хлороформа; убитых блох перекладывают в спирт Ч Из гнезд блох выбирают, разбирая гнездо по частям в ванночках с высокими бортами. В помещениях, где много блох, рекомендуют ставить на пол тарелки с водой (или жидким маслом). Прыгающие по полу блохи попадают в тарелки, откуда их выбирают пинцетом или кисточкой и помещают в баночки со спиртом.
ПРИГОТОВЛЕНИЕ ПРЕПАРАТОВ
Блох можно определять живыми, для чего их помещают в капли физиологического раствора, нанесенные на предметные стекла, и прикрывают покровным стеклом или сажают в капилляры пастеровских пипеток. Однако определение блох таким способом возможно лишь при хорошем знании систематики.
Для изготовления постоянного препарата блох переносят из спирта в воду минут на 15—20. Здесь блоху прокалывают острой иглой в области брюшка. Из воды блох перекладывают в 10% раствор едкого кали (натра) и кипятят в пробирке над спиртовкой в течение одной-двух минут. После этого пробирку переносят в термостат, где оставляют на 3—5 часов, при температуре 35—40°, до просветления брюшка и груди. Слишком сильно просветлять блох нельзя; они должны сохранять отчетливо желтый цвет. Далее объект промывают в воде, проводят через спирты возрастающей крепости (50, 65, 70, 85, 96°) и помещают для обезвоживания в абсолютный спирт или карбол-ксилол (из 96° спирта), где оставляют на полчаса и дольше. Из карбол-ксилола их можно непосредственно переносить в канадский бальзам. После абсолютного спирта просветляют в ксилоле или гвоздичном масле. Для приготовления временных препаратов, вынутых из спирта блох прокалывают острой иглой, помещают на несколько часов в абсолютный спирт и на сутки
1 Мелких животных, пойманных живыми, можно убивать, сворачивая им голову. Животное, посаженное в кисет, одной рукой схватывают за корпус, второй забирают в ладонь голову так, чтобы пальцы приходились под нижними челюстями. Голову зажимают и быстро поворачивают на 120°. Это движение моментально убивает животное, после чего с него собирают блох описанным выше образом.
21 Зак. 3420. Лабораторный практикум медицинской паразитологии	321
в гвоздичное масло. После определения (без заделки в канадский бальзам) блох через абсолютный спирт можно вернуть в 70° спирт для дальнейшего хранения.
Очень хорошие, стойкие препараты получаются при заключении блох к гуммиарабиковую смесь (стр. 15). В гуммиарабик переносят блох, промытых водой после обработки едким кали. Необходимо помнить, что пузырек воздуха, попавший в каплю гуммиарабиковой смеси, не растворяется. Поэтому, покрывая каплю смеси, с заключенной в ней блохой, покровным стеклом, надо соблюдать установленные предосторожности.
ИЗУЧЕНИЕ ПРЕПАРАТОВ
Взрослые насекомые. Наружное строение
Тело блохи (рис. 189) сжато латерально, поэтому на препарате опа всегда лежит боком. Сжатое с боков тело, покрытое плотным хитином, усики, спрятанные в ямках головы, мелкие волоски и шипики, прижатые к телу и направленные назад, обеспечивают блохе возможность легко и быстро продвигаться в шерсти или в волосах хозяина. Наружное
1 — нижнечелюстные щупики, 2 — глазная щетинка, 3 — гл аз, 4 — усик, 5 — про-илевра, 6 — пронотум, 7 —мезоплевра, 8— метэпистернум, 9 —метанотум, 10 — стигма, 11 — семеприемник, 12 — предпигидиальная щетинка, 13 — пигидий, 14 — метастернум. Малое увеличение.
строение блох — яркий пример адаптации к соответствующим условиям жизни, т. е. к паразитированию на покрытом шерстью, волосами или перьями теле.
Изучая морфологию человеческой блохи Pulex irritans, параллельно отметим, какие особенности строения необходимо знать для определения других видов.
Тело блохи разделяется на голову, грудь и брюшко. У самцов в конце брюшка просвечивают хитиновые части копулятивного аппарата в виде удлиненных и спиралеобразно закрепленных образований, у самок — сперматеки в виде пузырька с придатком разнообразной формы.
Передняя часть головы выпуклая, округленная. Ею блохи раздвигают шерсть или перья при движении на теле хозяина. Черное, округлен-322
ное образование на боковой поверхности головы — простой глаз (рис. 189). (Фасеточных глаз у блохи нет.) У некоторых видов глаза редуцированы или вовсе отсутствуют, как, например, у блох, постоянно живущих в норах сусликов. Сзади глаза находится усиковая ямка. В ней лежит усик, состоящий из двух члеников и булавы. У Pulex irritans первый членик более или менее грушевидный, второй кольцевой (большое увеличение!). У других видов блох форма этих члеников бывает иной (рис. 190, 191, 192). Булава — часть усика, легко заметная при рассмотрении области головы сзади глаза. Степень сегментации булавы у разных видов блох неодинакова. У Xenopsylla cheopis булава вообще не подразделяется на членики, у других сегментация выражена
Рис. 190. Голова и грудь Ct епосер halides cants.
7—ктенидии первого грудного сегмента, 2— фронтальный зубец головного ктенидия, 3 — нижнечелюстные щупики, 4 — верхняя челюсть, 5 — верхняя губа, 6 — нижнегубные щупики, 7—нижние челюсти, 8 — нижняя губа. Большое увеличение.
неясно. У человеческой блохи в ней насчитывают девять члеников (некоторые авторы булаву у всех блох считают одночлениковой). У самцов булавовидные части усиков значительно удлинены. Ими самец удерживает самку при копуляции. Усиковая ямка делит голову на переднюю и заднюю часть. Передняя часть головы до места прикрепления усиков называется лбом. Верхняя поверхность задней части головы носит название темени. Бороздка, соединяющая усиковые ямки, проходит между лбом и теменем. Нижнебоковая поверхность от лба до ямки усиков представляет щечный край. У Pulex irritans край лба гладкий. У других блох здесь может находиться зазубринка, называемая лобным зубчиком, степень развития которого различная.
Ротовой аппарат колющего типа обращен вниз. Его удобно рассматривать на препарате головы кошачьей и собачьей блохи, под большим увеличением. В первую очередь обращают на себя внимание довольно широкие уплощенные пластинки с острым краем. Это нижние челюсти (рис. 191); кпереди от них выдаются парные четырехчлениковые нижнечелюстные щупики (рис. 190, 191). Не следует смешивать их с усиками блохи. Верхние челюсти (рис. 190)—узкие, удлиненные, парные пластинки, по краям которых проходят зазубренные ребрышки (верхние челюсти напоминают собой напильники). Между ними тянется непарная пластинка с гладкими краями и желобком вдоль задней стенки —
323
21*
верхняя губа (рис. 190). Нижняя губа, раздвоенная на конце, с глубоким желобком посередине и нижнегубными щупиками, прилегающими к ее наружным краям, является также удлиненной частью ротового аппарата. Чтобы ее заметить, следует очень внимательно всматриваться в препарат, вращая микрометрическим винтом. Нижняя губа чаще на
препарате прилегает к заднему краю нижних челюстей, из-под которых она выдается. Нижнегубные щупики состоят из четырех члеников. Количество члеников может быть и иным, оно имеет систематическое значение.
На голове имеется различное число щетинок. Они подлежат более подробному изучению, так как имеют систематическое значение. В передней части головы первый от глаза ряд щетинок называется глазным. Щетинка этого ряда, находящаяся около глаза, называется глазной, а нижняя максил-лярной (рис. 189, 192). УPulex irritans эти две щетинки и составляют глазной ряд. Их рассматривают при большом увеличении. Глазная щетинка Pulex irritans лежит перед глазом и ниже его. У других видов число щетинок этого ряда может быть другим, а глазная щетинка может занимать другое положение. Так, например, у Xenopsylla cheopis глазной ряд состоит из трех щетинок, и глазная находится перед глазом, на уровне его (рис. 192). Кпереди от глазного ряда лежит почти
Рис 191. Голова Ctenocephalides felis.
1- фронтальный зубец головного ктенидия, J — нижнечелюстные щупики, 3 — пнжпегубиые щупики, 4 — нижние челюсти. Большое увеличение.
Рис. 192. Голова и грудь Xenopsylla cheopis.
1 -усик, 2-глаз, 3— глазная щетинка, 4 — проплевра, ВерТИКаЛЬНО ЛООНЫИ, ИЛИ 5 —тазик передней ноги, 6 — мезоплевра с хитинизированным ,
тяжем, 7— метастернум, 8 — метэпистериум.	СррОНТЭЛЬНЫИ, рЯД ЩСТИНОК,
перед которыми бывает еще префронтальный. Если фронтальные щетинки доходят до щечного края, то говорят о полном фронтальном ряде. Если имеются лишь верхние щетинки, то говорят о неполном фронтальном ряде. Задняя часть головы несет первый и второй ряд теменных щетинок; иногда они отсутствуют, как, например, у Pulex irritans.
Кроме того, на голове вдоль бокового края могут находиться широкие плоские зубцы, образующие гребни-ктенидии. Их легко заметить при малом увеличении на голове собачьей, а также кошачьей блохи (рис. 190 и 191). У человеческой блохи ктенидии отсутствуют. Зубцы,
324
Рис. 193. Тергиты брюшка Ceratophyllus tes-quorum.
1 — ктенидий первого грудного сегмента, 2—апикальные шипики, 3 — стигмы. Большое увеличение.
краю его может находиться
Рис. 194. А — нога блохи: 1—тазик, 2—вертлуг, 3—бедро, 4 — голень, 5 — лапка. Б — последний членик лапки: 6—подошвенные шипики. Большое увеличение.
На поепаоате видно, что
расположенные по всему краю головы, начиная от лба, составляют ротовой ктенидий (собачья, кошачья блоха); если же они помещаются по нижнему краю головы, только под глазом, то образуют щечный ктенидий. Глазной ктенидий состоит из зубцов, лежащих вдоль усиковой ямки. У видов блох, имеющих ктенидии, число и положение зубцов имеют систематическое значение. Голова соединена с грудью прочным основанием.
Сегменты груди состоят из верхних полуколец—тер-гитов, нижних полуколец — стернитов и срединных пластинок, называемых плеврами. На препарате тергиты представлены сравнительно широкими, удлиненными пластинками, с поперечными
рядами волосков вдоль своего заднего края. Тергит, прилегающий к голове, носит название переднеспинки — пронотум (рис. 189). По заднему ктенидий, состоящий из темно хитинизи-рованных зубцов. У Pule к irritans этот ктенидий отсутствует, но выражен у Cte-nocephalides (рис. 190) и у представителей Ceratophyllus (рис. 193). За пе-реднеспинкой следует среднеспинка, или мезонотум; последний тергит груди— заднеспинка, или метанотум (рис. 189). Ниже переднеспинки замечаем небольшую пластинку, огибающую голову снизу. Это проплевра (рис. 189, 192). За ней видим вторую, более крупную удлиненно-овальную пластинку — мезоплевру (рис. 189). У Pulex irritans она гладкая, у Xenopsylla cheopis (рис. 192) имеет внутренний хитинизированный тяж. Последний тянется вдоль мезоплевры по ее средней линии, что имеет значение в систематике блох. Ниже третьего тергита замечаем две пластинки; одна из них, метэпистернум (рис. 189, 192) крупнее, почти четырехугольной формы, с округленными кра ми, другая — метастер-нум — меньших размеров, располагается между этой пластинкой и тергитом.
Грудь несет три пары ног. Задняя пара — прыгательная, наиболее длинная. Каждая нога (рис. 194) состоит из тазика, вертлуга, бедра, голени и лапки, тазики — наиболее широкие, несколько
удлиненные членики ног — покрыты щетинками и шипиками. Особого внимания заслуживают косые ряды шипиков, находящиеся на внутренней стороне задних тазиков. Они отчетливо выражены у Pulex irritans. Чтобы увидеть их, следует в центр поля зрения микроскопа
поставить тазики задней пары ног. Переведя малое увеличение на большое и вращая микрометрическим винтом, можно заметить в нижней половине тазиков ряд мелких шипиков, идущий наискось. Вертлуг — маленький членик между тазиком и бедром, обусловливающий подвижность находящегося за ним отдела ноги. Бедро — удлиненный и сравнительно широкий членик, но уже тазика. На бедрах видим ряды щетинок: базальные и апикальные ближе к вентральному краю, между этими двумя — боковые, расположенные наискось. У других видов блох эти
ряды щетинок более или менее параллельны вентральному краю бедра. Голень — более удлиненный и узкий членик. На ней имеются свои ще-7	тинки. Наиболее разви-
тие. 195. Наружные покровы последних сегментов самца Ceratophyllus fasciatus.
/ — шестой тергит, 2 — седьмой тергит, 3 — предпигидиальная щетинка, 4 — пигидий, 5 — девятый тергит, б — десятый тергит, 7—подвижный палец половой клешни, 8 — восьмой тергит, 9 — восьмой стернит, 10— седьмой стернит. Большое увеличение.
тые, называемые шпорами, находятся вдоль заднего края задних голеней, образуя гребенчатый ряд. Характерно их попарное расположение. Лапка состоит из пяти члеников. Последний заканчивается двумя коготками. По краям, при сильном увеличении, видны 4 пары толстых щетинок. На базальной поверхности, над коготками, заметны подошвенные шипики; лежащие при основании членика — называются базальными, между коготками— приногтевыми. У человеческой блохи первые отсутствуют, вторые развиты. Шипики и щетинки лапки имеют систематическое значение. Кроме того, лапка покрыта волосками. Они тоньше и длиннее щетинок.
Брюшко состоит из десяти сегментов (рис. 195). Три последних окружают половое и анальное отверстия. Каждый сегмент образован
верхним полукольцом — тергитом и нижним полукольцом — стернитом, покрытыми рядами щетинок. На тергитах различают вертикальный задний ряд более крупных щетинок и передний ряд более мелких щетинок. Тергиты передних сегментов несут иногда ктенидии (у человеческой блохи их нет), похожие на ктенидии переднеспинки. Чаще вместо них присутствуют короткие широкие апикальные шипики (большое увеличение!), отчетливо выраженные, например, у блохи Ceratophyllus tes-quorum (рис. 193). У человеческой блохи их нет. На боковой поверхности брюшка, близ места соединения тергитов и стернитов, замечаем 8 светлых точек — это дыхальца, или стигмы (рис. 189, 193). На спинной стороне девятого сегмента привлекает внимание своеобразная, похожая на решето, пластинка. Это пигидий (рис. 189), особый орган чувств — овальное хитинизированное образование с большим числом маленьких круглых светлых ячеек и мелких чувствительных волосков. Обратим внимание на задний край седьмого тергита. К нему у Pulex Irritans
326
и у других блох прикрепляется удлиненная толстая щетинка, обращенная назад и торчащая над пигидием (рис. 189, 195). Это — предпи-гидиальная щетинка, по всей вероятности защищающая чувствительное поле девятого брюшного сегмента. Число предпигидиальных щетинок бывает разным и учитывается в систематике блох. Десятый сегмент брюшка называется анальным, девятый — преданальным. У самки брюшко кончается двумя членистыми придатками — церками. Тергиты и стерниты брюшных сегментов черепицеобразно покрывают друг друга. Близ заднего конца тела хорошо виден задний край седьмого стернита, который у Pulex irritans имеет вырезку. У других видов имеются выемки разного рода, выпуклости или край стернита остается прямым
Рис. 196. Копулятивные органы самца Ceratophyllus fasciatas.
/ —тело половой клешни, 2—неподвижный палец половой клешни, 3 — подвижный палец половой клешни, 4 — ацетабулюм, 5 — восходящая ветвь девятого стернита, 6 — пенис, 7 —рукоятка половой клешни. Большое увеличение.
(рис. 195). В конце брюшка самки на просветленном тотальном препарате заметна чашковидная, овальная или иной формы капсула с особым трубковидным придатком. Это семеприемник (рис. 189), его строение учитывается при систематическом определении самок. У самца в заднем отделе брюшка видны сложные хитиновые части копулятивного аппарата, являющиеся измененным придатком девятого сегмента. Они носят название половой клешни. Ею самец удерживает самку при копуляции. Детали строения клешни очень важны при определении самцов блох. Половая клешня состоит из тела, рукоятки, подвижного пальца, суставного бугра и неподвижного пальца.
Половая клёшня рассматривается на препарате крысиной блохи Ceratophyllus fasciatus (рис. 196). Изучение частей полового аппарата начинают от пигидия, поместив конец брюшка в центр поля зрения микроскопа. Спереди пигидий огибает широкая хитиновая полоска. Следуя глазом по краю этой полоски, можно увидеть, что кпереди и книзу она вытягивается в длинный, суживающийся к концу отросток — это рукоятка половой клешни; основанием ее служит широкая площадка— тело половой клешни. Прослеживая нижний край клешни кзади, замечаем, что здесь тело ее закругляется кверху, образуя дужку,
327
ограничивающую сзади и сверху суставную ямку — ацетабулюм. На дужке имеются две длинные ацетабулярные щетинки. Выше дужки находится выступ, покрытый тонкими щетинками. Это неподвижный палец половой клешни. Ацетабулюм соединяется с подвижным лопастевидным образованием — подвижным пальцем. У разных блох эта часть полового аппарата имеет разную форму. У крысиной блохи на подвижном пальце имеются две длинные щетинки и несколько мелких. Толстые длинные щетинки этого пальца называются шпорами. Все описанные образования парные. Подвижными пальцами половой клешни самец схватывает конец брюшка самки во время копуляции. Рукоятка половой клешни на некотором расстоянии от своего основания пересекается длинной, узкой, изогнутой пластинкой, опускающейся книзу. Это восходящая ветвь девятого стернита. Кзади от основания этой ветви отходит сравнительно широкая пластинка — горизонтальная ветвь девятого стернита, покрытая мелкими щетинками. Кпереди девятый стернит переходит в длинную, спирально изогнутую нить. Кзади от спиральной нити виден поперечно лежащий копулятивный орган — пенис. Снаружи все эти части прикрыты заходящими друг на друга тергитами и стернитами.
Систематика блох очень сложна, основывается на ряде признаков. Учитываются места расположения щетинок на голове, ряды щетинок, ктенидии, шипики брюшных сегментов, предпигидиальные щетинки, щетинки члеников лапки, строение семеприемника, строение половой клешни.
Главнейшие виды
Pulex irritans L.
У блох рода Pulex L. ктенидии на голове и на груди отсутствуют. Лоб не имеет хитинизированных бугров. Глазная щетинка ниже глаза (рис. 189). Губные щупики из четырех члеников. Плевра среднегруди без особого хитинового тяжа. Предпигидиальные щетинки развиты, по одной с каждой стороны.
Pulex irritans L. темно-каштанового, иногда почти черного цвета. Единственный вид Pulex в Европе и на севере Азии. Длина самца 1,5—3 мм, самки 2—4 мм. Кроме человека встречается на собаках, кошках, некоторых хищниках (волке, лисе) и других животных.
Xenopsylla cheopis Roths.
У блох рода Xenopsylla Glink. ктенидии на голове и на груди отсутствуют. Голова без хитинизированных бугров. Глазная щетинка помещается против глаза (рис. 192). Метэпистернум обособлен и не сливается с метастернум. Плевра среднегруди (рис. 192) имеет обособленный хити-низированный тяж, идущий от места прикрепления тазика кверху.
У Xenopsylla cheopis Roths, глазной ряд состоит из трех щетинок. В заднем отделе головы две щетинки. Самцы имеют с каждой стороны по два подвижных пальца половой клешни. Верхний подвижный палец вдвое шире нижнего и несет гребень из четырех пар щетинок. Булава сяжков не подразделена. Плевры среднегруди разделяются швом на две части. Длина самца в среднем 1,5 мм, самки — 2,5 мм. Крысиная блоха Индии и других тропических стран. Завезена в портовые города всего мира. Имеет большое значение в эпидемиологии чумы.
Ceratophyllus fasciatus Bose.
У блох рода Ceratophyllus Curt, лобный зубчик всегда выражен, хотя бы и в рудиментарной форме. Головные ктенидии отсутствуют. Пронотум с ктенидиями из 4 или более зубцов. Глазной ряд состоит из 328
трех щетинок. Глазная сндит впереди глаза, но не выше его. Предпиги-диальных щетинок у самцов одна-две, у самок две-три с каждой стороны. Передние тергиты брюшка с 1—4 спинными хитиновыми зубчиками— апикальными шипами.
У Ceratophyllus fasciatus Bose, на внешней поверхности задних бедер нет боковых щетинок. Передний край подвижного пальца половой клешни имеет вид тупого угла; задний край несет две щетинки. Расстояние между ними больше или равно расстоянию от верхней щетинки до вершины подвижного пальца. Апикальный край седьмого стернита самки как бы обрублен, без боковой выемки и без выступающей лопасти. Но три предпигидиальных щетинки с каждой стороны.
Ceratophyllus tesquorum Wagn.
На внешней поверхности задних бедер боковые щетинки есть. Подвижный палец половой клешни треугольный, с двумя короткими прямыми шп' рами в верхней половине заднего края. Передний край его вогнутый, задний — выпуклый. Рукоятка широкая, почти прямая. Вертикальная часть девятого стернита прямая, горизонтальная, с коническим концом. Апикальный край седьмого стернита самки с очень небольшой выемкой. По две предпигидиальных щетинки с каждой стороны. Типичная блоха юго-востока СССР. Паразитирует на сусликах и на других степных грызунах. Изредка попадает в жилье человека.
Ctenocephalides canis Curt.
У блох рода Ctenocephalides S. et С. ктенидий развит вдоль ротового края головы (рис. 190) и на пронотуме. Первый состоит из семивосьми зубцов, второй из восьми с каждой стороны. С внутренней стороны задние ноги имеют ряд или пучок щетинок.
У Ctenocephalides canis Curt, длина головы в 1,5 раза больше ее ширины. Первый фронтальный зубец ктенидия короче второго (рис. 190).
Паразитирует на собаках. Охотно нападает и на людей.
Ctenocephalides felis Bouche
Длина головы (рис. 191) в 2 раза больше ее ширины. Первый фронтальный зубец ктенидия одинаковой длины со вторым.
Паразитирует на кошках. Нападает и на людей.
Личинка
Личинка (рис. 197) имеет удлиненную, червеобразную форму. При вращении кремальеры заметны более или менее параллельные полоски, лежащие поперек тела. Это границы сегментов, покрытых со спинной, брюшной и боковой поверхности волосками. Волоски передних сегментов короче задних. Головной конец личинки округленный, слегка загнутый; задний — тупой, с парой удлиненных выростов. Три сегмента, расположенных за головой, составляют грудь, остальные — брюшко. Брюшная сторона грудных сегментов слегка выпукла, образует нечто вроде слабо выраженных ползательных бугорков. Ног нет. Ползая, личинка производит как бы кивающие движения головой, упираясь ею в субстрат, благодаря чему довольно быстро передвигается. При
32£>
рассматривании головы (при большом увеличении!) на дорзальной ее поверхности видны 2 цилиндрических выроста. Это сяжки, из которых каждый заканчивается коротким, тонким волоском. На переднем конце головы замечаем небольшое углубление, ведущее в ротовое отверстие. Над ним лежат слегка вытянутые и изогнутые темные хитиновые части. Это верхние челюсти, вдоль внутреннего края которых расположены зубцы. Личинка обладает грызущими ротовыми частями; нарушать целость покровов животных и питаться их кровью она не может, сухие же испражнения взрослых блох соскабливает особенно охотно, чем и объясняется наличие крови в пищеварительном канале. При лабораторном содержании личинок их необходимо подкармливать сухой кровью. В этом случае личинки хорошо живут и развиваются. Членистые пластинки, лежащие под верхними челюстями — нижние челюсти, которые
Рис. 197. Личинка блохи. Большое увеличение.
несут небольшие нижнечелюстные щупики, имеющие вид маленьких бугорков, покрытых волосками.
Сквозь покровы личинки просвечивают некоторые внутренние органы. При вращении кремальеры в переднем грудном' сегменте различается трубка с хорошо очерченными краями. Это пищевод, который в начале второго сегмента отделяется перехватом от следующего отдела — зоба, части кишечной трубки с более тонкими, расширяющимися кзади краями. В начале брюшка виден новый перехват, служащий границей между зобом и желудком. Последний можно проследить почти что до седьмого сегмента. В сегментах VII—IX проходит трубка меньшего диаметра. Это тонкая кишка, которая в начале десятого сегмента переходит в короткую, толстую кишку, заканчивающуюся у задней стенки этого сегмента, между его вентральными придатками, анальным отверстием. Между сегментами IV—VI просвечивают тонкие изогнутые ленты — мальпигиевы сосуды. На вентральной стороне тела, с первого грудного по седьмой брюшной сегмент, замечаем тела овальной формы, соединенные между собою перемычками. Это — брюшная нервная цепочка. Надглоточный и подглоточный узлы — в виде неясной массы в голове. По обе стороны кишечной трубки заметны мышцы в виде лентовидных пучков, расположенных частью параллельно кишечной трубке, частью перпендикулярно или под углом к ней.
ЛИТЕРАТУРА
Беклемишев В. П. (ред.). Учебник медицинской энтомологии. Ч. 1, Медгиз, М., 1949.
Павловский Е. Н. Руководство по паразитологии человека. Т. II, изд. АН СССР, 1948.
Павловский Е. Н. Насекомые и заразные болезни человека. Изд. Наркомздрава РСФСР, 1928.
И о ф ф И. Г. Вопросы экологии блох в связи с их эпидемиологическим значением. Орджоникидз. кр. изд., Пятигорск, 1941.
Иофф И. Г. и Скалой О. И. Определитель блох Восточной Сибири, Дальнего Востока и прилегающих районов. Медгиз, 1954.
330
ВШИ И ВЛАСОЕДЫ
СБОР МАТЕРИАЛА
Вшей и гнид консервируют в 5% водном формалине или в 70° спирте. Локализация человеческих вшей на теле человека и в его одежде относительна: головные вши могут быть и в белье и на волосах тела, платяные вши бывают и на теле, площицы встречаются (относительно редко) и на волосах бровей, бороды и на ресницах.
Из власоедов для человека имеют значение лишь власоеды собачий и кошачий. Первый встречается чаще, чем второй. Собирают их в шерсти неопрятно содержимых животных. Консервируют так же, как вшей.
Препараты для занятий. Материал проводят через спирты возрастающей крепости (обязателен прокол острой иглой хитиновых покровов), просветляют в гвоздичном масле, ксилоле или карбол-кси-лоле и заключают в канадский бальзам; под углы покровного стекла помещают ножки. Для заключения постоянных препаратов можно с успехом применять гуммиарабиковую смесь. Материал выдерживают в воде до полного отмытия спирта или формалина, прокалывают иглой и непосредственно заключают в указанную смесь. Заблаговременно заготовляют для выдачи на занятиях комплекты препаратов: самцов и самок головных вшей, платяных вшей и площиц; гнид всех видов вшей (на одном стекле); власоеда собаки или кошки.
Для демонстрации заготовляют стадии метаморфоза головной или платяной вши, продольный срез головы и передней половины тела Pediculus, отпрепарованные органы — желудок, слюнные железы, половые органы самки; тотальные препараты взрослых власоедов кошки или собаки.
ИЗУЧЕНИЕ ПРЕПАРАТОВ
Вши
На человеке паразитируют вши родов Pediculus и Phthirus. Различить их легко; при слабом увеличении микроскопа или под сильной лупой рассматривают форму тела.
А — тело удлиненное, сравнительно узкое; его наиболее широкая часть приходится на брюшко.............Pediculus — головная или
платяная вошь.
Б — тело короткое, трапециевидное; его наибольшая ширина отмечается на груди..............Phthirus	— площица (лобковая вошь).
Для распознавания полов пользуются следующими общими признаками.
А — задний конец тела раздвоен; через покров брюшка часто просвечивают созревающие или созревшие яйца . . . Самка Pediculus,
Б — задний конец брюшка округлый; в задней части брюшка с нижней стороны просвечивают вспомогательные части копулятивного аппарата — темные хитиновые полосы, образующие как бы клин, задний конец которого нередко торчит наружу............Самец Pediculus.
Al — через покров брюшка просвечивают созревающие или созревшие яйца..........................................Самка	Phthirus.
Bi — в задней части брюшка с нижней стороны просвечивают хитиновые полосы копулятивного аппарата...............Самец	Phthirus.
Вообще можно отметить, что самцы вшей по размерам тела меньше самок.
331
Самка Pediculus
При слабом увеличении микроскопа рассматривают весь препарат (рис. 198) со спинной стороны и ориентируют его головой вперед. Голова ясно обособлена от груди. Брюшко начинается позади третьей пары ног.
Голова расширена в средней части, несущей простые глазки. На суживающихся кпереди боковых ее сторонах сидят пятичлениковые усики. Верхняя поверхность головы между основаниями усиков и глазами называется лбом, а задняя, суживающаяся часть ее — затылком;
Рис. 198. Pediculus capitis.
А — самка, Ь — самец. Малое увеличение.
кпереди от основания усиков лежит щиток из утолщенного хитина. Передний край головы правильно округлен, с маленьким серединным возвышением — ртом. По краям и на поверхности головы имеются лежащие группами или поодиночке волоски. Глаза с прозрачной роговицей, под которой заметно большое скопление пигмента. Они относятся к категории простых глазков. Ротовых частей не видно, ибо они втянуты внутрь головы в особый футляр (см. препарат продольного разреза головы).
Грудь имеет форму, приближающуюся к трапеции, с несколько выпуклыми боками. Она слитная, поэтому различить передне-, средне- и заднегрудь не удается. В центре груди видна продольная полоска (впя-чивание хитина внутрь), от которой радиально расходятся к ногам ножные мышцы (эндоскелет). По бокам видны дыхальца, или стигмы, по одному с каждой стороны. У сильно пигментированных особей они 332
трудно различимы. С дыхальцем не надо смешивать круглые непигмен-тированные участки пигментированного края груди; из центра этих желтоватых пятен торчит по волоску. Нет никаких следов крыльев. Снизу из-под груди видны три пары ног.
Брюшко отличается фестончатыми краями. Фестонов шесть пар; каждая пара соответствует брюшному сегменту. Но фактическое число сегментов больше, так как явственный первый сегмент брюшка морфологически соответствует, видимо, двум сегментам. Позади последней пары фестонов лежит еще один сегмент. На вершине каждого фестона открывается по дыхальцу; всего в брюшке, следовательно, шесть пар стигм. От стигм отходят трахейные стволики, впадающие в продольные брюшные
Б
5
Рис. 199. Нога (Л) и усик (Б) самца Pedl-culus.
1 — тазик, 2 — вертлуг, 3— бедро, 4 —голень, 5 —лапка. Малое увеличение.
Рис. 200. Задний конец брюшка самки головной (Л) и платяной (Б) вши.
Видна различная форма половых серповидных придатков (7) —более широких и тупых у головной и более узких у платяной вши. Большое увеличение.
трахейные стволы. На поверхности хитина видны лежащие несколькими рядами волоски. Края брюшка пигментированы в различной степени; пигмент может вовсе отсутствовать. Восьмой сегмент брюшка подразделен (расщеплен); здесь открывается заднепроходное отверстие. Боковые дольки конца брюшка несут длинные волоски.
С брюшной стороны рассматривают прикрепление ног к груди. Непосредственно с грудью срастается тазик ноги (рис. 199), с ним сочленяется короткий членик — вертлуг, далее идут бедро, голень и одночле-никовая лапка, оканчивающаяся коготком. Коготок складывается подобно лезвию перочинного ножа и защемляет волос, за который держится вошь. Голень на дистальном конце расширена; ее внутренний выступ несет широкий шип и несколько жестких волосков. На брюшке снизу рассматривают поперечные ряды волосков. В предпоследнем сегменте видно своеобразное по форме пигментное пятно (приблизительно пятиугольной формы), вершиной направленное назад. Кзади от него лежит пара серповидно изогнутых придатков, называемых гоноподами, принадлежащих VIII сегменту (рис. 200). Края их несут волоски. Между основаниями гонопод лежит половое отверстие. Этими придатками вошь обхватывает волос или нить ткани, на которую она откладывает яйцо.
333
Самец Pediculus
Общие морфологические отношения те же, что и у самки. Находим следующие отличия. Голень первой пары ног развита сильно; на дистальном конце она несет громадный пальцевидный вырост с шипом и волосками. На брюшке обычно заметны поперечные границы сегментов. В трех последних сегментах просвечивают две сходящиеся под острым углом хитинизированные полосы, общий конец которых выступает наружу на заднем (округлом) конце брюшка. Эти полосы называютсяди-ляторами копулятивного органа, который они обслуживают. Задний
Рис. 201. Задний конец брюшка самца Pediculus.
А —в нормальном состоянии, Б — с выпяченным копулятивным органом. 1 — базальная пластинка, 2 — дилятор, 3 — пенис, 4 — половая щель. Большое увеличение.
округлый край брюшка опушен волосками. Пигментация варьирует. На спинке брюшка бывают поперечные, неправильной формы пигментированные полосы. Иногда попадаются самцы с вывернутыми половыми частями, именно копулятивными органами; в таком случае на заднем конце брюшка виден вывернутый мешок из мягкого хитина с копулятивным органом (рис. 201).
Отличия Pediculus vestimenti Nitzsh от Pediculus capitis De Geer
Головные и платяные вши некоторыми авторами считаются формами одного и того же вида — Pediculus humanus L. Другие признают их за различные виды.
Видовые отличия этих вшей (рис. 200) сводятся к следующему:
Головная вошь
Фестоны брюшка имеют глубокие вырезки, вдающиеся внутрь; гоноподы широки F более тупы на конце.
Платяная вошь
Фестоны брюшка не имеют глубоких вырезок; гоноподы более узки и остры на конце.
334
Демонстрационные препараты
Продольный разрез передней части тела Pediculus* колюще-сосущий ротовой аппарат (рис. 202).
Препарат снаружи окаймлен хитином кожных покровов, к которому изнутри прикрепляются пучки поперечнополосатых мышц. На переднем конце головы видно отверстие — рот, ведущее в ротовую полость — часть передней кишки, извивающейся в голове и проходящей в виде прямого пищевода в груди. В ротовую полость открывается также узкий и длинный мешок, лежащий под покровами нижней поверхности головы. В этом мешке помещается втянутый внутрь комплекс колющих
Рис. 202. Продольный разрез головы и груди вши.
1 — эндоскелет, 2 —ротовое отверстие, 3 — насос, / — глотка, 5 —пищевод, б —желудок, 7 —мышцы насоса, 8 — суживатель «лотки, 9 — расширитель глотки, 10— колющий хоботок, 11 — втягиватель хоботка, /2 —мышца, выпячивающая хоботок, 13 — железа влагалища хоботка, 14 — надглоточный нервный узел, 15 — брюшная нервная цепочка, 15 — хитин. Большое увеличение.
ротовых органов в виде длинного стержня, состоящего из нескольких частей, не различимых на продольном срезе; совокупность их называется стилетом. В основании колющих органов видны пучки мышц, втягивающих органы обратно (ретракторы). Они являются антагонистами мышц-вытягивателей колющего аппарата (протракторы). Последние состоят из прямого пучка, идущего от основания мешка стилета вперед, и короткого косого пучка, соединяющегося под углом с длинным пучком. При сокращении этих мышц футляр стилета подтягивается кпереди, стилет высовывается наружу и одновременно вкалывается в кожные покровы.
Передняя кишка распадается на следующие отделы (считая от ротовой полости до желудка): 1) короткую, прямо идущую трубку, переходящую в 2) серповидный, направленный выпуклостью книзу изгиб (к его верхней стенке прикрепляются пучки мышц-расширителей, идущие от хитиновых покровов верхней части головы); 3) глотку в виде прямого отрезка, уходящую суживающимся задним концом в окологлоточное нервное кольцо; 4) пищевод, идущий от глотки и впадающий в желудок. Глотка снабжена мышцами-расширителями (косые пучки, идущие к дорзальным покровам головы) и суживателями (сфинктерами), которые видны в поперечном сечении в виде круглых дисков, лежащих над и под глоткой.
Над начальной частью пищевода лежит надглоточный нервный узел, а под пищеводом — подглоточный узел, продолжающийся в брюшную
335
цепочку, состоящую из тесно сближенных узлов; эта часть нервной системы лежит в груди. Между описанными органами лежат дольки
Рис. 203. Пищеварительный канал Pedlculus.
1 — мешковидные выросты желудка, 2— „брюшной орган**, или минетом, «3 — мальпигиевы сосуды, 4 — ректальные железы Большое увеличение.
жирового тела, состоящие из крупных клеток, и разрезы трахей в виде мелких хитиновых колечек.
Вошь сосет кровь. Кожные покровы она прокалывает стилетом, который остается в теле хозяина во все время принятия крови и служит для подачи крови в пищеварительный тракт. Самая процедура всасывания обеспечивается попеременным сокращением дилятаторов и сфинктеров глотки и серповидного участка трубки. Благодаря этому глоточный аппарат работает подобно всасывающе-нагне-тательному насосу.
Желудок и кишечник Pediculus (тотальный, окрашенный кармином препарат). Желудок (средняя кишка) имеет вид более или менее объемистого мешка, в зависимости от степени наполнения кровью и целости стенки при изготовлении препарата (рис. 203). Впадение пищевода обычно не видно. От переднего конца желудка кпереди отходят два слепых мешковидных выроста. На брюшной стенке желудка видно обычно овальное тело в виде кнопки, «брюшной орган», или мицетом— группа крупных клеток, в которых находятся грибковые симбионты. Задний конец желудка утончается; в него впадают четыре нитевидных мальпигиевых сосуда — органы
выделения; кзади идет тонкая кишка; в ее расширении помещаются так
называемые ректальные железы; Часть пищеварительного тракта от места впадения мальпигиевых сосудов и до анального отверстия называется задней кишкой.
Слюнные железы Pedlculus. Слюнные железы очень малы. Они часто остаются во время препаровки на стенке желудка в его передней части; но рассмотреть их вполне ясно на фоне окрашенного желудка довольно трудно. Железы парные, двоякого рода — бобовидные и почковидные. Часто в связи с ними остаются бледно окрашиваю-
далее кзади идет прямая кишка.
Рис. 204. Женские органы размножения Pediculus.
ЩИеСЯ ОКруГЛЫе клетки — ЭНО-	1 — Яйцевая трубка, J — яйцевод, 3 — мешок матки,
циты, являющиеся органами вну- 4“семеприемникБ’05л?щ0лее^ триклеточного выделения. Секрет
бобовидных желез Pediculus вызывает резкие изменения кожных покровов в месте сосания крови (Е. Н. Павловский и А. К. Штейн).
Женские половые органы Pediculus. На тотальном препарате (рис. 204) видны два яичника, из которых каждый образован
336
дистальном конце
бокам открываются дольчатые
маленький
по
Б
одновременно созревать
пятью яйцевыми трубочками. Яйцевые трубочки имеют вид четок с неравномерными отделами; в каждом отделе или камере созревает яйцо; по мере созревания камера увеличивается в размерах, особенно, когда там лежит почти сформировавшееся яйцо. Яйцевые трубки впадают на каждой стороне тела в короткий и широкий яйцевод. Оба яйцевода соединяются в непарный канал, выходная часть которого называется влагалищем, в этот же канал впадает трудно различимый на тотальном препарате мешок, имеющий на своем семеприемник; у основания мешка клеевые железы, дающие секрет для приклеивания гнид.
В зависимости от степени зрелости яиц и их откладки внешний вид органов изменяется. Так, если яйцо лежит в одном из яйцеводов, это резко нарушает симметрию органов; когда яйцо находится в непарном выводном канале, размеры последнего соответственно увеличиваются. В зависимости от частоты питания вши в ее половых органах могут 2—3—4 яйца, откладываемые друг за другом (рис. 198).
Самка Phthirus pubis L.
Короткое, широкое, коренастое тело. Голова широким основанием сидит на груди. Края головы позади чуть сближаются друг с другом. Грудь — самая широкая часть тела. Граница ее с брюшком неясна. Брюшко короткое, кзади суживающееся, несет несколько пар увеличивающихся к заднему концу тела пальцевидных боковых выростов с длинными волосками (рис. 205,5). Задний конец брюшка самки раздвоен вследствие наличия там вырезки в виде тупого угла. Под ним располагается пара пластинчатых гонопод, несущих по задневнутреннему краю ряд длинных щетинок. Ноги площицы увеличиваются в размерах от первой до третьей пары. Коготок первой пары ног слаб, у второй и третьей пар ног и голень и лапка развиты сильно. Коготок задней ноги тупой; он как бы винтообразно закручен, что обеспечивает площице прочное защемление и закручивание волоса, на котором она сидит (рис. 205,5).
Самец Phthirus pubis L.
По общей конфигурации тела сходен с самкой. Размеры несколько меньше. Задний конец тела не имеет вырезки и дугообразно выдается
22 Зак. 3420. Лабораторный практикум медицинской паразитологии.	337
Рис. 205. Задний конец тела самца (Л) и самки (Б) площицы. В — конец задней ноги площицы.
1 — части копулятивного аппарата самца, 2 —гоноподы самки, 3 — винтообразный изгиб когтя лапки, способствующий прочному удерживанию площицы на защемленном волосе. Среднее увеличение.
кзади (рис. 205, Л). Чуть отступя от него кпереди, на брюшной стороне видна половая щель. Впереди от нее просвечивают копулятивные органы в виде темных желтовато-коричневых хитиновых полос.
Личинка Pediculus
Вышедшая из гниды личинка имеет большие голову и грудь и неясно отграниченное короткое брюшко. Ноги сильно развиты. Такая диспропорция частей тела личинки по сравнению с самкой или самцом объясняется недоразвитием органов размножения в брюшке, поэтому оно маленькое. Большие размеры головы зависят от наличия в ней всасывательно-нагнетательной глотки, обслуживаемой соответственно развитыми мышцами— сфинктерами и дилятаторами глотки. Личинка начинает сосать кровь вскоре после своего выхода из гниды. Поэтому органы сосания крови развиты полностью. Вторая жизненно важная для личинки необходимость — удержание в волосах хозяина. Это обеспечивается сильным развитием ног и приводящих в движение их мускулов, сосредоточенных в груди. Сильное развитие волосков на спинной стороне брюшка также способствует зацепливанию за волосы хозяина. В начальной части брюшка просвечивает шаровидное образование— мицетом, состоящий из грибков — симбионтов, ставших органом вши, лежащим на брюшной поверхности желудка (см. выше «брюшной орган»).
Неполный метаморфоз Pediculus
Вышедшая из яйца личинка I стадии вши через несколько дней линяет на личинку II стадии, которая затем линяет на личинку III стадии. С каждой линькой увеличивается брюшко вши. Личинка III стадии линяет на самку или на самца. К этому времени созревают половые органы и вши копулируют. При достаточном питании самка откладывает яйца, называемые гнидами.
Гниды
Гнида (рис. 206) имеет неправильно овоидное тело, которое в косом положении прикреплено прозрачной клеевой массой к волосу или к нитям материи. Клеевая масса обтекает волос футляром и заходит на проксимальную часть поверхности гниды. Проксимальный полюс гниды приострен; противоположный (свободный) полюс закрыт выпуклой крышечкой, несущей на себе несколько тесно сближенных ячеек (клеток). Содержимое гниды имеет различный вид, в зависимости от стадии развития зародыша. Оно или зернисто, или содержит угадываемые формы развивающегося зародыша.
Гнида площиц грушевидной формы, с высокими клеточками на крышечке (в виде формы для пломбира). Гнида головной вши имеет кле-338
Рис. 206. Гниды вшей: платяной (Л), головной (Б, В) и лобковой (Г).
1—крышечка, 2—волос, 3—клеевая масса. Большое увеличение.
точки на крышечке средней величины, она более цилиндрической формы. Приклеена к одному волосу. Гнида платяных вшей имеет низкие клеточки на крышечке, прикреплена или к перекрестам нитей материи, или к перекресту нескольких волос.
При вылуплении развившейся в гниде личинки крышечка гниды отскакивает благодаря действию особого внутреннего рычажного аппарата. Вошь начинает насасывать воздух, который проходит через весь желудочно-кишечный канал и через анальное отверстие. Воздух скопляется в основной части гниды и выдавливает постепенно личинку, которая в конце концов высвобождается из гниды и через некоторое время получает возможность ползать. В опустевшей гниде на краю ее отверстия виден рычажный аппарат, который открывает крышечку.
Власоеды
Trichodectes canis De Geer — Власоед собаки
Рассматривают препарат при малом увеличении микроскопа, пере
двигая его для первоначальной ориентировки.
Тело явственно делится Грудь — самая узкая часть
на три части: голову, грудь и брюшко, тела, голова значительно шире груди, а брюшко — шире головы (рис. 207, Л).
Голова имеет приблизительно форму широкого прямоугольника с передним выпуклым краем. У боковых его концов видны торчащие в стороны довольно длинные членистые усики. Глаз нет. На голове заметны коричневые хитиновые косо расположенные
Рис. 207. Trichodectes canis.
А — общий вид, Б —голова при сильном увеличении.
полоски. Почти посредине головы видны темные несколько изогнутые челюсти, обычно соприкасающиеся друг с другом (рис. 207, £). Грудь имеет форму, приближающуюся к трапеции, но боковые ее края имеют межсегментную выемку. Брюшко овальное, широкое, с ясными границами сегментов и рядами хорошо развитых длинных щетинок (по одному на каждом сегменте). Задний конец самки имеет серединную вырезку и пластинчатые гоноподы. Ноги цепкие, с сильными коготками на концах, по одному на каждой ноге.
22 *
339
Рис. 208. Trichodectes subrostratus. Слабое увеличение.
Благовещенский Д.
Угловатая широкая голова с торчащими усиками, широкое брюшко с рядами длинных жестких волосков и цепкие когтистые ноги — все эти особенности строения обеспечивают власоеду возможность хорошо цепляться за шерсть хозяина и оставаться на нем даже при сильных встряхиваниях тела. Форма мощно развитых челюстей указывает на их грызущую функцию. Действительно, власоеды нормально питаются ороговевшими чешуйками эпидермиса хозяина. Пероеды птиц грызут опахала перьев, но при случае могут также пить кровь.
Trichodectes subrostratus N. — Власоед кошки
Наиболее характерное отличие — форма головы, которая кпереди вытянута треугольником (рис. 208). При рассматривании препарата с брюшной стороны видно, что по средней линии головы от переднего ее конца к челюстям идет, как и у Trichodectes cams, желоб. Иногда попадаются экземпляры, держащиеся челюстями на волосе. Волос лежит в описанном желобе и обхвачен (или обнят) сомкнутыми челюстями. Такая особенность является добавочным приспособлением для удержания власоедов в шерсти.
ЛИТЕРАТУРА
И. К анатомии власоеда морской свинки—Gyropus ovalis N.
Паразит, сборн. Зоол. музея АН СССР, т. 2, 1931.
Благовещенский Д. И. Строение пищеварительной системы пухоедов в связи с их питанием. Паразит, сборн. Зоол. ин-та АН СССР, т. 11, 1949.
Благовещенский Д. И. Строение и систематическое значение половой системы пухоедов (Mallophaga). Паразит, сборн. Зоол. ин-та АН СССР, 16, 1956.
Козулина О. В. Исследование по размножению и развитию платяной вши Pediculus humanus corporis De Geer. Дисс. Л., 1958.
Павловский Е Н. Вши. Строение, жизнь и болезненное действие на человека. Изд. Наркомздрава, Л., 1920.
Павловский Е. Н. Главнейшие черты организации вшей в связи с переносом ими сыпного тифа. Сб. тр. конф.-съезда по сыпному тифу. Изд. Наркомздрава, Петроград, 1920.
Павловский Е. Н К анатомии половых органов у Pediculus capitis и Р. vestimenti. Тр. Русск. энтомол. об-ва, т. 38, 1907.
Павловский Е. Н. К сравнительной анатомии органов размножения у вшей. Тр. Княже-Дворской обл. опытн. станции, I, 1922.
Павловский Е. Н. Учебник паразитологии человека. Медгиз, Л., 1951.
Павловский Е Н и А. К. Штейн Экспериментальные исследования над вшами.
I. Maculae coeruleae и Phthirus inguinalis. Арх. клин, и эксп. мед., № 9/12, М., 1924. Павловский Е. Н. и А. К. Штейн. Экспериментальные исследования над слюнными железами вшей. II. О действии слюны Pediculus на кожные покровы человека. Вестн. микробиол. и эпидемиол., т. 2, № 3/4, 1923.
Тонкова В. В Об изменчивости гнид человеческих вшей. Изв. АН СССР, 1927.
ЧЕРНЫЙ ТАРАКАН — PERIPLANETA ORIENTAUS L.
СБОР МАТЕРИАЛА
Для занятий тараканов содержат в живом виде или хранят в 75° спирту, так как для изучения наружного строения их пригоден как свежий, так и спиртовый материал.
340
Тараканов ловят в стеклянные банки или эмалированные тазы, на дно которых кладут куски свежего хлеба. Сосуд для ловли обкладывают доверху бумагой и ставят на пол, на полку или в какое-нибудь другое подходящее место. Тараканы, привлекаемые запахом приманки, взбираются по бумаге до края сосуда, сваливаются в него и уже не могут вылезти обратно. Для сохранения тараканов в живом виде их пускают в садок, в который кладется бумага, хлеб и ставится в небольшой стеклянной чашке вода. Садок следует держать в теплом помещении. Приготовить его можно из деревянного ящика. Стенки ящика выпиливают, а остов обтягивают металлической сеткой. Дверцу удобнее сделать в половину боковой стенки садка. Садок должен быть просторным: в длину 40—50 см, в ширину 25, в высоту 30. В таком садке тараканы, вообще плохо живущие в неволе, выживают более продолжительное время.
Для изучения строения таракана требуется 10-кратная штативная лупа или бинокуляр, микроскоп с малым увеличением, тонкий пинцет, препаровальные иглы и ножницы.
ИЗУЧЕНИЕ ПРЕПАРАТОВ
Наружное строение
Рассматривая взрослых тараканов, мы замечаем, что одни из них меньше размерами, имеют крылья, другие же лишены их, но крупнее крылатых. Первые — самцы, вторые — самки.
Рис. 209. Periplaneta о г lent al is.
А — самка, Б — самец, 1 — голова, 2 — нижнечелюстной щупик, 3 — гл аз, 4 — усики, 5— переднеспинка, 6 — среднеспинка, 7 —щиток, 8 — надкрылье, Р —заднеспинка, 10 — бедро, 11 — голень, /2 —лапка, 13— брюшко, 14 — церки, 15 — грифельки. (По Н. Н. Богданову-Катькову).
Самка. Тело самки (рис. 209, Л) покрыто хитиновой кутикулой. Со спинной стороны его кутикула темного, почти черного цвета, с брюшной— коричневатая. Она представляет собою наружный скелет таракана.
При рассматривании таракана сверху видно, что тело его состоит из трех частей: головы, груди и брюшка.
Голова поставлена вертикально, т. е. ротовым отверстием вниз. Чтобы разобраться в находящихся на голове придатках, следует
341
отогнуть ее вперед или положить таракана брюшком кверху. По бокам головы, ближе к верхнему краю, заметны два длинных нитевидных придатка. состоящих из мелких члеников. Это усики, или сяжки (антенны). Осматривая голову с помощью 10-кратной лупы, можно заметить, что основания сяжков окаймлены сверху двумя черными полулунными мелкоточечными образованиями. Каждая точка представляет собой ячейку, или фасетку. Совокупность их образует сложный или фасеточный глаз. Простых глазков, имеющих вид отдельных точек, у таракана нет. Части головы имеют различные наименования: выпуклая часть между глазами называется теменем, кзади от него лежит затылок, между основаниями
Рис. 210. Ротовые части черного таракана.
Л —верхняя губа (7 и верхние челюсти (2), вид сзади; Б — нижняя челюсть: 1 — кардо, 2 — стипес, 3— внутренняя жевательная доля, 4 — наружная жевательная доля со щ\ ником. (Ио Н. Н. Богданову-Катькову).
сяжков — лоб, а по бокам глаз — щеки. Книзу лоб переходит в головной щит или наличник. Если немного оттянуть голову вперед, то заметна короткая, состоящая из светлого хитина трубка, соединяющая голову с грудью.
Продолжая осмотр, находят полуовальную пластинку, прикрепленную к наличнику. Это верхняя губа (рис. 210, Л). Придерживая пинцетом голову, препаровальной иглою отгибают верхнюю губу. Под ней находятся две толстые нерасчлененные пластинки, края их, обращенные друг к другу, несут черные зубцы. Это — верхние челюсти (мандибулы) (рис. 210, Л). По краям наличника находятся два членистых придатка, кпереди от них помещается вторая, более короткая пара придатков. Первые называются нижнечелюстными щупиками, они прикрепляются к наружным краям нижних челюстей (максиллы), лежащих кзади от верхних челюстей (при нормальном положении таракана). Нижние челюсти при общем осмотре головы хорошо разобрать трудно. Вторая
342
пара придатков — нижнегубные щупики. Для того чтобы рассмотреть нижнюю губу, таракан должен быть положен брюшком кверху, а голова его отогнута вперед. При этом положении нижняя губа лежит сверху головы (над нижними челюстями). Придерживая голову пинцетом, можно легко оттянуть нижнюю губу препаровальной иглой. В противоположность верхним челюстям, она является расчлененной пластинкой.
Продолжают осмотр, повернув таракана спинной стороной кверху. Тело его разделено на сегменты, что хорошо заметно и невооруженным глазом. Каждый сегмент насекомого состоит из спинки, грудки и двух боковых пластинок. Осматривая таракана сверху, мы видим спинки сегментов. Передние три сегмента составляют грудь. Первый, следующий непосредственно за головою, называется переднегрудью. Спинка его (пронотум) представлена широкой пластинкой с округленными углами. Второй сегмент — среднегрудь — имеет более узкую спинку. Она несет два листовидных придатка, прикрепленных широкими основаниями к передним краям среднеспинки. Эти придатки являются рудиментами крыльев. Концы их до половины прикрывают заднеспинку третьего грудного сегмента.
За грудью виден ряд поперечно лежащих пластинок. Это спинки, или верхние полукольца (тергиты), брюшных сегментов. Сжимая пинцетом конец брюшка, можно рассмотреть продольную щель, находящуюся на самом конце тела — анальное отверстие. По его краям помещаются два мелкочленистых палочковидных придатка — церки, прикрепленные к десятому или анальному сегменту, являющиеся рудиментами брюшных ножек.
Если повернуть таракана брюшной стороной кверху, видны 3 пары конечностей. Их рассматривают через лупу. Ноги, сочленяющиеся с брюшными пластинками всех трех грудных сегментов, состоят из пяти отделов. Основной членик, называемый тазиком, сильно развит, массивный, приблизительно овальной формы. Маленький вертлуг является как бы шарниром, на котором двигается нога. С вертлугом сочленяется бедро — удлиненный членик, значительно более узкий, чем тазик, покрытый редко расположенными, короткими шипами. Следующий членик — голень, почти такой же длины, как и бедро, но несколько уже, несет длинные, часто расположенные шипы. Конечная часть ноги — лапка—состоит из пяти отдельных члеников, из которых первый (считая от голени) самый длинный, вторым по длине будет пятый членик, кончающийся двумя коготками. Членики лапки покрыты очень мелкими шипиками. В целом нога таракана бегательного типа.
У некоторых самок из заднего конца тела выдается довольно толстое, покрытое твердым хитином образование 10—12 мм длины; передний и задний края его округлены, верхний край имеет узкую выдающуюся пластинку, снабженную зазубринами. Это образование представляет собою яйцевой кокон или оотеку. Если разрезать его скальпелем по длине, увидим внутри небольшие, светлые, овальные тела — яйца. Кокон образуется у самки после копуляции, развиваясь за счет выделений придаточных желез полового аппарата. Самка таскает его в течение нескольких дней, затем откладывает в какое-нибудь теплое место, например в щелях около печей, в трещинах пола в кухнях, хлебопекарнях и других подобных местах.
Тараканы издают неприятный, специфический запах. Он зависит от выделений кожных желез, открывающихся на верхней стороне 4-го сегмента брюшка. Это мешотчатые многоклеточные железы, расположенные среди клеток гиподермы. Подробнее ознакомиться с этими
343
железами можно лишь с помощью микроскопа, при изучении окрашен-
ных срезов кожи.
Самец. Осматривая самца (рис. 209,5), обращают внимание на его крылья. Они прикреплены к переднему краю среднеспинки, целиком прикрывают грудные и брюшные вплоть до шестого сегменты. Раздвинув
крылья пинцетом, находят под ними вторую пару крыльев, прикрепленных к заднеспинке. Передняя пара хитинизирована, называется над-
крыльями, или элитрами. Крылья второй пары перепончатые, склады-
ваются веерообразно по жилкам,
хорошо заметным, если оттянуть
Рис. 211. Ротовый аппарат черного таракана.
7 —верхняя губа, 2 — верхние челюсти, 5 —нижние челюсти, 4 — основной членик, 5 —стипес, 6 —внутренняя жевательная лопасть, 7 —наружная жевательная лопасть, 5 —нижнечелюстной щупик, 9 — нижняя губа, 10 — подподбородок, 11 — подбородок, 12 — язычки, 13 — придаточные язычки; 14 — нижнегубные щупики.
крыло в сторону. В жилках проходят трахеи и нервы крыла. В отличие от самки, самец имеет на конце брюшка, помимо церков, вторую пару придатков. Они очень короткие, нитевидные, прикреплены к IX сегменту между церками, но ниже их. Эти образования называются грифелевидными придатками. Подобно церкам, они являются рудиментами брюшных ножек.
Ротовой аппарат. Окончив наружный осмотр таракана, можно приступить к более детальному ознакомлению со строением его ротовых частей (рис. 211). Для этого таракана кладут на предметное стекло и под препаровальной лупой или бинокуляром от-
деляют иглой или скальпелем части ротового аппарата от головы. Придерживая голову пинцетом, ножницами отрезают верхнюю губу, затем нижнюю, после чего сначала отде-
ляют нижние, затем верхние челюсти. Ротовые органы раскладываются на чистое предметное стекло. Из них можно приготовить постоянный препарат с наклейкой на стекло (стр. 26). Можно рассматривать и временный препарат. В этом случае на разложенные ротовые части нано
сится несколько капель воды, и препарат изучается под малым увеличением микроскопа без покровного стекла.
Для детального изучения следует взять готовый препарат, заключенный в канадский бальзам, и рассматривать его под малым увеличе-
нием микроскопа.
Верхняя губа (рис. 211)—полуовальная, нечленистая хитинизиро-ванная пластинка, поверхность которой покрыта мелкими редкими волосками. По свободному краю расположены более длинные волоски. Верхние челюсти (рис. 211) —утолщенные нечленистые пластинки: передний край их несколько округлен, внутренний снабжен 4—5 зубцами. Они хитинизированы сильнее основной части челюстей, о чем можно судить по их более темному цвету. Зубцы темнокоричневые, почти черные по свободным краям, в то время как основная часть более светлая. Нижние челюсти (рис. 210,5; рис. 211), в противоположность верхним,
344
имеют вид членистых пластинок. Основной членик — кардо — более или менее овальный, поперечно лежащий, размерами значительно меньше остальных, сочленяет нижнюю челюсть с головою (рис. 211). Промежуточный членик — стипес, соединяющийся с основным — самый крупный, не вполне правильной четырехугольной формы, покрыт короткими редкими волосками. К наружному углу этого членика прикрепляется нижнечелюстной щупик, уже отмеченный при общем осмотре головы. Нижнечелюстной щупик состоит из пяти члеников. Первый членик наиболее короткий, широкий, почти квадратный. Остальные членики более узкие, продолговатые. Второй членик немного превышает длину первого, остальные три членика длиннее его в несколько раз. Все членики покрыты волосками. К стипес прилегают две доли, или лопасти. Одна из них — внутренняя жевательная доля — не вполне правильной тре' угольной формы, заканчивается темным зубцом, при основании которого бывает расположен второй зубец, размерами несколько меньше первого. К внутренней стороне от основания большого зубца обращен удлиненный выступ с тремя мелкими зубчиками на конце. От выступа вдоль всего внутреннего края членика расположены довольно длинные волоски. Другая наружная жевательная доля, прилегающая к стипес, расположена над основанием нижнечелюстного щупика. Она неправильной формы, покрыта очень мелкими, редкими волосками.
Нижняя губа (рис. 211), подобно нижним челюстям, членистая. Наиболее крупная часть ее, в виде широкой пластинки с округленными краями и вогнутой передней стороной, называется подподбородком — субментум. Спереди к ней прилегает более узкая, продолговатая пластинка, подбородок—ментум. По бокам его расположены трехчленико-вые ниж'негубные щупики. Передняя сторона ментума несет два придатка — язычки (глоссы). Окончания их покрыты многочисленными мелкими волосками. Снаружи язычков видны два других более крупных пальцевидных придатка, называемых параглоссами, или придаточными язычками. Внутренний край их покрыт мелкими волосками, длинные волоски расположены по верхней стороне и наружному краю. При рассматривании нижней губы отмечают ее сходство с нижними челюстями. Нижняя губа в сущности представляет собою вторую пару нижних челюстей, сросшихся по средней линии. Два стипеса образуют ментум, два кардо — субментум, язычки соответствуют внутренним долям.
Разобранный нами ротовой аппарат таракана относится к типу грызущих ротовых органов. Собственно грызущими органами являются здесь верхние челюсти, о чем можно судить по их массивности, сильно хитинизированным, зубчатым внутренним краям. Вспомогательную роль играют внутренние доли нижних челюстей. Волоски, покрывающие окончание нижней губы, служат чувствительными волосками.
Вскрытие
Для вскрытия требуются ванночка с восковым дном, ножницы, препаровальные иглы, скальпель, булавки, вода.
Свежеубитого таракана следует взять в левую руку, придерживая его большим и указательным пальцами так, чтобы передний конец тела был обращен вперед. Ножницы вставляются в щель анального отверстия, разрез ведут по боковой линии тела по направлению к голове, разделяя спинные и брюшные полукольца сегментов. Переворачивая затем таракана передним концом назад, разрез ведут по противоположному краю. После этого насекомое кладут спинной стороной кверху в ванночку с водой. Вода должна вполне покрывать таракана. Его
345-
прикалывают двумя булавками к восковому дну, втыкая их по одной с правой и левой стороны в края грудки первого грудного сегмента. Другую пару булавок втыкают в стерниты конечных брюшных сегментов. Фиксировав таким образом таракана, придерживают пинцетом
тергиты конечных брюшных сегментов, подрывают с помощью иглы или скальпеля мышцы и трахеи и удаляют целиком спинную часть покровов груди и брюшка.
В полости тела (рис. 212) виден клубок внутренних органов, главная масса которого состоит из кишечной трубки. В переднем конце тела находится сероватый мешок, обращенный более узким концом вперед, более широким — назад. Этот отдел кишечной трубки, называемый зобом, обычно бывает заполнен массой разбухшей пищи. Короткая узкая трубка, расположенная непосредственно впереди от зоба, — пищевод. Подводя иглу или скальпель под нижнюю поверхность зоба, расправляют кишечную трубку по направлению к заднему концу тела. При этом удаляется беловатая, рыхлая масса — жировое тело и разрываются тонкие, светлые трубочки — трахеи, оплетающие кишечный канал. Расправив кишечную трубку, отводят ее в сторону. Втыкая одну-
з 9 4 5 6 8 ?
Рис. 212. Вскрытый самец черного таракана.
А —вид сверху, Б — вид сбоку. 1 — глотка, 2 — пищевод, 3 — зоб, 4 — мышечный желудок, 5 —пилорические придатки, 6 — средняя кишка (собственно желудок), 7 —задняя кишка, 8 — мальпигиевы сосуды, 9 — спинной сосуд, 10 — надглоточный узел, // —брюшная нервная цепочка, 12— семенник, 13 — непарная придаточная железа, 14— семенной пузырек с парной придаточной железой, 15 — боковые трахейные стволы, 16 — слюнная железа, 17 — резервуар слюнной железы, 18— общий проток.
две булавки в дно ванночки между телом таракана и кишечной трубкой, фиксируют последнюю в нужном для осмотра положении. В случае разрыва задней кишки кишечную трубку отводят в сторону и прикалывают за самый конец к ванночке. Непосредственно за зобом следует небольшой, грушевидной формы, участок кишечной трубки — мышечный желудок, имеющий плотные стенки, в чем можно убедиться, сжимая 346
его слегка пинцетом. Пищевод, зоб, мускульный желудок являются отделами передней кишки. За мышечным желудком следует цилиндрическая трубка, в заднюю ее часть впадают тонкие, длинные, нитевидные трубочки — мальпигиевы сосуды. Отдел кишечной трубки от мышечного желудка до места впадения мальпигиевых сосудов, служащих органами выделения, называется средней кишкой, или собственно желудком. На переднем конце желудка находится несколько коротких слепых трубочек. Это пилорические придатки, они увеличивают собою общую внутреннюю поверхность кишечной трубки. За местом впадения мальпигиевых сосудов начинается задняя кишка, передний отдел которой называется тонкой кишкой. Ближе к концу можно различить небольшой перехват тонкой кишки, служащий границей между нею и толстой кишкой. Толстая кишка — очень короткий, самый задний отдел кишечной трубки — заканчивается анальным отверстием. По краям зоба заметны небольшие листовидные придатки, состоящие как бы из многочисленных мелких зерен. Это слюнные железы, их пара, причем каждая железа состоит из двух мелкозернистых долек и резервуара. Они продолжаются в тонкие, светлые трубочки — выводные протоки.
Таким образом, кишечный канал насекомого состоит из трех отделов: передней, средней и задней кишки. Передняя и задняя кишки суть производные эктодермы, а потому внутри выстланы хитиновой кутикулой. Средняя кишка, или желудок, внутренняя поверхность которого может увеличиваться за счет боковых выпячиваний, — производное энтодермы, без кутикулярной выстилки. Для паразитологических целей достаточно отпрепаровать кишечный канал таракана. Поэтому мы не останавливаемся на других внутренних органах (Е. Н. Павловский, 1938). Отметим лишь, что для изучения паразитов кишечного канала следует вскрывать свежих тараканов.
Развитие
Взрослые самцы достигают в длину 19—20 мм, самки — 25—26 мм. Отобрав взрослых насекомых, находят более мелкие экземпляры — личиночные стадии черного таракана. Сравнивая последних между собою, можно видеть, что все они в общем сходны друг с другом, а также очень похожи на взрослых тараканов. Более мелкие экземпляры — младшие стадии — лишены крыльев, у других они имеются в виде небольших пластинок, лежащих по краям среднегруди.
Развитие таракана связано с периодическими линьками. По выходе из яйца и самцы и самки крыльев не имеют. Зачатки их появляются после нескольких линек, а при последующих постепенно вырастают у самца и остаются в виде рудиментов у самки. Такой тип развития насекомых, при котором особи, вышедшие из яйца, похожи на своих родителей, и у которых отсутствует куколочная фаза, носит название неполного превращения. Черный таракан относится именно к этой группе насекомых.
ЛИТЕРАТУРА
Павловский Е. Н. Практикум зоологии. Учпедгиз, Л., 1938.
Павловский Е. Н. Насекомые и заразные болезни человека. М., 1928.
Павловский Е. Н. Руководство по паразитологии человека. Т. II. Изд. АН СССР, 1948.
Павловский Е. Н. Учебник паразитологии человека. М., Медгиз, 1951.
347
ПОСТЕЛЬНЫЙ КЛОП - С IM EX LECTULARIUS L.
Постельный клоп относится к роду Cimex, отряду полужесткокрылых —Hemiptera.
СБОР МАТЕРИАЛА
Клопов собирают в спальных помещениях под отставшими обоями, в рамах картин, в пазах кроватей, вдоль потолка над кроватями и т. д., а также в лабораториях — в деревянных клетках экспериментальных животных (белых мышей, крыс и др.). Там же находят яйца и личинок, которых легко узнать по их беловатому цвету. Материал хранится в 75° спирте.
Для занятий следует иметь: тотальные препараты взрослых клопов, самца и самки, обработанных КОН и заключенных в канадский бальзам, препараты яйца, личинки первой стадии и ротовых органов взрослого клопа. Методика приготовления препаратов обычная (стр. 15).
ИЗУЧЕНИЕ ПРЕПАРАТОВ
Тотальные препараты взрослых клопов предварительно рассматривают невооруженным глазом. Видно, что тело клопа сдавлено в спиннобрюшном направлении. При сравнении нескольких препаратов можно установить, что одни клопы имеют широкое, округленное брюшко, другие — более сжатое, удлиненное. Первые — самки, вторые — самцы.
Самец
Помещая клопа под микроскоп, ориентируют его головой вперед и рассматривают со спинной стороны. Тело насекомого не умещается в поле зрения, первоначально ставят в центр голову и грудь (рис. 213).
Голова находится в одной плоскости с телом. Выступы по краям головы, окаймленные светлыми пузырьками, являются сложными глазами. Каждый пузырек — ячейка, или фасетка, глаза. Нитевидные образования перед глазами — усики, состоящие из четырех члеников. Первый несколько утолщен, очень короткий, остальные удлиненные палочковидные, причем второй шире двух последних. Усики, как и поверхность головы, покрыты мелкими волосками. Выдающийся вперед выступ, помещающийся между первыми члениками усиков, — наличник. Ротовые органы, при рассматривании клопа сверху, не видны. В нормальном положении эти органы подогнуты на брюшную сторону. На препарате они просвечивают в виде полоски, тянущейся по средней линии, вдоль вентральной поверхности головы и становятся заметными при опускании тубуса микроскопа.
Двигая препарат под микроскопом, рассматривают строение груди и брюшка.
Первый грудной сегмент вогнут вдоль своего переднего края и образует две крыловидные пластинки, охватывающие основание головы. Эти пластинки характерны для европейского постельного клопа. Второй и третий сегменты груди представлены сравнительно широкими пластинками. На поверхности второго заметны контуры поперечно лежащих соприкасающихся овальных хитиновых образований, задние края которых налегают на третий грудной сегмент. Это рудименты надкрылий (гомологи передней пары крыльев). Каждый грудной сегмент несет по паре бегательных ног. При опускании тубуса видны членики не вполне правильной четырехугольной формы, лежащие по обе стороны 348
средней брюшной линии. Это тазики, соединяющие ногу с телом. Сдру» того конца с тазиком сочленяется очень маленький членик — вертлуг на котором собственно и двигается нога. За вертлугом следуют бедро — удлиненно-овальная часть, выдающаяся за края грудных сегментов, затем голень, представленная удлиненным цилиндрическим члеником, покрытым волосками и несущим помимо их на самом конце небольшую щеточку особенно тонких волосков. Последняя часть ноги — лапка, образованная тремя короткими члениками, заканчивающаяся парой коготков.
Рис. 214. Конец брюшка постельного клопа.
А —самец, Б —самка. Среднее увеличение.
Брюшко состоит из поперечных, не особенно широких пластинок, лежащих параллельно друг за другом. Это спинные полукольца-тер-гиты брюшных сегментов, границы их хорошо заметны. Тело клопа темное, коричневато-красноватое, пересеченное полосками более светлого тона. Каждая полоска — граница двух смежных сегментов. На боках тела заметны хорошо очерченные, очень маленькие кружки — стигмы. Конец брюшка самца асимметричен (рис. 214, Л). Последний сегмент с одной стороны как бы вырезан: с этой стороны к нему прилегает серповидный изогнутый орган — копулятивный аппарат. Из середины округленного конца этого сегмента выдается светлый выступ с анальным отверстием.
Самка
Продвигая препарат под микроскопом от переднего до заднего конца тела, помещают в центр поля зрения конец брюшка.
Тело самки крупнее и более округлено, чем у самца, что можно видеть, как уже отмечалось, и невооруженным глазом. Кроме того, самка отличается от самца строением последнего сегмента. Конец брюшка симметричный, округленный (рис. 214,5). Небольшой светлый выступ с анальным отверстием, выдающийся из середины конечного сегмента, как и у самца. Над ним половое отверстие в виде небольшой продольной щели (по средней линии тела), окаймленной продолговатыми пластинками. Светлые точки по краям брюшка сегментов — дыхальца, или стигмы. На некоторых препаратах сквозь покровы брюшка, иногда прерывисто, в нескольких местах, просвечивает темная масса, лежащая комком в середине или конце тела. Это кровь, находящаяся в кишечной трубке клопа. Ее можно видеть как в теле самки, так и в теле самца. Неприятный специфический запах, издаваемый клопом, зависит от выделений пахучих желез, лежащих на брюшной стороне тела и открывающихся при основании третьей пары ног.
350
Ротовые органы
Рассматривают препарат головы взрослого клопа с отогнутым и лежащим перед наличником хоботком (рис. 215).
Кпереди от наличника заметна полуовальная хитиновая пластинка— верхняя губа. При нормальном положении она подогнута и прикрывает основание ротовых частей. Из-под верхней губы выдается покрытая по краям волосками узкая длинная пластинка, состоящая из трех члеников — нижняя губа. Вдоль нижней губы тянется желобок, в котором заложены собственно колющие части в виде четырех тонких, длинных острых щетинок. При заделке препарата они обычно выходят из хоботка и ложатся вдоль губы. Колющие щетинки — видоизмененные верхние и нижние челюсти. Нижнечелюстные и нижнегубные щупики у клопов редуцированы. В целом рассмотренный ротовой аппарат относится к колюще-сосущему типу.
Рис. 215. Голова постельного клопа с ротовыми частями.
7 — верхняя губа, 2— верхние челюсти, 5—нижние челюсти, 4— нижняя губа, 5—усики. Сильное увеличение.
Рис. 216. Личинка постельного клопа.
7 —отверстия пахучих желез. Среднее увеличение.
Личинка первой стадии
Личинка (рис. 216) целиком умещается в поле зрения при малом увеличении микроскопа. Ориентируют ее головой вперед.
Два красных пятна по краям головы — глаза, перед ними четырех-члениковые усики, между ними — наличник, от которого подгибается под голову хоботок, представленный узкой, удлиненной пластинкой, достигающей уровня передней пары ног. Хоботок легко заметить, вращая большим винтом микроскопа. За головой находятся поперечно лежащие, покрытые мелкими волосками пластинки — верхние полукольца сегментов тела. Первые три относятся к грудным, остальные к брюшным сегментам. В отличие от взрослых клопов второй грудной сегмент рудиментов крыльев не имеет. У всех личинок брюшко округленное. На самом конце его находится анальное отверстие. Меняя малое увеличение на большое, помещают брюшко в центр поля зрения. При этом по средней линии тела, вдоль заднего края III—V сегментов, заметны небольшие поперечно лежащие щели — отверстия пахучих желез. Лапки состоят из двух члеников, а не из трех^ как у взрослого клопа.
351
Личинка в целом похожа на взрослое насекомое. Она является стадией питающейся и подвижной; ее развитие связано с ростом и периодическими линьками. После пятой, последней, линьки личинка превращается во взрослого клопа. На основании указанных данных можно заключить, что клоп относится к насекомым с неполным превращением.
Яйцо
Яйцо кубышкообразное, с более тонким верхним полюсом и более толстым нижним. Несколько отступя от верхнего конца яйцо пересекает поперечная полоска — нижняя граница яйцевой крышечки, отпадающей при вылуплении личинки. Яйцо приклеивается клеевой массой к различным предметам (волокнам, рамам и пр.). Клеевая масса покрывает более выпуклую сторону заднего конца яйца. Она растворима в воде и не всегда видна на препарате.
ЛИТЕРАТУРА
Беклемишев В. Н. (ред.). Учебник медицинской энтомологии. Ч. 1. Медгиз.М., 1949. Бианки В. Л. и Кириченко А. Н. Насекомые полужесткокрылые. Практ. энтом.
под ред. Н. И. Богданова-Катькова, Пг. 1923.
Павловский Е. Н. Насекомые и заразные болезни человека. М., 1928.
Павловский Е. Н. Руководство по паразитологии человека. Т. II. Изд. АН СССР, 1948.
КЛЕЩИ —ОТРЯД ACARINA
АРГАСОВЫЕ КЛЕЩИ —СЕМЕЙСТВО ARGASIDAE
Аргасовые клещи вместе с иксодовыми клещами (семейство /хо-didae) причисляются к надсемейству Ixodoidea. К аргасовым клещам принадлежат представители родов Argas и Ornithodorus, возводимые некоторыми авторами (АЛ. В. Поспелова-Штром) в ранг подсемейств Argasinae и Ornithodorinae.
РОД ARGAS LATR.
Сбор, хранением кормление
Основной вид рода Argas — Argas persicus Ок., персидский клещ. Широко распространенный вид; в СССР он обитает в Средней Азии, в Закавказье, по Волге доходит до Саратова. Паразит кур. Живет в курятниках, особенно примитивного устройства. Держится в трещинах стен, насестов, причем может забираться в узкие щели; если куры используют для насеста деревья во дворе, то клещи могут быть обнаружены под отставшей корою и в трещинах стволов. На кур Argas persicus нападают ночью и держатся обычно недолго, пока не насосутся крови, но возможна и задержка этих клещей под крыльями.
Нимфы последних стадий и половозрелые клещи могут нападать на человека и сосать его кровь. В месте присасывания образуются красноватые пятнышки, превращающиеся в мелкие папулки. Субъективные ощущения обычно слабые. Персидский клещ, вопреки довольно распространенному мнению, не является для человека переносчиком клещевого спирохетоза. Хотя в его организме спирохеты — возбудители этой болезни — в условиях опыта могут существовать до 70 дней, но не
352
имеют естественного выхода из тела зараженных персидских клещей. Поэтому последние и не являются переносчиками возбудителей клещевого спирохетоза человека. Зато эти клещи служат переносчиком патогенной для кур Spirochaeta anserina. В условиях опыта в организме персидского клеща могут сохраняться вирус желтой лихорадки до 6 дней, чумная палочка до ПО дней.
Клещей вынимают из трещин и щелей насестов и стен курятника тонким пинцетом или для отыскания их выгребают мусор из щелей между камнями кладки стен. Сохраняют живыми в колбочках Эрлен-мейера, объемом 100—200 мл, с фильтровальной бумагой на дне и вложенными внутрь полосками из нее, сложенными по длине. Колбочка закрывается туго свернутой ватной пробкой. Argas persicus — ксеро-фильный клещ, но все же необходимо время от времени увлажнять несколькими каплями воды ватную пробку на внутреннем ее конце. Колбочки с клещами держат на деревянных подносах в темном шкафу. Персидский клещ способен к довольно продолжительному голоданию.
Простой способ кормления персидского клеща в футляре спичечной коробки, надетой на ногу курицы. Футляр прибинтовывают снизу: в верхнее отверстие его закладывают голодных клещей и футляр забинтовывают полностью на несколько дней. После разбинтовывания, производимого над большой белой фотографической ванночкой или над листом белой бумаги, высыпающихся напитавшихся клещей одинакового размера перекладывают пинцетом в колбочку. Argas persicus сосет также кровь голубей и мелких птиц. Время от времени осматривают колбочки и отмечают линьку клещей.
В колбочке с самками и самцами могут быть обнаружены отложенные яйца. Поддерживая влажность, охраняющую яйца от высыхания, и подходящую температуру (30°), можно получить выплод личинок. Последовательным кормлением личинок и нимф персидского клеща можно проследить весь его метаморфоз, который довольно сложен:
1. Яйцо, личинка, нимфы I, II, III, IV, V, самец; самцы могут появляться и после линьки нимфы третьей.
2. Яйцо, личинка, нимфы I, II, III, IV, V, VI, VII, самка; самки могут появляться и после линьки нимфы четвертой.
Наружное строение
Argas persicus Ok. — Персидский клещ
Морфология клеща (рис. 217), особенности которой являются опорными признаками при определении, изучается под бинокулярным микроскопом на консервированных в спирте клещах, предварительно обсушенных со всех сторон фильтровальной бумагой. Объект должен быть хорошо освещен сильным падающим светом. Ознакомление с внешними признаками персидского клеща начинают с самки или с самца. У обоих имеется половое отверстие, лежащее на брюшной стороне тела между основаниями первой пары ног. У нимф полового отверстия нет. Личинки имеют шесть ног, нимфы, самки и самцы — восемь.
Форма тела яйцевидная; у голодного клеща оно плоское, истонченное, с резко выраженным краем; сытый клещ более толст, и края его тела округлы. Более узкий конец тела является передним, а более широкий — задним; верхняя, спинная, сторона тела на фоне шагреневого хитина имеет симметрично расположенные диски. Весьма характерно радиальное расхождение рядов спинных и частично брюшных дисков, являющееся родовым признаком, отличающим виды рода Argas
23 Зак. 3420. Лабораторный практикум медицинской паразитологии	353
от видов рода Ornlthodorus; диски эти служат местами прикрепления дорзо-вентральных мышц к покровам тела клеща. Брюшная сторона несет четыре пары ног, основания которых находятся в передней части тела, но значительно отступя от его переднего конца. Основные членики (коксы) первой пары ног лежат на уровне основания совокупности ротовых органов, называемой capitulum. Ротовые органы расположены отступя кзади от переднего конца тела и с дорзальной стороны вовсе не видны.
Ротовые органы могут быть рассмотрены на месте лишь в общих чертах: по бокам capitulum лежат по одному с каждой стороны согнутые на брюшную сторону че-тырехчлениковые щупики/ или пальпы. Если их раздвинуть в стороны, становится видной непарная зубчатая пластинка — гипостом; над ним видны концы двух стержневидных верхних челюстей, или хелицер. Для детального рассмотрения под
дует вырезать и расчленить на предметном стекле.
Между основаниями первой пары ног видно половое отверстие в форме поперечной щели у самки и дуговидной у самца. Другим половым отличием являются меньшие размеры самца по сравнению с самкой. Приблизительно на середине, между уровнем основания четвертой пары ног и зад-
микроскопом capitulum сле-
пим краем тела, лежит на средней линии брюшной поверхности анальное отверстие с двумя полукруглыми створками.
Хитиновые покровы нигде не образуют пластинчатых затвердений (отсутствие дорзального «щитка»); этот признак характерен для всех представителей семейства Argasidae. Яйцевидная или овальная форма тела и наличие ранта по краю тела отличает представителей рода Argas. При рассматривании ранта при более сильном увеличении сверху, видно, что он состоит из прямоугольников почти квадратной формы. Этот признак присущ Argas persicus.
Следует рассмотреть дополнительно некоторые детали. Ноги состоят из подвижных удлиненных члеников, сочлененных с основаниями ног, или коксами; последние неподвижно соединены с покровами брюшной стороны тела. Коксы правых и левых ног широко отодвинуты друг от друга. В каждом ряду коксы II, III, IV лежат непосредственно одна за другой; коксы I отодвинуты на некоторое расстояние от кокс II. Концевой членик ноги называется лапкой (tarsus), он несет на своем конце пару цепких серповидных коготков. Концевой подушечки на лапке нет. Позади и сбоку кокс IV на каждой стороне тела лежит дыхальце, или стигма; утолщенный хитин окружности дыхальца образует так называемую перитрему.
354
Argas reflexus Fabr.
Сходен по внешности с Argas persicus, но отличается от него структурой поперечно исчерченного краевого ранта (рис. 218). У насытившихся, раздувшихся клещей становится заметна линия, отделяющая спинные покровы от брюшных. Argas reflexus живет преимущественно в голубятнях; кроме голубей нападает и на других птиц; может попадать в жилье и беспокоить людей. Очень трудно воспитывается в лаборатории в противоположность персидскому клещу, так как надолго (годами) остается на одной и той же стадии превращения.
На летучих мышах паразитирует Argas vespertilionis (Latr.), который имеет почти круглое
Все виды рода Argas южными.
тело.
являются
Рис.
218. Argas reflexus, самка сверху. (По И. Г. Галузо).
Анатомирование взрослых клещей и их внутреннее строение
Для ознакомления с техникой вскрытия и со строением клещей выгоднее взять тощих Argas persicus. Клещей хлороформируют или убивают серным эфиром. Затем, взяв клеща пинцетом, опускают его на 1—2 секунды в 95° спирт и сразу переносят в
физиологический раствор, придерживая под поверхностью жидкости, пока не утихнут диффузионные токи. Это делается для того, чтобы покровы клеща смочились водой, и он не всплывал бы на ее поверхность. Иногда это приходится повторять дважды. При рассматривании клеща в проходящем свете видны темно просвечивающие сквозь хитин слепые отростки кишечника, благодаря содержащейся в них переваренной старой крови. Вскрытие производят под препаровальной лупой или, лучше, под бинокулярным микроскопом при сильном падающем освещении.
Клеща кладут в часовое стекло или в маленькую чашку Петри с физиологическим раствором; левой рукой придерживают клеща пинцетом или тупой иглой, правой же отрезают лопатовидной иглой ноги; затем, покачивая иглу, по окружности отсекают краевой рант, стараясь не порвать выпячивающиеся в прорезы покровов отростки кишечника. Так обрезают клеща по всей окружности его тела (рис. 219). Эту процедуру можно упростить, взяв клеща в левую руку и обрезав его краевой рант острыми ножницами. При вскрытии тощих самок и самцов семейства Ixodidae край тела отсекают лопатовидной иглой: у сытых же и крупных клещей вырезают осторожно ножницами бок тела; в образовавшуюся щель вводят ветвь ножниц, держа ее поверхностно и кнаружи, отрезают хитин по наиболее выпуклой части всей окружности тела, обходя сверху дыхальца. При этой процедуре клеща или держат в руке или предварительно прикалывают булавками к восковому дну препаровальной ванночки, сделанной из чашки Коха.
23*
355
Клеща с обрезанным краем тела прикалывают минуциями за перед-
ний и задний конец брюшных хитиновых покровов спиной кверху ко дну
Рис. 219. Вскрытие Argas persicus.
ванночки. Приподняв иглой передний конец спинных хитиновых покровов, захватывают его пинцетом, приподнимают кверху и оттягивают постепенно кпереди, пока он целиком не снимется с клеща. При этом разрываются пучки дорзо-вентраль-ных мышц; их разрыву у крупных клещей можно помочь иглами или копьевидной иглой, вводя инструмент под хитиновую спинку. У небольших клещей можно снять спинку и не прикалывая их к восковому дну ванночки, а прямо в часовом стекле, придерживая брюшной хитин иглой и отводя хи-
Ноги отрезаны. Отсекается краевой рант тела.	ТИН СПИНКИ ПИНЦСТОМ ИЛИ
иглой (рис. 220). Со спинкой снимается и часть жирового тела, иногда и с сердцем, имеющим
вид маленького короткого мешочка с полупрозрачными стенками, что делает его при препаровке трудно заметным.
Рис. 220. Вскрытие Argas persicus.
Рант отсечен и удален; левой иглой удерживаются вентральные покровы клеща; правой иглой (или пинцетом) приподнимается дорзальный покров тела; открываются трахеи и дорзо-вентральные мышцы, покровы снимаются прочь. Постепенно обнажаются внутренние органы.
Рис. 221. Вскрытие Argas persicus.
Освобождение внутренних органов, в первую очередь желудка — 1 и мальпигиевых сосудов —5;
2 — трахеи.
Снятую спинку кладут в фиксирующую жидкость (см. ниже). На вскрытом клеще видны (рис. 221): пленки жирового тела с ветвями 356
трахеи, в проходящем свете трахеи черного цвета, при падающем свете — серебристые; темные ветви кишечника — средней кишки или желудка, иглами их приводят в симметричное расположение, если они были сдвинуты при вскрытии хитина; две молочно-белые тонкие, длинные, часто варикозные, трубки, заметные лишь местами между петлями кишечника — мальпигиевы сосуды; в переднебоковых отделах препарата среди трахей и жирового тела лежат парные гроздевидные слюнные железы, а у самки между ними — лопастной или трубчатый орган Женэ, играющий важную роль при откладке яиц (у некоторых клещей он может быть найден выпяченным наружу, над основанием capitulum, что происходит при кладке яиц). Если клещи вскрыты со зрелыми половыми продуктами, то между отростками кишечника видны также: у самки — яичник, в виде усаженного шариками (яйцами) рукава, у самца же — сосискообразные или трубчатые мутновато-белые семяпроводы.
Ознакомившись с расположением органов, приступают собственно к препаровке, которую производят преимущественно препаровальными иглами.
1.	Сначала удаляют дольки жирового тела и разрывают связующие органы трахейные трубочки.
2.	Если при вскрытии клеща были поранены стенки кишечника, то описанная выше картина оказывается затемненной вышедшим наружу содержимым кишечника, варьирующим по своему виду от свежевсосан-ной жидкой крови до черной крошковатой массы. Муть удаляют струей воды, направляемой повторно с некоторой силой из пипетки с шарообразным резервуаром. Этот прием полезен вдвойне: помимо промывания объекта струя воды разрыхляет клубок органов клеща; часть жирового тела уносится вон, петли кишечника и других органов приподнимаются, благодаря чему делается более ясным ход последующей препаровки. У крупных клещей в кишечнике бывает так много крови, что она мутит всю воду в ванночке; в таком случае приходится повторно сменять физиологический раствор, пока он не перестанет мутнеть.
3.	Если препаровка преследует цели только ознакомления с анатомией клеща и приготовления тотальных препаратов, то можно рекомендовать прилить к физиологическому раствору несколько капель крепкого спирта. При этом органы выступают более резко, различные ткани делаются лучше различимыми и сама препаровка значительно облегчается.
4.	Иглами отводят трубки кишечника (рис. 222), отрывая подходящие к ним веточки трахей. Откидывают правые ветви кверху и находят точки перехода срединного ствола кишечника спереди в короткий пищевод, проходящий сквозь нервный узел, сзади же — в ректальный пузырь.
5.	Затем подводят иглу под пучок трахей, отходящих от стигмы, и движением кверху отрывают трахеи от их внутренних тонких разветвлений так, чтобы самый пучок их разволокнялся совершенно свободно. Эту процедуру проделывают осторожно: между ветвями расходящихся трахей лежат задние концы грозди слюнной железы, которую необходимо отпрепаровать в целости.
6.	Кроме слюнной железы в этом месте попадаются мальпигиевы сосуды, петли которых направляются к переднему концу клеща, и части половых органов — яичник с яйцеводом или часть семенника с семяпроводом. Попутно освобождают от связи с трахеями и эти органы. Вернув все органы к их прежнему положению, производят такую же препаровку на левой стороне клеща.
357
Рис. 222. Вскрытие Argas persicus.
Освобождение ветвей желудка окончено и весь желудок отведен кпереди. Обнажаются яичник —5 и матка— 6\ 4 — слюнная железа. Остальные обозначения см. на предыдущем рисунке.
7.	В описанном виде работа производится у клещей, петли кишеч-| ника которых лежат приблизительно в одной плоскости и не загибаются вниз и внутрь. Таковы Argas и некоторые Ornithodorus\ у 1хо-didae (см. ниже) ветви кишечника гораздо длиннее и относительно, и абсолютно. Боковые и задние ветви у самого края тела загибаются дугообразно и идут вниз, ложась как бы вторым этажом под видимым сверху кишечником. Некоторые петли при этом доходят до переднего конца тела. При вскрытии таких клещей особенно легко ранятся ветви кишечника в месте их изгиба. Препаровку петлистого кишечника ведут с целью извлечения наружу лежащих в глубине препарата ветвей кишечника. Это достигается разрыхлением клубка органов при помощи струи физиологического раствора из пипетки, приподниманием органов иглами, разрыванием связующих трахей и осторожным вытягиванием пинцетом нижних частей ветвей кишечника. Сначала освобождают петли правой, а затем левой стороны тела.
8.	При описанной работе следует остерегаться порвать половые органц семенник или яичник, ко торые лежат как раз по/ задними ветвями кишеч ника.
9.	Откинув кверху в кпереди задние ветви ки шечника (рис. 223), осма
тривают ректальный пузырь, имеющий снежно-белый цвет вследствш скопления в нем, как и в мальпигиевых сосудах, зернышек гуа нина. Пузырь тонкостенен, поэтому он легко рвется. Он бывает парным' Над ним лежит яичник, который отводят кпереди. Мальпигиевы сосуды впадают в пузырь по бокам места соединения с ним кишечника. От нижнего конца пузыря отходит очень короткая кишка (трубка) канальном] отверстию. Если пузырей два, то кишка, оба пузыря и оба мальпигиев: сосуда сливаются вместе, после чего и открываются анальным отверстием.
10.	Освободив все ветви кишечника и мальпигиевы сосуды, чтобь отделить кишечник от анального отверстия, соскребают лопатовидно: иглой, держа ее косо, все ткани с внутренней поверхности брюшны) покровов клеща, начиная сзади.
11.	Также можно вырезать иглой анальное отверстие с хитином (рис. 223), отведя его кпереди (рис. 224), отпрепаровать иглами яичниц (или семенник) от пищеварительного канала. Откинув кверху и на ле^: вую сторону передние ветви кишечника, приподнимают тупой иглой пе?' редкий конец его серединного ствола, чтобы видеть переход в пищевод; осторожно прорезают ножницами натянутую трубочку, благодаря чему
35b
совершенно освобождают пищеварительный аппарат, который и удаляют из тела клеща. Или, освободив дольки слюнных желез, вырезд-ют иглами capitulum; таким образом освобождается вся система органов пищеварения, начиная от ротовых органов и кончая заднепроходным отверстием. При отрезании capitulum сзади лопатовидную иглу опускают отвесно тотчас кпереди от половых путей, открывающихся в половое отверстие (рис. 225).
12.	Препаровка кишечника требует времени, в течение которого физиологический раствор диффундирует у некоторых видов клещей (например, у Argas) внутрь кишечника, вызывая появление шарообразных вздутий его ветвей и укорачивая их в длину. Чтобы надлежаще
Рис. 223. Вскрытие Argas persicus.
Освобожденный яичник (5) и яйцеводы (7) отводятся кпереди; матка (6) остается на месте; видно впадение желудка (2) в ректальный мешок (5), под который уходят концы мальпигиевых сосудов (5). Хитин вокруг ректального мешка рассекается насквозь по четырем направлениям, чтобы вырезать анальное отверстие.
оценить подобные артефакты, следует присматриваться к форме и виду кишечника на только что вскрытом клеще (контур, очертания и т. д.), чтобы выработать правильный критерий для сравнения.
13.	Если при препаровке крупные ветви кишечника и часть мальпигиевых сосудов оторвались, то замечают место, где они лежали, чтобы на предметном стекле при наклейке препарата можно было бы поместить их в, естественном положении. Отдельные куски кишечника (при вскрытии в физиологическом растворе) берут для фиксирования в гистологических целях или используют для изготовления экстрактов. Отпре-парованный кишечник наклеивают на стекло (стр. 26) или фиксируют отдельно.
14.	В оставшейся части клеща препаруют слюнные железы, если они не были раньше извлечены вместе с органами пищеварения. Лежат они в переднебоковых частях препарата. Слюнные железы Argas отно-
359
Рис. 224. Вскрытие Argas perslcus.
Яичник (5) и яйцеводы (7) отводят книзу. Желудок, вырезанный четырехугольник хитина с анальным отверстием (8), ректальным мешком (9), а также мальпигиевы сосуды (5) отводятся вперед. Обнажаются двурогая матка (0 и рукав влагалища (непарный канал —10), который отпрепаровывают. Представлен момент отсекания передней части хитиновых покровов (с ротовыми органами) от полового отверстия; 2—трахеи, # —слюнные железы.
Рис. 225. Вскрытие Argas perslcus.
Отделение ротовых органов от переднего куска хитиновых покровов. Вся пищеварительная система готова для наклейки на предметное стекло.
сительно коротки; их альвеолы очень тесно прилежат друг к другу; грозди слюнных желез Ixodidae длинны, более рыхлы и богаты боковыми веточками. Самое же развитие их у самок Ixodidae стоит в тесной связи с упитанностью клеща и со временем кладки. Нормально насытившаяся самка, уже кладущая яйца, имеет редуцированные слюнные железы. Редукция таковых сказывается в потере альвеолами вида туго растянутых пузырьков; они спадаются, кажутся пустыми и на препаратах еле красятся.
15.	Грозди слюнных желез освобождаются иглами от трахей и жирового тела, начиная от заднего конца желез. У Ixodidae главный ствол протока почти на середине длины дает боковое крупное ответвление, благодаря чему железа каждой стороны тела двудольчатая (одна долька главная, другая добавочная). По мере освобождения слюнную железу отводят в сторону, отпрепаровывают ее проток до места соединения его с ротовым аппаратом, после чего в таком же порядке отпрепаровывают и железу левой стороны тела.
16.	По освобождении слюнных желез самки отпрепаровывают орган Женэ, трубки или дольки которого четырьмя комплексами лежат позади основания capitulum между выводными протоками обеих слюнных желез. Тут же лежат группы более плотных клеток жирового тела и нефроциты, которые подлежат удалению. Орган Женэ выворачивается наружу и обхватывает откладываемые яйца, смазывая их своим секретом, что необходимо для сохранения яиц во время эмбрионального развития.
17.	Когда препарующий уже ориентировался в расположении органа Женэ или когда слюнные железы отпрепарованы с их выводным протоком, острой копьевидной иглой прорезают хитин вокруг комплекса ротовых частей (capitulum) так, чтобы его можно было удалить из тела клеща (рис. 225). При этой работе необходимо сохранить целость протока слюнных желез.
18.	Комплекс слюнных желез, орган Женэ и capitulum переносят на шпателе на предметное стекло с углублением, где при проходящем свете производят окончательную очистку препарата от жирового тела, трахей и мышц. Если слюнные железы или дольки органа Женэ будут оторваны, то их фиксируют для срезов.
19.	Отпрепарованные органы переносят на шпателе на обычное предметное стекло, где и наклеивают.
20.	Чтобы избежать лишнего переноса отпрепарованных органов (возможность порвать препарат), допрепаровку мелких по размерам органов (§ 18) можно производить прямо на предметном стекле в капле физиологического раствора. В таком случае необходимо тщательно убрать со стекла все обрывки долек жирового тела, мускулы и прочие посторонние части. •
21.	В оставшейся части препарата у самки выделяют половые органы (рис. 226). Яичник имеет разные размеры, в зависимости от степени развития в нем яиц. Величина его сравнительно мало варьирует у Argasidae, которые кладут яйца несколько раз в течение жизни и, наоборот, различия в размерах у Ixodidae достигают огромной величины, если сравнивать яичник напитавшейся самки и самки в разгар кладки яиц. Яичник узнать очень легко по массе шаровидных вздутий (развивающиеся яйцевые клетки) на его поверхности (рис. 226). Яичник Argas короток. Оба конца резко переходят в яйцеводы, которые постепенно утолщаются в рога матки. Обе матки сливаются во влагалище, которое у самого полового отверстия принимает пару трубчатых придаточных желез.
361
22.	Вид яйцевода и матки варьирует в зависимости от прохождения яиц через первый или заполнения живчиками второй.
23.	Женские половые органы Ixodidae устроены по тому же общему плану, но с некоторыми отличиями в строении яичника: яичник у них очень длинный, яйцеводы же короткие. Некоторые роды (как Hyalomma) имеют сперматофорную сумку, лежащую между передними концами яйцеводов.
24.	У Ornlthodorus papillipes (см. ниже) при копуляции самец прикрепляет к половой щели самки колбообразный сперматофор, который
Рис. 226. Вскрытие Argas persicus.
Вырезание полового отверстия с окружающим хитином и освобождение половой системы для последующей ее наклейки на предметное стекло.
остается все время снаружи, пока из него не перетечет содержимое в половые пути самки.
25.	При препаровке женские половые органы, по освобождении их от трахей, отводят вперед до тех пор, пока не дойдут до влагалища, к переднему концу последнего плотно прилежит центральная нервная система в виде компактного узла с радиально расходящимися нервами. В дальнейшем узел освобождают иглами, обрывая отходящие от него нервы. Половые органы или отскабливают лопатовидной иглой от наружного полового отверстия, или копьевидной иглой прорезают хитин вокруг последнего; в обоих случаях необходимо очистить влагалище от налегающих на него со стороны полости тела соединительно
тканных тяжей, нефроцитов и жирового тела. При этой работе щадят трубчатые придаточные же-
лезы влагалища, которые можно легко оторвать.
26.	Сперматофор имеет плотные стенки, поэтому его можно извлечь из сперматофорной сумки, прорезая очень острыми иглами стенку последней и снимая ее по частям. Кроме того, на дне колбочки с клещами можно найти выброшенные после их опорожнения капсулы сперматофоров. Сперматофоры у разных видов Ornlthodorus имеют некоторые отличия по форме.
27.	Половые органы самца состоят из тонкого и короткого семенника. От его краев отходят толстые семяпроводы; они особенно утолщаются при переполнении их живчиками; местами на них бывают перехваты. Иглами обрывают трахеи, семенник и семяпроводы отводят кпереди, пока не доходят до компактного пакета сложных придаточных желез, в основании которого и открываются семяпроводы. Спереди и снизу к этому пакету прилежит слитный нервный узел. Соскабливанием лопатовидной иглой по хитину брюшка отделяют половые органы от полового отверстия, после чего производят окончательную очистку их от соединительной ткани и жирового тела.
362
28.	Стенки половых органов самца очень нежны и легко ранимы. При повреждении из их полости высыпаются длинные палочковидные или изогнутые под углом живчики, характеризующиеся своей неподвижностью.
29.	При «отскабливании» выводных путей половой системы от хитина брюшной поверхности тела может быть удален также и эндостер-нит —в виде поперечной сухожильной перемычки между местами прикрепления пучков мышц. У некоторых Ixodidae могут быть также одновременно удалены и две коксальные железы ретортообразной формы.
30.	Оставшиеся на боках препарата дыхальца или стигмы с пучками трахей вырезают вместе с окружающим их хитином, если предполагают делать из них срезы или тотальные препараты.
31.	Из органов чувств легко найти глаза по краям спинного щитка или по бокам тела (есть не у всех видов) и обонятельный аппарат в виде ямки на лапке первой пары ног (Галлеров орган).
32.	Для обнаружения нефроцитов тонко оттянутой пипеткой впрыскивают в бок тела живого клеща аммиачный литиевый кармин. Через 1—2 суток клеща вскрывают. Нефроциты видны в виде ярко красных точек, диффузно рассыпанных по всему телу и по поверхности различных органов.
33.	Для получения препаратов крови (гемолимфы) отрезают ноги; выступающую из отверстий прозрачную жидкость размазывают по чистому предметному стеклу и фиксируют во влажном состоянии (см. стр. 16).
34.	Некоторым клещам, как Argas persicus и Ornithodorus papillipes свойствен феномен кровевыпрыскивания. Если клеща положить на спинку и придавливать тупой иглой, то иногда можно вызвать выступание крупных капель прозрачной жидкости с плавающими в ней мельчайшими беловатыми точками. Еще легче вызывать это явление, если положить клеща на нагретую стеклянную или металлическую пластинку.
РОД ORNITHODORUS KOCH
Сбор, хранением кормление
Южные клещи распространены в Средней Азии, Закавказье, на Северном Кавказе. Клещей собирают в трещинах глинобитных стен помещений для скота, под глиняной (лёссовой) штукатуркой, в углублениях между камнями стенной кладки. Выгребают мусор и просеивают его через крупнопетлистое сито. Взрослые клещи и нимфы старших стадий остаются в сите, личинки и молодые нимфы хорошо видны в субстрате, прошедшем сквозь сито. Клещи серого цвета, поэтому плохо заметны на субстрате, некоторое время они лежат спокойно, поджавши ноги, потом довольно быстро убегают. Из нор грызунов и черепах выгребают совком субстрат дна и рассматривают тем же способом. Клещей берут тонким пинцетом или улавливают кисточкой. В норах могут быть и иксодовые клещи. Клещи Ornithodorus отличаются отсутствием хитиновых плотных щитков в покровах тела. Иногда можно находить их сидящими прямо на стенах; зимою клещи Ornithodorus lahorentis в фазе нимф держатся в шерсти верблюдов, овец и других животных (как и некоторые виды иксодовых клещей).
Клещей Ornithodorus держат в колбочках Эрленмейера, как и Argas. Некоторые виды хорошо размножаются в лаборатории и могут долго голодать.
363
Для кормления клещей к столику привязывают морскую свинку или белую мышь спиной книзу. Тщательно выстригают или выбривают площадку покровов брюшка. На выстриженное место опрокидывают пробирку с несколькими клещами, не сильно придавливают ее к телу и ждут, пока клещи не присосутся к покровам. Пробирку снимают и наблюдают за клещами во время сосания ими крови. Отпавших клещей перекладывают пинцетом в колбочку, на ярлыке отмечают дату кормления.
Столик или доску с привязанным животным держат в большой эмалированной ванночке, чтобы клещи не убежали. Кормящий должен быть в халате с хорошо завязанными рукавами или клеенчатыми нарукавниками. Клещи Ornithodorus легко присасываются к человеку, зараженные клещи могут легко передать ему распространяемый ими спи-рохетоз; поэтому для избежания внутрилабораторного заражения необходимо проводить кормление клещей с указанными выше предосторожностями и при непрерывном наблюдении над кормящимися клещами. Повторность кормления может быть растянута на годовой срок. Однако это зависит от целей: поддержание культуры клещей в лаборатории или же для опытов с ними; в последнем случае сроки кормления устанавливаются в зависимости от характера работы.
Наружное строение
Ornithodorus lahorensis Neum.
Тело (рис. 227—230) удлиненное, крупных размеров (самка до 10,8 М'М X 6,2 мм, самец — до 8,5 мм X 4,4 мм), с толстым краем. Боковые края в средней части тела (считая от переднего его конца к заднему) параллельны друг другу, кпереди боковые края дугообразно изгибаются; сходясь вместе, они образуют приостренный передний конец тела. Задний контур тела широко округлый. Хитин дорзальной поверхности клеща с нежной звездчатой структурой, на фоне которой видны круглые диски. Расположены они вдоль по длине тела симметрично на обеих сторонах. Ни малейших следов радиальности их расположения нет. Краевого ранта нет. Щитков нет. В зависимости от степени истощенности клеща на спинной стороне бывают видны вдавления и утонченные края его могут сильно загибаться кверху.
С вентральной стороны видны сильно развитые ротовые части. За передний конец тела они не выступают. Ротовые органы состоят из непарной срединной, покрытой зубчиками, хитиновой пластинки — гипостома; при рассматривании клеща с брюшной стороны видны выступающие из-под переднего края гипостома концы пары верхних челюстей, или хелицер, с подвижным концевым члеником («пальцем»), по одному на каждой хелицере. При нормальном положении клеща хелицеры лежат над гипостомом. Кнаружи от ротовых органов лежит с каждой стороны по четырехчлениковому щупику. К ротовым органам с каждой стороны прилежат валикообразные вздутия покровов, никаких придатков в виде склеритов на них нет. Ног четыре пары. Половое отверстие в виде поперечной щели у самки лежит между коксами первой пары ног, у самца оно прикрыто овальной пластинкой. Если у клеща, имеющего восемь ног, полового отверстия нет, это означает, что рассматриваемый экземпляр является нимфой.
Анальное отверстие расположено приблизительно в конце первой четверти расстояния между уровнем кокс четвертой пары ног и задним краем тела. Позади анального отверстия по направлению к задней 364
окружности тела идет продольная, в различной степени углубленная, аномаргинальная борозда со множеством «дисков» в ее глубине; ко дну этой борозды прикрепляется соответственно большое количество дорзо-вентральных мышц. У сильно напитавшихся и раздувшихся клещей аномаргинальная борозда по бокам сглаживается, при этом ряд дисков делается вполне ясно видимым; кнаружи от нее симметрично лежат, по
Рис. 227. Ornithodorus lahorensis, сверху.
две с каждой стороны тела, группы сближенных дисков — места прикрепления совнутри четырех пучков дорзо-вентральных мышц. Постанальной поперечной борозды нет. Поэтому нет и типичной фигуры креста, образуемой пересечением этой борозды с аномаргинальной бороздой, характерной для других видов Ornithodorus (см. ниже). Стигма лежит на каждой стороне сбоку на уровне кокс IV. При рассматривании лапки I в профиль видны три очень сильно выраженных бугра на ее дорзальном крае; четвертая пара ног несет перед своим концом, сильно выступающим кверху, наклонный вырост (рис. 231).
Отсутствие боковых склеритов («щек») и постанальной поперечной борозды, звездчатая структура хитина, очертание краев тела и характер бугров лапок I и IV характеризуют Ornithodorus lahorensis h
1 М. В. Поспелова-Штром сводит этот вид, описанный Нейманом (Neumann), в качестве синонима к виду Ornithodorus canestrinii. Оба эти вида хорошо отличаются друг от друга. Подробный разбор этого вопроса будет дан в другом месте.
365
Рис. 228. Ornlthodorus lahorensis, самка, снизу.
Рис. 229. Ornlthodorus lahorensis, самка, сбоку.
Рис. 230. Ornithodorus lahorensis, нимфа.
Рис. 231. Ornithodorus lahorensis.
А — самка снизу, Б —лапка первой ноги сбоку, В —лапка четвертой ноги сбоку.
Этот вид передает туляремию; может хранить в себе возбудителей бруцеллеза до двух с половиною лет (М. М. Ременцова и В. Н. Кусов, 1950; М. М. Ременцова, 1951). Спирохет клещевого рекурренса не передает.
Ornithodorus papillipes Bir. (переносчик клещевого возвратного тифа в Средней Азии)
Тело (рис. 232, 233) широкое и относительно короткое. Размеры самки — до 8,2 мм длины и 4,6 мм ширины, самца — до 5,8 мм длины и 3,4 мм ширины. При рассматривании со спины видно, что края тела в средней части параллельны друг другу, на уровне передней трети медиально изламываются и
делают еще один излом, направляясь к переднему концу, загнутому книзу в виде клюва (rostrum). На границе задней трети длины на каждом боку тела видна ясно выраженная «зарубка». От нее кзади край тела образует округлый контур (иногда в виде правильного полукруга). Дорзальная поверхность хитиновой кутикулы в общем шагреневого вида. Характер поверхности хитиновых покровов (степень шагреневости) несколько меняется в зависимости от степени насыщения или от продолжительности голодания клеща (различная степень растянутости хитиновой кутикулы). На фоне кутикулы видны округлые «диски» — вдавления, к которым изнутри прикрепляются дорзо-вентральные мышцы. Лежат эти диски симметрично по обеим сторонам тела, не образуя радиаль
ных рядов.
Рис. 232. Ornithodorus papillipes, самка.	При осмотре клеща С
брюшной стороны кзади от «клюва» видны ротовые органы, состоящие, как и у других Ornithodorus, из пары хелицер и гипостома, по бокам которого лежат четырех-
члениковые щупики. Концы их загнуты вентрально. Отверстие, в котором лежат ротовые органы, называется камеростомом. По бокам каме-
ростома в его передней части имеются особые пластинчатые выросты, называемые «щеками» (рис. 234). У некоторых экземпляров клешей бы-
вает видно, как щеки, точно створки складня, прикрывают снизу оттесненные кверху ротовые органы. Щеки более заметны при рассматривании клеща сбоку.
Передняя половина тела на брюшной его стороне занята четырьмя парами кокс — основных, неподвижно сросшихся с телом, члеников йог.
•368
Лежат коксы двумя продольными линиями. Коксы I крупнее остальных; несколько отступя кзади от них расположены тесно прилежащие друг
Рис. 233. Ornlthodorus paplllipes.
А —самец, снизу: / — клюв, 2 —capitulum, 3 — кокса, 4 — надкоксальная складка, 5— половое отверстие, 6 — анус, 7—постанальная борозда, 8 — аномаргинальная борозда, 9 — подкоксальная складка. Б —лапка второй ноги сбоку; В —лапка четвертой ноги сбоку.
к другу коксы II — IV. Ковнутри от ряда кокс каждой стороны тела выдается по продольной коксальной складке. Между коксальными складками имеется свободное пространство хитиновых покровов. На уровне
Рис. 234. Rostrum, щечные
склериты и capitulum сбоку (передняя нога отрезана).
А —самка, Б —самец; 1 — ,щеки".
заднего края передних кокс на этом серединном пространстве лежит половое отверстие. У самки его поперечная щель ограничена двумя
24 Зак. 3420. Лабораторный практикум медицинской паразитологии	369
полукруглыми створками. У самца половое отверстие меньших размеров; оно прикрыто клапаном гладкого хитина. Передний край его выпуклый, У сильно напитавшихся экземпляров коксальные складки заметно сглаживаются. Позади кокс IV коксальная складка изламывается кзади и кнаружи и теряется позади боковой зарубки края тела. На уровне боковых зарубок находится анальное отверстие, прикрытое двумя полуовальными складками. Перед ним лежит преанальная борозда. От анального отверстия к заднему концу тела идет продольное вдавление — аномар-гинальная борозда. На ее дне видны диски — места прикрепления дорзо-вентральных мышц. От ее середины наискось — кзади и в стороны —
Рис. 235. Поперечная постанальная складка (/) и часть аномаргиналькой борозды (2) у нимфы Ornithodorus papillipes. (По Е. Н. Павловскому и Б. В. Лотоцкому).
отходит, на каждой стороне тела, волнистая глубокая борозда с исчерченным хитином — постанальная поперечная волнисто изогнутая борозда. Перекрест этих борозд образует фигуру креста (рис. 235) — признак, характерный для целой группы видов Ornithodorus. Коррелятивно он сопряжен с наличием склеритов («щек») по бокам ротовых органов. Замечательно, что переносчики клещевого спирохетоза имеются среди видов «крестоносцев» этого рода. Половые створки имеют вид полукруга гладкого хитина, выпуклостью направленного вперед. Лапка I по дорзальному краю неправильно волнистая (рис. 236). Лапка IV имеет гладкий верхний край, но с выдающимся бугром перед скатом к концу. Вентральный край покрыт густыми сильными щетинками (рис. 236).
Ornithodorus papillipes, описанный А. А. Бирулей, в нашей литературе (М. В. По-спелова-Штром и др.) считается синонимом Ornithodorus tholozani (Lab. et Megn.). Но в этом описании и в изображениях явно смешаны признаки Ornithodorus papillipes и Ornithodorus lahorensis. Общая внешность и конфигурация тела как у Ornithodorus papillipes, а характер бугристости лапок I и гипостом как у Ornithodorus lahorensis. Поэтому здесь сохраняется наименование, данное А. А. Бирулей.
370
Рис. 236. Лапки ног Ornithodorus.
Лапки 1 пары ног: 1 — Ornithodorus papillipes’, z — Ornithodorus verrucosus, самка; 3 —то же, самец; 4 — Ornithodorus cholodkovskyi\ 5 — Ornithodorus пегeeasts, самка; 6 — Ornithodorus tartakovskyi, самка; 7 — Ornithodorus jacobsoni Яап-ки IV пары ног: 8—Ornithodorus papillipes’, 9—Ornithodorus verrucosus, самка; 1Q—XO же, самец; 11 — Ornithodorus nereensis; 12 — Ornithodorus tartakovskyi^ 13 — Ornithod or us jaco bsoni.
24*
Ornithodorus verrucosus 01., Sas. et Fen.
Этот вид (рис. 237) описан по экземплярам, добытым из пещеры села Петровского в окрестностях Ставрополя. В Закавказье он распространен довольно широко (окрестности Тбилиси, Дагестан, Азербайджан) . Долгое время «островное» положение места первого обнаружения этого вида оставалось загадочным. Предположительно высказывалось мнение, что клещи Ornlthodorus verrucosus были завезены из Туркмении, но это мнение неосновательно; возможность столь дальнего завоза не
Рис. 237. Ornlthodorus verrucosus.
находит подтверждения при рассмотрении биологических особенностей клещей этого вида. Поисками, предпринимавшимися Н. Д. Чеботаре-вичем, были обнаружены новые точки нахождения Ornlthodorus verrucosus; они тянулись к югу. Наконец, клещи Ornlthodorus verrucosus были обнаружены в норах грызунов под Гудермесом (А. К. Шустров). Таким образом, от Петровского к границе Дагестана устанавливается цепь точек (правда, очень разбросанных) нахождения этих клещей. Совсем неожиданно обнаружение их на каменистом берегу Днепра в районе Каховки (крайней северо-западной точки нахождения Ornlthodorus verrucosus). Остается невыясненной связь этой крайней точки с Северным Кавказом. Ornlthodorus verrucosus является норовым обитателем. Он встречается в норах черепах, логовах лисиц и других животных.
По общему виду Ornlthodorus verrucosus сходен с Ornlthodorus ра-plllipes, от которого отличается меньшими размерами и строением лапки I. Самки имеют размер 6,5—7 X 4,4—4,5 мм, самцы — 5,3 X 3,2 мм. По дорзальному краю лапки I несут пять явственно выраженных (но 372
не так сильно, как у Ornithodorus lahorensis) бугров. Один из средних бугров немного выше остальных. Хитин спинки покрыт кружевным узором из сети рядов мелких бородавочек; с дна ячеек сети поднимается по волоску. Постанальная поперечная борозда слегка извилиста; половины ее лежат косо, спускаясь от средней линии тела несколько кзади. Половое отверстие лежит на уровне промежутка между коксами I и II. Ornithodorus verrucosus является переносчиком клещевого спирохетоза человека. В норах различных животных встречаются спонтанно зараженные спирохетами клещи, передающие спирохетоз человеку от животных, кровью которых они питаются (например, барсука, полевки* тушканчика и др.).
Ornithodorus verrucosus сводится М. В. Поспеловой-Штром в качестве синонима к виду Ornithodorus asperus Warb., описанному крайне коротко по единственному экземпляру из Месопотамии, a Ornithodorus asperus относится ею к подроду Alectoro-bius ( Pavlovsky ella). He касаясь здесь вопроса о таксономических подразделениях, предложенных М. В. Поспеловой-Штром, нужно отметить неправильность признания Ornithodorus verrucosus синонимом Ornithodorus asperus. К этому заключению я прихожу вследствие ознакомления с типом Ornithodorus asperus Warb. из Берлинского зоологического музея.
Ornithodorus tartakovskyi 01.
Мелкий вид. Тело короткое и относительно широкое, приближающееся к форме овала, с заостренной передней частью. Ротовые органы расположены под самым передним концом тела. По бокам ротовых органов лежат «щеки» в форме сплошных хитиновых пластинок, изборожденных по поверхности ломанными линиями. Свободный край «щек» неровный. Лапка первой пары ног короткая, широкая, с неровной явственной бугристостью. Лапы IV пары ног с выдающимся концевым притупленным бугром и густой щеткой волосков по нижнему краю. Структура поверхности хитина мелкозернистая.
Норовый вид. Встречается в норах песчанок, тонкопалого суслика и других животных в Кара-Кумах, в песках под Ашхабадом, по реке Мургабу, в Каракалинском и Кзыл-атрекском районах, на Мангышлаке, в южном Таджикистане.
Отличительные признаки видов клещей Ornithodorus приведены в табл. 12.
ЖИЗНЕННЫЙ ЦИКЛ И ЕГО ПРОДОЛЖИТЕЛЬНОСТЬ
Этот весьма важный вопрос в необходимых деталях изучен в отношении клещей Ornithodorus papillipes. Последовательность их метаморфоза отличается следующими особенностями:
1.	Откладка яиц и эмбриональное развитие приурочены к концу лета и осени.
2.	Из яйца вылупляется шестиногая личинка, которая сосет кровь различных мелких животных.
3.	После линьки выходит нимфа I с восемью ногами, но без полового отверстия. После кровососания нимфа I линяет на нимфу II* нимфа II в такой же последовательности линяет на нимфу III.
4.	Нимфы III после насыщения линяют на нимф IV, самцов и самок, нимфы IV, в свою очередь, линяют на нимф V, самцов и самок, и* наконец, нимфы V линяют на самцов и самок.
Особенностью такого течения метаморфоза Ornithodorus papillipes служит то обстоятельство, что самцы и самки этого вида по ходу превращения особей определенной семьи могут появляться три раза, после
373
Отличительные признаки OrnlfhodortiS
Таблица 12
Объект	Виды, передающие клещевой возвратный тиф					Виды, не передающие клещевой возвратный тиф	
	Ornithodorus papillipes	Ornithodorus verrucosus	Ornithodorus tartakovskyi	Ornithodorus пег ее ns is	Ornithodorus coniceps	Ornithodorus lahorensis	Ornithodorus canestrinll
Форма тела	Широкое, относительно короткое тело с загнутым книзу клювом на переднем конце; боковые края загибаются к клюву с изломом по середине загиба		Короткоовальная	Удлиненная	Удлиненная	Удлиненная. Тело дугообразно заостряющееся кпереди	Удлиненная. Тело широкое, суживающееся кпереди без изломов
Структура покровов спинки	Шагреневая или сетчатая		Тонкозернистая	Зернистость более крупная	Крупнобугорчатая	Нежнозвездчатая	Грубо сетчатая, с множеством впадин, разделенных валиками, исчерченными поперек
Крестообразные бороздки на брюшной стороне тела позади заднепроходного отверстия	Есть		Есть	Есть	Аномарги-нальная бороздка упирается в поперечную постанальную	Нет	Нет
Верхний край лапки передней ноги 1	Слабо и неправильно волнистый	С ясными бугристыми выступами	С тремя буграми	Ровный	Ровный	С тремя хорошо выраженными буграми	
Лапка IV пары ног	С тупым выростом		Вырост почти не выражен	Выроста нет	Без бугров	С резко выраженным, округлым на вершине выростом близ конца лапки	
«Щеки» по бокам хоботка	Есть, сплошные	Есть, сплошные	Есть, сплошные	Есть, пальцевидные	• Есть, сплошные плоские	Нет	Нет
линек нимф III, IV и V. Весьма вероятно, эта особенность свойственна многим видам Ornithodorus, что требуется тщательно проследить для каждого вида отдельно. Несомненно, что такой последовательностью превращения обладает Ornithodorus verrucosus.
Продолжительность метаморфоза связана с частотой питания и с наличием благоприятных факторов внешней среды. Клещи рода Ornithodorus во всех фазах, стадиях и возрастах питаются кровью позвоночных животных (любые млекопитающие, некоторые птицы, черепахи, гекконы и, вероятно, различные ящерицы, жабы) и человека. Процедура сосания крови длится минут до 40, а иногда и больше.
Ornithodorus papillipes обладает чрезвычайной устойчивостью к голоданию. В лаборатории кафедры Общей биологии и паразитологии Военно-медицинской академии им. С. М. Кирова установлена возможность более чем десятилетнего голодания нимф и половозрелых клещей этого вида. О стойкости клещей Ornithodorus к неблагоприятным условиям внешней среды можно косвенно судить по возможности содержания их живыми в лабораторных условиях. Наиболее стойки Ornithodorus lahorensis и Ornithodorus papillipes, затем в убывающей последовательности следуют Ornithodorus verrucosus, Ornithodorus tartakovskyl и Ornithodorus nereensis.
Стадии развития
Яйцо. Яйца Ornithodorus papillipes темно-желтого цвета, слегка удлиненно-овальной формы, откладываются в местах пребывания клещей.
Личинка. Голодная личинка (рис. 238) плоская, задняя половина тела правильной округлой формы, передняя кпереди несколько суживается. Ротовые части сидят терминально. Хитин покровов испещрен густо лежащими волнисто извилистыми параллельными линиями, нигде не пересекающими одна другую и распределяющимися вокруг различных центров. Сквозь прозрачный хитин просвечивают скопления зернышек гуанина, являющиеся остатками эмбрионального периода обмена веществ; они лежат то большими полями, например у анального отверстия, то меньшими кучками и отдельными зернами; их скопления непрозрачны, благодаря чему они закрывают местами структуру хитина. В проходящем свете они черны, в падающем — серебристы.
Покровы несут несколько крупных щетинок; на спине пара щетинок лежит у переднего края, по краям передней половины тела насчитывается по четыре щетинки, в средней поперечной зоне — две пары различно сближенных щетинок, по заднему округлому краю — четыре щетинки и на брюшной стороне — две пары щетинок на уровне и позади анального отверстия. Последнее закрыто двумя полуовальными створками, окруженными кольцом хитина, лишенным волнистолинейной структуры Каждая створка несет по длинному, сильно развитому волоску, направленному назад и превышающему длину самой створки. У основания гипостома пара направленных вперед и кнаружи волосков. Щупики очень бедно опушены волосками.
Ноги тонкие и длинные (рис. 239), с сильно развитыми коготками. Ноги покрыты редкими хорошо развитыми волосками. По форме лишь лапки I проявляют отдаленное сходство с лапками половозрелых клещей. Лапки II и III постепенно утончаются к вершине, не образуя дистального бугра дорзального края.
Нимфа первая. Нимфа I голодная (рис. 240, 241) около 1,5 мм длины, сытая около 2 мм, по форме тела похожа на взрослого клеща.
375
Рис. 238. Ornithodorus papillipes, личинки голодные.
Л —сверху; Б — снизу (ноги не изображены).
Ротовые части выдаются вперед и видны со спинной стороны даже у насытившейся нимфы. Хитин на спинной стороне тонкозернистой структуры, на общем его фоне более или менее ясно выступают вдавления дисков — мест прикрепления дорзо-вентральных мышц. На брюшной стороне явственны субкоксальные складки, расходящиеся друг от друга
Рис. 239. Лапки I — III и capitulum личинки. (По Е. Н. Павловскому и Б. В. Лотоцкому).
по направлению кзади. Коксы четырех пар ног сближены; коксы I крупнее, чем остальные. Над коксами проходит волнистая по форме надкок-сальная складка.
Рис. 240. Лапки I—IV и capitulum нимфы 1. (По Е. Н. Павловскому и Б. В. Лотоцкому).
У голодных нимф I часть тела, лежащая кзади от ануса, более короткая, чем у нимф, напившихся крови. Кпереди от ануса имеется поперечное вдавление, кзади идет явственно выраженная продольная срединная аномаргинальная борозда, в которую сбоку впадают две косо идущие постанальные борозды, лежащие по одной с каждой стороны тела; в общем позади ануса, пересечением указанных борозд, образуется фигура в виде неправильного креста. Над основанием задней пары ног
377
A'
&
или немного более кзади лежит обращенная вентрально стигма. Дорзальный край лапки передней ноги выдается полого кверху (рис. 240) •
Рис. 244. Нимфа III, сытая, снизу. (По Е. Н. Павловскому и Б. В. Лотоцкому).
Рис. 243. Нимфа II, сытая. (По Е. Н. Павловскому и Б. В. Лотоцкому).
Дистальная половина лапок IV
форме дорзального края
утончается к основанию коготков, по
ственной нимфе III и последующим стадиям и фазам превращения.
Нимфа вторая. Нимфа II (рис. 242, 243) около 2,2 мм длины и 1,2 мм ширины, хорошо напившаяся кровью — 4X2,3 мм. Очертания тела типичные. Ротовые органы у сытой нимфы не выдаются кпереди из-под клюва. Видна боковая зарубка края тела позади ног IV — след прохождения дугообразно изгибающейся складки, идущей от основания задней ноги кзади и кверху. Хитин тонко зернистый.
Лапка I по дорзальному краю имеет волнообразные неправильные
лапка IV отличается от более типичной, свой-
Рис. 245. Дыхальце на грушевидном возвышении над основанием задней ноги
выросты, лапки II и III несут бугрообразный выступ на границе кони-
чески сужающегося дистального нимфы III, вид сбоку. (По Е. Н. Павлов-конца. Лапка IV имеет форму как	скому и Б. в. Лотоцкому).
у нимфы I.
Нимфа третья. Нимфа III (рис. 244)—3,2X 2 мм; хорошо напитавшаяся — до 4,7 мм длины, 2,6 мм ширины и 2,5 мдц толщины.
379
При сильном насыщении хитин покровов растягивается, что разрежает зернистость его. Сильно изменяется и внешность брюшной поверхности нимфы. Коксы I значительно отодвигаются от кокс II, коксы II—IV остаются тесно соединенными друг с другом. В поперечном направлении ряды кокс обеих сторон тела далеко отодвигаются друг от друга. Валики и складки на брюшной поверхности почти полностью сглаживаются, крестообразные складки еле видны позади ануса.
По бокам capitulum намечаются небольшие продольные выпячивания хитиновых покровов (длиною около 0,2 мм) позади и сбоку от клюва, являющиеся зачатками «щек», «щеки» хорошо видны у насытившихся нимф, ротовые органы которых, вследствие общего вздутия тела, отодвигаются вперед и вентрально.
г0
-1

Лапки I—III еще резче подчеркивают форму, которая намечалась у нимф II; дорзальные бугры лапки I и концевые бугры ног II и III выражены явственно. Лапка IV также приобретает больше сходства с очертаниями, типичными для этого вида клещей, так как явственно обособляется концевой бугор ее дорзального края.
Стигма лежит на грушевидном возвышении хитиновых покровов над основанием задней пары ног (рис. 245).
Нимфа четвертая. Нимфа IV (рис. 246) — около 4,4 X X 2,6 мм — 6,2 X 3,7 мм (слабо упитанная). Имеет внешность, типичную для рассматриваемого вида. Характерны шагреневая структура спинной поверхности тела с явно выраженными дисками. Загиб края его по всей окружности кверху. На брюшной стороне, между коксами I, у нимф, готовящихся к линьке на взрослых клещей, наблюдается дисковидное вдавление хитиновой кутикулы, соответственно закладывающемуся под ней половому отверстию (точнее — его створкам).
Лапки I—IV типичной для вида формы. «Щеки» по бокам capitulum развиты больше, приобретают вид валиков до 0,5 мм длины (рис. 247).
Взрослые клещи от нимф третьих. Самцы, вылупляющиеся из нимф III, размерами 3,4X2 — 4,9X3 мм, а самки — 380
5,75 X 3,3 мм. Клюв, «щеки», capitulum и форма лапок соответствуют ви-
довым признакам.
Нимфа пятая. Нимфы V размерами и рассмотренными выше
признаками не отличаются от крупных взрослых клещей (например,
5,2X3,1 мм). Впадина покровов на месте будущего полового отверстия видна хорошо.
Взрослые клещи от нимф четвертых и пятых. Самцы, появляющиеся из нимф IV (рис. 248), около 4,2 X
Рис. 248. Самец из нимфы IV. (По Е. Н. Павловскому и Б. В. Лотоцкому).
Рис. 247. Capitulum и «щечные» склериты (7) нимфы IV, снизу. (По Е. Н. Павловскому и Б. В. Лотоцкому).
X 2,25 мм — 5,3 X 3,4 мм; самки — около 6,6X3,75 мм. Самки из нимф V — около 7,2—2,8 мм — 8—8,2 X 3,5—5 мм (рис. 249).
Рис. 249. Самка из нимфы V, сбоку, голодная; ноги не изображены.
/ — rostrum, 2 — плевральная борозда, 3— боковой край тела, 4 — „щеки*, 5 —над-коксальная складка, 6— преанальная борозда, 7— постанальная борозда. (По Е. Н. Павловскому и Б. В. Лотоцкому).
Половые различия. Самцы, в общем, меньших размеров, чем самки; у самца (рис. 250) половое отверстие прикрыто овальной гладкой створкой, лежащей на уровне кокс I, у самки — имеет вид поперечной,
381
в общем, ровной щели, сдвинутой несколько более кзади и ограниченной позади полулунной створкой; участок хитиновых покровов, лежащий перед половым отверстием, также сильно отличается по структуре кутикулы от окружающих покровов брюшной стороны тела, благодаря чему
Рис. 250. Половые отверстия.
Д —самца и Б —самки, вышедших из нимф IV. (По Е. Н. Павловскому и Б. В. Лотоцкому).
он производит впечатление второй створки, не будучи на самом деле таковой (рис. 250). Эти половые различия одинаковы у самцов и самок, происходящих от разных нимф.
ПРОВЕРКА КЛЕЩЕЙ НА СПОНТАННУЮ ЗАРАЖЕННОСТЬ СПИРОХЕТАМИ КЛЕЩЕВОГО ВОЗВРАТНОГО ТИФА
Собранных клещей оставляют живыми и держат в тех же пробирках, в которые они были положены, или перекладывают в баночки емкостью в 50 мл или колбочки Эрленмейера. На дно кладут кружочки фильтровальной бумаги и сложенные по длине полоски ее. В садки с клещами вкладывают паспорт. Садки закрывают плотным ватным тампоном и ставят в открытые коробки или на подносы, которые держат в шкафу под замком при комнатной температуре или в термостате при 25°. Как было сказано выше, садки следует время от времени увлажнять, пуская внутрь 2—3 капли воды.
Проверка клещей на спонтанную зараженность спирохетами производится кормлением партий клещей на морских свинках с последующим исследованием крови свинок на наличие спирохет. Морскую свинку привязывают брюшком вверх к деревянной доске, в боковины которой вбиты загнутые гвозди, доску с морской свинкой помещают в ванночку большого размера. Затем у морской свинки выстригают шерсть на брюшке и прикладывают к нему широкую пробирку или бюкс, в которые были переложены клещи из садков. Пробирку или бюкс плотно прижимают к телу морской свинки, чтобы клещи не разбежались, и ждут, когда они присосутся, после чего пробирку снимают, а неприсосавшихся клещей убирают обратно в садок. Следят, чтобы морская свинка, ворочаясь, не сбросила с себя клещей. Насытившиеся кровью клещи раздуваются, тяжелеют и поэтому двигаются медленно. Отпавших клещей переносят в садок. По окончании кормления морскую свинку отвязывают и помещают в клетку.
382
С четвертого дня после кормления у свинки начинают ежедневно1 брать кровь, прокалывая ухо копьем или другим инструментом. Из выступающей крови берут на два стекла по три толстые капли, которые окрашивают краской Романовского-Гимза и исследуют под иммерсионным микроскопом. Если спирохеты визуально не обнаруживаются, это-еще не значит, что свинка не заражена. Спирохетоз у свинок иногда проявляется в латентной форме, которая может перейти в явную форму при последующих пассажах. В случае отсутствия спирохет в крови свинки в течение 15—20 дней, берут ее кровь и вводят под веко и в нос новой морской свинке. Кровь этой последней свинки (толстую каплю) исследуют под микроскопом в течение 4—20 дней после предполагаемого заражения, получаемый результат считается окончательным.
Запись опытов ведется двояко. В одной тетради записывают под порядковыми номерами партии клещей с упоминанием всех паспортных сведений; на странице оставляется свободное место, куда вписывают даты кормления клещей и результат со ссылкой на номера свинок, кровь которых исследовалась. Второй журнал заводится для морских свинок; их нумеруют подряд и под каждым номером записывают даты кормления со ссылкой на номер партии клещей, их видовое название и место сбора. Кроме того, здесь же отмечаются все дни взятия крови и результаты ее исследования на спирохет, например:
4/Х 1941 г. Кормление.
7	8	9 10	11	12 13 14 15	16	18 19 20 22
- + + + ++ + + +	+ + Д------------
Если время наблюдения ограничено, то производят исследования крови до первого появления спирохет или, при отсутствии спирохет, в течение 15 дней.
Для экономии можно взять небольшие, однородные по месту нахождения партии клещей, например, 5, 4, 10 и 6 клещей, собранных в однотипных помещениях для скота в селении, или клещей из жилья и кормить их на одной свинке. Большие партии клещей из одного и того же биотопа разбивают на группы по 30—40 клещей для удобства манипулирования с ними. Кормят и крупных и мелких клещей (т. е. и половозрелых, и нимф). При недостатке морских свинок можно использовать кроликов и белых крыс. Для некоторых спирохетозов восприимчивым животным является белая мышь (при кормлении Ornithodorus tartakovskyi). Свинки, из крови которых спирохеты совершенно исчезли, могут все же долгое время оставаться спирохетоносителями, что обнаруживается при впрыскивании эмульсии их мозга новым свинкам. Положительные результаты наблюдались даже по истечении года после исчезновения спирохет из периферической крови зараженной свинки. Эпидемиологическое значение этого обстоятельства остается неясным, ибо неизвестно, могут ли спирохеты выйти из мозга обратно в кровь, циркулирующую в теле животного.
Для исследования крови человека на спирохет клещевого возвратного тифа используется методика, описанная для исследования крови человека на малярийные плазмодии (стр. 36). При диагностике клещевого возвратного тифа обязательно исследование толстой капли, так как в крови у больных спирохеты, как правило, обнаруживаются в очень небольшом количестве.
ЛИТЕРАТУРА
Галузо И. Г. Кровососущие клещи Казахстана, 5, Алма-Ата, 1953.
Левит Л. В. К внешней морфологии личинок и нимф Argas perslcus Изв. АН Казах. ССР, сер. паразит., 8, 1950.
Павловский Е. Н. Наставление к собиранию и исследованию клещей, Л., 1928.
383
Павловский Е. Н. О некоторых новых биотопах Ornithodorus papillipes и о среднеазиатских переносчиках клещевого возвратного тифа. Паразит, сборы. Зоол. музея АН СССР, т. 2, 1931.
Павловский Е. Н. Ornithodorus lahorensis и его отношение к распространению клещевого рекурренса. Тр. СОПС, АН СССР, сер. Туркм., 2, 1932.
Павловский Е. Н. О норовых Ornithodorus в Таджикистане и об отношении их к распространению клещевого рекурренса. Тр. Тадж. компл. эксп., 1932, Т. 10, 1935.
Павловский Е. Н. Новые очаги клещевого рекурренса в СССР (Северный Кавказ и Закавказье). Тр. отд. паразитол. ВИЭМ, 2, М., 1936.
Павловский Е. Н. О сперматофорном оплодотворении и женском половом аппарате у клещей Ixodoidea. Паразит, сборн. Зоол. ин-та АН СССР, т. 7, 1940.
Павловский Е. Н. Клещевой возвратный тиф. М., 1944.
Павловский Е. Н. Руководство по паразитологии человека. М., 1948.
Павловский Е. Н. Клещевой возвратный тиф в Иране. Сб. эпидемиол.-паразитол.
экспед. в Иран и паразитол. исслед., изд. АН СССР, 1948.
Павловский Е. Н. Методы обследования на клещевой спирохетоз. М., 1952.
Павловский Е. Н. и Лотоцкий Б. В. Наружная морфология переносчика клещевого возвратного тифа в Средней Азии клеща Ornithodorus papillipes. Паразит, сборн. Зоол. ин-та АН СССР, т. 9, 1948.
Павловский Е. Н., Первомайский Г. С. и Чагин К. П. Некоторые экспериментальные данные при среднеазиатской форме клещевого возвратного тифа. Докл. АН СССР, 72, 4, 1950.
Павловский Е. Н. и Скрынник А. Н. О продолжительности сохранения самкой клеща Ornithodorus papillipes способности передавать клещевой возвратный тиф. Зоол. журн., 24 (3), 1945.
Павловский Е. Н. и СкрынникА. Н. Некоторые биологические особенности клещей Ornithodorus — переносчиков клещевого возвратного тифа. Докл. АН СССР, Нов. сер., 78, 5, 1951.
Павловский Е. Н. и Штейн А. К. Действие укуса Ornithodorus papillipes во всех фазах его метаморфоза на покровы человека. Тр. отд. паразитол. ВИЭМ, 2, М., 1936.
Петрищева П. А. Каннибализм у клещей Ornithodorus как возможный путь передачи спирохет клещевого возвратного тифа. Нов. мед., 5, 1947.
Поспелова-Штром М. В. Клещи орнитодорины и их эпидемиологическое значение. Изд. АМН, 1953.
Поспелова-Штром М. В. О географическом распространении клещей подсемейства Omithodorinae. Мед. паразитол., 17 (6), 1948.
РеменцоваМ. М. и Кусов В. Н. К вопросу о роли клещей Ornithodorus lahorensis в распространении бруцеллеза. Изв. АН Каз. ССР, сер. паразит., 8, 1950.
Скопин Н. Г. О распространении и экологии Ornithodorus papillipes в Южном Казахстане, Изв. Казах, фил. АН СССР, 3, 1944.
Скрынник А. Н. Голодание клещей Ornithodorus papillipes. Тр. Воен.-мед. акад, им. С. М. Кирова, 46, 1951.
Скрынник А. Н. Роль различных видов клещей Ornithodorus в передаче спирохет клещевого возвратного тифа. Зоол. журн., 33 (2), 1954.
Славина Н. С. К вопросу о носительстве вируса клещевой возвратной лихорадки клещами-переносчиками в Казахстане. Мед. паразитол., 13 (5), 1944.
Софиев М. С. и Леонова Н. А. Новые данные о резервуарах вируса клещевого возвратного тифа в Узбекистане. Паразит, сб. Зоол. ин-та АН СССР, т. 9, 1948. Cooley R. А., Ко his G. М., The Argasidae of North America, Central America and Cuba, Notre-Dame, Ind. 1944.
Nuttall G. a. Warburton C. Ticks, a Monograph of the Ixodoidea. Part. I, Argasidae, Cambridge, 1908.
ИКСОДОВЫЕ (ПАСТБИЩНЫЕ) КЛЕЩИ — СЕМЕЙСТВО IXODIDAE
J СБОР, СОДЕРЖАНИЕ И КОРМЛЕНИЕ
Сбор материала
Пастбищные, или иксодовые, клещи живут преимущественно на лугах, в степи, лесу, норах и логовищах диких ^животных; некоторые виды обитают в стойлах домашнего скота и в глинобитных хозяйственных строениях. Большинство видов пастбищных клещей поздней осенью
384
и зимой находится в состоянии покоя. С наступлением же теплых весенних дней перезимовавшие голодные клещи взбираются на траву, валежник, низкорослые кустарники или ползают по земле, ожидая возможности нападения. Они прикрепляются к хозяину своим хоботком и сосут кровь в течение нескольких дней.
Сборы свободно живущих клещей производят на лесных и степных пастбищах; присосавшихся клещей снимают с домашних и диких животных. На пастбищах или на других участках территории голодных клещей собирают при помощи флажка, волокуши, «пропашника», «экрана» и др.
Рис. 251. Приборы для собирания клещей с растительности.
А — флажок, Б —полотнище, В — пропашник, Г— экран, Д —катушка.
Флажок — кусок марли, фланели, вафельного полотна или другой легкой светлой ткани, размерами 80 X 40 см, прикрепленный к палке длиной до одного метра (рис. 251, Д). Полотнище флажка протаскивают по земле, траве, валежнику, кустарникам, осматривают его через каждые 10— 20 шагов пройденного пути и собирают пинцетом прицепившихся клещей. Вариантом флажка является полотнище тех же размеров, прикрепленное к двум палкам одинаковой длины (рис. 251, Б). Работу ведут обеими руками. Количество собираемых клещей увеличивается раза в Р/2—2. Волокуша для собирания клещей — это полотнище из куска фланели, длиной в один метр и более. К узкой стороне куска прикрепляют палку, к концам которой привязывают веревку. Волокушу тянут за веревку по обследуемой местности. Материю осматривают через каждые 5—10 шагов. Для более полных сборов, особенно нимф и личинок, пользуются
25 Зак. 3420, Лабораторный практикум медицинской паразитологии.	385
так называемым «пропашником» (рис. 251, В), изготовляемым из прямоугольного куска фанеры 50 X 35 см, обтянутого марлей и прибитого косо к ручке. «Пропашник» проводят по траве вертикально, касаясь нижней его стороной почвы. Периодически осматривают переднюю сторону и ребро пропашника. Учеты вертикального распространения клещей производятся с помощью «экрана» (рис. 251, Г), состоящего из складной рамы высотою 2 м и шириной 75 см. Рамка скрепляется поперечными распорками. Основные ее жерди обтягиваются отбеленной бязью, расчерченной горизонтальными линиями на расстоянии 25 см одна от другой. С «экраном»
работают вдвоем, удерживая его за жерди в вертикальном положении так, чтобы нижнее ребро касалось земли. Экран протаскивают через заросли растительности, осматривают его через каждые 5 — 10 минут, снимают клещей, отмечают высоту, на которой они сидели. Каждую партию клещей кладут в отдельную пробирку или баночку. Для собирания личинок и нимф клещей с травы и низкорослых кустарников применяют так называемую «катушку» (рис. 251, Д) в форме намотанной на палку ткани, закрепленной шпагатом. Диаметр готовой катушки не должен превышать 5 см. Длина палки около одного метра. Катушку вбуравливают вращательными движениями в гущу растительности или травы. После нескольких вращений катушку осматривают и снимают клещей.
Некоторые виды клещей Hyalomma не вылавливаются ни одним из указанных способов; их собирают с травы руками. В южных полупустынях клещи Hyalomma и Rhlpicephalus нередко скопляются в кустарниковых зарослях. С них клещей стряхивают на подостланные белые простыни. Из нор грызунов клещей добывают, извлекая субстрат скребком или совком с длинной ручкой и просматривая его в тазу или на куске белой клеенки. Осматривают также места под камнями, валежни-могут сидеть сытые и голодные клещи. Домашних Необходимо тща-
Рис. 252. Баночка-ловушка для временного содержания клещей, ком, бревнами, где животных обследуют на пастбищах или в стойлах, тельно осматривать собак, ибо они, благодаря большой подвижности, собирают на себя много клещей. Собаки могут применяться особо в качестве ловчих животных. При осмотре скота обращают особое внимание на ушные раковины, шею, грудь, подмышечные впадины, пахи, околоанальную область, вымя, конец хвоста; здесь чаще, чем на других участках тела, встречаются присосавшиеся клещи. Разные виды клещей могут предпочитать те или иные места на теле хозяина.
Для выявления видового состава клещей в данном районе, определения периода их активности и степени заклещевения животных, осмотры последних производят еженедельно. Обследуют 10—30 голов каждого вида домашних животных по возможности на одном и том же месте, для получения данных по динамике численности клещей. Диких животных вылавливают капканчиками, живоловками, банками, врытыми в уровень с землей, или добывают отстрелом. Живых животных доставляют в лабораторию в клетках или банках. Убитое животное кладут в отдельный полотняный мешочек, крепко затягиваемый бечевкой. В лаборатории мешочек аккуратно развязывают над поместительной белой ванночкой и выбирают из него отпавших наружных паразитов кисточкой 386
или пинцетом. Затем животное кладут в ту же ванночку. Чтобы паразиты не расползались во время осмотра, эту ванночку ставят в другую большего размера, наполненную 1% раствором лизола. Осматривают животное, раздвигая шерсть (или перья — у птицы) пальцами и пинцетом.
Живых клещей, собранных во время экскурсии любым способом, помещают в обыкновенную химическую или энтомологическую пробирку или в баночку-ловушку (рис. 252), куда предварительно кладут полоску фильтровальной бумаги, сложенную гармоникой и смоченную 1—2 каплями воды; вместо фильтровальной бумаги можно использовать свежие листья растений без запаха. Клещей, присосавшихся к животным, снимают, захватывая их тонким пинцетом у самой кожи хозяина, и, покачивая из стороны в сторону, постепенно извлекают, стараясь не оторвать хоботок и не деформировать самих паразитов. При возможности производят осмотр промысловых животных в сезоны охоты. На водяных крысах, зайцах, диких кабанах и других животных нередко паразитируют пастбищные клещи. Осмотры животных сопровождают записями в дневнике, указывая вид животного (если он может быть установлен на месте), его порядковый номер, места нахождения на нем клещей, количество голодных и напитавшихся самок, самцов, нимф, личинок, дату сбора материала.
,У Хранение материала
Собранные клещи раскладываются отдельно по фазам развития: личинки, нимфы, взрослые особи. Клещей частью фиксируют, частью оставляют живыми для выведения всех фаз превращения, поддержания живой лабораторной коллекции или для экспериментальных работ.
Голодных клещей фиксируют, опуская их в нагретую до 70—80э воду, при этом у них расправляются ноги. Через 5—10 минут клещей подсушивают на фильтровальной бумаге и переносят в энтомологические пробирки или баночки, объемом 20—50 мл, с 70° спиртом или 2—3% водным формалином. Сытых клещей кладут прямо в спирт. Сухих клещей ввиду их хрупкости размягчают (до гибкости ног) под колпаком на влажном песке и кладут в 70° спирт. Размягчение сухих клещей достигается также кипячением их в воде в течение 2—3 часов. Объем фиксирующей жидкости в баночке должен в несколько раз превышать объем находящихся в ней клещей, особенно сытых; энтомологические пробирки заполняют спиртом доверху.
Баночки с клещами закрывают пробками, а пробирки — плотными ватными тампонами, обернутыми марлей. В пробирках не должно оставаться пузырьков воздуха. Энтомологические пробирки укладывают в материальные банки, устанавливая их вертикально. Свободные места между пробирками закладываются тампонами из гигроскопической ваты; в банку наливают 70е спирт. В большой банке энтомологические пробирки устанавливают (для перевозки и музейного хранения) в несколько вертикальных рядов, отделяемых один от другого прослойками ваты. Банку закрывают плотной пробкой.
Клещей можно сохранять и в сухом виде, раскладывая их на слои ваты в коробках, но при этом почти неизбежна порча значительной части материала.
Собранный материал на всех этапах работы с ним должен быть снабжен этикетками с записью необходимых для работы сведений.
25*
387
Содержание живых клещей
Живых клещей помещают в колбы объемом 100—200 мл или в обыкновенные химические пробирки. В каждой колбе можно содержать 300—400 взрослых голодных клещей, в пробирке 30—50 клещей-Сытые самки раскладываются поодиночке в пробирки; в пробирках хранят личинок и нимф клещей. До заполнения колбы на дно ее кладут кружок и полоску фильтровальной бумаги, сложенную в виде гармоники. В пробирку же кладут только удлиненную полоску фильтровальной бумаги, сложенную три-четыре раза под углом по всей ее длине. Колбы и пробирки с клещами закрывают плотным ватным тампоном, обернутым отрезком марли; свободные концы отрезка марли собираются вместе и завязываются сверху ниткой. В сосуды с живыми клещами опускают этикетки, а на наружную стенку колбы или пробирки наклеивают ярлык с номером сбора по дневнику или обозначают номера восковым карандашом.
Для содержания живых клещей в лаборатории необходимо поддержание температуры и относительной влажности воздуха, благоприятных для их существования. Разные виды клещей отличаются неодинаковыми требованиями к указанным факторам среды. Виды Hyalomma могут длительно сохраняться живыми в лаборатории при 16—24°; для сохранения живых клещей Ixodes требуется более низкая температура воздуха (14—18°). Относительная влажность воздуха в. сосудах с живыми клещами поддерживается следующими способами:
1.	На полоску фильтровальной бумаги в колбе или в пробирке периодически наносят 2—3 капли воды.
2.	Смачивают несколькими каплями воды внутренний конец ватного тампона, прикрывающего колбу или пробирку.
3.	В колбу с клещами опускают широкую энтомологическую пробирку с влажным песком, прикрытым сверху кружочками фильтровальной бумаги по диаметру пробирки.
4.	В пробирку наливают дистиллированную воду до 7б—Vs ее объема, вставляют в нее влажный ватный тампон до соприкосновения с водой, насыпают на вату мелкий прокаленный песок слоем 0,5—1 см и сверху прикрывают его 3—4 кружочками фильтровальной бумаги. В пробирку вкладывают прямоугольный кусок фильтровальной бумаги, перегнутый посередине.
5.	На дно пробирки или колбы заранее насыпают прокаленный влажный песок или опилки, около 7в объема сосуда, и прикрывают их сверху 3—5 кружками фильтровальной бумаги.
6.	Содержат колбы и пробирки с клещами в термостате при постоянной температуре и относительной влажности.
Пробирки с клещами Ixodes рекомендуется содержать в эксикаторе. На дно эксикатора насыпают слой мокрого песка. Сверху эксикатор закрывают крышкой. При любом способе поддержания относительной влажности в сосудах с живыми клещами следует не допускать оседания конденсационной воды на стенках сосуда и по мере появления удалять ее ватой. В случае обнаружения на фильтровальной бумаге плесени, клещей перекладывают в чистую колбу. Живых клещей хранят на затененных полках или в деревянных шкафах.
\ Кормление клещей
Разведение клещей в лаборатории связано с кормлением их на кроликах, морских свинках, белых мышах, ежах, собаках, баранах и др. 388
Кормление на кролике под н а кл е й ко й. Из отбеленной бязи сшивают рукав длиной 10—15 см, диаметром 6—8 см. Берут квадратный кусок тонкой белой ткани со стороной 10—12 см и в центре его вырезают круг диаметром 5—7 см. Подшивают один конец рукава к краям вырезки квадратного лоскута. В результате получается цилиндрический рукав с полями, приклеиваемыми к спине кролика. Для приготовления клея отмывают водой от эмульсии кусок кинопленки, сушат его и разрезают на мелкие кусочки, которые высыпают в смесь 96°’ спирта и эфира, взятых в равных частях. На 500 мл смеси требуется 45—50 г пленки. Для ускорения растворения пленки периодически размешивают ее в жидкости стеклянной палочкой.
Кролика закрепляют ремнями в специальном станке (рис. 253, Д). Посредине его спины кривыми ножницами коротко выстригают шерсть
Рис. 253. Кормление клещей на кролике.
Л —кролик  станке с приклеенным рукавом. Б—попона для прикрытия рукава. / — отверстия для передних ног, 2 —отверстия для задних ног.
прямоугольником 14 X 16 см. К выстриженному участку плотно прикладывают основной лоскут наклейки и приклеивают его к коже. На нижнюю поверхность лоскута наносят стеклянной палочкой тонкий слой клея и разглаживают появляющиеся складки рукой в резиновой перчатке. После высыхания наклейки снимают кролика со станка и одевают на него снизу попону из плотной ткани с отверстиями для пропускания ног (рис. 253, Б). Боковые края попоны загибают на спину и сшивают наглухо, кроме небольшого отверстия для свободного рукава наклейки. На шею кролика одевают картонный или жестяной круглый воротник диаметром 16—18 см. Попона и воротник предохраняют наклейку от сгрыза-ния ее кроликом. На следующий день проверяют плотность прикрепления наклейки и через ее рукав внутрь закладывают голодных клещей по 50—100 экземпляров самок и самцов. Личинок и нимф мягкой кисточкой партиями пересаживают туда же. Внутреннюю часть рукава тщательно просматривают и стряхивают ползающих по ней клещей на кожу кролика. Свободный край рукава ближе к телу животного туго завязывают бечевкой и закладывают его в бок под попону; последнюю же зашивают большими стежками наглухо. Затем кролика помещают в отдельную клетку. Через 2—3 дня рукав развязывают и наблюдают степень упитанности клещей под наклейкой. Напитавшихся и открепившихся клещей удаляют по счету в отдельную колбочку. После окончательного насыщения клещей с кролика снимают попону, воротник и срезают свободные
389
края наклейки. Через некоторое время возможно повторное кормление клещей на том же кролике L
Кормление на морской свинке. На свинках кормят по 10—20 взрослых клещей под наклейкой 6\8 см, а также личинок и нимф Rhlpicephalus в свободном состоянии. Свинку помещают в прямоугольную проволочную корзинку размерами 20X30X25 см, с плоским дном, на ножках высотой 3—5 см. Корзинку ставят в сухую белую эмалированную ванночку, которую опускают неплотно в другую ванночку большего размера, пространство между ними заполняют 1 % раствором лизола. Вокруг ножек корзинки кладут гигроскопическую вату. Клещей выпускают на спину свинки, находящейся в корзинке. Напитавшиеся личинки или нимфы открепляются от животного, выпадают сквозь сетчатое дно корзинки в сухой кювет, где расползание их задерживается ватой. Сытых клещей выбирают кисточкой или пинцетом.
Кормление на белой мыши. На шею мыши одевают целлулоидный воротничок диаметром около 4 см и помещают ее в 5— 10-литровую широкогорлую стеклянную банку. На дно банки кладут вату и ставят кормушку с влажным хлебом, что заменяет поилку. Горло банки изнутри смазывают тонким слоем мушиного клея, но так, чтобы он не стекал по стенкам вниз. Полоса клея шириной 2—3 см препятствует расползанию клещей из банки. Банку с мышью ставят в ванночку, наполненную 1 % раствором лизола. Личинки и нимфы, предназначенные для кормления, выпускаются в банку. Они сами переползают на мышь, прикрепляются к ней, питаются и после насыщения отваливаются на дно банки и на вату. Вату с напитавшимися личинками и нимфами извлекают из банки длинным пинцетом, кладут в белую ванночку и выбирают из нее клещей. Сытых личинок и нимф, ползающих по стенке банки, выбирают кисточкой.
Кормление на крупных животных. На телятах, баранах и других животных клещей кормят в мешочках, одеваемых на уши или на scrotum, закрепляя их резиновой тесьмой, повязками или бинтами. Клещей кормят также под матерчатыми колпачками, наклеенными на спину.
НАРУЖНОЕ СТРОЕНИЕ
Изучение наружного строения пастбищных клещей удобнее всего производить под бинокулярной лупой, при увеличении в 20—40 раз и сильном падающем свете. Для работы необходимо иметь слабо изогнутый глазной копьевидный нож, мягкий пинцет с тонкими концами, часовые стекла, фильтровальную бумагу, нарезанную полосками 10X5 см. Для начала берут голодных самца и самку Ixodes rlcintbs, фиксированных 70° спиртом. Клещей извлекают из баночки копьевидным ножом или пинцетом, подсушивают с обеих сторон на фильтровальной бумаге и кладут на предметный столик бинокуляра, покрытый полоской белой плотной бумаги. Клеща рассматривают сначала со спинной, а затем с брюшной стороны. При работе с живыми клещами их зажимают между двумя предметными стеклами, стянутыми резиновыми кольцами. Перед определением сухих клещей их предварительно размягчают в эксикаторе или в 5% растворе едкого калия. Ротовые органы клеща, личинок и нимф изучают на постоянных бальзамных или гуммиарабиковых препаратах.
1 Если рукав приклеен прочно, то в нем можно кормить вторую партию клещей после удаления первой.
390
Ixodes ricinus L.
Ixodes ricinus распространен в Европейской части СССР, в Крыму, на Кавказе в лиственных и хвойных лесах и на открытых местах, поросших кустарниками. Во взрослой фазе паразитирует на крупных домашних животных и на диких хозяевах: лосях, зайцах, лисицах, ежах и др. Личинки и нимфы питаются на мелких позвоночных: ежах, мышевидных грызунах, белках, ящерицах, змеях. На человека нападают взрослые клещи, реже личинки и нимфы. Ixodes ricinus развивается по треххозяй-ному типу: личинки, нимфы и взрослые питаются на разных хозяевах. Бывает переносчиком вируса шотландского энцефалита овец, вируса
Л —со спинной стороны, Б — с брюшной стороны. 1 — камеростомальная складка, 2 — основание хоботка, <? —пальпы, 4 — гипостом, 5 — футляры хелицер, 6 —спинной щиток, 7—валик, 8 — плечо, 9 — цервикальная бороздка, 10 — аурикулы, 11 — анальный щиток, 12— аданальный щиток, 13 — срединный щиток, 14 — эпи-меральный щиток, 15 — прегенитальный щиток, 16 — половое отверстие, 17— анальное отверстие, 18 — анальная бороздка, 19— перитрема, 20 — кокса, 21 — вертлуг, 22 — бедро, 23 — голень, 24 — предлапка, 25 —лапка, 26 — присоска, 27 — перепончатый придаток, 28 — орган Галлера.
клещевого энцефалита, вируса двухволнового менингоэнцефалита, возбудите/, ей пароксизмального риккетсиоза, листереллеза, туляремии, а также возбудителей пироплазмозов крупного рогатого скота. Обнаружена спонтанная зараженность клещей этого вида риккетсиями, идентичными по своим иммунологическим свойствам штаммам риккетсий, выделенных от больных клещевой сыпнотифозной лихорадкой в Алтайском крае.
Самец со спинной стороны. Тело (рис. 254, А) овальное, несколько суженное кпереди, 2,5 мм длины и 1,5 мм ширины, темнокоричневой окраски. На переднем конце различают хоботок (capitulum), прикрепленный подвижно в выемке переднего края тела складкой мягкого хитина — камеростомальной складкой. Хоботок состоит из следующих частей. Основание хоботка (basis capituli) имеет форму широкого прямоугольника, суженного кзади; по бокам к нему прикреплены четы-рехчлениковые щупики-пальпы. Первый, основной, членик пальп небольшой, сочлененный подвижно с основанием хоботка; второй и третий членики более крупные, соединены друг с другом неподвижно; четвертый,
391
маленький членик лежит в особом углублении на брюшной стороне третьего членика и сверху не всегда бывает виден. Пальпы с внутренней стороны имеют желобообразную выемку и в сложенном виде прикрывают ротовые органы клеща — хелицеры и гипостом.
Гипостом — непарный вырост средней части основания хоботка, с зубцами на нижней поверхности. Хелицеры — парные двучлениковые образования, лежащие над гипостомом. В спокойном состоянии они погружены в трубковидные футляры хелицер, образованные выростами спинной стороны основания хоботка. Концевой подвижный членик хелицер (палец) снабжен острыми зубцами. Подробнее о строении ротовых органов см. стр. 393.
Вся спинная поверхность тела покрыта плотным хитином — спинным щитком (scutum), что характерно для самцов иксодовых клещей. Спинной щиток по краям тела окаймлен рантиком мягкого хитина (валиком). Спинной щиток на переднем конце имеет вырезку, в которой лежит основание хоботка, с боков оно обрамлено плечами, или скапу-лами, являющимися выступами щитка, направленными вперед. На передней части щитка видны парные цервикальные бороздки. Спинной щиток покрыт многочисленными мелкими точечными углублениями и несет редкие светлые волоски.
Самец с брюшной стороны. При рассматривании брюшной поверхности тела (рис. 254, Б) лучше виден гипостом. Его находят на брюшной стороне хоботка в виде короткой пластинки, подразделенной продольной бороздой на правую и левую половины. Каждая половина гипостома усажена парными продольными рядами хитиновых зубцов, обращенных вершиной назад. В углублении третьего членика пальп заметен маленький четвертый членик, усаженный волосками. В передней части основания хоботка имеются небольшие зубцевидные боковые выросты — аурикулы (auriculae).
У самца Ixodes rlcinus, как и у других видов рода Ixodes, брюшная поверхность тела покрыта плотными хитиновыми щитками, разграниченными между собой бороздками. Брюшных щитков семь: у заднего края тела находится непарный анальный щиток; по бокам его располагается по аданальному щитку; кпереди от анального отверстия середину брюшной поверхности занимает крупный непарный срединный щиток, бока тела заняты парными эпимеральными щитками; кпереди от срединного щитка лежит непарный прегенитальный щиток.
Половое отверстие в виде поперечной щели находится на уровне заднего края основания ног третьей пары. Анальное отверстие в виде продольной щели находится перед задним концом тела, прикрыто анальным клапаном, состоящим из двух выпуклых створок — вальв, лежащих в хитиновом кольце, огибается спереди дугообразной анальной бороздкой, концы которой достигают заднего края тела. Наличие анальной бороздки перед анальным отверстием типично для клещей рода Ixodes.
На боках тела, с каждой стороны, позади оснований четвертой пары ног находится по одной овальной хитиновой дыхательной пластинке — перитреме, окаймленной тонкой хитиновой каемкой. Поверхность пери-тремы покрыта многочисленными ячейками, образующими поровое поле, являющееся, по-видимому, органом обоняния. На перитреме имеется гладкий выпуклый участок — макула с дыхальцем, или стигмой.
К передней половине брюшной поверхности тела прикрепляются четыре пары шестичлениковых ног. К телу неподвижно прикреплен тазик (соха)* с ним сочленяется вертлуг (trochanter), далее следуют бедро (femur), голень (tibia), предлапка (pretarsus) и лапка (tarsus). Коксы!
392
имеют короткий латеральный шип и конический длинный медиальный шип, налегающий частично на коксу II. К заднему краю кокс I прилегает перепончатый придаток в виде каемочки ткани беловатого цвета« Коксы II—IV имеют вид широких, неправильной формы пластинок, несущих по одному латеральному зубцу. Прочие членики ног имеют в общем цилиндрическую форму и соединены между собой подвижно. Лапки ног заканчиваются небольшим светлым вздутием — присоской и парой коготков. Наличие присосок на лапках обеспечивает передвижение голодных пастбищных клещей по гладкой поверхности любого наклона, На спинной стороне лапки I, ближе к ее концу, находится небольшое углубление, затянутое тонкой кожицей. Это чувствительный орган Галлера. Брюшная поверхность тела покрыта редкими волосками различной длины.
Самка со спинной стороны. Тело (рис. 255, Л) овальное, суженное кпереди, около 3 мм длины и 1,5 мм ширины. Хоботок состоит из тех же частей, что и у самца. На основании хоботка находят две группы точечных углублений, неправильно овальной формы, вытянутые латерально и кзади. Эти поровые поля, являющиеся чувствительными органами, имеются только у самок. Более половины спинной поверхности тела покрывает спинной щиток — scutum, кругловато-овальной формы, располагающийся впереди. Остальная часть спинной поверхности имеет сильно растяжимый хитиновый покров — аллоскутум. По бокам передней вырезки спинного щитка лежат направленные вперед, хорошо сформированные скапулы. На спинном щитке имеются цервикальные бороздки, кнаружи от них идет по одной боковой или латеральной бороздке. На аллоскутуме четко вырисовывается краевая бороздка, отделяющая краевой рантик мягкого хитина по бокам тела и сзади.
Наличие спинного щитка, покрывающего лишь переднюю часть спинной стороны тела, является одним из основных признаков самок иксодовых клещей.
Самйа с брюшной стороны. Брюшная поверхность тела (рис. 255, Б) покрыта мягким хитином, несущим редкие светлые волоски. Находят приостренный кпереди гипостом, усаженный продольными рядами мощных зубцов. Эти ряды зубцов имеют систематическое значение. Число их обозначают формулой в виде дроби, где числитель и знаменатель указывают на количество рядов зубцов с каждой стороны гипостома. У самки Ixodes riclnus число продольных рядов зубцов гипостома колеблется от 2/2 до 4/4- По бокам основания хоботка лежат небольшие выросты — аурикулы, в виде зубцов с широким основанием. Половое отверстие представляет собой полулунную щель, лежит на уровне кокс IV. По бокам от него проходят генитальные бороздки, их концы, несколько .расходясь в стороны, идут каудально. Анальное отверстие, огибаемое впереди анальной бороздкой, лежит между половой щелью и задним краем тела. Перитремы крупные, округло-овальной формы. От задневнутреннего угла кокс I отходит длинный конический медиальный шип, а от задненаружного угла — короткий латеральный шип. Коксы II уже кокс III и IV.
Сытые самки клещей сильно увеличиваются в размерах за счет расширения кишечника всосанной кровью и растяжения мягких хитиновых покровов тела. Окраска сытых самок приобретает стальной или желтоватый оттенок.
Ротовые органы самки. Для изготовления препарата ротовых органов у клещей отделяют полностью хоботки и вываривают их в 5% растворе едкого калия до просветления, промывают в нескольких водах, обезвоживают и заключают в канадский бальзам или после воды
393-
Д —со спинной стороны, 5-с брюшной стороны. 1-норовы^ но»,б‘~
переносят прямо в гуммиарабиковую смесь. Ротовые органы располагают на препарате брюшной и спинной сторонами, отводя пальпы в сто-
роны и подкладывая под края покровного стекла восковые ножки, ку-
сочки рисовальной бумаги и т. п.
Хоботок (рис. 256) длины 0,8—0,9 мм, основание его прямоугольное, шириной 0,5—0,6 мм, со слегка вогнутым задним краем. Брюшная
часть основания хоботка продолжается кпереди в виде широкой непарной пластинки — гипостома. Под малым увеличением микроскопа видна бороздка, подразделяющая гипостом на две половинки, усаженные рядами острых хитиновых зубцов, вершины которых направлены назад. Наиболее развиты боковые зубцы гипостома. Вершина гипостома приострена, покрыта мелкими зубчиками,
Рис. 256. Ixodes rlclnus, хоботок самки.
А —со спинной стороны, Б — с брюшной стороны. 2 — основание хоботка, 2 —поровые поля, 3 — пальпы, 4 —футляры	хелицер, 5 — гипостом,	б —аурикулы,
7—зубцы гипостома, 8 — четвертый членик пальп.
образующими так называемую корону. Над гипостомом лежат два трубчатых футляра, в них движется пара ротовых придатков — хелицер. Каждая
хелицера состоит из цилиндрического основания и подвижно сочлененного с ним второго членика — пальца. Пальцы хелицер выдаются
в стороны над свободным концом гипостома; они несут заостренные
изогнутые кнаружи крючья. На боках основания хоботка прикреплены четырехчлениковые пальпы. Пальпы служат органами чувств, с помощью их клещи отыскивают
Рис. 257. Ixodes rlclnus.
А —личинка, Б —нимфа.
место для присасывания к коже. Пальцы хелицер приспособлены для разрывания кожных покровов хозяина, гипостом служит для прочной фиксации клеща на коже.
Голодная личинка. Длина около 0,7 мм, ширина — 0,4 мм, В выемке переднего края тела (рис. 257,4) лежит треугольное основание хоботка, без поровых' полей, к нему с боков прикреплены пальпы,
395
усаженные редкими волосками. Спинной щиток покрывает переднюю часть верхней стороны тела; остальная часть спинной поверхности покрыта мягким хитином с продольными рядами редких волосков К брюшной стороне тела прикреплены три пары ног. Лапки несут по крупной присоске и паре коготков. На верхнем крае лапки I имеется округлое вдавление — Галлеров орган, свойственный и взрослым клешам. Половое отверстие и перитремы отсутствуют. Под большим увеличением микроскопа отчетливо видны: футляры и крючья на пальцах хелицер, зубцы на гипостоме, детали строения пальп.
Характерными особенностями наружного строения личинок иксо-довых клещей являются: малые размеры тела по сравнению со взрослыми клещами, наличие спинного ‘щитка, подобного таковому у самок, наличие трех пар ног, отсутствие полового отверстия и дыхательных пластинок (перитрем). У личинок родов Ixodes и Haemaphysalls отсутствуют также глаза.
Голодная нимфа. Длина около 1—1,2 мм, ширина — 0,6 мм. Хоботок (рис. 257, Б) относительно длинный, его основание имеет форму неправильного треугольника. Пальпы узкие, длинные. Около половины передней поверхности тела покрыто спинным щитком. На нем имеются цервикальные бороздки и мелкая равномерная пунктировка. Аллоску-тум покрыт редкими волосками. Ног четыре пары. Коксы I снабжены шипами: длинным внутренним (медиальным) и коротким латеральным. Остальные коксы имеют вид широких пластинок с небольшим латеральным зубчиком. Позади кокс IV на боках тела, с каждой стороны, находится округлая перитрема. Анальное отверстие лежит на брюшной поверхности у заднего края тела, оно огибается спереди дугообразной анальной бороздкой. Половое отверстие отсутствует. Под большим увеличением микроскопа отчетливо видны ряды зубцов на гипостоме, хелицеры с крючьями и все четыре членика пальп.
Общие внешние отличия нимф иксодовых клещей следующие: спинной щиток покрывает у них переднюю часть, как у самок и личинок. Ног, как у взрослых клещей, четыре пары. Перитремы имеются. Половое отверстие отсутствует. У нимф Ixodes и Haemaphysalls, как у личинок и взрослых клещей этих родов, глаз нет.
ОПРЕДЕЛЕНИЕ ВЗРОСЛЫХ КЛЕЩЕЙ
Изучение самца и самки Ixodes ricinus дает общее представление о наружном строении иксодовых клещей. У представителей других родов Ixodidae имеются иные признаки строения, которые рассматривают при родовом определении клещей и ознакомлении с отдельными их видами.
Семейство иксодовых клещей (Ixodidae) в фауне Советского Союза представлено шестью родами: Ixodes Latr., Haemaphysalls Koch, Bo-ophilus Cur., Dermacentor Koch, Rhlpicephalus Koch и Hyalomma Koch. Для практики определения необходимо иметь запас спиртовых самцов и самок клещей по возможности всех родов. Кроме набора принадлежностей, указанных на стр. 390, рекомендуется заготовить чашки Петри диаметром 10—12 см и вложить в каждую из них круг из плотной белой бумаги, соответствующий по размерам дну чашки. В центре круга простым карандашом наносят небольшой кружок и разбивают круг на шесть секторов. В секторах круга указывают род и пол клещей. В соответствии с результатами определения клеща кладут на тот или иной сектор круга. Маленький кружок в центре служит для материала, подлежащего определению. Для родового определения самцов и самок клещей пользуются следующей ниже таблицей.
396
ОПРЕДЕЛИТЕЛЬНАЯ ТАБЛИЦА РОДОВ’
1(10). Анальная бороздка впереди или сзади анального отверстия имеется.
2(3). Анальная бороздка огибает впереди анальное отверстие— . . .....................................................Ixodes	Latr.
3( 2). Анальная бороздка находится позади анального отверстия.
4( 5). Глаза отсутствуют. Основание хоботка прямоугольное. Коксы! без латерального шипа. Самцы не имеют анальных щитков .........................................Haemaphysalls Koch
5( 4). Глаза имеются.
6(7). Спинной щиток со светлым эмалевым рисунком. Коксы I с двумя шипами — медиальным и латеральным. Самцы без анальных щитков...........................................Dermacentor	Koch
7( 6). Спинной щиток без эмалевого рисунка. Самцы имеют анальные щитки.
8( 9). Основание хоботка шестиугольное. Хоботок относительно короткий. Коксы I с двумя длинными шипами. Самцы имеют две пары анальных щитков................................Rhlpicephalus	Koch
9( 8). Основание хоботка более или менее прямоугольное, без выступающих боковых углов. Хоботок относительно длинный. Коксы I с двумя длинными шипами. Самцы имеют три пары анальных щитков..............................................Hyalomma	Koch
0( 1). Анальная бороздка отсутствует. Основание хоботка шестиугольное. Коксы I с небольшим латеральным шипом. Самцы с двумя парами анальных щитков.............................Boophilus Сиг.
ОТДЕЛЬНЫЕ ВИДЫ
Ixodes persulcatus Р. Sch.
Распространен в таежных районах Дальнего Востока (включая Сахалин, Камчатку и Курильские острова), в Сибири и северо-западных областях СССР. Живет в хвойных, лиственных и смешанных лесах. На обжитых территориях взрослые клещи паразитируют на домашних животных, а в мало освоенных лесных районах — на диких копытных. Личинки и нимфы питаются на мелких млекопитающих и на птицах, ведущих наземный образ жизни. Взрослые клещи нападают также на человека. Развитие проходит по треххозяйному типу. Взрослые клещи активны с апреля по июнь, личинки и нимфы — ближе к осени. Ixodes persulcatus является специфическим переносчиком вируса клещевого (весенне-летнего) энцефалита, может передавать возбудителей северного пироплазмоза домашних животных, что установлено экспериментальным путем. По признакам наружного строения весьма сходен с Ixodes ricinus.
Самец. Тело (рис. 258, А) овальной формы, до 2,8 мм длины и 1,5 мм ширины. Спинной щиток темно-коричневого цвета, на нем видны равномерная пунктировка и мелкие светлые волоски; тело с краевым рантиком мягкого хитина. Цервикальные бороздки короткие, неглубокие. Хоботок относительно короткий, с основанием, слегка выпуклым по заднему краю. Пальпы широкие, в сложенном виде прикрывают футляры хелицер.
С брюшной стороны (рис. 258,5) гипостом несет ряды зубцов, из которых наиболее крупные боковые. Аурикулы четко выражены. Вся
1 Составлена по Б. И. Померанцеву (1950) с небольшими изменениями.
397
брюшная сторона тела покрыта щитками, как у самца Ixodes ricinus. Половое отверстие отыскивают на уровне кокс III, позади прегениталь-ного щитка. Анальное отверстие огибается спереди анальной бороздкой. Перитремы овальной формы. Коксы I снабжены крупным внутренним шипом и коротким внешним, лишены перепончатого придатка по заднему краю. Остальные коксы с небольшим внешним шипом. Присоски на лапках I крупнее присосок на остальных лапках.
Самка. По форме и размерам тела (рис. 259, А) напоминает самку Ixodes ricinus. Спинной щиток кругловато-овальный, бурого цвета, с равномерной пунктировкой и редками волосками. Обращают внимание
на слабое развитие скапул. Находят цервикальные бороздки в виде поверхностных вдавлений. Боковые бороздки не выражены. На аллоску-туме имеется краевая бороздка, отделяющая у голодных экземпляров краевой валик вдоль тела, с боков и сзади. Хоботок длинный. На коротком и широком его основании находится пара крупных поровых полей овальной формы. Задний край основания хоботка с небольшой выемкой, от его углов отходят мелкие, направленные назад зубцы — спинные корнуа.
С брюшной стороны (рис. 259, Б) рассматривают мощные хитиновые зубцы гипостома, зубцевидные аурикулы, расположенные в передней части основания хоботка. Коксы I снабжены длинным внутренним шипом и небольшим внешним; на остальных коксах имеется только по короткому внешнему шипу. Коксы II и III равной ширины. Присоски на лапках I крупнее присосок на других лапках. Половое отверстие лежит на уровне кокс IV, в виде прямой или волнистой поперечной щели. Анальное отверстие находится ближе к заднему краю тела и огибается 398
Рис. 259. Ixodes persuicatus, самка.
Л —co спинной стороны, Б — с брюшной стироны.
спереди дугообразной анальной бороздкой. Перитремы крупные, овальные, лежат по бокам тела позади кокс IV.
Рис. 260. Спинной щиток, коксы, половое отверстие самок. Ixodes ricinus {1—3), Ixodes persulcatas {4—6) (По Б. И. Померанцеву).
Отличительные особенности спинного щитка, кокс и формы полового отверстия самок Ixodes ricinus и Ixodes persulcatus приведены на рис. 2601
Haemaphysalis punctata Can. et Fanz.
Распространен в южных районах Европейской части СССР, в Крыму, на Кавказе, в республиках Средней Азии. Встречается в зоне горных лесов, в степных и пустынных ландшафтах. Типичный треххо-зяйный вид. Взрослые клещи паразитируют преимущественно весной и осенью на домашних и диких животных; личинки и нимфы встречаются весной и летом на мелких млекопитающих и птицах. Haemaphysalis punctata является переносчиком возбудителя сезонной сыпнотифозной лихорадки, может длительно сохранять возбудителя бруцеллеза, переносит кровопаразитов домашних животных.
Самец. Тело (рис. 261) удлиненно-овальное. Длина около 3 мм, ширина — 2 мм. Окраска темно-коричневая. Спинной щиток покрыт равномерной пунктировкой и снабжен короткими глубокими цервикальными бороздками. По заднему краю тела имеется 11 краевых нарезок или фестонов. Боковые бороздки длинные, отделяющие с каждой стороны по три фестона. Хоботок короткий, основание его прямоугольное, с двумя тупыми выступами — спинными корнуа, направленными кзади. Пальпы широкие, прикрывают сверху хелицеры и края гипостома, выдаются своим заднебоковым краем в стороны за основание хоботка. Рассматривают отдельные членики пальп и находят маленький первый членик, едва заметный со спинной стороны; второй членик наиболее крупный и широкий; третий членик сужен кпереди и заметно меньше второго.
На брюшной стороне тела виден гипостом, разделенный продольной бороздкой на две половины. Каждая половина гипостома несет по пять продольных рядов зубцов. На коксах I и II находят по мелкому зубцу, на коксах IV — длинный зубец с направленной ковнутри вершиной (рис. 261,2), равный длине основной части коксы. Брюшные щитки отсутствуют, их нет и у самцов других видов Haemaphysalis. Половое 400
Рис. 261. Haemaphysalls punctata.
2 — самец co спинной стороны, 2—коксы I —IV, 5—перитреме.
Рис. 262. Haemaphysalls punctata.
I —самка со спинной стороны, 2—коксы I—IV, 3— перитрема.
3
26 Зак. 3420, Лабораторный практикум медицинской паразитологии
отверстие прикрыто тонкой хитиновой пластинкой — апроном, лежит на уровне кокс II. Анальное отверстие огибается позади анальной бороздкой. Перитремы широкие, вытянуты в виде запятой, имеют широкий отросток, направленный на спинную сторону (рис. 261,5).
Самка. По форме и размерам тела (рис. 262) напоминает самца. Спинной щиток сердцевидный, с многочисленной мелкой пунктировкой и глубокими цервикальными бороздками. По заднему краю тела отчетливо выражены 11 фестонов. Аллоскутум несет пару длинных краевых бороздок. Хоботок короткий, с прямоугольным основанием, ширина которого превышает длину. Заднебоковые углы основания хоботка без каудальных выступов. Поровые поля крупные, округлые. Ротовые органы устроены так же, как у самца.
При рассмотрении самки с брюшной стороны обращают внимание на внутренний зубец кокс. Этот зубец на коксах IV более крупный, чем на остальных (рис. 262,2). Короткие конусовидные лапки несут у самой вершины небольшой зубчик. Находят половое отверстие и анальное, которое огибается позади анальной бороздкой. Перитремы, напоминающие округлые пластинки, снабжены коротким спинным отростком (рис. 262,5).
Haemaphysalis concinna Koch.
Распространен в Крыму, на Северном Кавказе, в Закавказье, Сибири, Хабаровском и Приморском краях. Встречается в лесах и в местах, поросших кустарниками. Треххозяйный вид. Взрослые клещи с мая по сентябрь (с преобладанием в июне) паразитируют на крупных домашних
Рис. 263. Haemaphysalis concinna.
/ — самец со спинной стороны, 2—коксы I —IV, 5—перитрема.
и диких млекопитающих. Личинки и нимфы питаются на млекопитающих и птицах. На человека нападают взрослые клещи и нимфы. Haemaphysa-lis concinna является переносчиком возбудителя клещевой сыпнотифозной лихорадки и вируса клещевого энцефалита.
402
Самец. Тело (рис. 263) овальное. Длина около 3 мм, ширина — 2 мм. Окраска коричневая. Спинной щиток покрыт мелкой равномерной пунктировкой. Цервикальные бороздки короткие, поверхностные. Фестонов 11. Боковые бороздки длинные, отделяющие по одному фестону с правой и левой стороны тела. Основание хоботка прямоугольное, с длинными острыми корнуа. Пальпы широкие, второй их членик резко выдается в сторону за основание хоботка.
С брюшной стороны видны шесть продольных рядов мелких хитиновых зубцов на каждой половине гипостома. Третий членик пальп несет небольшой брюшной зубчик. Коксы I имеют острый внутренний зубец,
Рис. 264. Haemaphysalis concinna.
/ — самка со спинной стороны, 2 — коксы I—IV, 3— перитрема.
более длинный, чем аналогичный зубец на других коксах (рис. 263,2). Половое отверстие лежит на уровне кокс II, прикрыто сверху хитиновой пластинкой, отходящей от переднего его края. Половая бороздка, дугообразно огибая половое отверстие спереди, идет назад, ее концы широко расходятся в стороны и теряются в области боковых фестонов. Анальная бороздка располагается позади анального отверстия. Кзади от кокс IV имеется по широкой длинной перитреме с небольшим тупым спинным отростком (рис. 263,5).
Следует заметить, что в сборах нередко встречаются так называемые гинотропные самцы, у которых передняя треть спинного щитка бывает резко отграничена; в таких случаях эта часть спинного щитка называется ложным щитком. У самцов Haemaphysalis брюшных щитков нет. Однако попадаются отдельные экземпляры с брюшными склеритами, расположенными на боках и позади анального отверстия. Эти склериты состоят из слившихся вместе хитиновых бляшек и имеют неправильную форму. У фиксированных самцов указанные склериты приобретают более темную окраску, чем смежные с ними хитиновые покровы.
26*	403
Самка. Тело (рис. 264) овальное, суженное впереди. Длина около 3,5 мм, ширина 2 мм. Спинной щиток темно-коричневый, почти круглый, с многочисленной мелкой пунктировкой. Цервикальные бороздки длинные; боковые бороздки не выражены. Фестонов 11. Боковые фестоны отделены краевыми бороздками от остальных. Основание хоботка прямоугольное, ширина его более чем в два раза превышает длину. От углов спинной стороны основания хоботка отходят корнуа в виде тупых зубцов. Поровые поля крупные, круглые. Пальпы широкие, прикрывающие сверху хелицеры и выдающиеся с боков за основание хоботка.
С брюшной стороны рассматривают гипостом, усаженный рядами зубцов. Находят небольшой зубчик на третьем членике пальп. Все коксы снабжены одним внутренним зубцом. Этот зубец на коксах I удлинен, а на остальных имеет вид небольшого выроста, едва выступающего за пределы задней части коксы (рис. 264,2). Лапки у вершины несут по зубчику. Присоски на лапках развиты хорошо. Половое отверстие лежит на уровне кокс III, по краям его выдаются валики из плотного хитина. Анальное отверстие расположено ближе к заднему краю тела и окружено сзади анальной бороздкой. Перитремы неправильно округлой формы, вытянуты вдоль тела (рис. 264,3).
Воорhilus calcaratus Bir.
Распространен на юге Украины, в Крыму, на Северном Кавказе, Закавказье и в республиках Средней Азии. Субтропический вид, живет в местах со значительным увлажнением. Паразитирует на крупных домашних и диких животных. Развитие проходит по однохозяйному типу; личинка, напитавшаяся на хозяине, не открепляясь, превращается в нимфу, которая после насыщения кровью линяет на взрослого клеща, продолжающего питаться на месте прикрепления и питания нимфы. Сытая самка оставляет хозяина и откладывает яйца на земле. Boophilus calcaratus в течение года может давать два-три поколения. Является переносчиком гемоспоридий и спирохет домашних животных. Может сохранять возбудителя бруцеллеза.
Самец. Длина тела 2—3 мм. Спинной щиток (рис. 265, А) коричневого цвета, без пунктировки, с мелкими светлыми волосками. Цервикальные и боковые бороздки не выражены. У заднего края спинного щитка, по средней его линии, заметна продольная заднесрединная бороздка, с каждой стороны от нее располагается заднебоковая бороздка. Фестоны едва обозначены. По бокам передней трети спинного щитка находятся глаза. Хоботок короткий. Основание хоботка шестиугольное, с мелкими корнуа.
С брюшной стороны рассматривают продольные ряды мелких зубцов гипостома. Коксы I несут небольшой внешний зубец. Лапки у вершины снабжены двумя зубцами. Половое отверстие находят на уровне кокс II. Анальная бороздка у анального отверстия не выражена. Имеются две пары брюшных щиткоз: пара крупных удлиненных аданальных, расположенных в стороны от анального отверстия, и пара более мелких акцессориальных, или добавочных, лежащих рядом с ада-нальными щитками. Перитремы небольшие, круглые, без спинного отростка.
Самка. Длина тела 3—4 мм. Спинной щиток (рис. 265,5) имеет треугольную форму и лишен пунктировки. На нем видны длинные, спускающиеся кзади цервикальные бороздки. Глаза небольшие. Переднебоковые края спинного щитка образуют крупные скапулы. Аллоскутум покрыт светлыми волосками. Шестиугольное основание хоботка несет
404
два крупных, удлиненно-овальных поровых поля. Пальпы короткие, с ребристыми спинными и боковыми сторонами.
С брюшной стороны под большим увеличением бинокуляра можно видеть четыре продольных ряда мелких зубцов на каждой половине
Рис. 265. Boophllus calcaratus со спинной стороны.
А —самец, Б —самка, 7 —коксы.
гипостома. Все коксы несут по одному мелкому внешнему зубцу. У вершины лапок находят небольшой зубец. Половое отверстие лежит на уровне кокс II. Анальная бороздка, как у самца, не выражена. Перитремы округлые, без спинного отростка.
405
Dermacentor pictus Herm.
Распространен от западных границ СССР до Красноярского края, а также в Крыму, на Кавказе, в восточном Казахстане, Киргизии и западном Алтае. Живет на лугах в зоне смешанных и лиственных лесов. Треххозяйный вид. Взрослые клещи паразитируют в марте — июне и в конце августа на крупных домашних и диких млекопитающих. Личинки и нимфы паразитируют летом на мелких животных — грызунах, хищных, насекомоядных. Взрослые клещи нападают и на человека. Dermacentor pictus является переносчиком возбудителей пироплазмоза и нут-таллиоза лошадей, пироплазмоза собак. Передает вирус инфекционного энцефаломиелита лошадей, вирус геморрагической лихорадки, возбудителя клещевой сыпнотифозной лихорадки в Алтайском крае. Имеет значение в распространении туляремии в природных очагах этой болезни. В условиях эксперимента длительно сохраняет вирус японского энцефалита и передает его через укус восприимчивым животным.
Самец. Тело овальное (рис. 266,А), суженное кпереди. Длина около 6 мм, ширина — 3—4 мм. Обращают внимание на окраску спинного щитка, которая является весьма характерной для представителей Dermacentor, На спинном щитке находят интенсивно развитый светлый эмалевый пигмент в виде узора и располагающиеся симметрично крупные бурые пятна. Цервикальные бороздки короткие, глубокие. Латеральные бороздки длинные, доходящие до краевых фестонов. Пунктировка спинного щитка двойная: мелкая густая и крупная редкая. По заднему краю тела четко выражены фестоны. Глаза представляют собой плоские беловатые пятнышки. Рассматривают хоботок: он короткий, с квадратным основанием. От заднебоковых углов основания хоботка отходят мощные зубцы — спинные корнуа. Пальпы широкие, выдаются вбок за основание хоботка. Второй членик пальп больше третьего, несет мощный шип, направленный вершиной назад.
Осматривают брюшную поверхность клеща. Находят мелкий четвертый членик пальп, небольшой зубец на третьем членике и инфраинтер-нальные щетинки, отходящие от второго и третьего члеников. Каждая половина гипостома несет по три продольных ряда мелких зубцов. Коксы I снабжены длинным внешним шипом, который значительно уже основной части коксы и короче ее; остальные коксы с небольшим зубцом. Бросается в глаза необычайное развитие кокс IV, что является общим характерным признаком самцов Dermacentor. На вертлуге I со спинной стороны имеется мелкий треугольный зубец, вертлуги II и III с брюшной стороны снабжены мелкими зубчиками. Присоски на лапках развиты хорошо, достигают половины длины коготков. На боках тела, на уровне задней половины кокс IV, находят по овальной перитреме с широким отростком, загнутым на спинную сторону. Половое отверстие в виде узкой поперечной щели, расположенной на уровне кокс II, спереди огибается половой бороздкой. Анальное отверстие лежит у заднего края тела и окружено сзади анальной бороздкой.
Самка. Тело (рис. 266, Б) продолговато-овальное, суженное кпереди. Длина—до 8 мм, ширина — 4—5 мм. Спинной щиток овальный, почти сплошь покрыт светлым эмалевым пигментом. Цервикальные бороздки узкие, глубокие. На спинном щитке видна двойная пунктировка — мелкая густая и крупная редкая. По заднему краю тела выражены 11 фестонов. Хоботок относительно короткий; рассматривая его основание, замечают, что оно имеет вид прямоугольника, ширина которого в два раза превосходит длину. Поровые поля круглые, крупные. От заднебоковых углов основания хоботка отходит по зубцу. Пальпы 406
угловатые, широкие, прикрывающие в сложенном виде футляры хелицер. Первый членик пальп узкий и короткий, второй — крупный, снабжен-
Рис. 266. Dermacentor pictus со спинной стороны. А — самец, Б —самка.
ный каудально направленным зубцом, третий членик короткий. Обращают внимание на вертлуги I, несущие со спинной стороны по длинному коническому зубцу.
407
При рассматривании брюшной стороны находят небольшой цилиндрический четвертый членик пальп, сидящий в углублении третьего. Под большим увеличением хорошо видны три продольных ряда зубцов на каждой половине гипостома; вершина последнего, усаженная мелкими зубчиками, носит название короны. На внутреннем крае брюшной
Рис. 267. Строение отдельных органов клещей Dermacentor.
Dermacentor nuttalli, самец: / — хоботок сверху, 2—перитрема, 5—вертлуг; самка: 4 — хоботок сверху, 5 —половое отверстие, 6 — перитрема, Dermacentor marginatas, самка: 7 —хоботок сверху, 5 —половое отверстие, 9 — перитрема. Dermatentor silvaram, самка: 10 — хоботок сверху, 11 — половое отверстие, Г> — перитрема. Dermacentor pictus, самка: 13 — половое отверстие, 14 — перитрема. (По Б. И. Померанцеву с изменениями).
стороны пальп видны редкие инфраинтернальные щетинки. Коксы I длинные, снабжены мощным внешним шипом, почти достигающим своей вершиной края основной части коксы. Остальные коксы вооружены небольшими шипами; шип на коксах IV более короткий и тупой, чем шипы на других коксах. Перитремы овальные, с коротким и широким спинным отростком (рис. 267,14). Половое отверстие лежит на уровне кокс II (рис. 267,13). Позади анального отверстия находится анальная бороздка.
408
Dermacentor nuttalli 01.
Распространен в степях Предбайкалья, Забайкалья, Минусинского и Красноярского края. Обнаружен в восточного Тибете, на северном Тянь-Шане и в Монголии. Треххозяйный вид. Взрослые клещи паразитируют в апреле — июне на лошадях, крупном рогатом скоте, верблюдах, овцах, собаках. Личинки и нимфы паразитируют в июне—августе на мышевидных грызунах, сусликах, хомяках и крысах. На человека нападают взрослые клещи. Dermacentor nuttalli является переносчиком возбудителей пироплазмоза и нутталлиоза лошадей, возбудителя клещевой сыпнотифозной лихорадки. В экспериментальных условиях может быть заражен вирусом клещевого энцефалита.
Самец. Форма и размеры тела приближаются к таковым Dermacentor pictus. Эмалевый пигмент расположен на спинке симметричными участками. Цервикальные бороздки напоминают небольшие луночки; боковые бороздки узкие, длинные. Пунктировка состоит из мелких и крупных точечных вдавлений, густо покрывающих спинной щиток. Фестоны выражены. Глаза лежат по краям передней части спинного щитка; они круглые и слегка выпуклые. Хоботок короткий с прямоугольным основанием, ширина которого больше длины. От задних углов основания хоботка отходят мелкие зубчики (рис. 267,7). Пальпы широкие. Спинной зубец на втором членике пальп мелкий, едва заметный.
Коксы I снабжены длинным внешним зубцом с тупой вершиной; зубец по длине равен внутренней части коксы. На вертлугах I—III с брюшной стороны развиты небольшие зубчики (рис. 267,5). Спинной зубец на вертлуге I мелкий. На голенях и предлапках IV имеются три пары брюшных зубцов. Обращают внимание на перитремы; они овальной формы, с узким коротким отростком, не доходящим до спинного щитка (рис. 267,2). Половое отверстие лежит на уровне кокс II, впереди его проходит половая бороздка. Анальное отверстие расположено ближе к заднему краю тела и огибается анальной бороздкой сзади.
Самка. Тело овальное, суженное кпереди. Спинной щиток овальный, почти сплошь покрыт эмалевым пигментом. Лишь в области цервикальных бороздок, сбоку от них у глаз и на задней трети срединного поля спинного щитка, имеются небольшие участки бурого цвета. Цервикальные бороздки короткие. Пунктировка спинного щитка мелкая густая и крупная, очень редкая. По краям спинного щитка спереди находят круглые, слегка выпуклые глаза. Основание хоботка прямоугольное, ширина его в два раза превышает длину. Корнуа выражены неясно. Поровые поля крупные, овальные. Пальпы широкие, но выдаются слегка вбок за основание хоботка (рис. 267,4). Со спинной стороны развит зубец на вертлуге I.
Рассматривают брюшную сторону самки. На каждой половине гипостома находят по три продольных ряда зубцов. Коксы I с длинным внешним шипом, достигающим вершины внутренней части коксы; коксы II—IV с небольшим шипом. Замечают, что внешний шип кокс IV короткий и тупой, вершина его не выходит за пределы заднего края коксы. Вертлуги I—III с небольшим брюшным зубчиком. Перитремы удлиненноовальной формы, снабжены коротким тупым спинным отростком (рис. 267,6). Половое отверстие лежит на уровне кокс II, имеет небольшие крыловидные придатки (рис. 267,5). Анальное отверстие окружено сзади анальной бороздкой.
Dermacentor marginatus Sulz.
Распространен на Украине, включая и Крымскую область, на Кавказе, в Закавказье, Нижнем Поволжье, республиках Средней Азии,
409
«южной и восточной Сибири. Живет на равнинных и горных степных и -лесостепных участках. Треххозяйный вид. Взрослые клещи паразитируют в марте—июне на рогатом скоте, верблюдах, волках, собаках, зайцах, ежах; могут нападать и на человека. Личинки и нимфы встречаются летом на насекомоядных, грызунах и мелких хищниках. Dermacentor marginatus является переносчиком кровепаразитов домашних животных. Переносит вирус энцефаломиелита лошадей, возбудителя клещевой сыпнотифозной лихорадки в ее природных очагах. Длительно сохраняет в своем теле возбудителей туляремии, чумы, бруцеллеза.
Самец. Тело овальное, суженное кпереди. Степень развития эмалевого пигмента заметно варьирует. В общем же пигмент выражен слабо, о чем свидетельствует наличие на спинном щитке больших темных пятен, расположенных симметрично. По заднему краю тела 11 четко обособленных фестонов. Цервикальные бороздки в виде небольших лунок. Боковые бороздки узкие, длинные, спереди доходят до границы передней и средней трети тела, а сзади сливаются с бороздкой, отделяющей первый фестон. Плоские глаза лежат по краям передней трети «спинного щитка. Последний покрыт мелкой и крупной пунктировкой. Хоботок короткий, с прямоугольным основанием, ширина которого несколько превышает длину. От задних углов основания хоботка отходят тонкие, узкие зубчики. Пальпы широкие, прикрывающие в сложенном виде футляры хелицер; боковые края пальп округлены. На втором членике спинной стороны пальп имеется мелкий зубец.
Рассматривают брюшную поверхность самца. Находят ряды зубцов на гипостоме. Четвертый членик пальп небольшой, цилиндрической формы. Все коксы снабжены внешним шипом. На коксах I этот шип .длинный, но вершина его не выходит за пределы основной части коксы. Шип на коксах II—IV мелкий. Спинная сторона вертлуга I с зубцом. На брюшной стороне вертлугов II—III при внимательном рассматривании можно видеть небольшие зубчики. Половое отверстие находится на уровне кокс II. Коксы IV крупные, по бокам их видны овальные пери-тремы с длинным и широким спинным отростком. Вокруг перитрем — ободок хитина, который образует заметное спинное утолщение. Анальное отверстие огибается бороздкой сзади.
Самка. Тело крупное, овальное, суженное кпереди. Спинной щиток сердцевидной формы. Эмалевый пигмент выражен относительно слабо. Цервикальные бороздки короткие, глубокие. Краевые бороздки узкие, длинные, лежат на мягком хитине, доходят спереди до заднебокового края щитка, сзади же сливаются с бороздкой между вторым и третьим фестонами. Глаза плоские. Пунктировка спинного щитка мелкая густая и крупная редкая. Хоботок короткий, с прямоугольным основанием, ширина которого в два раза превышает длину. От задних углов основания хоботка отходит по широкому, короткому спинному зубцу (спинные корнуа). Пальпы широкие, без зубцов, прикрывающие сверху футляры хелицер. Поровые поля овальные, расходящиеся кпереди (рис. 267,7).
Рассматривая брюшную поверхность тела, находят по три продольных ряда зубцов на каждой половине гипостома, мелкий четвертый членик пальп, шипы на коксах. Обращают внимание на коксы I, снабженные длинным внешним шипом, не достигающим, однако, внутренней части коксы. Остальные коксы несут небольшой внешний зубец. На спинной стороне вертлуга I находится тупой зубец, на вертлугах II—III — по мелкому зубцу. Половое отверстие окружено спереди половой бороздкой, расположено на уровне кокс II, снабжено с боков двумя сходящимися сзади под углом полулунными хитиновыми выступами — крыло-видными придатками (рис. 267,5). Перитремы продолговато-овальные,
410
с коротким, заостренным на конце спинным отростком, загнутым дорзально (рис. 267,9). Каемка из плотного хитина, обрамляющая пери-трему, снабжена спинным утолщением, которое находят при рассматривании клеща с боков. Анальное отверстие огибается сзади анальной бороздкой.
Dermacentor silvarum 01.
Распространен в Приморском крае, Приамурье, восточном Забайкалье, на западном берегу о. Байкал, в Кемеровской области и на Алтае. Треххозяйный вид. Взрослые клещи паразитируют с марта по июль на крупном рогатом скоте, овцах, лошадях, собаках, средних и крупных диких млекопитающих; они нападают и на человека. Личинки и нимфы встречаются летом и осенью на мелких млекопитающих. Известны находки взрослых клещей, зимующих на скоте в прикрепленном состоянии. Dermacentor silvarum является переносчиком возбудителей пироплазмоза и нутталлиоза домашних животных и вируса энцефаломиелита лошадей. Переносит вирус клещевого энцефалита и возбудителя эндемичной клещевой сыпнотифозной лихорадки.
Самец. Тело овальное, суженное кпереди. Эмалевый пигмент концентрируется преимущественно в передней трети спинного щитка. Цервикальные бороздки в виде неглубоких лунок. Боковые бороздки длинные, поверхностные. Пунктировка глубокая, распределяющаяся равномерно по спинному щитку. Фестонов 11. Глаза плоские, овальные. Основание хоботка прямоугольное, ширина его немного больше длины. От задних углов основания хоботка отходят небольшие тупые зубцы. Пальпы с боков округлены, второй членик их несет мелкий спинной зубчик. На вертлуге I со спинной стороны находится заостренный зубец. На брюшной поверхности гипостома под большим увеличением видны продольные ряды зубцов. Четвертый членик пальп небольшой, цилиндрический, сидит в углублении на брюшной поверхности третьего членика. Коксы I с крупным внешним зубцом, едва не достигающим своей вершиной вершины внутренней части коксы. Коксы II—IV снабжены небольшим зубцом. На брюшной поверхности вертлугов I—III мелкие зубчики. Бедра и голени IV имеют по три парных ряда небольших зубцов. Половое отверстие расположено на уровне кокс II. Перитремы с широким спинным отростком; хитиновый ободок вокруг них равномерной толщины. Анальное отверстие огибается сзади анальной бороздкой.
Самка. Тело овальное, суженное в передней трети. Длина до 8 мм. Спинной щиток сзади округлен, длина его равна ширине. Белый эмалевый пигмент выражен слабо. Цервикальные бороздки в виде небольших углублений. Краевые бороздки узкие, длинные, доходящие до фестонов, которые четко обозначены по заднему краю тела. Пунктировка спинного щитка мелкая, равномерная. Глаза плоские. Основание хоботка прямоугольное; его ширина почти в два раза превосходит длину. Спинные корнуа в виде тупых зубцов. Поровые поля овальные. Пальпы широкие, с округленными боковыми краями (рис. 267,70).
С брюшной стороны гипостом несет по три продольных ряда зубцов на каждой половине. Коксы I снабжены длинным внешним шипом, вершина которого доходит до вершины основной части коксы; остальные коксы несут по небольшому зубцу. На вертлуге I со спинной стороны имеется зубец. Небольшие зубчики есть на брюшной поверхности вертлугов II—III. Половое отверстие с небольшими крыловидными придатками (рис. 267,11). На боках тела, позади кокс IV, расположены перитремы овальной формы. Отросток перитрем короткий, тупой, загнутый на спинную сторону. Хитиновый ободок вокруг них не образует заметного
411
спинного утолщения (рис. 267, 12). Анальное отверстие расположено ближе к заднему краю тела; анальная бороздка находится позади отверстия.
Rhipicephalus bursa Сап. et Fanz.
Распространен на территории Нижнего, Поволжья, в Крымской области, на Кавказе, в Закавказье, Туркмении. Взрослые клещи паразитируют на рогатом скоте, лошадях, некоторых диких млекопитающих весной и летом. Личинки и нимфы встречаются на тех же животных осенью. Типичный двуххозяйный вид: личинки и нимфы питаются на одном и том же хозяине, взрослые — на другом. Rhipicephalus bursa — переносчик многих видов кровепаразитов домашних животных и риккет-сиоза овец. При экспериментальном заражении сохраняет около двух недель вирусы японского и клещевого энцефалитов. Имеет значение как переносчик бруцеллеза.
Самец. Тело (рис. 268) широко-овальное, слабо сужено кпереди. Длина около 4 мм, ширина — 2 мм. Цвет темно-коричневый. Спинной щиток покрыт густой равномерной пунктировкой. Цервикальные бороздки в своей передней части глубокие; спускаясь же назад, они несколько расходятся в стороны, приобретают характер мелких вдавлений и теряются у глаз. Боковые бороздки узкие, глубокие, идут кзади от глаз и сливаются с углублением между первым и вторым фестонами. Обращают внимание на заднесрединную и заднебоковые бороздки. Заднесрединная бороздка тянется вдоль задней трети спинного щитка по средней его линии, заднебоковые бороздки имеют вид удлиненных вдавлений, расположенных по одному в стороны от заднесрединной бороздки. Глаза находятся по краям спинного щитка спереди; они небольшие, круглые, слегка выпуклые. Задний край тела с четко обособленными фестонами. Хоботок короткий, с шестиугольным основанием и отходящими от его задних углов спинными зубцами. Пальпы широкие, третьи членики их впереди плотно прилегают друг к другу.
Рассматривают строение самца с брюшной стороны. Находят у внутреннего края пальп инфраинтернальные щетинки. Последние очень редкие: 3—5 щетинок на первом членике и 3—4 — на втором. Каждая из двух сросшихся половинок гипостома несет по три продольных ряда зубцов; число крупных зубцов в ряду равно 8. Коксы I снабжены длинным внешним шипом со слегка отогнутой наружу вершиной. Остальные коксы с небольшими тупыми зубцами. Вертлуги I имеют по широкому треугольному спинному зубцу. Половое отверстие отыскивают на уровне кокс II. Перитремы овально-удлиненные, с узким длинным отростком, загнутым к спинной стороне (рис. 269,2). Анальное отверстие огибается сзади анальной бороздкой. Имеются две пары брюшных щитков. Первая пара — крупные аданальные щитки — расположена по бокам от анального отверстия (рис. 269, /), каждый из этих щитков напоминает неправильный, суженный кпереди треугольник с округленными заднебоковыми краями; на внутренней стороне щитка имеется небольшой шип. Вторая пара — мелкие, заостренные кзади добавочные щитки, лежащие кнаружи от аданальных щитков.
Самка. Тело (рис. 268, Б) овальное, суженное кпереди. Длина около 4,5 мм, ширина — 2,5 мм. Спинной щиток широкий; задний его контур округлен. Окраска темно-коричневая. При рассматривании сверху бросается в глаза густая пунктировка, равномерно покрывающая спинной щиток. Цервикальные бороздки глубокие, боковые бороздки не выражены. По краям аллоскутума идут глубокие краевые бороздки. Задний край тела подразделен на фестоны. Глаза имеют вид желтоватых, 412
Рис. 268. Rhiplcephalus bursa co спинной стороны. Д —самец, £ —самка.
овальных пятнышек. Хоботок короткий; его широкое основание имеет шестиугольную форму, с ясно выраженными боковыми углами. От заднебоковых углов основания хоботка отходят зубцы. Поровые поля крупные, овальные, расходящиеся кпереди. Пальпы широкие, в сложенном виде прикрывают сверху хоботок. Размеры члеников пальп неодинаковы: первый членик небольшой, мало заметный со спинной стороны, второй и третий членики крупные, усаженные редкими волосками. Четвертый членик виден лишь с брюшной стороны.
Рис. 269. Строение отдельных органов клещей Rhlpicephalus.
Rhlpicephalus bursat / — брюшные щитки самца, 2— перитрема самца, 3 — перитрема самки; Rhlpicephalus sanguineus-. 4— брюшные щитки самца, 5 — перитрема самца, б —перитрема самки; Rhipicephalus rossicus: 7 —брюшные щитки самца, 8 — перитрема самца, 9 — перитрема самки, (По Г В. Сердюковой).
Рассматривая брюшную сторону самки, обращают внимание на редкие инфраинтернальные щетинки. Количество их на первом членике пальп равно 4—5, на втором — 3—4. Эти щетинки находятся друг от друга на расстоянии, превышающем их диаметр, и оперены у вершины. Гипостом несет по три продольных ряда зубцов на каждой половине. Коксы I имеют длинный внешний шип, вершина которого лежит на уровне внутренней части коксы. Коксы II—IV несут по небольшому тупому шипу. На спинной стороне вертлуга I развит треугольный шип. Лапки снабжены парой коготков и удлиненной присоской. Половое отверстие лежит на уровне кокс II и окружено спереди половой бороздкой, которая идет кзади; концы ее, расходясь в стороны, сливаются с выемкой между третьим и четвертым фестонами. На боках тела, позади кокс IV, находят широкие овальные перитремы с коротким узким отростком, загнутым на спинную сторону (рис. 269,5).
Rhipicephalus sanguineus Latr.
Распространен в Крыму, Закавказье и на востоке до Красноводска. Треххозяйный вид. Взрослые клещи паразитируют с марта по сентябрь на собаках и других домашних животных. Личинки и нимфы встречаются летом на собаках. Весь цикл развития может проходить в хозяйственных строениях, собачьих конурах и дворах. Rhipicephalus sanguineus является переносчиком пироплазмоза, трипанозомоза, лейшманиоза и других заболеваний собак. Передает спирохетоз человека в Испании и Африке, а также возбудителей марсельской сыпнотифозной лихорадки. Может сохранять вирус бешенства собак, возбудителя туляремии, вирус клещевого энцефалита.
414
Самец. Тело (рис. 270, Л) продолговато-овальное, суженное кпереди. Длина до 4,5 мм, ширина — 2,3 мм. Окраска темно-коричневая. Цервикальные бороздки напоминают небольшие луночки. Позади глаз начинаются глубокие боковые бороздки, которые идут по краям тела назад и отделяют там по два фестона. Спинной щиток покрыт мелкой, относительно густой, равномерной пунктировкой; на фоне последней отмечается крупная редкая пунктировка, располагающаяся поперечными рядами. Глаза овальные, слегка выпуклые, лежат по краям передней трети спинного щитка. Хоботок короткий, основание его шестиугольной формы, с выступающими боковыми углами и спинными корнуа. Пальпы широкие, усажены, как у других иксодовых клещей, редкими волосками.. Рассматривают задний край тела. Находят длинную широкую заднесрединную бороздку и заднебоковые бороздки в виде овальных вдавлений.
С брюшной стороны видны все четыре членика пальп и ряды продольных зубцов на гипостоме. Инфраинтернальные щетинки пальп густые, с перистой вершиной. На первом членике пальп имеется 8—10 щетинок, на втором — 5—7. Коксы I снабжены длинным внешним шипом, который бывает короче основной части коксы; коксы II—IV с коротким тупым зубцом. Половое отверстие лежит на уровне кокс II, прикрыто тонкой хитиновой пластинкой (апроном), отходящей от его переднего края. Спереди половое отверстие окружено половой бороздкой, концы которой направлены назад. Позади кокс IV на боках тела находят за-пятовидные перитремы с длинным отростком, суженным к спинной стороне (рис. 269,5). У анального отверстия, огибаемого сзади анальной бороздкой, рассматривают брюшные щитки; их две пары (рис. 269,4). Лданальные щитки крупные, треугольные, с округленным задним краем и выемкой на внутреннем крае; длина их в 272—3 раза превышает ширину. Добавочные (акцессориальные) щитки мелкие, заостренные' кзади. Обращают внимание на средний фестон — каудальный отросток. С брюшной стороны он имеет трапециевидную форму, у питавшихся самцов выпячивается кзади.
Самка. Тело (рис. 270, Б) удлиненно-овальное, слегка суженное-кпереди. Длина около 4 мм, ширина — 2 мм. Окраска темно-коричневая. Длина спинного щитка больше ширины, задний его контур волнистый. Цервикальные бороздки в виде глубоких вдавлений, боковые — длинные,, доходящие до заднего края щитка. Краевые бороздки узкие, длинные. Пунктировка спинного щитка двойная: мелкая, редкая, равномерная и крупная, очень редкая, расположенная рядами. Глаза светлые, плоские. Хоботок короткий, основание его широкое, шестиугольное, со спинными корнуа. Поровые поля небольшие, круглые. Пальпы широкие, усажены редкими волосками. Аллоскутум имеет продольные морщинистые складки п несет редкие волоски. По заднему краю тела четко выражены II фестонов.
При изучении особенностей строения брюшной поверхности рассматривают инфраинтернальные щетинки; они густые, плотно прилегают друг к другу. На первом членике пальп имеется 9—И таких щетинок, на втором — 8—10. Концы большинства щетинок оперены, что можно видеть под большим увеличением. Гипостом несет три продольных ряда зубцов на каждой половине.
Коксы I снабжены длинным внешним шипом, который равен или несколько короле основной части коксы. Остальные коксы с тупым треугольным зубцом. На лапках II—IV у вершины острый зубец. Половое отверстие лежит на уровне кокс II, огибается спереди половой бороздкой. Перитремы овальные, с относительно узким спинным отростком (рис. 269,5). Анальное отверстие окружено сзади анальной бороздкой.
415
Rhipicephalus rossicus Jack, et Kohl-Jack.
Распространен на Украине, в Нижнем Поволжье, Дагестане, на Северном Кавказе, в республиках Закавказья, Казахстане и Туркмении. Типичный треххозяйный вид. Взрослые клещи паразитируют на крупном рогатом скоте, лошадях, ежах, хомяках, зайцах с апреля по сентябрь. Нападают и на человека. Личинки и нимфы паразитируют на различных мелких грызунах. Развитие одной генерации в природе может быть растянуто до 2—3 лет. Rhipicephalus rossicus является переносчиком возбудителя туляремии в природных очагах этой болезни.
Самец. Обращают внимание на спинной щиток, который имеет продолговато овальную форму, расширен кзади и окрашен в темно-коричневые тона. Щиток несет двойную пунктировку: крупную редкую и мелкую густую. Цервикальные бороздки в виде небольших ямок. Глаза краевые, плоские. Фестонов И.
С брюшной стороны находят широкие аданальные щитки с небольшим бугорком по внутреннему краю. Добавочные щитки мелкие (рис. 269,7). Перитремы овальной формы; их спинной отросток значительной ширины (рис. 269,5). Половое отверстие лежит на уровне кокс II, анальное — ближе к заднему краю тела. Инфраинтернальные щетинки пальп мощные, густые. В каждом продольном ряде гипостома имеется по 8 зубцов.
Самка. Тело овальное. Спинной щиток широкий, округлый по заднему краю. Пунктировка мелкая. Цервикальные бороздки хорошо выражены, имеют вид вдавлений и тянутся кзади за середину щитка. Боковые бороздки обычно не развиты. Глаза плоские. Перитремы овальные, с широким тупым спинным отростком (рис. 269,9).
Hyalomma plumbeum Panz. (Hyalomma marginatum Koch)
Распространен на юге Украины, включая и Крымскую область, на Кавказе, в республиках Средней Азии. Двуххозяйный вид. Взрослые клещи паразитируют в течение всего теплого сезона года на многих видах домашних животных, на зайцах, куропатках, сычах. Личинки и нимфы паразитируют на одном и том же хозяине: зайцах, диких и домашних птицах. В СССР отмечено три подвида: Hyalomma plumbeum plumbeum Panz., Hyalomma plumbeum turanicum Pom., Hyalomma plumbeum impressum Koch. Первый из этих подвидов отличается более широким ареалом, является переносчиком кровепаразитов лошадей, вируса геморрагической лихорадки, способен сохранять в течение нескольких месяцев возбудителя бруцеллеза. Ниже приводится описание самца и самки Hyalomma plumbeum plumbeum.
Самец. Тело (рис. 271, Л) овальное, суженное кпереди. Длина около 6 мм, ширина — 3 мм. Окраска бурая или темно-коричневая. Пунктировка мелкая, густая, равномерная. Кроме пунктировки этого типа на переднебоковых краях спинного щитка имеются крупноточечные вдавления. Цервикальные бороздки неглубокие, заканчивающиеся позади глаз. Боковые бороздки узкие, длинные. В задней трети спинного щитка поверхностная заднесрединная бороздка, обычно не доходящая до среднего фестона, и две неглубокие заднебоковые бороздки. Задний край тела с 11 фестонами; из них средний фестон значительно уже соседних с ним фестонов. Глаза небольшие, сферические, лежат в углублениях по краям передней части спинного щитка. Хоботок относительно длинный, основание его более или менее прямоугольной формы. Пальпы широкие.
27 Зак. 3420. Лабораторный практикум медицинской паразитологии
417
Рис. 271. Hyalomma plumbeum co спинной стороны.
А — самец, Б— самка.
Рассматривают самца с брюшной стороны. Внутренний край первого и второго члеников пальп снабжен длинными щетинками. Гипостом вооружен продольными рядами зубцов. Коксы I несут длинный внешний шип, остальные коксы с коротким шипом. Ноги коричневого цвета, со светлым пигментом у сочленений. Половое отверстие находится на уровне кокс II, прикрыто тонкой хитиновой пластинкой — клапаном. Половая бороздка глубокая, длинная. Находят анальное отверстие, бо-роздку, расположенную позади него, и три пары брюшных щитков. Наиболее крупные аданальные щитки; они широкие, нередко несут на внутренней стороне отросток. Добавочные щитки значительных размеров, лежат по бокам аданальных, напоминают по форме овальные пластинки. Третья пара более мелких щитков, называемых субанальными, расположена позади аданальных. Размеры и форма субанальных щитков варьируют, наиболее часто они имеют вид широких зубцов, направленных каудально. Перитремы видны на боках тела позади кокс IV; они1 крупные, снабжены широким и длинным спинным отростком.
Самка. Тело (рис. 271, Б) широко овальное, несколько суженное кпереди. Длина до 7 мм, ширина 3,6 мм. Спинной щиток широкий, с задним контуром в виде ломанной линии. Окраска бурая. Пунктировка спинного щитка густая, равномерная. Цервикальные бороздки хорошо выражены. Глаза круглые, выпуклые, лежат в орбитах по краям широкой части спинного щитка. Позади глаз спинной щиток имеет выемку. На аллоскутуме рассеяны редкие светлые волоски. Краевые бороздки) длинные, глубокие. Задний конец тела с фестонами.
Хоботок длинный, его основание без боковых выступов, приближается по форме к прямоугольнику. Посередине основания хоботка находится продольный выступ — срединный гребень. Поровые поля овальной формы. Пальпы широкие; при отведении их в стороны можно видеть футляры и пальпы хелицер.
Рассматривают брюшную сторону тела. Находят четвертый членик пальп, сидящий в углублении на брюшной стороне третьего членика. Внутренняя поверхность первого членика пальп снабжена тонкой пластинкой со щетинками. Каждая из сросшихся половин гипостома несет по три ряда продольных зубцов. Коксы I имеют длинный внешний шип, достигающий своей вершиной края внутренней части коксы. Коксы II—ПГ с небольшим тупым зубцом. Зубец на коксах IV не всегда четко выражен. В местах соединения члеников ног развит светлый пигмент. Лапки несут по паре коготков и присоску небольших размеров. Половое отверстие — на уровне кокс II, спереди его огибает половая бороздка, концы которой идут далеко назад. Перитремы крупные, с широким коротким отростком. Анальное отверстие окружено сзади анальной бороздкой.
Hyalomma anatolicum Koch
Распространен в Закавказье, Дагестане и республиках Средней Азии. Треххозяйный вид. Взрослые клещи паразитируют с марта по ноябрь на домашних животных и на диких млекопитающих, нападают и на человека. Личинки и нимфы встречаются летом и в начале осени на рогатом скоте. Hyalomma anatolicum является переносчиком кровепара-зитов домашних животных, передает вирус инфекционного энцефаломиелита лошадей, геморрагической лихорадки и риккетсиоза.
Самец. Тело (рис. 272, А) удлиненно-овальное. Длина до 6 мм, ширина — 4,5 мм. Окраска коричневая или темно-бурая. Спинной щиток покрыт редкой пунктировкой. Цервикальные бороздки длинные. Заднесрединная бороздка выражена, но не достигает среднего фестона.
27*	419-
Рис. 272. Hyalomma anatollcum co спинной стороны.
А — самец, Б — <амка.
Последний бывает окрашен в более светлые тона, чем соседние с ним фестоны, и окружен спереди бороздкой; в этом случае средний фестон носит название пармы. По бокам от заднесрединной бороздки имеются заднебоковые бороздки. Часть спинного щитка, ограниченная заднебоковыми бороздками, называется каудальным полем. Это поле покрыто мелкой густой пунктировкой. Основание хоботка со спинной стороны прямоугольное, с вогнутым задним краем. Пальпы усажены волосками, прикрывают с боков и частично сверху хелицеры.
Переходят к изучению брюшной поверхности тела. Находят на брюшной стороне гипостома продольные ряды зубцов. Хорошо заметен четвертый членик пальп. Коксы I снабжены длинным внешним шипом с отогнутой кнаружи вершиной. Коксы остальных ног несут по короткому тупому зубцу. В местах соединения члеников ног полоски светлого пигмента. Половое отверстие расположено на уровне кокс II, прикрыто сверху широкой хитиновой пластинкой — клапаном. Половая бороздка, огибая половое отверстие, спереди идет своими концами далеко назад. У анального отверстия, окруженного сзади анальной бороздкой, развиты три пары брюшных щитков. Наиболее крупные из них аданальные; они длинные, суженные кзади, несут по короткому внутреннему отростку^ Добавочные щитки небольшие, лежат по бокам аданальных щитков. Наиболее мелкие субанальные щитки находятся под аданальными, напоминая по форме широкие зубцы. Перитремы крупные, с длинным отростком, который загнут кверху и достигает края спинного щитка.
Самка. Тело (рис. 272, Б) овально-удлиненное. Длина до 6 мм, ширина — 3 мм. Окраска коричневая или бурая. Спинной щиток вытянут в длину, приближается к ромбической форме. Цервикальные бороздки длинные, но не глубокие. У крупных экземпляров хорошо заметны боковые бороздки. Пунктировка мелкая редкая и крупная, также редкая, располагающаяся рядами на боковых полях и срединном поле спинного щитка. Хоботок длинный, основание его прямоугольное, несколько расширенное кзади, с слегка вогнутым задним краем. Поровые поля овальные, расходящиеся кверху. Задний край тела с фестонами.
С брюшной стороны видны все четыре членика пальп. Гипостом несет продольные ряды зубцов.
Коксы I снабжены длинным внешним зубцом, вершина которого равна или несколько короче основной части коксы. Остальные коксы с тупыми зубцами. Ноги коричневых оттенков, со светло пигментированными полосками в местах соединения члеников. Присоски на лапках круглые, не достигают вершины коготков. Отыскивают половое и анальное отверстия; последнее окружено сзади анальной бороздкой. Перитремы крупные, овальные, с относительно длинным и узким спинным отростком.
Hyalomma scupense Sch.
Распространен в Курской, Саратовской областях, Нижнем Поволжье, на Украине, Кавказе, в Казахстане и Таджикистане. Типичный однохозяйный вид. Взрослые клещи паразитируют преимущественно на рогатом скоте. Личинки и нимфы встречаются на домашних и диких животных. Hyalomma scupense имеет значение как переносчик крове-паразитов сельскохозяйственных животных. Может хранить возбудителя чумы в вирулентном состоянии до 11 дней. Обнаружено спонтанное заражение клеща возбудителем бруцеллеза.
Самец. Тело овальное, суженное кпереди. Длина около 5 мм, ширина — 3 мм. Окраска темно-коричневая. Цервикальные бороздки глубокие, короткие. Боковые бороздки выражены более или менее отчетливо
421
в задней трети спинного щитка. Пунктировка очень редкая, разбросанная. Глаза небольшие, выпуклые. Обращают внимание на задний край спинной поверхности тела. Находят хорошо заметную заднесрединную бороздку и отмечают, что она доходит до среднего фестона. Последний имеет вид пармы и отличается от соседних с ним фестонов большей шириной, светлой окраской, наличием спереди узкой бороздки. По бокам от заднесрединной бороздки находится по одной заднебоковой бороздке; каждая из них представлена в виде продольного морщинистого вдавления. Хоботок относительно длинный; его основание прямоугольной формы. Пальпы широкие.
С брюшной стороны рассматривают части хоботка, первые коксы, брюшные щитки, перитремы. Находят внешний шип кокс I, длина которого равна длине основной части коксы. Позади анального отверстия отыскивают анальную бороздку, пару широких аданальных щитков с небольшим внутренним отростком, пару добавочных щитков треугольной формы и пару мелких субанальных щитков, лежащих под аданальными. Позади кокс IV на боках тела лежат удлиненные перитремы с широким отростком, достигающим края спинного щитка. Половое отверстие огибается спереди половой бороздкой и прикрыто сверху клапаном. Ноги коричневые, без светло пигментированных полосок.
Самка. Тело овальное, суженное кпереди. Длина 4—5 мм, ширина 2—3 мм. Спинной щиток сзади округлен и нередко покрыт продольными морщинами. Окраска коричневая или бурая. Пунктировка слабая — редкая, поверхностная. Неглубокие цервикальные бороздки доходят до •середины спинного щитка. Боковые бороздки не выражены. Глаза крупные, выпуклые. Аллоскутум с продольными морщинами, бороздками и светлыми волосками. На заднем крае тела фестоны. Хоботок длинный, на прямоугольном его основании видны округлые поровые поля.
Находят с брюшной стороны продольные ряды зубцов на гипостоме. Рассматривают членики пальп, длинный внешний зубец кокс I, короткие и тупые зубцы кокс II—IV. Ноги одноцветные, коричневые. Присоски на лапках небольшие. Половое отверстие лежит на уровне кокс II. Перитремы овальные; отросток их короткий, широкий и загнут на спинную сторону почти под прямым углом. Анальное отверстие находится у заднего края тела и огибается сзади анальной бороздкой.
ЛИТЕРАТУРА
Бекер Э. и Г. Уартон. Введение в акарологию. Изд. и.—л., М., 1955.
Благовещенский Д. И. Биологические обоснования борьбы с иксодовыми клещами. Энтомол. обозр., т. XXXVI, в. 1, 1957.
Галузо И. Г. Кровососущие клещи Казахстана. Т. 1—4. Изд. АН Казах. ССР, 1946—1950.
б лен е в Н. О. Паразитические клещи Ixodoidea фауны СССР. Изд. АН СССР, 1931. Олсуфьев Н. Г. К экологии лугового клеща Dermacentor pectus Негт\ о происхождении его очагов и путях их ликвидации в средней полосе Европейской части РСФСР. Вопр. краев., общ. и эксп. паразитол. и мед. зоол., VIII, М., 1953.
Павловский Е. Н. Наставление к собиранию и исследованию клещей Ixodidae. Изд. АН СССР, 1928.
Павловский Е. Н. Клещи надсемейства Ixodoidea. В кн.: Практикум медицинской паразитологии. Медгиз, Л., 1935.
Павловский Е. Н. Иксодовые клещи Дальнего Востока. В кн.: Паразитология Дальнего Востока. Медгиз, Л., 1947.
Павловский Е. Н. Руководство по паразитологии человека. Т. 2. Изд. АН СССР, 1948.
Первомайский Г. С. Изменчивость пастбищных клещей (Acarina, Ixodidae) и значение ее для систематики. Тр. Всес. энтомол. об-ва, т. 44, изд. АН СССР, 1954.
Пионтковская С. П., Ж м а е в а 3. М., Коршунова О. С. Иксодовые клещи — переносчики риккетсиозов. Изд. АМН СССР, 1952.
422
Померанцев Б. И. К морфологии рода Rhipicephalus Koch в связи с построением натуральной классификации. Паразит, сборн. Зоол ин-та. АН СССР, т. 6, 1936. Померанцев Б. И. Иксодовые клещи (Ixodidae). Фауна СССР. Паукообразные, т. 2, в. 2, изд. АН СССР, 1950.
Поспелова-Штром М. В. Иксодовые клещи (семейство Ixodidae). В кн.: Учебник медицинской энтомологии (п/ред. В. Н. Беклемишева), Медгиз, М., 1949.
Сердюкова Г. В. Наставление для сбора иксодовых клещей в районах их северного распространения в СССР. Изд. АН СССР, 1952.
Сердюкова Г. В. К вопросу о дифференциальных признаках личинок и нимф иксодовых клещей (Ixodidae). Зоолог, журн., XXXIV (5), 1955.
Сердюкова Г. В. Семейство Ixodidae. В кн.: Клещи грызунов фауны СССР Изд. АН СССР, 1955.
Сердюкова Г. В. Иксодовые клещи фауны СССР. Определители по фауне СССР, изд. Зоол. ин-та АН СССР, 1956.
Стрелков А. А. Отряд Acarina — клещи. В кн.: Большой практикум по зоологии беспозвоночных, п/ред. Ю. И. Полянского, ч. 2, изд. Советская наука, 1946.
ГАМАЗОВЫЕ КЛЕЩИ —НАДСЕМЕЙСТВО OAMASOIDEA
Очень мелкие клещи (0,2—2,5 мм), входящие вместе с аргасовыми и иксодовыми клещами в отряд Parasitiformes. Надсемейство Gama-soidea объединяет свыше 20 семейств с многочисленными (около 300) родами и подродами.
СБОР МАТЕРИАЛА
Гамазовые клещи распространены повсюду — в холодных, умеренных и жарких странах. Сбор клещей можно производить в любое время года, но зимой добывать их труднее, и поэтому для занятий нужно приготовить материал заранее — в теплое время года.
Паразитических гамазовых клещей собирают на различных животных (на грызунах, птицах, летучих мышах, змеях, ящерицах и др.), а также в их гнездах, норах и убежищах. Некоторые виды живут не на теле хозяина, а в его внутренних органах (в носовой полости, в трахеях и в легких птиц, в лобных пазухах собаки, в ушах крупного рогатого скота), и обнаружить их можно только при вскрытии животного. С мелких млекопитающих (грызунов, насекомоядных) клещей собирают в лаборатории. Каждого зверька, попавшего в капкан или ловчую банку, убивают и кладут в отдельный мешочек из плотной белой материи; мешочек крепко завязывают. Покидая остывающий труп животного, многие клещи переходят с него на стенки мешочка; темные, довольно подвижные клещи хорошо заметны на белой ткани мешочка, так что сбор их не составляет больших затруднений.
Клещей, оставшихся на зверьке, собирают, вычесывая животное частым гребнем или зубной щеткой в белой эмалированной кювете. После вычесывания зверька для контроля тщательно осматривают, проводя пинцетом или препаровальной иглой против шерсти и обнажая кожу.
Свободноживущих гамазовых клещей можно собирать в самых различных местах: в лесной подстилке, во мху, в трухлявых пнях, под корой деревьев, в навозе, на различных растениях (где они поедают паутинных клещиков), на насекомых, в ульях, в муравейниках, в шмелиных гнездах, в гнездах и норах зверей и птиц, в пещерах. Из-за мелких размеров гамазовых клещей их бывает трудно обнаружить непосредственно в природе; поэтому обычно во время экскурсии собирают суб-
423
страт, в котором живут клещи, в плотный мешочек и вкладывают туда же временную этикетку с указанием места сбора, стации, даты. В лаборатории субстрат кладут в термоэклектор, где под действием яркого света, высокой температуры и высушивания клещи покидают субстрат и попадают в чашечку со спиртом, подставленную под воронку термо-эклектора. Таким же образом можно собирать клещей из гнезд грызунов, насекомоядных, птиц.
ХРАНЕНИЕ И ОБРАБОТКА МАТЕРИАЛА
Клещей хранят в отдельных небольших энтомологических плоскодонных пробирках с 70° спиртом, которые помещают в широкогорлые стеклянные банки емкостью 0,1—0,5 л и заливают 70° спиртом. Каждый сбор обязательно этикетируют (стр. 10). Таким образом клещей можно хранить в течение многих лет, но из свежесобранного материала получаются лучшие препараты.
Для определения клещей необходимо приготовить тотальные микроскопические препараты. Для изготовления постоянных препаратов применяют гуммиарабиковую смесь (24 г гуммиарабика насыпают в 40 мл дистиллированной воды, добавляют 16 мл чистого глицерина и 160 г хлоралгидрата). Темных клещей иногда предварительно мацерируют (выдерживают 10—12 часов в 10% растворе едкого кали или едкого натра). Препараты делают под бинокуляром. На предметное стекло наносят каплю гуммиарабиковой смеси, кладут одного или нескольких клещей, проверяют их положение под бинокуляром (часть клещей должна лежать на брюшной стороне, часть на спинной) и закрывают покровным стеклом. Готовые препараты помещают в термостат для просветления и подсушивания на срок от 2 дней до 2 недель при температуре около 60°. Каждый препарат обязательно этикетируется.
Можно также делать временные препараты: на предметное стекло наносят каплю молочной кислоты, кладут в нее клеща, вынутого из спирта, закрывают покровным стеклом и подогревают, проверяя под микроскопом степень просветления объекта. Использовав такой препарат, клеща снова кладут для хранения в пробирку со спиртом.
ИЗУЧЕНИЕ ПРЕПАРАТОВ
Ознакомление с наружным строением гамазовых клещей удобнее начинать с изучения взрослых клещей. Берутся готовые тотальные препараты клещей, заключенных в гуммиарабиковую смесь.
Взрослые клещи
Ornithonyssus bacoti Hirst — Крысиный клещ
В литературе известен также под следующими названиями: Leiog-nathus bacoti, Liponyssus bacoti, Macronyssus bacott и Bdellonyssus bacoti.
Самка. Для общего ознакомления с наружным строением гамазовых клещей возьмем препарат самки крысиного клеща.
Детали строения можно рассмотреть только под микроскопом. Вначале устанавливается малое увеличение (объектив 8 при окуляре 7 или 10), затем переводится на среднее увеличение (объектив 20 при том же окуляре). Зеркало микроскопа устанавливается так, чтобы 424
часть на спинной. В ряде случаев, если
Рис. 273. Брюшная поверхность самки гамазового-клеща (схема).
7—хелицера, 2 —педипальпа, <?—гнатосома, 4 —тритостер-нум, 5 — перитрема, 6 — предгрудной щиток, 7 —грудной щит, 8 — межкоксальный щиток, 9 — промежуточный щиток, 10 — перитремальный щиток, 11 — дыхальце, /2 —прикоксаль-ный щиток, 13 — генитальный щит, 14 — боковой брюшной щит, 1S— брюшной, или вентральный, щит, 16 — анальный щит, 17 — тазик, 18— вертлуг, 19— бедро, 20— колено, 21 — голень, 22 —лапка, 23 — предлапка.
объект был виден при проходящем свете. Следует пользоваться диафрагмой: изменяя степень освещения, удается разглядеть многие детали строения. Для определения клеща нужно рассмотреть его и со спинной (дорзальной) и с брюшной (вентральной) стороны. Поэтому в препарате должны быть клещи различно ориентированные: часть клещей должна лежать на брюшной стороне, клещ хорошо просветлен, вращая микрометрический винт, удается рассмотреть сначала спинную, затем брюшную сторону.
Тело крысиного клеша, как и всех гамазовых клещей, отчетливо разделено на 2 неравные части: на собственно тело — идиосому — и комплекс ротовых частей — гнатосому (рис. 273). Гнатосома несет две первые пары конечностей — хелицеры и педипальпы, или ного-щупальцы, идиосома несет 4 пары ходильных конечностей — ноги.
Гнатосому (рис. 274) нужно рассматривать . при помощи объектива 40. Основание гнатосомы (гнатоба-за) подвижно сочленено с идиосомой. Гнатобаза образована слившимися основными члениками (коксами) педипальп. Она имеет вид трубки, которая с дорзальной стороны впереди вытянута в треугольную пластинку— тектум (или как его раньше называли — эпистом) с небольшими зубчиками на вершине. Форма тектума очень различна у клещей разных семейств и родов. С брюшной стороны
(рис. 274,5) гнатобаза разделена продольным серединным желобком с крошечными зубчиками, направленными вперед. В этот желобок вкладываются щетинки тритостернума — вильчатого придатка, прикрепленного между передними ногами у основания гнатосомы, и поэтому зубчики не всегда видны. К переднебоковым краям гнатобазы причленены подвижные пятичлениковые педипальпы (II пара конечностей), снабженные многочисленными осязательными щетинками; на вершине первого членика с внутренней стороны есть конусовидный выступ; у основания последнего (вершинного) членика имеется видоизмененная двувильчатая щетинка.
Между педипальпами находится ротовой конус; дорзальная часть его образована тектумом, вентральная часть — максиллярными лопастями,
42&
несущими впереди 2 пары выростов — наружные (корникулы) и перепончатые внутренние. Между этими выростами и несколько выше виден непарный гипостом с вершиной, раздвоенной на 2 ветви, или ла-цинии. При вращении микрометрического винта и рассматривании глубже лежащих частей виден конусовидный зубчатый выступ — губа. Между губой и тектумом находятся хелицеры (первая пара конечностей), которые могут быть втянуты внутрь тела или сильно выдвинуты
Рис. 274. Гнатосома самки Ornithonyssus bacotl.
Д —спинная, Б—брюшная сторона.
/ — хелицера, 2 —тектум, 3 — стилеты, 4 —губа, 5 —кокса педипальпы, 6 — корникулы, 7—гипостом, мак иллярная лопасть, 9 — желобок гнатобазы. Большое увеличение. (По Е. Н. Нель-зиной).
вперед. Трехчлениковые хелицеры состоят из двух вытянутых цилиндрических члеников и клешни. Клешня образована неподвижным и подвижным пальцами, лишенными зубчиков по внутреннему краю. По бокам и непосредственно под хелицерами расположена пара длинных узких слюнных стилетов. Не на каждом препарате удается подробно рассмотреть все детали строения гнатосомы.
Тело овальное, при кровососании сильно раздувается. На эластичных кожных покровах есть несколько уплотненных участков — щитов. На спинной стороне имеется один длинный щит, постепенно сужающийся спереди назад (рис. 275, Д); на щите 18 пар щетинок (2 пары лобных— Т7! и F3, 2 пары внутренних височных — 7\ и Т2, лопаточные — Sc, 8 пар спинных — D} — D&, 4 пары предкраевых S2, S3, S7 и S8, 1 пара краевых Д4ц). Все щетинки (за исключением коротких Fi и крошечных Ds) 426
длинные, игольчатые. Вне щита имеются многочисленные длинные щетинки. На брюшной стороне 3 щита (рис. 275,5), между вторыми ногами вытянутый в поперечном направлении грудной щит с 3 парами щетинок (S/i — S/3); к грудному щиту примыкает своей складчатой частью длинный генито-вентральный щит, суженный к заднему концу, с одной парой щетинок; на задней части находится анальный щит грушевидной формы, суженный кзади, с двумя парными щетинками и одной непарной (как у всех гамазовых клещей). Брюшная сторона тела, так же как и спинная, покрыта многочисленными щетинками.
Рис. 275. Самка Ornithonyssus bacoti.
Д —спинная сторона идиосомы. (По Е. Н. Нельзиной). Б —вид с брюшной стороны. (По Hirst). Большое увеличение. Объяснение в тексте.
На брюшной поверхности тела сбоку, между III и IV ногами, с каждой стороны, расположено дыхальце (стигма); от дыхалец вперед простираются узкие, длинные, трубчатые перитремы с узким перитремаль-ным щитком.
Ног 4 пары. Первая пара ног служит для осязания, вторая, третья и четвертая — для ходьбы. Каждая нога состоит из следующих шести члеников, считая от места прикрепления: тазик, или кокса, вертлуг, бедро, колено, голень и лапка с предлапкой. Предлапка, служащая для прикрепления клеща к субстрату, состоит из небольших склеритов, двух коготков и присоски. Ноги покрыты многочисленными тонкими щетинками.
Крысиный клещ вызывает дерматит. Является переносчиком крысиного сыпного тифа и нью-йоркского мышиного риккетсиоза от грызунов людям. В опытах доказана передача лабораторным животным ряда заболеваний (лимфоцитарного хорио-менингита, лихорадки Ку,
427
желтушного лептоспироза, чумы, туляремии). Крысиный клещ служит промежуточным хозяином крысиной филярии Litomosoides carini.
Клещей собирают на крысах, домовых мышах и в тех жилых и служебных помещениях, где люди подвергались массовым нападениям клещей.
Самец. Самец мельче самки, при кровососании его тело раздувается не так сильно. Спинной щит у самца шире, чем у самки и несет 22 пары щетинок (рис. 276,4). На брюшной стороне тела (рис. 276,5)
Рис. 276. Самец Ornithonyssus bacotl.
А —спинная сторона, Б —брюшная сторона. Большое увеличение. (По Е. Н. Нельзиной).
Б
один узкий длинный щит с 9 парами игольчатых щетинок (иногда часть щетинок расположена вне щита, рядом с ним). На переднем крае щита, как и у всех других самцов гамазовых клещей, находится половое отверстие в форме воронки. Вне щитов щетинок на теле меньше, чем у самки. Клешня хелицеры с более короткими пальцами, чем у самки; от основания подвижного пальца отходит вырост — сперматодактиль. В отличие от самки на вершине первого членика педипальп нет конусовидного выступа.
Dermanyssus gallinae Redi — Куриный клещ
Самка. Сравнивают с самкой крысиного клеща. Хелицеры у самки куриного клеща иного строения, чем у крысиного. Они имеют вид тонких длинных иголок или гибких стилетов. Спинной щит шире, сзади прямо обрублен, а не заострен, на щите 15 пар коротких тонких щетинок (51, F3, Sc, Т\, Т2, S2, Di — Ds, Л). Грудной щит с 2 парами щетинок (рис. 277). Генито-вентральный щит широкий, с широко округленным задним краем, также несет одну пару щетинок. Анальный щит шире, чем у крысиного клеща. На поверхности тела, не покрытой щитами, :28
Рис. 278. Самка Allodermanyssus sanguineus.
4 — брюшная сторона, Б —спинная сторона. Большое увеличение. (По Hirst).
имеются немногочисленные щетинки. Перитремы доходят до середины или переднего края кокс II.
Куриный клещ нередко нападает на человека, вызывает дерматит, является переносчиком вирусных заболеваний — западного и восточного лошадиного энцефаломиелита, энцефалита Сан-Луи. В опытах установлена передача клещами лихорадки Ку лабораторным животным. Клещей можно собирать в курятниках, в гнездах голубей и ряда других птиц.
Allodermanyssus sanguineus Hirst — Риккетсиозный клещ
Самка. Хелицеры самки (рис. 278,4) такого же строения, как у куриного клеща. На спинной стороне тела имеются 2 щитка: передний— узкий, удлиненный, задний — маленький, округлый (рис. 278,5). На переднем щите 16 пар щетинок (Fb F3, V, Т, Sc, S2— S5, D[ — D7), на заднем — одна пара (Ain). Грудной щит почти прямоугольный, с 3парами щетинок. Генито-вентральный щит с широким передним и заостренным задним краями, на нем 1 пара щетинок. Анальный щит удлиненный, иногда с почти прямым краем. На поверхности тела, не покрытой щитами, имеются многочисленные щетинки. Перитрема доходит до середины кокс II.
Клещи паразитируют на грызунах, но часто нападают на людей; укусы их вызывают дерматит. Клещи переносят риккетсиозные заболевания— везикулезный риккетсиоз и риккетсиозную оспу, или нью-йоркский мышиный риккетсиоз. В условиях опыта отмечено заражение лабораторных животных вирусом лимфоцитарного хорио-менингита при кормлении на них зараженных клещей. Клещей можно собирать в южных районах СССР (на Украине, в Армении, в Средней Азии) на крысах, домовой мыши, сером хомячке и других грызунах.
Laelaps pavlovskyi Zachv.
Самка. Тело почти круглое, покровы его значительно сильнее склеротизованы, чем у рассмотренных ранее крысиного, куриного и риккетсиозного клещей. Ноги коренастые. Спинной щит широкий, покрывает почти все тело сверху (рис. 279,4). На щите 39 пар щетинок, как у многих видов рода Laelaps'. 3 пары лобных F\ — F3, 1 пара теменных V, по 2 пары наружных и внутренних височных — Е7\ — ЕТ2, 1\ — Т2, 1 пара лопаточных Sc, 8 пар спинных —D3, 8 пар предкраевых Si—S8, 11 пар краевых Мх—А4ц, 3 пары вставочных /1 —13. Щетинки S8 в 4—5 раз короче, чем щетинки 57. Грудной щит (рис. 279,5) значительно длиннее, чем у предыдущих видов, с довольно широким уступом по заднему краю; углы уступа не вытянуты вниз (как у близкого вида Laelaps micromydis), на щите 3 пары щетинок (S^—S/3). Генито-вентральный щит широкий (лишь немного уже грудного щита) с 4 парами щетинок, как у других клещей рода Laelaps-, щит постепенно расширяется от переднего края к заднему, не образуя боковых уступов. Анальный щит примерно треугольной формы, с округленными углами; парные щетинки (аданальные) тонкие и короткие, не превышают длину анального отверстия, находящегося в центре щита; непарная щетинка (постанальная) значительно толще и длиннее (равна длине анального щита). На не покрытых щитами частях тела щетинки длинные, игольчатые, немногочисленные. По бокам от передней части генито-вентрального щита, между коксами III и IV, находится пара небольших удлиненных мета-стернальных щитков, несущих по одной щетинке. Позади кокс IV, с ка-430
ждой стороны, имеется по одному округлому боковому брюшному щитку. Гнатосома сильнее склеротизована, чем у предыдущих видов; максиллярные лопасти — корникулы — имеют форму рога; хелицеры короче, с зубчиками по внутренней стороне подвижного и неподвижного пальцев.
Рис. 279. Самка Laelaps pavlovskyl.
Л —брюшная сторона, Б —спинная сторона. Большое увеличение. (По А. А. Захваткину).
Laelaps pavlovskyl подозревается в переносе вируса геморрагического нефрозо-нефрита. Клещей можно собирать на полевой и на азиатской лесной мышах.
Haemolaelaps glasgowi Ewing
Самка. Отличается от самки Laelaps pavlovskyl слабее склеротизо-ванным овальным телом с более длинными ногами. На широком спинном щите (рис. 280, Л) не 39, а 38 пар щетинок (отсутствует одна пара внутренних височных щетинок Т2). Генито-вентральный щит уже, лишь с одной парой щетинок (рис. 280, Б). Все щетинки тела и конечностей тоньше. На неподвижном пальце хелицер имеется прозрачный придаток с расширенным основанием и узкой изогнутой вершиной.
Haemolaelaps glasgowi является переносчиком туляремии среди грызунов. Клещей можно собирать на различных грызунах и особенно в их гнездах.
Фазы развития
Жизненный4 цикл гамазовых клещей складывается из следующих фаз: яйцо — личинка — нимфа I (протонимфа), нимфа II (дейто-нимфа)—взрослые клещи. У некоторых видов самки не откладывают яйца, а отрождают личинок или даже нимф.
431
mm
Рис. 281. Личинка
Л —спинная сторона, Б—брюшная сторона.
Рис. 280. Самка Haemolaelaps glasgowl.
А — спинная сторона, Б— брюшная сторона. Большое увеличение.
Яйцо
Довольно крупное (по сравнению с телом клеща) яйцо можно разглядеть на многих тотальных препаратах самок. Яйцо просвечивает сквозь покровы тела самки в виде крупного овала.
Личинка Ornithonyssus bacoti
Личинка, в отличие от взрослого клеща и нимф, имеет 3 пары ног. Дыхальца и перитремы у нее отсутствуют (дыхание кожное, всей поверхностью тела). Кутикула бесцветная, почти прозрачная; щиты отсутствуют. На спинной стороне 11 пар щетинок — 8 пар коротких, в передней половине тела, и 3 пары длинных, по заднему краю (рис. 281, А). На брюшной стороне 6 парных щетинок и 1 непарная (рис. 281,5). Ротовые части развиты очень слабо, мягкие, перепончатые. Хелицеры длинные, но пальцы клешни недоразвиты. Тектум клиновидный, с гладкой незазубренной вершиной.
Протонимфа Ornithonyssus bacoti
Протонимфа имеет 4 пары ног (к трем парам личиночных ног сзади добавляется еще одна пара). С боков тела появляются дыхальца с короткими перитремами. На спинной стороне передней половины тела
Рис. 282. Протонимфа Ornithonyssus bacoti.
А —спинная сторона, Б —брюшная сторона. Большое увеличение. (По Е. Н. Нельзиной).
крупный округлый щит с 10 парами щетинок, на задней части — короткий, но широкий треугольный щит с 4 парами щетинок; вне щитов 15 пар щетинок. Между этими щитами находится 6 пар мелких вставочных склеритов (рис. 282,4). На брюшной стороне 2 щита — несколько вытянутый грудной с 3 парами щетинок и удлиненно треуголь-
28 Зак. 3420. Лабораторный практикум медицинской паразитологии	433
ный анальный с обычными двумя парными щетинками и одной непарной (рис. 282,5). Кроме того, на брюшной стороне тела есть еще 7 пар щетинок. Ротовые части хорошо склеротизованы, длина хелицер более чем в 2 раза превышает длину педипальп; пальцы клешни хорошо развиты; тектум конусовидный, с мелкими зубчиками на вершине.
Дейтонимфа Dermanyssus gallinae
Для изучения строения дейтонимфы следует взять дейтонимфу куриного, а не крысиного клеща. У куриного клеща дейтонимфальная фаза имеет многие черты, характерные для большинства гамазовых клещей, тогда как дейтонимфы, сходные с дейтонимфами крысиного клеща (то есть непитающиеся, с недоразвитыми ротовыми органами и лишенные щитов), встречаются лишь у немногих гамазовых клещей.
Рис. 283. Дейтонимфа Dermanyssus gallinae.
А—брюшная сторона, Б —спинная сторона. Большое увеличение. (По А. А. Земской).
Дейтонимфа отличается от протонимфы длинной перитремой. Щиты на теле значительно уплотняются и увеличиваются. Спинная сторона тела покрыта одним удлиненным щитом с почти прямо обрубленным задним краем; на щите 14 пар коротких тонких щетинок, вне щита 22 пары (рис. 283,5). Щиты, расположенные на брюшной стороне тела (грудной и анальный), удлиняются. Задний конец грудного щита выступает ниже кокс IV. На грудном щите 5 пар щетинок (иногда одна из этих пар расположена вне щита, около его бокового края). Анальный щит с прямым передним краем несет обычные 3 щетинки. Вне щитов на брюшной стороне тела 11 пар щетинок (рис. 283, А).
ЛИТЕРАТУРА
Бекер Э. и Г. Уартон. Введение в акарологию. Изд. ин. л., М., 1955.
Брегетова Н. Г. Сбор и изучение гамазовых клещей. Изд. АН СССР, 1952.
Брегетова Н. Г. Гамазовые клещи (Gamasoidea). Краткий определитель. Изд. АН СССР, 1956.
Захваткин А. А. Систематика рода Laelaps (Acarina, Parasitiformes) и вопросы его эпидемиологического значения. Паразит, сборн. Зоол. ин-та АН СССР, т. 14, 1952.
434
Земская А. А. Биология и развитие куриного клеща Dermanyssus gallinae в связи с его эпидемиологическим значением. Зоол. журн., т. 38, № 1, 1951.
Земская А. А. Сбор и лабораторное разведение крысиного клеща Bdellonyssus ba-coti Hirst 1913. Зоол. журн., т. 33 (2), 1954.
Ланге А. Б. О некоторых Laelaps s. str. (Acarina, Parasitiformes), паразитирующих на мышах подсем. Murinae. Паразит, сборн. Зоол. ин-та АН СССР, т. 10, 1948. ЛевиМ. И. и Кислякова Л. Н. Биологические особенности некоторых гамазоид-ных клещей в связи с их возможным эпидемиологическим значением. Сб. тр. Харьк. науч.-иссл. ин-та вакцин и сывороток, т. 20, 1954.
Нельзина Е. Н. Крысиный клещ. Изд. АМН СССР, 1955.
Нельзина Е. Н. и Барков И. П. Носительство туляремийного микроба (В. tula-rense) некоторыми видами гамазовых клещей в естественных условиях. Докл. АН СССР, т. 78, №4, 1951.
Нельзина Е. Н. и Романов В. П. Способ передачи туляремийного микроба ( В. tularense) гамазовыми клещами. Докл. АН СССР, т. 78, № 1, 1951.
Павловский Е. Н. (ред.). Клещи грызунов фауны СССР. (Раздел — Надсемейство Gamasoidea, стр. 217—366), изд. АН СССР, 1955. (Ряд статей по гамазовым клещам в Паразитологическом сборнике, тома 10—16, изд. АН СССР; в сборниках «Вопросы краевой, общей и экспериментальной паразитологии и медицинской зоологии», т. 9, Медгиз, 1955; «Природная очаговость болезней человека и краевая эпидемиология», Медгиз, 1955; в Зоологическом журнале и др.).
ПРИЛОЖЕНИЯ
ОПРЕДЕЛИТЕЛЬНАЯ ТАБЛИЦА ОТРЯДОВ НАСЕКОМЫХ > (ПО ВЗРОСЛЫМ НАСЕКОМЫМ)
1	(8). Брюшко с придатками не только на конце, но и на первых сегментах (или с прыгательной вилкой). Крыльев нет. Мелкие или очень мелкие насекомые . . . Подкласс Apterygota — Низшие насекомые (Первичнобескрылые).
2	(3). Усиков нет. Брюшко из 12 сегментов (последние очень короткие); первые 3 сегмента с небольшими парными придатками на нижней стороне — рудиментарными конечностями . . .
................................Protura— Бессяжковые.
3	(2). Усики есть. Брюшко из 4—11 сегментов.
4	(5). Брюшко не более чем из 6 сегментов, на четвертом — прыга-тельная вилка (у большинства видов) . . . Collembola — Ногохвостые.
5	(4). Брюшко из 10—11 сегментов, без прыгательной вилки.
6	(7). Тело без чешуек. Сложных глаз нет. Ротовые органы редуцированы, погружены внутрь головы. На конце брюшка парные церки, у некоторых видов превращенные в клешню . . . .
....................Diplura (Entognatha)—Двухвостые.
7	(6). Тело покрыто чешуйками. Сложные глаза имеются. Ротовые органы видны снаружи. На конце брюшка 3 членистых хвостовых нити . . . Thyscinura (Ectognatha) — Щстипохвостые.
8	(1). Брюшко с придатками только на заднем конце тела или вовсе без придатков. Крылья имеются или отсутствуют................
................Подкласс Pterygota — Высшие насекомые.
9	(10). Лапки из одного, реже двух члеников, с присасывательным пузырьком на конце. Крылья (если есть) узкие, с немногими продольными жилками, по краям покрыты длинными ресничками. Мелкие или очень мелкие насекомые......................
. . . Thysanoptera (Physopoda) — Пузыреногие (Трипсы). 10 (9). Лапки без присасывательных пузырьков.
1 Составлена А. В. Гуцевичем по И. Н. Филипьеву (1928) и другим источникам.
28*	435
11
12
13
14
15
16
17
18
19
20
21
22
23
24
'25
•26
27
28
.29
30
31
(12). На конце брюшка очень крупные церки в виде клещей или ножниц, раздвигающихся в горизонтальной плоскости. Передние крылья плотные, без жилок.....................Dermatoptera
(Dermapterd) —Кожистокрылые (Уховертки).
(11). Церки, если имеются, иного строения.
(14). Передние ноги хватательные: уплощенная зазубренная голень в покое вкладывается в желобок бедра, также несущего шипы....................................Mantodea — Богомолы.
(13). Передние ноги иного строения.
(16). Передняя часть головы вытянута в виде хобота, образует так называемую головотрубку, на конце которой помещаются грызущие или колющие ротовые органы. Крылья, если имеются, перепончатые; передние сходны с задними . . . Mecoptera — Скорпионовые мухи.
(15). Передняя часть головы не вытянута в виде хобота; если го-ловотрубка имеется, то передняя пара крыльев превращена в плотные надкрылья.
(50). Крылья имеются — одна или две пары. Иногда кажется, что крыльев нет, потому что передняя пара соединена с задней или сращена на спинной стороне.
(21). Ротовые органы образуют расчлененный хоботок, как правило удлиненный, в покое подогнутый под тело.
(20). Передние крылья состоят из плотной основной и перепончатой вершинной частей. Хоботок причленен к передней части головы . . . Hemiptera (Heteropterd) — Полужесткокрылые (Клопы).
(19). Передние крылья однородные. Хоботок, направленный вниз и назад, кажется причлененным к задней части головы . . . ..........................Homoptera — Равнокрылые хоботные.
(18). Ротовые органы не образуют членистого хоботка.
(25). Усики тонкие, короче головы. Жилки на крыльях образуют густую сеть.
(24). Передние и задние крылья одинаковой длины. Ротовые органы грызущие. Церки короткие...................Odonata — Стрекозы.
(23). Задние крылья меньше передних или отсутствуют. Ротовые органы недоразвиты. Брюшко с 2—3 длинными хвостовыми нитями......................Ephemeroptera	(Agnatha) — Поденки.
(22). Усики не короче головы; если короткие, то толстые, прилегающие к голове.
(27). Передние крылья образуют плотные, лишенные жилок надкрылья. Задние крылья перепончатые, с сетью жилок, в покое спрятаны под надкрылья (или задние крылья отсутствуют) ..................Coleopter а — Жесткокрылые (Жуки).
(26). Передние крылья с сетью жилок.
(31). Передние крылья более плотные; задние — перепончатые, расширены, складываются веерообразно.
(30). Голова подогнута под широкую переднегрудь. Все ноги бега-тельные. Лапки пятичлениковые . . . Blattodea — Таракановые.
(29). Голова не подогнута под переднегрудь. Задние ноги прыга-тельные, с резко утолщенными в основной половине бедрами; если задние ноги не прыгательные, то передние ноги уплощены и расширены (роющие). Число члеников лапки менее пяти................................Orthoptera — Прямокрылые.
(28). Передние крылья перепончатые.
436
32
33
34
35
36
37
38
39
40
41
42
43
44
45
46
47
48
49
50
51
52
53
54
55
56
57
(33). Задних крыльев нет; позади передних крыльев расположены головчатые жужжальца — рудименты задней пары крыльев....................................Diptera	— Двукрылые.
(32). Задние крылья есть; иногда оба крыла каждой стороны сцеплены друг с другом, почему кажется, что имеется только одна пара крыльев.
(37). Ротовые органы недоразвиты.
(36). Тело и крылья покрыты волосками. Крылья в покое складываются кровлеобразно...................Trichoptera	— Ручейники.
(35). Тело и крылья не покрыты волосками. Крылья в покое сложены горизонтально.......................Plecoptera	— Веснянки.
(34). Ротовые органы развиты нормально: грызущие, лижущие, колющие или сосущие.
(39). Крылья и тело покрыты чешуйками. Ротовые органы обычно образуют свернутый спиралью длинный мягкий хоботок . . .
..................Lepidoptera — Чешуекрылые (Бабочки).
(38). Крылья и тело без чешуек. Ротовые органы иного типа.
(45). Крылья сетчатые со многими продольными и поперечными жилками.
(42). Усики прикреплены между глазами. Членики лапок не расширены ............................Neuroptera — Сетчатокрылые.
(41). Усики прикреплены впереди глаз. Третий или четвертый членик лапки расширен.
(44). Расширен третий членик лапки. Крылья прозрачные с «глазком» (птеростигмой) . . . Raphidioptera — Верблюдковые.
(43). Четвертый членик лапки расширенный, двулопастный. Крылья буроватые, без птеростигмы . . . Megaloptera — Вислокрылые.
(40). Крылья с относительно немногочисленными жилками, или жилкование продольное, без ясно выраженных поперечных жилок.
(47). Крылья с многочисленными продольными ветвящимися жилками ......................................Isoptera — Термиты.
(46). Крылья с относительно немногочисленными продольными и поперечными жилками.
(49). Жилкование выражено хорошо. Передние крылья не больше или немного больше задних. Переднегрудь не обособлена .......................Hymenoptera — Перепончатокрылые.
(48). Жилок очень мало. Передние крылья значительно больше задних; в покое крылья сложены высокой кровлей. Мелкие или очень мелкие насекомые .... Copeognatha — Сеноеды.
(17). Крыльев нет, или они очень укорочены, недоразвиты.
(52). Тело сильно сплющено с боков. Задние ноги прыгательные. Паразиты теплокровных......................Aphaniptera	— Блохи.
(51). Тело не сплющено с боков.
(58). Тело сильно сплющено сверху вниз. Ноги с крепкими коготками, направлены в стороны. Паразиты.
(55). Ротовые органы грызущие. Голова относительно большая ....................................Mallophaga — Пухоеды.
(54). Ротовые органы колюще-сосущие (хоботок может быть втянутым).	*
(57). Усики по длине примерно равны голове. Щупиков нет. Лапки с одним коготком................................Anoplura	— Вши.
(56). Усики значительно короче головы. Щупики есть. Лапки с двумя коготками.........................Diptera — Двукрылые
(семейство Hippoboscidae — Кровососки).
437
58	(53). Тело не сплющено сверху вниз (если сплющено, то образ жизни не паразитический).
59	(60). Первый членик передней лапки вздут, в нем находятся пря-ч дильные железы...............................Embiodea — Эмбии.
60	(59). Первый членик передней лапки не вздут.
61	(74). Ротовые органы грызущие или грызуще-лижущие.
62	(63). Грудные сегменты слабо отличимы от брюшных. Тело плоское, червеобразное .... Coleoptera (самки жуков светляков).
63	(62). Грудные сегменты по строению явственно отличаются от брюшных.
64	(65). Переднеспинка большая; голова подогнута под переднегрудь. Тело уплощенное............................Blattodea	— Таракановые.
65	(64). Голова не подогнута под переднегрудь. Тело не уплощенное.
66	(67). Брюшко соединено с грудью тонким стебельком. Переднегрудь слита с остальной частью груди . . . Hymenoptera— Перепончатокрылые.
67	(66). Брюшко не стебельчатое. Переднегрудь свободная.
68	(69). Задние ноги прыгательные, с утолщенными бедрами . . . ..........................................Orthoptera	— Прямокрылые.
69	(68). Задние ноги не прыгательные.
70	(71). Тело очень вытянуто в длину, палочковидное...............
....................Phdsmodea	— Привиденьевые (Палочники).
71	(70). Тело не палочковидное; насекомые похожи на муравьев.
72	(73). Глаза выпуклые. Усики в большинстве случаев примерно такой длины, как и тело. Очень мелкие насекомые......................
....................................Copeognatha	— Сеноеды.
73	(72). Глаза не выпуклые. Усики значительно короче тела . . . ................................................Isoptera	— Термиты.
74	(61). Ротовые части в виде хоботка, сосущие или колюще-сосущие.
75	(76). Хоботок свернут спиралью или недоразвит. Тело, густо покрытое чешуйками или волосками, более или менее червеобразное ...................Lepidoptera — Чешуекрылые (Бабочки).
76	(75). Хоботок не согнут спиралью.
77	(80). Хоботок членистый, подогнут под брюшную сторону тела.
78	(79). Хоботок, направленный вниз и кзади, кажется отходящим от задней части головы . . . Homoptera — Равнокрылые хоботные.
79	(78). Хоботок отходит от передней части головы.................
....................Hemiptera	— Полужесткокрылые (Клопы).
80	(77). Хоботок не членистый, не подогнут под брюшную часть тела ..........................................Diptera	— Двукрылые.
АМБАРНЫЕ ВРЕДИТЕЛИ
СБОР МАТЕРИАЛА
Отличительной чертой некоторых половозрелых насекомых — амбарных вредителей является их способность замирать при малейшем шуме. Это свойство при небольших размерах и неяркой окраске насекомых делает их малозаметными при поверхностном осмотре амбаров и складов. Поэтому существует особая методика обследования зернохранилищ и сбора вредителей, на чем мы остановимся в самых общих чертах.
438
Рис. 284. Система сит для обследования зерна на наличие вредителей.
Легче всего обнаружить вредителей в просыпке, то есть в том зерне и муке, которые просыпались в подполье. Берется около 200 г просыпки и просеивается через два сита с отверстиями диаметром 2,5 и 1 мм. В первом ярусе остаются неповрежденные зерна, бабочки и крупные жуки, во втором ярусе — мелкие, разломанные зерна и мелкие жуки, в третьем ярусе — мучнистые остатки и амбарные клещи. Рекомендуют также систему пяти сит с отверстиями диаметром от 3 до 1 мм (рис. 284). Для того чтобы составить представление о состоянии склада, необходимо также брать пробы из внутренней и наружной части продуктов, насыпанных в мешки, из верхнего, среднего и нижнего слоя зерна, засыпанного в закрома, из использованной тары. Мешки следует выворачивать наизнанку и щетками счищать приставшую муку или зерна на темный лист бумаги.
ИССЛЕДОВАНИЕ ПРОБ
Все фазы развития насекомых, кроме яйца, обнаруживаются в пробах большею частью простым глазом, без особых приемов. Существует, однако, в ряде случаев так называемое скрытое заражение зерна некоторыми вредителями, например долгоносиками и зерновой молью, развитие которых происходит внутри зерна, или зерновками, развивающимися внутри бобов. Для примера опишем развитие амбарного долгоносика. Самка долгоносика выгрызает углубление в зерне, кладет туда яйцо и замазывает отверстие особым секретом, который быстро твердеет на воздухе (пробочка). Из яйца выходит личинка, проходящая внутри зерна все свое развитие (несколько возрастов). Там же происходит окукливание и формирование половозрелой фазы. Для выхода из оставшейся оболочки зерна взрослый долгоносик прогрызает в ней очень характерное круглое отверстие (рис. 285). Зерновая моль откладывает яйцо на зерно, и вышедшая личинка (гусеница) вгрызается внутрь зерна.
С целью обнаружения скрытого заражения зёрен или бобов используются насыщенные растворы солей. Для исследования пшеницы рекомендуют раствор из расчета 570—730 г селитры, для гороха — 730 г на один литр воды. Поваренной соли требуется значительно меньше: для гороха — около 345 г на литр воды. В приготовленный раствор опускается проба зерна, при этом зёрна, в которых образовались полости, всплывают наверх. Всплывшие зёрна вскрывают для проверки на заражение вредителями. При этом можно обнаружить преимущественно пустые зёрна с оболочками гусениц и куколок зерновой моли или личинок и куколок долгоносиков. Для выявления заражения зерна амбарным долгоносиком в первом периоде (еще до образования полостей) употребляется метод Брудной. Суть его заключается в следующем. Навеска около 15 г зерна опускается на одну минуту в теплую воду (30°), где происходит разбухание пробочек, а затем на такой же срок переносится в 1% раствор марганцевокислого калия (30°), где разбухшие пробочки окрашиваются в черный цвет, и, наконец, промывается
439
амбарным долго-
Рис. 285. Повреждение зерна носиком.
в холодной воде. После этой обработки на поверхности поврежденных зёрен появляются круглые черные точки правильной формы, по которым и можно выделить такие зёрна из обшей массы. Запасы, пораженные амбарными клещами, приобретают характерный, неприятный тухло-медовый запах, позволяющий установить наличие клещей. Такие продукты лучше всего исследовать под бинокуляром. Клещей можно заметить и с помощью 10—12-кратной лупы, а при хорошем зрении даже простым глазом.
Методы определения заражения муки клещами довольно несовершенны. Например, на стол насыпают муку конусообразными сверху кучками. При наличии клещей, которые двигаются тем быстрее, чем выше температура окружающего воздуха, кучка муки осыпается отсутствии их кучка сохраняет свою первона-
и делается плоской, а при с—;  - ;  —   --- чальную форму. Если насыпать муку, зараженную клещами, в стакан и поставить его на свет, то на внутренней поверхности стакана, обращенной к свету, вскоре проступает целая сеть дорожек, образованных передвигающимися клещами.
ИЗУЧЕНИЕ ПРЕПАРАТОВ
Прежде чем достигнуть половозрелого состояния все клещи и насекомые претерпевают метаморфоз, или превращение, связанное с изменением формы тела и внутреннего строения.
Клещи откладывают яйца, из которых выходят шестиногие личинки. Личинка линяет на нимфу I, имеющую четыре пары ног; нимфа I линяет на нимфу II, отличающуюся от предыдущей главным образом более крупными размерами; нимфа II превращается во взрослого клеща, имеющего, в отличие от нимфы, половое отверстие. Если условия жизни неблагоприятны для клещей, то нимфа I может превращаться в особую фазу, носящую название гипопуса, из которой в дальнейшем выходит нимфа II. Гипопус хорошо защищен уплотненными покровами; он не питается и лучше других фаз переносит неблагоприятные условия среды.
Кроме мучных клещей (см. Tyroglyphidae и Glycyphagidae), питающихся зерном и мукой, среди амбарных вредителей встречаются хищные клещи (семейство Cheyletidae и Pedlculoldidae), питающиеся за счет других клещей и насекомых. Самка пузатого клеща Pediculoides ventricosus (семейство Pediculoididae) живородяща, гипопус у этого вида отсутствует.
В отличие от насекомых, амбарных клещей лучше изучать в живом состоянии, так как погибших клещей очень трудно находить в продуктах, особенно в муке. Зараженная клещами (или подозрительная на заражение, то есть имеющая тухло-медовый запах) мука берется на часовое стекло диаметром 5 см и рассматривается под бинокуляром.
440
Чаще всего в поле зрения видны медленно движущиеся клещи, тело которых расчленено поперечной бороздой на маленький передний и крупный задний отделы; это большею частью собственно мучные клещи семейства Tyroglyphidae. Наряду с ними можно встретить быстро и беспорядочно двигающихся клещей, с нерасчлененным телом, —волосатых клещей семейства Glycyphagidae. Среди тех и других иногда встречаются более крупные — хищные клещи семейства Cheyletidae, движения которых быстры, но, в отличие от волосатых клещей, координированы. У хищных клещей щупики нижних челюстей превращены в крупные хватательные щипцы, напоминающие как бы дополнительную, пятую пару ног. Наряду с половозрелыми мучными клещами в муке заметны личинки, нимфы и яйца клещей.
Зараженную муку удобно рассматривать также на черной бумаге, в которую упаковывают фотопластинки. Для этого на бумагу насыпают муку и затем вновь ссыпают ее обратно. Кратковременного выдерживания зараженной муки на шероховатой поверхности обычно достаточно для того, чтобы на ней зацепилось несколько клещей, которых очень удобно рассматривать на черном фоне. Различают три степени заражения муки клещами: 1 степень — небольшое количество, единичные экземпляры; 2 степень — большое количество, трудно поддаются подсчету, но тотчас после просеивания не образуют «войлочной» массы; 3 степень —образуют «войлочный» слой. Под войлочной массой следует понимать сплошные двигающиеся колонии, в которые клещи сцепляются в случае большой численности.
При наличии муки с третьей степенью заражения клещей можно зафиксировать в 70° спирте. Взятая из такого сбора одна капля спирта всегда будет содержать несколько клещей. После удаления жидкости фильтровальной бумагой клещи сохраняют некоторое время свой внешний вид. В это время их удобно изучать под бинокуляром или под малым увеличением микроскопа. Заделка амбарных клещей в канадский бальзам не рекомендуется, так как они сильно просветляются и становятся малозаметными. Для приготовления препаратов рекомендуют (А. А. Захваткин, 1941) следующую смесь Фора—Берлезе: дистиллированная вода — 50 частей, хлоралгидрат — 200, глицерин — 20, гуммиарабик сухой — 30.
Метаморфоз насекомых может быть неполным или полным. У насекомых с неполным превращением (прямокрылые, полужесткокрылые и др.) личинка сходна по внешнему виду со взрослой фазой, от которой отличается некоторыми деталями строения (размерами и др.), фаза куколки отсутствует. У насекомых с полным превращением личинка червеобразная, совершенно не походит на взрослую фазу, после ряда линек превращается в куколку, которая не питается; из нее уже выходит взрослое насекомое. Все насекомые, вредящие запасам (жуки, бабочки, сырная муха)., имеют полное превращение. По внешнему виду личинки и куколки у разных отрядов сильно отличаются между собою. Для изучения личинок и куколок удобнее пользоваться спиртовым материалом, который рассматривают под бинокуляром, лучше при падающем свете. Взрослых насекомых для этой цели умерщвляют и накалывают на энтомологические булавки.
Живых жуков умерщвляют парами хлороформа или серного эфира. При наколке булавку (№ 1) вкалывают в правую сторону переднеспинки насекомого с таким расчетом, чтобы она вышла между первой и второй парой ног. Вслед затем расправляют ножки и усики, чтобы в дальнейшем их можно было рассмотреть. Если приходится накалывать сухой материал, то его предварительно помещают в эксикатор на
441
одни-двое суток и накалывают насекомых лишь после того как они становятся мягкими и гибкими. В отношении мелких жуков, например различных мукоедов, практикуется наклейка их на вершины бумажных треугольников, которые в свою очередь накалывают на энтомологические булавки.
При наколке бабочек нужно расправлять не только ножки и усики, но и крылья. Эта процедура требует большой осторожности, так как при грубом обращении чешуйки могут быть стерты и объект испорчен. Для расправления бабочек необходимо иметь особые расправилки, подробные описания которых имеются в руководствах по оборудованию курса зоологии (Н. Г. Кременецкий, 1938).
ВЗРОСЛЫЕ КЛЕЩИ Tyroglyphus farinae L. — Мучной клещ
Длина взрослого клеща 0,35—0,67 мм. Тело яйцевидное, молочно-белое, полупрозрачное со стеклянным блеском. Оно делится поперечными бороздами на три неравные части: комплекс ротовых органов, или гнатосому, переднюю небольшую часть тела — проподосому и заднюю, крупную часть — гистеросому (рис. 286, а). Две последние части составляют собственно тело клеща, или идиосому, к которой прикреплены 4 пары ног. Ротовые органы подвижны и отчасти могут втягиваться внутрь тела. Они состоят из пары клешнеобразных верхних челюстей грызущего типа, называемых хелицерами (или мандибулами), и непарного образования — гипостома, находящегося под хелицерами. Гипостом имеет форму трапеции, к передним углам которой причленяются небольшие челюстные щупики. Проподосома несет две передние пары ног; гистеросома также несет две, третью и четвертую, пары ног.
Никаких следов сегментации, кроме указанных двух поперечных борозд, а также признаков отграничения задней части тела, соответствующей брюшку, от средней, соответствующей груди, у тироглифоид-ных клещей нет. Следы метамерного строения видны лишь в распределении щетинок на дорзальной поверхности тела, расположенных более или менее поперечными рядами. Ноги Tyroglyphus farinae состоят из 6 члеников. Первые членики — тазики (coxae) —неподвижно сращены с телом и образуют вместе с соответствующими частями вентральной поверхности так называемый коксо-стернальный скелет. Свободную часть ноги составляют вертлуг (trochanter), бедро (femur), колено или коленный членик (genu, patella), голень (tibia) и лапка (tarsus). На конце последней располагаются присоски или амбулакры, состоящие из перепончатого образования (pretarsus) и непарного коготка (unguis). Первая пара ног самца сильно утолщена, бедро несет на нижней поверхности крупный заостренный шип (рис. 286, б).
На вентральной поверхности тела, между ногами четвертой пары, находятся наружные половые органы: у самца — пенис в виде заостренного хитинизированного образования, у самки — яйцевыводное отверстие в виде щели (рис. 286, б, в). Анальное отверстие, в форме продольной щели, расположено на вентральной поверхности в задней части тела. У самца по бокам этого отверстия имеются круглые образования — анальные копулятивные присоски.
Glycyphagus destructor Ouds. — Волосатый клещ
Длина взрослого клеща 0,35—0,56 мм. Главным отличием от предыдущего вида является нерасчлененная идиосома (рис. 286, г). Наружный покров бесцветный, нежной перепончатой консистенции. Со спинной
442
поверхности тело покрыто очень длинными щетинками, иные из которых в полтора раза превышают длину идиосомы. Эти щетинки густо опу-
Рис. 286. Амбарные клещи.
a—Tyroglyphus farlnae, самка, с дорзальной стороны; б—то же, самец, с вентральной стороны; в —тоже, самка, с вентральной стороны; г — Glycy-phagus destructor, д — Cheyletus eruditus, e и ж — самки Pediculoldes ventricosus в разные моменты жизни.
шены, перистого строения, у живых особей расположены перпендикулярно к поверхности тела. За это клещ и получил название «волосатого». Лапки очень тонкие и длинные, шиловидные, длиннее и тоньше, чем у предыдущего вида, с очень мелкими коготками.
443
Cheyletus eruditus Schrk. — Хищный клещ
o Взрослый клещ 0,5—0,8 мм длины, несколько крупнее мучных клещей, желтоватого цвета. Идиосома не разделена поперечной бороздой и напоминает по форме шестиугольник, вытянутый в задней части (рис. 286, 5). Ротовые органы сосущего типа. Щупики нижних челюстей превращены в крупные хватательные щипцы. Эти мощные образования, приспособленные для ловли и удерживания добычи, напоминают как бы дополнительную (пятую) пару ног и потому их называют иногда «ного-челюстями».
Pediculoides ventricosus Newp. — Пузатый клещ
В отличие от предыдущего, этот, тоже хищный клещ, живородящ. Неоплодотворенная самка мала, 0,2 мм длиной. Тело желтого цвета, удлиненное, с остатками сегментации в задней части. Вскоре после оплодотворения в половых органах самки начинают развиваться молодые клещи, вследствие чего и размер ее во много раз увеличивается (рис. 286, е, ж). При вскрытии самки обнаруживаются частично уже развившиеся клещи и частично яйца. Подвижная молодая самка находит гусеницу или куколку насекомого, прокалывает острыми челюстями ранку и, вводя яд, умерщвляет добычу, а затем постепенно ее высасывает, не покидая жертву до отрождения молодых клещей.
Ведя хищнический образ жизни, пузатый клещ может нападать на человека и вызывает у него дерматит. Поскольку хищные клещи загрязняют зерно и муку продуктами своей жизнедеятельности, они также считаются вредителями запасов.
НАСЕКОМЫЕ
Взрослая фаза
Tenebrio molitor L. — Мучной хрущак
Самый крупный среди жуков — амбарных вредителей, 13—15 мм длиной. На нем удобно ознакомиться с морфологией насекомых вообще и жуков в частности.
Тело взрослого насекомого делится на три больших отдела: голову, грудь и брюшко. По бокам головы расположены фасеточные глаза и пара членистых усиков; спереди или снизу имеется комплекс ротовых органов со щупиками. Передний край головы, между глазами, называется наличником; иногда он расширяется впереди и в виде козырька прикрывает ротовые органы и основание усиков. Грудь состоит из трех отделов, называемых соответственно передне-, средне- и заднегрудью. Дорзальная поверхность переднегруди называется переднеспинкой. К груди присоединяются 3 пары ног, к средне- и заднегруди по паре крыльев (рис. 287). Нога состоит из тазика, вертлуга, бедра, голени и лапки. Лапка имеет несколько члеников и оканчивается коготками. Брюшко также состоит из отдельных колец-сегментов. Спинная поверхность сегмента называется тергитом, брюшная — стернитом. Счет сегментов брюшка, лапки, усиков и т. д. ведется от их основания. У жуков перед-444
КОЖИСТЫМ
Я
/5
24
15
крыльям, они не прини-
27
Рис. 287. Наружное строение Tenebrlo molltor.
I —голова, II — переднеспинка, III — заднеспинка; 1 — 6 —сегменты брюшка, 7—надкрылье, 8 — крыло, 9 —бедро, 10 — голень, // — /5—членики лапок, 16 — коготки, /7 —глаз, 18 — усик, /9 —наличник, 20 — передний угол переднеспинки, 2/— бок переднеспинки, 22 — основание переднеспинки, 23— щиток, 24— шов надкрылий, 25 —точечные бороздки, 25 — промежутки между точечными бороздками, 27 —жилки крыла.
Z
3
4
5
20
21
22
ние крылья твердые, сильно хитинизированы, называются надкрыльями; в противоположность задним мают активного участия в полете.
Мучной хрущак имеет продолговатое тело со слабым блеском. Дорзальная поверхность почти черного цвета, пе-реднеспинка несколько светлее надкрылий. Вентральная поверхность тела темно-бурая, но ги темно-коричневые. Надкрылья голые, то есть не покрытые волосками, изрезаны неглубокими продольными бороздами и обычно покрывают все брюшко. Голова крупная. Передний край ее между глазами (наличник) расширяется спереди и в виде козырька прикрывает собою основания усиков. Усики четковидные, заходят за половину переднеспинки. Передне-спинка выпуклая, в полтора раза шире своей длины. Ширина
ее несколько уже основания надкрылий. Задние ноги немного длиннее средних и передних. Предпоследний сегмент брюшка уже остальных. Передние и средние лапки пятичлениковые, задние — четырехчлениковые.
Calandra granaria L. — Амбарный долгоносик
Небольшой жук, 2,5—3,5 мм длиной, с узким продолговатым блестящим телом. Молодые насекомые коричневого цвета, старые — почти черные. Иногда переднеспинка несколько светлее надкрылий. Усики и ноги также светлее надкрылий — коричневые. Как и у других представителей семейства Curculionidae, небольшая голова вытянута кпереди в виде длинного хоботка, или головотрубки (рис. 288, а). На конце хоботка расположены ротовые органы. На голове, по обеим сторонам хоботка, находится пара фасеточных глаз. Недалеко от основания к хоботку причле-няется пара коленчатых усиков, оканчивающихся хорошо выраженной приостренной булавой. Переднеспинка крупная, прикрывает сверху среднегрудь и по длине своей равна 2/3 надкрылий. Поверхность переднеспинки вся изрыта эллипсоидными ямками в виде запятых, расположенных спереди назад. Лишь в середине переднеспинки имеется очень небольшое поле без пунктировки. Надкрылья немного не прикрывают брюшка. Поверхность их изрезана глубокими продольными бороздами, на дне которых видна мелкая пунктировка. Вблизи них рядами расположены небольшие золотистые волоски. Пунктировка надкрылий значительно мельче, чем на переднеспинке. Задние крылья не развиты. Летать жук не может. Все три пары ног почти одинаковой длины. Лапки четырехчлениковые, оканчиваются двумя коготками.
Calandra oryzae L. — Рисовый долгоносик
Длина жука 2,5—3 мм. По внешнему виду очень походит на амбарного долгоносика (рис. 288,6). Поверхность хитина матовая, цвет коричневый, на надкрыльях четыре красноватых пятна. Пунктировка передне-
445
спинки густая, сплошная, в форме более или менее правильных точек. Пунктировка надкрылий почти такой же глубины, как и на передне-
Рис. 288. Жуки — амбарные вредители. a —Calandra granaria, б—Calandra oryzae, в — Bruchus pisorum, г — Acanthoscelides obtectus, 0 — Oryzaephilus surinamensis, e — Tenebrioides mauritanicus.
спинке. Задние крылья хорошо развиты. Жук летает. Лапки четырех-члениковые.
Bruchus pisorum L.— Гороховая зерновка
Длина жука 4—5 мм. Тело широкое, почти овальное, несколько приплюснутое. Цвет пестро-мраморный (рис. 288,в). Он зависит от того, что черный хитин на надкрыльях покрыт в мозаичном порядке белыми, оранжевыми и черными волосками. Надкрылья сильно укорочены и не прикрывают брюшка. Задний тер-гит имеет два черных пятна, не покрытых волосками. Впереди этих пятен и между ними тергит покрыт белыми волосками, чем усиливается яркость рисунка. Голова вытянута в короткую головотрубку, направленную вниз. Усики прямые, несколько утолщаются в конечной половине; 4 первых членика усиков красноватые. Переднеспинка относительно короткая, почти в два раза шире своей длины, имеет посередине боковых краев по одному зубцу. Задние крылья развиты. Задняя пара ног значительно более мощная, чем другие. На вершине задних бедер, на внутренней их стороне, по одному крупному зубцу. Лапки четырех-члениковые.
Acanthoscelides obtectus Say — Фасолевая зерновка
Длина жука 3—3,5 мм. Подобно другим зерновкам, с широким, почти овальным телом. Хитин дорзальной поверхности тела темно-коричневый, покрыт желтыми волосками, вследствие чего насекомое приобретает бурый цвет. Надкрылья значительно короче брюшка и не прикрывают его (рис. 288, а). Конец брюшка меднокрасного цвета. Голова вытянутая, направлена вниз. Уси
ки прямые, утолщаются на конце.
Переднеспинка почти треугольная, длина ее почти равна ширине. Задние ноги более мощные, чем передние и средние, медно-красного
446
цвета. Лишь передняя поверхность задних и отчасти средних бедер почти черная. На вершине задних бедер по три шипа, один из которых крупный, а два мелких. Лапки четырехчлениковые.
Tenebrioides mauritanicus L. — Мавританская козявка
Довольно крупный жук, 7—11 мм длиной. После мучного хрущака второй среди жуков — амбарных вредителей по величине. Темно-коричневый, почти черный, блестящий, с очень уплощенным телом (рис. 288, е). Голова большая, блестящая, густо покрытая с дорзальной стороны мелкими точками. Ротовые органы выдаются вперед в виде мощных жвал; остальные органы прикрыты наличником — квадратным образованием с густой щетиной желтых волосков по переднему краю. Усики с нерезкой пятичлениковой булавой. Переднеспинка чашеобразная, широкая впереди, суживающаяся у основания. Передние углы переднеспинки в виде больших треугольных выступов, направленных вперед. Дорзальная поверхность ее покрыта сплошь густой пунктировкой. Между переднеспин-кой и надкрыльями имеется резкое сужение, вследствие чего тело как бы перетянуто. Надкрылья покрывают все брюшко, изрезаны продольными бороздами, на которых расположены ряды точек. Ноги буро-красные. Лапки пятичлениковые.
Oryzaephilus surinamensis L. — Суринамский мукоед
Длина жука 3—3,5 мм. Тело уплощенное, вытянутое, темно-бурое, матовое. Надкрылья покрывают брюшко. Голова крупная, направлена вперед. Четыре последних членика усиков немного утолщены, образуют булаву. Переднеспинка лишь немного длиннее головы. На дорзальной стороне переднеспинки имеются два плоских вдавления; по боковым краям ее расположено по шести характерных зубцов (рис. 288,(9). Все ноги почти одинаковой длины. Лапки пятичлениковые.
Laemophloeus testaceus F. — Рыжий мукоед
Длина жука 1,5—2,5 мм. Тело уплощенное, покрыто шелковистым пушком. Цвет красновато-коричневый. Надкрылья прикрывают брюшко. Голова крупная, направлена вперед. Усики нитевидные, длина их почти равна длине тела. Переднеспинка широкая, приближается по форме своей к квадрату. Задняя пара ног не длиннее других. Все лапки пятичлениковые.
Laemophloeus ferrugineus Steph. — Короткоусый рыжий мукоед
Длина тела 1,5—2,2 мм. Близок к предыдущему. Отличается от него тем, что длина усиков не превышает половины длины тела. Кроме того, переднеспинка широка впереди, но сильно суживается к заднему краю (рис. 289, а). Ширина переднего края переднеспинки почти равна ширине основания надкрылий, ширина же заднего края — значительно уже. Жук как бы перетянут «в талии». Все ноги примерно равной длины. Лапки пятичлениковые.
Ptinus fur L. — Притворяшка-вор
Длина жука 2,5—4,3 мм. Самка имеет яйцевидное, почти шарообразное тело, темно-коричневого цвета. Блестящие выпуклые надкрылья покрыты редкими желтоватыми волосками. В передней и задней части
447
надкрылий имеются округлые скопления густых светлых волосков, образующих 4 ярких беловатых пятна на темном фоне (рис. 289,6). Задние крылья не развиты, самки не летают. Голова небольшая, направленная вниз, прикрыта переднеспинкой и сверху не видна. Нитевидные усики
Рис. 289. Жуки — амбарные вредители.
а — Lacmophloeus ferrugineus, б — Ptinus fur (самка), в — Sitodrepa panicea, г — Tribolium conjusum, д — усики Tribolium confusum (вверху) и Tribolium navale (внизу).
длинные, прикреплены между глазами. Переднеспинка сравнительно небольшая, покрыта густыми желтыми волосками. Она имеет 4 характерных бугорка, хорошо заметных сверху. Лапки пятичлениковые. Самец отличается от самки продолговатым цилиндрическим телом желтоватого цвета и наличием второй пары крыльев, благодаря чему способен летать. Общим видовым признаком является строение головы, направленной вниз, и переднеспинки, имеющей 4 желтоватых бугорка.
448
Sitodrepa panicea L. — Хлебный точильщик
Длина жука 1,5—3 мм. Тело овальной формы, коричневого цвета, покрыто желтоватым золотистым пушком. Надкрылья, изрезанные продольными бороздками, прикрывают брюшко. Небольшая голова, направленная вниз, как бы втянута в очень крупную переднеспинку, вследствие чего сверху не видна. Она может быть обнаружена при рассматривании жука в профиль (рис. 289, в). Усики нитевидные. Три последних членика длинные и широкие, чем резко отличаются от остальных. Два первых членика мельче вершинных, но крупнее шести очень мелких срединных члеников. Основные и срединные членики легче обнаружить на живом насекомом, так как обычно на препарате усики подогнуты.
Переднеспинка очень крупная, в виде «капора» надвигается на голову. Все 3 пары ног примерно одинаковой длины. Лапки пятичлени-ковые. Брюшко округло-овальное, без особых придатков.
Tribolium confusum Duv. — Малый хрущак
Длина тела 3—3,5 мм. По форме наружных органов очень похож на мучного хрущака, но значительно мельче. Цвет жука коричневый. Поверхность хитина со слабым блеском. Надкрылья голые, покрыты неглубокими продольными бороздками и покрывают все брюшко (рис. 289, г). Голова крупная. Передний край ее между глазами (наличник) расширяется впереди и в виде козырька прикрывает основания усиков. Усики постепенно утолщаются к концу и образуют нерезкую булаву (рис. 289,5). Ширина переднеспинки несколько превышает длину и почти равна основанию надкрылий. Предпоследний сегмент брюшка уже остальных. Передние и средние лапки пятичлениковые, задние — четырехчлениковые. На малого хрущака очень похож булавоусый малый хрущак — Tribolium navale F., который отличается рыжеватым цветом и усиками (рис. 289,5), образующими заметную трехчлениковую булаву.
Tinea granella L. — Амбарная моль
Мелкая бабочка (размах крыльев 10—14 мм). Передние крылья узкие, желтовато-пестрые, с темными и коричневыми пятнышками (рис. 290, а). Задние крылья одноцветно-серые, с длинной реснитчатой пятнистой бахромой. Голова покрыта пучками волосков, мохнатая, желтовато-белого цвета. Хоботок короткий. Нижнечелюстные щупики длинные.
Sitotroga cerealella Oliv. — Зерновая моль
Мелкая бабочка (размах крыльев 11 —16 мм). Передние крылья узкие, серовато-желтые, на вершине несколько темнее. Задние крылья также узкие, трапециевидные, серовато-желтого цвета, несколько темнее передних, с очень широкой реснитчатой бахромой по заднему краю. У вершины заднего крыла имеется характерная глубокая полулунная вырезка, резко отличающая зерновую моль от других молей — вредителей продуктов (рис. 290,6). Голова гладкая, не покрытая волосками. Хоботок длинный. Нижнечелюстные щупики короткие. Нижняя поверхность брюшка покрыта золотистыми волосками.
Ephestia kiihniella Zell. — Мельничная, или амбарная, огневка
Небольшая бабочка (размах крыльев 20—25 мм). Передние крылья узкие, но шире брюшка бабочки, свинцово-серые, с двумя поперечными зазубренными полосами более светлого оттенка, окаймленными
29 Зак. 3420. Лабораторный практикум медицинской паразитологии	449
с наружной стороны темноватой линией (рис. 290, в). Задние крылья широкие, почти в два раза шире передних и значительно светлее их, беловатые, с темными жилками, темными наружным и задним краями.
Последний обрамлен длинной реснитчатой бахромой. Чешуйчатый покров челюстных щупиков густой. Брюшко относительно тонкое, густ* иокрытое золотистыми чешуйками.
Plodia interpunctella Hb. — Южная амбарная огневка
Мелкая бабочка (размах крыльев 13—18 мм). Передние крылья узкие, хорошо делятся по своему цвету на две части: от основания и до половины своей длины желтоватые, а с половины и до вершины крыла темно-бурые (рис. 290, а). Две поперечные перевязи свинцово-бурые.
460
Задние крылья широкие, грязно-белые, с коричневым наружным краем и с реснитчатой бахромой по заднему краю. Голова и грудь оранжевого цвета.
Pyralis farinalis L. — Мучная огневка
Не только задние, но и передние крылья широкие, в форме вытянутого треугольника с округленной вершиной. Ярко окрашенные бабочки: передние крылья у основания и у вершины лиловато-коричневые, посередине с широкой зеленовато-желтой полосой. Эти полосы ограничиваются с боков белыми извилистыми линиями, которые переходят и на задние крылья. Последние темно-серого цвета, с более светлым краем. Размах крыльев 20—22,5 мм (рис. 290, д).
Piophila casei L. — Сырная муха
Крылья хорошо развиты. На лапках две присоски (эмподий недоразвит). Костальная жилка крыла (идущая по латеральному краю) перед местом слияния с субкостальной (второй по порядку) имеет перерыв или перетяжку. Тазики ног сближены. Усики со спинной щетинкой.
Рис. 291. Фазы развития Plophha easel, а — личинка, б — ложный кокон, в —куколка, г —самка.
Лоб у обоих полов широкий, яйцеклад самки (рис. 291, г) мягкий, втяжной. Цвет мухи черный; голова и, как правило, средняя пара ног желтого цвета. Длина тела 2—3,5 мм. Встречается на сыре, ветчине, соленой рыбе, где развиваются ее личинки.
Личиночная фаза
Личинка Tenebrio molitor
Личинка крупная, до 30 мм длиной, с твердым хитиновым покровом. Голова крупная, с хорошо заметными усиками и сильно развитыми ротовыми органами.
Имеются 3 пары членистых грудных ног, каждая из которых оканчивается коготком. Личинка полосатая, желтого цвета, с более темными
29*
451
коричневыми поперечными полосами, кажется голой, хотя на вентральной поверхности, на боках грудных и первых брюшных сегментов, а также на последних сегментах тела есть редкие волоски. Второй и третий грудные сегменты уже остальных. Первые четыре сегмента тела имеют более темные коричневые полосы по переднему и заднему краям, сегменты V—IX лишь с заднекрайней темной полосой, сегменты X—XII коричневой окраски, с белой передней полосой. Последний сегмент оканчивается двумя загнутыми кверху шипами, позади которых, с боков, имеется по одному шипику (рис. 292, а).
Личинка Calandra granaria
Личинка не более 3 мм длиной, безногая Ч Тело голое, без волосков, кремово-белого цвета, согнутое на брюшную сторону, толстое, мягкой и рыхлой консистенции. Голова небольшая, желтого цвета (рис. 292,6 и 61).
Гусеница Ephestia kiihniella
Личиночная фаза бабочек, называемая гусеницей, отличается тем, что кроме хорошо выраженных трех пар членистых грудных ног имеет еще 5 пар брюшных ног. Последние не членистые, в виде выступов, с кружком крючков на конце (рис. 292, в).
Гусеница мельничной огневки до 15 мм длиной, одноцветная, кремово-белая. На дорзальной поверхности тела с каждой стороны расположены три продольных ряда волосков. У основания волосков ясно видны рыжеватые пятнышки. Голова сильно хитинизирована, темно-коричневого цвета. Такого же цвета затылочный щиток, расположенный на первом грудном сегменте и разделенный продольно более светлой полоской. Последний и предпоследний сегменты тела покрыты с дорзальной поверхности анальным щитком светло-коричневого цвета, менее хитинизированным, чем затылочный щиток. Анальный щиток делится поперечной линией на две части: большую, заднюю и меньшую, переднюю.
Личинка Piophila easel
В отличие от личинки жуков и гусеницы бабочек, личинка мух не имеет головы; головной, наиболее узкий, сегмент содержит ярко выделяющиеся, сильно хитинизированные голово-глоточные крючки, или склериты. На заднем, наиболее широком конце тела расположены особые возвышения, несущие дыхальца. Личинка сырной мухи молочно-белого цвета, что зависит от обильных скоплений жирового тела, просвечивающих сквозь почти прозрачную кутикулу. Головной конец имеет 2 двучлениковых сяжка. Ротовые органы в виде черных крючков.
Поверхность кутикулы со спинной стороны гладкая; брюшные сегменты с вентральной стороны имеют мелкие зубчики, расположенные по заднему их краю в три ряда. На заднем конце тела два дорзальных выроста, по бокам — два широких зубца и между ними пара желтых бугорков с дыхальцами (рис. 291, а). В связи с исключительной устойчивостью к воздействию химических агентов и, в частности, способностью жить и размножаться в соленой рыбе, сыре и других продуктах, содержащих большое количество поваренной соли, личинка сырной мухи
1 Возможно, что отсутствие ног у личинки долгоносика связано с развитием насекомого внутри зерен. Подобную зависимость можно увидеть и у гороховой зерновки: мигрирующие личинки первой стадии снабжены ногами, а личинки второй стадии, живущие внутри бобов, безноги.
452
Рис. 292. Неполовозрелые фазы насекомых—амбарных вредителей.
л —личинка и г —куколка Tenebrlo molitor, б—личинка, б!—то же, в зерне, и б —куколка Calandra granaria; в —гусеница и г —куколка Ephestia kUhniella.
30 Зак. 3420. Лабораторные практикум медицинской паразитологии
имеет исключительно толстую кутикулу. Не менее интересным приспособлением личинок к весьма своеобразным условиям их жизни является способность передвигаться значительными прыжками, до 30 см в длину. Для этого личинка, подгибая задний конец тела, цепляется ротовыми крючками за впадины между бугорками, несущими дыхальца, и затем с силой выпрямляется, что и сопровождается прыжком. Обычно личинки выпрыгивают из бочек с соленой рыбой, за что и названы «прыгунами». Куколки сырной мухи не обладают даже незначительной долей той устойчивости к влаге, которая свойственна личинке.
Куколочная фаза
Куколка Tenebrio molitor
Как и у всех жуков, куколка мучного хрущака похожа уже на взрослое насекомое; куколочная оболочка окружает все части тела формирующегося насекомого, повторяя их контуры, как перчатка. Это так называемая свободная куколка (pupa libera, рис. 292, г), обладающая подвижностью головы, придатков и почти всех брюшных сегментов, кроме последних.
Куколка мучного хрущака до 20 мм длиной, одноцветная, светло-желтая. Голова крупная, без хоботка. Переднеспинка впереди и на боках несет ряд мелких шипиков. Брюшные сегменты имеют с боковых сторон широкие выросты, каждый из которых вооружен гребнем крепких шипов. На вентральной поверхности задних брюшных сегментов также имеются мелкие заднекрайние шипики. Брюшко оканчивается двумя острыми крючками, изогнутыми кнаружи. У куколки можно рассмотреть зачатки ног, крыльев, усиков и других органов формирующегося насекомого.
Куколка Calandra granaria
Куколка около 3—4 мм длиной, кремового цвета. Голова уже имеет длинный хоботок, большею частью прилегающий к вентральной поверхности тела. У основания хоботка прикрепляются коленчато-булавовидные усики, обычно лежащие своей булавой на бедрах передних ног. С дорзальной стороны видна более или менее сформировавшаяся крупная переднеспинка, занимающая около трети длины тела, с формирующейся характерной для долгоносика пунктировкой (рис. 292, д).
Куколка Ephestia kuhniella
В отличие от жуков, куколочная оболочка бабочек окружает тело будущего насекомого общим чехлом. Это так называемая покрытая куколка (pupa obtecta, рис. 292, е), у которой подвижны только некоторые сегменты брюшка.
Куколка мельничной огневки желтовато-коричневого цвета, стройная, 10 мм длиной. В отличие от куколки хлебной моли, шипики на спинной стороне брюшка отсутствуют. На конце брюшка имеется пучок длинных крючочков, со спиральным завитком. Парные зачатки хоботка длинные. Между ними, в отличие от южной амбарной огневки, отсутствует зачаток губных щупиков.
454
Куколка Piophila casei
У сырной мухи, как и у всех мух, шкурка последней личинки не сбрасывается, а лишь уплотняется; внутри этого ложного кокона, или пупария, происходит формирование куколки, а затем и половозрелой фазы. Эта куколка, по существу, свободная (рис. 291, б, в); однако, поскольку она заключена в ложный кокон, часто выделяется в особую группу ложных, или бочковидных, куколок (pupa coaretata). Куколки сырной мухи обычно обнаруживаются в сухих местах. Они весьма чувствительны к влаге и, в противоположность личинкам (стр. 452), не могут переносить пребывания в растворе поваренной соли.
* *
Для определения насекомых удобно пользоваться 10—12-кратной лупой, которую держат близко к глазу, примерно на расстоянии очков. Ниже даются таблицы для определения фаз развития клещей и насекомых, взрослых жуков и бабочек и некоторых семейств мучных клещей.
ОПРЕДЕЛИТЕЛЬНАЯ ТАБЛИЦА ФАЗ РАЗВИТИЯ КЛЕЩЕЙ И НАСЕКОМЫХ
1 (16). Вредители подвижны.
2(7). Тело червеобразное.
3	(4). Голова отсутствует........................Личинка мух.
4(3). Голова имеется.
5	( 6). 3 пары грудных ног и 5 пар брюшных, так называемых ложных ножек........................Гусеница бабочек (рис. 292,в).
6(5). Только 3 пары грудных ног; у некоторых личинок, живущих внутри зерен, ноги отсутствуют. Личинка жуков (рис. 292, а, б).
7(2). Тело не червеобразное.
8	(13). Длина тела больше 1 мм. Крылья имеются. Тело ясно разделено на голову, грудь и брюшко. Голова имеет усики, глаза и ротовые органы. Грудь, состоящая из 3 отделов, несет 3 пары ног и, большею частью, две пары крыльев.
9	(10). Одна пара перепончатых крыльев. Взрослые мухи (рис. 291, г). 10 (9). Две пары крыльев.
11	(12). Обе пары крыльев перепончатые, покрытые чешуйками. Ротовые органы сосущего типа. . Взрослые бабочки (рис. 290).
12	(И). Передняя пара крыльев твердая, очень сильно хитинизирован-ная, задняя пара перепончатая, иногда отсутствует. Ротовые органы грызущего типа. . Взрослые жуки (рис. 287, 289), 13 ( 8). Длина тела не больше 1 мм. Крылья отсутствуют. Тело большей частью разделено на головогрудь и брюшко поперечной бороздой. Иногда головогрудь не отделена от брюшка. Усики отсутствуют.
14	(15). 3 пары ног......................Личинка мучных клещей.
15	(14). 4 пары ног. Взрослые мучные клещи или их нимфы (рис. 286). 16 ( 1), Вредители в фазе куколки неподвижны или малоподвижны. 17 (18). Куколка бочковидная.......................Куколка мух.
18	(17). Куколка не бочковидная.
19	(20). Куколка покрытая: все части тела формирующегося взрослого насекомого покрыты общей оболочкой; конечности свободно от тела не отстают.......................Куколка бабочек (рис. 292).
20	(19). Куколка свободная: оболочка покрывает тело и все конечности не общим чехлом, каждую конечность в отдельности, подобно перчатке. ..... Куколка жуков (рис. 292, г, д).
30*
455
1 2
3
4
5
6
7
8
9 10
11
12
13
ОПРЕДЕЛИТЕЛЬНАЯ ТАБЛИЦА ВЗРОСЛЫХ ЖУКОВ1
(20). Тело узкое, удлиненное.
(19). Переднеспинка относительно крупная, лишь в 2—З’/а раза короче надкрылий, или еще крупнее.
( 6). Голова вытянута в виде длинного тонкого хоботка, или голово-трубки. Переднеспинка немного, примерно на */з своей длины, короче надкрыльев. Коленчатые усики с длинным основным члеником и яйцевидной заостренной булавой, прикреплены у основания хоботка. Тело не плоское, в дорзо-вентральном сечении почти круглое, 3—5 мм длины. Лапки на всех ногах четырехчлениковые.
( 5). Темно-коричневый или черный, одноцветный, блестящий; усики и ноги несколько светлее. Переднеспинка в крупных продолговатых ямках, в виде запятых. Надкрылья с глубокими бороздками. Перепончатые крылья недоразвиты (рис. 288, а) . . . ..................Calandra granaria L. — Амбарный долгоносик.
( 4). Темно-коричневый, с 4 красноватыми пятнами на надкрыльях. Матовый. Переднеспинка густо покрыта круглыми ямками в виде точек. Надкрылья в точечных бороздках, с узкими промежутками у основания. Перепончатые крылья вполне развиты (рис. 288,6) . . . Calandra oryzae L. — Рисовый долгоносик.
( 3). Голова не вытянута в виде длинного тонкого хоботка. Переднеспинка значительно, не менее чем в два раза, короче надкрылий. Тело плоское или уплощенное, 1,5—15 мм длины. Лапки на передних и средних ногах пятичлениковые.
(14). Передний край головы между глазами (наличник) не расширен в виде козырька. Лапки на задних ногах пятичлениковые. Тело плоское.
( 9). Крупный, 7—11 мм длины. Темно-коричневый, почти черный, блестящий, с очень плоским, как бы приплюснутым телом. Передние углы переднеспинки в виде больших острых, направленных вперед выступов. Лапки с укороченным первым члеником (рис. 288, е) . . . Тenebrioides maurltanicus L. — Мавританская козявка.
( 8). Мелкие, 1,5—3,5 мм длины; красновато-коричневые.
(11). Бока переднеспинки зазубрены, с 6 большими зубцами с каждой стороны; переднеспинка сверху с 2 широкими впадинами. Усики с ясной трехчлениковой булавой на конце. Длина тела 2,5—3,5 мм (рис. 288, д)..........................Oryzaephilus
surinamensis L. — Суринамский мукоед.
(10). Боковой край переднеспинки прямой, без зубцов; верх без впадин. Усики длинные, нитевидные.
(13). Переднеспинка почти квадратной формы; ее передние углы чуть приострены и как бы отогнуты в стороны. Усики длинные, такой же длины, как и сам жук. Длина тела 1,5—2,5 мм . . . ....................Laemophloeus testaceus F. — Рыжий мукоед.
(12). Переднеспинка к основанию заметно суживается. Усики короткие, не длиннее половины тела. Длина тела 1,5—2,2 мм (рис. 289, а) . . . Laemophloeus ferrugineus Steph. — Короткоусый рыжий мукоед. * Е.
по жукам и бабочкам составлены
1 Определительные таблицы
Е. В. Зверезомб-Зубовскому (1925).
456
в основном по
и
15
16
17
18
19
20
21
22
23
24
25
26
27
( 7). Передний край головы между глазами (наличник) расти* ряется впереди в виде козырька, прикрывающего сверху осно-вание усиков. Лапки на задних ногах четырехчлениковые. Тело лишь немного уплощенное. Предпоследний сегмент брюшка уже остальных.
(16). Черные крупные жуки, плоско выпуклые, со слабым блеском. Длина тела 13—15 мм (рис. 287) . . Tenebrio molitor L.— Мучной хрущак.
(15). Жуки мелкие, длиною 3—4,5 мм; светлоокрашенные. Передние голени слегка расширены на концах.
(18). Коричневый. Усики утолщаются к концу постепенно (рис. 289,5) . . . Tribolium confusum Duv.—Малый хрущак.
(17). Рыжеватый. Усики утолщаются к концу с довольно резким переходом. Три последних членика усиков образуют заметную булаву (рис. 289,5)...................................Tribolium
navale F. (ferrugineum F). — Булавоусый малый хрущак.
( 2). Переднеспинка мелкая, в 5 раз короче надкрылий, сбоку треугольной формы и со спинной стороны с 4 пушистыми бугор* ками. Длина тела 3,5—4,5 мм . . . Ptinus fur L. (самец).— Притворяшка-вор.
( 1). Тело широкое.
(24). Надкрылья укороченные, далеко не прикрывают брюшка. Голова сзади слегка сужена и наклонена вниз. Усики нитевидные, прикреплены к выемке переднего края больших выпуклых глаз. Задние ноги значительно длиннее передних. Тело короткое, широкое, почти овальное. Все лапки четырехчлениковые.
(23). Ширина переднеспинки почти в Р/г раза более своей длины. Пестро-мраморный; беловатые пятна на надкрыльях образуют косые полоски. Последнее верхнее полукольцо брюшка с 2 большими яйцевидными, непокрытыми волосками, черными пятнами. Длина тела 4—5 мм (рис. 288, в) .... Bruchus pisorum L. — Гороховая зерновка.
(22). Ширина треугольной переднеспинки у основания почти равна длине. Темно-бурый; надкрылья в темных пятнах, имеют по 10 продольных бороздок, покрыты желтоватыми волосками. Длина тела 2,5—3 мм (рис. 288, г) . . . Acanthoscelides obtectus Say. — Фасолевая зерновка.
(21). Надкрылья длинные, прикрывают все брюшко; передние и средние лапки пятичлениковые, а задние четырехчлениковые.
(26). Переднеспинка большая, сзади такой же ширины, как надкрылья, надвигается на голову капором. Голова до самых глаз втянута в переднегрудь и сверху не видна. Усики нитевидные, с 3 длинными последними члениками. Тело широко цилиндрическое, коренастое, плотное, покрыто густым пушком. Длина тела 2—3 мм (рис. 289, в).............................Sitodrepa
panicea L. — Хлебный точильщик.
(25). Переднеспинка маленькая, шееобразно сужена, сбоку почти треугольной формы. Голова заметна сверху. Усики нитевидные, длина члеников примерно одинаковая. Тело яйцевидное.
(28). Темно-коричневый. Надкрылья (каждое) с двумя беловатыми пятнами, покрыты темными, слегка желтоватыми волосками. На дорзальной стороне переднеспинки четыре пушистых желтоватых бугорка. Походят на паучков. Длина тела 2,5—3,5 мм (рис. 289, б) . . . Ptinus fur L. (самка) — Притворяшка-вор.
457
28 (27). Желтый, чуть блестит подобно шелку. Надкрылья одноцветные, густо покрыты желтыми волосками. На дорзальной стороне переднеспинки бугорков нет. Длина тела 3—3,5 мм . . . . . . Niptus hololeucus Fald. — Шелковистый притворяшка.
ОПРЕДЕЛИТЕЛЬНАЯ ТАБЛИЦА ВЗРОСЛЫХ БАБОЧЕК
1 (10). Бабочки мелкие, напоминают моль; размах крыльев до 22,5 мм.
2(9). Передние крылья узкие, почти такой же ширины, как и брюшко бабочки.
3(6). Задние крылья узкие, с очень длинной реснитчатой бахромой по заднему краю крыла.
4(5). Заднее крыло вытянуто, овальное, заостренное. Голова мохнатая, желтовато-белая. Хоботок короткий (рис. 290, а) . . . ................................Tinea	granella L. — Амбарная моль.
5(4). Заднее крыло удлинено, трапециевидное; задний край его у вершины с глубокой полулунной вырезкой. Голова гладкая. Хоботок длинный (рис. 290, б) . . . Sitotroga cerealella Oliv.— Зерновая моль.
6(3). Задние крылья широкие, значительно шире передних, с менее длинной реснитчатой бахромой по заднему краю крыла.
7(8). Передние крылья пепельно-серые, с двумя более светлыми поперечными линиями; с наружной стороны, вдоль каждой из этих линий, идет черноватая каемка. Задние крылья беловатые, с более темными жилками и наружным краем. Размах крыльев 15—20 мм (рис. 290, в) . . . Ephestia kuhniella Zell. — Мельничная, или амбарная, огневка.
8(7). Передние крылья в основной части желтоватые, в вершинной ржаво-желтые с темно-бурым рисунком. Две поперечные перевязи свинцово-серые. Задние крылья грязно-белые с коричневатым наружным краем. Размах крыльев	10—15 мм.
(рис. 290, г) . . . Plodia interpunctella Hb. — Южная амбарная огневка.
9(2). Передние крылья широкие, почти треугольные, с округленной вершиной, ярко окрашенные, лиловато-коричневые. Две поперечные белые линии ограничивают широкое зеленовато-желтое поле посередине крыла. Эти линии переходят и на задние крылья. Последние темно-серого цвета, с более светлым краем. В размахе 20—22,5 мм (рис. 290, д) . . . Pyralis farina-Us L. — 1Мучная огневка.
10 ( 1). Бабочка крупная, размах крыльев 30—35 мм. Передние крылья бледно-коричневые, в средней части с более темной полосой, по сторонам которой лежат светлые пятна с темными ободками, ближе к основанию крыла короткая черная продольная черта. Задние крылья одноцветные, серые, с коричневатым оттенком ...........................Hadena	basilinea F. — Зерновая совка.
ОПРЕДЕЛИТЕЛЬНАЯ ТАБЛИЦА НЕКОТОРЫХ СЕМЕЙСТВ МУЧНЫХ КЛЕЩЕЙ
1 (2). Щупики нижних челюстей превращены в крупные хватательные щипцы . . . Хищные клещи семейства Cheyletidae. Пример: Cheyletus eruditus Schrk. (рис. 286,(9).
2(1). Щупики нижних челюстей не превращены в хватательные щипцы.
3(8). Тело не сегментировано.
458
4 (5). Тело нерасчлененное . . .Волосатые клещи семейства Gly-cyphagidae. Пример: Glycyphagus destructor Schrk. (рис. 286, г). 5(4). Тело явственно разделено поперечной бороздой на передний и задний отделы.
6(7). Передний отдел тела меньше заднего . . . Мучные клещи семейства Tyroglyphtdae. Пример: Tyroglyphus farinae L. (рис. 286, а, б, в).
7(6). Передний отдел тела значительно больше заднего . . . Пузатые клещи семейства Pediculoidtdae (самцы). Пример: Самец Pediculoides ventricosus Newp.
8 ( 3) Задняя часть тела (гистеросома) явственно сегментирована..^ Пузатые клещи семейства Pediculoidtdae (самки). Пример: самка Pediculoides ventricosus Newp. (рис. 286, е, ж).
ЛИТЕРАТУРА
Захваткин А. А. Определитель клещей, вредящих сельскохозяйственным продуктам в СССР. Уч. зап. МГУ. Зоология, в. 42, изд. МГУ, 1940.
Захваткин А. А. Тироглифоидные клещи (Tyroglyphoidea). Фауна СССР, Паукообразные, т. 6, в. 1, изд. АН СССР, 1941.
Зверезомб-Зубовский Е. В. Определитель главнейших насекомых, встречающихся в зерне и зерновых продуктах. М.—Л., 1925.
Иванова 3. В. Амбарные вредители и меры борьбы с ними. Сельхозгиз, М., 1949.
Ион О. И. Сырная муха (Piophila casei L). Научный очерк. Изд. «Мир знаний», Пб., 1922.
Кременецкий Н. Г. Оборудование курса зоологии педвузов. Учпедгиз, 1938.
Родендорф Б. Б. Определитель хищных и пузатых клещей (Cheyletidae и Pedicu-loidae). Уч. зап. МГУ. Зоология, вып. 42, М., 1940.
Румянцев П. Д. Амбарные вредители и меры борьбы с ними. Заготиздат, М., 1940. Румянцев П. Д. и Холин С. С. Таблицы — определители вредных клещей, насекомых и сорняков, встречающихся в зернопродуктах. Изд. Сан. упр. РККА, М.» 1938.
Сах а рсл Н. Л. Вредители рыбных продуктов Астраханского рыбного промысла. Саратов, 1921.
Шевченко М. И. Защита зерна от вредителей при хранении. Сельхозгиз, М.—Л^ 1954.
Шорохов П. И. и Шорохов С. И. Вредители запасов зерна и зерновых продуктов-Сельхозгиз. М . 1938.
ГРЫЗУНЫ —ОТРЯД GLIRES
Значение грызунов как хозяев паразитов и как резервуаров возбудителей ряда болезней человека и домашних животных очень большое. В связи с проводимыми в соответствующих направлениях работами необходимо более углубленное ознакомление с этими млекопитающими. Поэтому здесь, наряду с методикой изготовления и хранения препаратов, даются также общие сведения по морфологии, систематике и экологии некоторых видов грызунов, важных в эпидемиологическом отношении.
СБОР И ПОДГОТОВКА МАТЕРИАЛА
Для занятий необходимо следующее: 1) циркуль-измеритель с миллиметровой линейкой или штанген-циркуль (большой, 200—250 мм, с нониусом); 2) лупа; 3) тушки1 15—20 видов грызунов; 4) таблицы (вскрытый грызун-крыса, половая система самца и самки крысы, резец грызуна, коренные зубы мышей и полёвок, череп крысы, полёвки, сурка, зайца).
1 Тушкой у зоологов называется набитая шкурка с привязанным к ней черепом и этикеткой.
459
Для определения нужны шкурки и черепа наиболее распространенных видов грызунов. Они могут быть снабжены этикеткой, с указанием основных промеров, пола, даты и т. д., но без названия вида.
Сбор материала и изготовление тушек следует делать заблаговременно до занятий. Материал можно получить путем отлова грызунов в природе, а также через дератизационные пункты (крыса, домовая мышь). На занятиях используются только здоровые грызуны. Наиболее удобны для отлова многих широко распространенных грызунов в природе ловушки-давилки (плашки, крысоловки). Они бывают трех размеров: малые, средние и большие. В зависимости от вида, размеров грызуна пользуются теми или другими, но наиболее употребительны средние и большие. Часто применяют также живоловки и дуговые капканчики (для более крупных животных), а в некоторых случаях, особенно при обилии грызунов, подручные средства: высокие металлические банки (40—50 см), цветочные горшки и т. д.
Прежде чем приступить к обработке материала, у добытых животных делают измерения длины тела, хвоста, задней ступни и уха, которые записывают на этикетке (см. ниже). Предварительно, если на шкурке имеются следы крови и грязи, мех обмывают водой и высушивают картофельной мукой. Препаровать начинают с проведения разреза на брюшной стороне. Для этого грызуна кладут на спину, брюшком кверху, головой к левой руке препаратора и, приподняв пинцетом кожу около анального отверстия, разрезают ее до заднего конца грудной кости острым скальпелем (держать лезвием кверху!) или тонкими ножницами, которые подводят снизу. Необходимо обращать внимание на то, чтобы разрез на брюшке затрагивал только кожу, но не мышцы, так как жидкость, выступившая из брюшной полости, будет пачкать шкурку и мешать работе. Далее отделяют кожу от тушки сперва с одного, а после с другого бока, пока не достигнут коленных суставов. Ножницами или скальпелем перерезают коленное сочленение и вытягивают лапку. То же проделывают и с другой конечностью. Затем осторожно продолжают отделение кожи от тушки. Когда снизу под тушкой вся кожа будет отделена в области заднепроходного отверстия, отделяют кожу от прямой кишки зверька; тщательно отделяют кожу вокруг хвоста так, чтобы она прилегала только к позвонкам его корня. Затем правой рукой^ крепко берут основание хвоста, а пинцетом или ногтями большого и указательного пальцев левой руки захватывают кожу вокруг него и тянут позвоночник, удерживая завернутую кожу. Сперва позвонки из хвоста вытягиваются довольно туго, но потом выдергиваются сразу, как из чехла. Нельзя только очень сильно сжимать позвонки и тянуть резко — это приводит к обрыву хвоста. Освободив хвост, выворачивают шкурку чулком до передних конечностей, стараясь ее не растягивать. Передние конечности перерезаются в локтевом суставе, после чего шкурка выворачивается чулком сперва с шеи, а затем с головы. Ушные хрящи отрезаются как можно ближе к черепу, осторожно подрезается перепонка у глаз. Весьма осторожно, по самому краю подрезаются губы, и шкурка остается прикрепленной к черепу только в области носового хряща. Перерезая хрящ, шкурку полностью освобождают от тушки.
Далее шкурку очищают от кусочков мяса, остатков подкожного жира и соединительнотканных пленок, удаляют мышцы с костей передних и задних конечностей. В хвост вставляют смоченную мышьяковистым натром тонко выструганную палочку, несколько большей длины, чем хвостовой отдел позвоночника, так, чтобы палочка выдавалась наружу. Подготовленная таким образом шкурка тщательно смазывается водным раствором мышьяковистого натра (ядовит!) и выворачивается мехом 460
наружу. Кости, оставшиеся при шкурке, обматывают небольшим количеством ваты, придавая ей форму бывшей здесь мускулатуры. Из ваты же скатывается подобие туловища с заостренным передним концом. Пин* детом захватывают этот комок и вводят через разрез в шкурку, пока он не достигнет головы. Здесь подтягивают вату вперед через рот. Голове придают ее естественную форму, в случае необходимости добавляют небольшие комочки ваты. Их добавляют и в разные части туловища. Передний конец хвостовой палочки закрепляется в вате ближе к брюшной стороне, чем к спинной. Окончив набивку, зашивают брюшной разрез шнуровочным швом, и тушка готова. Пока она не высохла, ей придают нужную форму, сжимая ее пальцами. Приготовленную тушку укладывают для просушки на доску или пробковую пластинку. Расправляют уши. Передние конечности вытягивают прямо вперед, задние — назад. В таком положении тушку прикалывают булавками. Сушат в затемненном месте, на ветру, но не на солнце.
Череп вываривают и очищают. Вываривают на медленном огне в воде с добавлением щелочи (сода, поташ) для ускорения отделения мяса от костей и частичного их обезжиривания. Окончание варки определяется по степени отделения мышц от костей. Здесь следует быть очень внимательным, так как этот момент при обработке мелких черепов легко пропустить, и тогда череп начинает распадаться на отдельные кости. Очистка производится с помощью глазного пинцета, скальпеля, препаровальных игл и зубной щетки. Особенно внимательным следует быть при очистке крыловидной области, слезных костей и скуловых дуг. Очищенный череп кладут для отбелки в 2—3% раствор перекиси водорода, где держат не более 2—3 часов (в зависимости от величины).
Отпрепароваиные черепа мелких грызунов хранят под одним номером со шкуркой в стеклянных пробирках или цилиндрах с пробкой, а черепа более крупных грызунов привязывают нитками к задним конечностям шкурки. Готовые тушки хранят в плотно закрытых деревянных коробках, тщательно оберегая от порчи молью. Для этого в углы коробки кладут марлевые мешочки с нафталином. Можно сохранять добытых грызунов цельными в формалине или спирте; 40% формалин для этой цели разводится в десять раз водой. Недостатками такого рода фиксации являются сильное уплотнение тканей и разрушение костей при долгом хранении, резкий запах жидкости. (При дальнейшей работе формалиновые препараты промывают водой с добавлением аммиака, разрушающего формалин). Спирт для фиксации употребляется не ниже 75—80%. В том и другом случае перед опусканием грызуна в жидкость у него вскрывают брюшную стенку для более быстрого проникновения консервирующей жидкости к внутренним органам.
НАРУЖНАЯ АНАТОМИЯ
Грызуны — весьма обособленный отряд млекопитающих с характерным строением зубной системы. Их долотообразные резцы имеют незамкнутый корень и растут у животного всю жизнь, стираясь по мере стачивания. При этом режущая поверхность всегда остается острой, так как передняя поверхность резца, покрытая твердой эмалью, стирается медленнее, чем более мягкая дентиновая часть. На боковой и задней поверхности резца эмали нет (рис. 293). Большинство грызунов имеет по одной паре резцов в верхней и нижней челюсти. Исключение составляют зайцы и пищухи с четырьмя резцами в верхней челюсти (за передней парой резцов находится пара задних). Клыки всегда отсутствуют,, и между резцами и коренными зубами виден беззубый промежуток —
461
диастема. Коренные зубы, как правило, имеют короткую коронку с жевательной поверхностью, покрытую бугорками. У некоторых грызунов
коронка удлиняется, корни полностью редуцируются, а жевательная поверхность с эмалевыми петлями различной конфигурации становится плоской. Ушные кости образуют значительные вздутия — барабанные
камеры.
Внешнее и внутреннее строение млекопитающих, в частности, грызунов, рассматривается в руководствах по зоологии (П. П. Гамбарян и Н. М. Дукельская, 1955; Е. Н. Павловский, 1938; П. В. Терентьев, 1948; П. В. Терентьев, В. Б. Дубинин и Г. А. Новиков, 1952). Здесь отметим лишь некоторые особенности, более характерные для грызунов.
Головной мозг с относительно гладкими полушариями, не прикры
вающими сильно развитый мозжечок, который несет на своей поверхности складки. Ключицы нередко сильно редуцированы. Желудок простой. Кишечник значительной длины, обычно с хо-
«а заднем конце, 4 — поверхность стирания.
рошо развитой слепой кишкой (отсутствующей лишь у сонь). Семенники располагаются постоянно в брюшной полости или в паховом мешке, реже в мошонке. Матка двурогая. Плацента отпадающая, дискоидальная.
Череп (рис. 294) состоит из двух частей, соединенных друг с другом: собственно черепа и нижней челюсти. Можно также различать в черепе лицевую часть (кости, окружающие рот, и носовую полость) и мозговую — содержащую мозг.
В лицевой части сверху различаем выдающиеся вперед носовые кости, снизу и с боков —
межчелюстные, на которых располагаются
резцы. У грызунов эта часть называется ростральной, или рострум. Под носовыми костями расположено большое носовое отверстие. Сзади
к межчелюстным костям присоединяются верхнечелюстные кости с коренными зубами, отделенными от резцов диастемой (рис. 294), сверху которых находятся лобные кости (7), суженные над глазными впадинами (орбитами), образующими межглазничный промежуток. Верхнечелюстные кости имеют направленные назад скуловые отростки. Нижняя часть их вместе с нёбной костью образует костное нёбо с нёбными отверстиями, иногда соединенными бороздкой с резцовым. По бокам рострума, пронизывая верхнечелюстные кости и выходя в глазничные впадины, находятся хорошо развитые у грызунов подглазничные отверстия. В нижней части этих отверстий проходит лицевая ветвь тройничного нерва, а в верхней — верхняя ветвь жевательного мускула. В переднем углу орбит располагается небольшая слезная косточка (легко отпадает при препаровке).
У некоторых грызунов (сем. беличьих и др.) лобные кости с боков образуют надглазничные отростки, защищающие глаза сверху. Эти кости являются также крышей мозговой коробки, образованной главным образом парными теменными (19) и межтеменной костями. Сзади и отчасти снизу черепа находится большая затылочная кость, образованная за счет срастания верхнезатылочной, двух боковых костей и основной затылочной кости. Затылочная кость имеет затылочное отверстие, через него головной мозг соединяется со спинным. По бокахМ этого отверстия находятся два мыщелка, которыми череп сочленяется с позвоночником, здесь же помещаются затылочные отростки. По бокам мозговой коробки расположены чешуйчатые кости, с направленными вперед скуловыми
-462
отростками верхнечелюстных костей; они образуют по бокам глазниц скуловые дуги черепа.
Скуловые отростки чешуйчатой кости на своих нижних поверхностях имеют сочленовные ямки, где к черепу причленяется нижняя челюсть. В задней боковой части чешуйчатые кости образуют вырезку или отверстие, через которое видны слуховые кости. По бокам затылочной кости располагается слуховая область черепа, состоящая из входящей в мозговую коробку каменистой кости с заключенным в нее лабиринтом и
Рис. 294. Главнейшие кости черепа общественной полевки.
А — вид снизу, Б —сверху, В —сбоку. 1 — барабанные камеры, 2 — верхнезатылочная кость, 3 — верхнечелюстная кость, 4 — затылочный мыщелок, 5 — коренные зубы, 6 — крыловидный отросток, 7 —лобная кость, 8 — нёбная, 9 —носовая, 10 — основная клиновидная, // — основная затылочная, 12— резцы, 13 — резцовые отверстия, 14 — слезная кость, 15 — скуловая, 16 — скуловой отросток верхнечелюстной кости, /7 —слуховой проход, 18 — сосцевидная кость, /9 —теменная, 20— межчелюстная, 2/— чешуйчатая,	22 — параокципитальный отросток,
23 — межтеменная кость. (По Б. С. Виноградову с изменениями).
соединенной с ней сосцевидной костью. К этим костям прирастает сильно развитая барабанная кость, образующая пузыревидные вздутия, или барабанные камеры со слуховым проходом, иногда вытянутым в трубку и заканчивающимся наружным слуховым отверстием. Внутри барабанных камер находится среднее ухо, полость которого несет слуховые косточки (молоточек, наковальню, стремя) и барабанную перепонку.
В нижней части черепа, кпереди от основной части затылочной кости, находится основная клиновидная кость с большими крыловидными
463
выростами. Впереди ее располагается передняя клиновидная кость с малыми крыловидными отростками по краям, с отверстиями для зрительного нерва. Клиновидные кости в задней части нёбной области имеют небольшие, направленные к нёбной кости отростки, которые, соединяясь с мелкими крыловидными косточками, образуют крыловидные отростки. Часть больших крыловидных выростов основной клиновидной кости составляет крыловидные пластинки, находящиеся кнаружи от крыло-видных отростков. Наружная часть этих пластинок иногда располагается вертикально, а поверхность крыловидных пластинок имеет форму ямки (крыловидные ямки).
Передняя часть дна мозговой капсулы, впереди от клиновидной кости, образована решетчатой костью, пронизанной отверстиями, в которых проходят волоконца обонятельных нервов. К этой кости в носовой
А	Б
Рис. 295. Первый нижний коренной зуб домовой мыши (Л) и обыкновенной полевки (Б).
В
Рис. 296. Схема промеров грызуна.
Л —высота уха, Б —длина задней ступни (Pl), В —длина тела (L), и длина хвоста (С).
полости прирастают тонкие этмоидальные кости, составляющие носовой лабиринт. Сошник и решетчатая кость образуют перегородку носовой полости. Между лобными и теменными костями находится венечный шов, между теменными и затылочной — ламбдовидный, а между носовыми и лобными — лобно-носовой. Часто развивающиеся на черепе гребни носят следующие названия. Гребень посередине лобных костей (продолжение лобного шва), идущий иногда назад по теменным костям до затылочных, называется сагиттальным, а гребень на границе затылочных костей с чешуйчатыми и межтеменной — ламбдовидным.
Нижняя челюсть состоит из парной кости, в передней части которой находятся резцы, а в верхней — коренные. В задней части челюсти имеются отростки: самый верхний — венечный, ниже — угловой. По бокам ветвей нижней челюсти лежат альвеолярные бугры, образованные корнями резцов. Иногда альвеолярный бугор развит в виде отростка и по размерам почти не уступает сочленовному, расположенному рядом с ним. Характер пищи и способ жевания накладывает на коренные зубы своеобразный отпечаток. Эти зубы имеют бугорчатую или плоскую (иногда образованную вторично в результате стирания бугорков) жевательную поверхность. Коренные зубы разделяются на ложнокоренные и собственно коренные. Большое число ложнокоренных зубов наблюдается у зайцев; у многих грызунов они исчезают совершенно (мыши, полёвки и др.). Собственно коренных бывает не более трех. У ряда грызунов коренные зубы растут в течение всей жизни, компенсируя постоянное стирание. Бугорчатой жевательной поверхностью обладают представи
464
тели семейств мышеобразных и хомякообразных. Полёвки имеют плоскую жевательную поверхность; форма зубов сверху треугольная, сбоку — они как бы состоят из призм. Треугольники (см. сверху) образованы ободком эмали, внутри которой дентин. Эти замкнутые треугольники называют петлями (рис. 295, Б).
Количество зубов разных типов у большинства грызунов остается постоянным для определенных видов, родов и многих семейств. Это один из характерных признаков, на который ссылаются при определении. Количество зубов для краткости обозначают зубными формулами (берется одна сторона черепа) следующим образом: для мыши и крысы— I—1/1, С—0/0, Р—0/0, М—3/3=16; суслика, сурка: I—1/1, С—0/0, Р—2/1, М—3/3 = 22; зайца: 1—2/1, С—0/0, Р—3/2, М—3/3 = 28. Буквы являются начальными латинских названий зубов: резцы — I (Incisivi), клыки — С (Canini), ложнокоренные — Рт или Р (Praemolares), коренные — М (Molares).
Для определения грызунов приходится производить промеры тушек и черепов (рис. 296), главные из которых приводятся ниже. В скобках даны сокращенные обозначения в виде первых букв соответствующих латинских слов (L — Longitudo, С — Cauda, Pl — Plusna, А — Aurum и т. д.). Размеры приводятся в мм. Некоторые из них (длина тела, уха и т. д.) изменяются при снятии шкурки, поэтому их делают до препа-ровкь и записывают на этикетке.
Производятся следующие промеры.
1.	Длина тела — расстояние от конца морды до заднепроходного отверстия по брюшной поверхности тела.
2.	Хвост — от заднепроходного отверстия до конца хвоста, без концевых волос.
3.	Ступня — от пятки до конца самого длинного пальца, без когтя.
4.	Ухо — от нижнего края вырезки при основании до вершины.
5.	Общая длина черепа — от наиболее выдающейся вперед точки черепа до наиболее выступающей назад части.
6.	Кондилобазальная длина черепа (в некоторых руководствах ее называют «длиной черепа>) —от переднего края верхнечелюстной кости до заднего края затылочных мыщелков.
7.	Скуловая ширина — наибольшее расстояние между наружными краями скуловых дуг.
8.	Лицевая часть — от выдающихся между резцами межчелюстных костей до задней стороны альвеолы последнего коренного.
9.	Мозговая часть — от задней стороны альвеолы последних коренных до затылочных мыщелков.
10.	Межглазничный промежуток — наиболее узкое расстояние между орбитами.
11.	Ширина мозговой коробки (она же наибольшая ширина черепа) —между наиболее выступающими по бокам частями черепа, например слуховыми отверстиями барабанных камер или ламбдовидными гребнями; иногда ширину измеряют в области теменных костей или за скуловыми отростками чешуйчатой кости.
12.	Наибольшая высота черепа — от наиболее низкой части барабанных камер до наиболее высокой точки в теменной области.
13.	Диастема (иногда называют «длина носовой части>)—от заднего края альвеолы верхнего резца до переднего края альвеолы первого ложнокоренного или корен*» ного.
14.	Длина ряда коренных зубов (чаще всего используется так называемая альвеолярная) — от основания переднего ложнокоренного до заднего края последнего коренного.
ИЗУЧЕНИЕ МАТЕРИАЛА
Грызуны, представленные большим количеством видов (около 2800), приспособлены к самым разнообразным условиям среды. Среди них есть синантропы; формы, отлично лазающие по деревьям; землерои, с различной степенью адаптации к обитанию в земле; хорошие бегуны, с удлиненными и специализированными задними конечностями; виды, ведущие амфибиотический образ жизни или планирующие в воздухе.
465
Фауна грызунов Советского Союза насчитывает в настоящее время 145 видов (включая завезенных акклиматизированных и лабораторных), относящихся к 13 семействам. Будучи очень широко распространены, грызуны встречаются в самых различных стациях: в тундрах, зоне разнообразных лесов, в степях, пустынях, в горах, реках и озерах. Здесь мы рассмотрим некоторые эпидемиологически важные виды грызунов
МЫШЕОБРАЗНЫЕ —СЕМЕЙСТВО MURID АЕ
Rattus noroegicus Berk. — Серая крыса, или пасюк
Наиболее специализированный, приспособленный к жизни вблизи человека грызун, с широкой и тупой мордой, сравнительно короткой, овальной формы, ушной раковиной, покрытой изредка волосами. Ухо, вытянутое вперед и приложенное к боку морды, не достигает глаза. При основании уха узкая, остроугольная вырезка. На передней и задней конечностях имеются бугорки, носящие название мозолей. Между пальцами, при их основании на задней ступне, имеются небольшие складки кожи (плавательные перепонки). Хвост всегда короче тела, почти голый, с короткими и редкими волосами между чешуйчатыми кольцами, число которых, как правило, не превышет 200. Окраска верхней части тела — серо-бурая или рыжевато-бурая, охристая. Брюшная сторона беловатая. Сосков 10—12. Череп при рассматривании сверху угловатый, благодаря сильно развитым гребням. Верхние кости черепа — теменные и лобные — у взрослых лежат примерно в одной плоскости. По краям теменные кости ограничены прямыми гребнями, почти параллельными друг другу. Длина тела — 150—200 мм, хвоста — 100—220 мм, ступни — 27—44 мм, черепа — 39—45 мм.
Размножение пасюка весьма интенсивно в связи с жизнью в защищенных убежищах, при достаточном корме число пометов в году бывает велико (до пяти). Количество детенышей в помете в среднем 8. В связи с синантропной жизнью пасюк всеяден.
В пределах Советского Союза пасюк распространен в Европейской части (вторично) от Мурманска до Крыма и Закавказья, в Сибири — полосой (преимущественно южная часть, местами северный Казахстан), соединяющей Европейскую часть с Восточной Сибирью, Дальним Востоком и Приморьем (первичный ареал). Отсутствует на громадной территории в зонах тундры, лесотундры и тайги заенисейской Сибири, таежной полосы Западной Сибири и Северного Урала, в пустынях и горах Средней Азии, а также в зоне полупустынь (за исключением нижнего течения таких рек, как Волга, Урал и др.).
Вторичное заселение пасюком Европейской части СССР началось, по-видимому, в XVII в. и шло с Запада, где первые находки его относятся к XVI в. и куда он был завезен из юго-восточной Азии (родственные пасюку виды крыс живут в южном Китае). В границах ареала распределен весьма неравномерно, заселяет природные биотопы (первичный ареал) и, главным образом, населенные пункты.
Серая крыса — наиболее вредный грызун-синантроп. Она уничтожает продукты питания и загрязняет их фекалиями, портит тару и различные товары, иногда нападает на молодых птиц в птичниках и на кроликов. Крысы (пасюк, черная, туркестанская) имеют очень большое эпидемиологическое значение как природные резервуары возбудителей болезней человека и домашних животных.
466
Rattus rattus L. — Черная крыса
Имеет наиболее длинную и узкую морду по сравнению с другими видами крыс. Ушная раковина большая и округлая, снаружи и внутри почти голая, не покрытая волосами. Складок кожи между основаниями пальцев задних конечностей нет. Хвост более густо покрыт волосами и, как правило, длиннее тела, чем отличается от хвоста пасюка. Окраска спины различного цвета, чаще всего двоякая: 1) темно-коричневая или черная, с посветлением на боках (брюшная сторона грязно-серая) или 2) сходная с таковой пасюка, чаще всего светлее (брюшная сторона желтовато-белая). Длина тела 130—190 мм, хвоста—134—228 мм, уха— 18—25 мм, ступни — 29—36 мм. Череп с менее развитыми гребнями, более округлый, с более заостренной носовой частью. Размеры черепа (по А. И. Аргиропуло): общая длина — 37,1—45,5 мм; кондило-базаль-ная длина — 34,9—45 мм; межглазничный промежуток — 5,1—6;4 мм; слуховая ширина — 15,6—17 мм; скуловая ширина 18—22 мм; затылочная высота от основной кости 10—11,5 мм; то же от bulla tympani 12,8—• 15 мм; длина носовых костей 12,2—16,5 мм; длина резцовых отверстий— 6,3—18,1 мм; длина верхней диастемы — 9,3—12,4 мм; ширина темени по гребням — 13,5—15,4 мм; длина шва лба—11 —13,9 мм; длина шва темени — 7—8,2 мм; длина ряда верхних коренных зубов — 6—7,4 мм.
Черная крыса весьма изменчива (на земном шаре описано более 50 географических рас), в нашей стране известны 4 подвида:
1.	Rattus rattus rattus L. — типичная форма, наиболее часто встречаемая, с темной, почти черной, окраской.
2.	Rattus rattus ruthenus Strog. et Ogn. — (Смоленская область) крупнее типичной, с коричневым оттенком верха тела.
3.	Rattus rattus alexandrinus Geoff.— (описана из Египта), окрашена как пасюк и крупнее типичной формы; встречается в некоторых южных портах.
4.	Rattus rattus rufescens Gray—(Индия) с темной рыжеватой окраской; известна с кораблей в Одесском порту.
Родина черной крысы — Индия. Отсюда она расселилась по земному шару, проникнув в Европу раньше пасюка. В СССР распространена спорадически. Как и пасюк, селится преимущественно в постройках, чаще встречается в сельских местностях. Более подвижна и лучше лазает, чем пасюк, чаще заселяет чердаки домов, на юге — даже дупла деревьев. В портах чаще встречается на судах, чем на территории порта. Иногда селится в садах (Крым). Роет норы простого устройства с 3— 4 выходами и 1—2 жилыми камерами и камерой для хранения запасов. Количество пометов бывает меньше, чем у пасюка, 2—3 в году (весной и летом).
Mus muse ulus L. — Домовая мышь
Домовая мышь характеризуется мелкими размерами: длина тела у взрослых не более 120 мм; хвоста — 42—102 мм; задней ступни — 13—19 мм, уха — 10—14 мм. Носовая часть черепа в большинстве случаев укорочена, мозговая коробка большая. Гребневидные оторочки по бокам черепа и межглазничного промежутка, в отличие от черепа крыс, развиваются сравнительно редко. Наиболее характерно наличие на верхних резцах за режущим краем, на внутренней стороне, различно развитого ступенчатого выступа дентина («зубец», рис. 297, Б), отсутствующего у других представителей семейства. В строении коренных зубов характерно увеличение первого верхнего коренного по сравнению со
467
А
Рис. 297. Верхние резцы: кры-хы (4) и домовой мыши (Б).
1 — .зубец".
вторым и третьим. Мех относительно мягкий и густой с длинными и тонкими остями. Окраска очень сильно варьирует, в чем проявляется географическая изменчивость. Индивидуальная изменчивость и сезонный диморфизм меха выражены слабо. Верх тела от светлой, песчано-охристой расцветки до темно-серой и коричневой. Окраска брюшка от чисто белой, без темных оснований волос, до сероватой и пепельной. Граница цветов верха и брюшка не всегда резкая и отчетливая. Молодые особи отличаются более тусклой окраской волос верха тела и меньшим развитием ости. Уши покрыты редкими короткими волосками. Хвост равномерно покрыт волосками, сквозь которые видны чешуйчатые кольца кожи.
В Советском Союза домовая мышь рас
пространена весьма широко, встречается даже в некоторых районах крайнего севера (бухта Тикси).
Описано большое количество подвидов из разных мест Союза. Отметим наиболее резко обособленные:
1.	Mus musculus musculus L. — типичная форма, к которой относятся домовые мыши средней полосы Европейской части Союза. Длина хвоста около 90% длины тела, задняя ступня 15—18 мм; спина буровато-серая, темная; брюхо грязно-серое. Mus musculus tomensis Kaschtsch. из Сибири сходна с упомянутой типичной формой, но с охристо-желтым оттенком брюшка.
2.	Mus musculus hortulanus Nordm. — курганчиковая мышь, характерная для степной полосы — степи юга Европейской части Союза, Западной Сибири и большей части Казахстана. Длина хвоста около 75% длины тела, задняя ступня короче— 14—16,5 мм; верх спины светло-серый, брюшко грязно-белое.
3.	Mus musculus severtzovi Kaschk. — домовая мышь Северцова, распространенная в Средней Азии. Хвост в среднем равен 85—90% длины тела, ступня задней ноги 15—19 мм, окраска верха песчано-желтая, низ — белый.
Ареал домовой мыши подразделяют на три широтные зоны. К югу от линии Мозырь — Воронеж — Борисоглебск — Саратов — Кустанай — Барнаул домовые мыши встречаются круглый год в открытых стациях, успешно перезимовывая и размножаясь в природе. К северу от указанной границы расположена полоса, примерно до линии Ленинград — Великий Устюг — среднее течение реки Оби — Томск, где большая часть популяции обитает только в населенных пунктах. На лето некоторое количество зверьков выселяется из домов деревень и городских окраин в поля и лес, где размножаются успешнее, чем в постройках. Осенью возвращаются в теплые постройки. Севернее этой зоны (в Европейской части Союза до берегов Баренцева моря) домовая мышь целиком зависит от человека, вне построек не наблюдается. Область массового обитания домовых мышей в открытых биотопах занимает южную половину Украины (от границ Румынии на Западе), Крым, степи Нижнего Дона, Предкавказье, нижнее Поволжье и южную часть Казахстана. Здесь места массового обитания распределяются отдельными пятнами и полосами, приуроченными к зарослям бурьянов и сорняков, старым залежам, запущенным участкам огородов, опушкам кустарников и густым зарослям по берегам водоемов. На посевах зерновых мыши живут до уборки, вскоре выселяются в места, лучше защищенные и обеспеченные зерновым кормом, но остаются на полях в случаях, если там оставляются скирды.
Половая зрелость в средней зоне у самок наступает в двухмесячном возрасте при весе 12 г. Размножаются весьма интенсивно Мыши, живу-468
щие в домах, могут давать до 10 пометов в год, по 4—10 молодых в помете. Беременность продолжается около 20 суток, и пометы следуют один за другим с промежутками в 30—35 дней. Для курганчиковой мыши отмечено 3—8 пометов, причем в помете 4—8 детенышей. Эта мышь осенью собирает запасы корма в виде кучки, прикрытой сверху слоем земли. Под таким «курганчиком» находится нора с сетью ходов и гнездовыми камерами. Осенью население курганчика составляет одна пара или семья (до 12 экземпляров); весной в них находили от 1 до 23 зверьков. Постройки с населением выше 15 особей довольно обычны. Этим курганчиковая мышь отличается от серой полёвки. Если последняя при разрастании семьи, расселяясь, избегает скученности, то домовые мыши при обилии корма (зерно курганчика) живут скученно.
Домовая мышь очень восприимчива к туляремии. Вовлекаясь в эпизоотию серых полёвок на гумнах, отсюда заносит инфекцию в жилые дома. Случаи туляремийных заболеваний бытового происхождения, связанные с появлением мышей, отмечались в ряде местностей средней полосы.
Apodemus agrarius Pall. — Полевая мышь, или житник
Хорошо отличается от других видов мышей черной полоской на верхней части тела, проходящей от затылка до основания хвоста. Рыже-вато-охристого или рыжевато-бурого цвета. Брюшко белесое с темными основаниями волос, причем цвет его резко граничит с рыжеватыми боками. Мех более жесткий по сравнению с другими представителями этого рода; у старых экземпляров грубеет, образуя подобие мягких иголочек (у восточно-азиатских особей), основания волос верха тела значительно светлеют. Морда более тупая, чем у близкого вида — лесной мыши, уши также короче, глаза меньше. Лопасть на наружном крае ушной раковины развита слабее, чем у других видов рода. Ступня относительно короткая и широкая, с более короткими и притупленными, чем у лесных мышей, когтями. Хвост составляет около 70% длины тела. Основные промеры: длина тела 100—125 мм, хвоста — 60—90 мм, задней ступни 17—21 мм, уха—11—13,5 мм. Сравнительно небольшой череп (кондилобазальная его длина 25,5—27,5 мм) характерен несколько удлиненной носовой частью (примерно 7з кондилобазальной длины), с хорошо развитыми альвеолярными буграми и относительно большой, овальной, частично приплюснутой мозговой коробкой. Относительно широкий межглазничный промежуток (18% кондилобазальной длины) с хорошо развитыми гребневидными оторочками по краям. Скуловые дуги слабые, довольно широко расставлены, достигают наибольшей ширины обыкновенно посередине. Резцовые отверстия широкие и задний край их иногда доходит до линии, соединяющей альвеолы первых коренных, или лежит впереди от этой линии. Нёбные отверстия лежат примерно на половине длины костного нёба. Барабанные камеры несколько вытянутые. Слуховые отверстия малы.
Полевая мышь широко распространена в Европейской части СССР (лесостепная и степная полоса), за исключением северных районов, в Крыму и в Закавказье. Встречается в Северном Казахстане (на восток до Алма-Ата), в южной Сибири до Иркутска, на Дальнем Востоке, в Китае.
Избегая сплошных лесных, пустынных пространств и открытой засушливой степи, придерживается мест, где поля и луга перемежаются с рощами и садами. В степях обитает в зарослях кустарников, в бурьянах, заросших балках, речных долинах с кустарниками. Встречается
469
вблизи жилья человека — на огородах, в садах, на пустырях. Осенью заселяет поля и заходит с наступлением заморозков в жилые постройки человека (наши наблюдения 1951 г. в Калининской области). Зимой — обычный обитатель скирд, стогов и омётов. Роет неглубокие, но длинные норы. Роющие способности у полевой мыши выражены значительно лучше, чем у лесной. Питается растительной пищей с преобладанием семян (зёрна пшеницы, овса, ржи, ячменя, гречихи и кукурузы). Повреждает огородные и бахчевые культуры. Отмечено поедание желудей (в лесных питомниках). Самки дают 3—4, иногда 5 пометов в год. Молодых в помете бывает обычно 5—6. Через 2,5 месяца они становятся половозрелыми. Численность полевой мыши подвержена резким изменениям, в годы массовых размножений зверек весьма многочислен. Полевая мышь имеет значение в распространении туляремии.
ХОМЯКООБРАЗНЫЕ — СЕМЕЙСТВО CRICETIDAE
Cricetulus migratorius Pall. — Серый хомячок
Ш
Рис. 298. Коренные зубы хомякообразных.
Л —схема строения первого верхнего коренного зуба хомякообразных (род Cricetulus). Б —жевательная поверхность верхних коренных зубов обыкновенной полевки. I, II, III —1, 2, 3-й коренные зубы; / — эмаль, 2 — дентин, 3 — наружные выступающие углы, 4 — входящие углы. (По В. Г. Гептнеру).
Серый хомячок является одним из мелких представителей подсемейства Cricetinae, размером немного больше обыкновенной полёвки (100—120 мм). Для этого вида, как и для всего рода Cricetulus, характерна одноцветная окраска. Верхняя часть тела окрашена в серый, сероватый или палевый цвет. Брюшко белое. Короткие уши одноцветные, без белой каймы по краю, покрытые как внутри, так и снаружи сероватыми волосками. Короткий хвост не превышает трети длины тела (20—35 мм). Череп зверька несколько вытянут, барабанные камеры удлинены. Коренные зубы имеют хорошо развитые корни. Жевательная поверхность первых двух верхних коренных с бугорками, расположенными двумя продольными рядами (у представителей Muridae — тремя) в том случае, если бугорки не стерты или имеют поперечные, подковообразно изогнутые эмалевые петли (рис. 298, Л). Последние неправильной формы (в отличие от треугольной формы петель у полёвок, см. рис. 298, Б). Длина верхнего ряда коренных 3,6— 4,3 мм.
В Советском Союзе серый хомячок распространен от западных границ страны до Алтая, Средней Азии и Казахстана на востоке. Северная
граница ареала проходит примерно через Киев, Рязань, Казань, Оренбург; на юг до Крыма и Закавказья включительно.
Селится в самых разнообразных стациях — лесостепи, степи, полупустыни и пустыни (каменистые, глинистые, отчасти песчаные), в горах. Охотно обитает вблизи культурных земель, на огородах, приусадебных участках, в скирдах и омётах, жилых постройках и складских помещениях (Туркмения). Селится в кучах камней, старых дувалах и т. п. Норы различного устройства; иногда переделывает для жилья норы дру-470
гих грызунов (сусликов, временные норы тушканчиков). Серого хомячка находили в норах, связанных с жилыми колониями общественной полёвки, в жилых курганчиках курганчиковой мыши и ряда других грызунов. Размножается в году два раза и более; в помете бывает до 9 детенышей (в среднем 5—7). Самки бросают детенышей в возрасте около трех недель и переселяются в другую нору. За лето хомячок может сменить 2—3 норы, соответственно количеству выводков. Пищей служат как дикие, так и культурные растения, отчасти насекомые и другая пища животного происхождения.
Использование серым хомячком нор разнообразных грызунов имеет эпидемиологическое значение, поскольку способствует распространению инфекции во время эпизоотии. Вероятность контакта усиливается тем, что при выведении потомства самка меняет нору несколько раз. В ряде мест, на юге Европейской и Среднеазиатской части Союза, поселяясь в хозяйственных постройках человека (как синантроп он стоит на втором месте после домовой мыши), серый хомячок может служить звеном в передаче ряда инфекций человеку.
Rhombomys opimus Licht. — Большая песчанка
Наиболее крупная из песчанок (длина тела до 200 мм, задняя ступня до 42 мм), охристо-желтого с темными пестринами цвета, с хвостом, несущим на конце хорошо развитую метелку из черноватых волос. Волосы брюшка с темными основаниями. В строении меха имеются резкие сезонные различия. Летний мех грубый, редкий и ломкий; когда обиваются концы волос, шкурка от цвета основной части волоса получает сероватый оттенок. Обращают на себя внимание большие размеры и конфигурация барабанных камер и величина черепа (наибольшая длина до 47 мм). Зубной аппарат характеризуется отсутствием корней у коренных зубов (в отличие от песчанок рода Meriones), а также наличием двух продольных бороздок на передних поверхностях каждого, верхнего резца. Размеры: длина тела 150—200 мм, задней ступни до 42 мм, уха — 13—14 мм.
Распространение охватывает Среднюю Азию и южную часть Казахстана от низовий Урала и побережья Каспийского моря до равнинных районов Семиречья включительно.
Наиболее обычными стациями этого вида в Средней Азии являются массивы песчаных пустынь, где большая песчанка селится в более закрепленных песках, чаще всего в долинах, в понижениях, несколько» реже занимает солянковые эфемеровые биотопы. Местами проникает в предгорную полосу (Копет-Даг). По образу жизни, в противоположность большинству других песчанок, это исключительно дневной зверек; живет, как правило, большими, а иногда и огромными колониями, насчитывающими несколько десятков особей. Число пометов в году достигает двух; детенышей в помете бывает от трех до восьми. Питается растительной пищей (солянками, эфемерами, злаками, древесной растительностью); добывая ее, иногда залезает на ветви саксаула и разных кустарников..
Может играть роль одного из основных резервуаров чумы в при* роде, а также кожного лейшманиоза и клещевого возвратного тифа.
Arvicola terrestris L. — Водяная полевка, или водяная крыса
Самая крупная полёвка (кроме ондатры), встречающаяся на территории Советского Союза (длина тела взрослых особей от 140 до 240 мм, вес — 130—270 г). Несколько неуклюжее тело на укороченных конечностях.
471
Массивные ступни задних лап (от 28 до 35 мм) имеют по 5 мозолей. Края ступни, частично передних и особенно задних конечностей, несут оторочки более плотных, густых волос. Мех водяной крысы сравнительно с другими полёвками (род Microtus) густой, пышный с хорошим подшерстком (особенно зимой). Окраска верхней части тела варьирует от тускло-серой с буроватым оттенком до темно-бурых и черноватых тонов или совершенно черных у меланистических экземпляров. Брюшко по окраске варьирует от грязно-белого до черно-серого. Длина хвоста несколько более 7г длины туловища. Голова большая, широкая, с тупой закругленной мордой. Уши короткие (14—22 мм), отогнутые вперед, не достигают заднего края глаза. Череп широкий, массивный, с хорошо развитым (у старых особей) продольным гребнем, расходящимся в теменном отделе в стороны и достигающим теменных костей. Очертания черепа у взрослых, особенно у старых животных, угловатые. Носовые кости прямые и широкие, ширина ростральной части превышает межглазничную ширину. Скуловые дуги у взрослых водяных полёвок массивные, широко расставленные. Межглазничное пространство укороченное по сравнению с длиной мозговой капсулы. Жевательная поверхность коренных зубов состоит у взрослых особей из замкнутых эмалевых треугольных петель, свойственных большинству полёвок. М3 имеет обычно 4, реже 5 и, как исключение, 3 замкнутые эмалевые петли. У детенышей (до той стадии, пока зубы еще не прорезались) на зубах верхней челюсти хорошо выражена бугорчатая структура, изменяющаяся позже в гладкую жевательную поверхность.
Водяная полёвка распространена по всей Европейской части Союза от Львовской области и низовьев Днепра, на север до дельты Печоры, на юг до Крымского перешейка и Закавказья, на восток до реки Лены и озера Байкал. Отсутствует в пустынной части Казахской ССР и в большей части территории среднеазиатских республик.
Основным местообитанием водяной полёвки являются поймы рек и других водоемов, часто встречается она на луговых участках среди леса, кустарников, на огородах, в полях и даже постройках. Летом часто меняет места обитания. Роет неглубокие норы (глубина до 20 см, редко глубже), иногда довольно длинные (до 50 м), с несколькими (до 10) выходными отверстиями и камерами (7—8); кучки земли на поверхности напоминают кучки, оставленные кротом. Размножение происходит в течение всего лета; количество пометов бывает, как правило, не менее четырех; количество детенышей в помете от 3 до 14 (в среднем 6—8). Численность водяной полёвки подвержена резким колебаниям; нередки массовые размножения. Пищу ее составляют главным образом луговые и болотные растения. Зимой нередко она обгрызает кору лиственных деревьев. Отчасти питается животной пищей (моллюски, мелкая рыба и пр.). Шкурка заготовляется в качестве одного из второстепенных видов пушнины.
Водяная полёвка — основной природный резервуар туляремии.
Microtus arvalis Pall. — Обыкновенная, или серая, полёвка
Размеры тела относительно мелкие (вполне взрослые экземпляры — от 90 до 147 мм), хвост составляет 30—40% его длины. На задней ступне расположены 6 бугорков (мозолей). Серая полёвка имеет укороченное ухо, едва выступающее из меха. Окраска серо-бурая, варьирует от светлого до темного тона; брюшко грязно-белого цвета. Хвост сверху черноватый или коричневатый, а снизу беловатый. Череп имеет слабо развитый, но достаточно ясный межглазничный гребень. Кондилобазальная 172
длина черепа 23—30 мм (в среднем около 24 мм), скуловая ширина 12—17 мм (в среднем около 14 мм). Третий верхний коренной зуб имеет с наружной стороны 3 выдающихся угла, с внутренней — 4 (рис. 298, Б). Второй верхний коренной с двумя выдающимися углами на внутренней стороне (третий добавочный угол на внутренней стороне этого зуба отсутствует). Длина верхнего ряда коренных зубов 5,2—7,5 мм (в среднем около 6). Первый нижний коренной зуб с 4 выдающимися углами на наружной стороне и с 5 — на внутренней; имеет 7 замкнутых петель (рис. 295, Б).
Серая полёвка распространена в СССР от западных границ до реки Оби и Алтая включительно, на север до Кольского полуострова и Новосибирска; южная граница — побережье Черного и Азовского морей (включая Крым), Закавказье, низовья Волги и Урала, Актюбинская и Карагандинская области до озера Зайсан; по Тарбагатаю и хребтам Тянь-Шаня до северной части Ферганской долины.
Обитает в необычайно разнообразных местах: различного типа степи, луга и пашни, открытые склоны гор, опушки лесов, лесные поляны, заросли кустарников, березовые колки, сосновые боры, широколиственные леса, плодовые сады; часто встречается на усадебных землях, огородах, гумнах, в скирдах и омётах соломы, иногда в постройках. Норы серой полёвки состоят из сложной сети ходов, расположенных главным образом в дерновинном слое почвы с несколькими камерами (гнездовые и склады) и выходными отверстиями (от 4 и более). В зимнее время, поселяясь в омётах соломы, полёвки выгрызают здесь ходы; также устраивают ходы в снегу на поверхности земли. Пища, в зависимости от характера окружающей растительности и времени года, весьма разнообразна. В период теплого времени года бывает 4—6 пометов с 4— 8 детенышами в каждом.
Серая полёвка — наиболее вредный грызун в СССР, особенно в годы массовых размножений. Является источником туляремийной инфекции.
БЕЛИЧЬИ - СЕМЕЙСТВО SCIURIDAE
Citellus pygmaeus Pall.—Малый, или серый, суслик
Малый суслик один из наиболее мелких видов наших сусликов. Длина его тела около 200—210 мм (не более 260), задней ступни (без когтей) —20—32 мм (не более 39 мм), хвоста (без концевых волос) — менее V4 длины тела. Ушные раковины мало развиты и образуют лишь небольшие кожные складки, выступающие наружу на несколько миллиметров. Открывающиеся в ротовую полость защечные мешки развиты слабо (по сравнению с обыкновенным хомяком). Перед ротовым отверстием выступают длинные верхние и нижние резцы. Ноздри относительно крупные, складка (plica), идущая от медиальной части ноздрей к верхней части ротового отверстия, укороченная, более короткая, чем у тонкопалого суслика. Задние конечности несут 4, передние — 5 мозолей; две задние, особенно внутренняя из них, крупнее передних. С внешней стороны передних конечностей, в их тыльных частях, имеются группы вибрисс. Количество последних по сравнению с другими беличьими (например, белкой или тонкопалым сусликом), резко уменьшено. Наибольшее число вибрисс (до 22 с каждой стороны), различных по форме и размерам, расположено между глазом и носом. Над глазами помещаются 4—5 вибрисс. Небольшие вибриссы (3—5) сидят на щеках под глазами, 2—4 непигментированные вибриссы находятся внизу на шее или сразу же за подбородком. По одной вибриссе есть на верхней
31 Зак. 3420. Лабораторный практикум медицинской паразитологии	473
стороне предплечья, по семи — на основании сгиба кисти (сбоку и снизу) и в области полового органа у самцов. Сосков 8: грудных 1—1, брюшных 2—2, паховых 1 — 1. Череп относительно широкий, с широко расставленными скуловыми дугами и короткой, но широкой мозговой коробкой. Длина черепа не превышает 43 мм. Носовая часть относительно короткая; гребни лировидной формы слабо развиты. Межглазничное пространство около 9 мм шириной. Коренных зубов 5/4. Длина верхнего ряда коренных зубов несколько уступает длине верхней диастемы (иногда равна). Окраска верха варьирует от светлой серо-палевой до буроватой различных тонов с преобладанием охристого. По этому фону разбросаны небольшие светлые крапины, иногда очень слабые, еле просвечивающие. Верх головы иногда отличается от тона средней части спины более интенсивной окраской. Бока тела варьируют от бледных серо-белесых до тускло-серых. Горло, подбородок и брюхо белесые; последнее — с желтоватым налетом. Основания брюшных волос разных оттенков серого цвета. Внешние части конечностей более или менее темные, серо-палевые. Ступни задних лапок голые, с волосами лишь по бокам и у самых пяток. Окраска когтей варьирует от буро-желтой до черноватой, кончики когтей желтые.
Распространение (в общих чертах) — от Днепра на западе до озера Зайсан на востоке. Северная граница приблизительно проходит севернее Днепропетровска на восток по направлению Калач, Энгельс, Кинель, Троицк, Акмолинск, северное побережье Зайсана. Южная граница идет у гор Крыма, далее по побережью Азовского моря к Ростову, по правому берегу Дона и на юго-восток по линии Мечетинская, Моздок, Махачкала, откуда направляется к северному берегу Каспия на Усть-Урт, северный берег Аральского моря, через Карагандинскую область, юго-западное побережье Балхаша к озеру Зайсан. Изолированные колонии известны в горах Северного Кавказа, под Нальчиком и в Дагестане.
Наиболее характерные местообитания малого суслика — полыннозлаковые степи и полупустыни со светло-каштановыми, глинистыми почвами. В зоне чернозема этот вид нередко селится по холмам с глинистокаменистой почвой. Обычно зверьки живут относительно крупными колониями, проявляя свою деятельность в утренние и дневные часы. Роют различного типа норы. Структура постоянных нор в общих чертах следующая. Летом зверек вырывает нору с наклонным ходом, направленным полого и косо от поверхности земли. Осенью, перед залеганием в спячку, суслик прорывает из камеры или из самого хода вертикальный отнорок. Он не доводится до поверхности; землей, полученной при рытье этого отнорка, забивается наклонный ход, которым суслик пользовался летом. Окончательно вертикальный ход доводится до поверхности весной, когда суслик разрывает его до конца, чтобы выйти на поверхность земли. Так как вертикальный ход отрывается снизу, то около него никогда не бывает кучек земли. Постоянные норы могут быть двоякого рода: 1) одиночные для старых самцов, самок после периода лактации, расселившихся молодых и 2) выводковые. Постоянные норы одиночных сусликов имеют одно гнездо на глубине около 110 см, главный ход, соединяющий гнездо с поверхностью земли — до 200 см длиною, с 1—2 коленами и 1—2 отнор-ками, последние иногда совершенно отсутствуют. Общая длина ходов одиночных постоянных нор в среднем до 285 см. Выводковые норы отличаются от нор одиночных вторыми выходами и более длинными отнорками, а также большей длиной ходов (до 375 см). Начало активной жизни (весеннее пробуждение) малого суслика колеблется в зависимости от широты местности. Например, в Донских степях оно проис
474
ходит во второй половине марта, между низовьями Урала и Волги —• в начале апреля, а в некоторые малоснежные зимы в Сталинградской области — даже в феврале. Период спаривания, следующий за пробуждением, продолжается около 18—25 дней и бывает один раз в году. Беременность длится 25—26 дней. Среднее число эмбрионов бывает 7—6 (от 4 до 13), родившихся детенышей чаще всего 4—6. Родятся суслята слепыми, голыми и беспомощными, глаза у них прорезываются на 7—8-й день; тогда же они издают первый писк. В возрасте 15 дней бывают уже покрыты шерстью и в 20—22 дня выходят на поверхность (в начале июня). Через 10—14 дней после первого выхода на поверхность земли выводок молодых сусликов начинает расселяться. Они занимают ближайшие старые брошенные норы, а на мягком грунте иногда роют совершенно новые, сооружающиеся у какого-либо бугорка или в ямке;. Самцы и самки до начала расселения молодых усиленно кормятся1, быстро прибывая в весе, от 90—120 г до 400—450 и даже 500 г, за счет накопляющегося к периоду спячки жира. Продолжительность жизни серого суслика может достигать трех лет или немного более. Однако-большая часть особей гибнет в возрасте до года и до двух лет. Эта убыль пополняется весьма быстрым размножением (до 4—8 молодых в помете). В связи с этим весенняя и осенняя плотность населения очень различна: весною населено в среднем около 5% нор, осенью в среднем около 15%.
Малый суслик важен в эпидемиологическом отношении, он являлся одним из главных носителей и передатчиков чумной инфекции. Суслики болеют как острой, так и хронической формой туляремии, сохраняя возбудителя длительное время.
ОПРЕДЕЛИТЕЛЬНАЯ ТАБЛИЦА НЕКОТОРЫХ СЕМЕЙСТВ И ПОДСЕМЕЙСТВ ГРЫЗУНОВ 1 * * * 5
1 (4). Верхняя челюсть имеет 2 пары резцов, за парой больших передних — два мелких добавочных резца. В нижней челюсти 5 коренных зубов. . . . Подотряд Dupllcidentata — Четырехрезцовые.
2(3). Всего коренных 6/5. Длина тела взрослых особей не менее 500 мм. Задние ноги почти вдвое длиннее передних. Уши длинные. Хвост короткий, но заметен. . . . Семейство Leporldae— Зайцы.
3(2). Коренных 5/5. Длина тела взрослых менее 280 мм. Задние ноги почти равны передним. Уши короткие, округлые (длина их почти равна ширине). Хвост настолько короткий, что не выступает из меха. . . . Семейство Lagomyidae — Пищухи, или сеноставки.
4(1). Верхняя челюсть имеет лишь одну пару больших резцов; в нижней челюсти 3 или 4 коренных. . . Подотряд Simplici-dentata — Двухрезцовые.
5 (20). В нижней челюсти не более 3 коренных.
6(7). Задние конечности очень длинные (в 3—4 раза длиннее передних). Задние ступни с двумя укороченными боковыми пальцами, не достигающими трех остальных, или только с тремя пальцами. Хвост часто оканчивается плоской кисточкой. Коренных 4/3—3/3...................Семейство Dlpodidae — Тушканчики.
7(6). Задние конечности мало отличаются по длине от передних; ступня всегда с 5 пальцами. Хвост без кисточки на конце. Коренных, как правило, 3/3.
31*
475-
8
9
10
11
12
13
14
15
16
17
18
19
20
21
22
23
24
25
( 9). Коренных зубов 4/3. Хвост всегда длиннее тела . . . Подсемейство Siclstinae — Мышевки.
( 8). Коренных зубов 3/3.
(II). Глаз нет (скрыты под кожей, в которой нет прорезов). От носа к уху идет ряд жестких щетинок . . . Семейство Spalacidae — Слепыши.
(10). Глаза видны снаружи, хотя и маленькие; по бокам головы нет ряда щетинок.
(13). Коренные зубы рудиментарны: длина зубного ряда не свыше 1,5 мм.
(12). Коренные развиты нормально; длина зубного ряда не менее 2,5 мм. Первый коренной нижней челюсти вытянут и длиннее второго. На жевательной поверхности коренных бугорки или эмалевые петли.
(15). Жевательная поверхность 1 и 2 верхних коренных покрыта 3 продольными рядами бугорков (лучше заметных в молодом возрасте). Защечных мешков нет. Морда заострена, глаза и уши большие. Хвост более длины тела .... Семейство Muridae — Мышеобразные.
(14). Жевательная поверхность 1 и 2 верхних коренных покрыта эмалевыми бугорками в два ряда или плоская с рисунком из эмалевых петель .... Семейство Crlcetidae —Хомякообразные.
(17). Защечные мешки, как правило, есть и хорошо развиты. На жевательной поверхности коренных зубов бугорки или эмалевые петли (у очень старых особей) . . . Подсемейство Cricetlnae — Хомяки.
(16). Защечных мешков нет совсем или они в зачатке. Поверхность коренных зубов во всех возрастах плоская, с эмалевыми петлями.
(19). Жевательная поверхность коренных состоит из треугольников, и зуб сбоку производит впечатление призм, соединенных друг с другом. Зубы большей частью не имеют корней. Первый верхний коренной не более чем в 2—2,5 раза превышает третий и почти равен второму. Поверхность резцов спереди без бороздок. Хвост обычно короче половины длины тела . . . Подсемейство Microtinae — Полёвки.
(18). Жевательная поверхность коренных в виде замкнутых или полузамкнутых ромбовидных петель. Третий верхний коренной в 4—5 раз меньше первого и в 2—3 раза меньше второго. Резцы спереди имеют 1—2 продольные бороздки. Хвост больше ‘/2 длины тела .... Подсемейство Gerbillinae — Песчанки.
( 5). Нижняя челюсть имеет более чем 3 коренных зуба.
(22). Коренных 5/4 (очень редко 4/4). Надглазничные отростки хорошо развиты (тонкие, заостренные, направленные назад) . . ..................................Семейство	Scturidae — Беличьи.
(21). Коренных 4/4. Надглазничные отростки отсутствуют или зачаточные.
(24). Хвост не виден снаружи. Задняя ступня с 3 пальцами. Длина черепа до 65 мм . . . Семейство Cavtidae — Морские свинки.
(23). Хвост имеется и равен половине длины тела. Задняя ступня с 4 пальцами. Длина черепа до 120 мм . . . . Семейство Capromyidae — Нутриевые.
(26). Спинная сторона тела покрыта иглами. Длина носовых костей составляет около V2 общей длины черепа .... Семейство Hystricidae — Дикобразы.
476
26	(25). Спинная сторона тела покрыта шерстью. Длина носовых костей всегда меньше 72 общей длины черепа.
27	(28). Длина тела взрослого животного не менее 500 мм. Хвост широкий, сплющенный сверху вниз, покрыт чешуями, голый (волосы лишь у основания чешуй). Коренные зубы без корней, с плоской жевательной поверхностью .... Семейство Castorb dae — Бобры.
28	(27). Взрослые животные всегда меньше 250 мм длиной. Хвост в сечении круглый, более или менее равномерно покрыт волосами, иногда расчесанными на две стороны . . . Семейство Myoxldae — Сони.
ЛИТЕРАТУРА
Айзенштадт Д. С. К вопросу об истории и путях расселения пасюков (Rattus пог-vegicus norvegicus Berken.) в пределах СССР. Зоол. жури., 34 (5), 1955.
Аргиропуло А. И. Сем. Muridae. Мыши. Фауна СССР, Млекопитающие, т. 3. в. 5, изд. АН СССР, 1940.
Бобринский Н. А., Кузнецов Б. А. и Кузякин А. Д. Определитель млекопитающих СССР. М., 1944.
Виноградов Б. С. и Громов И. М. Грызуны фауны СССР. Изд. АН СССР, 1952.
Виноградов Б. С. и Громов И. М. Краткий определитель грызунов фауны СССР. Изд. АН СССР, 1956.
Гамбарян П. П. и Дукельская Н. М. Крыса. М., 1955.
Гептнер В. Г., Морозова-Турова Л. Г. и Цалкин В. И. Вредные и полезные звери районов полезащитных насаждений. М., 1950.
Гладков Н. А. Новые сведения о позвоночных заполярной Якутии (Бухта Тикси). ДАН СССР, т. 112, № 1, 1957.
Грызуны и борьба с ними. Сборн. статей, в. 1—4. Изд. Гос. научн.-иссл. ин-та микробиол. и эпидемиол. ю. — в. СССР, Саратов, 1941, 1946, 1951, 1955.
Н а у м о в И. П. Очерки сравнительной экологии мышевидных грызунов. Изд. АН СССР, 1948.
Новиков Г. А. Полевые исследования по экологии наземных позвоночных животных. М., 1953.
Огнев С. И. Звери СССР и прилежащих стран. Грызуны, т. 4—7, М. — Л., 1940, 1947, 1948, 1950.
Павловский Е. Н. Практикум по зоологии, Л., 1938.
Терентьев П. В. Малый практикум зоологии позвоночных, М., 1948.
Терентьев П. В., Дубинин В. Б. и Новиков Г. А. Кролик. М., 1952.
Формозов А. Н. (ред.). Фауна и экология грызунов. Материалы по грызунам.
Сборн. статей, в. 1—5, МОИП, 1947, 1948, 1951, 1957.
ОГЛАВЛЕНИЕ
Предисловие (Е. Н. Павловский) .......................	3
Введение (Е. Н. Павловский) .........................	5
ОБЩАЯ ЧАСТЬ
Метод полного сбора паразитов (Е. Н. Павловский).................. 9
Сбор наружных паразитов и взятие крови........................ 10
Вскрытие и фиксирование....................................... 11
Литература.................................................... 14
Общие данные по технике изготовления простейших микроскопических и музейных препаратов (Е. Н. Павловский)....................... —
Изготовление тотальных морфологических препаратов членистоногих ....	15
Изготовление гистологических препаратов ...................... 16
Фиксирование членистоногих для срезов ....................... —
Последующая обработка (уплотнение, обезвоживание) и заливка в парафин. Размягчение хитина................................ 17
Изготовление и наклейка срезов.............................. 19
Окраска срезов.............................................. 20
Изготовление анатомических препаратов ........................ 23
Общие правила вскрытия мелких	насекомых и клещей............. —
Наклейка свежеотпрепарованных органов на предметные стекла и дальнейшая их обработка......................................... 26
Консервирование анатомического материала в общих целях и для последующих работ................................................... 28
Изготовление (монтировка) макроскопических	препаратов .... 30
Литература.................................................... 32
СПЕЦИАЛЬНАЯ ЧАСТЬ
Простейшие — тип Protozoa........................................ 33
Малярийные плазмодии — род Plasmodium (Б.	П Николаев) ........	—
Приготовление препаратов ................ .	.............. —
Материал для препаратов .................................. —
Взятие крови и приготовление препаратов .................. —
Фиксация и окраска мазков крови.......................... 35
Окраска толстых капель................................... 36
Хранение препаратов ..................................... 37
478
Изучение препаратов................................................ 37
Плазмодии малярии в мазках крови................................. —
Плазмодии малярии в толстой капле............................... 45
Оформление результатов исследования и подсчет паразитов крови ....	52
Литература......................................................... 53
Лейшмании — род Leishmanla (Б. П. Николаев)............................ —
Заготовка материала ................................................ —
Изучение препаратов................................................ 54
Мазок из кожной язвы или из пунктата костного мозга.............. —
Мазок из культуры лейшманий..................................... 56
Литература....................................................... —
Токсоплазмы — род Toxoplasma (В. А. Саляев)............................ —
Культивирование и методы обнаружения................................ —
Изучение препаратов ............................................... 58
Литература.......................................................... —
Простейшие кишечника (В, Г. Гнездилов)................................. —
Материал для занятий................................................ —
Оборудование, растворы, краски и их приготовле» ие................. 59
Сбор, доставка и правила просмотра материала....................... 60
Изготовление постоянных препаратов................................. 62
Микроскопирование препаратов, окрашенных железным гематоксилином по Гейденгайну.................................................. 65
Entamoeba histolytica............................................ —
Entamoeba coll.................................................. 71
Entamoeba hartmannl............................................. 75
Jodamoeba biitschlU............................................. 76
Endolimax nana.................................................. 77
Dientamoeba fragllis............................................. —
Entamoeba ginglvalls............................................ 78
Lamblla Intestlnalis............................................. —
Chilomastix mesnlll............................................ 81
Trichomonas elongata........................................... 82
Trichomonas homlnis............................................ 83
Enteromonas homlnis............................................ 84
Embadomonas Intestlnalis....................................... —
Balantidium coll............................................... 85
Исследование вегетативных форм простейших в живом состоянии ....	87
Приготовление нативного мазка .................................. —
Исследование нативного мазка .................................. 88
Entamoeba histolytica.......................................... —
Entamoeba moshkovskil.......................................... 90
Entamoeba coll................................................. 91
Entamoeba hartmannl............................................ 92
Jodamoeba btltschlii........................................... —
Endolimax nana................................................. —
Dlentamoeba fragllis........................................... —
Entamoeba ginglvalls........................................... —
Lamblia intestlnalis.......................................... —
Chilomastix mesnlll............................................ 93
Trichomonas elongata.......................................... —
Trichomonas homlnis........................................... —
Enteromonas homlnis и Embadomonas intestlnalis................ 94
Isos рога belli............................	—
Balantidium coll.............................................. 95
479
Исследование цист кишечных простейших в йодном растворе............... 96
Приготовление мазка................................................. —
Исследование мазков............................................. —
Entamoeba histolytica........................................... 97
Entamoeba coli.................................................. —
Entamoeba hartmannl............................................. —
Jodamoeba biitschlli............................................ 98
Endolimax папа.................................................. —
Lamblia intestinalis............................................ —
Chllomastix mesnili............................................. —
Метод концентрации цист простейших.................................... 99
Культивирование кишечных простейших................................ 100
Копрозойные простейшие............................................. 101
Hartmanella hyalina............................................. ЮЗ
Dlmastlgamoeba grub er I............................................ —
Bodo caudatus................................................... —
Cercomonas longicauda........................................... 104
Копрозойные ресничные........................................... —
Псевдопротозойные образования...................................... —
Мышечные волокна.................................................. 105
Растительная клетчатка ........................................... 105
Растительные споры................................................ 106
Дрожжевые грибки................................................ —
Капли нейтрального жира........................................... 108
Пузырьки воздуха................................................ —
Форменные элементы крови и кишечный эпителий........................ —
Blastocystls hominis............................................... НО
Простейшие транзитного характера..................................... 112
Eimeria dupe arum.................................................. ИЗ
Eimeria sardinae.................................................... —
Литература............................................................. —
Trichomonas vaginalis — Влагалищная трихомонада (В.	Г. Гнездилов) . . .	114
Морфология........................................................... 115
Диагностика............................................................ —
Культивирование ..................................................... 116
Литература........................................................... 117
Черви — тип Venues ......................................................... —
Сосальщики — класс Trematodes (И. Н. Костылев)........................... —
Изучение материала .................................................... —
Fasciola hepatica — Печеночная двуустка, или	фасциола.............. —
Dicrocoelium lanceatum—Ланцетовидная двуустка..................... 124
Opistorchis fellneus — Кошачья двуустка, или	описторхис .......... 126
Литература........................................................... 127
Ленточные черви — класс Cestoidea (Н. Н. Костылев)...................
Подготовка материала .................................................. —
Изучение материала .................................................. 128
Diphyllobothrium latum — Широкий лентец............................ —
Taeniarhynchus saginatus — Цепень невооруженный, Taenia solium —
Цепень вооруженный............................................... 131
Исследование мяса на финноз.....................................  134
Род Hymenolepis...................................................... 135
Hymenolepis diminuta—Цепень крысиный............................... —
480
Hymenolepis папа — Цепень карликовый............................. 136
Dipylidium caninum— Цепень тыквовидный........................... 137
Echinococcus granulosus — Цепень эхинококка...................... 139
Литература.......................................................... 141
Собственно круглые черви — класс Nematodes (Г. Г. Смирнов)............. —
Изучение материала ................................................. —
Ascaris lumbricoides— Аскарида человеческая...................... —
Trlchocephalus trlchiurus — Власоглав............................ 149
Enterobius vermlcularls — Острица................................ 152
Ancylostoma duodenale— Кривоголовка двенадцатиперстная...........	155
Necaior americanus— Некатор американский......................... 158
Развитие яиц и личинок анкилостомид.............................. 162
Trlchlnella spiralis — Трихинелла................................ 164
Литература.......................................................... 170
Гельминтологическая диагностика (Г. Г. Смирнов)........................ —
Подготовка материала ............................................... —
Гельминтоскопия..................................................... —
Определение круглых червей....................................... 172
Определение ленточных червей .................................... —
Определение сосальщиков.......................................... 173
Омеопаразиты..................................................... —
Сбор и консервирование паразитов................................. —
Гельминтоовоскопия.................................................. 174
Техника микроскопирования........................................ 175
Характеристика яиц............................................... —
Определительная таблица яиц важнейших паразитических червей, имеющих медицинское значение .......................................... 176
Измерение яиц.................................................... 177
Качественные методы исследования испражнений..................... 178
Количественный анализ............................................ 183
Гельминтологическое исследование дуоденального сока и мокроты . .	186
Метод обнаружения личинок анкилостомид и кишечной угрицы (Stron-gyloides stercoralis).............................................. 187
Методика организации и проведения обследовательской гельминтологической
работы среди населения (Г. Г. Смирнов)........................... 190
Подготовка материала ................................................. —
Организация обследования ........................................... 191
Обследование внешней среды на зараженность яйцами паразитических червей......................................................... 194
Исследование почвы............................................... 195
Исследование овощей.............................................. —
Исследование воды................................................ 196
Обследование предметов	бытовой	обстановки....................... 197
Определение жизнеспособности	яиц	и	личинок паразитических червей 198
Литература.......................................................... 200
Членистоногие —тип Arthropoda.............................................. —
Насекомые — класс Insecta................................................ —
Комары — семейство Culicldae (А. В. Гуцевиг)............................. —
Сбор материала ..................................................... —
Взрослые насекомые................................................. —
Фазы развития (яйцо, личинка, куколка)........................... 201
Хранение и обработка материала...................................... 202
Взрослые комары.................................................... —
Фазы развития (яйцо, личинка, куколка)........................... 204
481
Наружное строение..................................................... 204
Взрослые комары ..................................................... 205
Anopheles macullpennis— Обыкновенный малярийный комар............ —
Си'ех pipiens — Немалярийный	комар................................ 209
Строение головы и	ротового	аппарата ................... 210
Anopheles bifurcatus— Лесной, или родниковый, малярийный комар 212
Anopheles plumbeus— Черноногий, или дупловой, малярийный комар .	—
Anopheles hyrcanus— Палласов малярийный комар.................... —
Anopheles superрIctus — Украшенный малярийный комар.............. 213
Anopheles pulcherrimus — Белый малярийный комар.................. 214
Culex tritaeniorhynchus............................................ 215
Aedes togoi......................................................... —
Aedes vexans........................................................ —
Aedes caspius...................................................... 216
Aedes punctor....................................................... —
Aedes (Stegomyia)	aegypti — Желтолихорадочный комар................. —
Theobaldia annulata, Theobaldia alaskaensis........................ 217
Строение гипопигия самцов Anopheles................................ 218
Фазы развития (яйцо, личинка, куколка)............................... 219
Яйцо Anopheles macullpennis......................................... —
Яйца Culex....................................................... 221
Личинка Anopheles macullpennis IV стадии............................ —
Личинки Anopheles macullpennis I, II, 111, IV стадий для демонстрации хода развития личинки.......................................... 224
Личинка Culex (IV стадия).......................................... 226
Личинка Anopheles bifurcatus (IV стадия)............................ —
Личинка Anopheles plumbeus (IV стадия)............................. 227
Личинка Anopheles hyrcanus (IV стадия)............................. 228
Личинка Anopheles superpfctus (IV стадия)........................... —
Личинка Anopheles pulcherrimus (IV стадия)........................ 230
Личинка Aedes (IV стадия)........................................... —
Личинка Theobaldia (IV стадия)..................................... 231
Куколка малярийного комара ......................................... —
Куколка немалярийного комара ...................................... 232
Внутренняя анатомия взрослых комаров ................................. —
Препаровка ........................................................ —
Изучение анатомии комаров на	срезах.............................. 238
Противомалярийное обследование водоемов и их окружения............... 241
Литература........................................................... 249
Мокрецы — семейство Heleidae (Б. И. Померанцев)....................... 250
Сбор и хранение....................................................... —
Наружное строение .................................................... —
Вскрытие и знакомство с внутренним строением......................... 255
Некоторые наиболее распространенные виды............................. 257
Culicoides pulicaris.............................................. 258
Cullcoldes obsoletus............................................... —
Culicoides fascipennls............................................. —
Culicoides nubeculosus............................................. —
Литература . . .	  —
Москиты — род Phlebotomus (П П. Перфильев)............................... —
Сбор и заготовка материала........................................... 259
Приготовление препаратов ............................................ 260
482
Методика выплаживания.............................................. 262
Изучение препаратов .............................................. —
Самка москита. Наружное строение............................... —
Самка Phlebotomus papatasii..................................... 267
Самка Phlebotomus sergenti........................................ —
Самка Phlebotomus caucasicus.................................... 268
Самка Phlebotomus major......................................... 269
Самка Phlebotomus chinensis '..................................... —
Самка Phlebotomus sogdianus..................................... 270
Самец Phlebotomus papatasii....................................... —
Самец Phlebotomus sergenti.....................................
Самец Phlebotomus caucasicus...................................... —
Самец Phlebotomus major......................................... 273
Самец Phlebotomus chinensis..................................... 274
Самец Phlebotomus sogdianus..................................... 276
Личинка Phlebotomus papatasii (IV стадия)......................... —
Куколка Phlebotomus............................................. 277
Литература .......................................................
Мошки—семейство Slmulildae (А. В. Гуцевич)........................... 278
Сбор и хранение материала ........................................
Изучение препаратов ..............................................
Самка Simulium ................................................
Самец............................................................ 280
Личинка последней стадии....................................... 281
Куколка....................о................................... 282
Литература............................................................ —
Слепни — семейство Tabanldae (Н. Г. Олсуфьев)........................... —
Сбор материала....................................................... —
Сбор взрослых слепней............................................. —
Сбор кладок яиц................................................ 283
Сбор личинок................................................... 284
Сбор куколок................................................... 285
Изучение препаратов ................................................. —
Взрослые слепни ................................................... —
Наружное строение................................................. —
Род Tabanus — настоящие	слепни............................. 288
Род Chrysops — пестряки,	златоглазики.......................... 289
Род Chrysozona — дождевки......................................... —
Строение ротового аппарата........................................ —
Внутреннее строение ........................................... 290
Яйцо............................................................ 294
Личинка ........................................................... —
Куколка......................................................... 298
Литература........................................................ 299
Синантропные мухи (И. К. Теравский) .................................... —
Подготовка материала................................................. —
Изучение препаратов................................................. 300
Взрослые насекомые................................................. —
Наружное строение................................................. —
Внутреннее строение ............................................. 304
Яйцо.............................................................. 310
Личинка ........................................................... —
483
Наружное строение................................................. 310
Внутреннее строение............................................... 312
Куколка............................................................ 314
Главнейшие представители............................................ 315
Семейство Muscldae— Настоящие мухи................................... —
Musca do те st lea — Комнатная муха................................. —
Musca sorbens — Базарная муха....................................... —
Muscina stabulans — Домовая муха.................................... —
Fannla canlcularls—Малая комнатная муха........................... 316
Stomoxys calcltrans—Жигалка....................................... 317
Семейство Callphorldae.............................................. —
Calliphora erythrocephala—Синяя мясная муха......................... —
Lucllia caesar — Зеленая падальная муха........................... 318
Protophormla terrae-novae—Весенняя падальная муха................... —
Семейство Sarcophagldae............................................. —
Sarcophaga carnaria — Серая мясная муха............................. —
Wohlfahrtla magnlflca—Вольфартова муха............................ 319
Семейство Syrphidae — Цветочные мухи.............................. 320
Ег у stalls tenax — Иловая муха..................................... —
Литература............................................................ —
Блохи — отряд Aphaniptera (77 П. Перфильев).............................. —
Сбор и обработка материала............................................ —
Приготовление препаратов ........................................... 321
Изучение препаратов ................................................ 322
Взрослые насекомые. Наружное строение................................ —
Главнейшие виды.................................................... 328
Pulex Irritans...................................................... —
Xenopsylla cheopls.................................................. —
Ceratophyllus fasciatus............................................. —
Ceratophyllus tesquorum .......................................... 329
Ctenocephalides cants............................................... —
Ct eno cep halides felts............................................ —
Личинка ............................................................. —
Литература.......................................................... 330
Вши и власоеды (Е. И. Павловский) ..................................... 331
Сбор материала........................................................ —
Изучение препаратов .................................................. —
Вши.................................................................. —
Самка Pediculus.................................................. 332
Самец Pediculus.................................................. 334
Отличия Pediculus vestimenti от Pediculus capitis.................. —
Демонстрационные препараты....................................... 335
Самка Phthirus pubis............................................. 337
Самец Phthirus pubis............................................... —
Личинка Pediculus................................................ 338
Неполный метаморфоз Pediculus . .*................................. —
Г ниды............................................................. —
Власоеды........................................................   339
Trichodectes canis — Власоед собаки................................ —
Trichodectes subrostratus — Власоед кошки........................ 340
Литература.......................................................... —
Черный таракан — Periplaneta orientalls (П 17. Перфильев).............. 340
Сбор материала........................................................ —
Изучение препаратов ................................................ 341
Наружное строение.................................................. —
Вскрытие..........................................................345
Развитие......................................................... 347
Литература............................................................ —
Постельный клоп — Cimex lectularlus (П. П. Перфильев).................. 34К
Сбор материала ....................................................... —
Изучение препаратов................................................... —
Самец.............................................................. —
Самка............................................................ 350
Ротовые органы................................................... 351
Личинка первой стадии ............................................. —
Яйцо............................................................. 352
Литература............................................................ —
Клещи — отряд Acarina......................................................
Аргасовые клещи — семейство Argasldae (Е. И. Павловский) .......
Род Argas............................................................ —
Сбор, хранение и кормление....................................... —
Наружное строение................................................ 353
Argas perslcus — Персидский клещ................................ —
Argas reflexus.................................................. 355
Анатомирование взрослых клещей	и их внутреннее строение......... —
Род Ornlthodorus................................................... 363
Сбор, хранение и кормление....................................... —
Наружное строение................................................ 364
Ornlthodorus lahorensls........................................... —
Ornlthodorus papllllpes......................................... 368
Ornlthodorus verrucosus......................................... 372
Ornlthodorus tartakovskyi....................................... 373
Жизненный цикл и его продолжительность............................ —
Стадии развития................................................. 375
Проверка клещей на спонтанную зараженность спирохетами клещевого возвратного тифа................................................... 382
Литература........................................................ 383
Иксодовые (пастбищные) клещи — семейство Ixodldae (Г. С. Первомайский) 384
Сбор, содержание и кормление...................................... —
Сбор материала.................................................. —
Хранение материала.............................................. 387
Содержание живых клещей......................................... 388
Кормление клещей................................................ —
Наружное строение................................................. 390
Ixodes rlclnus.................................................. 391
Определение взрослых клещей....................................... 396
Определительная таблица родов .................................. 397
Отдельные виды.................................................... —
Ixodes persulcatus.............................................. —
Haemaphysalis punctata.......................................... 400
Haemaphy sails cone Inna........................................ 402
Boop hilus calcar atus.......................................... 404
485
Dermacentor plctus.............................................. 406
Dermacentor nuttalll............................................ 409
Dermacentor marglnatus............................................ —
Dermacentor silvarum............................................ 411
Rhlpicephalus bursa............................................. 412
Rhlpicephalus sanguineus ....................................... 414
Rhlpicephalus rossicus.......................................... 417
Hyalomma plumbeum (Hyalomma	marginatum)........................ —
Hyalomma anatolicum............................................. 419
Hyalomma scupense............................................... 421
Литература......................................................... 422
Гамазовые клещи — надсемейство Gamasoidea	(Н.	Г. Брегетова).......... 423
Сбор материала..................................................... —
Хранение и обработка материала .................................... 424
Изучение препаратов ................................................. —
Взрослые клещи................................................... —
Ornithonyssus bacoti — Крысиный клещ.............................. —
Dermanyssus galllnae — Куриный клещ............................. 428
Allodermanyssus sanguineus — Риккетсиозный клещ................. 430
Laelaps pavlovskyl.............................................. —
Haemolaelaps glasgowi........................................... 431
Фазы развития.................................................... —
Яйцо............................................................ 433
Личинка Ornithonyssus bacoti.................................... —
Протонимфа Ornithonyssus bacoti................................. —
Дейтонимфа Dermanyssus galllnae................................. 434
Литература......................................................... —
Приложения........................................................... 435
Определительная таблица отрядов насекомых (по взрослым насекомым)	—
Амбарные вредители (Н. И. Алфеев)....................................... 438
Сбор материала...................................................... —
Исследование проб................................................. 439
Изучение препаратов .............................................. 440
Взрослые клещи.................................................... 442
Tyroglyphus farinae — Мучной клещ ............................... —
Glyclphagus destructor—Волосатый клещ............................ —
Cheyletus erudltus — Хищный клещ............................... 444
Pediculoides ventricosus — Пузатый клещ.......................... —
Насекомые........................................................... —
Взрослая фаза..................................................... —
Tenebrio molltor — Мучной хрущак................................. —
Calandra granaria — Амбарный долгоносик........................ 445
Calandra oryzae—Рисовый долгоносик............................... —
Bruchus plsorum — Гороховая зерновка........................... 446
Acanthoscelldes obtectus — Фасолевая зерновка.................... —
Tenebrioldes mauritanlcus — Мавританская козявка............... 447
Oryzaephilus surinamensis — Суринамский мукоед................... —
Laemophloeus testaceus — Рыжий мукоед............................ —
Laemophloeus ferruglneus—Короткоусый рыжий мукоед................ —
Ptlnus fur — Притворяшка-вор..................................... —
Sitodrepa panicea — Хлебный точильщик.......................... 449
Tribodum confusum — Малый хрущак................................. —
486
Tinea granella — Амбарная моль....................................449
Sitotroga cerealella— Зерновая моль............................... —
Ephestia kilhniella— Мельничная, или амбарная, огневка............ —
Plodia interpunctella— Южная амбарная огневка..................... 450
Pyralis farinalis — Мучная огневка................................ 451
Piophila casei—Сырная муха........................................ —
Личиночная фаза....................................................... —
Личинка Tenebrio molitor............................................   —
Личинка Calandra granaria...........................................452
Гусеница Ephestia kilhniella......................................... —
Личинка Plophila casei............................................... —
Куколочная фаза...................................................... 454
Куколка Tenebrio molitor............................................. —
Куколка Calandra granaria............................................ —
Куколка Ephestia kilhniella.......................................... —
Куколка Piophila casei.............................................. 455
Определительная таблица фаз развития клещей и насекомых............. —
Определительная таблица взрослых жуков................................ 456
Определительная таблица взрослых бабочек.............................. 458
Определительная таблица некоторых семейств мучных клещей............... —
Литература...........................................................  459
Грызуны — отряд Glires (Б. П. Скворцов)...................................... —
Сбор и подготовка материала............................................ —
Наружная анатомия..................................................... 461
Изучение материала ................................................... 465
Мышеобразные — семейство Muridae...................................... 466
Rattus norvegicus — Серая крыса, или пасюк........................... —
Rattus rattus — Черная крыса........................................ 467
Mus musculus — Домовая мышь.......................................... —
Apodemus agrarius — Полевая мышь, или житник...................... 469
Хомякообразные — семейство Crlcetidae................................. 470
Cricetulus migratorius — Серый хомячок............................... —
Rhombomys oplmus — Большая песчанка................................. 471
Arvicola terrestris — Водяная полевка, или водяная крыса..........—
Mlcrotus arvalis — Обыкновенная, или серая, полевка............... 472
Беличьи — семейство Scluridae......................................... 473
Citellus pygmaeus — Малый, или серый, суслик......................
Определительная таблица некоторых семейств и подсемейств грызунов .	475
Литература.......................................................... 477
Под редакцией Павловского Евгения Никаноровича
Лабораторный практикум медицинской паразитологии
Редактор Д. И. БЛАГОВЕЩЕНСКИЙ
Техн, редактор М. С, Рулева
Корректоры И, А, Егорова, Е. Р. Сухотина Переплет художника М. Н. Свиньиной
Сдано в набор 12/VIII 1958 г.	Подписано кпечати 23/1 1959 г.
Тираж 10 000 экз. Формат бум. 70X108Vie.	15,254-0,25 вкл. бум. лист.
41,78+0,5 вкл. печ. лист. 39,09+0,46 вкл. уч.-издат. лист. Заказ 3420. М-09037. Цена 20 руб. 35 коп.+2 руб. переплет.
Типография Кв 2 им. Евгении Соколовой УПП Ленсовнархоза. Ленинград, Измайловский пр., 29.
Отпечатано с матриц в типографии № 3 Углетехиздата. Ленинград, ул. Салтыкова-Щедрина, 54. Зак. 3/184.